Methamphetamin virker på subpopulationer af neuroner, der regulerer seksuel adfærd hos hanrotter (2010)

Neuroscience. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

Kilde

Institut for Anatomi og Cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, ON, Canada, N6A 5C1.

Abstrakt

Methamphetamin (Meth) er et stærkt vanedannende stimulerende middel. Meth-misbrug er normalt forbundet med udøvelsen af ​​seksuel risikoadfærd og øget forekomst af humane immundefektvirus og meth-brugere rapporterer øget seksuel lyst, ophidselse og seksuel fornøjelse. Det biologiske grundlag for dette stof-sex-nexus er ukendt. Den nuværende undersøgelse viser, at meth-administration i hanrotter aktiverer neuroner i hjernegrupper i mesolimbic-systemet, der er involveret i reguleringen af ​​seksuel adfærd. Specielt Meth og parring co-aktiverer celler i kernen accumbens kerne og skal, basolateral amygdala og anterior cingulate cortex. Disse resultater illustrerer, at misbrug i modsætning til den nuværende overbevisning kan aktivere de samme celler som en naturlig forstærker, det er seksuel adfærd, og det kan igen påvirke tvangssøgning efter denne naturlige belønning.

nøgleord: nucleus accumbens, basolateral amygdala, prefrontal cortex, stofmisbrug, reproduktion, afhængighed

Motivation og belønning er reguleret af mesolimbic systemet, et sammenkoblet netværk af hjerneområderne omfattet af ventral tegmental area (VTA) nucleus accumbens (NAc), basolateral amygdala og medial prefrontal cortex (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas og Volkow, 2005). Der er rigeligt bevis for, at mesolimbic systemet er aktiveret som reaktion på begge stoffer af misbrug (Di Chiara og Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) og til naturligt givende adfærd som seksuel adfærd (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Mandlig seksuel adfærd, og især ejakulation, er meget givende og forstærkende i dyrmodeller (Pfaus et al., 2001). Mandlige gnavere udvikler en konditioneret pladspræference (CPP) til copulation (Agmo og Berenfeld, 1990, Martinez og Paredes, 2001, Tenk, 2008) og udfører operative opgaver for at få adgang til en seksuelt modtagelig kvinde (Everitt et al., 1987, Everitt og Stacey, 1987). Misbrug af stoffer er også givende og forstærkende, og dyr vil lære at selvadministrere stoffer med misbrug, herunder opiater, nikotin, alkohol og psykostimulerende midler (Klogt, 1996, Pierce og Kumaresan, 2006, Feltenstein og See, 2008). Selv om det vides, at begge stoffer med misbrug og seksuel adfærd aktiverer mesolimbiske hjerneområder, er det for tiden uklart, om stoffer med misbrug påvirker de samme neuroner, der formidler seksuel adfærd.

Elektrofysiologiske undersøgelser har vist, at mad og kokain begge aktiverer neuroner i NAc. De to forstærkere aktiverer dog ikke de samme celler inden for NAc'et (Carelli et al., 2000, Carelli og Wondolowski, 2003). Desuden forårsager føde- og saccharose-selvadministration ikke langsigtede ændringer af elektrofysiologiske egenskaber som induceret af kokain (Chen et al., 2008). I modsætning hertil antyder en samling af beviser, at mandlig seksuel adfærd og misbrugsmisbrug faktisk kan fungere på de samme mesolimbiske neuroner. Psykostimulerende midler og opioider ændrer ekspressionen af ​​seksuel adfærd hos hanrotter (Mitchell og Stewart, 1990, Fiorino og Phillips, 1999a, Fiorino og Phillips, 1999b). Nylige data fra vores laboratorium viste, at seksuel oplevelse ændrer responsen til psykostimulanter, som det fremgår af sensibiliserede locomotoriske reaktioner og sensibiliseret belønningsoplevelse for d-amfetamin hos seksuelt erfarne dyr (Pitchers et al., 2009). Et lignende svar er tidligere blevet observeret ved gentagen udsættelse for amfetamin eller andre misbrugsmedicin (Lett, 1989, Shippenberg og Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren og Kalivas, 2000). Sammen tyder disse fund på, at seksuel adfærd og reaktioner på misbrugsmedier medieres af de samme neuroner i mesolimbic-systemet. Derfor er det første mål med den foreliggende undersøgelse at undersøge neural aktivering af mesolimbic systemet ved seksuel adfærd og lægemiddeladministration i samme dyr. Især har vi testet hypotesen om, at psykostimulanten, methamphetamin (Meth), virker direkte på neuroner, som normalt formidler seksuel adfærd.

Meth er et af de mest misbrugte illegale stoffer i verden (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) Dennd det har ofte været forbundet med ændret seksuel adfærd. Interessant er det, at Meth-brugere rapporterer øget seksuel lyst og ophidselse, samt forbedret seksuel nydelse (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). I øvrigt, Meth misbrug er normalt forbundet med seksuelt kompulsiv adfærd (Rawson et al., 2002). Brugere rapporterer ofte at have mange seksuelle partnere og er mindre tilbøjelige til at bruge beskyttelse end andre stofmisbrugere (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Desværre er undersøgelser, der angiver Meth, brugt som en forudsigelse for seksuel risikoadfærd, begrænsede, da de er afhængige af ubekræftede selvrapporter (Elifson et al., 2006). Derfor er en undersøgelse af den cellulære basis af meth-inducerede ændringer i seksuel adfærd i en dyremodel nødvendig for at forstå denne komplekse narkotika-sex-nexus.

I lyset af ovenstående skitserede beviser, der tyder på, at misbrugsmedicin og især Meth kan virke på neuroner, der normalt er involveret i formidling af seksuel adfærd, var formålet med den foreliggende undersøgelse at undersøge neurale aktivering ved seksuel adfærd og administration af psykostimulerende Meth. Denne undersøgelse implementerede en neuroanatomisk teknik ved anvendelse af immunohistokemisk visualisering af de umiddelbare tidlige gener Fos og phosphorylerede Map Kinase (pERK) for at detektere samtidig neural aktivering ved henholdsvis seksuel adfærd og Meth. Fos udtrykkes kun inden for cellerne, med et maksimalt ekspressionsniveau 30-90 minutter efter aktivering af neuronen. Der er rigeligt bevis for, at seksuel aktivitet fremkalder Fos-udtryk i hjernen (Pfaus og Heeb, 1997, Veening og Coolen, 1998), herunder det mesocorticolimbiske system (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Der er også tegn på, at stoffer med misbrug inducerer pERK-udtryk inden for det mesocorticolimbiske system (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). I modsætning til ekspressionen af ​​Fos er phosphorylering af ERK en højdynamisk proces og forekommer kun 5-20 minutter efter neuronal aktivering. Fos og pERKs distinkte tidsmæssige profiler gør dem til et ideelt sæt markører til efterfølgende neuronal aktivering med to forskellige stimuli.

