Tagasivõtmine põhjustab FosB / osFosB ekspressiooni selged mustrid õlgnevates Šveitsi hiirtes, keda klassifitseeritakse tundlikeks ja resistentseteks etanooli poolt esilekutsutud lokomotoorse sensibiliseerimise suhtes (2014)

Märksõnad

• FosB;
• DeltaFosB;
• Lokomotoorne sensibiliseerimine;
• Tagasivõtmine;
• Käitumuslik varieeruvus;
• Hiired

1. Sissejuhatus

Praeguste uimastisõltuvuse praeguste neurobioloogiliste uuringute väljakutse on mõista neuronite plastilisuse mehhanisme, mis vahendavad üleminekut harrastuskasutuselt käitumise kontrolli kaotamisele narkootikumide otsimise ja narkootikumide võtmise üle. Üks tähtsamaid narkomaaniateooriaid, mida nimetatakse „sõltuvuse tumedaks küljeks”, viitab sellele, et impulsiivsus (positiivse tugevdamisega seotud) on kompulsiivsus (mis on seotud negatiivse tugevdamisega). See edenemine kokkukukkumise tsüklis hõlmab järgmisi olekuid: mure / ootused, mürgistus ja äravõtmine / negatiivne mõju (Koob ja Le Moal, 2005, Koob ja Le Moal, 2008 ja Koob ja Volkow, 2010). Sellest stsenaariumist lähtudes on uimastisõltuvuse uuringud keskendunud neurobioloogilistele mehhanismidele, mis on seotud nii ägeda kui ka pikaleveninud eemalviibimise negatiivsete emotsionaalsete seisunditega. Sõltuvalt narkomaania tumeda külje teooriast näib, et närvipiiridel on pikaajaline ja püsiv muutus, mille eesmärk on tasu piiramine. Kuid need plastilisuse muutused toovad kaasa negatiivse emotsionaalse seisundi, mis tekib siis, kui ravimile juurdepääs on takistatud. See mehhanism pakub tugevat motivatsiooni sõltuvuse loomiseks, samuti selle hooldamiseks (Koob ja Le Moal, 2005 ja Koob ja Le Moal, 2008).

Lokomotoorne sensibiliseerimine on kasulik loomamudel, mis põhineb asjaolul, et ravimite subjektiivse toime suurenemine nende korduval kokkupuutel on sarnane ravimi poolt põhjustatud stimulantide lokomotoorse toime suurenemisega (Vanderschuren ja Kalivas, 2000 ja Vanderschuren ja Pierce, 2010). Kuigi lokomotoorne sensibiliseerimine ei jäljenda mitut narkomaaniaga seotud käitumist, on selle ajalised morfoloogilised ja neurokeemilised tunnused paralleelsed nendega, mis viivad üleminekust puhkeotstarbelisest kasutusest narkomaaniale (Robinson ja Kolb, 1999, Vanderschuren ja Kalivas, 2000 ja Vanderschuren ja Pierce, 2010). Traditsiooniliselt sisaldab lokomotoorne sensibiliseerimisprotokoll kolm etappi: omandamine (korduv ravimi ekspositsioon), keeluaeg ja väljakutse (uus kokkupuude ravimiga pärast keeluaega). Kahjuks keskenduti enamikel uuringutel, mis kasutasid lokomotoorse sensibilisatsiooni, vaid omandamis- ja väljakutse faasi, mis katkestas ärajäämisperioodi.

On tõestatud, et korduv kokkupuude kuritarvitatavate ravimitega (Perrotti jt, 2008) ja krooniline stress (Perrotti jt, 2004) suurendab transkriptsioonifaktori fosB / deltafosB ekspressiooni kortikolimbilise süsteemis. FosB / DeltaFosB akumuleerumine nendes piirkondades on oletatavasti keskne roll stressile vastupidavuses (Berton et al., 2007 ja Vialou et al., 2010) ja kokaiini tasuv mõju (\ tHarris et al., 2007 ja Muschamp jt, 2012) etanool (Kaste et al., 2009 ja Li et al., 2010) ja opioidid (Zachariou et al., 2006 ja Solecki et al., 2008). Seetõttu on võimalik, et FosB / DeltaFosB moduleerib mõningaid etanoolist põhjustatud lokomotoorse sensibiliseerimisega seotud neuronite plastilisuse sündmusi, aga ka eemaldamist, mis põhjustab liikumis- ja sensibiliseerimise omandamisfaasi.

Tähelepanuväärne on see, et puhkeotstarbelisest kasutusest narkomaaniale üleminekul on täheldatud individuaalseid erinevusi (Flagel et al., 2009, George ja Koob, 2010 ja Swendsen ja Le Moal, 2011). Näiteks DBA / 2 J hiired on altimad reageerima etanooli poolt indutseeritud lokomotoorse sensibiliseerimisega kui C57BL / 6 J (Phillips et al., 1997 ja Melón ja Boehm, 2011a). Välismaal asuvate Šveitsi hiirte puhul kirjeldati esmalt etanooli poolt indutseeritud lokomotoorse sensibiliseerimise käitumuslikku varieeruvust Masur ja dos Santos (1988). Sellest ajast alates on muud uuringud näidanud olulisi neurokeemilisi omadusi, mis on seotud käitumusliku varieeruvusega etanoolist põhjustatud liikumis-tundlikkuse tekkimisel (Souza-Formigoni jt, 1999, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Quadros et al., 2002a ja Quadros et al., 2002b). Kuid need uuringud ei käsitlenud käitumusliku varieeruvuse mõju võõrutusperioodil pärast liikumisjärgse sensibiliseerimise omandamisetappi. Hiljutises uuringus kirjeldas meie laboratoorium märkimisväärset erinevust sensibiliseeritud ja sensibiliseerimata haritud Šveitsi hiirte vahel seoses 1 kannabinoidiretseptori (CB1R) ekspressiooniga kogu äraviimise ajal. Selles uuringus oli sensibiliseeritud (kuid mitte sensibiliseeritud hiirtel) suurenenud CB1R ekspressioon prefrontaalses ajukoores, ventralises tegmentaalses piirkonnas, amygdala, striatum ja hipokampuses (Coelhoso et al., 2013).

