Подростки более уязвимы к зависимости от кокаина: поведенческие и электрофизиологические данные (2013)

 

  1. Микела Маринелли

+Показать филиалы

+ Авторские заметки

  • Нынешний адрес Дж. Э. Маккатчеона: Департамент психологии Иллинойского университета в Чикаго, Чикаго, штат Иллинойс 60607.

  • Вклады автора: разработанные WCW, JEM и MM исследования; WCW, KAF, NEP и MM провели исследования; WCW, KAF, NEP, JEM и MM проанализировали данные; WCW, JEM и MM написал статью.

  1. Журнал неврологии, 33(11): 4913-4922; doi: 10.1523/JNEUROSCI.1371-12.2013

Абстрактные

У людей подростковый возраст - это период повышенной склонности к развитию зависимости от кокаина. Неизвестно, связано ли это с более широким доступом и воздействием кокаина в этом возрасте или является ли подростковый мозг особенно уязвимым для аддиктивных свойств кокаина. Здесь мы подвергли мужчин-подростков (P42) и взрослых (~P88) крысам широкому спектру процедур самообслуживания кокаина. Кроме того, чтобы определить, связаны ли поведенческие различия с различиями в развитии дофаминергической активности, мы исследовали и манипулировали активностью нейронов допамина. По сравнению с взрослыми крысы-подростки чаще принимали кокаин, более чувствительны к более низким дозам, демонстрировали большую эскалацию потребления кокаина и были менее восприимчивы к повышению цены (т. Е. Были более «неэластичными»). Параллельно, подростки также показали повышенную активность дофаминовых нейронов вентральной тегментальной области, что, как известно, связано с повышенным самолечением. Фармакологическое манипулирование допамином D2 рецепторную функцию с квинпиролом (агонистом) или этиклопридом (антагонистом), чтобы изменить активность нейронов допамина, устраняли возрастные различия в самообмене кокаина. Эти данные свидетельствуют о причинно-следственной связи между поведенческими и электрофизиологическими детерминантами ответственности за зависимость от кокаина. В заключение, подростки демонстрируют поведенческие и электрофизиологические особенности повышенной ответственности за зависимость.

Введение

Подростковый возраст - это период повышенной склонности к развитию кокаиновой зависимости у людей (Kandel et al., 1992; Chambers et al., 2003; Johnston и др., 2011), что проявляется в более быстром прогрессировании заболевания и более тяжелых симптомах (Энтони и Петронис, 1995; Patton et al., 2004; Ребуссин и Энтони, 2006; Chen et al., 2009). Неясно, является ли такая повышенная восприимчивость результатом более высокого воздействия препарата и экспериментов или же подростки более чувствительны к аддиктивным свойствам кокаина. Определить это у людей сложно, потому что невозможно объяснить различия в возможностях употребления наркотиков на протяжении веков. В равной степени невозможно изучать использование кокаина в отсутствие небиологических факторов, таких как социально-экономические влияния на употребление наркотиков.

Используя модели на животных, мы можем изучать потребление наркотиков в условиях равного доступа к лекарственным средствам. Хотя ни одна поведенческая задача не может моделировать каждый элемент зависимости, различные процедуры самообслуживания могут моделировать конкретные аспекты употребления наркотиков (для обзора см. Линч и Кэрролл, 2001). Текущая литература показывает, что, по сравнению со взрослыми крысами, крысы-подростки принимают больше определенных наркотических средств (Schramm-Sapyta и др., 2009), таких как алкоголь (Doremus et al., 2005; Зигмунд и др., 2005), никотина и амфетамина (Левин и др., 2007; Шахбази и др., 2008). Однако исследования по кокаину противоречивы и, к сожалению, применяют только процедуры приема одной дозы. Некоторые исследования показывают, что подростки имеют большее потребление, чем взрослые (Анкер и Кэрролл, 2010; Schramm-Sapyta и др., 2011), тогда как другие показывают, что подростки и взрослые не отличаются (Лесли и др., 2004; Belluzzi и др., 2005; Frantz et al., 2007; Kantak et al., 2007; Kerstetter и Kantak, 2007; Harvey et al., 2009; Ли и Франц, 2009). Чтобы устранить эти расхождения, здесь мы использовали широкий спектр доз кокаина и процедуры самообслуживания для моделирования множественных размеров приема лекарств, а именно потребления и чувствительности [приобретение самообслуживания с использованием коротких (ShA) / long (LgA) процедуры доступа], эскалацию потребления и потребление кокаина в зависимости от цены (потребление кокаина при увеличении соотношения для получения препарата). Используя эти процедуры, мы обнаружили, что, по сравнению с взрослыми крысами, подростки-подростки проявляют повышенное поведение при самоконтроле кокаина.

Повышенное самообслуживание кокаина связано с повышенной активностью дофаминовых нейронов вентральной тегментальной области (VTA) у взрослых крыс (Маринелли и Уайт, 2000). Интересно, что активность дофаминовых нейронов также усиливается в подростковом возрасте (McCutcheon и Marinelli, 2009; McCutcheon и др., 2012). Мы стремились установить причинность между поведенческими и физиологическими показателями зависимости от наркомании путем введения лекарств, которые изменяют активность нейронов допамина во время самообслуживания кокаина. В частности, мы протестировали гипотезу о том, что снижение активности активированных дофаминовых нейронов у крыс-подростков будет снижать их повышенное потребление кокаина до уровней, наблюдаемых у взрослых; наоборот, увеличение активности дофаминовых нейронов у взрослых увеличит потребление кокаина до уровней, наблюдаемых у подростков.