EKSPERIMENTELLE PROCEDURER

Emner

Voksne Sprague Dawley-rotter (210-225 g) fra Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canada) blev anbragt to pr. Bur i standard plexiglasburer (hjemmebure). Dyrestuen blev opretholdt ved en 12 / 12 h omvendt lyscyklus (lyser ved 10.00 h). Mad og vand var til rådighed ad libitum. Alle test blev udført i den første halvdel af den mørke fase under dim rød belysning. Stimuløse kvinder anvendt til seksuel adfærd blev bilateralt ovariektomeret under dybere anæstesi (13 mg / kg ketamin og 87 mg / kg xylazin) og modtog et subkutant implantat indeholdende 5% østradiolbenzoat (EB) og 95% cholesterol. Seksuel modtagelighed blev induceret ved subkutan (sc) administration af 500 μg progesteron i 0.1 ml sesamolie 4 h forud for testning. Alle procedurer blev godkendt af Dyrlægeudvalget ved University of Western Ontario og er i overensstemmelse med de retningslinjer, der er skitseret af det canadiske råd om dyrepleje.

Eksperimentelle design

Eksperimenter 1 og 2: Mandrotter (n = 37) fik lov til at mate med en modtagelig kvinde til en ejakulation (E) eller for 30 min, som nogensinde kom først i rene testburer (60 × 45 × 50 cm) i løbet af fem gange ugentlige præ-test parring sessioner, for at opnå seksuel oplevelse. I løbet af de to sidstnævnte sessioner blev alle standardparametre for seksuel præstation registreret, herunder: monteringslatens (ML; klokkeslæt fra introduktion af kvinden til den første mount), intromission latens (IL; klokkeslæt fra introduktion af kvinden til den første mount med vaginal penetration), ejakulationslatens (EL, tid fra den første intromission til ejakulation), efter ejakulationsinterval (PEI; tid fra ejakulation til første efterfølgende intromission), antal mounts (M) og antal intromisser (IM)Agmo, 1997). Alle mænd fik 1 ml / kg daglig injektion af 0.9% NaCl (saltvand, sc) 3 på hinanden følgende dage før testdagen, for at blive behandlet og injiceret. En dag før testdagen var alle mænd enkeltboede. Hos erfarne mænd kan Fos induceres af konditionerede kontekstuelle tegn i forbindelse med tidligere seksuel erfaring (Balfour et al., 2004). Derfor blev alle parrings- og kontrolmanipulationer under de afsluttende tests udført i hjemmeboret (undgå prædiktive betingede signaler) for at forhindre betinget induceret aktivering i de ikke-kontrollerede kontrol mænd. Mænd blev fordelt i otte eksperimentelle grupper, der ikke var forskellige i nogen form for seksuel præstationer i løbet af de sidste to parringssessioner (data ikke vist). Under den endelige test fik mænd enten lov til at mate i deres hjemmebure, indtil de viste en ejakulation (sex) eller ikke modtog kvindelig partner (ingen køn). Alle parrede mænd blev perfunderet 60 minutter efter begyndelsen af ​​parring for at muliggøre analyse af parringsinduceret Fos-ekspression. Males modtog en injektion af 4 mg / kg Meth eller 1 ml / kg saltvand (sc) (n = 4 hver), enten 10 (eksperiment 1) eller 15 (eksperiment 2) min før perfusion til analyse af lægemiddelinduceret phosphorylering af MAP kinase. Dosering og tid før perfusion var baseret på tidligere rapporter (Choe et al., 2002, Choe og Wang, 2002, Chen og Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Kontrolgrupper indbefattede haner, der ikke mødte, men modtog Meth 10 (n = 7) eller 15 (n = 5) min før ofring eller saltopløsning 10 (n = 5) eller 15 (n = 4) min før offer . Efter ofre blev behandlinger behandlet til immunhistokemi.

Eksperiment 3: Da en høj dosis Meth blev anvendt i forsøg 1 og 2, blev der udført et yderligere neuroanatomisk forsøg for at undersøge, om seksuel adfærd og en lavere dosis Meth inducerer dosisafhængige mønstre af overlappende neural aktivering. Denne undersøgelse blev udført på samme måde som forsøg 1 og 2. I den endelige test modtog parret og ikke-modtagne grupper (n = 6 hver) 1 mg / kg Meth (sc) 15 min forud for ofre.

Eksperiment 4: For at teste om neural aktivering forårsaget af sex og Meth er specifik for Meth, undersøgte dette forsøg, om lignende mønstre af overlappende neural aktivering kunne ses med den psykostimulerende d-amphetamin (Amph). Dette eksperiment blev udført på samme måde som forsøg 1 og 2. På den endelige test blev mænd imidlertid administreret enten Amph (5 mg / kg) eller saltvand (1 mg / kg) (sc) 15 min før aflivning (n = 5 hver). Kontroller ikke-modtagne hanner modtaget saltvand eller Amph 15 minutter før aflivning. En oversigt over de eksperimentelle grupper, der anvendes i forsøg 1-4, findes i Tabel 1.

Tabel 1      

Oversigt over eksperimentelle grupper inkluderet i eksperimenter 1-4.

Vævsforberedelse

Dyr blev bedøvet med pentobarbital (270 mg / kg; ip) og perfuseret transcardielt med 5 ml saltopløsning efterfulgt af 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M phosphatbuffer (PB). Hjerner blev fjernet og efterfikseret for 1 h ved stuetemperatur i det samme fikseringsmiddel, dernæst nedsænket i 20% saccharose og 0.01% Sodium Azide i 0.1 M PB og opbevaret ved 4 ° C. Koronale sektioner (35 μm) blev skåret på et frysende mikrotom (H400R, Micron, Tyskland), opsamlet i fire parallelle serier i kryobeskyttelsesopløsning (30% sucrose og 30% ethylenglycol i 0.1 M PB) og opbevaret ved 20 ° C indtil videre forarbejdning.

immunhistokemi

Alle inkubationer blev udført ved stuetemperatur under forsigtig omrøring. Frie flydende sektioner blev vasket grundigt med 0.1 M phosphatbufret saltvand (PBS) mellem inkubationer. Sektioner blev inkuberet i 1% H2O2 for 10 min, derefter blokeret i inkubationsopløsning (PBS indeholdende 0.1% bovint serumalbumin og 0.4% Triton X-100) for 1 h.

pERK / Fos

Væv blev inkuberet natten over med et kaninpolyklonalt antistof mod p42- og p44-kortkinaser ERK1 og ERK2 (pERK; 1 400 1 19 1 4.000 2 3 21; Cell Signaling Cat # 9101;) efterfulgt af en 1 h inkubationer med biotinyleret æsel-anti-kanin-IgG (1: 500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) og avidin-peberrodsperoxidasekompleks (ABC Elite; 1: 1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Derefter blev vævet inkuberet for 10 min med biotinyleret tyramid (BT; 1: 250 i PBS + 0.003% H2O2; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) og for 30 min med Alexa 488-konjugeret strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Derefter blev væv inkuberet natten over med et kaninpolyklonalt antistof mod c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz-bioteknologi, Santa Cruz, CA) efterfulgt af en 30 min-inkubation med gede-anti-kanin Alexa 555 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Efter farvning blev sektionerne vasket grundigt i 0.1 M PB, monteret på glasskinner med 0.3% gelatine i ddH20 og dækslet med et vandigt monteringsmedium (Gelvatol) indeholdende anti-fading agent 1,4-diazabicyclo (2,2) octan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiske kontroller indeholdt udeladelse af enten eller begge primære antistoffer, hvilket resulterede i manglende mærkning i den passende bølgelængde.

