FosB valkude ja potentsiaalsete sihtgeenide diferentsiaalne väljendus sõltuvus- ja depressioonipatsientide valitud aju piirkondades (2016)

  • Paula A. Gajewski,
  • Gustavo Turecki,
  • Alfred J. Robison

Avaldatud: August 5, 2016

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355

Abstraktne

Krooniline kokkupuude stressi või uimastite tarvitamisega on seotud muutunud geeniekspressiooniga kogu kehas ja geeniekspressiooni muutused diskreetsetes ajupiirkondades arvatakse olevat paljude psühhiaatriliste haiguste, sealhulgas peamise depressiivse häire ja uimastisõltuvuse aluseks. Nende häirete prekliinilised mudelid on tõestanud muudetud geeniekspressiooni mehhanisme, sealhulgas transkriptsioonifaktoreid, kuid tõendite avaldamine nende tegurite rolli kohta inimpatsientidel on olnud aeglane. Transkriptsioonifaktor ΔFosB indutseeritakse näriliste prefrontaalses ajukoores (PFC) ja hipokampuses (HPC) vastusena stressile või kokaiinile ning arvatakse, et selle ekspressioon nendes piirkondades reguleerib nende "ülalt alla" juhtimist tasustamisskeemi, sealhulgas tuuma üle akumulaanid (NAc). Siin kasutatakse biokeemiat, et uurida FosB transkriptsioonifaktorite perekond ja nende potentsiaalsed geenisihtmärgid depressiooniga patsientide ja kokaiinisõltlaste PFC ja HPC surmajärgsetes proovides. Näitame, et ΔFosB ja muud FosB isovormid on HPC-s alareguleeritud, kuid mitte depressiooniga ja sõltuvuses olevate isikute aju PFC-d. Lisaks näitame, et ΔFosB transkriptsiooni sihtmärgid, sealhulgas GluA2, on ka kokaiinisõltlaste HPC-s alareguleeritud, kuid mitte PFC. Seega esitame esimesed tõendid FosB geeni ekspressioon inimese HPC-s ja PFC-s nendes psühhiaatrilistes häiretes ning pidades silmas hiljutisi leide, mis näitavad HPC ΔFosB kriitilist rolli näriliste õppimis- ja mälumudelites, viitavad need andmed sellele, et vähenenud ΔFosB HPC-s võib potentsiaalselt olla seotud kokaiini kroonilise kuritarvitamisega kaasnevate kognitiivsete defitsiitidega või depressioon.  

Viide: Gajewski PA, Turecki G, Robison AJ (2016) FosB valkude ja võimalike sihtgeenide diferentsiaalse ekspressiooni sõltuvus- ja depressiooniga patsientide valitud ajupiirkondades. PLOS ONE 11 (8): e0160355. doi: 10.1371 / ajakiri.pone.0160355

Toimetaja: Ryan K. Bachtell, Colorado Boulderi ülikool, Ameerika Ühendriigid

Vastatud: Veebruar 29, 2016; Vastu võetud: Juuli 18, 2016; Avaldatud: August 5, 2016

Copyright: © 2016 Gajewski jt. See on avatud juurdepääsuga artikkel, mida levitatakse Creative Commonsi litsentsi litsents, mis võimaldab piiramatut kasutamist, levitamist ja paljundamist mis tahes andmekandjal, kui algne autor ja allikas on krediteeritud.

Andmed Kättesaadavus: Kõik asjakohased andmed on paberil.

Rahastamine: Autor PAG sai palgatoetust Whitehall Fondi toetusel autor AJR-ile. Rahastajatel polnud mingit rolli uuringute kavandamisel, andmete kogumisel ja analüüsil, avaldamise otsusel ega käsikirja ettevalmistamisel.

Konkureeritavad huvid: Autorid on teatanud, et ei ole konkureerivaid huve.

Sissejuhatus

Psühhiaatriliste haiguste, nagu depressioon ja sõltuvus, molekulaar- ja ringtaseme mehhanisme ei mõisteta täielikult ning need teadmised on üliolulised uute ja paremate raviviiside ratsionaalseks väljatöötamiseks. Mitmete uuringutega on sõltuvuse ja depressiooni patogeneesis kaasatud muutused tuuma akumulatsioonide tuumades (NAc) ja ajupiirkondades, mis kontrollivad NAc funktsiooni ülevalt alla, näiteks prefrontaalses ajukoores (PFC) ja hipokampuses (HPC). nii mudelorganismides kui ka tapajärgses inimese ajus [1-5]. Paljud praegused depressiooniravi toimivad serotonergiliste ja / või dopaminergiliste signaalide kroonilise tugevdamise kaudu ja praktiliselt kõik kuritarvitamise ravimid mõjutavad NAc-s dopamiini signaalimist. Lisaks on sõltuvus ja depressioon väga kaasnevad: peaaegu kolmandikul raske depressiooniga patsientidest on ka uimastite tarvitamise häireid ja kaasuvaid haigusi, mis põhjustab suuremat suitsiidiriski ning suuremat sotsiaalset ja isiklikku kahjustust [6, 7]. Need andmed kokku võttes viitavad sellele, et mesolimbilise dopamiini ahelas ja sellega seotud struktuurides esinevad kroonilised halvad kohandumised võivad olla nii sõltuvuse kui ka depressiooni taustal ja et geeniekspressiooni muutused mängivad tõenäoliselt olulist rolli nendes halvasti kohanemistes.

Kuna nii depressioon kui ka sõltuvus arenevad aja jooksul ja võivad olla seotud kroonilise kokkupuutega stressi ja / või kuritarvitamise ravimitega [8, 9] ja kuna tüüpilised antidepressandid, mis on suunatud serotonergilisele ja dopaminergilisele signaaliülekandele, vajavad nädalatepikkust ravi, et olla efektiivne [10], näib tõenäoline, et nende haiguste patogenees ja nende ravimehhanismid võivad olla seotud pikaajaline muutused geeniekspressioonis. Sellised muutused võivad tuleneda geenistruktuuri epigeneetilistest modifikatsioonidest ja tõendusmaterjal on DNA metüülimise ja histooni modifikatsioonide võtmerolli olemasolu nii sõltuvuse kui ka depressiooni korral [11-14]. Kuid see ei välista transkriptsioonifaktorite potentsiaalset rolli nendes protsessides, eriti krooniliste neuronaalsete aktivatsioonide poolt indutseeritud stabiilsed transkriptsioonifaktorid. Üks selline transkriptsioonifaktor on ΔFosB [1, 15, 16], mis on toodetud FosB geen. Erinevalt täispikast FosB valgust on ΔFosB märkimisväärselt stabiilne võrreldes teiste kohesete varajaste geeniproduktidega (poolväärtusaeg ajus kuni 8 päeva) [17]), peamiselt kahe degroni domeeni kärbumise tõttu c-otsas [18], samuti stabiliseerivat fosforüülimist Ser27-is [19, 20]. ΔFosB indutseeritakse stressi kaudu kogu näriliste ajus, kaasa arvatud NAc ja sellega seotud struktuurid [21-23], antidepressandid [22] ja kuritarvitamise ravimid [24]. Lisaks seostavad näriliste mudelid ΔFosB ekspressiooni NAc-ga mõlemas sõltuvuses [20, 25] ja depressioon [26, 27] ja hiljutised uuringud näitavad ΔFosB rolli nendes haigustes PFC-s [21] ja HPC [28]. NAc-s soodustab ΔFosB ekspressioon näriliste psühhomotoorsete ainete suuremat psühhomotoorset sensibiliseerimist ja nendest premeerimist [20, 25]. NAc FFosB toimib ka hiire kroonilise depressiooni sotsiaalse depressiooni mudeli jaotusfaktorina ja selle ekspressioon on vajalik antidepressandi funktsiooniks [26]. Seevastu ΔFosB ekspressioon PFC-s soodustab hiirtel vastuvõtlikkust sotsiaalsele stressist tingitud stressile [21], mis viitab sellele, et ΔFosB mängib premeerimisahelas ja seda innerveerivates ajupiirkondades väga erinevaid rolle. Lõpuks indutseeritakse ΔFosB hiire dorsaalses HPC-s õppimise teel ja selle funktsioon on vajalik normaalse ruumimälu moodustamiseks [28], pakkudes võimalikku mehhanismi kognitiivse defitsiidi tekkeks, mis sageli kaasneb kroonilise ravimiga kokkupuutumise ja / või depressiooniga [29-31].

