COMMENTI: primo esperimento che dimostra che la dopamina influisce sui livelli di DeltaFosb.
Eur J Neurosci. 1996 Feb; 8 (2): 365-81.
Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS.
Fonte
Dipartimento di Farmacologia, Università di Ottawa, Ottawa, Ontario, Canada K1H 8M5.
Astratto
Utilizzando un anticorpo che riconosce i prodotti di tutti i membri noti della famiglia fos di geni precoci immediati, è stato dimostrato che la distruzione della via nigrostriatale da parte di lesioni 6-idrossidopamina (6-OHDA) del fascio proencefalo mediale produce un prolungato (> 3 mesi) aumento dell'immunoreattività Fos-like nello striato. Utilizzando tecniche di tracciamento del tratto retrogrado, abbiamo precedentemente dimostrato che questo aumento dell'immunoreattività simile a Fos si trova prevalentemente nei neuroni striatali che proiettano al globo pallido. Nel presente studio, i Western blot sono stati eseguiti su estratti nucleari dallo striato intatto e denervato di ratti con lesioni 6-OHDA per determinare la natura delle proteine Fos-immunoreattive responsabili di questo aumento. Circa 6 settimane dopo la lesione 6-OHDA, l'espressione di due antigeni Fos-correlati con masse molecolari apparenti di 43 e 45 kDa è stata aumentata nello striato denervato. La somministrazione cronica di aloperidolo ha anche aumentato selettivamente l'espressione di questi antigeni Fos-correlati, suggerendo che la loro induzione dopo denervazione dopaminergica è mediata da una ridotta attivazione dei recettori dopaminergici D2-simili.
L'immunocolorazione con Western blot che utilizza un anticorpo che riconosce l'N-terminale di FosB ha indicato che gli antigeni 43 e 45 kDa Fos indotti dalla denervazione dopaminergica e dalla somministrazione cronica di aloperidolo possono essere correlati a una forma troncata di FosB nota come deltaFosB. Coerentemente con questa proposta, gli esperimenti di tracciamento retrogrado hanno confermato che l'immunoreattività deltaFosB nello striato deafferato era localizzata prevalentemente nei neuroni striatopallidali.
Esperimenti di gel shift hanno dimostrato che l'elevata attività di legame AP-1 negli strati denervati conteneva proteine simili a FosB, suggerendo che livelli di deltaFosB migliorati possono mediare alcuni degli effetti della deplezione prolungata della dopamina sui geni regolati da AP-1 nei neuroni striatopallidali. Al contrario, la somministrazione cronica dell'agonista del recettore DXXUMX simile a CY 1 ai ratti lesionati 208243-OHDA ha aumentato drasticamente l'immunoreattività deltaFosB nei neuroni striatali proiettandoli alla sostanza nera. L'immunocolorazione con Western blot ha rivelato che deltaFosB e, in misura minore, FosB sono elevati dalla somministrazione cronica di agonisti tipo D6. Sia la reazione a catena quantitativa della transcriptasi-polimerasi inversa che il test di protezione ribonucleasi hanno dimostrato che i livelli di mRNA deltafosB sono stati sostanzialmente migliorati nello striato denervato mediante somministrazione cronica di agonisti tipo D1.
Infine, abbiamo esaminato gli effetti della somministrazione cronica di agonisti dei recettori della dopamina D1-like e D2-like sull'espressione deltaFosB striatale nel modello di primati 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetraidropiridina (MPTP) della malattia di Parkinson . Nelle scimmie rese parkinsoniane dall'MPTP, si è verificato un modesto aumento delle proteine simili a deltaFosB, mentre lo sviluppo della discinesia prodotta dalla somministrazione cronica di agonisti D1 è stato accompagnato da grandi aumenti delle proteine simili a DeltaFosB. Al contrario, la somministrazione dell'agonista D2 a lunga durata d'azione cabergolina, che ha alleviato i sintomi parkinsoniani senza produrre discinesia, ha ridotto i livelli di deltaFosB quasi normali. Presi insieme, questi risultati dimostrano che alterazioni croniche nella neurotrasmissione dopaminergica producono un elevazione persistente di proteina simile al deltaFosB sia nel roditore che nel primato striato.
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