Dataanalyse

Seksuel adfærd

For alle fire forsøg blev standardparametre for seksuel præstation registreret som beskrevet ovenfor og analyseret ved anvendelse af variansanalyser (ANOVA). Data analyse af seksuel adfærd i den afsluttende testdag afslørede ingen signifikante forskelle mellem grupper i nogen af ​​parametrene for seksuel præstation.

pERK / Fos-celletællinger

Enkelt- og dobbeltmærkede celler for Fos og pERK blev talt i de caudale niveauer af NAc-kerne- og shell-subregioner, basolateral amygdala (BLA), posterodorsal medial amygdala (MEApd), central amygdala (CeA), medial preoptisk kerne (MPN), posteromedial og posterolaterale sengekerner af stria terminalis (BNSTpm og BNSTpl) og det forreste kingulerede område (ACA), prelimbic (PL) og infralimbic (IL) subregioner af mPFC. Billeder blev indfanget ved hjælp af et afkølet CCD-kamera (Microfire, Optronics), der er knyttet til et Leica-mikroskop (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) og Neurolucida-software (MicroBrightfield Inc) med faste kameraindstillinger for alle emner (ved brug af 10x-mål). Ved hjælp af neurolucidaprogrammer blev områder af analyse defineret baseret på landemærker (Swanson, 1998) unik for hver hjerneområde (se Figur 1). Standardområder for analyse blev anvendt på alle områder undtagen NAc kerne og skal. I de sidstnævnte områder var pERK- og Fos-udtryk ikke homogent og optrådte i patchlignende mønstre. Derfor blev hele kerne og skal skitseret baseret på landemærker (lateral ventrikel, anterior commisure og øerne Calleja). Analyserne varierede ikke mellem eksperimentelle grupper og var 1.3 mm2 i NAc kerne og skal. Standardområder for analyse for de resterende områder var: 1.6 mm2 i BLA, 2.5 og 2.25 mm2 i henholdsvis MEApd og CeA, 1.0 mm2 i MPN, 1.25 mm2 i BNST- og mPFC-underregionerne og 3.15 mm2 i VTA. To sektioner blev talt bilateralt for hver hjerneområde pr. Dyr, og antallet af enkelt- og dobbeltmærkede celler for pERK og Fos samt procentdelene af pERK-celler, der udtrykte Fos-markør, blev beregnet. For eksperimenterne 1, 2 og 4 blev gruppeværdier sammenlignet med tovejs ANOVA (faktorer: parring og lægemiddel) og Fisher's LSD for post hoc sammenligninger på et signifikansniveau af 0.05. For eksperiment 3 blev gruppernes gennemsnit sammenlignet ved hjælp af uparrede t-test på et signifikansniveau af 0.05.

Figur 1      

Skematiske tegninger og billeder, der illustrerer hjernens analyser. Indikerede analysedier var baseret på landemærker, der var unikke for hver hjernegruppe, var ikke forskellige mellem forsøgsgrupper og var 1.25 mm2 i mPFC-underregioner (a), 1.3 mm2 i ...

Billeder

Digitale billeder til Figur 3 blev fanget ved hjælp af CCD kamera (DFC 340FX, Leica) knyttet til et Leica mikroskop (DM500B) og blev importeret til Adobe Photoshop 9.0 software (Adobe Systems, San Jose, CA). Billeder blev ikke ændret på nogen måde bortset fra justering af lysstyrke.

Figur 3      

Repræsentative billeder af NAc-sektioner immunostained for Fos (rød, a, d, g, j) og pERK (grøn, b, e, h, k) af dyr i hver forsøgsgruppe: Nej Sex + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), Ingen Sex + Meth (g, h, i) og Sex + Meth (j, k, l). Højre paneler er ...

RESULTATER

Neural aktivering af limbic systemet ved seksuel adfærd og meth administration

Eksperiment 1: Analyse af enkelt- og dobbeltmærkede celler til parringsinduceret Fos og Meth-induceret pERK hos mænd, der modtog Meth 10 minutter før offer afslørede parringsinducerede Fos i MPN, BNSTpm, NAc kerne og skal, BLA, VTA, og alle subregioner af mPFC, i overensstemmelse med tidligere undersøgelser, der demonstrerer parringsinduceret Fos-ekspression på disse områder (Baum og Everitt, 1992, Pfaus og Heeb, 1997, Veening og Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Meth administration 10 minutter før offer induceret pERK i NAc kerne og skal, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl og regioner af mPFC, i overensstemmelse med aktiveringsmønstre induceret af andre psykostimulanter (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Desuden blev tre mønstre af co-ekspression af neural aktivering ved seksuel adfærd og Meth observeret: For det første blev hjerneområder identificeret, hvor sex og lægemidler aktiverede ikke-overlappende neurale populationer (Tabel 2). Specifikt i CeA, MEApd, BNSTpl og mPFC signifikante stigninger i både lægemiddelinduceret pERK (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) og kønsinduceret Fos (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) blev observeret. I disse regioner var der imidlertid ingen signifikante stigninger i dobbeltmærkede neuroner hos parrede Meth-behandlede mænd. Den eneste undtagelse var MEApd, hvor en effekt af parring på antallet af dobbeltmærkede celler blev fundet (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Der var imidlertid ingen samlet effekt af lægemiddelbehandling, og dobbelt mærkning i Meth-behandlede grupper var ikke signifikant højere end i saltvandsbehandlede grupper og blev derfor ikke forårsaget af lægemidlet (Tabel 2). For det andet blev hjerneområder identificeret, hvor neurale aktivering kun blev induceret ved parring (Tabel 3). Specifikt blev MPN, BNSTpm og VTA aktiveret kun ved parring og indeholdt signifikante stigninger i parringsinduceret Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p <0.001), men ingen Meth-induceret pERK.

Tabel 2      

Oversigt over parringsinduceret Fos og Meth-induceret pERK-ekspression i hjerneområder, hvor køn og lægemidler aktiverer ikke-overlappende neurale populationer.
Tabel 3      

Oversigt over parringsinduceret Fos og Meth-induceret pERK-ekspression i hjerneområder, hvor neurale aktivering kun blev induceret ved parring.

