DeltaFosB in The Nucleus Accumbens on seksuaalse preemia mõju tugevdamiseks oluline. (2010)

KOMMENTAARID: Delta FosB on kõigi sõltuvuste, nii käitumuslike kui ka keemiliste, marker. Kui see molekul hüvede ahelas suureneb, suureneb ka sõltuvuskäitumine. See on üks neuroplastiliste muutustega seotud molekulidest. See katse näitab, et see suureneb seksuaalse kogemusega, sarnaselt narkomaaniaga. Eksperimendis kasutasid nad geenitehnoloogiat, et tõsta selle tase üle normi. Selle tulemuseks oli seksuaalse tegevuse hõlbustamine. Me arvame, et see juhtub pornosõltuvusega.

Täielik uuring

Kannid KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Geenid Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Anatoomia ja rakubioloogia osakond, Schulichi meditsiini- ja hambaarstikool, Lääne-Ontario ülikool, London, Ontario, Kanada.

ABSTRACT

Seksuaalne käitumine meessoost rottidel on rahuldav ja tugevdav. Siiski on vähe teada seksuaalset tasu vahendavatest spetsiifilistest raku- ja molekulaarsetest mehhanismidest või tasu tugevdavatest mõjudest seksuaalse käitumise järgneval väljendamisel. Selles uuringus testitakse hüpoteesi, et FosB, FosB püsivalt väljendunud kärbitud vorm, mängib olulist rolli seksuaalse käitumise tugevdamisel ja seksuaalse motivatsiooni ja sooritusvõime soodustamisel.

On näidatud, et seksuaalne kogemus põhjustab ΔFosB akumuleerumist mitmetes limbilistes aju piirkondades, sealhulgas tuuma accumbens (NAc), mediaalne prefrontaalne ajukoor, ventral tegmental ja caudate putamen, kuid mitte mediaalne preoptiline tuum.

Järgmisena mõõdeti seksuaalselt kogenud ja naiivsetel loomadel c-Fose indutseerimist, mis on allavoolu (represseeritud) ΔFosB sihtmärk. Paaritust põhjustatud c-Fos-immunoreaktiivsete rakkude arv vähenes oluliselt seksuaalselt kogenud loomadel võrreldes seksuaalselt naiivsete kontrollidega.

Lõpuks manipuleeriti AFosB tasemed ja selle aktiivsus NAc-s, kasutades viiruse poolt vahendatud geeniülekannet, et uurida selle potentsiaalset rolli seksuaalse kogemuse vahendamisel ja kogemuste tekitatud seksuaalse jõudluse hõlbustamisel. ΔFosB üleekspressiooniga loomad näitasid seksuaalse jõudluse paremat hõlbustamist seksuaalse kogemusega võrreldes kontrollidega. Seevastu ΔJunD, ΔFosB domineeriva negatiivse sidumispartneri ekspressioon nõrgendas seksuaalse kogemuse tekitatud seksuaalse jõudluse hõlbustamist ja vaevab pikaajalist hõlbustamist, võrreldes rohelise fluorestsentsvalgu ja ΔFosB üleekspresseerivate rühmadega.

Üheskoos toetavad need leiud ΔFosB väljenduse kriitilist rolli NAc-s seksuaalse käitumise ja seksuaalse kogemuse põhjustatud seksuaalse jõudluse soodustamise mõjude tugevdamiseks.

SISSEJUHATUS

Seksuaalne käitumine on meessoost näriliste jaoks väga kasulik ja tugevdav (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Lisaks muudab seksuaalne kogemus järgnevat seksuaalset käitumist ja tasu (Tenk et al. 2009). Korduva paarikogemuse tõttu on seksuaalkäitumist hõlbustatud või „tugevdatud”, mida tõestavad vähene latentsus alustada paaritumist ja seksuaalse jõudluse soodustamist (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Samas on seksuaalse tasu ja tugevdamise aluseks olevad raku- ja molekulaarmehhanismid halvasti mõistetavad. On näidatud, et seksuaalne käitumine ja konditsioneeritud vihjed, mis ennustavad paaritumist, indutseerivad ajutiselt vahetu varajase geeni c-fos ekspressiooni isaste rottide mesolimbilises süsteemis (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Veelgi enam, hiljuti demonstreeriti, et seksuaalne kogemus põhjustab isasroti mesolimbilise süsteemi pikaajalist neuroplastikat (Frohmader et al. 2009; Kannud et al. 2010). Lisaks on isastel rottidel näidatud, et seksuaalne kogemus indutseerib ΔFosB, \ t a Fose perekonnaliige tuumakinnis (NAc) (Wallace et al. 2008). FosB, FosB kärbitud splaissingu variant, on Fos perekonna ainulaadne liige tänu suuremale stabiilsusele (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) ja mängib rolli suurenenud motivatsioonis ja tasustamises kuritarvitatavate narkootikumide ja sõltuvust vahendava pikaajalise närvilise plastiilsuse eest.Nestler et al. 2001). ΔFosB moodustab heteromeerse transkriptsioonifaktori kompleksi (aktivaatorvalk-1 (AP-1)) Jun-valkudega, eelistatult JunD-ga (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). ΔFosB indutseeritava üleekspressiooniga, mis piirdub peamiselt striatumiga, kasutades bi-transgeenset hiirt, toodetakse narkootikumidest sõltuv käitumuslik fenotüüp, hoolimata eelneva ravimi ekspositsiooni puudumisest (McClung et al. 2004). See käitumuslik fenotüüp hõlmab sensoorset lokomotoorset vastust kokaiinile (Kelz et al. 1999), suurem kokaiini eelistamine (Kelz et al. 1999) ja morfiin (Zachariou et al. 2006) ja suurenenud kokaiini enda manustamine (Colby et al. 2003).

Sarnaselt narkootikumide eest makstavale tasule reguleerib ΔFosB loomuliku rahuldustava käitumisega ja vahendab nende käitumist. ΔFosB üleekspressioon NAc-s, kasutades näriliste mudeleid, suurendab vabatahtlikku rataste liikumist (Werme et al. 2002), toiduainete eest vastamine (Olausson et al. 2006), sahharoosi tarbimine (Wallace et al. 2008), ja hõlbustab meest (Wallace et al. 2008) ja naised (Bradley et al. 2005) seksuaalne käitumine. Seega võib ΔFosB olla kaasatud looduslike rahuldavate kogemuste mõju vahendamisse. Tpraegune uurimus laieneb varasematele uuringutele, uurides spetsiaalselt ΔFosB rolli NAc-s seksuaalse kogemuse pikaajalistes tulemustes järgneva paaritumise käitumise ja neuraalse aktiveerimise osas mesolimbisüsteemis.

