DeltaFosB, FosB ja cFos Striatuse reguleerimine kokaiini enese manustamise ja väljavõtmise ajal (2010)

J Neurochem. Autori käsikiri; saadaval PMC Oct 1, 2011.
Avaldatud lõplikus redigeeritavas vormis:
Väljaandja selle artikli lõplik redigeeritud versioon on saadaval aadressil J Neurochem
Vaata teisi PMC artikleid tsitaat avaldatud artiklis.

Abstraktne

Krooniline ravimi ekspositsioon põhjustab muutusi geeniekspressiooniprofiilides, mis arvatakse olevat narkomaania arengu aluseks. Käesolevas uuringus vaadeldi transkriptsioonifaktorite Fos-perekonna reguleerimist, eriti cFos, FosB ja ΔFosB, striatilisel alampiirkonnal kroonilise intravenoosse kokaiini manustamise ajal ja pärast seda iseenesest manustatavates ja löögirottides. Me leidsime, et cFos, FosB ja ΔFosB eksponeerivad piirkondlikult ja ajaliselt eraldiseisvaid ekspressioonimustreid, kus αFosB valgu kuhjumine tuuma accumbens (NAc) kestas ja südamikus pärast kroonilist kokaiini manustamist on säilinud, samal ajal kui ΔFosB suurenemine caudate-putamenis (CPu) jäi sarnane ägeda või kroonilise manustamisega. Seevastu tekitas kokaiini poolt indutseeritud αFosB mRNA suhtes tolerantsus kõigis kroonilise manustamisega 3-i rästikupiirkondades. Tolerantsus tekkis ka FosB ekspressiooniks, eriti NAc kesta ja CPu puhul. Huvitav on see, et tolerantsus kokaiini poolt indutseeritud cFos-induktsiooni suhtes sõltus kokaiini tarbimise kontrollist ventraalsetes, kuid mitte seljaga striatali piirkondades, samal ajal kui FosB ja ΔFosB regulatsioon oli kokaiiniga iseseisvate ja löögiloomade puhul sarnane. Seega võivad αFosB-vahendatud neuroadaptatsioonid CPus-s esineda varem arvatuna intravenoosse kokaiini kasutamise alustamisel ja koos suurema ΔFosB kogunemisega NAc-s võib aidata kaasa sõltuvusega seotud kokaiinitootmise käitumise suurenemisele.

Märksõnad: kokaiin, füüsilisest isikust manustamine, võõrutus, striatum, Fos

Sissejuhatus

Korduv kokkupuude sõltuvust tekitavate ravimitega tekitab neuroadaptatsioone aju tasustamisviisides, mis arvatakse olevat aluseks nii kompulsiivse narkootikumide võtmise kui ka iha ja retsidiivi püsimisele narkootikumide otsimise käitumisele. Paljud neist neuroadaptatsioonidest tulenevad transkriptsioonifaktorite indutseerimisest ja järgnevast geeniekspressiooni reguleerimisest, mis võivad avaldada neuronite struktuurile ja funktsioonile potentsiaalselt pikaajalist mõju (Zhang et al. 2006). Eriti huvipakkuv on transkriptsioonifaktorite Fos-perekond, kuna selle perekonna liikmetel on pärast ägeda ja kroonilise kokaiiniga kokkupuudet striatioonipiirkondades diferentsiaalsed induktsioonimustrid. Kui kokaiini manustatakse akuutselt passiivsel, mitte-tingimuslikul moel (st intraperitoneaalse (IP) süstimise teel), suurendab see cFos ja FosB mRNA-d ja valku nii selja (caudate-putamen, CPu) kui ka ventraalse (nucleus accumbens, NAc) korral. striatum (Graybiel et al. 1990; noor et al. 1991; Loodan et al. 1992), samas kui tolerantsus sellele reaktsioonile tekib kroonilise passiivse manustamise korral (Loodan et al. 1992, 1994; Alibhai et al. 2007). Seevastu FosB (35-37 kDa) striatsiumi tasemed, stabiilne kärbitud splaissingu variant fosB kroonilise, kuid mitte akuutse passiivse kokaiiniga kokkupuute korral (Loodan et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997). Need stabiilsed ΔFosB isovormid võivad heterodimeerida erinevaid Jun perekonna valke kui cFos või FosB (Chen et al. 1995) ja võib samuti moodustada funktsionaalseid homodimeere (Jorissen et al. 1997), mis viitab sellele, et kroonilise kokaiini pärast aktiveeriva proteiini-1 (AP-1) komplekside diferentseerumine võib muuta geeni ekspressiooni AP-1 saitidel viisil, mis erineb ägeda kokaiiniga kokkupuutest saadud geeniekspressioonist (Loodan, 1998; Kelz ja Nestler, 2000). Geeni ekspressiooniprofiilide erinevused esinevad ka sõltuvalt sellest, kas ΔFosB tõus on lühiajaline või pikaajaline, ning need muutused võivad viia kokaiini vahendatud käitumise diferentseerumiseni (McClung ja Nestler, 2003). Krooniline kokkupuude teiste ravimitega, sealhulgas amfetamiin, morfiin, Δ9-THC, nikotiin, etanool ja fentsüklidiin toovad kaasa ka stabiilse ΔFosB isovormi kogunemise striatali piirkondades (McClung et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Lisaks viitavad hiljutised tulemused negatiivsele vastasmõjule ΔFosB akumulatsiooni ja amfetamiini poolt indutseeritud cFoside vahel, mis võivad põhjustada kroonilise stimuleeriva kokkupuute järel leitud tolerantsust cFose induktsioonile (Renthal et al. 2008). Üheskoos on need leiud viinud hüpoteesini, et stabiilsed ΔFosB isovormid võivad toimida „molekulaarse lülitina“ ja hõlbustada üleminekut algsest uimastitarbimisest sõltuvamatele bioloogilistele seisunditele (Nestler et al. 2001; Nestler, 2008).