Endelig blev hjerneområder fundet, hvor sex og stoffer aktiverede overlappende populationer af neuroner (Figur 2 , and3) .3). I NAc-kernen og -skallen, BLA og ACA, var der samlede effekter af parring (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) og lægemiddelbehandling (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001) samt en interaktion mellem disse to faktorer (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; ingen signifikant interaktion i ACA) på antal celler, der udtrykker begge parringsinduceret Fos og Meth-induceret pERK. Post hoc-analyse afslørede, at antallet af dobbeltmærkede neuroner var signifikant højere hos parrede meth-injicerede hanner sammenlignet med umættede meth-behandlede (p = 0.027- <0.001) eller parrede saltopløsningsbehandlede (p = 0.001- <0.001) hanner (Figur 2 , and3) .3). Når data blev udtrykt som procentdelene af lægemiddelaktiverede neuroner, blev 39.2 ± 5.3% i NAc-kernen, 39.2 ± 5.8% i NAc-skalen, 40.9 ± 6.3% i BLA og 50.0 ± 5.3% af ACA-neuroner aktiveret af både parring og Meth.

Figur 2      

Seksinduceret Fos og Meth-induceret pERK-ekspression i NAc, BLA og ACA-neuroner 10 min efter administration af 4 mg / kg Meth. Middelværdier ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) og to (c, f, i, l) mærkede celler i NAc-kernen ...

En uventet observation var, at seksuel adfærd påvirkede meth-induceret pERK. Selvom Meth signifikant inducerede pERK-niveauer i både parrede og umoderne Meth-injicerede grupper, i NAc, BLA og ACA, var pERK-mærkning signifikant lavere hos parrede Meth-injicerede hanner, når de sammenlignes med umoderne Meth-injicerede hanner (Figur 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Denne konklusion kan yderligere understøtte den hypotese, at køn og stoffer virker på de samme neuroner, men det kan også være vejledende for parringsinducerede ændringer i lægemiddeloptagelse eller metabolisme, som igen forårsager ændrede neurale reaktioner på Meth. For at undersøge, om seksuel adfærd forårsager et andet temporalt mønster af lægemiddelinduceret aktivering, blev dele af NAc, BLA og ACA farvet for mænd, der blev ofret på et senere tidspunkt (15 min) efter lægemiddeladministration (eksperiment 2).

Eksperiment 2: Analyse af enkelt- og dobbeltmærkede celler bekræftede de ovenfor beskrevne fund, at seksuel adfærd og efterfølgende eksponering for Meth 15 minutter før offeret resulterede i signifikante stigninger i Fos- og pERK-immuno-mærkning i NAc-kerne og skal, BLA og ACA. Derudover blev signifikant co-ekspression af parringsinduceret Fos og Meth-induceret pERK igen fundet i disse områder (Figur 4; parringseffekt: F (1,12) = 15.93-76.62; p = 0.002- <0.001; lægemiddeleffekt: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). Antallet af dobbeltmærkede neuroner hos parrede meth-injicerede hanner var signifikant højere sammenlignet med umættede meth-behandlede (p <0.001) eller parrede saltopløsningsbehandlede (p <0.001) hanner. Når data blev udtrykt som procentdele af lægemiddelaktiverede neuroner, 47.2 ± 5.4% (NAc-kerne), 42.7 ± 7.6% (NAc-skal), 36.7 ± 3.7% (BLA) og 59.5 ± 5.1% (ACA) af aktiverede neuroner ved parring blev også aktiveret af Meth. Derudover var lægemiddelinduceret pERK ikke forskellig mellem parrede og umodnede dyr (Figur 4b, e, h, k) i alle områder undtagen ACA (p <0.001). Disse data indikerer, at seksuel adfærd faktisk forårsager en ændring af det temporale mønster af pERK-induktion med Meth.

Figur 4      

Seksinduceret Fos og Meth-induceret pERK-ekspression i NAc, BLA og ACA-neuroner 15 min efter administration af 4 mg / kg Meth. Middelværdier ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) og to (c, f, i, l) mærkede celler i NAc-kernen ...

Neural aktivering efter seksuel adfærd og 1 mg / kg Meth

Indtil videre viste det sig, at seksuel adfærd og 4 mg / kg Meth aktiverede overlappende populationer af neuroner i NAc-kerne og skal, BLA og ACA. To undersøge indflydelsen af ​​lægemiddeldosering på denne overlapning ved aktivering, mønstre af neural aktivering blev også studeret under anvendelse af en lavere dosis Meth. NAc-kerne og skal, BLA og ACA blev analyseret for aktivering induceret af køn og Meth. Faktisk har seksuel adfærd og efterfølgende eksponering for Meth resulteret i signifikante stigninger i Fos- og pERK-immunomerkning i NAc-kerne- og shell-subregionerne, BLA, såvel som neuroner i ACA-regionen i mPFC'en (Figur 5). Interessant nok resulterede den lavere dosis af Meth i tilsvarende antal pERK-mærkede neuroner som induceret af 4 mg / kg Meth i de fire hjernegrupper analyseret. Endnu vigtigere viste NAc-kernen og skalet, BLA og ACA signifikante stigninger i antallet af dobbeltmærkede celler (Figur 5c, f, i, l) sammenlignet med umættede meth-injicerede hanner (p = 0.003- <0.001). Når data blev udtrykt som procentdelene af medikamentaktiverede neuroner, blev 21.1 ± 0.9% og 20.4 ± 1.8% i henholdsvis NAc-kernen og skallen, 41.9 ± 3.9% i BLA og 49.8 ± 0.8% af ACA-neuroner aktiveret af køn og Meth.

Figur 5      

Seksinduceret Fos og Meth-induceret pERK-ekspression i NAc, BLA og ACA-neuroner 15 min efter administration af 1 mg / kg Meth. Middelværdier ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) og to (c, f, i, l) mærkede celler i NAc-kernen ...

Neural aktivering efter seksuel adfærd og administration af d-amfetamin

For at teste om de ovennævnte resultater var specifikke for Meth, blev der udført et yderligere eksperiment for at studere parring- og Amph-induceret neuralaktivering. Analyse af enkelt- og dobbeltmærkede celler for pERK og Fos viste, at seksuel adfærd og efterfølgende eksponering for Amph resulterede i signifikante stigninger i Fos- og pERK-immunomerkning i NAc-kerne og skal og BLA (Figur 6; parringseffekt: F (1,15) = 7.38-69.71; p = 0.016- <0.001; lægemiddeleffekt: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). Desuden var antallet af dobbeltmærkede neuroner signifikant højere i parret Amph-behandlet sammenlignet med ikke-parret Amph-behandlet (p = 0.009- <0.001) eller parret saltvand-behandlet (p = 0.015- <0.001) hanner (Figur 6c, f, i). Når data blev udtrykt som procentdelene af lægemiddelaktiverede neuroner, blev 25.7 ± 2.8% og 18.0 ± 3.2% i henholdsvis NAc-kernen og -skallen og 31.4 ± 2.0% af BLA-neuroner aktiveret ved både parring og Amph. ACA-regionen i mPFC viste signifikante niveauer af parringsinduceret Fos (Figur 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). I modsætning til Meth resulterede Amph imidlertid ikke i signifikante stigninger i lægemiddelinducerede pERK-niveauer i ACA (Figur 6k) eller antal dobbeltmærkede neuroner i ACA (Figur 6l) sammenlignet med både parrede og ikke-modificerede saltvandssprøjte hanner.