Arvestades Šveitsi tõugu hiirte väljakujunenud käitumise varieeruvust etanoolist põhjustatud lokomotoorse sensibiliseerimise osas ja et selle varieeruvusega kaasnevad hilisema eemaldamise ajal erinevad neurokeemilised tunnused, uuriti käesolevas uuringus FosB / DeltaFosB (18 h) ja pärast 5-päevast tagasivõtmist.

2. materjalid ja meetodid

2.1. Teemad

Kasutati isaseid Šveitsi Websteri hiiri (EPM-1 koloonia, São Paulo, SP, Brasiilia), mis tulid algselt Albino Swiss Websteri liinist, mis pärines Universidade Federal de São Paulo bioloogia ja meditsiini loomamudelite arenduskeskusest . Hiired olid testi alguses 12 nädala vanused (30–40 g). Kümnest hiirest koosnevad rühmad paigutati puitlaastudega voodritesse (10 × 40 × 34 cm). Kontrollitud temperatuuri (17–20 ° C) ja niiskuse (22%) kontrollitud loomakolooniat hoiti valguse / pimeduse tsüklil (50/12 h), tuled põlesid kell 12:07, hiire söögigraanulite ja kraaniveega libitum, välja arvatud testimise ajal. Hiiri hoiti sellistes pidamistingimustes vähemalt 00 päeva enne uimastiravi ja käitumistestide algust. Loomade hooldamine ja katselised protseduurid viidi läbi vastavalt protokollidele, mille kinnitas ülikooli loomade hooldamise ja kasutamise eetika komitee (protokolli number: 7/2043) vastavalt EL direktiivile 09/2010 / EL loomkatsete jaoks (http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2. Lokomotoorne sensibiliseerimine

Lokaalse liikumise sensibiliseerimise protokoll põhines varasemal uuringul meie enda laboris.Coelhoso et al., 2013). Protokolli alguses süstiti kõikidele loomadele intraperitoneaalselt (ip) soolalahust ja testiti neid 15 minuti jooksul automatiseeritud aktiivsuskarbis (Insight, Brasiilia), et tuvastada basaalliikumine. Kaks päeva hiljem süstiti loomadesse iga päev etanooli (2 g / kg, 15 massiprotsenti 0.9% NaCl, ip-EtOH rühm, N = 40) või soolalahust (sarnane maht, ip, - kontrollrühm, N = 12), 21 päeva jooksul. Kohe pärast 1., 7., 14. ja 21. süsti pandi loomad 15 minutiks tegevuspuuri. Horisontaalset liikumist igas olukorras mõõdeti käitumusliku analüüsi süsteemiga (Pan Lab, Hispaania). Ootuspäraselt ( Masur ja dos Santos, 1988 ja Coelhoso et al., 2013), käitumise varieeruvus liikumisaktiivsuses 21st'i omandamise päeval võimaldab meil jagada EtOH-rühma loomi 2-i alamrühmades: EtOH_High (võetud ülemise 30% -st jaotusest) ja EtOH_Low (võetud alamast 30% -st). levitamine). Seega lisati analüüsi ainult loomade 60%. See strateegia on identne nendega, mida kasutati uuringutes, milles uuriti individuaalset varieeruvust etanooli sensibiliseerimise paradigmas ( Masur ja dos Santos, 1988, Souza-Formigoni jt, 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 ja Coelhoso et al., 2013).

Pärast katserühmade määratlust viisime läbi kaks sõltumatut katset vastavalt keeluaegade ajalistele kriteeriumidele: (i) loomad, kellele anti soetamisfaas ja kes ohverdati pärast 2-tunnist võõrutusperioodi, ja (ii) loomad, kes allutati omandamisfaasile ja tapeti pärast 18-päevast tagasivõtmist. Nii hõlmas see uuring 5 eksperimentaalset rühma (kontroll, EtOH_High ja EtOH_Low), mis jagunesid kahte alarühma (3 tundi ja 2 päeva eemaldamist) (N = 6 alamrühma kohta). Nende kahe ajalise märgi valimine keeluperioodi jooksul tulenes FosB ja DeltaFosB ekspressiooni kineetilistest aspektidest pärast 18-tunnist tagasivõtmist (nagu on selgitatud aruteluosas) ja pärast 5-päevast tühistamist, tuginedes meie labori varasematele uuringutele uuris mõningaid neurokeemilisi omadusi seoses võõrutusperioodiga lokomotoorse sensibiliseerimise paradigmas ( Fallopa et al., 2012 ja Escosteguy-Neto jt, 2012). Lõpuks, korrelatsioonide teostamiseks lokomotoorse sensibiliseerimise ja FosB / DeltaFosB ekspressiooni vahel, arvutasime iga looma liikumisfunktsiooni sensibiliseerimise skoori valemiga: skoor = (Locomotion in the 21st Day - Locomotion in the 1st day) * 100 / Locomotion in 1. päev.

2.3. Immunohistokeemia

Pärast vastavat keeluaega anesteseeriti loomad sügavalt ketamiini (75 mg / kg, ip) ja ksülasiini (25 mg / kg, ip) sisaldava kokteiliga. Pärast sarvkesta refleksi kadumist perfusseeriti need transkardiaalselt 100 ml 0.1 M fosfaatpuhvri lahusega [fosfaatpuhverdatud soolalahus (PBS)], millele järgnes 100 ml 4% paraformaldehüüdi (PFA). Ajud eemaldati kohe pärast perfusiooni, neid hoiti 24 tundi PFA-s ja hoiti seejärel 30 tundi 48% sahharoosi / PBS lahuses. Seeriakoronaalsed sektsioonid (30 μm) lõigati külmutava mikrotoomi abil ja hoiti külmumisvastase lahuse sees, mida kasutati immunohistokeemilistes protseduurides vabalt hõljuva värvimisega.