Kuigi enamikus varasematest uuringutest kasutati Fos perekonna valkude ekspressiooni uurimiseks korduvaid passiivseid kokaiiniravi, on selle regulatsiooni kohta suhteliselt vähe näiteid, kui kokaiini manustatakse ise intravenoosselt (IV) mitme tunni jooksul, mis on iseloomulik inimese kuritarvitamisele. Ühes uuringus leiti, et cFos mRNA on CPu-s kõrgenenud pärast ühe 30-minuti kestvat kokaiini eneseanalüüsi hiirtel (Kuzmin ja Johansson, 1999), samas kui rotid ei ole pärast subkroonilist (CPA) muutunud. 3 päeva) või kroonilise (6-12 nädala) kokaiini eneseanalüüs (Daunais et al. 1993, 1995). Pärast katkestusperioodi on kokaiini vahendatud cFos-valgu suurenemine NAc-s vähenenud eelnevalt suurenenud kokaiini tarbimisega rottidel.Ben-Shahar et al. 2004), samal ajal kui kogu striatumis on leitud kõrgemaid cFos-tasemeid pärast kokaiiniga seotud \ tNeisewander et al. 2000; Kufahl et al. 2009). Erinevalt cFosist on pärast kroonilist kokaiini ennast manustamist täheldatud ΔFosB suurenenud valgusisaldust kogu striatumis ning see akumuleerumine võib püsida vähemalt 1i päevas tagasi.Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Siiski ei ole ühtegi aruannet, mis võrdleks mitmete Fos-perekonna valkude reageerimisvõimet sellises intravenoosses kokaiini manustamises koos ägeda või kroonilise ekspositsiooniga. Arvestades võimalikke interaktsioone ΔFosB ja cFose vahel, AP-1i kompleksi moodustumise diferentseerumise võimet avaldada erinev mõju geeniekspressioonile ja nende erinevuste võimalikku mõju kokaiini vahendatud käitumisele, on samuti oluline kinnitada, et muutused on cFos, FosB ja ΔFosB ekspressioon, mis tekib pärast mittekontrollitavat manustamist, leitakse ka siis, kui kokaiin on vabatahtlikult vabatahtlik ja et määrata kindlaks, kui kaua need muutused võivad püsida pärast kokaiini manustamist. Seetõttu võrreldi käesolevas uuringus kroonilise IV kokaiini manustamise mõju ΔFosB, FosB ja cFos ekspressioonile striatiaalsetes alampiirkondades nii kokaiini manustamise kui ka äravõtmise ajal. Me võrdleme reguleerimist, mida leiti vabatahtliku enesehooldusega, loomadega, kes said sama koguse ja kokaiini ajalise mustriga mittetäieliku löögi infusiooniga pärast ägedaid või kroonilisi kokkupuuteid. Arvestades, et FosB ja ΔFosB on sama splaissingu variandid fosB geeni, võrdlesime ka mRNA-de reguleerimist FosB ja ΔFosB-ga valgu tasemel reguleerimisega.

Katsemenetlused

Teemad ja operatsioon

Täiskasvanud isased Sprague-Dawley rotid, kes kaalusid esialgu ligikaudu 250-300 g, hoiti temperatuuri ja niiskuse kontrollitud keskkonnas 12 h valguse-pimedas tsüklis (tuled 7: 00 AM). Loomi toideti ja vett ad libitum alati, välja arvatud see, et neid hoiti sahharoosipelletite (85 mg, BioServ) käiguvahetuspraktika ajal 45% ulatuses nende vaba söötmiskaalust. Lever-pressikoolitus viidi läbi ventileeritud operatsioonikambrites (Med Associates, Georgia, VT), kuni omandamiskriteeriumid olid täidetud (100 pelletid 3i järjestikuste istungite jooksul) fikseeritud suhe 1 (FR1) tugevdamise ajakava alusel. Seejärel toideti loomi ad libitum vähemalt 24 h enne operatsiooni. Kirurgiale manustati rottidele atropiini (0.04 mg / kg, subkutaanne), et hingata hingamisteedesse ja krooniline eluruumiga kateeter sisestati parema jugulaarse veeni naatriumpentobarbitaali (50 mg / kg, IP) anesteesia all vastavalt eelnevalt avaldatud protseduuridele (Edwards et al. 2007). Pärast operatsiooni manustati rottidele infektsiooni vältimiseks penitsilliini (200,000 IU / kg, intramuskulaarne) süstimine ja kateetreid loputati iga päev 0.2 ml hepariniseeritud (20 IU / ml) bakteriostaatilise soolalahusega, mis sisaldas gentamütsiinsulfaati (0.33 mg / ml). Kõik katsemenetlused viidi läbi vastavalt Tervise Instituudile Laborite loomade hooldamise ja kasutamise juhendning need on heaks kiitnud UT Southwestern Medical Centeri institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee (IACUC).

Seadmed ja isekorraldus

Pärast 1-i taastumist operatsioonist jagati loomad mitmeks katserühmaks / ärajätmise aeg (Joonis 1A) ja tagastati operantide katsekambritele päevase istungi ajal, nagu eelnevalt \ tEdwards et al. 2007b). Töötlemata kontrollrühmas olevad rotid olid üksikud, neid hoiti igapäevaselt oma kodus puurides, ilma et nad oleksid iseseisvalt sattunud. Patsientidel, kes olid kokaiini iseseisvuse (CSA) rühmas, lubati vabatahtlikult manustada kokaiini (0.5 mg / kg / 50 μl infusiooni) fikseeritud suhtega 1 (FR1) ajakavas 4-i päevadel, mida korraldati 6-päevadel. / wk, kokku 18 päeva kohta. Iga aktiivse hoova vajutamine tekitas 2.5i kokaiini infusiooni, mis oli seotud valguskiirte valgustamisega aktiivse hoova kohal. Kogu valgus kustutati kokaiini infusiooni ajal ning pärast infusiooni oli 12.5i lisaaeg, kus majavalgustus jäi välja. Salvestati infusiooni ajal ja aegumise perioodil reageeriv hoob, kuid sellel ei olnud mingit mõju. Kambrites oli veel üks mitteaktiivne hoob, kuid sellele kangile reageerimine oli ilma tagajärgedeta. Kroonilise ike (CY) rottidel olid paarid, et aktiivselt ise manustada rotte, ja said passiivseid kokaiini infusioone kogustes ja ajalistes mustrites, mis olid identsed nende iseenesest manustavate partneritega. Ägeda ike (AY) rottidel olid ka kroonilise CSA rühma rottidega seotud paarid, kuid nad said kokaiini asemel passiivse soolalahuse infusiooni, kuni nad said esimese passiivse kokaiini infusiooni seansi esimeseks päevaks. aega. Lõpuks lasti Saline SA rühmal manustada soolalahust kogu aeg, et teha kindlaks võimalikud muutused, mis on seotud töötlemata kontrollidega võrreldes operatsiooni, testimise või muude eksperimentaalsete protseduuridega. AY ja CY rühmade võrdlusi kasutati, et tuvastada muutused cFos, FosB või ΔFosB reageerimisel ägeda ja kroonilise kokaiini kokkupuutega, samas kui CSA ja CY rühmi võrreldi, et tuvastada muutused cFos, FosB või ΔFosB ekspressioonis, mis olid konkreetselt seotud kokaiini kasuliku ja farmakoloogilise toimega. Kõigi uuringurühmade koe koguti kohe pärast lõplikku 4 h testiseanssi, et võrrelda kokaiini poolt indutseeritud cFose, FosB ja ΔFosB regulatsiooni, ning kokaiiniga indutseeritud muutuste püsivus määrati mõnede uuringurühmade jaoks, kus koe koguti 24 h või 3 pärast viimast testiseanssi. Kvantitatiivseid western blot- ja RT-PCR-protseduure kasutati striaatide alampiirkondade dissektsioonidel, et vältida võimalikke antikehade ristreaktiivsusega seotud probleeme ja parandada tundlikkuse tuvastamiseks muutusi.

Joonis 1  

A) ajakava, mis kujutab kokaiini manustamist ja äravõtmist (WD). Tahked jooned näitavad kokaiini infusiooni (0.5 mg / kg / infusioon) intravenoosset manustamist kroonilises kokaiini manustamises (CSA) ja kroonilises (CY) loomades kokku kokku ...

