Kilde
Wagoner Center for Alkoholisme og Addiction Research, Institute for Neuroscience, University of Texas at Austin, Austin, TX, 78712, USA. [e-mail beskyttet].
Abstrakt
ABSTRAKT:
BAGGRUND:
Manglende evne til at reducere eller regulere alkoholindtagelse er et kendetegnssymptom for alkoholforstyrrelser. Forskning i nye adfærdsmæssige og genetiske modeller for oplevelsesinducerede drikkevand ændrer vores viden om alkoholforstyrrelser. Der blev tidligere observeret markante alkoholadministrationsadfærd ved sammenligning af to F1-hybridstammer af mus: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) viser reduceret alkoholpræference efter erfaring med høje koncentrationer af alkohol og perioder med afholdenhed mens C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) viser vedvarende alkoholpræference. Disse fænotyper er interessante, fordi disse hybrider demonstrerer forekomsten af genetisk additivitet (BxN) og overdominans (BxF) i ethanolindtag på en oplevelsesafhængig måde.
Specifikt udviser BxF vedvarende alkoholpræference, og BxN udviser reduceret alkoholpræference efter erfaring med høje ethanolkoncentrationer; erfaring med lave ethanolkoncentrationer producerer imidlertid vedvarende alkoholpræference for begge hybrider.
I den nuværende undersøgelse testede vi hypotesen om, at disse fænotyper er repræsenteret ved differentieret produktion af den inducerbare transkriptionsfaktor, FosB, i belønnings-, aversions- og stressrelaterede hjerneområder.
RESULTATER:
Ændringer i neuronal plasticitet (målt ved ΔFosB-niveauer) var erfaringsafhængige såvel som hjerneområdet og genotypespecifikke, hvilket yderligere understøtter, at neuronale kredsløb ligger til grund for motiverende aspekter af ethanolforbrug.
BxN-mus, der udviste reduceret alkoholpræference, havde lavere ΔFosB-niveauer i Edinger-Westphal-kernen end mus, der udviste vedvarende alkoholpræference, og øgede ΔFosB-niveauer i centrale mediale amygdala sammenlignet med kontrolmus.
BxN-mus, der viser vedvarende alkoholpræference, udviste højere ΔFosB-niveauer i det ventrale tegmentale område, Edinger-Westphal nucleus og amygdala (centrale og laterale divisioner).
Desuden i BxN-mus ΔFosB-niveauer i Edinger-Westphal-kernen og de ventrale tegmentale regioner korrigerede signifikant positivt med ethanolpræference og indtag. Derudover afslørede hierarkisk klynge-analyse, at mange ethanolnaive mus med overordnede lave ΔFosB-niveauer er i en klynge, mens mange mus, der viser vedvarende alkoholpræference med overordnede høje ΔFosB-niveauer, er i en klynge sammen.
KONKLUSIONER:
Ved at sammenligne og kontrastere to alkoholfænotyper viser denne undersøgelse, at de belønnings- og stressrelaterede kredsløb (inklusive Edinger-Westphal-kernen, det ventrale tegmentalområde, amygdala) gennemgår en betydelig plasticitet, der manifesterer sig som reduceret alkoholpræference.
Baggrund
Der er kendte følsomhedsfaktorer, miljømæssige og genetiske, forbundet med alkoholmisbrug og alkoholisme. Evnen til at drikke rigelige mængder alkohol med ringe konsekvens for individet er et primært symptom på debut hos mange alkoholikere, hvilket indikerer, at et lavt respons på alkohol er en væsentlig sårbarhedsfaktor i udviklingen af alkoholisme [1,2]. Definition af neurobiologiske faktorer, der bidrager til alkoholmoderation, vil hjælpe vores forståelse af alkoholbrug og misbrug, og er en effektiv strategi til udvikling af forbedrede behandlinger for personer, der er diagnosticeret med alkoholforstyrrelser. Brug af gnavermodeller til efterligning af menneskelig sygdom har været et kraftfuldt redskab til at fremme forståelsen af denne sygdom og forbedre behandlingerne. Der er flere gnavermodeller på plads til at undersøge aspekter af alkoholmisbrug og alkoholisme, men ingen modellerer alkoholisme fuldstændigt. Hvorvidt en mus mundtligt selv administrerer ethanolopløsninger under lignende miljøforhold afhænger meget af dens genetiske baggrund [3].
For nylig fandt vi, at C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) og FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 hybridmus selv administrerer usædvanligt høje niveauer af alkohol under to-flaske-præferenceundersøgelser (hunner forbruger 20 / X dag og mænd 35 – 7 g / kg / dag, afhængigt af koncentration og paradigme) [4]. Denne nye genetiske model har en betydelig fordel sammenlignet med eksisterende indavlede stammer, inklusive bevis for en overdominerende fænotype og drikke til høje blodalkoholniveauer [4]. Derudover ses det høje ethanolforbrug, som BxF-mus udviser, i to yderligere ethanol-drikkeparadigmer (drikke i mørke og ethanol-accept under planlagt væsketilgang) [4]. Vi observerede derefter adskilte alkoholadministrationsadfærd, når vi sammenligner to F1-hybridstammer af mus: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) viser reduceret alkoholpræference efter erfaring med høje koncentrationer af alkohol og perioder med afholdenhed og BxF viser vedvarende alkoholpræference [5]. Ved hjælp af et batteri af adfærdsundersøgelser har vi vist, at BxN er mere følsomme end BxF-mus overfor de aversive og beroligende, men ikke givende, effekter af ethanol [6].
Grundlæggende undersøgelser af nye adfærdsmæssige og genetiske modeller for højt alkoholforbrug og oplevelsesinducerede driftsændringer vil fremme vores viden om alkoholmisbrug og alkoholisme. Fænotypen med reduceret alkoholpræference er interessant, fordi BxN-mus oprindeligt viser en høj præference for ethanolopløsninger. Selvom det motiverende aspekt af reduktion af alkoholindtagelse efter erfaring med høje ethanolkoncentrationer og afholdenhed ikke er kendt, kan BxN-mus måles som moderat alkoholholdige, fordi de stadig forbruger ethanolopløsninger, men på et reduceret niveau, formodentlig på grund af en aversiv oplevelse.