Figur 6      

Seksinduceret Fos- og Amph-induceret pERK-ekspression i NAc-, BLA- og ACA-neuroner 15 min efter administration af 5 mg / kg Amph. Middelværdier ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) og to (c, f, i, l) mærkede celler i NAc-kernen ...

DISKUSSION

Den nuværende undersøgelse viser på et cellulært niveau en overlapning mellem neural aktivering ved den naturlige forstærkers seksuelle adfærd og den psykostimulerende Meth. Derfor viser disse data, at ikke kun stoffer virker på samme hjerneområder, der regulerer naturlig belønning, men i virkeligheden aktiverer stoffer de samme celler involveret i reguleringen af ​​naturlig belønning. Specifikt blev det vist her, at seksuel adfærd og Meth samvirkede en population af neuroner i NAc-kernen og skalet, BLA og ACA-regionen i mPFC, der identificerer potentielle steder, hvor Meth kan påvirke seksuel adfærd.

Den nuværende konstatering om, at seksuel adfærd og administration af Meth aktiverer overlappende populationer af neuroner i NAc, BLA og ACA er i modsætning til resultater fra andre undersøgelser, der viser, at forskellige populationer af NAc-neuroner koder for lægemiddel og naturlig belønning.

Specifikt viste elektrofysiologiske undersøgelser, der sammenlignede neural aktivering under selvadministration af naturlige belønninger (mad og vand) og intravenøs kokain, at kokain selvadministration aktiverede en differentiel, ikke-overlappende population af neuroner, som generelt ikke var lydhør under operantrespons for vand og fødevareforstærkning (92%). Kun 8% af akkumulale neuroner viste aktivering af både kokain og naturlig belønning (Carelli et al., 2000).

I modsætning hertil viste et flertal (65%) af cellen i NAc aktiveringen ved forskellige naturlige belønninger (mad og vand), selvom en forstærker var mere spiselig (saccharose) (Roop et al., 2002).

Flere faktorer kan have bidraget til uoverensstemmelsen med de nuværende resultater. For det første blev forskellige tekniske tilgange brugt til at undersøge neurale aktiviteter. Den nuværende undersøgelse udnyttede en neuroanatomisk metode til påvisning af samtidig neural aktivering ved to forskellige stimuli ved anvendelse af dobbelt fluorescenscent immunocytokemistik for Fos og perk, hvilket muliggør undersøgelse af enkeltcelleaktivering over store spænd af hjerneområder. I modsætning hertil anvendte undersøgelser fra Carelli og medarbejdere elektrofysiologiske optagelser, der var begrænset til NAc'en af ​​opførende dyr for at tage stilling til, om selvadministration af misbrugsmedicin aktiverer det samme neurale kredsløb, der anvendes af naturlige belønninger.

For det andet undersøgte den nuværende undersøgelse en anden naturlig belønning, dvs. seksuel adfærd i forhold til tidligere undersøgelser, som brugte mad og vand i begrænsede rotter (Carelli, 2000). Fødevarer og vand kan have mindre givende værdi end parring. Seksuel adfærd er meget givende, og rotter udgør let CPP til kopiering (Agmo og Berenfeld, 1990, Martinez og Paredes, 2001, Tenk, 2008). Selvom diætbegrænsede rotter udgør CPP for vand (Agmo et al., 1993, Perks og Clifton, 1997) og mad (Perks og Clifton, 1997), diet ubegrænsede rotter forbruger fortrinsvis og danner CPP for mere spiselige fødevarer (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

For det tredje inkluderede vores undersøgelser forskellige misbrugsmedicin i forhold til tidligere undersøgelser, idet man anvendte methamphetamin og amfetamin i stedet for kokain. De foreliggende resultater viser, at specifikt Meth og i mindre grad resulterede i, at amfetamin resulterede i aktivering af neuroner også aktiveret ved seksuel adfærd. Lægemiddelerfaring kan også have spillet en faktor i vores resultater. De nuværende undersøgelser udnyttede dyr, der var seksuelt erfarne, men narkotika naive. I modsætning hertil anvendte de elektrofysiologiske undersøgelser af Carelli og medarbejdere "veluddannede" dyr, der fik gentagne eksponeringer mod kokain.

Det er derfor muligt, at den Meth-inducerede aktivering af neuroner aktiveret ved seksuel adfærd ændres hos lægemidlet erfarne rotter. Foreløbige undersøgelser fra vores laboratorium tyder dog på, at lægemiddelerfaring sandsynligvis ikke vil være en vigtig faktor som seksuel adfærd og Meth behandling hos hanner behandles kronisk med Meth-co-aktiverede tilsvarende procentdele af lægemiddelaktiverede neuroner som rapporteret i den aktuelle undersøgelse (20.3 ± 2.5% i NAc kerne og 27.8 ± 1.3% i NAc shell; Frohmader og Coolen, upublicerede observationer).

Endelig undersøgte den aktuelle undersøgelse den "direkte" virkning af lægemidler ved anvendelse af passiv administration. Derfor afslører den nuværende analyse ikke oplysninger om neurale kredsløb involveret i stofsøgning eller signaler forbundet med lægemiddelbelønning, men afslører snarere neural aktivitet forårsaget af lægemidlets farmakologiske virkning. I de tidligere elektrofysiologiske undersøgelser er NAc-neural aktivitet, der forekommer inden for sekunder af forstærkede responser, ikke resultatet af kokainens farmakologiske virkning, men er stærkt afhængig af associative faktorer inden for selvadministrationsparadigmet (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Specielt er NAc-neurale aktiviteter påvirket af reaktionsuafhængige præsentationer af stimuli forbundet med intravenøs kokainleverance såvel som ved instrumentelle uforudsete faktorer (dvs. trykpresse), der er forbundet med dette adfærdsmæssige paradigme (Carelli, 2000, Carelli og Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli og Wightman, 2004). Sammenfattende kan vores resultater af coaktivering ved naturlig og narkotikabelønning være specifik for aktivering ved seksuel adfærd og passivt administreret Meth og Amph.