  • Kõigepealt tehti kindlaks, millised aju piirkonnad, mis on seotud tasustamise skeemiga ja seksuaalkäitumisega, väljendavad seksikogemuse indutseeritud ΔFosB-d.
  • Järgmisena mõjutab suguürituse poolt indutseeritud ΔFosB mõju c-Fose paralleelselt indutseeritud ekspressioonile, mis on allavoolu sihtmärk, mida ΔFosB represseeris (Renthal et al. 2008) uuriti.
  • Lõpuks määrati viiruse vektori kohaletoimetamistehnoloogia abil toime FosB aktiivsuse manipuleerimisele NAc-s (geeni üleekspressioon ja domineeriva negatiivse sidumispartneri ekspressioon) seksuaalse käitumise ja kogemuste indutseeritud seksuaalse motivatsiooni ja jõudluse hõlbustamiseks.
Mine:

MEETODID

Loomad

Täiskasvanud isased Sprague Dawley rotid (200-225 grammi) saadi firmast Charles River Laboratories (Senneville, QC, Kanada). Loomad paigutati katsete ajal Plexiglas puurides tunnelitoruga samades soost paarides. Kolooniaruum reguleeriti temperatuuri järgi ja seda hoiti 12 / 12 h valguse pimedas tsüklis koos toidu ja veega. ad libitum välja arvatud käitumiskatsete ajal. Stimulus naissoost (210 – 220 grammid) said paaritumisperioodil subkutaanset implantaati, mis sisaldas 5% östradioolbensoaati ja 95% kolesterooli pärast kahepoolset ovariektoomia sügavas anesteesias (0.35g ketamiin / 0.052g Xylazine). Seksuaalset vastuvõtlikkust indutseeriti 500µg progesterooni manustamisega 0.1 mL seesamiõlis umbes 4 tundi enne katset. Kõik protseduurid kiideti heaks Lääne-Ontario Ülikooli loomade hooldamise ja kasutamise komiteedel ning vastavad CCACi suunistele, mis hõlmasid selgroogseid loomi.

Seksuaalne käitumine

Paaritusseansid toimusid varase tumeda faasi ajal (2 – 6-tundide vahel pärast pimeda perioodi algust) pimedas punases valguses. Enne katse algust jagati loomad juhuslikult rühmadesse. Paaritumise ajal lasti isastel rottidel kopuleuda ejakulatsiooniks või 1-tunniks ja registreeriti seksuaalse käitumise parameetrid, sealhulgas: mount latentsus (ML; aeg naissoost kuni esmakordse paigaldamiseni), intromission-latentsus (IL; emane enne esimest montaaži vaginaalse läbitungimisega), ejakulatsiooni latentsus (EL; aeg esimestest intromissionist ejakulatsioonini), ejakulatsiooni intervall (PEI; aeg ejakulatsioonist esimesse järgnevasse intromissioni), monteerimiste arv (M; vaginaalne tõukumine ilma vaginaalse läbitungimine), intromioonide arv (IM; paigaldamine, sealhulgas tupe läbitavus) ja kopulatsiooni efektiivsus (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Loomade arv, mis ei sisaldanud ejakulatsiooni, ei sisaldanud analüüside hulka. Paigaldus- ja intromission-latentsus on seksuaalset motivatsiooni näitavad parameetrid, samas kui ejakulatsiooni latentsus, montaazide arv ja kopulatsiooni tõhusus kajastavad seksuaalset jõudlustHull 2002).

Katse 1: ΔFosB ekspressioon

Seksuaalselt varem mittesaanud isastel rottidel lasti puhastada puhta testiga puurides (60 × 45 × 50 cm) 5i järjestikuste, igapäevaste paaritamisetappide jaoks või jäi seksuaalselt naiivseks. Täiendav tabel 1 kirjeldab eksperimentaalsete rühmade käitumuslikku paradigmat: naiivne sugu (NNS; n = 5), naiivne sugu (NS; n = 5), ei kogenud sugu (ENS; n = 5) ja kogenud sugu (ES; n = 4). NS ja ES loomad surmati 1 tundi pärast ejakulatsiooni viimasel paaripäeval, et uurida paaritumise indutseeritud c-Fos ekspressiooni. NNS-i loomad surmati samaaegselt ENS-i loomadega 24 tundi pärast viimast paaritumist, et uurida sugukogemuse indutseeritud ΔFosB-d. Seksuaalselt kogenud rühmi sobitati seksuaalse käitumise jaoks enne järgnevat katset. Rühmade vahel ei täheldatud olulisi erinevusi käitumismeetmete osas sobiva paaritumisperioodi jooksul ja seksuaalkäitumise põhjustatud seksuaalse käitumise hõlbustamist näitasid mõlemad kogenud rühmad (Täiendav tabel 2). Kontrollid hõlmasid seksuaalselt naiivseid mehi, keda raviti samaaegselt paaritunud loomadega, tagades naissoost lõhnade ja vokaliseerumise ilma otsese naissoost kontaktita.

Ohverdamiseks anesteseeriti loomad naatriumpentobarbitaaliga (270mg / kg; ip) ja perfuseeriti intrakardiaalselt 50 ml 0.9% soolalahusega, millele järgnes 500% 4% paraformaldehüüd 0.1 M fosfaatpuhvris (PB). Ajusid eemaldati ja fikseeriti 1 h toatemperatuuril samas fiksaatoris, seejärel kasteti 20% sahharoosi ja 0.01% naatriumasiidiga 0.1 M PB-s ja hoiti 4 ° C juures. Koronaalsed lõigud (35 µm) lõigati külmutava mikrotoomiga (H400R, Micron, Saksamaa), koguti neli paralleelset seeriat krüoprotektandi lahuses (30% sahharoos ja 30% etüleenglükool 0.1 M PB-s) ja säilitati -20 ° C juures. Vaba ujuvaid sektsioone pesti ulatuslikult inkubatsioonide vahel 0.1 M fosfaatpuhverdatud soolalahusega (PBS; pH 7.3-7.4). Sektsioonid eksponeeriti 1% H-ga2O2 10 min toatemperatuuril endogeensete peroksidaaside hävitamiseks, seejärel blokeeritakse PBS + inkubeerimislahuses, mis on PBS, mis sisaldab 0.1% veise seerumi albumiini (kataloogi kirje 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) ja 0.4% Triton X -100 (kataloogi kirje BP151-500; Sigma-Aldrich) 1 h jaoks. Seejärel inkubeeriti sektsioone üleöö 4 ° C juures pannil FosB küüliku polüklonaalses antikehas (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB antikeha kasvatati FosB ja ΔFosB jagatud sisemise piirkonna vastu. ΔFosB-IR rakud olid spetsiifiliselt ΔFosB-positiivsed, sest stimuleerimisjärgsel ajal (24 tundi) on kõik detekteeritavad stiimulid indutseeritud FosB degradeerunud (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Lisaks sellele selles eksperimendis surmati viimasel päeval paarituvad loomad (NS, ES) 1 h pärast paaritumist, seega enne FosB ekspressiooni. Western blot analüüs kinnitas ΔFosB tuvastamist ligikaudu 37 kD juures. Pärast primaarse antikeha inkubeerimist inkubeeriti sektsioone 1 h jaoks biotiiniga konjugeeritud kitse anti-küüliku IgG-s (1: 500 PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ja seejärel 1 h avidiin-biotiin-peremehe peroksidaasis (ABC eliit 1: 1K PBS-s, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Pärast seda inkubatsiooni lõigud töödeldi ühel järgmistest viisidest:

1. Ühe peroksidaasi märgistamine

NNS-i ja ENS-i loomade sektsioone kasutati seksuaalse kogemuse indutseeritud AFosB akumulatsiooni ajuanalüüsiks. Pärast ABC inkubeerimist visualiseeriti peroksidaasikompleks pärast 10 minutite töötlemist kromogeenilahusena, mis sisaldas 0.02% 3,3'-diaminobensidiin tetrahüdrokloriidi (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) 0.02 M PB-s koos 0.1% nikkelsulfaadiga. vesinikperoksiid (0.015%). Sektsioonid pesti põhjalikult 0.1 M PB-s, et lõpetada reaktsioon ja paigaldati kodeeritud Superfrost pluss klaasplaatidele (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) koos 0.3% želatiiniga ddH-s20. Pärast dehüdraatimist kaeti kõik slaidid DPX-ga (dibutüülftalaadi ksüleen).

2. Kahekordne immunofluorestsents

ΔFosB ja c-Fos analüüsimiseks kasutati nelja NAc ja mPFC sisaldava eksperimentaalse rühma sektsioone. Pärast ABC inkubeerimist inkubeeriti sektsioone 10 min biotinüülitud türamiidiga (BT; 1: 250 PBS + 0.003% H2O2 Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) ja 30 min jaoks Alexa 488-konjugeeritud strepavidiiniga (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Seejärel inkubeeriti sektsioone öö läbi küüliku polüklonaalse antikehaga, mis tuvastas spetsiifiliselt c-Fose (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), millele järgnes inkubeerimine 30 min kitse anti-küüliku Cy3-konjugeeritud sekundaarse antikehaga (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Pärast värvimist pesti sektsioone põhjalikult 0.1 M PB-s, mis oli paigaldatud kodeeritud klaasplaatidele 0.3% želatiiniga ddH-s.20 ja katta libisemine veega monteeriva söötmega (Gelvatol), mis sisaldab anti-fading agent 1,4-diasabitsüklo (2,2) oktaani (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokeemilised kontrollid hõlmasid ühe või mõlema primaarse antikeha väljajätmist, mille tulemuseks oli märgistuse puudumine sobivas lainepikkuses.

Andmete analüüs

AFosB aju analüüs

Kaks katselist, kes olid pimedad ravile, tegid aju laia skaneerimise kodeeritud slaididel. AFosB-immunoreaktiivsed (-IR) rakud kogu ajus analüüsiti poolkvantitatiivselt, kasutades skaala, et esindada ΔFosB-positiivsete rakkude arvu, nagu on kirjeldatud Tabel 1. Lisaks loendati poolkvantitatiivsete leidude põhjal ΔFosB-IR rakkude arv standardseid analüüsialasid kasutades aju piirkondades, mis olid seotud tasu ja seksuaalse käitumisega, kasutades Leica DMRD mikroskoobi külge kinnitatud kaamera lucida joonistustoru (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Saksamaa): NAc (südamik (C) ja kest (S); 400 × 600µm), mida analüüsiti kolmel rostraal-Balfour et al. 2004); ventral tegmental area (VTA; 1000 × 800µm), mida analüüsiti kolmel rostraal-caudal tasemel (Balfour et al. 2004) ja VTA saba (Perrotti et al. 2005); prefrontaalne ajukoor (anterior cinglulate area (ACA); prelimbiline koor (PL); infralimbiline koort (IL); iga 600 x 800 µm; caudate putamen (CP; 800 × 800µm); ja mediaalne preoptiline tuum (MPN; 400 × 600 µm) (Täiendavad joonised 1 – 3). Alampiirkonna kohta loendati kaks sektsiooni ja rühma keskmise arvutamiseks arvutati keskmine looma kohta. ΔFosB-IR rakkude seksuaalselt naiivseid ja kogenud rühmi võrreldi iga alampiirkonna puhul, kasutades paralleelseid t-teste.

Tabel 1    

Kokkuvõte ΔFosB ekspressioonist seksuaalselt naiivsetel ja kogenud loomadel
ΔFosB ja c-Fos analüüs

Pildid salvestati, kasutades jahutatud CCD-kaamerat (Microfire, Optronics), mis on kinnitatud Leica mikroskoobi (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Saksamaa) ja Neurolucida tarkvara (MicroBrightfield Inc) jaoks, millel on fikseeritud kaamera seaded kõigi objektide jaoks (kasutades 10xi eesmärke). Cc-Fos-IR või AFosB-IR-d ekspresseerivate rakkude arv NAc südamikus ja kestas (400 × 600µm; Täiendav joonis 1) ja mPFC ACA (600 × 800µm; Täiendav joonis 3) loendati käsitsi katserühmadele pimestatud vaatleja, 2-sektsioonides looma kohta, kasutades Neurolucida tarkvara (MBF Bioscience, Williston, VT) ja keskmistati looma kohta. C-Fos või ΔFosB rakkude keskmisi keskmisi võrreldi kahesuunalise ANOVAga (tegurid: seksuaalne kogemus ja seksuaalne aktiivsus) ja Fisheri LSD-ga post hoc võrdlusteks 0.05i olulisuse tasemel.