Immunohistokeemia jaoks viidi läbi tavapärane avidiini – biotiini – immunoperoksidaasi tehnika. Kõigi katserühmade ajuosad kaasati samasse katsesse, neid töödeldi 3 minuti jooksul vesinikperoksüdaasiga (15%) ja pesti seejärel 30 minutit PBS-iga. Seejärel eksponeeriti kõiki sektsioone 30 minuti jooksul PBS-BSA-ga, 5%, et vältida mittespetsiifilisi reaktsioone. Seejärel inkubeeriti lõike üle küüliku primaarse antikeha anti-FosB / DeltaFosB (1: 3,000; Sigma Aldrich, St Louis, MO, USA, nr. Kass AV32519) PBS-T lahuses (30 ml PBS, 300 μl Triton) X-100). Seejärel inkubeeriti sektsioone toatemperatuuril 2 h biotinüülitud kitse küüliku vastases IgG sekundaarses antikehas (1: 600; Vector, Burlingame, CA, USA). Seejärel töödeldi sektsioone avidiini-biotiini kompleksiga (Vectastain ABC Standard kit; Vector, Burlingame, CA, USA) 90 minuti jooksul ja allutati nikliga intensiivistatud diaminobensidiini reaktsioonile. Etappide vahel loputati lõigud PBS-ga ja segati rotaatoril. Lõigud kinnitati želatiiniga kaetud slaididele, kuivatati, dehüdreeriti ja kaeti.

Analüüsiti järgmisi entsefalopiirkondi: prefrontaalne ajukoort [eesmine cingulatsioonikoor (Cg1), prelimbiline cortex (PrL) ja infralimbiline koor (IL)], motoorne ajukoor [primaarne (M1) ja sekundaarne (M2)], dorsal striatum [dorsomediaalne striatum ( DmS) ja dorsolateraalne striatum (DlS)], ventral striatum [tuuma accumbens südamik (Acbco) ja kest (Acbsh), ventral pallidum (VP)], hipokampus [Cornus Ammong 1 ja 3 püramiidkiht (vastavalt CA1 ja CA3), dentate gyrus (DG)], amygdala [basolateraalne tuum (BlA) ja tsentraalne tuum (CeA)], hüpotalamuse (VMH) ventromediaalne tuum ja ventral tegmental [anterior (VTAA) ja tagumised (VTAP)) osad ( Vaata Joonis 1). Arvutiga ühendatud Nikon Eclipse E200 mikroskoopi kasutati igast sektsioonist piltide hõivamiseks × 20 suurendusega. Kujutised salvestati .tiff arhiividena FosB / DeltaFosB immunoreaktiivsuse tagumise analüüsi jaoks. Immunoreaktiivsed rakud loendati, kasutades tarkvara ImageJ (NIH Image, Bethesda, MD, USA). Aju piirkonnad olid igal fotol piiritletud vastavalt The Stereotaxic Mouse Brain Atlas (Franklin ja Paxinos, 1997). Kuna mikroskoobiga tehtud fotomikrograafiad esindavad 2.5 × 10³ mm² 20-kordse suurendusega väljendatakse FosB / DeltaFosB-ga märgistatud rakkude kvantifitseerimist immunovärvivate rakkude keskmisena 2.5 × 10 kohta³ mm². EtOH rühmades saadud väärtused normaliseeriti kontrollväärtustele ja väljendati protsentides. (Kontroll = 100%).

2.4. Statistiline analüüs

Esialgu kasutati kõigi muutujate jaotuse normaalsuse kontrollimiseks Shapiro – Wilk. Käitumistulemusi analüüsiti ühepoolse ANOVA abil korduva mõõtmise jaoks, pidades faktoriks lokomotoorse sensibiliseerimise 5 perioodi: basaal, 1., 7., 14., 21. ja 18. päev. Histoloogilisi tulemusi analüüsiti kahepoolse ANOVA-ga, võttes arvesse teguritena: võõrutusperiood (5 tundi ja XNUMX päeva) ja katserühm (kontroll, EtOH_High ja EtOH_Low). Mitteparameetrilised muutujad standardiseeriti andmete skooriks, et vähendada andmete hajumist, ja rakendati seejärel kahesuunalises ANOVA-s, nagu eelnevalt kirjeldatud. Newman Keuls post-hoc kasutati vajadusel. Lõpuks uurisime võimalikke seoseid FosB / DeltaFosB positiivsete rakkude ja lokomotoorse sensibiliseerimise skooride vahel. Need korrelatsioonid arvutati ainult nende tuumade jaoks, kus oli leitud statistilisi erinevusi katserühmade vahel. Kuna need erinevused piirdusid viie päeva taganemisega (vt tulemuste osa), viitavad nendes korrelatsioonides käsitletud FosB / DeltaFosB väärtused sellele konkreetsele tühistamisajale. Kuna need erinevused piirdusid viie päeva taganemisega (vt tulemuste osa), viitavad selles korrelatsioonis vaadeldavad FosB / DeltaFosB väärtused sellele konkreetsele ärajäämise ajale. Olulisuse tasemeks määrati 5% (p <0.05).

3. Tulemused

3.1. Lokomotoorne sensibiliseerimine

ANOVA korduvate mõõtmiste puhul tuvastas grupiteguri olulisi erinevusi [F_(2,32) = 68.33, p <0.001], protokolli perioodil [F_(4,128) = 9.13, p <0.001] ja nende omavaheline interaktsioon [F_(8,128) = 13.34, p <0.001]. Basaalses liikumises ei olnud erinevusi ja mõlemal EtOH rühmal oli esimesel omandamispäeval liikumisvõime sarnane suurenemine võrreldes kontrollrühmaga (p <0.01). Kuid EtOH_High (kuid mitte EtOH_Low) suurendas liikumisaktiivsuse järkjärgulist suurenemist kogu omandamisetapi jooksul (p <0.01, võrreldes kontroll- ja EtOH_Low rühmadega, omandamise viimasel päeval; p <0.01 võrreldes liikumisaktiivsusega esimesel omandamispäeval) ( Joonis 2). Need andmed kinnitasid esialgse uuringu tulemusi. Masur ja dos Santos, 1988) ja meie eelmisest aruandest ( Coelhoso et al., 2013) etanoolist põhjustatud liikumishäireid põhjustanud tõrjutud Šveitsi hiirte käitumusliku varieeruvuse kohta.