Kuna ΔFosB on transkriptsioonifaktor, eeldatakse tavaliselt, et see avaldab oma bioloogilisi toimeid valitud sihtgeenide ekspressiooni moduleerimise kaudu ja paljud neist sihtgeenidest on seotud depressiooni ja sõltuvusega. ΔFosB reguleerib α-amino-3-hüdroksü-5-metüül-4-isoksasoolpropaanhappe (AMPA) ja N-metüül-D-aspartaadi (NMDA) -tüüpi glutamaadi retseptorite ekspressiooni mitmete alaühikutega [25, 26, 32] ja need retseptorid on otseselt seotud sõltuvusega [33, 34], depressioon [35, 36] ja antidepressandi funktsioon [36, 37]. ΔFosB reguleerib ka signaalmolekulide, näiteks kaltsiumist / kalmoduliinist sõltuva proteiinkinaasi II α (CaMKIIα) ekspressiooni, mis on seotud paljude psühhiaatriliste häiretega [38] ja oleme näidanud, et see CaMKII ekspressiooni reguleerimine hiirtel põhjustab kokaiini suhtes psühhomotoorse ülitundlikkuse [20] ja antidepressantfunktsioon [27]. Lisaks reguleerib ΔFosB tsükliinist sõltuva kinaasi 5 (cdk5) ekspressiooni [39], mille esilekutsumine striaatumis on tingitud psühostimulantide kokkupuutest ja stressist [40-42] ja reguleerib kokaiini psühhomotoorseid ja motiveerivaid reaktsioone [43]. Seega on näriliste mudelites kindel tõendusmaterjal, et ΔFosB indutseerimine stressi, antidepressantide ja kuritarvitamisega mitmel ajupiirkonnal võib reguleerida depressiooni ja sõltuvusega seotud käitumist, moduleerides valitud sihtgeenide ekspressiooni diskreetsetes ajupiirkondades.

Ehkki sõltuvuse ja depressiooni prekliinilised mudelid on olnud üsna viljakad, on hädavajalik toetada loommudelite järeldusi inimkatsete tõenditega, kui eeldame potentsiaalsete molekulaarsete mehhanismide tõlkimist uudseteks ravivõimalusteks. Oleme varem näidanud, et ΔFosB on inimese kokaiinisõltlaste NAc-s ülereguleeritud [20] ja depressioonis inimeste NAc sisaldus vähenenud [26]. Siiski: FosB geeniprodukti ekspressiooni HPC ja PFC-s, NAc neuronaalse aktivatsiooni kriitiliste regulaatoritena, ei ole inimese ajus varem uuritud, samuti ei ole potentsiaalse ΔFosB sihtgeeni ekspressiooni reguleerimine reguleeritud. Seetõttu uurisime FosB geeniproduktid, samuti potentsiaalsete ΔFosB sihtgeenide ekspressioon peamise depressioonihäire või kokaiinisõltuvuse all kannatavate patsientide PFC-s ja HPC-s.

Materjalid ja meetodid

Inimproovid

Surmajärgsed inimese ajukoed saadi Douglas Bell-Canada Brain Bankist (Douglase vaimse tervise ülikooli instituut, Montreal, Quebec, Kanada). Teavet inimeste kokaiinisõltlaste, depressiooniga patsientide ja vastavate kontrollide kohta narkootikumide tarvitamise kohta leiate veebisaidilt Tabel 1. Kudede konserveerimine toimus põhimõtteliselt kirjeldatud viisil [44]. Kui aju ekstraheeritakse, asetatakse aju märjale jääle vahtpolüstürooli kasti ja kiirustatakse Douglas Bell-Kanada ajupanga rajatiste juurde. Poolkerad eraldatakse aju, ajutüve ja väikeaju keskel sagitaalse lõikega. Veresooned, käbinääre, koroidne plexus, pool väikeaju ja pool ajutüve eraldatakse tavaliselt vasakust ajupoolkerast, mis seejärel lõigatakse enne külmutamist koronaalselt 1 cm paksusteks viiludeks. Viimane pool väikeaju lõigatakse enne külmutamist sagitaalselt 1cm paksusteks viiludeks. Koed külmutatakse kiirusel 2-metüülbutaanis temperatuuril -40 ° C ~ 60 sek. Kõiki külmunud kudesid hoitakse pikaajalisel hoidmisel kilekottides temperatuuril -80 ° C eraldi. Keskkonna temperatuuri kontrollimiseks eraldatakse konkreetsed ajupiirkonnad külmunud koronaalviiludest roostevabast terasest plaadil kuiva jääga. PFC proovid pärinevad Brodmanni piirkonnast 8 / 9 ja HPC proovid võetakse hipokampuse moodustumise keskmest (Joon 1).

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (1.61MB)

originaalpilt (1.59MB)

Joonis 1. Inimese ajuproovide lahutamispiirkondade skeem.

Joonised tähistavad inimese aju eesmist (A) ja tagumist (B) koronaalseid lõike, mida kasutatakse PFC proovide ja (C) HPC proovide lahkamiseks. Punased kastid tähistavad lahutamispiirkondi. SFG: parem eesmine gyrus; MFG: eesmine keskmine gyrus; IG: saareline gyrus; FuG: fusiform gyrus.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g001

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (529KB)

originaalpilt (1.02MB)

Tabel 1. Ainesõltuvus, toksikoloogia ja antidepressantide kasutamine inimestel kokaiinisõltlastel, depressiooniga patsientidel ja vastavates kontrollrühmades.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t001

Hiire proovid

Uuringus järgiti juhendis kirjeldatud juhiseid Laborite loomade hooldamise ja kasutamise juhend, kaheksas väljaanne (laboratoorsete loomade ressursside instituut, 2011). Enne mis tahes katsetamist kiitis Michigani osariigi ülikooli institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee kõik katseprotseduurid heaks. Kui mõnel loomal pole peibutamist, nakatumist, tõsist kehakaalu langust või liikumatust, siis loom tapetakse. Ükski loom ei vajanud selles uuringus enne eksperimentaalset lõpp-punkti sellist eutaneerimist. Pärast rajatise saabumist paigutati 7-i nädala vanused C57BL / 6 isased hiired (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA) rühmas 4 puuri kohta kolooniaruumis, mis oli seatud konstantsele temperatuurile (23 ° C) vähemalt 3 päeva enne katsetamist 12 h valguse ja pimeduse tsüklis koos ad libidum toit ja vesi. Hiirtele tehti intraperitoneaalse (ip) süsti kaudu krooniline (7 päeva) või äge (ühe süstiga) kokaiin (15 mg / kg) või steriilne soolalahus (0.9% soolalahus) ja surmati emakakaela dislokatsiooni teel tund pärast viimast süstimist. Kude koristati kohe (Joon 2) või erinevatel ajahetkedel pärast ohverdamist (Joon 3).