Modellen med vedvarende alkoholpræference er også interessant, da BxF-mus stabilt forbruger ekstremt høje niveauer af ethanol uanset tidligere erfaring. Vedvarende og reduceret alkoholpræference kan relateres til en alkoholmangeleffekt, et fænomen, hvor dyr udviser markant øget alkoholforbrug efter en periode med tvungen abstinence [7]. Alkoholfratagelseseffekten er et nyttigt fænomen til undersøgelse af øget alkoholdrinkadfærd. Selvom det eksperimentelle skema, der vides at inducere alkoholmangelvirkningen, er ganske anderledes end det anvendte skema, sammenligner man vedvarende og reduceret alkoholpræference med en alkoholberøvelseseffekt de forskellige adfærdsfænotyper, der diskuteres her, til et vigtigt fænomen i gnavermodeller i alkoholforskning. Nedsat alkoholpræference ville være det modsatte af en alkoholberøvelseseffekt, og vedvarende alkoholpræference kan beskrives som fraværet af en alkoholberøvelseseffekt. Brugen af forskellige genetiske dyremodeller, såsom BxF og BxN, bidrager meget til fremskridt i marken, da alkoholanvendelsesforstyrrelser antages at stamme fra komplekse interaktioner mellem genetik og miljø. Identificering af differentieret øjeblikkelig, tidlig genekspression for disse hybrider giver indsigt i hjernekredsløbet, der er vigtigt for de givende og aversive egenskaber ved ethanol.
Ethanol og andre medikamentengagerede neurokredsløb er blevet undersøgt i specifikke gnavermodeller ved anvendelse af molekylære markører for neuronal plasticitet og / eller aktivitet [8-15]. Selvadministreret og eksperimenteradministreret ethanol resulterer ikke i ækvivalente hjernemetabolskekort, hvilket antyder, at specifikke kredsløb ligger til grund for de forstærkende virkninger af ethanol [8,9].
En nøglekomponent, som endnu ikke skal undersøges omfattende i alkoholforskning, er undersøgelse af vedvarende og reduceret alkoholpræferencesadfærd og identifikation af neuronale kredsløb, der er involveret under denne adfærd. Målet med dette eksperiment var at identificere hjerneområder involveret ved vedvarende og reduceret alkoholpræference. Fordi kronisk alkoholindgivelse (sammen med andre misbrugsmidler) har vist sig at forårsage regionale forskelle i hjerne i FosB-niveauer, testede vi hypotesen om, at disse adfærdsmæssige fænotyper er repræsenteret ved differentieret produktion af den inducerbare transkriptionsfaktor, FosB, i hjerneregioner, der vides at være involveret i belønning, aversion og stress [10].
Kroniske stimuli, der forårsager regionale forskelle i osFosB-niveauer, inkluderer misbrugsmidler (alkohol, kokain, amfetamin, nikotin, morfin og antipsykotika), kronisk stress (fastholdelsesstress, uforudsigelig fodstød, elektrokonvulsive anfald) og kompulsiv hjulkørsel [11]. Som en potentiel formidler af langsigtede tilpasninger i hjernen er det at identificere den dominerende variant af FosB (FosB eller ΔFosB) som svar på kronisk ethanolbehandling en vigtig skelnen.
Der er adskillige undersøgelser, der målte FosB og ΔFosB efter kronisk stimuli, for hvilke det ikke er verificeret, at osFosB var den dominerende isoform (som dem beskrevet nedenfor). Der er dog stærke beviser for, at osFosB, ikke FosB, er den dominerende isoform efter kronisk stimuli [10-12]. En undersøgelse foretaget af Ryabinin og Wang (1998) fandt, at i lav alkohol, der foretrækker DBA / 2J mus, resulterede fire dage med gentagne ethanolinjektioner i kraftige stigninger i FosB-ekspression i de følgende hjerneområder: anterior cortical amygdaloid nucleus, lateral septum ventrale, central amygdala , lateral amygdala, lateral hypothalamus, nucleus accumbens shell, bed nucleus of stria terminalis og paraventrikulær kerne i thalamus [13]. Deres resultater identificerer en ethanol-responsiv neurokredsløb. FosB-ekspression er også blevet målt i den højalkohol, der foretrækker C57BL / 6J-musen under erhvervelse og vedligeholdelse af ethanol-selvadministration under begrænsede adgangsbetingelser. Der var ingen ændringer i FosB-niveauer under erhvervelse af selvadministration [14]. Efter to uger med selvadministration med ethanol med begrænset adgang blev FosB-niveauerne imidlertid forøget i den centrale mediale kerne i amygdala og Edinger-Westphal nucleus [15]. Generelt identificerer rapporter nye regioner, der beskæftiger sig med ethanol-selvadministration, samt indebærer en rolle for den mesocorticolimbiske sti og udvidet amygdala [16]. Det er dog vigtigt at bemærke, at ændringer i osFosB-niveauer afhænger af ethanoladministrationsvej, dosis og længde af tiden udsat for en behandling eller tidsplan [13-15].
Musestammene anvendt i denne undersøgelse tilvejebringer interessante modeller til sammenligning af vedvarende og reduceret alkoholpræference og de underliggende mekanismer, der er ansvarlige for disse forskellige alkoholresponser. Denne undersøgelse viser, at mus, der udviser reduceret alkoholpræference, også viser signifikant plasticitet i belønnings- og stressrelaterede kredsløb (inklusive Edinger-Westphal nucleus, ventral tegmental område, amygdala, nucleus accumbens og cingulate cortex).