3.2. FosB / DeltaFosB väljendus

FosB / DeltaFosB immunoreaktiivsuse illustreeriv fotomikrograafia on kujutatud Joonis 3 ja normaliseeritud väärtused on näidatud Joonis 4, Joonis 5, Joonis 6 ja Joonis 7. Kahesuunaline ANOVA tuvastas olulisi erinevusi M1, M2, DmS, DlS, Acbco, Acbsh, VP ja VTA-s (FosB / DeltaFosB immunoreaktiivsuse mittestandardiseeritud väärtuste ja kõikide struktuuride statistiliste analüüside kohta) Tabel Suppl1 ja Tabel 1vastavalt). Struktuurides, kus oli võimalik täheldada statistilisi erinevusi, oli FosB / DeltaFosB ekspressioonil neli erinevat mustrit. Esimeses, täheldatud M1 ja M2, suurenes etanooli eemaldamise viiendal päeval FosB / DeltaFosB ekspressioon ainult EtOH_High rühmas (võrreldes EtOH_High väärtustega 18 tundi pärast eemaldamist, samuti kontrolliga ja EtOH_Low rühmad 5 päeva taganemisel) (vt Joonis 4). Teises skeemis, mida täheldati VTAA-s, suurenes FosB / DeltaFosB ekspressioon 5-päevase etanooli eemaldamise korral ainult EtOH_Low rühmas (võrreldes EtOH_Low väärtustega 18 tundi pärast eemaldamist, samuti kontrollrühmaga 5 päeva pärast eemaldamist ) (vt Joonis 5). Kolmandas mustris, mida täheldati DmS, Acbco ja Acbsh puhul, kasvas FosB / DeltaFosB ekspressioon 5-päevase etanooli eemaldamise korral nii EtOH_High kui EtOH_Low rühmas (võrreldes nende vastavate väärtustega 18 h eemaldamise korral), kuid ainult EtOH_Low rühm erines kontrollrühmast (vt Joonis 6). Lõpuks, neljandas mustris, mida täheldati DlS-is ja VP-s, kasvas FosB / DeltaFosB ekspressioon 5-päevase etanooli eemaldamise korral nii EtOH_High kui EtOH_Low rühmas (võrreldes nende vastavate väärtustega 18 h eemaldamise ajal), kuigi see tõus oli statistiliselt ekspressiivsem EtOH_Low kui EtOH_High rühmas ja ainult EtOH_Low rühm erines kontrollrühmast (vt. Joonis 7).

Kinnitamaks, et muutused FosB / DeltaFosB ekspressioonis olid tingitud äravõtmisest, mitte etanooliga kokkupuutest, teostasime ülalmainitud tuumades korrelatsioone lokomotoorse sensibiliseerimise ja FosB / DeltaFosB immunomärgistatud rakkude vahel 5th väljumispäeval (M1, M2, Acbco, Acbsh, DmS, DlS, VP, VTAA). Nagu oodatud, ei täheldatud nende tuumade suhtes olulisi seoseid (M1 - r² = 0.027862, p = 0.987156; M2 - r² = 0.048538, p = 0.196646; Acbco - r² = 0.001920, p = 0.799669; Acbsh - r² = 0.006743, p = 0.633991; DmS - r² = 0.015880, p = 0.463960; DlS - r² = 0.023991, p = 0.914182; Asepresident - r² = 0.002210, p = 0.785443; VTAA - r² = 0.001482, p = 0.823630).

4. Arutelud

Käesolevas uuringus täheldatud tulemused näitavad, et FosB / DeltaFosB suurenenud ekspressioon, mis on täheldatud etanooli poolt põhjustatud lokomotoorse sensibiliseerimise paradigmas, on tõenäoliselt seotud pigem ärajätmisega kui kroonilise ravimiga. Sellegipoolest kaasnes liikumisharjumuste käitumise varieeruvus kõrvalekaldumise ajal FosB / DeltaFosB ekspressiooni selgete mudelitega. Liikuva koore, ventraalse tegmentaala ja striatumi roll liikumis- ja sensibiliseeriva paradigma omandamisel ja ekspressioonil on hästi teada (Vanderschuren ja Pierce, 2010). Lisaks on mesolimbilise raja dereguleerimine üks väljalülitusaja keskseid neurobioloogilisi tunnuseid koos laiendatud amygdala tekkega (Koob ja Le Moal, 2005 ja Koob ja Le Moal, 2008). Ainult vähesed uuringud uurisid lokomotoorse sensibiliseerimise paradigma võõrutusperioodi. Meie tulemused näitasid selle perioodi jooksul huvitavaid muutusi FosB / DeltaFosB ekspressioonis motoorses ajukoores, ventraalses tegmentaalses piirkonnas ja striatumis.