Katse 2: ΔFosB ekspressiooni manipuleerimine

Viiruse vektor-vahendatud geeniülekanne

Seksuaalselt naiivsed isased Sprague Dawley rotid jagati juhuslikult rühmadesse enne stereotaksilist operatsiooni. Kõik loomad said GFP-d (kontroll; n = 12) kodeerivate rekombinantsete adeno-assotsieerunud viiruse (rAAV) vektorite, metsiktüüpi ΔFosB (n = 11) või ΔFunB domineeriva negatiivse seondumispartneri, mida nimetatakse ΔJunD-ks, kahepoolsed mikroinjektsioonid riiklikku büroodesse. AJunD vähendab AFosB poolt vahendatud transkriptsiooni, mis on kompetentselt heterodimeeriv AFosB-ga, enne kui seostatakse AP-9 piirkond geenipromootorites (Winstanley et al. 2007). Viiruse tiiter määrati qPCR abil ja hinnati in vivo enne uuringu algust. Tiiter oli 1 – 2 × 1011 nakkusohtlikud osakesed ml kohta. rAAV vektorid süstiti 1.5 µL / külje mahus 7 minuti jooksul (koordinaadid: AP + 1.5, ML +/− 1.2 Bregmast; DV −7.6 kolju pinnalt vastavalt Paxinos ja Watson, 1998), kasutades Hamiltoni süstalt (5µL Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektorid ei tekita toksilisust, mis on suurem kui ainult kontrollinfusioonidel (Winstanley et al., 2007; AAV ettevalmistamise üksikasju vt Hommel et al., 2003). Käitumiskatsed alustasid 3i nädalaid pärast vektori süstimist, võimaldades optimaalset ja stabiilset viirusinfektsiooni (Wallace et al. 2008). Transgeeni ekspressioon hiire liikide tipudes 10i päevadel ja jääb kõrgeks vähemalt 6 kuu jooksul (Winstanley et al. 2007). Katse lõpus olid loomad transkardiaalselt perfuseeritud ja NAc lõigud immunoloogiliselt töödeldi GFP jaoks (1: 20K; küüliku anti-GFP antikeha; Molecular Probes), kasutades ABC-peroksidaas-DAB reaktsiooni (nagu eespool kirjeldatud) histoloogiliselt. kontrollida süstekohad, kasutades GFP-d markerina (Täiendav joonis 4). AFosB ja AJunD vektorid sisaldavad ka segmenti, mis ekspresseerib GFP-d, mis on eraldatud sisemise ribosomaalse sisenemiskohaga, võimaldades GFP visualiseerimisega kõigis loomades süstekoha kontrollimist. Statistilistesse analüüsidesse kaasati ainult süstekohtadega loomad ja viiruse levik ainult NAc-le. Viiruse levik piirdus üldjuhul ainult osaga NAc ja ei levinud rostraal-caudally kogu tuumas. Veelgi enam, viiruse levik piirdus peamiselt koorega või südamikuga. Samas ei mõjutanud süstekohtade varieerumine ja levik NAc-s mõju käitumisele. Lõpuks ei mõjutanud GFP süstid seksuaalset käitumist ega seksuaalse käitumise soodustamist, võrreldes eelmiste uuringute mittekirurgiliste loomadega (Balfour et al. 2004).

Seksuaalne käitumine

Kolm nädalat pärast viirusvektorite kohaletoimetamist ühinesid ühe ejakulatsiooniga (või 1-tunniga) loomad 4-i järjestikuste päevaste paaritamisetappidega, et saada seksuaalset kogemust (kogemuste istungid) ja testiti seejärel pikaajalise kogemuse esilekutsumiseks seksuaalse käitumise hõlbustamiseks 1 ja 2 nädalat (testiseansid 1 ja 2) pärast lõppkokkuvõtet. Seksuaalse käitumise parameetrid registreeriti kõigi ülalpool kirjeldatud paaritumise ajal. Statistilisi erinevusi kõigi parameetrite vahel iga paaritumise ajal võrreldi gruppide vahel ja nende vahel, kasutades kahesuunalist korduvmõõtmist ANOVA-sid (tegurid: ravi ja paaritumine) või ühesuunalist ANOVA-d (ejakulatsiooni latentsus, monteerimiste arv ja intromaadid; faktor: ravi või paaritumine) sessioon), millele järgnesid Fisher LSD või Newman-Keuls testid post-hoc võrdluste jaoks 0.05i olulisuse tasemel. Täpsemalt võrreldi seksuaalse kogemuse hõlbustavat mõju paaritamisparameetritele kogemuste seansi 1 (naiivne) ja iga 2i, 3i või 4i kogemuste vahel, samuti katseliste rühmade vahel igas kogemusetapis. Lisaks võrreldi ravi (vektori) mõju seksuaalse käitumise pikaajalisele soodustamisele, võrreldi parameetreid 4i ja seansi 1 ja 2 kogemuste vahel igas ravirühmas ning võrreldi katserühmade vahel iga testiseansi jooksul.

Mine:

TULEMUSED

Seksuaalne kogemus põhjustab ΔFosB akumulatsiooni

Esialgu teostati seksuaalselt kogenud meestel ΔFosB akumulatsiooni kogu ajus poolkvantitatiivne uurimine võrreldes seksuaalselt naiivsete kontrollidega. Kokkuvõte üldistest järeldustest on esitatud Tabel 1. AFosB-IR analüüsi täiendati, määrates AFosB-IR rakkude arvu mitmetes limbilistega seotud aju piirkondades, kasutades standardseid analüüsialasid. Joonis 1 demonstreerib DAB-Ni-i representatiivseid kujutisi, mis värvivad seksuaalselt naiivsete ja kogenud loomade NAc-d. Märkimisväärne ΔFosB ülesreguleerimine leiti mPFC alampiirkondades (Joonis 2A), NAc tuum ja kest (2B), caudate putamen (2B) ja VTA (2C). NAc-s esinesid märkimisväärsed erinevused kõigis NAc südamiku ja kestade rostraalsetes ja tasakaalu tasemetes ning Joonis 2 keskmine on kõigi rostro-caudalide tasemete keskmine. Seevastu ei täheldatud ΔFosB-IR märkimisväärset suurenemist hüpotalamuse mediaalse eeloptilise tuumaga (NNS: keskmine 1.8 +/− 0.26; ENS: keskmine 6.0 +/− 1.86).

Joonis 1    

 

Esindavad kujutised, mis näitavad ΔFosB-IR-rakke (must) naiivse sugu (A) NA-s ja kellel ei ole sugu (B) rühmi. aco: anterior commissure Skaala riba näitab 100 µm.
Joonis 2     

AFosB-IR rakkude arv: A. infralimbic (IL), prelimbiline (PL) ja eesmine cingulate cortex (ACA) alampiirkonnad mediaalse prefrontaalses ajukoores; B. Nucleus accumbens südamik ja kest ning caudate putamen (CP); C. Rostraalsed, keskmised, caudal ja saba ...