Resultater
Virkningen af alkoholkoncentrationer og afholdenhedsperioder på selvadministrering i BxF og BxN mus
For at demonstrere, at forskellige ethanolkoncentrationer og / eller afholdenhedsperioder ændrede efterfølgende ethanolforbrug, designede vi fire skemaer (grupper) til måling af ethanolforbrug (figur (Figure1a, b).1a, b). Der var fire eksperimentelle grupper for hver hybrid: Høje koncentrationer, høje koncentrationer med afholdenhedsperioder, lave koncentrationer og lave koncentrationer med afholdenhedsperioder. Komplette data for ethanolpræference (figur (Figure2)2) og forbrug (figur (Figure3)3) data (for alle grupper og begge genotyper) præsenteres som reference. For at fastlægge og illustrere adfærdsmæssige fænotyper af vedvarende og reduceret alkoholpræference, er 9% ethanolpræferencer og forbrugsdata præsenteret i figurer Figures44 , and5.5. Disse adfærdsmæssige fænotyper er baseret på sammenligning af 9% ethanolpræferencer og forbrug fra den første, anden, tredje og fjerde præsentation i grupperne Høj koncentration og tilsvarende eksperimentelle dage for grupper med lav koncentration. En tovejs ANOVA (genotype x tid) af 9% ethanolpræferencer og forbrug blev udført. For gruppen med høje koncentrationer foretrækkes ethanol (figur (Figure4a)4a) og forbrug (figur (Figure5a)5a) var større for BxF end BxN, og BxF udviste vedvarende alkoholpræference og -forbrug, mens BxN udviste reduceret alkoholpræference og -forbrug (ETHANOLPREFERENCE - interaktion F (3,54) = 4.83, P <0, 01, genotype F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, tid F (9.92) = 0.0001, P <1,54; ETHANOLFORBRUG - interaktion N / S, genotype F (50.73) = 0.0001, P <3,54, tid F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). For gruppen med høje koncentrationer med afholdenhed foretrækkes ethanol (figur (Figure4b)4b) og forbrug (figur (Figure5b)5b) var større for BxF end BxN, og BxF udviste vedvarende alkoholpræference og -forbrug, mens BxN udviste reduceret alkoholpræference og -forbrug (ETHANOL FORETRUKNE - interaktion F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotype F (1,132) = 250.43, P <0.0001, tid F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ETHANOLFORBRUG - interaktion F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotype F (1,132) = 510.88, P <0.0001, tid F (3,132) = 22.42, P <0.0001). For gruppen med lave koncentrationer foretrækkes ethanol (figur (Figure4c)4c) og forbrug (figur (Figure5c)5c) var større for BxF end BxN, og begge hybrider udviste vedvarende alkoholpræference og -forbrug (ETHANOLPREFERENCE - interaktion N / S, genotype F (1,54) = 12.2, P <0.01, tid N / S; ETHANOL FORBRUG - interaktion N / S, genotype F (1,54) = 74.83, P <0.0001, tid N / S). For gruppen med lave koncentrationer med afholdenhed foretrækkes ethanol (figur (Figure4d)4d) og forbrug (figur (Figure5d)5d) var større for BxF end BxN, og begge hybrider udviste moderat reduktion i alkoholpræference og -forbrug (ETHANOL FORETRUKNING - interaktion N / S, genotype F (1,132) = 166.58, P <0.0001, tid N / S; ETHANOL FORBRUG - interaktion F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotype F (1,132) = 480.64, P <0.0001, tid F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Sammenfattende udviste BxF i grupper med høje koncentrationer (uden afholdenhed) vedvarende alkoholpræference, mens BxN udviste reduceret alkoholpræference, og i grupper med lave koncentrationer (uden afholdenhed) udviste både BxF og B6xN vedvarende alkoholpræference. Da fænotyperne af interesse bedst fanges i grupper uden afholdenhed, er de fokus for resten af undersøgelsen.
ΔFosB-niveauer
ΔFB-kvantificering og analyse blev anvendt til at identificere neurokredsløb, der kronisk blev aktiveret under vedvarende og reduceret alkoholpræference. Der var tre eksperimentelle grupper for hver hybrid: Høje koncentrationer, lave koncentrationer og vand (kontrol). ΔFosB-data præsenteres som procentdel ΔFosB-positive neuroner [(# af ΔFosB-positive neuroner) / (# af ΔFosB-positive neuroner + # af Nissl-positive neuroner)] (tabel (Table1).1). Tidligere arbejde har vist, at erfaring med ethanol kan inducere neurodegeneration [17]. Derfor undersøgte vi neuronale tal i denne undersøgelse og rapporterer ingen signifikant forskel baseret på genotype eller gruppe for hjerneområderne kvantificeret i denne undersøgelse. De følgende tre analyser af ΔFosB-data blev udført: 1) tre-vejs ANOVA (genotype x gruppe x hjerneområde), 2) tovejs ANOVA (hjerneområde x gruppe) for hver genotype og 3) korrelationsmatrixer blev udviklet for at kortlægge korrelation netværk.
Gentagne tiltag trevejs ANOVA (genotype x gruppe x hjerneområde) afslørede en genotype x hjerneområdet interaktion [F (15,375) = 2.01, P <05], en gruppe x hjerne region interaktion [F (15.375) = 1.99, P <0.01] og en hovedeffekt af hjerneområdet [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Gentagne tiltag tovejs ANOVA (hjerneområde x gruppe) for hver genotype viste, at der var en hovedeffekt af gruppe og hjerneområde for både BxF og BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, hovedeffekt af gruppe; F (15,374) = 25.64, P <.0001, hovedeffekt af hjerneområdet; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, hovedeffekt af gruppe; F (15,360) = 23.73, P <.0001, hovedeffekt af genotype]. Post-hoc-analyse afslørede seks signifikante gruppeforskelle for BxN (figur (Figure6a-c).6ac). Procent ΔFB-niveauer var højere i gruppen med lave koncentrationer end i vand-gruppen i La, CeC / CeL, EW og VTA. Procent ΔFB var højere i gruppen High Concentrations end i Water-gruppen i CeMPV. Procent ΔFB var højere i gruppen Lav koncentrationer end i gruppen Høj koncentration i EW. ΔFB-data for alle andre kvantificerede hjerneområder er vist i tabel Table1.1. Pearsons r-korrelationsanalyse blev brugt til at bestemme, om% af ΔFosB-positive neuroner i en given hjerneområde korrelerede med ethanolforbrug eller præference. Ethanolforbrug og præference viste en signifikant positiv korrelation med% ΔFosB i EW og VTA for BxN-mus (ETHANOLFORBRUG - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETHANOL FORETRAG - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 for alle).