FosB cDNA kodeerib 33, 35 ja 37 kDa valkude ekspressiooni. Ägedate stiimulitega kokkupuude põhjustab tugevat 33- ja diskreetset 35- ja 37-kDa Fos-valgu induktsiooni. Selle tagajärjel on ägeda aktivatsiooni korral domineeriv FosB ekspressioon seotud 33 kDa-ga (McClung jt, 2004 ja Nestler, 2008). Nende valkude vahel on veel üks tähelepanuväärne erinevus: ainult 35–37 kDa valgud on väga stabiilsed isovormid. Selle kõrge stabiilsuse tõttu akumuleeruvad need FosB kärbitud vormid, mida nimetatakse ka DeltaFosB-deks, ja need väljenduvad tugevalt vastusena kroonilistele stiimulitele, nagu psühhotroopsed ravimid, kroonilised elektrokonvulsiivsed krambid ja stress (Kelz ja Nestler, 2000, Nestler jt, 2001 ja McClung jt, 2004). Selle tulemusena on DeltaFosB-d peetud püsivaks molekulaarseks lülitiks, mis vahendab pikaajalise neuraalse ja käitumusliku plastilisuse vorme. Huvitav on see, et elegantne uuring, milles kasutati hiire jooni, mis väljendavad erinevalt FosB ja DeltaFosB, näitasid, et FosB on stressi tolerantsuse suurendamiseks hädavajalik ja neutraliseerib ka korrelatsiooni psühhostimulandi poolt põhjustatud liikumishäirete ja DeltaFosB akumulatsiooni vahel striatumis (Ohnishi et al., 2011). Seetõttu võivad mõlemad valgud mängida olulist rolli käesolevas uuringus kasutatud katseprotokollis. On märkimisväärne, et kasutatud FosB antikeha tunneb ära nii FosB kui ka DeltaFosB. Kuna FosB langeb pärast ägedat stiimulit algtasemele 6 tunni jooksul (Nestler jt, 2001) ja DeltaFosB akumuleeruvad pärast korduvat ärritust, otsustasime loomad 18 tundi pärast omandamisfaasi ohverdada, et vältida etanooliga töötlemise võimalikke kõrvalekaldeid FosB ekspressiooni suhtes. Sellest hoolimata nimetame tehniliselt täpseks käesolevas uuringus FosB / DeltaFosB väljendit. On oluline märkida, et seda strateegiat on kasutatud teistes uuringutes, sealhulgas neis, kus kasutati sama siin kirjeldatud esmast antikeha (Conversi et al., 2008, Li et al., 2010, Flak et al., 2012 ja García-Pérez jt, 2012). Selle tulemusena arutame nende eksperimentaalsete piirangute kõrval ka meie tulemusi, arvestades DeltaFosB rolli neuronite plastilisuses.

On hästi tõestatud, et krooniline ravimi ekspositsioon suurendab FosB / DeltaFosB ekspressiooni mitmes aju piirkonnas (Nestler jt, 2001 ja Perrotti jt, 2008). Kummalisel kombel ei erinenud käesolevas uuringus ei sensibiliseeritud etanooliga ega sensibiliseerimata etanooliga hiired kroonilise soolalahusega töödeldud hiirtel FosB / DeltaFosB ekspressiooni osas 18 tundi pärast omandamisfaasi. Lisaks puudusid olulised korrelatsioonid FosB / DeltaFosB ekspressiooni ja lokomotoorse sensibiliseerimise skooride vahel. Seda lahknevust võiks vähemalt osaliselt seletada katseprotokollis leitud erinevustega. Näiteks etanooliga kokkupuudet arvesse võttes kasutati kahes uuringus kahte pudelivaba valiku paradigmat 15 vahelduva joomise ajal (Li et al., 2010) või 17 päeva jooksul automaatselt manustatava toitumisega täieliku vedela dieediga (kus loomad tarbivad etanooli annustes vahemikus 8 kuni 12 g / kg päevas)Perrotti jt, 2008). Teises uuringus, kuigi autorid viitavad kroonilisele ravile, koosnes protokoll ainult 4i etanooliga kokkupuutest (Ryabinin ja Wang, 1998). Niisiis, mujal kasutatud protokollid on täiesti erinevad siin kasutatutest, mis koosnesid 21-päevast töötlemist, kus eksperimentaator manustas igapäevaseid etanoolisüste. Vaatamata nendele erinevustele on mitmeid uuringuid, mis hõlmavad intraperitoneaalseid süste, mis teatavad FosB / DeltaFosB ekspressiooni suurenemisest pärast psühhostimulantide poolt põhjustatud lokomotoorse sensibiliseerimise protokolle (Brenhouse ja Stellar, 2006, Conversi et al., 2008 ja Vialou et al., 2012) ja opioidid (Kaplan et al., 2011). Kuid nendes uuringutes sisalduvad lokomotoorse sensibiliseerimise protokollid hõlmavad palju vähem kui 21i ravimi ekspositsioonid ja mõnes neist manustati ravimit vahelduvalt. Seevastu kasutasime meie protokolli eelmises uuringus kirjeldatud sama ravi, mis hõlmas 21i igapäevast etanooli süstimist.Masur ja dos Santos, 1988, Souza-Formigoni jt, 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011 ja Abrahão et al., 2012). On tõendeid, et kuigi krooniline kokaiini manustamine soodustab DeltaFosB ekspressiooni kuhjumist tuuma accumbensis, soodustab see ka tolerantsust DeltaFosB mRNA induktsiooni suhtes nii ventraalses kui ka seljajooksul (Larson et al., 2010). Seetõttu oletasime, et erinevused meie katserühmades omandamisetapis võivad olla tingitud tolerantsusest FosB / DeltaFosB induktsiooni suhtes, kuna käesolevas protokollis oli psühhostimulandi ja opioidide puhul kasutatud perioode suurem periood. teistes uuringutes.

Uuringud, mis kasutasid knockouti ja transgeenset hiirt, näitasid, et FosB mutant hiirtel on paranenud käitumuslik vastus kokaiinile, nagu stimulantide lokomotoorne toime ja konditsioneeritud kohtade eelistus. Lisaks puudub selles mutantses hiires nii basaal- kui ka kokaiin-indutseeritava DeltaFosB ekspressioon (Hiroi jt, 1997). Seevastu näitavad DeltaFosB indutseeritava üleekspressiooniga transgeensed hiired suuremat tundlikkust kokaiini ja morfiini kasuliku toime suhtes (Muschamp jt, 2012). Need tulemused andsid otsese tõendusmaterjali DeltaFosB ja tasulise protsessi vahelisest korrelatsioonist. Lisaks korduvale ravimi ekspositsioonile suurendab krooniline stress ka DeltaFosB ekspressiooni kortikolimbilistes ahelates (Perrotti jt, 2004). Huvitaval kombel on DeltaFosB üleekspresseerivad transgeensed hiired vähem tundlikud kappa-opioidagonisti pro-depressiivse toime suhtes, mis teadaolevalt põhjustavad närilistel düsfooriat ja stressitaolisi toimeid (Muschamp jt, 2012). Nii et preemiaprotsessi kõrval mängib DeltaFosB ka võtmerolli nähtuste emotsionaalsetes aspektides. Selle stsenaariumi korral võib võõrutamine põhjustada ka FosB / DeltaFosB ekspressiooni, kuna stress on ravimi võtmise põhikomponent. See perspektiiv on kooskõlas meie tulemustega, kuna FosB / DeltaFosB ekspressiooni ja sensibiliseerimisskooride vahel ei olnud korrelatsioone ning pealegi täheldati FosB / DeltaFosB ekspressiooni suurenemist alles loobumise viiendal päeval.