Kudede kogumine

Rotid surmati mikrolainekiirgusega, mis oli suunatud peapiirkonnale (5 kW, 1.5 s, Murimachi Kikai, Tokyo, Jaapan). Ajusid lõigati kiiresti ja jahutati ning tuuma accumbens (NAc) kesta, NAc südamiku ja caudate-putameni (CPu) kahepoolsed koopiad (14 gabariidid) saadi 1.5 mm koronaalsetest viiludest, lähtudes koordinaatidest, mis saadi Paxinos ja Watson (1998, illustreeritud Joonis 1B). Koeproovid homogeniseeriti ultraheliga lüüsipuhvris, mis sisaldas proteaasi ja fosfataasi inhibiitoreid. Seejärel keedeti homogenaate 5 min, asetati jääle ja seejärel analüüsiti Lowry poolt valgu kontsentratsioonide määramiseks. Seejärel jaotati homogenaadid 20 μg proovidesse ja säilitati -80 ° C juures kuni kasutamiseni.

Western blot

Kudeproovid kanti 12% polüakrüülamiidi geelidele eraldamiseks elektroforeesiga Tris / glütsiin / naatriumdodetsüülsulfaadi puhverdatud soolalahuses (TGS; Bio-Rad, Hercules, CA). Pärast eraldamist viidi proovid elektroforeesiga (250 mA 18 h-le) polüvinülideenfluoriidmembraanidele (PVDF; Amersham, Piscataway, NJ) ja seejärel blokeeriti 3% rasvata kuivpiimas ja 1 × Tris / Tween puhverdatud soolalahuses (TTBS; -Rad, Hercules, CA) üleöö 4 ° C juures. Seejärel inkubeeriti membraane 1is: primaarse Fra antikeha 1000i lahjenduses (soovitavalt Dr. Michael Iadarola, riiklik tervishoiuinstituut, Bethesda, MD) 3% piima / 1 × TTBS lahuses üleöö 4 ° C juures. 1 × TTBS-is (4-ajad, iga 15 min) ja inkubeeriti 1 × TTBS-is, mis sisaldas 1-i: 25000-i konjugeeritud kitse anti-küüliku sekundaarse antikeha 1-i lahjendust (Bio-Rad, Hercules, CA) XNUMX h-s toatemperatuuril temperatuur. Membraanid pesti uuesti ja seejärel töötati välja, kasutades Pierce Super Signal West Dura (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL) kemiluminestsents-vahendatud tuvastamist Hyperfilmil (ECL plus; Amersham). CFos, FosB ja ΔFosB valgu ribade lokaliseerimist on illustreeritud Joonis 1C. Selles uuringus otsustasime uurida ainult ΔFosB (st 35-37 kDa) stabiilselt ekspresseerunud vorme, sest need vormid kogunevad kroonilise uimastitarbimisega ja tekitavad sõltuvuse põhjustavat neuroplastikat.Nestler et al. 2001). Scion Image (Frederick, MD) kasutati ribade absoluutse immunoreaktiivsuse määramiseks ja skannerit kasutati filmide digitaalsete piltide tegemiseks. Pärast avastamist eemaldati membraanid ja prooviti uuesti β-tubuliini suhtes (1: 200000, Cell Signaling, Danvers, MA). F-seotud valkude taseme normaliseerimiseks kasutati β-tubuliini tasemeid laadimiskontrollina.

RT-PCR

FosB ja AFosB mRNA muutuste määramiseks kasutati kvantitatiivset RT-PCR-i (qRT-PCR) kohe ja kokaiini manustamise järgselt 24 h. Loomad eutaniseeriti kiire dekapitatsiooniga ja NAc tuum, NAc kest ja CPu isoleeriti kirjeldatud viisil (Täistera- et al. 2007; Bachtell et al. 2008). Üksikud proovid homogeniseeriti kohe RNA-STAT-60-s (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswood, TX) ja külmutati kuivjääl, kuni mRNA ekstraheeriti vastavalt tootja juhistele. Lühidalt lisati igale proovile kloroform ja vesikiht eraldati pärast tsentrifuugimist. Kogu mRNA sadestati isopropanooliga lineaarse akrüülamiidi juuresolekul (Ambion, Austin, TX). Proovid tsentrifuugiti ja ekstraheeritud mRNA graanulid pesti 70% etanooliga ja suspendeeriti uuesti DEPC vees. Kogu mRNA-d töödeldi DNAaasiga (Ambion, Foster City, CA) ja pöördtranskribeeriti cDNA-le juhuslike heksameeridega, kasutades Superscript III (Invitrogen, Carlsbad, CA). FosB, ΔFosB ja glütseraldehüüd-3-fosfaatdehüdrogenaasi (GAPDH) amplifitseerimiseks kasutatud praimerjärjestused olid 5'-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 'ja 5'-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3', 5'-AGGCAGAGGGGGGGGGGGGT Ja 3′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-5 ’ja 3′-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-5’. Tsükli künnised (cT) arvutati kolmekordsete reaktsioonide põhjal, kasutades amplifikatsioonikõvera teist tuletist. FosB ja ΔFosB cT väärtused normaliseeriti GAPDH cT väärtustega (ΔcT), kuna kokaiin ei reguleerinud GAPDH-d. Voldimuutused arvutati ΔΔcT meetodil, nagu on kirjeldatud varem (Applied Biosystems manual).

Statistiline analüüs

Iga valgu taset väljendati protsentuaalse muutusena töötlemata kontrollidest iga ajupiirkonna ja ajapunkti kohta ning uurimisrühmi võrreldi ühesuunalise dispersioonanalüüsiga (ANOVA), kusjuures olulisuse tase määrati p <0.05. Üldistele mõjudele järgnes post-hoc võrdlemine Fishersi LSD testidega. Kokaiini tarbimise ja valgusisalduse muutuste vahelisi seoseid hinnati lineaarse regressiooni abil.

Tulemused

CSA rühma loomadel, kellel lubati vabatahtlikult manustada kokaiini, ilmnesid SA (kolm korda nädalas 13-18) kolmanda nädala jooksul stabiilsed kokaiini eneseanalüüsid. SA viimase nädala jooksul oli CSA rottide ja nende CY partnerite keskmine kokaiini tarbimine 46.9 (± 1.8) mg / kg / päevas (vahemik: 37-60 mg / kg / päevas). Viimasel katsepäeval said CN rottid 0 h eemaldamise (WD) rühmas ise manustatud 44.5i (± 2.5) mg / kg kokaiini (vahemikus 25.5-57.5 mg / kg) ja sama koguse kokaiini CY-ga. ja AY partnerid.