Meth og køn aktiverede overlappende populationer af neuroner i NAc kerne og skal på en dosisafhængig måde. De samaktiverede neuroner i NAc'en kan formidle potentielle virkninger af Meth på motivation og givende egenskaber ved seksuel adfærd, da læsioner af NAc forstyrrer seksuel adfærd (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Desuden er disse neuroner potentielt et sted for dosisafhængige lægemiddelvirkninger ved parring, da den lavere Meth-dosis (1 mg / kg) reducerede antallet af dobbeltmærkede celler med 50% sammenlignet med den højere dosis Meth (4 mg / kg). Selv om denne undersøgelse ikke identificerer den kemiske fænotype af co-aktiverede neuroner, har tidligere undersøgelser vist, at lægemiddelinduceret pERK- og Fos-ekspression i NAc er afhængig af både dopamin (DA) og glutamatreceptorer (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Selv om det ikke er klart, om parringsinduceret neuralaktivering i NAc er afhængig af disse receptorer, er dette blevet påvist i andre hjerneområder, især i det mediale preoptiske område (Lumley og Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). Thus kan Meth virke på neuroner også aktiveret under seksuel adfærd via aktivering af dopamin og glutamatreceptorer. NAc glutamats rolle i seksuel adfærd er for tiden uklar, men det er veletableret, at DA spiller en afgørende rolle i motivationen for seksuel adfærd (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Mikrodialysestudier rapporterede stigninger i NAc DA-udstrømning under appetitive og forbrugsfaser af mandlig seksuel adfærd (Fiorino og Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) og mesolimbisk DA-udstrømning er blevet korreleret med at lette initiering og vedligeholdelse af råtters seksuelle adfærd (Pfaus og Everitt, 1995). Desuden viser DA-manipulationsundersøgelser DA-antagonister i NAc-hæmmer seksuel adfærd, mens agonister letter indvielsen af ​​seksuel adfærdr (Everitt et al., 1989, Pfaus og Phillips, 1989). Meth kan således påvirke motivation for seksuel adfærd via aktivering af DA receptorer.

I modsætning til NAc'et forblev antallet af dobbeltmærkede celler i BLA og ACA forholdsvis uændret uanset Meth-dosen. BLA er kritisk for diskret associativ læring og er stærkt involveret i betinget forstærkning og belønningsevaluering under instrumentalt svar (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Se, 2002). BLA-læsede rotter viser nedsat håndtagstryk for konditionerede stimuli parret med mad (Everitt et al., 1989) eller seksuel forstærkning (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). I modsætning hertil påvirker denne manipulation ikke den føderative fase af fodring og seksuel adfærd (Cardinal et al., 2002). BLA spiller også en nøglerolle til minde om betingede stimuli forbundet med lægemiddelstimuli (Grace and Rosenkranz, 2002, Laviolette og Grace, 2006). Læsioner eller farmakologiske inaktivering af BLA blokere opkøbet (Whitelaw et al., 1996) og udtryk (Grimm og See, 2000) betinget cocaine genindførelse, mens det ikke påvirker lægemiddeladministrationsprocessen. Desuden, Amph infunderet direkte i BLA resulterer i en potentieret lægemiddelreinstatering i nærværelse af de konditionerede indikatorer (See et al., 2003). Det er derfor muligt, at psykostimulerende forstærket DA transmission i BLA resulterer i forstærket følelsesmæssig lethed og søger (Ledford et al., 2003) af seksuel belønning og bidrager dermed til det forbedrede seksuelle drev og begær rapporteret af Meth misbrugere (Semple et al., 2002, Grøn og Halkitis, 2006).

I ACA var neural aktivering af sexaktiverede neuroner dosisuafhængig og specifik for Meth, da den ikke blev observeret med Amph. Selvom Meth og Amph har lignende strukturelle og farmakologiske egenskaber, er Meth et mere potent psykostimulerende middel end Amph med længerevarende virkninger (NIDA, 2006). Undersøgelser af Goodwin et al. viste, at Meth genererer en større DA-udstrømning og hæmmer clearance af lokalt anvendt DA mere effektivt i rotten NAc end Amph. Disse egenskaber kunne bidrage til de vanedannende egenskaber af Meth sammenlignet med Amph (Goodwin et al., 2009) og måske de neurale aktiveringsforskelle, der observeres mellem de to lægemidler. Det er imidlertid ikke klart, om de forskellige mønstre af resultater skyldes effektforskelle mellem stofferne eller styrkeproblemerne i forbindelse med de anvendte doser, og yderligere undersøgelse er påkrævet.

Samaktivering af Meth og sex blev ikke observeret i andre subregioner af mPFC (IL og PL). I rotten er ACA blevet grundigt studeret ved hjælp af appetitive opgaver, der understøtter en rolle i stimulus-forstærkersammenslutninger (Everitt et al., 1999, Se, 2002, Cardinal et al., 2003). Der er rigeligt bevis for, at mPFC er involveret i lægemiddelbehov og tilbagefald til stofsøgende og narkotikamisbrugsadfærd hos både mennesker og rotter (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin og See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas og Volkow, 2005). jegPå linje med dette er det blevet foreslået, at mPFC-dysfunktion forårsaget af gentagen udsættelse for misbrugsmedicin kan være ansvarlig for reduceret impulskontrol og øget narkotikarelateret adfærd som observeret hos mange misbrugere (Jentsch og Taylor, 1999). Nylige data fra vores laboratorium viste, at mPFC-læsioner resulterede i fortsat søgning efter seksuel adfærd, da dette var forbundet med en aversiv stimulus (Davis et al., 2003). Selv om denne undersøgelse ikke undersøgte ACA, understøtter den hypotesen om, at mPFC (og ACA specifikt) medierer virkningerne af Meth på et tab af hæmmende kontrol over seksuel adfærd som rapporteret af Meth-misbrugere (Salo et al., 2007).

Sammenfattende udgør disse undersøgelser et kritisk første skridt i retning af en bedre forståelse af, hvordan narkotika af misbrug virker på neurale veje, som normalt formidler naturlige belønninger. Desuden illustrerer disse resultater, at i modsætning til den nuværende overbevisning om, at misbrugsmedicin ikke aktiverer de samme celler i mesolimbic-systemet som naturlig belønning, aktiverer Meth og i mindre grad Amph de samme celler som seksuel adfærd. Til gengæld kan disse co-aktiverede neurale populationer påvirke søgen efter naturlig belønning efter lægemiddeleksponering. Endelig kan resultaterne af denne undersøgelse betydeligt bidrage til vores forståelse af grundlaget for afhængighed generelt. Sammenligninger af ligheder og forskelle, samt ændringer i neural aktivering af mesolimbic systemet fremkaldt af seksuel adfærd versus misbrugsmedicin kan føre til en bedre forståelse af stofmisbrug og tilhørende ændringer i naturlig belønning.

Tak

Denne forskning blev støttet af tilskud fra National Institutes of Health R01 DA014591 og canadiske institutter for sundhedsforskning RN 014705 til LMC.