Huvitav on, et mõnes struktuuris täheldati FosB / DeltaFosB suurenemist nii EtOH_High kui ka EtOH_Low grupis, kuigi need olid endises rühmas ekspressiivsemad, mis viitab sellele, et nende suurenemine võib sõltuvalt nende intensiivsusest omada erinevaid funktsionaalseid tagajärgi. Seda hüpoteesi võib seletada FosB / DeltaFosB mitme erineva funktsionaalse rolliga. Näiteks olid kokaiiniga krooniliselt eksponeeritud rotid suurenenud DeltaFosB ekspressiooni tuuma akumuleerumisperioodil, mõju oli korrelatsioonis kokaiini eelistustega, kuid negatiivselt uudsuse eelistusega. Peale selle suurendab tühistamise ajal tekkinud stress käitumisreaktsiooni psühhostimulantidele, suurendades DeltaFosB ekspressiooni kortikolimbilistes neuronites (Nikulina et al., 2012). Niisiis võiks DeltaFosB ennustada pikaajalise tagasivõtmise ajal tekkivat hedoonilise töötlemise reguleerimist (Marttila jt, 2007). Teisest küljest on nii vastupidavus stressile kui antidepressantidele seotud suurema DeltaFosB ekspressiooniga striatumis (Vialou et al., 2010). Seetõttu spekuleerime, et FosB / DeltaFosB suurenemine striatumil EtOH_High-s oleks võinud suurendada etanooli rahuldavat mõju, andes suurema vastuvõtlikkuse järgnevate ravimite ekspositsioonidele. Teisest küljest oleks FOSB / DeltaFosB intensiivsem suurenemine EtOH-rühmas täheldatud tundlikkuse vähendamiseks nii düspooria kui ka stressimõjude suhtes, minimeerides järgneva ravimi ekspositsiooni negatiivseid tugevdavaid mõjusid ja sel viisil seletades suuremat resistentsust selles Grupp. Huvitav on see, et paradoksil oli neurokeemiline alus. Näiteks oli transgeensetel hiirtel, kes olid üleekspresseerinud FosB-d keskmistes selgroo GABAergilistes tuumaklundide neuronites, suurenenud nii muu- kui ka kapa-opioidiretseptorite tase (Sim-Selley et al., 2011) ja need retseptorid suurendavad ja inhibeerivad mesolimbilist tooni (Manzanares et al., 1991 ja Devine et al., 1993). Lisaks võib rakutüübi ekspressioon samuti oluliselt suurendada FosB / DeltaFosB suurenenud funktsionaalseid tagajärgi. Elegantses uuringus, milles kasutati D1-i või D2-i ekspresseerivaid DeltaFosB-d üleekspresseerivaid hiiri, selgus, et DUMNUMX- (kuid mitte D1-) neuronites DeltaFosB suurendab käitumisvastaseid reaktsioone kokaiinile (Grueter et al., 2013).

Kummalisel kombel suurenes motoorse ajukoorega FosB / DeltaFosB ekspressioon ainult EtOH_High rühmas ja see piirdus 5. eemaldamise päevaga. Võõrutamise suurenemise puudumist 18. tunnil võib seletada FosB / DeltaFosB ekspressiooni võimaliku tolerantsusmehhanismiga selles piirkonnas pärast kroonilist etanooliga kokkupuudet. Lisaks näitavad meie tulemused, et võõrutusperioodil on motoorses ajukoores aktiivsed neurokeemilised muutused, hoolimata asjaolust, et loomadega sel perioodil ei manipuleeritud. See on huvitav, sest see plastilisus võiks vähemalt osaliselt mängida rolli liikumisvastase sensibiliseerimise säilitamisel. Ehkki püsivat hüperlokomotsiooni pärast mitmepäevast tühistamist siin ei uuritud, on mitmeid uuringuid, sealhulgas varasemaid meie laboratooriumist, mis näitavad, et sensibiliseeritud hiirtel (kuid mitte sensibiliseerimata) oli pärast teatud keeluaega etanooliga kokkupuutel suurenenud liikuvusMasur ja dos Santos, 1988, Souza-Formigoni jt, 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Fallopa et al., 2012 ja Coelhoso et al., 2013).

Lõpuks on tähelepanuväärne, et ainult EtOH_Low rühm näitas suurenenud FosB / DeltaFosB ekspressiooni ventraalse tegmentaala eesmises (kuid mitte tagumises) osas. Neil osadel on erinevad prognoosid ja neurokeemilised profiilid ning nende osalemine tasustamisprotsessis sõltub mitmest tegurist (Ikemoto, 2007). Näiteks on rottide etanooli ise manustamine seotud tagumise, kuid mitte ventraalse tegmentaalse piirkonna ventraalse osaga (Rodd-Henricks et al., 2000 ja Rodd et al., 2004). Lisaks on endokannabinoidisüsteemil, samuti GABA-A-l, dopaminergilistel D1-D3-i ja serotoniinergilistel 5HT3-i retseptoritel oluline osa etanooli otsimise käitumises (Linsenbardt ja Boehm, 2009, Rodd et al., 2010, Melón ja Boehm, 2011b ja Hauser jt, 2011). Siiski on GABA-B ventraalse tegmentaala eesmises osas oluline tasustamise (Moore ja Boehm, 2009) ja stimulantide lokomotoorne toime (\ tBoehm et al., 2002) etanooli. Lisaks osalevad eesmises osas kolinergilised nikotiiniretseptorid etanooliga indutseeritud suurenenud dopamiini tasemeid (Ericson et al., 2008). Seega, olenemata nende osade erinevatest profiilidest, on võimalik, et EtOH_Low rühmas esinenud muutused eesmises osas võivad olla seotud rahuldava protsessiga. Krooniline kokaiin, kuid mitte krooniline morfiin või krooniline stress, suurendab deltaFosB-d ventraalses tegmentaalses piirkonnas, eriti gamma-aminovõihappe (GABA) rakupopulatsioonis (Perrotti jt, 2005). See fakt võib seletada FosB / DeltaFosB normaalseid tasemeid kogu eemaldamise ajal, mis esines EtOH_High hiirte ventraalses tegmentaalses piirkonnas, sõltumata oletatavast kõrgest stressikogemusest sel perioodil. Lisaks kinnitavad need andmed vähemalt osaliselt hüpoteesi, et FosB / DeltaFosB ekspressiooni suurenemist kogu eemaldamise ajal EtOH_Low-s võib iseloomustada kui adaptiivset vastust.