ΔFosB valgu diferentsiaalne regulatsioon ajukiirkonna alampiirkondades pärast akuutset või kroonilist kokaiini

ΔFosB valgu diferentsiaalne regulatsioon leiti striatiaalsetes alampiirkondades vahetult pärast intravenoosset kokaiini manustamist 4 h (0 h WD). NAc kesta puhul põhjustas ainult krooniline kokaiin CSA ja CY rühmade olulist suurenemist (45-61%) võrreldes töötlemata kontrollidega (Joonis 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005). NAc südamikus leiti ΔFosB (41%) märkimisväärne suurenemine pärast ägeda kokkupuudet AY grupis (Joonis 2B, F4,60 = 17.04, p <0.001) ja veelgi suurem tõus (89–95%) leiti pärast kroonilist kokaiini. Erinevalt ΔFosB suurema kogunemisest NAc-s koos kroonilise kokaiini manustamisega näitas CPu ΔFosB sarnast suurenemist (86–102%) nii ägeda kui ka kroonilise kokaiini rühmas (Joonis 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001). Üheski striataalses alampiirkonnas ei erinenud ΔFosB suurenemine CSA ja CY rühmade vahel, mis näitab, et regulatsioon oli seotud kokaiini ekspositsiooniga, sõltumata tahtlikust kokaiini tarbimisest. ΔFosB regulatsioon püsis vähemalt 24 tundi pärast kroonilist kokaiini NAc-kestas (F2,32 = 5.19, p = 0.02), NAc tuum (F4,60 = 4.53, p = 0.02) ja CPu (F2,34 = 12.13, p <0.001), kuid naasis algtasemele 3 nädala pärast. Sarnane ΔFosB suurenemine leiti, kui kokaiinirühmi võrreldi Saline SA rühmaga, välja arvatud see, et AY loomade NAc-kesta väiksem tõus saavutas olulisuse võrreldes Saline SA-ga, kuid mitte töötlemata kontrollidega. Kuid loomadel, kes ise manustasid soolalahust kogu treeningu vältel, ei olnud märkimisväärset ΔFosB regulatsiooni võrreldes töötlemata kontrollidega, mis näitas, et ΔFosB reguleerimine oli tingitud kokaiinist ega tulenenud kirurgilistest ega testimisprotseduuridest.

Joonis 2  

ΔFosB reguleerimine kohe pärast kokaiini manustamist ja 24 h ja 3 nädalat WD. ΔFosB (35-37 kDa) taset väljendatakse kui keskmist ± SEM protsenti muutust töötlemata homecage kontrollidest (kontroll). Koe soolalahusest ...

Tolerantsus FosB valgu reguleerimise suhtes pärast kroonilist kokaiini

Erinevalt ΔFosB regulatsioonist põhjustas IV kokaiini manustamise ühekordne kokkupuude 4 h-ga oluliselt suurema FosB-valgu suurenemise kõigis 3-i striatuse alampiirkondades, kuid selle reaktsiooni oluline tolerantsus tekkis pärast kroonilist kokaiini manustamist. NAc kesta puhul suurenes FosB (260%) kohe pärast 4-i ägeda kokaiini manustamist AY-loomadel, kuid pärast CY- ja CSA-rühmade manustamist vähenesid need kroonilise manustamise järgselt (142-146%).Joonis 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001). Sarnane FosB suurenemine (295%) leiti AY loomade CPU-s, mis samuti vähenesid (135-159% -ni) pärast kroonilist kokaiini manustamist CY ja CSA rühmades (Joonis 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001). NAc südamikus põhjustas äge kokaiini manustamine AY loomadel vähem olulist FosB kasvu (164%) võrreldes teiste ajupiirkondadega; need kasvud olid siiski suuremad kui kroonilise manustamise järgselt (109–112%) CY ja CSA rühmades (Joonis 3B, F4,57 = 20.23, p <0.001). Nagu leiti ΔFosB-st, ei moduleeritud FosB reguleerimist pärast kroonilist kokaiini kokaiini tarbimise tahtliku kontrolliga. Kuid erinevalt ΔFosB-st ei suutnud FosB valgu suurenemine nii NAc kestas kui ka südamikus 24 tunni pärast püsida, ehkki jääkkasv (38-52%) püsis ka protsessoris (F2,32 = 3.590, p <0.05). FosB taset ei mõjutanud kirurgilised ega testimisprotseduurid soolalahusega isehakanud loomadel.

Joonis 3  

FosB reguleerimine kohe pärast kokaiini manustamist ja 24 h ja 3 nädalat WD. FosB (46-50 kDa) valgu taset väljendatakse kui keskmist ± SEM protsenti muutust töötlemata homecage kontrollidest (vt. Joonis 2 lühendid) ...

Nii FosB kui ka FosB mRNA induktsiooni nõrgendamine pärast kroonilist kokaiini

Intravenoosse kokaiini manustamise äge ekspositsioon 4 h-le andis samaväärse suurenemise (11-16 korda) ΔFosB mRNA-s NAc kesta (F3,19 = 15.82, p <0.001), NAc tuum (F3,19 = 13.275, p <0.001 ja protsessor (F3,11 = 5.78, p = 0.03), võrreldes Saline SA kontrollidega (0 h WD, Joonis 4A). Kuid see reaktsioon oli tugevalt pärsitud CY ja CSA rühmades pärast kroonilist kokaiini manustamist NAc kestas (3-4 korda), NAc südamikus (4 korda) ja CPu (3 korda). Hoolimata asjaolust, et akuutne IV kokaiini manustamine suurendas FosB valgu suhtes AFosB-d, põhjustas äge kokaiini manustamine suhteliselt madalama mRNA suurenemise FosB (4-9 korda) kui ΔFosB (11-16 korda) puhul kõigis 3-i striatüüpi alampiirkondades (Joonis 4B). See reaktsioon oli praktiliselt kaotatud pärast kroonilist kokaiini NAc kesta (F3,19 = 26.22, p <0.001) ja protsessor (F3,11 = 4.24, p <0.05), ehkki NAc tuuma CY ja CSA rühmades püsis väike, kuid märkimisväärne tõus (2 korda) (F3,19 = 11.10, p <0.001). Kokaiinist põhjustatud AFosB ja FosB suurenemist AY loomadel ei peetud 24 h WD-ga võrreldes sama Saline SA kontrollrühmaga. FosB ja ΔFosB mRNA taseme suhte edasine analüüs 0 h WD ajahetkel näitas, et kokaiini manustamine vähendas oluliselt FosB suhtelist kogust ΔFosB mRNA-ks NAc-kestas (F3,19 = 4.79, p = 0.02), NAc tuum (F3,19 = 4.49, p = 0.02) ja CPu (F3,11 = 5.59, p = 0.03) FosB isovormi suurema moodustumise tõttu ja olenemata olulisest tolerantsusest kokaiiniga indutseeritud vastusele mõlemas mRNAs pärast kroonilist manustamist (Joonis 4C). Nendes suhetes ei täheldatud olulist erinevust, kas kokaiin manustati iseenesest või võeti passiivselt läbi infusiooni ja FosB: ΔFosB suhtelised suhted olid kõigis kolmes aju piirkonnas normaliseerunud 24h WD ajapunkti järgi (andmeid ei ole näidatud).

Joonis 4  

FosB ja ΔFosB mRNA reguleerimine kohe pärast kokaiini manustamist ja 24 h WD-s. ΔFosB (A), FosB (B) ja FosB / AFosB transkriptide (C) transkriptide kvantitatiivne RT-PCR on väljendatud kui keskmine ± ...