Det komplekse forhold mellem ΔFosB-ekspression, genotype, hjerneregion og ethanolforbrug blev yderligere undersøgt ved anvendelse af principkomponentanalyse og hierarkisk klynger. Analyse af hovedkomponenter afslørede, at størstedelen af variationen (~ 80%) i dataene var repræsenteret af 5-komponenter. Uovervåget hierarkisk klynge (klynget af individer og hjerneområder) blev derefter udført og bestilt under anvendelse af den første hovedkomponent (figur (Figure7).7). Den individuelle gruppering afslørede stærke, men ikke perfekte gruppemønstre baseret på ethanolforbrug, uanset genotype. Mange af de ethanolnaive mus sammenklynges og udviste mindre samlet osFBB end gennemsnittet, og mange af musene, der udviste vedvarende alkoholpræference, samlet sammen og udviste mere samlet ΔFosB end gennemsnittet. Disse to klynger var de mest forskellige. De tre klynger derimellem repræsenterede en større end, mindre end og en gennemsnitlig blanding af ΔFosB-værdier og ethanoldrænkende fænotyper.
Diskussion
Der blev observeret markant alkoholadministrationsadfærd ved sammenligning af to F1-hybridstammer af mus: BxN viser nedsat alkoholpræference efter erfaring med høje koncentrationer af alkohol og perioder med afholdenhed, mens BxF viser vedvarende alkoholpræference. BxF-modellerne er stabilt, højt forbrug (vedvarende alkoholpræference) og BxN-modeller moderat drikke (reduceret alkoholpræference). Neuronal plasticitet (eller aktivitet, målt ved ΔFosB-niveauer) var forskellig afhængig af ethanol-oplevelse, hvilket yderligere understøtter en underliggende rolle som specifikt neuronal kredsløb i vedvarende og reduceret alkoholpræference.
For den høje alkoholforbrugende stamme er C57BL / 6, ethanolpræference og forbrug meget afhængige af den indledende ethanolkoncentration, længden af afholdenhed og understamme (C57BL / 6Cr eller C57BL / 6J) [7,18]. Vi fandt, at ethanolpræferencen og forbruget, der blev set i BxF-mus, var konstant højere (og mere stabilt end i BxN) i de fire forskellige tidsplaner, der blev testet. Den moderat høje ethanolpræference og forbrug i BxN blev kun opretholdt med en tidsplan for kronisk drikke (lave koncentrationer uden afholdenhed), mens reduktioner i præference og forbrug blev observeret med alle andre testede kroniske drikkeplaner. BxN reduceret alkoholpræference tilbyder en ny dyremodel, hvor erfaring (gentagen præsentation af ethanol efter erfaring med flere høje ethanolkoncentrationer og / eller flere korte perioder med afholdenhed) reducerer deres respons på en tidligere meget foretrukken ethanolkoncentration dramatisk.
Selvadministreret og eksperimenteradministreret ethanol producerer forskellige hjernemetabolskekort, hvilket antyder, at specifikke kredsløb ligger under de forstærkende virkninger af ethanol [8,9]. Vi testede hypotesen om, at de vedvarende og reducerede alkoholpræferences adfærdsfænotyper er repræsenteret ved differentieret produktion af den inducerbare transkriptionsfaktor, FosB, i hjerneregioner, der vides at være involveret i belønning, modvilje og stress. ΔFosB er en transkriptionsfaktor med en unik langtidsstabilitet og udtænker ikke til stimuli, som c-Fos gør, snarere akkumuleres det under kroniske behandlinger. Stigninger i osFosB skyldes øget neuronal aktivitet og menes at afspejle langvarig neuronal plasticitet. Vi fandt, at procentdelen af osFosB-positive neuroner i hjerneområder afhænger af genotype (BxF og BxN) og gruppe (vandkontrol, lave koncentrationer og høje koncentrationer).
Feller BxN, post-hoc-analyse afslørede, at frivilligt ethanolforbrug resulterede i øget ΔFosB i EW-kernen, VTA og amygdala: indikerer øget neuronal plasticitet i hjerneområder, der vides at være involveret i ethanol-, belønnings- og stressreaktioner. BxN-mus i gruppen High Concentrations (reduceret alkoholpræference) har reduceret neuronal plasticitet i EW, hvilket antyder, at disse neuroner reagerer på alkoholindtagelse med en oplevelsesafhængig plasticitet. I gruppen Lav koncentrationer (udvist vedvarende alkoholpræference) er neuronal plasticitet i EW større end i kontrolgrupperne for høje koncentrationer og vand. Selvom de blev udført ved anvendelse af forskellige ethanol-drikkeparadigmer og genetiske musemodeller, stemmer vores fund i EW for BxN-mus overens med tidligere ethanolforbrugsundersøgelser [14,15]. Den ikke-preganglioniske EW er for nylig blevet karakteriseret som indeholdende perioculomotor urocortin (Ucn) -holdige neuroner [19]. Ucn1 er et corticotropin-frigørende faktor (CRF) -lignende peptid, der binder CRF1- og CRF2-receptorer. Tidligere undersøgelser med genetiske, farmakologiske og læsionsmetoder har vist, at Ucn1 er involveret i regulering af alkoholforbrug [19-22]. Ther er en kendt genetisk disponering for højt alkoholindtag i gnavere, der er korreleret med højere basalniveauer af Ucn1 i EW og LSi [23]. Manglen på post-hoc-betydning, som vi observerede i EW for høj alkohol, der foretrækker og indtager BxF-mus, var således uventet. Måske skyldes dette de lidt forhøjede procentdel osFB-niveauer i BxF-vandgruppen sammenlignet med BxN-vandgruppen. Faktisk var procentdel ΔFB-niveauerne for alle mus, der udviser vedvarende alkoholpræference (BxF-højkoncentrationsgruppe, BxF-lave koncentrationsgruppe og BxN-lave koncentrationsgruppe) ret ens.