Vabatahtlikust kasutamisest narkomaaniale üleminekul täheldatud individuaalsed erinevused on märkimisväärsed (Flagel et al., 2009, George ja Koob, 2010 ja Swendsen ja Le Moal, 2011). Selle tulemusena on hädavajalik uurida individuaalse varieeruvusega seotud neurobioloogilisi tunnuseid. Käitumise sensibiliseerimine on loommudel, mida tavaliselt kasutatakse narkomaania neurobioloogiliste tunnuste uurimiseks. Selle mudeli aluseks on see, et ravimite subjektiivsed mõjud suurenevad nende korduval kokkupuutel. Pärast liikumise ja liikumise sensibiliseerimist on pikaajaline kestus ja see on otseselt ajaliselt seotud mesolimbilise raja morfoloogiliste ja neurokeemiliste muutustega ning mitmete emotsionaalsuse ja motoorse käitumisega seotud entsefaloloogiliste tuumadega.Robinson ja Kolb, 1999 ja Vanderschuren ja Pierce, 2010). Pioneeri läbiviidud uuring Masur ja dos Santos (1988) demonstreeris, et varjatud Šveitsi hiirtel esineb etanoolist põhjustatud liikumishäirete suhtes suur käitumuslik varieeruvus. Sellest ajast alates on teised uuringud näidanud olulist seost neurokeemiliste omaduste ja käitumusliku varieeruvuse vahel, peamiselt need, mis on seotud dopamiinergiliste omadustega (Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 ja Souza-Formigoni jt, 1999) ja glutamaatergilised süsteemid (\ tQuadros et al., 2002a ja Quadros et al., 2002b). Lisaks näitas meie laboratooriumi eelmine uuring, milles kasutati etanooli poolt indutseeritud lokomotoorse sensibiliseerimise paradigmat, et sensibiliseeritud (kuid mitte-sensibiliseeritud) hiirtel täheldati ärajäämise ajal märkimisväärset 1-tüüpi kannabinoidiretseptori (CB1R) kasvu.Coelhoso et al., 2013). Siin me tuvastasime FosB / DeltaFosB ekspressiooni erinevad mustrid EtOH_High ja EtOH_Low gruppide vahel.

Kokkuvõttes kaasneb etanooli poolt indutseeritud lokomotoorse sensibiliseerimise omandamisfaasis täheldatud käitumuslik varieeruvus selgesõnalise neuronaalse plastilisusega väljumisaja jooksul. Huvitav on see, et meie tulemused näitavad, et sensibiliseeritud ja sensibiliseerimata hiirtel tuvastatud FosB / DeltaFosB ekspressiooni erinevad mustrid on pigem seotud keeluaegaga kui kroonilise ravimi eksponeerimisega, mis on tõenäoliselt tingitud ravimi poolt indutseeritud FosB / DeltaFosB transkriptsiooni tolerantsusest.

Järgmised on käesoleva artikliga seotud täiendavad andmed.

viited

• Nikulina et al., 2012
• EM Nikulina, MJ Lacagnina, S. Fanous, J. Wang, RP Hammer Jr.
• Vahelduv sotsiaalne löögi stress suurendab mesokortikolimbilist ΔFosB / BDNF koosekspressiooni ja aktiveerib püsivalt kortikostermaalsed neuronid: mõju psühhostimulantide haavatavusele
• Neuroteadus, 212 (2012), lk 38 – 48
• Artikkel

  |

   PDF (1552 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (12)
•  
• Vialou et al., 2012
• V. Vialou, J. Feng, AJ Robison, SM Ku, D. Ferguson, KN Scobie, et al.
• ΔFosB kokaiini indutseerimiseks on mõlemad vajalikud seerumi reaktsiooniteguri ja cAMP-vastuse elementi siduva valgu jaoks
• J Neurosci, 32 (2012), lk 7577 – 7584
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (17)
• Vanderschuren ja Pierce, 2010
• LJ Vanderschuren, RC Pierce
• Sensibiliseerimisprotsessid narkomaanias
• Curr Top Behav Neurosci, 3 (2010), lk 179 – 195
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (53)
• Vanderschuren ja Kalivas, 2000
• LJ Vanderschuren, PW Kalivas
• Dopamiinergilise ja glutamatergilise ülekande muutused käitumusliku sensibiliseerimise indutseerimisel ja ekspressioonil: prekliiniliste uuringute kriitiline ülevaade
• Psühhofarmakoloogia (Berl), 151 (2000), lk 99 – 120
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (884)
• Swendsen ja Le Moal, 2011
• J. Swendsen, M. Le Moal
• Individuaalne haavatavus sõltuvusele
• Ann NY Acad Sci, 1216 (2011), lk 73 – 85
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (35)
• Souza-Formigoni jt, 1999
• ML Souza-Formigoni, EM De Lucca, DC Hipólide, SC Enns, MG Oliveira, JN Nobrega
• Sensibiliseerimine etanooli stimuleeriva toimega on seotud aju D2 retseptori seondumise lokaliseeritud suurenemisega
• Psühhofarmakoloogia, 146 (1999), lk 262 – 267
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (54)
• Solecki et al., 2008
• W. Solecki, T. Krowka, J. Kubik, L. Kaczmarek, R. Przewlocki
• FosB roll morfiini tasu ja ruumilise mäluga seotud käitumises
• Behav Brain Res, 190 (2008), lk 212 – 217
• Artikkel