Kokkuvõttes suurenenud tolerantsus kokaiini põhjustatud cFoside suhtes NAc-s

Vastupidiselt FosB geeniproduktide reguleerimisele, mis kujutasid endast kokaiini farmakoloogilist vastust sõltumata passiivsest või tahtevastasest manustamisest, mõjutas cFos reguleerimist NAc alampiirkondades tugevalt kokaiini eneseanalüüsi kontekst võrreldes loomadega, kes said kokaiini passiivsetel kokkutõmbunud infusioonidel. Kokaiini kokkupuude suurendas cFos valgu tasemeid (109-126%) nii NAc kesta kui ka akuutse või kroonilise manustamise korral AY ja CY rühmades (Joonis 5A-B). Kui kokaiini infusiooni manustati iseseisvalt manustatavates loomades vastusena, vähendati seda reaktsiooni (kuni 55%) NAc kesta (F4,60 = 9.14, p <0.001) ja ei suutnud oluliselt suurendada cFos-i NAc tuumas (F4,57 = 5.92, p <0.001). CPU-s tekkis tolerantsus kokaiini poolt indutseeritud cFoside suhtes kas kroonilise passiivse või tahtliku kokaiini manustamise korral (Joonis 5C) ja cFos indutseerimine AY loomadel (164%) vähenes (45-57%) nii CY kui ka CSA rühmades (F4,67 = 13.29, p <0.001), sarnaselt tolerantsuse arengule FosB valgu indutseerimisel kõigis 3 striataalses alampiirkonnas. Seega ilmnes tugevdusega seotud tolerantsus kokaiini poolt indutseeritud cFos-i suhtes spetsiifiliselt striatumi mesolimbilistes piirkondades. Kõigis kolmes striataalses piirkonnas ei leitud cFos-i suurenemist soolalahusega isehakanud loomadel ja see ei püsinud 3 tunni pärast WD-d.

Joonis 5  

CFoside reguleerimine kohe pärast kokaiini manustamist ja 24 h WD-s. CFose (52-58 kDa) valgu tase kontrollrottides (kontroll, Saline SA) rottidel, kes said passiivse kokaiiniga akuutselt (AY) või krooniliselt (CY), ja rottidel, kes läbisid ...

Kokaiini tarbimise, cFose ja ΔFosB vahelised seosed striatumi alampiirkondades

Kuna kokaiini enda manustamise kogused varieerusid individuaalsete loomade ja nende närimispartnerite vahel, võrdsime kokaiini tarbimise kogust cFos, FosB ja ΔFosB valgu tasemete indutseerimisega mitme lineaarse regressioonianalüüsi abil (vt Täiendav tabel 1 kõigi võimalike korrelatsioonide tulemuste kohta). Rottidel, kes said passiivse infusiooniga akuutset kokaiini manustamist, esinesid olulised korrelatsioonid kokaiini tarbimise ja cFos-i taseme vahel ning need suhted erinesid selja- ja kõhupiirkonna alampiirkondades. NAc südamikus korreleerus cFos indutseerimine vahetult pärast ägeda IV kokaiini manustamist 4 ht tugevalt ja negatiivselt kokaiini tarbimisega, samas kui sarnane, kuid ebaoluline suhe leiti NAc kesta (Joon. 6). Seevastu cFoside induktsioon korreleerus positiivselt kokaiini tarbimisega CPu-s. FosBi või ΔFosB kokaiini tarbimise (kas aktiivse või passiivse) ja valgu tasemete vahel ei täheldatud mingit olulist korrelatsiooni üheski striatumi allpiirkonnas. Siiski esines tugevalt positiivne korrelatsioon cfos ja ΔFosB taseme vahel NAc kestas 24 h pärast kokaiini, kuid ainult loomadel, kes said kokaiini tahtliku eneseanalüüsi kaudu (Joon. 7) ja hoolimata asjaolust, et üldist cFose taset ei muudetud 24 h WD juures. Sarnased suundumused (p <0.07) cFos ja ΔFosB valkude taseme vaheliste positiivsete korrelatsioonide jaoks leiti kohe pärast 4-tunnist kokaiini manustamist NAc südamikus ja esmakordselt kokaiini saanud loomade CPU-s (AY rühm).

Joonis 6  

Kokaiini tarbimise ja akuutse kokaiini (AY) järgse cFos-immuunreaktiivsuse vahelise piirkonna korrelatsioon. CFos-i immunoreaktiivsuse protsentuaalne suurenemine on negatiivne korrelatsioon kokaiini tarbimisega viimases seansis NAc südamikus (A) ja positiivselt korreleerunud ...
Joonis 7  

Märkimisväärne korrelatsioon cfos ja ΔFosB vahel NAc kestas iseseisvate loomade puhul. CFos-i immunoreaktiivsuse protsentuaalne tõus korreleerub positiivselt ΔFosB immunoreaktiivsusega pärast 24 h WD-d kokaiini manustamisel ise. ...

Arutelu

Käesolevas uuringus uurisime ägeda ja kroonilise intravenoosse kokaiini kokkupuute mõju või kroonilist iseeneslikku manustamist ΔFosB, FosB ja cFos taseme reguleerimisele NAc kesta, NAc südamiku ja CPu striatumi alampiirkondades. Varasemad uuringud on järjekindlalt leidnud, et ΔFosB suureneb alles pärast korduvat kokkupuudet ja mitte pärast ägeda kokaiini manustamist passiivse IP kokaiini süstimise teel (Loodan et al. 1994, Nye et al. 1995; Chen et al. 1995). Samamoodi leidsime, et krooniline IV kokaiini kokkupuude suurendas ΔFosB-d kõigis uuritud striatumi alampiirkondades, sõltumata sellest, kas seda manustati tahtlikult või passiivselt. Kuid suur erinevus võrreldes eelmiste uuringutega on see, et äge kokaiini manustamine suurendas ΔFosB valgu tasemeid nii NAc tuumas kui ka CPu-s ja lähenes NAc kesta tähtsusele. (p <0.1). Selle erinevuse üks võimalik seletus võib olla kokaiiniga kokkupuute annus ja / või kestus, kuna AY rühma rotid said ühe 4-tunnise seansi jooksul mitu IV kokaiini infusiooni, mille tulemuseks oli kokaiini kogu tarbimine vahemikus 25.5 kuni 57.5 ​​mg / kg üksikute loomade puhul, mis ületab palju annuseid 10–20 mg / kg, mida tavaliselt kasutatakse ühe boolus-IP-süstena (Loodan et al. 1994; Alltuulekülg et al. 2006). Lisaks manustati kokaiini otsesema IV manustamisviisi kaudu, mis tekitab kokaiini ja dopamiini suuremaid piigi aju tasemeid, mis püsivad kogu seansi vältel, samas kui need mõjud tavaliselt vähenevad tunni jooksul pärast IP süstimist (Bradberry, 2002). Seega sõltub FosB võime koguneda pärast ühekordset akuutset kokkupuudet kokaiiniga tõenäoliselt nii käesolevas uuringus kasutatud kokaiini stiimuli tugevusest kui ka kestusest. Igal juhul näitab järeldus, et ΔFosB võib koguneda pärast ühekordset kokaiiniga kokkupuudet, näitab, et ΔFosB võib avaldada oma toimeid kiiremini kui varem arvati, mis võib olla tingitud algsest iseenesest manustamisest.