Seksuaalne kogemus nõrgendab paaritumist põhjustatud c-Fos

Seksuaalse kogemuse mõju ΔFosB tasemetele NAc-s kinnitati fluorestsentsvärvimistehnikate abil. Lisaks analüüsiti seksuaalse kogemuse mõju c-Fose ekspressioonile. Joonis 3 demonstreerib kõikide eksperimentaalsete rühmade (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES) ΔFosB- (roheline) ja c-Fos (punane) -IR rakkude representatiivseid kujutisi. Seksuaalne kogemus suurendas oluliselt ΔFosB ekspressiooni NAc tuumas (Joonis 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) ja kest (Joonis 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Seevastu 1i tund enne paaristamist ei mõjutanud ΔFosB ekspressiooni (Joonis 4A, C) ning ei leitud vahet vahet enne perfusiooni seksuaalse kogemuse ja paaritumise vahel. Enne perfusiooni toimus paaritumise üldine mõju c-Fose ekspressioonile nii NAc tuumas (Joonis 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) ja kest (Joonis 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Veelgi enam, NAc tuumas tuvastati seksuaalse kogemuse üldine mõju (Joonis 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) ja kest (Joonis 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) ja NAc tuumas tuvastati interaktsioon seksuaalse kogemuse ja paaritumise vahel enne perfusiooni (F1,15 = 6.5; p = 0.022), kusjuures suundumus kestas (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post hoc analüüsid näitasid, et seksuaalselt naiivunud meeste südamikus ja kestas on paaritumist põhjustatud c-Fos-i ekspressioon (Joonis 4B, D). Seksuaalselt kogenud meestel ei suurenenud ka c-Fos NAc südamikus (Joonis 4B) ja kesta puhul oluliselt nõrgenenud (Joonis 4D). Seega põhjustas seksuaalne kogemus paaritumise indutseeritud c-Fose ekspressiooni vähenemist. P-väärtused spetsiifiliste paariviisiliste võrdluste jaoks on toodud joonistel.

Joonis 3     

Esindavad kujutised, mis näitavad ΔFosB (roheline) ja c-Fos (punane) NAc-s igas katserühmas. Skaala riba näitab 100 µm.
Joonis 4     

Seks kogemus põhjustas ΔFosB ja paaritumise indutseeritud c-Fos. FosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) või c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) immunoreaktiivsete rakkude arv igas rühmas: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) või ES (n = 4). Andmed on väljendatud ...

Seksuaalse kogemuse mõju paaritumise indutseeritud c-Fose tasemetele ei piirdunud NAc-ga. Samasuguse c-Fos ekspressiooni nõrgenemist täheldati seksuaalselt kogenud loomadel ACA-s võrreldes seksuaalselt naiivsete kontrollidega. Seksuaalne kogemus mõjutas oluliselt ACAB-i ekspressiooni ACA-s (Joonis 4E: F1,15 = 154.2; p <0.001). Enne perfusiooni paaritumine ei mõjutanud ΔFosB ekspressiooni (Joonis 4C), kuid oluliselt suurenes c-Fos (Joonis 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) ACA-s. Pealegi vähenes paaritumise põhjustatud c-Fos-i ekspressioon ACA-s seksuaalse kogemuse tõttu oluliselt (Joonis 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). C-Fos-i ekspressioonile tuvastati seksuaalse kogemuse ja paaritumise vaheline kahepoolne koostoime enne perfusiooni.Joonis 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). Konkreetsete paariliste võrdluste P-väärtused on toodud jooniselegendides. Lõpuks ei vähenenud oluliselt paaritumisega indutseeritud c-Fos-i ekspressioon mediaalses preoptilises tuumas (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09) - piirkonnas, kus paaritumiskogemus ei põhjustanud olulist ΔFosB ekspressiooni suurenemine, mis näitab, et paaritumise indutseeritud c-Fos ekspressiooni ei mõjutanud kõik ajupiirkonnad.

ΔFosB NAc-s vahendab seksuaalse käitumise tugevdamist

Et uurida potentsiaalset molekulaarset mehhanismi seksuaalse käitumise tugevdamiseks, mida demonstreerib seksuaalse käitumise hõlbustamine kogemuste poolt, määrati ΔFosB tasemete kohaliku manipuleerimise ja selle transkriptsioonilise toime mõju. Nelja järjestikuse kogemuse ajal toimunud seksuaalne kogemus mõjutas oluliselt latentsust (Joonis 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), intromission latency (Joonis 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) ja ejakulatsiooni latentsus (Joonis 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP kontrollloomadel ilmnes eeldatav kogemuste põhjustatud seksuaalkäitumise hõlbustamine ja näidati tunduvalt madalamaid latentsusi esmakordsel paigaldamisel, esimest intromissioni ja ejakulatsiooni kogemuse seansi 4 ajal võrreldes kogemuste seansiga 1 (Joonis 5A – C; vaata p-väärtuste joonist. Seda kogemust põhjustatud seksuaalkäitumise hõlbustamist täheldati ka FFosB rühmas mount- ja intromission-latentsuse jaoks, kuid ejakulatsiooni latentsuses ei täheldatud olulist erinevust (Joonis 5A – C). Vastupidiselt sellele näitasid AJunD loomad kummalist hõlbustamist; vaatamata sellele, et korduvate paaritamistsüklite ajal vähenes kinnitusvahendite, intromissioonide ja ejakulatsioonide latentsus, ei saavutanud ükski neist parameetritest statistilise tähtsuse, kui võrrelda kogemusi 1 ja 4 (Joonis 5A – C). Iga kogemuse seansi grupi võrdluste vahel näitavad, et ΔJunD-l oli kogemuste istungite ajal ΔFosB-ga ja GFP-ga võrreldes palju pikem latentsus, et siseneda, siseneda ja ejakuleerida.Joonis 5A – C). Lisaks mõjutas nii seksuaalne kogemus kui ka ravi kopulatsiooni efektiivsust (Joonis 5F: seksuaalne kogemus, F1,12 = 22.5; p <0.001; ravi, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB-isastel oli kogemuste seansil 4 võrreldes kogemuste seansiga 1 suurenenud kopulatsioonitõhusus (Joonis 5F). Lisaks sellele olid ΔFosB loomadel kogemuste seansipäeva 4 ajal ejakulatsioonile eelnenud aja jooksul tunduvalt vähem kinnitusi, võrreldes kogemuste seansiga 1 (Joonis 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004) ja et ΔJunD-isastel oli ejakulatsioonile eelnevalt oluliselt rohkem kinnitusi, vähendades seega oluliselt kopulatsiooni efektiivsust kui ükskõik kummast teisest rühmast (Joonis 5D ja F). Seega näitasid GFP ja ΔFosB loomad kogemuste indutseerimist seksuaalse käitumise ja seksuaalse käitumise algatamiseks, samal ajal kui ΔJunD loomad seda ei teinud.

Joonis 5     

GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) ja ΔJunD (n = 9) loomade seksuaalne käitumine: mount latentsus (A), intromission latency (B), ejakulatsiooni latentsus (C), monteerimiste arv (D), intromioonide arv (E) ja kopulatsiooni efektiivsus (F). Andmed on väljendatud ...