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (649KB)

originaalpilt (878KB)

Joonis 2. Inimese ja hiire FosB valkude võrdlus.

(A) Hipokampuse valkude Western blot FosB antikehaga paljastab inimese kokaiinisõltlasest sõltuva HPC proovis mitu täiendavat riba, võrreldes kroonilise kokaiiniga ravitud (15 mg / kg 7 päeva jooksul) hiire HPC-ga. Uudsed ribad on nähtavad 20 kDa, 23 kDa (valge nool) ja 30 kDa (must nool) korral. (B) Inimproovide iga riba valkude ekspressiooni korrelatsiooni ja lineaarse regressiooni graafikud iga inimese proovi jaoks pärast surmajärgset intervalli (aeg surma ja aju külmumise vahel). Punktiirjooned tähistavad 95% usaldusvahemikku; ükski lineaarne regressioonikalle ei erinenud 0-ist märkimisväärselt.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g002

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (214KB)

originaalpilt (317KB)

Joonis 3. FosB valkude ekspressioon hiire HPC-s pärast pikemaid surmajärgseid intervalle.

Hiirte ajud, millele tehti äge kokaiinisüst (15 mg / kg ip), jäeti alles kohapealne 0, 1 või 8 tundideks pärast ohverdamist enne HPC koristamist. Western blot näitab 23 kDa riba moodustumist 8 hr loomadel, kuid ei näita teisi ribaid, mis leiti inimese HPC proovidest.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g003

Western blotting

Hiire ajud ekstraheeriti kiiresti jääl ja viilutati seejärel 1 mm lõikudeks ja dorsaalne hipokampus eemaldati 12 mõõturiga ja külmutati kohe kuival jääl. Nii inimese kui ka hiire proovid homogeniseeriti kerge ultrahelitöötlusega modifitseeritud RIPA puhvris (10 mM Tris-alus, 150 mM naatriumkloriid, 1 mM EDTA, 0.1% naatriumdodetsüülsulfaat, 1% Triton X-100, 1% naatriumdeoksükolaat, pH 7.4, proteaasi ja fosfataasi inhibiitorid [Sigma Aldrich]). Kontsentratsiooni mõõdeti DC Protein Assay (BioRad) abil ja geeliproovid normaliseeriti koguvalgu suhtes. Valgud eraldati 4 – 15% polüakrüülamiidi gradiendigeelidel (Criterion System, BioRad) ja Western blot-analüüs tehti kemoluminestsentsi abil (SuperSignal West Dura, Thermo Scientific). Koguvalgu määramiseks kasutati Swift Membrane Stain (G Biosciences) ja valke kvantifitseeriti ImageJ tarkvara (NIH) abil. Primaarseid antikehi kasutati FosB isovormide tuvastamiseks (5G4; 1: 500; raku signaliseerimine, 2251), GluA2 / 3 (1: 1,000; Millipore, 07 – 598), CaMKIIX, 1, 1,000: 05: 532: 5; (1: 1,000; Santa cruz, sc-173), GAPDH (1: 20,000; raku signalisatsioon, 21185).

Statistika

Kõik statistilised analüüsid viidi läbi tarkvarapaketi Prism 6 (GraphPad) abil. Kas ekspressiooni ekspressiooniks kasutati lineaarset regressioonanalüüsi FosB geeniproduktid korreleerusid surmajärgse intervalliga. Testiti iga lineaarse regressioonisirge kalde olulist erinevust nullist. Õpilaste t-teste kasutati kontroll- ja kokaiinisõltlastest isikute paaride võrdlemiseks (näidatud jaotises Tulemused, kus on antud t väärtus). Ühesuunalisi ANOVA-sid kasutati kontrollide, depressioonis isikute, kellel pardal antidepressandid, või depressioonis isikute, kellel antidepressante ei olnud, mitmekordseks võrdlemiseks (näidatud tulemustes, kus on antud F väärtus). Ühesuunalistele ANOVAdele järgnes Tukey post hoc test. P <0.05 peeti oluliseks.

Tulemused

Meie hiljutised uuringud näitavad, et FosB Aju geen, täispikk FosB (~ 50 kDa), ΔFosB (~ 35 – 37 kDa) ja Δ2ΔFosB (~ 25 kDa), indutseeritakse diferentseeritult hiire aju premeerimisega seotud piirkondades vastusena stressile ja antidepressantidele [22] ja muud Fos-iga seotud antigeenid, mida tõenäoliselt produtseerib FosB geeni on täheldatud ka hiire ajus [45-47]. Seetõttu otsisime kõigepealt, kas inimese aju väljendab mustrit FosB geenitooted, mis sarnanevad hiire ajus leiduvatega. Võrdlesime inimese kokaiinisõltlase tüüpilist HPC proovi (Tabel 2) kroonilise kokaiini saanud hiire HPC-st (15 mg / kg, ip 7 päeva jooksul). Kõik kolm suurt FosB geeniprodukte leiti nii hiire kui inimese ajukoes, kuid inimese proovis täheldati hiirega võrreldes täiendavaid ribasid (Joonis 2A). Kõige silmatorkavamalt esinesid inimproovides ribad ~ 30 kDa, ~ 23 kDa ja ~ 20 kDa, kuid neid ei täheldatud hiireproovides. Me postuleerisime, et need ribad võivad esindada proteolüütilisi tooteid, mis tulenevad FosB või ΔFosB lagunemisest, mis on tingitud pikenenud surmajärgse intervalli (PMI) tulemusest meie inimproovides (Tabel 2). Nende uudsete ribade intensiivsuse ja PMI (Joonis 2B) või PMI ja peamiste geeniproduktide FosB, ΔFosB ja Δ2ΔFosB (Joonis 2B), st ühelgi regressioonisirgel ei olnud nullist märkimisväärselt erinevat kalle. Seega ei pruugi need uued ribad olla proteolüütilised lagunemissaadused, mis tulenevad pikaajalisest ajast surma ja koe külmumise vahel.