Huvitav on see, et ΔFosB kogunemine erines kroonilise kokaiini manustamise ajal selja- ja vatsakese striatali piirkondades. NAc südamikus oli kohe pärast kroonilise manustamise viimast päeva (0 h WD) leitud ΔFosB kogus rohkem kui kaks korda suurem kui akuutse manustamise järgselt leitud kogus ja väiksem ΔFosB suurenemine NAc kestas saavutas tähtsuse alles pärast kroonilist manustamist , olenemata sellest, kas kokaiini manustati ise või manustati passiivselt. Kroonilise kokaiini manustamise suurenemine peegeldab tõenäoliselt väga stabiilse ΔFosB valgu kuhjumist, kuna need püsisid vähemalt 24 tundi pärast viimast kokkupuudet. Vastupidiselt sellele ei õnnestunud ΔFosB suure hulga suurenemine CPu-s eristada ägeda või kroonilise ekspositsiooniga, mis võib peegeldada selle aju piirkonna akuutse kokkupuute poolt tekitatud ülemmäära. Kuid isegi CPu-s soodustas AFosB valgu kogunemine tõenäoliselt püsivalt suurenenud AFosB tasemeid pärast kroonilist ekspositsiooni, kuna kokaiini poolt indutseeritud mRNA suhtes tekkis oluline tolerantsus kõikidel 3 aju piirkondadel kroonilise manustamisega.

IV kokaiini äge manustamine suurendas ka täispika FosB valgu taset, CPu ja NAc kest kasvas rohkem kui NAc tuum. Kuid FosB mRNA indutseeriti NAc-kestas peaaegu 10-kordselt ning CPu ja NAc-tuumas vähem kui 5-kordselt. Arenes märkimisväärne tolerantsus kokaiini võimele indutseerida kroonilise manustamise korral nii mRNA kui ka valku FosB jaoks, ehkki FosB valgu madalam induktsioon püsis ja võis potentsiaalselt konkureerida AP-1 seonduvate partnerite ΔFosB-ga. FosB / ΔFosB mRNA suhteline suhe vähenes ka ägeda kokaiini manustamise tõttu suhteliselt suurema ΔFosB induktsiooni tõttu, vastavalt varasematele amfetamiini kasutavatele aruannetele (Alibhai et al. 2007). Erinevalt varasematest korduvatest amfetamiinravi tulemustest jäi FosB / ΔFosB mRNA suhtelise suhte vähenemine ägeda kokaiiniga pärast kroonilist manustamist, mis peegeldas ΔFosB suhteliselt suuremat jääkinduktsiooni kui FosB.

Asjaolu, et ΔFosB tasemed suurenevad pärast isegi ägedaid kokaiine, kasutades inimese intravenoosseks manustamiseks tüüpilisemat manustamisviisi ja kestust, mõjutab oluliselt sõltuvusprotsessi. Seega võib AFosB kaasa aidata AP-1i seondumisaktiivsusele esialgse kokaiinitarbimisega, kui adekvaatseid annuseid manustati ise. Kuid FosB konkureeriks nii FosB kui ka cFosiga AP-1 sidumisaktiivsuse suhtes, mis viib allavoolu geeniekspressiooni ja neuroplastilisuse suhtes, mis erineb kroonilisest manustamisest, kui AFosB on kõrgendatud oluliselt vähenenud cFos ja FosB-ga. Seega võib ΔFosB-l pärast kroonilist kokaiini manustamist olla suurem toime nii suurema akumuleerumise tõttu ventralises striatumis kui ka AP-1-i siduvate partnerite vähenenud konkurentsi nii dorsaalses kui ka ventralises striatumis. Arvestades, et ΔFosB striat-spetsiifiline üleekspressioon suurendab kokaiini motivatsiooni (Colby et al. 2003) võib selline kiire FosB kogunemine esmase kokaiiniga kokkupuute ajal pikendada kokaiini tarbimist sõltuvusprotsessi väga varajases staadiumis. Veelgi enam, selline silmapaistev ja laialt levinud ΔFosB ekspressioon kogu striatumis koos ägeda ekspositsiooniga muudaks AP-1-i seondumisaktiivsust viisil, mis võib hõlbustada kompulsiivsete harjumuste teket dorsaalsete striatsioonide ahelate varase sidumise kaudu (Belin ja Everitt, 2008).

Arvestades ΔFosB isovormide stabiilsust, püsisid ΔFosB tasemed märkimisväärselt 24 tundi pärast viimast kokaiini manustamist, mis on kooskõlas eelnevate uuringutega, milles kasutati kroonilist intravenoosset kokaiini manustamist (Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Teistes uuringutes, kus kasutati IP kokaiini süstide passiivset katsetajat, leiti, et ΔFosB akumuleerumine võib püsida 1-2i võtmise nädalatel (Loodan et al. 1994; Brenhouse ja Stellar, 2006; Alltuulekülg et al. 2006), kuigi me ei leidnud tõendeid nende muutuste kohta 3 nädalat pärast kokaiini manustamise lõpetamist. Need uuringud näitavad koos, et ΔFosB akumuleerumine võib püsida suhteliselt lühikeste võõrutusperioodide (<3 nädalat) jooksul ja aidata otseselt kaasa kokaiini pidevale tarvitamisele, kuid ei pruugi otseselt soodustada pikaajalise võõrutamise suuremat tagasilanguse kalduvust. Siiski on D1-retseptorit sisaldavate striataalsete neuronite puhul tuvastatud ΔFosB immunoreaktiivsus pärast 30-päevast eemaldamist hiirte korduvast kokaiinist (Alltuulekülg et al. 2006). Selline rakuspetsiifiline proov võib olla tundlikum AFosB jääkide akumuleerumise suhtes kui käesolevas uuringus kasutatud kogu koe analüüs või võib-olla muutuvad AFosB muutused hiirtel kauem kui rottidel. Samuti on võimalik, et ΔFosB indutseerib transkriptsiooniliste sündmuste kaskaadi, mis viib pikaajalistesse morfoloogilistesse muutustesse, nagu dendriitide lülisamba moodustumine D1-i sisaldavatesse striataalsetesse neuronitesse (Alltuulekülg et al. 2006; Rägastik et al. 2010). Sellega seoses on pärast kroonilist kokaiini suurenenud mitmed ΔFosB sihtmärgid, sealhulgas Cdk5 ja NFkB, ning need tegurid võivad modelleerida tuuma accumbens'i ahelat muutuste kaudu neuronite struktuuris ja / või funktsioonis (Ang et al. 2001; Benavides ja Bibb, 2004; Nestler, 2008). Seega on võimalik, et pikaajaline ΔFosB akumuleerumine taganemise ajal ei ole vajalik selle pikaajaliseks mõjutamiseks uimastitarbimisele tulevikus või -nägijate käitumisele, vaid võib kujutada endast „molekulaarset lülitit”, mis käivitab mitmed rakulised protsessid, mis hõlbustavad üleminekut enam sõltuvuses olevad bioloogilised riigid (Nestler et al. 2001).