Et testida hüpoteesi, et ΔFosB ekspressioon on elulise seksuaalse käitumise hõlbustamise pikaajalise ekspressiooni seisukohalt kriitiline, testiti loomi 1 nädalal (testiseanss 1) ja 2 nädalaid (testiseanss 2) pärast lõppkokkuvõtet. Tõepoolest, nii GFP kui ka ΔFosB gruppides säilitati hõlbustatud seksuaalkäitumine, kuna ükski käitumuslikest parameetritest ei erinenud testiseansside 1 või 2 ja lõpliku kogemuse seansi 4 vahel GFP ja ΔFosB gruppides (Joonis 5A – C; välja arvatud ejakulatsiooni latentsus ja kopulatsioonitõhusus testiseansil 1 ΔFosB loomadele). Kõigi seksuaalse käitumise parameetrite puhul tuvastati mõlemas testiseansis olulisi erinevusi ΔJunD loomade ja GFP või ΔFosB gruppide vahel.Joonis 5A – F). Rühmade vahel või nende vahel ei täheldatud erinevusi, kui võrrelda võrdlustulemuste, PEI või ejakulatsiooniga loomade protsentide arvu (100% meestest kõigis nelja paaritumise ajal ejakulatsiooniga rühmades).

Mine:

ARUTLUS

Praegune uuring näitas, et seksuaalne kogemus põhjustab ΔFosB kogunemist mitmetesse limbilistega seotud aju piirkondadesse, sealhulgas NAc tuuma ja kestaga, mPFC, VTA ja caudate putamen. Lisaks nõrgendas seksuaalne kogemus c-Fose paaritumist põhjustatud ekspressiooni NAc-s ja ACA-s. Lõpuks näidati, et ΔFosB NAc-s on kriitilise tähtsusega paaritumise hõlbustamisel seksuaalse kogemuse omandamisel ja kogemuste poolt põhjustatud seksuaalse käitumise hõlbustamise pikaajalisel väljendamisel. Täpsemalt, AFosB-vahendatud transkriptsiooni vähendamine nõrgestas kogemuste poolt põhjustatud seksuaalse motivatsiooni ja jõudluse hõlbustamist, samal ajal kui ΔFosB üleekspressioon Riiklik büroo põhjustas seksuaalkäitumise tõhustamist seksuaalsete jõudude suurenemise ja vähem kogemuste osas. Üheskoos toetavad praegused leiud hüpoteesi, et ΔFosB on seksuaalse kogemuse poolt põhjustatud pikaajalise neuraalse ja käitumusliku plastilisuse kriitiline molekulaarne vahendaja.

Praegused leiud pikendavad varasemaid uuringuid, mis näitasid, et suguüritustel indutseeritud ΔFosB on NAc-s isastel rottidel (Wallace et al. 2008) ja naiste hamstrid (Hedges et al. 2009). Wallace et al. (2008) näitas, et rAAV-ΔFosB üleekspressioon NAc-s suurendas seksuaalselt naiivsete loomade seksuaalset käitumist esimese paaritumise ajal, mida tõendab ejakulatsiooni vähenemine ja ejakulatsioonijärgsete intervallide lühenemine, kuid neil polnud mõju seksuaalselt kogenud meestele (Wallace et al. 2008).

Seevastu näitas käesolev uuring, et esimesel katsel, kuid mitte seksuaalse kogemuse omandamisel ja pärast seda, ei ilmnenud ΔFosB üleekspressiooni mõju seksuaalselt naiivsetele meestele. AFosB üleekspressorid näitasid suurenenud seksuaalset jõudlust (suurenenud kopulatsiooni efektiivsus) võrreldes GFP loomadega.

Lisaks testiti praeguses uuringus FosB rolli, blokeerides ΔFosB-vahendatud transkriptsiooni, kasutades AJunD ekspresseerivat viirusvektorit. OsFosB ekspressiooni kogemuse põhjustatud suurenemise ennetamine pärssis seksuaalse motivatsiooni (suurenenud mount- ja intromission-latentsus), samuti seksuaalse esinemise (suurenenud ejakulatsiooni latentsus ja monteerimiste arv) ja järgneva pikaajalise väljendunud seksuaalse käitumise väljendumist.

Seega on need andmed esimesed, mis näitavad ΔFosB kohustuslikku rolli seksuaalse käitumise kogemuste põhjustatud hõlbustamise omandamisel. Veelgi enam, need andmed näitavad, et ΔFosB on samuti kriitiliselt seotud kogemuste põhjustatud hõlbustatud käitumise pikaajalise ekspressiooniga. Me pakume, et see hõlbustatud käitumise pikaajaline väljendus kujutab endast loomuliku tasu mälu vormi, seega on NAc-s ΔFosB tasu mälu vahendaja. Seksuaalne kogemus suurendas ka ΔFosB tasemeid VTA ja mPFC-s, piirkondades, mis on seotud tasu ja mäluga (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Tulevased uuringud on vajalikud selleks, et selgitada ΔFosB ülesreguleerimise võimalikku tähtsust nendes piirkondades tasu mälu jaoks.

ΔFosB ekspressioon on väga stabiilne, seega on sellel suur potentsiaal aju püsivate kohanduste molekulaarse vahendajana pärast kroonilisi häireid (Nestler et al. 2001). On näidatud, et ΔFosB suureneb NAc-s järk-järgult mitme kokaiini süstimise korral ja kestab kuni mitu nädalat (Loodan et al. 1992; Loodan et al. 1994). Need muutused NAc ΔFosB ekspressioonis on seotud ravimite tasustamise sensibiliseerimisega ja sõltuvusega (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). Seevastu ΔFosB rolli loomuliku tasu vahendamisel on mõistetud. Hiljutised tõendid näitavad, et ΔFosB induktsioon NAc-s on seotud loodusliku tasuga. ΔFosB tasemed suurenevad NAc-s sarnaselt sahharoosi tarbimisele ja ratta jooksmisele. AFosB üleekspressioon striatumis, kasutades rottidel bitransgeenseid hiiri või viirusvektoreid, suurendab sahharoosisisaldust, toidu motivatsioon ja spontaanne rataste liikumine (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Praegused andmed lisavad oluliselt nendele aruannetele ja toetavad veelgi arusaama, et ΔFosB on kriitiline vahendaja tasu tugevdamiseks ja looduslikuks tasu mäluks.