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (279KB)

originaalpilt (504KB)

Tabel 2. Inimeste kokaiinisõltlaste, depressiooniga patsientide ja vastavate kontrollrühmade demograafia.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t002

Selle edasiseks uurimiseks andsime hiirtele ühekordse kokaiini (15 mg / kg, ip) või soolalahuse süsti ja ohverdasime need tund hiljem emakakaela dislokatsiooni teel. Seejärel jäeti ajud alles kohapealne null, üks või kaheksa tundi enne proovide võtmist. Märkisime mõned lagunemissaadused (Joon 3), kõige silmatorkavam oli ~ 23 kDa, kuid saadud muster ei jäljendanud seda, mida nähti inimese HPC proovides. Need andmed kokku viitavad sellele, et inimese ajus on täiendavaid Fos-iga seotud antigeene, mis võivad olla uudsed FosB geeniproduktid ja tõenäoliselt pole need FosB või ΔFosB proteolüüsi tulemus.

Järgmisena otsisime, kas kokaiinisõltuvus, ravimata depressioon või depressioon koos antidepressantide kasutamisega on seotud muutustega FosB geeniproduktid inimese HPC-s või PFC-s. Patsiendid ja kontrollisikud valiti nii, et keskmises vanuses, soos, aju pH-s ega PMI-s ei esinenud olulisi erinevusiTabel 1). Kokaiinist sõltuvate patsientide proovides ei tuvastanud Western blot mingeid erinevusi FosB isovormi ekspressioonis PFC-ga võrreldes kontrollidega (Joonis 4A ja 4B). Kuid me täheldasime kokaiinisõltuvate isikute HPC märkimisväärset langust täispikas FosB-s (t(35) = 2.67, p = 0.012), ΔFosB (t(31) = 2.81, p = 0.009), aga ka kõigis kolmes uudses sagedusalas 30 kDa (t(34) = 2.71, p = 0.011), 23 kDa (t(15) = 2.7, p = 0.016) ja 20 kDa (t(13) = 2.43, p = 0.031) ja trend Δ2ΔFosB (t(29) = 2.03, p = 0.052). Sarnaselt ei esinenud depressiooni all kannatavate patsientide proovides erinevusi FosB isovormi ekspressioonis PFC-s, samas kui HPC näitas täispika FosB (F (2,35) = 1.98, p = 0.048) ja ΔFosB ( F (2,30) = 1.38, p = 0.027), samuti ribades 23 kDa (F (2,21) = 2.05, p = 0.022) ja riba 20 kDa (F (2,18) = 0.97, p = 0.028) (Joonis 4C ja 4D). Need andmed viitavad sellele FosB geeni ekspressioon HPC-s väheneb mitmetes psühhiaatrilistes tingimustes, samal ajal kui PFC ekspressioon ei muutu.

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (1.19MB)

originaalpilt (1.98MB)

Joonis 4. FosB valkude ekspressioon inimese kokaiinisõltuvuse ja depressiooniga patsientide HPC-s ja PFC-s.

(A) FosB valkude Western blot inimese kokaiinisõltlaste HPV-st ja PFC-st (Coc) ja kontrollid (Con). (B) Kvantifitseerimine näitab kokaiinist sõltuvat langust paljudes FosB valkudes HPC-s, kuid mitte PFC-s (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) FosB valkude Western blot HPC-st ja PFC-st inimeste depressioonihaigetel (Dep) või antidepressantidel (Dep + AD) ja kontrollidel (Con). (D) Kvantifitseerimine näitab depressioonist sõltuvat langust mõnes FosB valgus HPC-s, kuid mitte PFC-s (*: p <0.05). Vearibad näitavad keskmist +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g004

Otseseid tõendeid ΔFosB transkriptsiooni regulatsiooni geenisihtmärkide kohta HPC-s on vähe, ainult hiirtel pärast elektrokonvulsiooni stimuleerimist on kinnitatud ainult tsükliinist sõltuv proteiinkinaas 5 (cdk5) [39]. Kuid paljudest teistest geenidest on teada aafosB transkriptsiooni regulatsiooni sihtpunktid teistes ajupiirkondades, eriti NAc-s. Need hõlmavad mitmeid geene, mis on olulised hipokampuse rakkude funktsioneerimiseks ja sünaptiliseks plastilisuseks, näiteks GluA2 [48] ja CaMKII [20]. Seetõttu kasutasime Western bloti abil ΔFosB potentsiaalsete geenieesmärkide taseme hindamist kokaiinisõltuvate ja depressiooniga patsientide HPC-s ja PFC-s. Me ei tuvastanud kokaiinisõltuvate indiviidide PFC-s olulisi erinevusi kandidaatsihtgeenide valgu tasemetes, samas kui HPC näitas GluA2 (t (34) = 2.31, p = 0.027) olulist langust ja tugevat suundumust CaMKII tasemed (t (35) = 1.99, p = 0.053) ekspressioon, samas kui cdk5 jäi muutumatuks (Joonis 5A ja 5B). Depressiooniga patsientide PFC ja HPC korral ei muutunud muutusi ΔFosB sihtgeenide ekspressioonis (Joonis 5C ja 5D). Need andmed viitavad sellele, et ΔFosB võib reguleerida potentsiaalsete sihtgeenide ekspressiooni inimese HPC-s ja see regulatsioon võib olla ajupiirkonna ja haiguse spetsiifiline.

thumbnail

Lae:

PowerPointi slaid

suurem pilt (546KB)

originaalpilt (1.01MB)

Joonis 5. Võimalike ΔFosB geeni sihtvalkude ekspressioon inimese kokaiinisõltuvuse ja depressiooniga patsientidel HPC ja PFC.

(A) potentsiaalsete ΔFosB geeni sihtvalkude Western blot inimkokaiini kuritarvitajate HPC ja PFC (Coc) ja kontrollide (Con) (B) Kvantifitseerimine näitab kokaiinist sõltuvat kogu GluA2 ja CaMKII vähenemist HPC-s, kuid mitte PFC-s (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) Inimese depressiooniga patsientide HPC ja PFC potentsiaalsete ΔFosB geeni sihtvalkude Western blot (Dep) või antidepressantidega (Dep + AD) ja kontroll (Con). (D) Kvantifitseerimine ei näita depressioonist sõltuvaid muutusi. Vearibad näitavad keskmist +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g005

Arutelu

Esitame siin esimese kogumiku FosB geeniprodukti ja ΔFosB-sihtmärkvalgu analüüs kokaiinisõltlaste ja depressiooniga patsientide hipokampuses ja prefrontaalses ajukoores. Need ajupiirkonnad mängivad teadaolevalt võtmerolli nende haiguste patofüsioloogias ja inimeste surmajärgsete proovide kasutamine võimaldab meil: 1) teha kindlaks, kas nende haiguste hästi uuritud näriliste mudelites leiduvad molekulaarsed muutused on inimestel uuesti koondatud ; 2) määratleb võimalike terapeutiliste sekkumiste jaoks näriliste mudelitega uudsed uuringuteed. Meie analüüs keskendus FosB geeniprodukte, kuna nende ekspressioon nendes piirkondades on väidetavalt mänginud depressiooni ja on põhjustatud kokaiini kokkupuutest näriliste mudelites [21, 22, 24]. Kui uuriti algselt FosB valgu taset meie inimproovides, oli selge, et meie FosB antikeha tuvastas rohkem ribasid, kui meie rühma ja paljude teiste näriliste ajuproovides on varem teatatud [1, 22]. Kuna inimese ajud külmutatakse tundid pärast surma, samal ajal kui hiire proovid eemaldatakse ja külmutatakse kahe minuti jooksul pärast ohverdamist, jätsime hiire ajud kohapealne pärast kuni kaheksa tunni pikkust ohverdamist, et teha kindlaks, kas sarnased ribad tekivad. Kuna me ei jälginud inimproovides leiduvat sama FosB valkude mustrit ja kuna me ei leidnud korrelatsiooni ka PMI pikkuse ja erinevate proovide ribade vahel inimese proovides, järeldasime, et paljud inimese aju proovid pole tõenäoliselt suuremate FosB isovormide proteolüütilise lagunemise tulemus. Ehkki me ei saa välistada liikidevahelisi proteolüütiliste mehhanismide erinevusi, võiksime arvata, et osa inimese ribadest võib tuleneda FosB mRNA erinevast splaissingust ja meie rühma tulevased uuringud käsitlevad seda küsimust.