Tuurimuses leiti, et kokaiini vahendatud ΔFosB akumuleerumist ei mõjuta kokaiini tarbimise tahtlik kontroll iseenesest manustatavates loomades, mis on kooskõlas eelnevate uuringutega, milles kasutati immunohistokeemilisi protseduure ja mitmeid kuritarvitavaid ravimeid (Perotti et al. 2008; Pich et al. 1997). See näitab, et kokaiini indutseeritud AFosB ja FosB suurenemine on tõenäoliselt seotud kokaiini või teiste monoaminergiliste retseptorite allavoolu sündmuste farmakoloogilise vastusega. Erinevalt ΔFosB-st leidsime, et kokaiinist tingitud cFoside suhtes tolerantsuse kujunemist mõjutas oluliselt kokaiini tarbimise kontrollimine NAc-s, kuid mitte CPu-s. Seega ei esinenud NAc-s kokaiinist tingitud cFoside suhtes tolerantsust loomadel, kes said kroonilist kokkutõmbumisinfusiooni passiivselt kokaiini, võrreldes ägeda udusinfusiooniga.. Need leiud erinevad märkimisväärselt arvukatest aruannetest, et sigade psühhostimulantide poolt põhjustatud cFoside suhtes on tolerantsus, kui ravimeid antakse passiivse IP-süstimise teel (Loodan et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997; Alibhai et al. 2007). Arvestades, et tolerantsus cFos-i suhtes kokaiini omal manustamisel olevatel loomadel võrdub mitmete korduvate IP-süstidega uuringutega, võib kroonilise intravenoosse intravenoosse manustamise korral olla taluvus, mis võib olla seotud paljude ja ettearvamatute kokaiinisüstidega seotud stressiga (Goeders 1997). Tolerantsuse vähenemine pigem ventraalses kui dorsaalses striatumis oleks kooskõlas motiveerivate ja emotsionaalsete reaktsioonidega seotud limbiliste ahelate selektiivse mõjuga. Lisaks, kuigi kokaiini manustatavatel loomadel esines tolerantsus cFoside indutseerimise suhtes, jäi kohe pärast nende lõplikku eneseanalüüsi istungit NAc kesta oluliselt suurenenud cFos-valgu suurenemine N50% ja suundumus (p <0.1) cFos suurenenud ka südamikus. Selle lahknevuse põhjused peegeldavad tõenäoliselt erinevusi IP-süstimise ja mitme IV-infusiooni vahel 4 tunni jooksul, nagu eespool arutletud. CFoside jääkinduktsioon NAc-s pärast kroonilist kokaiini eneseannustamist on uudne leid, mis sunnib uuesti kaaluma selle rolli sõltuvusprotsessis, kus cFos-i, ΔFosB ja FosB sisaldavad AP-1 kompleksid eksisteerivad mingil määral pärast kroonilist kokkupuudet .

Arvestades hiljutisi tõendeid selle kohta, et cFos on reguleeritud otse ΔFosB akumuleerumisega seljastriatumis (Renthal et al. 2008) on huvitav, et CPu-s kokaiinist põhjustatud cFosid paralleelselt ΔFosB suurenemisega ägeda kokaiiniga kokkupuutega. Üheks võimaluseks on see, et ΔFosB akumulatsioon akuutse manustamisega toimub 4-i sessioonis liiga hilja, et mõjutada cFos-i induktsiooni, samal ajal kui selle esinemine 24 h pärast kokaiini manustamist krooniliselt ravitud loomadele takistab cFose indutseerimist järgneva kokaiiniga kokkupuute ajal. See idee on kooskõlas suundumusega (p = 0.067) mõõduka positiivse korrelatsiooni vahel cFos ja ΔFosB tasemete vahel CPu-s koos ägeda kokaiini manustamisega (0 h WD). See mõiste on kooskõlas ka tugeva positiivse korrelatsiooniga cFose indutseerimise ja kokaiini tarbimise vahel CPu-s akuutsete loomade puhul. Need tulemused viitavad sellele, et sarnaselt ΔFosB-le võib cFos-i vastus kajastada saadud kokaiini annust. Kuid NAc-s ei saa AFosB suurem akumuleerumine kroonilise kokkutõmbega kokaiini manustamisega arvesse võtta nende loomade cFos-vastuse tolerantsuse puudumist. Pealegi, kuigi tolerants cFos-induktsiooni suhtes ilmnes iseenesest manustatavatel loomadel, ei toeta tugev positiivne korrelatsioon cFos-i jääkide ja AFosB-taseme vahel NAc-kestas pärast 24 h väljumist cFos-i ja AFosB-i negatiivset koostoimet vatsakehas. Teine erinevus CPu andmetest on see, et NAF-südamikus olevad cFosid olid pigem negatiivse kui positiivse korrelatsiooniga kokaiini tarbimisega vahetult pärast ägeda kokaiini manustamist, mis võib peegeldada seansi jooksul toimuvat tahhüfülaksiat, mis tekib suurema doosiga kokkupuutel ventral striatumis.

Kokkuvõttes näitavad käesoleva uuringu tulemused, et cFos, FosB ja ΔFosB läbivad pärast ägeda ja kroonilise intravenoosset kokaiini manustamist selged piirkondlikud ekspressioonimustrid. Need ekspressioonimustrid sõltuvad ainulaadselt nii ravimi ekspositsiooni kestusest kui ka kogusest ning tolerantsus kokaiini poolt indutseeritud cFosidele sõltub suuresti kokaiini vabatahtlikust manustamisest. Tulemused näitavad ka, et ΔFosB võib koguneda nii ägeda kui ka kroonilise kokaiini manustamisega intravenoosse süstimise teel, toetades ideed, et ΔFosB akumulatsioon võib olla oluline varases protsessis, mis soodustab kokaiini otsivat käitumist ja aitab kaasa kokaiinisõltuvuse arengule. Lõppkokkuvõttes on oluline mõista, kuidas ΔFosB võib kaudselt mõjutada püsivat narkootikumide iha väljaviimisega suhteliselt lühiajaliste mõjude kaudu geeniekspressioonile kokaiini kasutamise ja varajase keeluaja jooksul. Püüded tuvastada erinevate allavoolu sihtmärkide ja nende mõju neuronaalsele morfoloogiale ja / või funktsioonile selgitavad lõpuks AFosB ja teiste Fosiga seotud antigeenide rolli sõltuvust tekitava käitumise väljendamisel.

Lisamaterjal

Supp tabel S1

Täiendav tabel 1. Lineaarsete regressioonianalüüside üldised korrelatsioonitulemused. Kolm vasakpoolset paneeli sisaldavad seost kokaiini tarbimise ja cFos (ülemine paneel), FosB (keskmine paneel) või ΔFosB (alumine paneel) tasemete vahel. Parempoolsed kolm paneeli sisaldavad korrelatsioone cFos ja ΔFosB (ülemine paneel), cFos ja FosB (keskmine paneel) ning FosB ja ΔFosB (alumine paneel) vahel. Iga üksiku analüüsi jaoks on näidatud suhtelised ajupiirkonnad ja WD ajapunktid koos vastavate r- ja p-väärtustega. * p <0.05, T0.1> p> 0.05.

Vajuta siia.(2.8M, tif)

Tunnustused

Autorid ei deklareeri selles töös huvide konflikti. Seda tööd toetasid NIH toetused DA 10460 ja DA 08227 ning Wesley Gillilandi professor biomeditsiiniuuringutes.