For BxN øgede ethanolforbruget i gruppen Low Concentrations neuronal plasticitet i VTA (større end i kontrolgrupperne for High Concentrations and Water). Ethanolpræferencer og forbrug var også større for gruppen med lave koncentrationer. Manglen på post-hoc-betydning, som vi observerede i VTA for høj alkohol, der foretrækker og indtager BxF-mus, var uventet og kan skyldes lidt højere basale niveauer af ΔFosB i vandkontrolgruppen. Procent osFB-niveauer var svagt forhøjede i BxF-vandgruppen sammenlignet med BxN-vandgruppen, medens procentdel af BFosB-niveauer var ret ens for alle mus, der udviste vedvarende alkoholpræference (BxF-højkoncentrationsgruppe, BxF-lavkoncentrationsgruppe og BxN-lavkoncentrationsgruppe) . VTA-dopaminsystemet spiller en vigtig rolle i medieringen af de forstærkende virkninger af ethanol og deltager i mange gensidige forbindelser, der er vigtige for ethanol og belønningsrelateret adfærd [24-26]. Derudover projicerer VTA til amygdala- og EW-kernen. Det er vist, at rotter selvadministrerer ethanol direkte i VTA [27]. Ethanoleksponering øger også fyringshastigheden for dopaminerge neuroner i VTA [28,29]. Forhøjet fyringshastighed kunne være knyttet til ΔFosB-induktionen i VTA, som vi observerede efter kronisk frivillig ethanoladministration i BxN.
Alkoholafhængighed inducerer langvarige neuroadaptationer, hvilket resulterer i negative følelsesmæssige tilstande; en vigtig mekanisme i negativ forstærkning er corticotropin-frigivende faktor (CRF) signalering inden for amygdala [30]. Farmakologiske manipulationer af neuroner i CeA har målrettet GABA-, CRF-, opioid-, serotonin-, dynorphin- og norepinephrin-receptorer [25,31-34]. GABA-antagonister samt CRF-antagonister mindsker ethanolforbruget [32,33,35]. Læsioner af CeA mindsker kontinuerlig adgang til frivilligt ethanolforbrug [36]. Vores fund understøtter endvidere en rolle for CeA i reguleringen af alkoholholdningsadfærd. GABAergiske neuroner i den centrale amygdala danner en heterogen population, hvis forbindelser synes at være relateret til deres peptidindhold. Disse GABAergiske neuroner integrerer outputaktivitet af CeA. Som gennemgået i [Wee og Koob (2010]), sevige studier har identificeret en rolle for dynorphin og kappa opioidreceptorer i vedligeholdelse og eskalering af ethanolintake [37]. For nylig har Walker et al demonstreret, at κ-opioidreceptorantagonisten nor-binaltorphimin inden for den udvidede amygdala selektivt reducerer ethanol-selvadministrering i afhængige dyr [38]. Kappa opioidreceptorsignalering forbliver en nøgleinteresse for forskning i skæringspunktet mellem stress, belønning og aversion. Det er også demonstreret, at stressinduceret ethanol-selvadministrering er medieret ved kappa opioidreceptorsignalering [39]. Den centrale CeA kan opdeles i latero-kapsel (CeL / CeC) og medial posterior ventral. GABAergiske neuroner fra CeL / CeC modtager dopaminerge innervationer fra VTA; som tidligere bemærket, aktiveres disse neuroner efter akut ethanoladministration og viser forøgede ΔFosB-mus, der viser vedvarende alkoholpræference. Se også Mc [Brud (2002]) for en fremragende gennemgang af CeA og virkningerne af alkohol [40]. I vores undersøgelse udviste BxN-mus med vedvarende alkoholpræference (Low Concentrations-gruppe) øget neuronal plasticitet i CeC / CeL, og La og BxN-mus med reduceret alkoholpræference (High Concentrations-gruppe) udviste øget neuronal plasticitet i CeMPV. Disse resultater antyder, at specifik ethanoloplevelse involverer plasticitet i GABAergiske neuroner i amygdalaen. Med disse data sammen med tilsvarende ændringer i neuronal plasticitet i VTA og EW foreslår vi, at dette kredsløb gennemgår betydelig plasticitet under vedvarende alkoholpræferencesituationer.
Tidligere forskning har vist, at C57BL / 6J mus kan opnå høje blodalkoholniveauer ved to flaske valg af drikke, men disse blodalkoholniveauer opretholdes ikke, og ofte opfylder drikken ikke kriterierne for farmakologisk motivation angivet af Dole og Gentry (1984) [41,42]. BxN-mus, der udviser reduceret alkoholpræference, forbruges mindre end man kunne forvente af en typisk C57BL / 6J-mus [1]. Selvom vi ikke tog blodalkoholprøver, er det ikke sandsynligt, at BxN-mus, der viser reduceret alkoholpræference, opnåede vedvarende farmakologisk relevante blodalkoholniveauer, hvilket antyder, at høje blodalkoholkoncentrationer af ikke er nødvendige for at inducere plasticitet i disse hjerneområder. Det er vigtigt at bemærke, at en yderst signifikant effekt af gruppe også findes i BxF, selvom post-hoc-resultater (korrigeret for flere sammenligninger) for BxF-hjerneområder ikke indikerede signifikante ændringer i procent ΔFosB-positive neuroner for nogen region efter kronisk ethanolforbrug med disse forskellige tidsplaner.
For at visualisere potentielle forhold mellem variabler blev der udført hierarkisk klynge. Varmekortet for den resulterende analyse viser en generel tendens mellem ΔFosB-niveauer og ethanolforbrug uanset genotype. Højere ΔFB-niveauer var forbundet med højt drikkevand, og lavere ΔFosB-niveauer var forbundet med kontroldyr; forholdet var imidlertid ikke tilstrækkeligt til nøjagtigt at forudsige drikkefænotyper baseret udelukkende på osFosB-niveauer.
konklusioner
Der blev observeret markant alkoholadministrationsadfærd med to F1-hybridstammer af mus: BxN viser reduceret alkoholpræference efter erfaring med høje koncentrationer af alkohol, mens BxF viser vedvarende alkoholpræference. BxF-modellerne er stabilt, højt forbrug (vedvarende alkoholpræference) og BxN-modeller moderat drikke (reduceret alkoholpræference). Ændringer i neuronal plasticitet (målt ved ΔFosB-niveauer) var erfaringsafhængige såvel som hjerne-region- og genotype-specifikke, hvilket yderligere definerer det neuronale kredsløb under bag motivationsaspekterne af ethanolforbrug. Disse resultater viser, at ændringen af en forældrelinje i hybridmus resulterer i ændringer i mønster af alkoholforbrug og markerede ændringer i mønstre for ΔFosB-ekspression, hvilket antyder, at forskellige hjernetværk engageres i disse forskellige hybridmus.