FORKORTELSER

  • ABC
  • avidin-biotin-peberrodsperoxidasekompleks
  • ACA
  • anterior cingulate område
  • amph
  • d-amphetamin
  • BLA
  • basolateral amygdala
  • BNSTpl
  • posterolaterale sengekerner fra stria terminalis
  • BNSTpm
  • posteria-bedialkernen fra stria terminalis
  • BT
  • biotinyleret tyramid
  • CEA
  • cental amygdala
  • CPP
  • konditioneret sted præference
  • E
  • ejakulation
  • EL
  • ejakulationslatens
  • IF
  • infralimbic område
  • IL
  • intromission latens
  • IM
  • intromission
  • M
  • montere
  • MAP Kinase
  • mitogenaktiveret proteinkinase
  • MEApd
  • posterodorsal medial amygdala
  • meth
  • metamfetamin
  • ML
  • mount latency
  • MPFC
  • medial prefrontal cortex
  • MPN
  • medial preoptisk kerne
  • NAc
  • nucleus Accumbens
  • PB
  • phosphatpuffer
  • PBS
  • phosphatpufret saltvand
  • PEI
  • post ejaculatorisk interval
  • pERK
  • phosphoryleret MAP Kinase
  • PL
  • prelimbic område
  • VTA
  • ventral tegmental område

Fodnoter

Ansvarsfraskrivelse for udgiver: Dette er en PDF-fil af et unedited manuskript, der er blevet accepteret til offentliggørelse. Som en service til vores kunder leverer vi denne tidlige version af manuskriptet. Manuskriptet vil gennemgå copyediting, sætning og gennemgang af det resulterende bevis før det offentliggøres i sin endelige formular. Bemærk venligst, at der under produktionsprocessen kan opdages fejl, som kan påvirke indholdet, og alle juridiske ansvarsfraskrivelser, der gælder for tidsskriftet, vedrører.