Varasemad näriliste uuringute tulemused on tuvastanud HPC ja PFC FosB isovormide suurenemise pärast kroonilist kokaiini [24]. Kuid meie kokaiinisõltuvate isikute kohordist leidsime kõigi FosB isovormide vähenemist HPC-s, PFC-s muutusi ei olnud võrreldes kontroll-indiviididega. Usume, et selle põhjuseks võivad olla näriliste uuringute ja inimeste sõltuvusjuhtumite loomulikud erinevused. Kokaiinisõltuvuse uuringud kestavad ainult väikese osa näriliste elust ja seni pole ΔFosB esilekutsumise uuringud ületanud kokaiini pideva kokkupuute 14-päevi [1, 20]. Inimeste kokaiinitarbijad võivad olla sõltlased palju pikema aja jooksul, mis võib põhjustada homeostaatilisi mõjusid FosB HPC-s represseeritav geen. Lisaks on paljud uuringud näidanud, et pikaajalise sõltuvusega psühhostimulantidest kaasneb vähenenud kognitiivne funktsioon [9, 49]. Meie hiljutine töö näitab, et HPC ΔFosB mängib õppimisel kriitilist rolli [28] ja seega HPC langus FosB Siin näidatud kokaiinisõltlaste geeniekspressioon võib kujutada endast psühhostimulantide sõltuvuse kognitiivse languse mehhanismi. Vähenenud ekspressiooniga FosB geeni HPC-s, täheldasime ka kandidaat ΔFosB sihtgeenide GluA2 ja CaMKII valgu taseme langust ning mõlemad need molekulid on kriitilise tähtsusega ka HPC funktsioneerimisel ja õppimisel [50] ja on varem olnud sõltuvusega seotud [38, 51].

Depressiooniga patsientide HPC-s täheldasime paljude FosB valkude vähenemist sõltuvalt sellest, kas patsiendid võtsid antidepressante. See võib osutada, et antidepressantidel on erinev toime FosB geenitooted, kuigi meie varasemad närilistega tehtud uuringud selliseid erinevusi ei ilmutanud [22]. Kuid nende patsientide HPC ega PFC potentsiaalsete sihtgeenide ekspressioonis ei olnud erinevusi. Ehkki suurema depressiooniga kaasnevad sageli kognitiivsed probleemid [52], on tõenäoline, et HPC ΔFosB ei ole ainus tegur, mis on muutunud depressioonivastuseks. Kui kokaiinisõltlastel ilmnesid muutused HPC ΔFosB ja sihtgeeni ekspressioonis, võib depressioon viia erinevate kompenseerivate mehhanismideni, mis takistavad GluA2 või CaMKII ekspressiooni vähenemist. Seega selgitavad tulevased uuringud, kas muutused HPC geeni ekspressioonis depressiooni ja sõltuvuse korral tulenevad sarnastest mehhanismidest.

Kriitiline on märkida, et selle uuringu jaoks kasutatud inimpopulatsioonidel puudub prekliiniliste näriliste või primaatide mudelite homogeensus. Näiteks viis depressiooniga patsiendist kannatas alkoholismi käes ja kahel oli surma ajal pardal opiaadid. Samamoodi olid kuus kokaiinist sõltuvat isikut tarvitanud antidepressante kolme kuu jooksul enne surma. Kuigi see pole üllatav, kuna depressioonil ja sõltuvusel on kõrge kaasuvuse tase [6, 7], kuid see muudab tulemuste tõlgendamise keerukamaks. Me ei tähelda olulisi erinevusi meie biokeemilistes näitajates kokaiinisõltuvate katsealuste vahel, kellel olid pardal antidepressandid, ja nende vahel, kellel seda polnud, samuti ei täheldata erinevusi depressioonis patsientide vahel, kellel oli ainest sõltuvus, ja nende vahel, kellel seda ei olnud (andmeid pole näidatud) ). Kuid see välistab depressiooni ja sõltuvuse kattuva või sünergilise mõju meie abinõudele. Vastupidi, kuna me täheldame HPC FosB isovormi ekspressiooni sarnast langust koos depressiooni ja sõltuvusega, on võimalik, et HPC vähenemine FosB geeniekspressioon on nende kahe seisundi ühine mehhanism ja võib kaasa aidata kaasuvate haiguste tekkele. Selle hüpoteesi uurimiseks on vaja palju suuremaid inimgruppide rühmi ja täiendavaid prekliinilisi uuringuid.

Kokkuvõtteks leiame, et see on mitu FosB geeniproduktid on sõltuvuse ja depressiooni all kannatavate inimeste HPC-s alareguleeritud, kuid mitte PFC. Ehkki me ei saa selle nähtuse ja haigusseisundite vahel etioloogilist seost luua, on võimalik, et HPC ΔFosB ja / või teiste FosB isovormide langus võib osaliselt põhjustada depressiooni ja sõltuvusega seotud kognitiivseid puudujääke või aidata kaasa nende psühhiaatriliste haiguste kaasnevale haigusele. häired.

Tunnustused

Autorid tänavad Kenneth Mooni suurepärase tehnilise abi eest.

Autori panused

  1. Kujundanud ja kavandatud katsed: AJR PAG.
  2. Tehtud katsed: AJR GT PAG.
  3. Analüüsiti andmeid: PAG AJR.
  4. Kaasas olevad reaktiivid / materjalid / analüüsivahendid: GT.
  5. Kirjutas raamatu: PAG AJR.