Metoder
Etik
Denne undersøgelse blev udført i nøje overensstemmelse med anbefalingerne i Vejledningen til pleje og brug af laboratoriedyr fra de nationale sundhedsinstitutter. Protokollen blev godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee på University of Texas i Austin (AUP 2010 – 00028). Al operation blev udført under natrium pentobarbital anæstesi, og alle bestræbelser blev gjort for at minimere lidelse.
Dyr
Undersøgelser blev udført ved anvendelse af intercross-hunnlige F1-hybridmus afledt af C57BL / 6J og enten FVB / NJ eller NZB / B1NJ mus (BxF F1 og BxN F1, maternel stamme x faderlig stamme). C57BL / 6J, FVB / NJ og NZB / B1NJ opdrættere blev købt fra The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) og parret ved 7 – 8 uger. Afkom blev fravænket i isoseksuelle grupper af hver af genotyperne (BxF F1, BxN F1). Vi testede kun hunmus for at lette sammenligningen med tidligere indsamlede data [1,5,6]. Mus blev anbragt i standardbur med fødevarer og vand til rådighed ad libitum. Kolonirummet og testrummet var på en 12 h lys: 12 h mørk cyklus (lys tændt ved 07: 00).
To flaske valg af ethanolpræferencer
Metoden til valg af to flasker blev anvendt til at bestemme frivillige ethanol-selvadministrationsmønstre i kvinder BxF og BxN mus [1,6]. F1 hybrid hunmus (alder 63 dage) blev individuelt opbevaret i standardbur, mens de blev vant i en uge til flasker med sipperør indeholdende vand inden introduktion af en ethanolopløsning. Efter tilvenning havde mus adgang til to identiske flasker: den ene indeholdt vand og den anden indeholdt en ethanolopløsning. Rørpositioner blev ændret dagligt for at kontrollere for positionspræferencer. For at tage højde for potentielt spild og fordampning blev den gennemsnitlige vægt, der blev udtømt fra rør i kontrolbure uden mus, trukket fra de individuelle drikkeværdier hver dag. Mus blev vejet hver 4 dage gennem hele eksperimentet. Alt væskeforbrug blev målt dagligt i hele eksperimentet. Mængden af forbrugt ethanol og ethanolpræference blev beregnet for hver mus, og disse værdier blev gennemsnitligt beregnet for hver koncentration af ethanol. Effekten af alkoholkoncentrationer og afholdenhedsperioder på selvadministrering i BxF- og BxN-mus blev demonstreret ved at udpege en eksperimentel gruppe med adgang til høje koncentrationer (eskalerende adgang til 3-35% ethanolopløsninger efterfulgt af 3 gentagne cykler af 9, 18, og 27% ethanol, der slutter med en endelig præsentation af 9% ethanol) og en anden gruppe med lave koncentrationer (stigende adgang til 3-9% ethanol, med resten af eksperimentet udført med adgang til 9% ethanol). Hver af disse grupper havde en undergruppe, der gjorde eller ikke oplevede tre ugens abstinensperioder. Kontrolmus oplevede lignende betingelser på samme tid som eksperimentelle mus, men blev kun tilbudt en flaske vand.
I alt var der fem grupper for hver hybrid: Vand (n = 14-16), høje koncentrationer (n = 10), høje koncentrationer med afholdenhedsperioder (n = 20), lave koncentrationer (n = 10) og lave koncentrationer med afholdenhedsperioder (n = 20). Se figur Figure11 for detaljerede to tidsplaner for valg af flaske.
ΔFosB Immunohistokemi og kvantificering
ΔFosB immunhistokemi (IHC) blev målt i 16 hjerneregioner fra mus, der oplevede 72 dages kontinuerlig adgang til enten vand (kontrol) eller vand og alkohol [Høje koncentrationer og lave koncentrationer]. Effekten af høje koncentrationer på præference og forbrug af ethanol var meget større end virkningen af afholdenhed; derfor blev grupper, der oplevede perioder med afholdenhed, ikke inkluderet i ΔFosB IHC-målinger. Yderligere blev eksperimentet udført ud over det første udseende af vedvarende eller reduceret alkoholpræference for at vise, at de adfærdsmæssige fænotyper er stabile med gentagne cyklusser med ændringer i ethanolkoncentration for at undersøge virkningerne af kronisk ethanolforbrug. Fire til otte timer efter fjernelse af alkohol på den 73. dag i forsøget blev mus dybt bedøvet (175 mg / kg natriumpentobarbital) og perfunderet intrakardielt med 20 ml 0.01 M phosphatbufret saltvand (PBS) efterfulgt af 100 ml 4% paraformaldehyd i PBS. Hjerner blev fjernet, postfikseret i 4% paraformaldehyd ved 4 ° C, indlejret i 3% agarose, sektioneret (50 um, koronal) på et vibratom, anbragt i kryobeskyttende middel (30% saccharose, 30% ethylenglycol og 0.1% polyvinyl pyrrolidon i PBS) natten over ved 4 ° C og opbevares ved -20 ° C, indtil den behandles til IHC. Optøede sektioner blev vasket med PBS, behandlet med 0.3% H2O2 og inkuberet i en time i 3% normalt gedeserum for at minimere ikke-specifik mærkning. Vævssnit blev derefter inkuberet natten over ved 4 ° C i 3% normalt gedeserum og anti-FosB (SC-48, 1: 5000 fortynding, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Sektioner blev vasket, inkuberet i biotinyleret gede-anti-kanin Ig (1: 200 fortynding, Vector Laboratories, Burlingame, CA) i en time, vasket og inkuberet i avidin-biotinkompleks (1: 200 fortynding, Elite kit-Vector Laboratories) . Peroxidaseaktivitet blev visualiseret ved reaktion med 0.05% diaminobenzidin (indeholdende 0.015% H2O2). Vævsektioner blev Nissl-tællet (under anvendelse af methylenblå / azurblå II). Slides blev kodet til blind tælling. ΔFB-IR-neuroner blev talt ved 50X (olie) -forstørrelse under anvendelse af den optiske fraktioneringsmetode og StereoInvestigator computersoftware. Prøvetagning af parameteroplysninger: tællerammen (50um x 50um x 10um) var den samme for alle kvantificerede regioner; netstørrelsen blev imidlertid bestemt for hvert hjerneområde for at sikre, at de totale bilaterale celletællinger ville være lig 100 – 300 for at opnå en variationskoefficient mindre end 0.1. Data blev beregnet som procent af ΔFosB positive kerner (antal ΔFosB positive kerner / antal neuroner) for hver region.