ΔFosB võib vahendada kogemuse poolt põhjustatud seksuaalse käitumise tugevdamist plastsuse indutseerimise kaudu mesolimbisüsteemis. Tõepoolest, seksuaalne kogemus põhjustab mesolimbilise süsteemi mitmeid pikaajalisi muutusi (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; Kannud et al. 2010). seksuaalselt kogenud isastel rottidel on näidatud käitumuslikku taset, tundlikku liikumisvastast reaktsiooni amfetamiinile ja täiustatud amfetamiini tasu.Kannud et al. 2010); naissoost hamstrite puhul on täheldatud ka muutust amfetamiini suhtes.Bradley & Meisel 2001). Lisaks on leitud, et dendriitrakkude arvu suurenemine ja dendriitide võllide keerukus on täheldatud pärast raseduse katkemise perioodi alates isaste rottide seksuaalsest kogemusest (Kannud et al. 2010). Käesolev uuring näitab, et ΔFosB võib olla seksuaalse kogemuse pikaajaliste tulemuste konkreetne molekulaarne vahendaja. Kokkuvõttes on ΔFosB hiljuti osutunud oluliseks dendriitiliste selgroo muutuste esilekutsumiseks vastuseks kroonilisele kokaiini manustamisele. (Dietz et al. 2009; Rägastik et al. 2010).

Ei ole selge, milline ülesvoolu neurotransmitter (id) vastutab ΔFosB indutseerimise eest NAc-s, kuid DA on pakutud kandidaadiks (Nye et al. 1995). Peaaegu kõik kuritarvitamise ravimid, sealhulgas kokaiin, amfetamiin, opiaatid, kannabinoidid ja etanool, samuti looduslikud hüved, suurendavad ΔFosB-d NAc-s (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Mõlemad kuritarvitamise ravimid ja looduslikud hüved suurendavad sünaptilist DA-kontsentratsiooni NAc-s (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). DA retseptorit sisaldavates rakkudes on näidatud ΔFosB indutseerimist narkootikumide poolt ja kokaiini poolt indutseeritud ΔFosB blokeerib D1 DA retseptori antagonistt (Nye et al. 1995). Seega eeldatakse, et DA vabanemine stimuleerib AFosB ekspressiooni ja seeläbi vahendab premeerimisega seotud neuroplastikat. Lisaks toetades ideed, et ΔFosB tasemed on DA-sõltuvad, on järeldus, et aju piirkonnad, kus seksuaalne kogemus muutis ΔFosB tasemeid, saavad tugevat dopamiinergilist sisendit VTA-st, kaasa arvatud mediaalne prefrontaalne ajukoor ja basolateraalne amygdala.

Kuid vastupidi, ΔFosB ei ole mediaalse preoptilises piirkonnas suurenenud, kuigi see piirkond saab dopamiinergilist sisendit, kuigi hüpotalamuse allikatest (Miller & Lonstein 2009). Tulevased uuringud on vajalikud selleks, et testida, kas paaritumise indutseeritud ΔFosB ekspressioon ja seksuaalse kogemuse mõju seksuaalsele motivatsioonile ja jõudlusele sõltuvad DA tegevusest. DA roll seksuaalse tasu eest isastel rottidel ei ole praegu täiesti selge (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). On piisavalt tõendeid selle kohta, et DA on naissoost naise või paaritumise ajal vabastatud NAc-st.Damsma et al. 1992) ja DA neuronid aktiveeritakse seksuaalse käitumise ajal (Balfour et al. 2004). Siiski ei takista DA-retseptori antagonisti süsteemsed süstid seksuaalse tasu poolt põhjustatud konditsioneeritud kohtade eelistust (Agmo & Berenfeld 1990) ja hüpotees, et DA on kogemuse indutseeritud paaritumise tugevdamise jaoks kriitiline, on testimata.

Samuti on ebaselge, millised on ΔFosB-i allavoolu vahendajad seksuaalsele käitumisele. On näidatud, et AFosB toimib nii transkriptsiooni aktivaatorina kui repressorina AP-1-sõltuva mehhanismi kaudu (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). On tuvastatud arvukalt sihtgeene, sealhulgas vahetu varajase geeni c-fos (Loodan et al. 1992; Loodan et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dünorfiin (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFKB allüksused (Ang et al. 2001) Ofja AMPA glutamaadi retseptori GluR2 subühik (Kelz et al. 1999). Praegused tulemused näitavad, et paaritumise indutseeritud c-Fose tasemeid vähendati seksuaalse kogemusega aju piirkondades, kus suurenenud ΔFosB (NAc ja ACA). C-Fose supressioon sõltub viimasest paaritumisest ja korduvatest paaritamistsüklitest, nagu eelmistes uuringutes, sellist vähenemist c-Fosis ei leitud isastel rottidel, keda testiti 1 nädalal pärast viimast paaritumist (Balfour et al. 2004) või pärast seksuaalset kogemust, mis koosneb ainult ühest paaritumisest (Lopez & Ettenberg 2002). Lisaks sellele on praegune järeldus kooskõlas tõenditega, et ΔFosB surub pärast kroonilist amfetamiiniga kokkupuudet c-fos geeni.Renthal et al. 2008). Kooskõlas nende leidudega vähendati korduvate kokaiinisüstide toimel mitme ägeda varajase geeni mRNA (c-fos, fosB, c-jun, junB ja zif268) indutseerimist võrreldes ägeda ravimi süstimisega (Loodan et al. 1992; Loodan et al. 1994) ja amfetamiini poolt indutseeritud c-fos pärssis pärast kroonilise amfetamiini manustamise lõpetamist (\ tJaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). C-Fose ekspressiooni allakäitumise funktsionaalne tähtsus pärast kroonilist narkootikumide ravi või seksuaalset kogemust on endiselt ebaselge ja on pakutud oluliseks homeostaatiliseks mehhanismiks, et reguleerida looma tundlikkust korduva tasu eest (Renthal et al. 2008).

Kokkuvõtteks võib öelda, et käesolev uuring näitab, et ΔFosB NAc-s mängib lahutamatut rolli seksuaalse tasu mälus, toetades võimalust, et ΔFosB on oluline üldise tasustamise tugevdamiseks ja mäluks. Käesoleva uuringu tulemused selgitavad veelkord meie arusaamist seksuaalset tasu ja motivatsiooni vahendavatest raku- ja molekulaarsetest mehhanismidest ning lisavad kirjandusele, mis näitab, et ΔFosB on oluline roll sõltuvuse arendamisel, näidates ΔFosB rolli loomulikus tasus. tugevdamine.

Mine:

Lisamaterjal

Supp joonised S1-S4 ja tabel S1-S2

Vajuta siia.(167K, pdf)
Mine:

Tänusõnad

Seda uuringut toetasid Kanada Tervishoiuuuringute Instituudide toetused LMC-le, riiklikule vaimse tervise instituudile ja Kanada Loodus- ja Inseneriuuringute Nõukogule KKP-le ja LMC-le.