viited

  1. 1. Robison AJ, Nestler EJ. Sõltuvuse transkriptsioonilised ja epigeneetilised mehhanismid. Nat Rev Neurosci. 2011; 12 (11): 623 – 37. Epub 2011 / 10 / 13. doi: 10.1038 / nrn3111 nrn3111 [pii]. pmid: 21989194; PubMed Central PMCID: PMC3272277.
  2. 2. Fass DM, Schroeder FA, Perlis RH, Haggarty SJ. Emigeneetilised mehhanismid meeleoluhäirete korral: neuroplastilisuse sihtimine. Neuroteadus. 2014; 264: 112 – 30. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2013.01.041 pmid: 23376737; PubMed Central PMCID: PMC3830721.
  3. Vaata artiklit
  4. PubMed / NCBI
  5. Google Scholar
  6. Vaata artiklit
  7. PubMed / NCBI
  8. Google Scholar
  9. Vaata artiklit
  10. PubMed / NCBI
  11. Google Scholar
  12. Vaata artiklit
  13. PubMed / NCBI
  14. Google Scholar
  15. Vaata artiklit
  16. PubMed / NCBI
  17. Google Scholar
  18. 3. Menard C, Hodes GE, Russo SJ. Depressiooni patogenees: teadmised inimeste ja näriliste uuringutest. Neuroteadus. 2015. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2015.05.053 pmid: 26037806.
  19. Vaata artiklit
  20. PubMed / NCBI
  21. Google Scholar
  22. Vaata artiklit
  23. PubMed / NCBI
  24. Google Scholar
  25. Vaata artiklit
  26. PubMed / NCBI
  27. Google Scholar
  28. Vaata artiklit
  29. PubMed / NCBI
  30. Google Scholar
  31. Vaata artiklit
  32. PubMed / NCBI
  33. Google Scholar
  34. Vaata artiklit
  35. PubMed / NCBI
  36. Google Scholar
  37. Vaata artiklit
  38. PubMed / NCBI
  39. Google Scholar
  40. Vaata artiklit
  41. PubMed / NCBI
  42. Google Scholar
  43. Vaata artiklit
  44. PubMed / NCBI
  45. Google Scholar
  46. Vaata artiklit
  47. PubMed / NCBI
  48. Google Scholar
  49. Vaata artiklit
  50. PubMed / NCBI
  51. Google Scholar
  52. Vaata artiklit
  53. PubMed / NCBI
  54. Google Scholar
  55. Vaata artiklit
  56. PubMed / NCBI
  57. Google Scholar
  58. Vaata artiklit
  59. PubMed / NCBI
  60. Google Scholar
  61. Vaata artiklit
  62. PubMed / NCBI
  63. Google Scholar
  64. Vaata artiklit
  65. PubMed / NCBI
  66. Google Scholar
  67. Vaata artiklit
  68. PubMed / NCBI
  69. Google Scholar
  70. Vaata artiklit
  71. PubMed / NCBI
  72. Google Scholar
  73. Vaata artiklit
  74. PubMed / NCBI
  75. Google Scholar
  76. Vaata artiklit
  77. PubMed / NCBI
  78. Google Scholar
  79. Vaata artiklit
  80. PubMed / NCBI
  81. Google Scholar
  82. Vaata artiklit
  83. PubMed / NCBI
  84. Google Scholar
  85. Vaata artiklit
  86. PubMed / NCBI
  87. Google Scholar
  88. Vaata artiklit
  89. PubMed / NCBI
  90. Google Scholar
  91. Vaata artiklit
  92. PubMed / NCBI
  93. Google Scholar
  94. Vaata artiklit
  95. PubMed / NCBI
  96. Google Scholar
  97. Vaata artiklit
  98. PubMed / NCBI
  99. Google Scholar
  100. Vaata artiklit
  101. PubMed / NCBI
  102. Google Scholar
  103. Vaata artiklit
  104. PubMed / NCBI
  105. Google Scholar
  106. Vaata artiklit
  107. PubMed / NCBI
  108. Google Scholar
  109. Vaata artiklit
  110. PubMed / NCBI
  111. Google Scholar
  112. Vaata artiklit
  113. PubMed / NCBI
  114. Google Scholar
  115. Vaata artiklit
  116. PubMed / NCBI
  117. Google Scholar
  118. Vaata artiklit
  119. PubMed / NCBI
  120. Google Scholar
  121. Vaata artiklit
  122. PubMed / NCBI
  123. Google Scholar
  124. Vaata artiklit
  125. PubMed / NCBI
  126. Google Scholar
  127. Vaata artiklit
  128. PubMed / NCBI
  129. Google Scholar
  130. Vaata artiklit
  131. PubMed / NCBI
  132. Google Scholar
  133. Vaata artiklit
  134. PubMed / NCBI
  135. Google Scholar
  136. Vaata artiklit
  137. PubMed / NCBI
  138. Google Scholar
  139. Vaata artiklit
  140. PubMed / NCBI
  141. Google Scholar
  142. Vaata artiklit
  143. PubMed / NCBI
  144. Google Scholar
  145. Vaata artiklit
  146. PubMed / NCBI
  147. Google Scholar
  148. Vaata artiklit
  149. PubMed / NCBI
  150. Google Scholar
  151. Vaata artiklit
  152. PubMed / NCBI
  153. Google Scholar
  154. 4. Keralapurathi MM, Briggs SB, Wagner JJ. Kokaiini iseseisev manustamine kutsub esile sünaptilise ülekande ja plastilisuse muutused ventraalses hipokampuses. Sõltuvusbioloogia. 2015. doi: 10.1111 / adb.12345 pmid: 26692207.
  155. 5. Loureiro M, Kramar C, Renard J, Rosen LG, Laviolette SR. Kannabinoidide ülekandumine hipokampuses aktiveerib tuuma akumuleerunud neuroneid ja moduleerib tasu ja vastumeelsusega seotud emotsionaalset silmanähtavust. Bioloogiline psühhiaatria. 2015. doi: 10.1016 / j.biopsych.2015.10.016 pmid: 26681496.
  156. 6. Davis L, Uezato A, Newell JM, Frazier E. Suure depressiooni ja kaasuvate ainete tarvitamise häired. Praegune arvamus psühhiaatrias. 2008; 21 (1): 14 – 8. doi: 10.1097 / YCO.0b013e3282f32408 pmid: 18281835.
  157. 7. Kaasnevus: sõltuvus ja muud vaimuhaigused. Osades: Teenused USDoHaH, toimetaja: Narkootikumide kuritarvitamise riiklik instituut; 2010.
  158. 8. Tafet GE, Nemeroff CB. Stressi ja depressiooni vahelised seosed: psühhoneuroendokrinoloogilised, geneetilised ja keskkonnamõjud. Ajakiri neuropsühhiaatriast ja kliinilistest neuroteadustest. 2015: appineuropsych15030053. doi: 10.1176 / appi.neuropsych.15030053 pmid: 26548654.
  159. 9. Kadett JL, Bisagno V. Kroonilise uimastitarbimise neuropsühholoogilised tagajärjed: olulisus raviviisides. Piirid psühhiaatrias. 2015; 6: 189. doi: 10.3389 / fpsyt.2015.00189 pmid: 26834649; PubMed Central PMCID: PMC4713863.
  160. 10. Blier P. Oletatava varase algusega antidepressantide strateegiate farmakoloogia. Eur Neuropsychopharmacol. 2003; 13 (2): 57 – 66. pmid: 12650947. doi: 10.1016 / s0924-977x (02) 00173-6
  161. 11. Januar V, Ancelin ML, Ritchie K, Saffery R, ​​Ryan J. BDNF promootori metüülimine ja geneetiline variatsioon hilise elu depressioonis. Tõlkepsühhiaatria. 2015; 5: e619. doi: 10.1038 / tp.2015.114 pmid: 26285129; PubMed Central PMCID: PMCPMC4564567.