FosB-antistoffet anvendt i denne undersøgelse (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) blev frembragt mod en intern region af FosB og genkender både FosB og ΔFosB. Selvom dette antistof genkender både FosB og ΔFosB, vil de immunopositive neuroner, der er kvantificeret i denne undersøgelse, blive omtalt som ΔFosB-positive neuroner, da det har vist sig, at misbrugsmidler, herunder alkohol, specifikt inducerer ΔFosB, ikke FosB, i neuroner. Perrotti et al. ([2008]) målt ΔFosB-induktion (som reaktion på kronisk indgivelse af misbrugsmidler, inklusive alkohol) ved anvendelse af to antistoffer: et, der genkender FosB og ΔFosB (SC-48) og et selektivt for ΔFosB (ikke kommercielt tilgængeligt) og fandt, at for alle lægemidler studeret skyldes den immunreaktivitet, der er observeret ved hjælp af FosB-antistoffet (SC-48), ΔFosB, da de ikke påviste nogen immunoreaktive neuroner ved anvendelse af et antistof selektivt til FosB i fuld længde [10]. Derudover vides osFB at være induceret på en hjerneregion- og celletypespecifik måde ved forskellige kroniske behandlinger og fremragende anmeldelser om dette emne er tilgængelige [11,43,44].
Forkortelser og placering af neuroanatomiske strukturer
Il - infralimbisk cortex (+1.70 mm); Cg1 - cingulate cortex 1 (+1.1 mm); Cg2 - cingulate cortex 1 (+1.10 mm); NAcc-kerne - nucleus accumbens core (+1.10 mm); NAcc shell - nucleus accumbens shell (+1.10 mm); LSi - mellemliggende septum mellemliggende (+1.10 mm); La - lateral amygdala (-1.22 mm); Bla - basolateral amygdala (-1.22 mm); CeC / CeL - central kapsel og central lateral amygdala (-1.22 mm); CeMPV - medial posterioventral del af amygdalas centrale kerne (-1.22 mm); PAG - periaquaductal grå (-3.64 mm); EW - Edinger-Westphal kerne (-3.64 mm); VTA - ventralt tegmentalt område (-3.64 mm); DR - dorsal raphe (- 4.60 mm); PBN - parabrachial kerne (-5.2 mm); NTS - nucleus tractus solitarius (-6.96 mm). Musehjernen i stereotaksiske koordinater[45] blev brugt til subjektivt at matche en til tre sektioner til kvantificering af hvert hjerneområde.
Statistiske procedurer
Data rapporteres som middelværdien ± SEM, medmindre andet er angivet. Data blev normalt distribueret. Statistikker blev udført ved anvendelse af Statistica version 6 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) og GraphPad Prism version 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Gentagne målinger tovejs ANOVA'er blev udført for ethanolforbrug og præferencesdata for at evaluere forskelle mellem grupper. To- og trevejs-ANOVA'er blev udført for osFosB-data for at evaluere interaktioner og hovedeffekter for gruppe (høje koncentrationer, lave koncentrationer og vand), hjerneområde og genotype. Bonferronis korrektion for flere sammenligninger og Bonferronis post-hoc blev udført, når det var relevant. Specifikt antog vi, at stress- og belønningskredsløb ville have øget FosB hos mus, der viser reduceret alkoholpræference. For hvert hybridkors blev Pearson's r anvendt til at identificere tilstedeværelsen af signifikante korrelationer mellem ΔFosB-niveauer og ethanolpræferencer og forbrug i ethanol-erfarne mus.
Hierarkisk gruppering blev udført for at visualisere, hvordan dataene samvarierer og vurderer, hvordan datagruppen sammen. Imputerede medianværdier erstattede manglende procentdel ΔFBB-data, som ikke oversteg 15% af data. Selv om der er en større grad af usikkerhed, end hvis de beregnede værdier faktisk var blevet observeret, kræver hierarkisk klynge-analyse fuldstændigt medlemskab eller fuldstændig sletning for sammenligning af sager. Hierarkisk klynge blev udført ved anvendelse af Ward's metode, og de resulterende klynger blev bestilt af den første principkomponent i en hovedkomponentanalyse (JMP®, version 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). For vand- og ethanol-erfarne grupper blev osFosB-data for hver hjerneområde z-score transformeret, og analyse af hovedkomponenter blev udført for at bestemme antallet af klynger. Dataene blev derefter klynget op af hjerneregioner og individer under anvendelse af overvåget hierarkisk klyngebaseanalyse.
Forfatterens bidrag
ARO, YAB, RAH, TAJ bidrog til designet af undersøgelsen. ARO erhvervede dataene. ARO, IP, RDM analyserede dataene. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB og RAH var involveret i udarbejdelse og revision af manuskriptet. Alle forfattere læste og godkendte det endelige manuskript.