  |

   PDF (328 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (7)
• Sim-Selley et al., 2011
• LJ Sim-Selley, MP Cassidy, A. Sparta, V. Zachariou, EJ Nestler, DE Selley
• ΔFosB üleekspressiooni mõju opioididele ja kannabinoidiretseptorite vahendatud signaaliülekannetele tuumaklundides
• Neurofarmakoloogia, 61 (2011), lk 1470 – 1476
• Artikkel

  |

   PDF (446 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (10)
• Ryabinin ja Wang, 1998
• AE Ryabinin, YM Wang
• Korduv alkoholi manustamine mõjutab c-Fos ja FosB valgu immunoreaktiivsust DBA / 2 J hiirtel erinevalt
• Alkoholiklassi Exp Res, 22 (1998), lk 1646 – 1654
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (33)
• Rodd-Henricks et al., 2000
• ZA Rodd-Henricks, DL McKinzie, RS Crile, JM Murphy, WJ McBride
• Piirkonna heterogeensus etanooli intrakraniaalse eneseanalüüsi puhul naissoost Wistar rottide ventralises tegmentaalses piirkonnas
• Psühhofarmakoloogia (Berl), 149 (2000), lk 217 – 224
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (130)
• Rodd et al., 2010
• ZA Rodd, RL Bell, SM Oster, JE Toalston, TJ Pommer, WJ McBride, et al.
• Serotoniin-3 retseptorid tagumises ventralises tegmentaalses piirkonnas reguleerivad alkoholi eelistavate (P) rottide etanooli enese manustamist
• Alkohol, 44 (2010), lk 245 – 255
• Artikkel

  |

   PDF (604 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (19)
• Rodd et al., 2004
• ZA Rodd, RI Melendez, RL Bell, KA Kuc, Y. Zhang, JM Murphy, et al.
• Etanooli intrakraniaalne eneseanalüüs isaste Wistari rottide ventralisse tegmentaalsesse piirkonda: tõendid dopamiini neuronite kaasamise kohta
• J Neurosci, 24 (2004), lk 1050 – 1057
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (111)
• Robinson ja Kolb, 1999
• TE Robinson, B. Kolb
• Dendriitide ja dendriitrakkude morfoloogia muutused tuuma accumbensis ja prefrontaalses ajukoores pärast korduvat ravi amfetamiini või kokaiiniga
• Eur J Neurosci, 11 (1999), lk 1598 – 1604
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (427)
• Quadros et al., 2002b
• IM Quadros, JN Nóbrega, DC Hipolide, EM de Lucca, ML Souza-Formigoni
• Erinev kalduvus etanooli sensibiliseerimiseks ei ole seotud hiire aju D1 retseptorite või dopamiini transportijate muutumisega.
• Addic Biol, 7 (2002), lk 291 – 299
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (21)
• Quadros et al., 2002a
• IM Quadros, DC Hipólide, R. Frussa Filho, EM De Lucca, JN Nóbrega, ML Souza-Fomigoni
• Vastupidavus etanooli sensibiliseerimisele on seotud suurenenud NMDA retseptorite sidumisega konkreetsetes aju piirkondades
• Eur J Pharmacol, 442 (2002), lk 55-61
• Artikkel

  |

   PDF (128 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (36)
• Phillips et al., 1997
• TJ Phillips, AJ Roberts, CN Lessov
• Käitumise sensibiliseerimine etanooliga: stressi geneetika ja mõju
• Pharmacol Biochem Behav, 57 (1997), lk 487 – 493
• Artikkel

  |

   PDF (186 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (101)
• Perrotti jt, 2008
• LI Perrotti, RR Weaver, B. Robison, W. Renthal, I. Maze, S. Yazdani, et al.
• DeltaFosB indutseerimise eritunnused ajus kuritarvitatavate ravimitega
• Synapse, 62 (2008), lk 358 – 369
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (79)
• Perrotti jt, 2004
• LI Perrotti, Y. Hadeishi, PG Ulery, M. Barrot, L. Monteggia, RS Duman, et al.
• DeltaFosB indutseerimine tasuliste aju struktuuridega pärast kroonilist stressi
• J Neurosci, 24 (2004), lk 10594 – 10602
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (148)
• Perrotti jt, 2005
• LI Perrotti, CA Bolaños, KH Choi, SJ Russo, S. Edwards, PG Ulery, et al.
• DeltaFosB akumuleerub GABAergilise raku populatsioonis ventraalse tegmentaala tagaosas pärast psühhostimulantravi.
• Eur J Neurosci, 21 (2005), lk 2817 – 2824
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (85)
• Ohnishi et al., 2011
• YN Ohnishi, YH Ohnishi, M. Habad, H. Nomaru, K. Yamazaki, Y. Tominaga, et al.
• FosB on oluline stressitolerantsuse suurendamiseks ja antagoniseerib ΔFosB-i liikuvustundlikkust
• Biol Psychiatry, 70 (2011), lk 487 – 495
• Artikkel

  |

   PDF (2016 K)

  |

  Vaata kirjeid Scopuses

   | 

  Artiklite tsiteerimine (13)
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  
•  

• Vialou et al., 2010
• V. Vialou, AJ Robison, QC Laplant, HE Covington III, DM Dietz, YN Ohnishi, et al.
• DeltaFosB vahendab aju tasu ahelates vastupidavust stressile ja antidepressantidele
• Nat Neurosci, 13 (2010), lk 745 – 752
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (141)
•  
• Zachariou et al., 2006
• V. Zachariou, CA Bolanos, DE Selley, D. Theobald, MP Cassidy, MB Kelz, et al.
• DeltaFosB oluline roll morfiini toimel tuumasõlmedes
• Nat Neurosci, 9 (2006), lk 205 – 211
• Vaata kirjeid Scopuses

  |

  Full Text CrossRefi kaudu

   | 

  Artiklite tsiteerimine (138)

•  
• Korrespondentautor aadressil: Rua Cesário Mota Jr, 61, 12 andar, São Paulo, SP 01221-020, Brasiilia. Tel / faks: + 55 11 33312008.
• 1
• Need autorid osalesid võrdselt käesolevas uuringus.