  162. 12. Covington HE 3rd, Maze I, LaPlant QC, Vialou VF, Ohnishi YN, Berton O jt. Histooni deatsetülaasi inhibiitorite antidepressandid. J Neurosci. 2009; 29 (37): 11451 – 60. Epub 2009 / 09 / 18. 29 / 37 / 11451 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1758-09.2009 pmid: 19759294; PubMed Central PMCID: PMC2775805.
  163. 13. Maze I, Covington HE 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ jt. Histooni metüültransferaasi G9a oluline roll kokaiini põhjustatud plastilisuses. Teadus. 2010; 327 (5962): 213 – 6. Epub 2010 / 01 / 09. 327 / 5962 / 213 [pii] doi: 10.1126 / teadus.1179438 pmid: 20056891; PubMed Central PMCID: PMC2820240.
  164. 14. Massart R, Barnea R, Dikshtein Y, Suderman M, Meir O, Hallett M jt. DNA metüleerimise roll tuumas akumulatsioonides kokaiini iha inkubeerimisel. Neuroteaduste ajakiri: neuroteaduste ühingu ametlik ajakiri. 2015; 35 (21): 8042 – 58. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.3053-14.2015 pmid: 26019323.
  165. 15. Ruffle JK. Sõltuvuse molekulaarne neurobioloogia: mis on kogu (Delta) FosB? Ameerika uimastite ja alkoholi kuritarvitamise ajakiri. 2014; 40 (6): 428–37. doi: 10.3109 / 00952990.2014.933840 pmid: 25083822.
  166. 16. Nestler EJ. FosB: stressi ja antidepressantide vastuste transkriptsiooniline regulaator. Eur J Pharmacol. 2014. doi: 10.1016 / j.ejphar.2014.10.034 pmid: 25446562.
  167. 17. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. DeltaFosB fosforüülimine vahendab selle stabiilsust in vivo. Neuroteadus. 2009; 158 (2): 369 – 72. Epub 2008 / 12 / 02. S0306-4522 (08) 01596-0 [pii] doi: 10.1016 / j.neuroscience.2008.10.059 pmid: 19041372; PubMed Central PMCID: PMC2734485.
  168. 18. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A jt. FosB destabiliseerimise proteasoomidest sõltuvad ja sõltumatud mehhanismid: FosB degroni domeenide tuvastamine ja mõju DeltaFosB stabiilsusele. Eur J Neurosci. 2007; 25 (10): 3009 – 19. Epub 2007 / 06 / 15. EJN5575 [pii] doi: 10.1111 / j.1460-9568.2007.05575.x pmid: 17561814.
  169. 19. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. DeltaFosB stabiilsuse reguleerimine fosforüülimise teel. J Neurosci. 2006; 26 (19): 5131 – 42. Epub 2006 / 05 / 12. 26 / 19 / 5131 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4970-05.2006 pmid: 16687504.
  170. 20. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M jt. Kroonilise kokaiini käitumis- ja struktuurireaktsioonid nõuavad tagasisidet, mis hõlmab DeltaFosB ja kaltsiumist / kalmoduliinist sõltuvat valgukinaasi II tuuma kesta. J Neurosci. 2013; 33 (10): 4295 – 307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013 pmid: 23467346.
  171. 21. Vialou V, Bagot RC, Cahill ME, Ferguson D, Robison AJ, Dietz DM jt. Koletsüstokiniini vahendatud prefrontaalne kortikaalne lülitus depressiooni ja ärevusega seotud käitumiste jaoks: DeltaFosB roll. J Neurosci. 2014; 34 (11): 3878 – 87. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1787-13.2014 pmid: 24623766; PubMed Central PMCID: PMC3951691.
  172. 22. Vialou V, Thibault M, Kaska S, Cooper S, Gajewski P, Eagle A jt. FosB isovormide diferentseeritud induktsioon kogu ajus fluoksetiini ja kroonilise stressi mõjul. Neurofarmakoloogia. 2015; 99: 28 – 37. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2015.07.005 pmid: 26164345.
  173. 23. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS jt. DeltaFosB indutseerimine tasuga seotud ajustruktuurides pärast kroonilist stressi. J Neurosci. 2004; 24 (47): 10594 – 602. Epub 2004 / 11 / 27. 24 / 47 / 10594 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004 pmid: 15564575.
  174. 24. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S jt. DeltaFosB indutseerimise erisused ajus kuritarvitamise ravimitega. Synapse. 2008; 62 (5): 358 – 69. Epub 2008 / 02 / 23. doi: 10.1002 / syn.20500 pmid: 18293355; PubMed Central PMCID: PMC2667282.
  175. 25. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA Jr., Whisler K, Gilden L, Beckmann AM jt. Transkriptsioonifaktori deltaFosB ekspressioon ajus kontrollib kokaiini suhtes tundlikkust. Loodus. 1999; 401 (6750): 272 – 6. Epub 1999 / 09 / 28. doi: 10.1038 / 45790 pmid: 10499584.
  176. 26. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN jt. DeltaFosB vahendab aju rekursiooniringides vastupidavust stressile ja antidepressantide vastuseid. Nat Neurosci. 2010; 13 (6): 745 – 52. Epub 2010 / 05 / 18. nn.2551 [pii] doi: 10.1038 / nn.2551 pmid: 20473292; PubMed Central PMCID: PMC2895556.
  177. 27. Robison AJ, Vialou V, Sun HS, Labonte B, S AG, Dias C jt. Epigeneetiliselt muudab fluoksetiin CaMKIIalpha promootorit tuumas akumuleeruvates ainetes, et reguleerida DeltaFosB seondumis- ja antidepressante. Neuropsühhofarmakoloogia. 2013. doi: 10.1038 / npp.2013.319 pmid: 24240473.
  178. 28. Eagle AL, Gajewski PA, Yang M, Kechner ME, Al Masraf BS, Kennedy PJ jt. Hippocampali DeltaFosB juhtimisest kogemusest sõltuv induktsioon. J Neurosci. 2015; 35 (40): 13773 – 83. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2083-15.2015 pmid: 26446228.
  179. 29. Papakostas GI, Culpepper L. Depressiooniga patsiendi kognitsiooni mõistmine ja juhtimine. J Clin psühhiaatria. 2015; 76 (4): 418 – 25. doi: 10.4088 / JCP.13086ah1c pmid: 25919832.
  180. 30. Evans VC, Iverson GL, Yatham LN, Lam RW. Neurokognitiivse ja psühhosotsiaalse funktsioneerimise seos peamise depressiivse häire korral: süstemaatiline ülevaade. J Clin psühhiaatria. 2014; 75 (12): 1359 – 70. doi: 10.4088 / JCP.13r08939 pmid: 25551235.
  181. 31. Wood S, Salvei JR, Shuman T, Anagnostaras SG. Psühhostimulandid ja tunnetus: käitumusliku ja kognitiivse aktiveerimise jätk. 2014 (66): 1 – 193. doi: 221 / pr.10.1124 pmid: 112.007054; PubMed Central PMCID: PMC24344115.