Referencer

  1. Agmo A. Mandlig rotte seksuel adfærd. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Forstærkning af ejakulationsegenskaber hos hanrotten: opioids og dopaminers rolle. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Belønning og forstærkning produceret af drikkevand: Rolle af opioider og dopaminreceptorsubtyper. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuel adfærd og seksuelt forbundne miljøindikatorer aktiverer mesolimbic systemet hos hanrotter. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Forøget ekspression af c-fos i det mediale preoptiske område efter parring i hanrotter: Rolle af afferente indgange fra medial amygdala og midbrain central tegmental felt. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. En rolle for præfrontale cortex i stress- og kokain-induceret genoptagelse af kokain, der søger hos rotter. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Kardinal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Følelser og motivation: rollen som amygdala, ventral striatum og præfrontal cortex. Neurovidenskab og bioadfærdsmæssige anmeldelser. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Rollen af ​​den forreste cingulat cortex i kontrollen over adfærd ved Pavlovian betingede stimuli hos rotter. Behavioral Neuroscience. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktivering af accumbens cellebrænding ved stimuli forbundet med kokainlevering under selvadministration. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens cellefyring under målrettet adfærd for kokain vs. 'naturlig' forstærkning. Fysiologi og adfærd. 2002; 76: 379-387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektiv aktivering af accumbens neuroner ved kokain-associerede stimuli under en vand / kokain flere tidsplan. Brain Research. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Bevis for, at separate neurale kredsløb i kernen accumbens koder for kokain kontra "naturlig" (vand og mad) belønning. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funktionel mikrokredsløb i accumulationens underliggende stofmisbrug: indsigt fra realtids signalering under adfærd. Nuværende udtalelse i neurobiologi. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektiv kodning af kokain versus naturlige fordele ved nucleus accumbens neuroner er ikke relateret til kronisk lægemiddeleksponering. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronale reaktioner i præfrontal cortex og nucleus accumbens under heroin selvadministration i frit bevægelige rotter. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaine, men ikke naturlig belønning Selvadministration eller passiv kokaininfusion producerer vedvarende LTP i VTA. Neuron. 2008; 59: 288-297. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Forbedret Cdk5-aktivitet og p35-omplacering i Ventral Striatum af akutte og kroniske methamphetamin-behandlede rotter. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbisk aktivering under cue-induceret kokainbehov. Am J Psykiatri. 1999; 156: 11-18. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamin øger phosphorylering af ekstracellulære signalregulerede kinase- og transkriptionsfaktorer i rottestriatum via gruppe I-metabotrope glutamatreceptorer. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII regulerer amfetamininduceret ERK1 / 2 phosphorylering i striatale neuroner. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Samfundet for Behavioral Neuroendocrinology. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoner og adfærd; 2003. Lesioner af den mediale præfrontale cortex forstyrrer ikke seksuel adfærd hos hanrotter; s. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Drugs misbrugt af mennesker præferentivt øger synaptiske dopamin koncentrationer i mesolimbic systemet af frit bevægelige rotter. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274-5278. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Parring aktiverer NMDA-receptorer i det mediale preoptiske område af hanrotter. Behavioral Neuroscience. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Forudsigere af seksuel risikovurdering blandt nye stofbrugere. Journal of sex research. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapi af methamphetaminafhængighed: En opdatering. Stofmisbrug. 2008; 29: 31-49. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Seksuel motivation: En neural og adfærdsmæssig analyse af de mekanismer, der ligger til grund for appetitive og copulatoriske reaktioner hos hanrotter. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaktioner mellem amygdala og ventral striatum i stimulus-belønning foreninger: Undersøgelser ved hjælp af en anden ordensplan for seksuel forstærkning. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Undersøgelser af instrumental adfærd med seksuel forstærkning hos hanrotter (Rattus norvegicus): I. Kontrol med korte synlige stimuli parret med en modtagelig kvinde. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Associative processer i afhængighed og belønning Rolle for Amygdala-Ventral Striatal Subsystems. Annaler fra New York Academy of Sciences. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studier af instrumental adfærd med seksuel forstærkning hos hanrotter (Rattus norvegicus): II. Virkninger af præoptiske areal læsioner, kastration og testosteron. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, se RE. Den neurokredsløb af afhængighed: en oversigt. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Amfetaminfremkaldt c-fos mRNA-ekspression i kaudat-putamen: virkningerne af DA- og NMDA-receptorantagonister varierer som en funktion af neuronal fænotype og miljømæssig kontekst. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dynamiske forandringer i nukleare accumulation dopamin efflux under Coolidge effekten hos hanrotter. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Tilrettelæggelse af seksuel adfærd og forbedret dopamin-efflux i Nucleus Accumbens fra hanrotter efter D-amfetamininduceret adfærdsmæssig sensibilisering. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Tilrettelæggelse af seksuel adfærd hos hanrotter efter d-amfetamin-induceret adfærdsmæssig sensibilisering. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin og Methamphetamin Forskelligt påvirker Dopamintransportører i Vitro og in Vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulering af konditionerede reaktioner af basolaterale amygdala neuroner. Fysiologi og adfærd. 2002; 77: 489-493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktivering af hukommelseskredsløb under cue-fremkaldt kokainbehov. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040-12045. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  39. Grøn AI, Halkitis PN. Crystal methamphetamine og seksuel socialitet i en urban homoseksuel subkultur: En valgfri affinitet. Kultur, sundhed og seksualitet. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, se RE. Dissociation af primære og sekundære belønningsrelevante limbiske kerner i en dyremodel af tilbagefald. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormon-neurotransmitter interaktioner i bekæmpelsen af ​​seksuel adfærd. Behavioral Brain Research. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mandlig seksuel adfærd. I: Pfaff DW, et al., Redaktører. Hormoner Hjerne og adfærd. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamin og serotonin: indflydelse på mandlig seksuel adfærd. Fysiologi og adfærd. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Effekter af enkelt og gentagen administration af methamphetamin eller morfin på neuroglycan C-genekspression i rottehjerne. Den Internationale Journal of Neuropsychopharmacology. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Conditioned place preferences (CPP'er) til højkaloriske "snack foods" i rotte stammer genetisk tilbøjelige mod resistent over for diæt induceret fedme: Modstand mod naltrexon blokade. Farmakologi biokemi og adfærd. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Virkning af opioidantagonisme på betingede sted præferencer til snack mad. Farmakologi biokemi og adfærd. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitet som følge af frontostriatal dysfunktion i stofmisbrug: konsekvenser for kontrol af adfærd ved hjælp af belønningsrelaterede stimuli. Psykofarmakologi (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Det neurale grundlag for afhængighed: en patologi af motivation og valg. Am J Psykiatri. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Hukommelse og afhængighed: fælles neuralkredsløb og molekylære mekanismer. Neuron. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Modstående roller af nucleus accumbens og anterior lateral hypothalamisk område i kontrollen af ​​seksuel adfærd i hanrotten. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoider potentierer følelsesmæssig læring plasticitet i neuroner af den mediale præfrontale cortex gennem basolaterale Amygdala indgange. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, se RE. Potentieret genindførelse af kokain-søgende adfærd efter D-amfetamininfusion i Basolateral Amygdala. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Gentagne eksponeringer intensiveres i stedet for at mindske de givende virkninger af amfetamin, morfin og kokain. Psykofarmakologi (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Seksuel adfærd hos hanrotter efter radiofrekvens eller dopamin-depletterende læsioner i nuklear accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Lateral Hypothalamus Serotonin hæmmer Nucleus Accumbens Dopamin: Implikationer for Seksuel Satiety. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Virkninger af en D1-antagonist og seksuel oplevelse på copulationsinduceret Fos-lignende immunoreaktivitet i den mediale preoptiske kerne. Brain Research. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Kun self-paced parring er givende i rotter af begge køn. Horm Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, se RE. Selektiv inaktivering af den dorsomediale præfrontale cortex og den basolaterale amygdala dæmper betinget genindførelse af slukket kokain-søgende adfærd hos rotter. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Tilrettelæggelse af seksuel adfærd i hanrotten i nærvær af stimuli, der tidligere var parret med systemiske injektioner af morfin. Farmakologi biokemi og adfærd. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Bestemmelser for methamphetaminbelønning ved ekstracellulær signalreguleret kinase 1 / 2 / ets-lignende gen-1 signalvej gennem aktivering af dopamin NIDA Research Report Serie: Mishandling af methamphetamin og addicton. 2006 NIH Publikationsnummer 06-4210. [PubMed]
  61. Fordele SM, Clifton PG. Forstærkerevaluering og betinget stedpræference. Fysiologi og adfærd. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Veje af seksuel begær. Journal of Sexual Medicine. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psykofarmakologi af seksuel adfærd. I: Bloom FE, Kupfer DJ, redaktører. Psykofarmakologi: fjerde generation af fremskridt. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Virkninger af øjeblikkelig geninduktion i hjernen efter seksuel stimulering af kvindelige og mandlige gnavere. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditionering og seksuel adfærd: en anmeldelse. Horm Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Differentielle virkninger af dopaminreceptorantagonister på den seksuelle opførsel af hanrotter. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Det mesolimbiske dopaminsystem: Den endelige fælles vej for den forstærkende virkning af misbrugsmedicin? Neurovidenskab og bioadfærdsmæssige anmeldelser. 2006; 30: 215-238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Seksuel erfaring fremkalder funktionel og strukturel plasticitet i mesolimbic systemet. Biologisk Psykiatri. 2009 I tryk.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Dopaminfluktuationer i kernen accumbens under vedligeholdelse, udryddelse og genindførelse af intravenøs D-amphetamin selvadministration. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Narkotika og seksuelle virkninger: Narkotikas rolle og køn. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuel adfærd øger c-fos-ekspressionen i forræderen af ​​hanrotten. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens aktivitet under en multipel tidsplan for vand og sucrose forstærkning hos rotter. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Attentional Control og Brain Metabolite Niveauer i Methamphetamin Abusers. Biologisk Psykiatri. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Krystalmetamfetamin og ecstasy er forskellige i forhold til usikkert sex blandt unge homoseksuelle mænd. Canadisk journal for folkesundhed. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Se RE. Neural substrater af betinget cued tilbagefald til narkotikasøgende adfærd. Farmakologi biokemi og adfærd. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Se RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Narkotikamisbrug, Tilbagefald og Amygdala. Annaler fra New York Academy of Sciences. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivationer forbundet med methamphetamin brug blandt hiv mænd, der har sex med mænd. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Genoprettelsesmodellen for tilbagefald af lægemidler: historie, metodologi og større resultater. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilisering til de konditionerede givende virkninger af kokain: farmakologiske og tidsmæssige karakteristika. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilisering til de konditionerede givende virkninger af morfin: farmakologi og tidsmæssige karakteristika. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Forudsigere af hiv-seksuel risikoadfærd i et fællesskabsprøve af injektionsmedicinsk brug af mænd og kvinder. Aids og adfærd. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Methamphetamin Anvendelse og Seksuel Risiko Behandling i amerikanske gymnasiestuderende: Resultater fra en National Risk Behavior Survey. Forebyggelsesvidenskab. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Virkninger af dopamin og NMDA-receptorer på kokaininduceret Fos-ekspression i striatum af Fischer-rotter. Brain Research. 2008; 1243: 1-9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  84. Swanson LW, redaktør. Hjernekort: Struktur af rottehjerne. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuel belønning hos hanrotter: Effekter af seksuel erfaring på betinget sted præference forbundet med ejakulationer og intromissioner. Horm Behav. 2008 [PMC gratis artikel] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Sider C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Inddragelse af den ekstracellulære signalregulerede kinasekaskade til cocaine-givende egenskaber. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Sider C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Addictive og ikke-vanedannende stoffer inducerer forskellige og specifikke mønstre af ERK-aktivering i musens hjerne. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulering af en proteinfosfatasekaskade tillader konvergerende dopamin- og glutamatsignaler til at aktivere ERK i striatumet. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491-496. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Ændringer i dopaminerg og glutamatergisk transmission ved induktion og ekspression af adfærdsmæssig sensibilisering: En kritisk gennemgang af prækliniske undersøgelser. Psykofarmakologi (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neural aktivering efter seksuel opførsel i den mandlige og kvindelige rottehjerne. Behavioral Brain Research. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Excitotoksiske læsioner af den basolaterale amygdala svækker erhvervelsen af ​​kokain-søgeradfærd under en andenordens plan for forstærkning. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologi af afhængighed. Nuværende udtalelse i neurobiologi. 1996; 6: 243-251. [PubMed]