Mine:

VIITED

  • Agmo A. Mees roti seksuaalne käitumine. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Berenfeld R. Emaskulatsiooni tugevdamine isasrottidel: opioidide ja dopamiini roll. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Tuumafaktor-kappaB indutseerimine kroonilise kokaiini manustamisega tuumaklundides. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuaalne käitumine ja sugudega seotud keskkonnaalased vihjed aktiveerivad isasrottidel mesolimbilise süsteemi. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Kroonilise kokkupuute mõju kokaiinile reguleerib neuronaalne valk Cdk5. Loodus. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-hüdroksüdopamiini kahjustused naissoost hamstrites (Mesocricetus auratus) kaotavad seksuaalse kogemuse sensibiliseeritud mõjud kopulatoorsetele interaktsioonidele meestega. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. C-Fose seksuaalse käitumise indutseerimine tuuma accumbensis ja amfetamiini poolt stimuleeritud lokomotoorne aktiivsus on seniste seksuaalsete kogemuste tõttu tundlik emaste Süüria hamstrite puhul. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. FosB destabiliseerimise proteasoomsest sõltuvad ja sõltumatud mehhanismid: FosB degroni domeenide identifitseerimine ja mõju DeltaFosB stabiilsusele. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chao J, Nestler EJ. Narkomaania molekulaarne neurobioloogia. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Delta FosB ja FosB-sarnaste valkude reguleerimine elektrokonvulsiivsete krampide ja kokaiiniga töötlemise teel. Molekulaarne farmakoloogia. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosB striatoorse rakutüübi spetsiifiline üleekspressioon suurendab kokaiini stimuleerimist. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Ejakulatsiooni tsentraalne reguleerimine. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuaalne käitumine suurendab dopamiini ülekandumist isaste rottide tuumas ja striatumis: võrdlus uudsuse ja liikumisega. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Maze I, mehaanik M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. ΔFosB oluline roll kokaiini reguleerimisel tuuma accumbens-neuronite dendriitrakkudel. Neuroteaduste ühing. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Meelelahutuste segamine: ülevaade ravimite mõjust inimeste käitumisele ja loomade mudelitele. Horm Behav. 2009 Ajakirjanduses.
  • Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB üleekspressioon tuumasõlmedes suurendab seksuaalset tasu naissoost Süüria hamstritel. Geenid Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Söötmine ja hüpotalamuse stimuleerimine suurendavad dopamiini käivet akumeenides. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Toiduhüvitis ja kokaiin suurendavad rakuvälist dopamiini tuumasõlmedes, mõõdetuna mikrodialüüsi abil. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB geeni oluline roll krooniliste elektrokonvulsiivsete krampide molekulaarses, rakulises ja käitumuslikus tegevuses. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokaalne geeni koputus ajus viiruse poolt vahendatud RNA interferentsi abil. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Kroonilise kokaiini abil reguleeritakse vahetu varajase geeniekspressiooni ja AP-1i seondumist roti tuumas. Proc Natl Acad Sci USA A. 1992;89: 5764-5768. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Pikaajalise AP-1i kompleksi indutseerimine, mis koosneb muutunud Fos-tüüpi valkudest ajus kroonilise kokaiini ja teiste krooniliste ravimite abil. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mees seksuaalne käitumine. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akuutsed ja kroonilised amfetamiiniravi reguleerivad erinevalt neuropeptiidi RNS-i tasemeid ja Fos-immuunreaktiivsust roti striatu neuronites. Neuroteadus. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Dopamiini dünaamiline tõus emasloomade rottidel elavdatud kopulatsiooni ajal. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Duman RS Nestler EJ. Transkriptsioonifaktori deltaFosB ekspressioon ajus kontrollib kokaiini tundlikkust. Loodus. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Kokkupuude emaste rottidega tekitab erinevusi c-fos induktsioonis seksuaalselt naiivsete ja kogenud isaste rottide vahel. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Histooni metüültransferaasi G9a oluline roll kokaiiniga indutseeritud plastilisuses. Teadus. 2010;327: 213-216. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Geeniekspressiooni ja kokaiini tasu reguleerimine CREB ja DeltaFosB poolt. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulaarne lüliti aju pikaajaliseks kohanemiseks. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Dopamiinergilised projektsioonid sünnitusjärgsete rottide keskmisele preoptilisele piirkonnale. Neuroteadus. 2009;159: 1384-1396. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkriptsiooni sidumine neuronites: rakkude vahetu varajase geeni roll. Trends Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Narkomaania molekulaarsed mehhanismid. Neurofarmakoloogia. 2004;47 Suppl 1: 24 – 32. [PubMed]
  • Nestler EJ. Kokaiini sõltuvuse neurobioloogia. Sci Practic Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Nestler EJ. Ülevaade. Sõltuvuse transkriptsioonimehhanismid: DeltaFosB roll. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: püsiv molekulaarne lüliti sõltuvuse jaoks. Proc Natl Acad Sci USA A. 2001;98: 11042-11046. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakoloogilised uuringud kroonilise FOS-ga seotud antigeeni indutseerimise kohta kokaiiniga striatumis ja tuumasõlmedes. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB reguleerib tuuma accumbensis toidu tugevdatud instrumentaalset käitumist ja motivatsiooni. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. indutseeritav, c-Jun domineeriva negatiivse mutandi aju piirkonna spetsiifiline ekspressioon transgeensetes hiirtes vähendab tundlikkust kokaiini suhtes. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB kogunevad GABAergilise raku populatsiooni ventraalse tegmentaala tagumises otsas pärast psühhostimulantravi. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. DeltaFosB indutseerimine tasuliste aju struktuuridega pärast kroonilist stressi. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indutseerimise eritunnused ajus kuritarvitamise ravimitega. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Pfaus JG. Seksuaalse soovi teed. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditsioneerimine ja seksuaalkäitumine: ülevaade. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Ülalt-alla perspektiiv dopamiini, motivatsiooni ja mälu kohta. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Kannid KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplastsus mesolimbisüsteemis, mis on indutseeritud looduslikust tasust ja sellest tulenevast tasustamise abstinensist. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB vahendab c-fos geeni epigeneetilist desensibiliseerimist pärast kroonilist amfetamiini ekspositsiooni. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Kokaiini kromatiini reguleerimise genoomide kogu analüüs näitab sirtuiinide rolli. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuaalne tasu isastel rottidel: seksuaalse kogemuse mõju ejakulatsiooni ja intromissionidega seotud konditsioneeritud kohtade eelistustele. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. DeltaFosB fosforüülimine vahendab selle stabiilsust in vivo. Neuroteadus. 2008
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. DeltaFosB stabiilsuse reguleerimine fosforüülimise teel. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Firenze TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosB mõju tuumakinnitusele on seotud loodusliku tasuga seotud käitumisega. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reguleerib rataste liikumist. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB induktsioon orbitofrontaalses ajukoores vahendab tolerantsust kokaiini poolt indutseeritud kognitiivse düsfunktsiooni suhtes. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB oluline roll morfiini toimel tuumasõlmedes. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos hõlbustavad kokaiini põhjustatud püsivate muutuste omandamist ja väljasuremist. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]