  182. 32. Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA jt. FosB geeni oluline roll krooniliste elektrokonvulsioonhoogude molekulaarses, rakulises ja käitumuslikus tegevuses. J Neurosci. 1998; 18 (17): 6952 – 62. Epub 1998 / 08 / 26. pmid: 9712664.
  183. 33. Pierce RC, hunt ME. Psühhostimulantide poolt indutseeritud neuroadaptatsioonid tuumas omandavad AMPA retseptori ülekande. Cold Spring Harbori väljavaated meditsiinis. 2013; 3 (2): a012021. doi: 10.1101 / cshperspect.a012021 pmid: 23232118; PubMed Central PMCID: PMC3552338.
  184. 34. Luscher C. Kokaiin kutsus esile ventraalse tegmentaalse piirkonna erutusülekande sünaptilise plastilisuse. Cold Spring Harbori väljavaated meditsiinis. 2013; 3 (5): a012013. doi: 10.1101 / cshperspect.a012013 pmid: 23637310; PubMed Central PMCID: PMC3633178.
  185. 35. Grayal C, Kiseliseczk C, Holmes A. Stressist põhjustatud tunnetus- ja emotsionaalsuse vaegused: glutamaadi roll. Curr Top Behav Neurosci. 2012; 12: 189 – 207. doi: 10.1007 / 7854_2011_193 pmid: 22261703; PubMed Central PMCID: PMC3877736.
  186. 36. Duman RS. Depressiooni patofüsioloogia ja uuenduslikud ravimeetodid: glutamatergiliste sünaptiliste seoste rekonstrueerimine. Dialoogid Clin Neurosci. 2014; 16 (1): 11 – 27. pmid: 24733968; PubMed Central PMCID: PMC3984887.
  187. 37. Zarate C, Duman RS, Liu G, Sartori S, Quiroz J, Murck H. Raviresistentse depressiooni uued paradigmad. Ann NY Acad Sci. 2013; 1292: 21 – 31. doi: 10.1111 / nyas.12223 pmid: 23876043; PubMed Central PMCID: PMC3936783.
  188. 38. Robison AJ. CaMKII tärkav roll neuropsühhiaatrilises haiguses. Trends Neurosci. 2014; 37 (11): 653 – 62. doi: 10.1016 / j.tins.2014.07.001 pmid: 25087161.
  189. 39. Chen J, Zhang Y, Kelz MB, Steffen C, Ang ES, Zeng L jt. Tsükliinist sõltuva kinaasi 5 esilekutsumine hipokampuses krooniliste elektrokonvulsioonsete krampide kaudu: FosB roll. J Neurosci. 2000; 20 (24): 8965 – 71. Epub 2000 / 01 / 11. 20 / 24 / 8965 [pii]. pmid: 11124971.
  190. 40. Mlewski EC, Krapacher FA, Ferreras S, Paglini G. Cdk5 aktivaatori p25 ajutine võimendatud ekspressioon pärast ägedat ja kroonilist d-amfetamiini manustamist. Ann NY Acad Sci. 2008; 1139: 89 – 102. doi: 10.1196 / annals.1432.039 pmid: 18991853.
  191. 41. Bignante EA, Rodriguez Manzanares PA, Mlewski EC, Bertotto ME, Bussolino DF, Paglini G jt. Vaheseina Cdk5 osalemine stressist põhjustatud liigse ärevuse ilmnemisel. Euroopa neuropsühhofarmakoloogia: Euroopa neuropsühhofarmakoloogiakolledži ajakiri. 2008; 18 (8): 578 – 88. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2008.02.007 pmid: 18406108.
  192. 42. Seiwell AP, Reveron ME, Duvauchelle CL. Suurenenud Cdk5 akumulatsioonide ekspressioon rottidel pärast lühiajalist juurdepääsu iseendale manustatavale kokaiinile, kuid mitte pärast pika juurdepääsuga seansse. Neurosci Lett. 2007; 417 (1): 100 – 5. doi: 10.1016 / j.neulet.2007.02.043 pmid: 17339080; PubMed Central PMCID: PMC1876973.
  193. 43. Taylor JR, Lynch WJ, Sanchez H, Olausson P, Nestler EJ, Bibb JA. Cdk5 pärssimine akumulatsiooni tuumas tugevdab kokaiini lokomotoorseid aktiveerivaid ja ergutavaid-motiveerivaid mõjusid. Proc Natl Acad Sci USA A. 2007; 104 (10): 4147 – 52. Epub 2007 / 03 / 16. 0610288104 [pii] doi: 10.1073 / pnas.0610288104 pmid: 17360491; PubMed Central PMCID: PMC1820723.
  194. 44. Quirion R, Robitaille Y, Martial J, Chabot JG, Lemoine P, Pilapil C jt. Inimese aju retseptori autoradiograafia, kasutades terveid poolkera lõike: üldine meetod, mis minimeerib kudede artefakte. Synapse. 1987; 1 (5): 446 – 54. Epub 1987 / 01 / 01. doi: 10.1002 / syn.890010508 pmid: 2850625.
  195. 45. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y jt. Pikaajalise AP-1 kompleksi indutseerimine muudetud fossilaadsetest valkudest ajus kroonilise kokaiini ja muude krooniliste ravimeetodite abil. Neuron. 1994; 13 (5): 1235 – 44. Epub 1994 / 11 / 01. 0896-6273 (94) 90061-2 [pii]. pmid: 7946359. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2
  196. 46. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakoloogilised uuringud kokaiini poolt kroonilise FOS-iga seotud antigeeni induktsiooni reguleerimise kohta striaatumis ja tuuma akumulatsioonides. J Pharmacol Exp. 1995; 275 (3): 1671 – 80. Epub 1995 / 12 / 01. pmid: 8531143.
  197. 47. Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kroonilise Fos-iga seotud antigeenid: ajus kroonilise raviga indutseeritud deltaFosB stabiilsed variandid. J Neurosci. 1997; 17 (13): 4933 – 41. Epub 1997 / 07 / 01. pmid: 9185531.
  198. 48. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM jt. Transkriptsioonifaktori ekspressioon FtaB kontrollib ajus tundlikkust kokaiini suhtes. Loodus. 1999; 401 (6750): 272 – 6. http://www.nature.com/nature/journal/v401/n6750/suppinfo/401272a0_S1.html. pmid: 10499584
  199. 49. Buchta WC, Riegel AC. Krooniline kokaiin häirib mesokortikaalseid õppimismehhanisme. Brain Res. 2015; 1628 (Pt A): 88 – 103. doi: 10.1016 / j.brainres.2015.02.003 pmid: 25704202; PubMed Central PMCID: PMC4739740.
  200. 50. Shonesy BC, Jalan-Sakrikar N, Cavener VS, Colbran RJ. CaMKII: sünaptilise plastilisuse ja mälu molekulaarne substraat. Edusammud molekulaarbioloogias ja translatsiooniteaduses. 2014; 122: 61 – 87. doi: 10.1016 / B978-0-12-420170-5.00003 – 9 pmid: 24484698.
  201. 51. Loweth JA, Tseng KY, Wolf ME. Kohanemised AMPA retseptori ülekandes tuuma akumulatsioonides aitavad kaasa kokaiini iha inkubatsioonile. Neurofarmakoloogia. 2014; 76 Pt B: 287 – 300. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2013.04.061 pmid: 23727437; PubMed Central PMCID: PMC3836860.
  202. 52. Culpepper L. Ravimata peamise depressiivse häire mõju tunnetusele ja igapäevasele funktsioonile. J Clin psühhiaatria. 2015; 76 (7): e901. doi: 10.4088 / JCP.13086tx4c pmid: 26231021.