Kasutatud lühendid

  • Protsessor
  • caudate-putamen
  • NAc
  • tuum accumbens
  • AY
  • äge ike
  • CY
  • krooniline ike
  • CSA
  • kokaiini iseseisev manustamine
  • WD
  • tagasivõtmine
  • IV
  • intravenoosselt
  • IP
  • intraperitoneaalne.

viited

  • Alibhai IN, roheline TA, Potashkin JA, Nestler EJ. . \ T fosB ja ΔfosB mRNA ekspressioon: in vivo ja in vitro uuringud. Brain Res. 2007: 1143: 22 – 33. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Tuumafaktor-κB indutseerimine kroonilise kokaiini manustamisega tuumaklundides. J Neurochem. 2001: 79: 221 – 224. [PubMed]
  • Bachtell RK, Choi KH, Simmons DL, Falcon E, Monteggia LM, Neve LN, Self DW. GluR1i ekspressiooni roll tuumaklundides neuronites kokaiini sensibiliseerimisel ja kokaiini otsimisel. Eur J Neurosci. 2008: 27: 2229 – 2240. [PubMed]
  • Belin D, Everitt BJ. Kokaiini otsivad harjumused sõltuvad dopamiinist sõltuvast seeriaühendusest, mis seob ventraali dorsaalse striatumiga. Neuron. 2008: 57: 432 – 441. [PubMed]
  • Benavides DR, Bibb JA. Cdk5i roll narkootikumide kuritarvitamisel ja plastilisuses. Ann NY Acad Sci USA. 2004: 1025: 335 – 344. [PubMed]
  • Ben-Shahar O, Ahmed SH, Koob GF, Ettenberg A. Üleminek kontrollitud ravimist uimastitarbimisele on seotud sensibiliseerimise kadumisega. Brain Res. 2004: 995: 46 – 54. [PubMed]
  • Bradberry CW. Ekstratsellulaarse dopamiini dünaamika kokaiini ägeda ja kroonilise toime korral. Neuroteadlane. 2002: 8: 315 – 322. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos ja ΔFosB muutuvad erinevalt tuuma accumbens'i kestade erinevates alampiirkondades kokaiinitundlikel rottidel. Behav Neurosci. 2006: 137: 773 – 780. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. ΔFosB ja FosB-sarnaste valkude reguleerimine elektrokonvulsiivsete krampide ja kokaiiniga töötlemise teel. Mol Pharmacol. 1995: 48: 880 – 889. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kroonilised Fos-ga seotud antigeenid: AFosB stabiilsed variandid, mis on ajus esile kutsutud kroonilise raviga. J Neurosci. 1997: 17: 4933 – 4941. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB striatsiooniline rakutüübi spetsiifiline üleekspressioon suurendab kokaiini stimuleerimist. J Neurosci. 2003: 23: 2488 – 2493. [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW. Sõltuvusega seotud muudatused D-s1 ja D2 dopamiiniretseptori käitumuslikud reaktsioonid pärast kroonilist kokaiini enese manustamist. Neuropsychopharm. 2007a: 32: 354 – 366. [PubMed]
  • Edwards S, Graham DL, Bachtell RK, Self DW. Piirkonnaspetsiifiline tolerants kokaiiniga reguleeritud cAMP-sõltuva valgu fosforüülimise suhtes pärast kroonilist eneseanalüüsi. Eur J Neurosci. 2007b: 25: 2201 – 2213. [PubMed]
  • Goeders NE. Neuroendokriinne roll kokaiini tugevdamisel. Psychoneuroendocrinol. 1997: 22: 237 – 259. [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamiin ja kokaiin indutseerivad c-fos geeni spetsiifilist aktivatsiooni striosoomi-maatriksi sektsioonides ja striatumi limbilistes alajaotustes. Proc Natl Acad Sci USA. 1990: 87: 6912 – 6916. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, DiLeone RJ, Rios M, Self DW. Dünaamiline BDNF-i aktiivsus kokaiinitarbimises olevates tuumades suurendab eneserakendamist ja retsidiivi. Nat Neurosci. 2007: 10: 1029 – 1037. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Kroonilise kokaiini poolt reguleeritakse varase geeniekspressiooni ja AP-1i seondumist roti tuumas. Proc Natl Acad Sci USA. 1992: 89: 5764 – 5768. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Pikaajalise AP-1i kompleksi indutseerimine, mis koosneb muutunud Fos-tüüpi valkudest ajus kroonilise kokaiini ja teiste krooniliste ravimitega. Neuron. 1994: 13: 1235 – 1244. [PubMed]
  • Loodan, et BT. Kokaiin ja AP-1 transkriptsioonifaktori kompleks. Ann NY Acad Sci. 1998: 844: 1 – 6. [PubMed]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Dimerisatsioon ja transkriptsioonifaktori ΔFosB DNA-siduvad omadused. Biokeemia. 2007: 46: 8360 – 8372. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr jt. Transkriptsioonifaktori ΔFosB ekspressioon ajus kontrollib tundlikkust kokaiini suhtes. Loodus. 1999: 401: 272 – 276. [PubMed]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL. c-Fose väljendus, mis on seotud kokaiini otsiva käitumise taastamisega reageerivate tingimuslike tingimuste abil. Synapse. 2009: 63: 823 – 835. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Lee K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaiini poolt indutseeritud dendriitide selgroo moodustumine D1 ja D2 dopamiini retseptorit sisaldavatel keskmistel närvilistel neuronitel tuuma accumbensis. Proc Natl Acad Sci USA. 2006: 103: 3399 – 3404. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Histooni metüültransferaasi G9a oluline roll kokaiini põhjustatud plastilisuses. Teadus. 2010: 327: 213 – 216. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: molekulaarne lüliti aju pikaajaliseks kohanemiseks. Mol Brain Res. 2004: 132: 146 – 154. [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LTL, Palmer A, Marshall JF. Fos-valgu ekspressioon ja kokaiini otsivad käitumised rottidel pärast kokaiini omastamise keskkonda sattumist. J Neurosci. 2000: 20: 798 – 805. [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: püsiv molekulaarne lüliti sõltuvuse jaoks. Proc Natl Acad Sci USA. 2001: 98: 11042 – 11046. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Nestler EJ. Sõltuvuse transkriptsioonimehhanismid: ΔFosB roll. Phil Trans R Soc B. 2008: 363: 3245 – 3255. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakoloogilised uuringud kroonilise FOS-ga seotud antigeeni indutseerimise kohta kokaiiniga striatumis ja tuumasõlmedes. J. Pharmacol Exp Ther. 1995: 275: 1671 – 1680. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. ΔFosB indutseerimine tasuvusega seotud aju struktuurides pärast kroonilist stressi. J Neurosci. 2004: 24: 10594 – 10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, et al. OsFosB indutseerimise eritunnused ajus kuritarvitatavate ravimitega. Synapse. 2008: 62: 358 – 369. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson GC. Roti aju stereotaksilistes koordinaatides. 4th. New York: Academic Press; 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Nikotiini ja kokaiini sõltuvust tekitavate omaduste ühised närvialused. Teadus. 1997: 275: 83 – 86. [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I et al. ΔFosB vahendab epigeneetilist desensibiliseerimist c-fos geen pärast kroonilist amfetamiini ekspositsiooni. J Neurosci. 2008: 28: 7344 – 7349. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L et al. DeltaFosB mõju tuumakinnitusele on seotud loodusliku tasuga seotud käitumisega. 2008: 28: 10272 – 10277. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Noor ST, Porrino LJ, Iadarola MJ. Kokaiin indutseerib striaalt c-Fos-immunoreaktiivseid valke dopamiinergilise D kaudu1 retseptorid. Proc Natl Acad Sci USA. 1991: 88: 1291 – 1295. [PMC tasuta artikkel] [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos hõlbustavad kokaiini põhjustatud püsivate muutuste omandamist ja väljasuremist. J Neurosci. 2006: 26: 13287 – 13296. [PubMed]