Anerkendelser
Vi vil gerne takke Dr. Jody Mayfield og Colleen McClung til nyttige diskussioner og Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour og Darshan Pandya for teknisk assistance. Denne forskning blev støttet af det integrerende neurovidenskabsinitiativ til alkoholisme Consortium Grant AA13520 og National Institute for Alcohol Abuse and Alcoholism Grants AA06399-S og AA16424.
Referencer
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Firewater-myten og respons på alkohol i Mission Indianere. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Resultater i undergrupper angående reaktionsniveauet på alkohol som en risikofaktor for alkoholforstyrrelsesforstyrrelser: en universitetspopulation af kvinder og latinamerikanere. Alkohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Frivilligt forbrug af ethanol i 15 indavlede musestammer. Psychopharmacology. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hybride C57BL / 6J x FVB / NJ mus drikker mere alkohol end C57BL / 6J mus. Alkohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Hybridmus som genetiske modeller for højt alkoholforbrug. Opfør Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Adfærdsmæssige forskelle mellem C57BL / 6JxFVB / NJ og C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 hybridmus: forhold til kontrol af ethanolindtagelse. Opfør Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Udvikling af en alkoholmangel og eskaleringseffekt i C57BL / 6J. Alkohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Virkninger af selvadministrering af ethanol og ethanol / saccharose på hastighederne for lokal cerebral glukoseudnyttelse i rotter. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ. Lave og moderate doser ethanol producerer forskellige mønstre af cerebrale metaboliske ændringer hos rotter. Alkohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Forskellige mønstre af DeltaFosB induktion i hjernen af misbrugsmisbrug. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylær switch for langsigtet tilpasning i hjernen. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB akkumuleres i en GABAergic cellepopulation i den bageste hale af det ventrale tegmentale område efter psykostimulerende behandling. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Wang YM. Gentagen alkoholindgivelse påvirker differentielt c-Fos og FosB proteinimmunreaktivitet i DBA / 2J mus. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. ITF-ekspression i musehjerne under erhvervelse af selvadministration af alkohol. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Cross Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Alkoholdrinkning producerer selektive ændringer i hjernen i ekspression af inducerbare transkriptionsfaktorer. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Kalivas PW. Hvordan bestemmer vi, hvilke medikamentinducerede neuroplastiske ændringer er vigtige? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Cross Ref]
- Besætninger FT, Nixon K. Mekanismer til neurodegeneration og regenerering i alkoholisme. Alkohol. 2009;44: 115-127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Cross Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Karakterisering af ethanoldeprivationseffekten i undergrænser af C57BL / 6 mus. Alkohol. 2006;40: 119-126. doi: 10.1016 / j.alkohol.2006.12.003. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urocortin 1-distribution i musens hjerne er belastningsafhængig. Neuroscience. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE. Læsioner af den Edinger-Westphal kerne i C57BL / 6J mus forstyrrer ethanolinduceret hypotermi og ethanolforbrug. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Urocortin 1 mikroinjektion i musens laterale septum regulerer erhvervelse og ekspression af alkoholforbrug. Neuroscience. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Urocortin 1-ekspression i fem par rottelinier, der selektivt var opdrættet for forskelle i alkoholdrikning. Psychopharmacology. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ. Urocortin 1 neurokredsløb: ethanolsensitivitet og potentielt involvering i alkoholforbrug. Brain Res Rev 2006;52: 368-380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Cross Ref]
- Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Selvadministration af alkohol: mesolimbisk dopamins rolle. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ, Li TK. Dyremodeller for alkoholisme: neurobiologi for høj alkoholdrinkende adfærd hos gnavere Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Cross Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurocircuitry mål i ethanoløn og afhængighed. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Intrakranial selvadministrering af ethanol inden for det ventrale tegmentale område hos Wistar-hanrotter: bevis for involvering af dopaminneuroner. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Cross Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Lave doser af ethanol aktiverer dopaminergiske neuroner i det ventrale tegmentale område. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Cross Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Ethanol øger fyringshastigheden for dopaminneuroner i rottet ventralt tegmentalt område in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Cross Ref]
- Heilig M, Koob GF. En nøglerolle for corticotropin-frigivende faktor i alkoholafhængighed. Trends Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Bevis for, at amygdalaen er involveret i de hæmmende virkninger af 5-HT3-receptorantagonister på alkoholdrikning hos rotter. Alkohol. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Cross Ref]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Effekter af CRF1-receptor- og opioidreceptorantagonister på afhængighedsinduceret stigning i alkoholdrikning ved alkohol-foretrukne (P) rotter. Alkohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. GABAA-receptorantagonisme i den udstrakte amygdala mindsker selvadministration af ethanol hos rotter. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Cross Ref]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Ethanol øger den GABAergiske transmission på både præ- og postsynaptiske steder i centrale amygdala-neuroner fra rotte. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Intra-amygdala muscimol nedsætter operativ ethanol-selvadministrering i afhængige rotter. Alkohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Reduceret eksperimentel angst og frivilligt ethanolforbrug hos rotter efter centrale, men ikke basolaterale amygdala-læsioner. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Cross Ref]
- Wee S, Koob GF. Dynorphin-kappa opioidsystemets rolle i de forstærkende virkninger af misbrugsmedicin. Psykofarmakologi (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Målretning af dynorphin / kappa opioidreceptorsystemer til behandling af alkoholmisbrug og afhængighed. Alkohol. 2012;46: 359-370. doi: 10.1016 / j.alkohol.2011.10.006. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Endogen kappa-opioid-formidling af stressinduceret potentiering af ethanolkonditioneret stedpræference og selvadministrering. Psykofarmakologi (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ. Amygdala's centrale kerne og virkningerne af alkohol og alkoholdrinkende adfærd hos gnavere. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Mod en analog til alkoholisme hos mus: Skalafaktorer i modellen. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Mod en analog til alkoholisme hos mus: Kriterier for anerkendelse af farmakologisk motiveret drikke. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ. Afhængighed af molekylær neurobiologi. Er j addict 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: en molekylær formidler af langsigtet neural og adfærdsplastisitet. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Franklin KJ, Paxinos G. Musehjernen i stereotaksiske koordinater. 2. San Diego, Californien: Akademisk; 2001.
;