J Neurochem. Jan 2014;128(1):173-85. doi: 10.1111/jnc.12381. Epub 2013 21 aug.
Liu QR1, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hoopje BT.
Abstract
Methamphetamine en oare medisinen aktivearje in lyts part fan alle neuroanen yn it harsens. Wy hawwe earder in fluorescence-aktivearre selsortering (FACS)-basearre metoade ûntwikkele om molekulêre feroarings te karakterisearjen dy't selektyf ynaktivearre neuroanen dy't de neuronale aktiviteitsmarker Fos uterje. Dizze metoade fereasket lykwols it sammeljen fan samples fan in protte rotten. Wy beskriuwe no in wizige FACS-basearre metoade om molekulêre feroaringen te karakterisearjen yn Fos-ekspresje dorsale striatale neuroanen fan in inkele rat mei in multiplex pre-amplifikaasjestrategy.
Fos en NeuN (in neuronale marker) immunohistochemistry jouwe oan dat 5-6% fan dorsale striatum neuroanen waarden aktivearre 90 min nei acute methamphetamine ynjeksjes (5 mg / kg, ip) wylst minder as 0.5% fan neuroanen waarden aktivearre troch saline ynjeksjes.
Wy brûkten FACS om NeuN-labele neuroanen te skieden yn Fos-positive en Fos-negative neuroanen en beoardiele mRNA-ekspresje mei RT-qPCR fan sa min as fiif Fos-positive neuroanen. Methamphetamine feroarsake 3-20-fâldige ferheging fan direkte iere genen arc, homer-2, c-fos, fosB, en syn isofoarmen (ΔfosB en in nije isofoarm ΔfosB-2) yn Fos-positive mar net Fos-negative neuroanen. Direkte iere gen-mRNA-ynduksje wie 10-fâld leger as ôfwêzich as beoardiele yn net-sortearre samples fan ienige dorsale striatum-homogenaten. Us wizige metoade makket it mooglik om unike molekulêre feroaringen te studearjen yn neuroanen aktivearre troch drugs of drugs-assosjearre oanwizings yn komplekse ferslavingsmodellen.
Methamphetamine en oare medisinen aktivearje in lyts part fan alle neuroanen yn it harsens. Wy rapportearje hjir in ferbettere metoade om molekulêre feroaringen te karakterisearjen dy't selektyf ynaktivearre neuroanen dy't de neuronale aktiviteitsmarker Fos uterje. Wy brûkten FACS tegearre mei rjochte PCR-pre-amplifikaasje om acute methamphetamine-induzearre gene-ekspresje te beoardieljen fan sa min as 5 Fos-ekspresje neuroanen út in single rat dorsale striatum. Methamphetamine feroarsake 3-20-fâldige ferheging fan direkte iere genen (IEG's) yn Fos-positive mar net Fos-negative neuroanen. Targeted PCR pre-amplification makket it mooglik om unike molekulêre feroarings te studearjen yn neuroanen aktivearre troch drugs of drugs-assosjearre oanwizings yn komplekse ferslavingsmodellen.
Publisearre 2013. Dit artikel is in wurk fan 'e Amerikaanske regearing en is yn it publike domein yn' e FS.
;