Материалы и методы

Тематика

Самцов крыс Sprague Dawley получали из колонии Portage (Charles River). Они размещались три на клетку в течение 12 h светлого / темного цикла при постоянной температуре 22 ± 2 ° C и влажности 66% ± 25, с вволю доступ к продовольствию и воде в любое время. Подростковые крысы отнимали от груди в точно постнатальный день 21 (P21). Все крысы прибыли в vivarium за неделю ~1 перед началом экспериментов. Во время этого акклиматизации крыс обрабатывали по крайней мере один раз. Начало полового созревания определяли приблизительно от P35 до P44 с использованием метода балано-препуциального разделения (Колхо и др., 1988); это произошло примерно в P41. Все эксперименты длились 7-10 d, если они не были указаны, и были начаты, когда препубертатные подростки-крысы, послепубертатные подростки-крысы (называемые далее «крысами-подростками»), а взрослые крысы были в P35, P42 и P88 соответственно. Все исследования проводились во время темной фазы цикла свет / темнота, когда крысы активны. Исследования проводились в течение ~2 года.

Самообслуживание кокаина

Крысы, подвергшиеся испытанию на самообслуживание кокаина или наложенные им экспериментаторы, вводили внутривенную катетеризацию правой наружной яремной вены под анестезией с использованием изофлуранового газа (индукция 5%, обслуживание 2-3%). Силастичный катетер (10-12 мкл мертвого объема) прикреплялся к яремной вене и проходил подкожно, чтобы выйти из середины лопаточной области. Во время послеоперационного периода восстановления ~1 неделю катетер ежедневно промывали стерильным физиологическим раствором (100 мкл) для предотвращения засорения. За день до начала сеансов самолечения крысы помещали в камеры самообслуживания (41 × 24 cm floor area, 21 cm high, MED Associates) для привыкания к камерам для 1.5 h. Это было сделано, чтобы препятствовать поисковому поведению мешать поведению самоуправлений. В экспериментальном эксперименте мы отметили, что подростки-крысы исследовали камеру больше, чем взрослые, и что эта деятельность конкурировала с поведением самоуправляемости. Поэтому период привыкания устраняет эту предвзятость.

Камеры для самообслуживания были оснащены двумя отверстиями для носа, противоположными друг другу, расположенными на 2 см над полом в каждой из коротких сторон камеры. Камеры были установлены внутри звукоусиляющей камеры. Во время акклиматизации были закрыты отверстия для носа. Во время самоубийства нос, высунувшийся в одном из отверстий («активная» дыра), доставлял одну инфузию препарата (т. Е. Фиксированное отношение 1 (FR1); один носовой совок эквивалентен одной инфузии, если не указано иное]; это также привело к освещению света внутри активного отверстия для 10 s. Был период времени ожидания 10-30, чтобы предотвратить передозировку во всех экспериментах, за исключением эксперимента, который тестировал потребление как функцию увеличения отношения (цены), у которого не было таймаута. Нос, ткнувшийся в другую дыру («неактивный»), не имел последствий. Инфузии доставляли шприцевым насосом в объеме 200 мкл / кг (т. Е. 30 мкл для крысы 150 g) и скорости ~12 мкл / с. Количество носовых пиков и количество вливаний было собрано менеджером по расписанию программных пакетов MED Associates для Windows. Патентность катетеров тестировалась один раз на крысу с помощью Brevital (5 мг / кг, iv) в конце эксперимента; крысы, которые немедленно не реагировали на анестезию, были исключены из исследований. Таким образом, из исследований было исключено 18 крыс 455 (~4%).

Эксперимент 1: возрастные различия в приобретении самоуправлений

ША.

Разным когортам крыс было позволено самостоятельно вводить физиологический раствор или кокаин (75-1200 мкг / кг на инфузию) для 1.5 h ежедневно для 7-10 d. Эти дозы кокаина определяются как очень низкие (75 мкг / кг на инфузию), низкие (150 мкг / кг на инфузию), умеренно низкие (300 мкг / кг на инфузию), умеренные (600 мкг / кг на инфузию) и высокие (1200 мкг / кг на инфузию). Препубертатные подростки тестировали только в умеренно низкой дозе (300 мкг / кг на инфузию). Приобретение поведения с самоубийством с кокаином при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию) также тестировалось в отдельной когорте крыс с целью установления критерия приобретения.

LGA.

Чтобы изучить вопрос о приобретении препарата при ежедневном доступе к лекарственным средствам, отдельной когорте крыс было разрешено самостоятельно вводить кокаин для 6 h ежедневно в умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию) для 10 d.

Эксперимент 2: возрастные различия в эскалации самообслуживания кокаина

Отдельную когорту крыс сначала обучали самостоятельно вводить умеренную дозу кокаина (600 мкг / кг на инфузию) для 4 d (два раза в день, для восьми сеансов 1.5 h). Для установления эскалации требуются умеренно высокие дозыАхмед и Кооб, 1998; Mantsch et al., 2004). Поскольку потребление в умеренных дозах различалось между подростками и взрослыми (Рис 1), и это может повлиять на последующую эскалацию, мы сравнили количество потребления кокаина в возрасте в течение начальной фазы обучения. Для этого крысы удаляли из камер самообслуживания, как только они достигли инфузий 15-20, или после максимума 3 h. После фазы тренировки крысы подвергались эскалации. Для исследования эскалации крысам ежедневно тестировали 6 h ежедневно (LgA) или 1.5 h ежедневно (ShA) для 12 d.

Эксперимент 3: возрастные различия в потреблении кокаина в зависимости от цены

Отдельной когорте крыс было позволено самостоятельно вводить высокую дозу кокаина (1200 мкг / кг на инфузию) для 1.5 h ежедневно. Во время первого 2 d мы использовали FR1 (один носовой мешок эквивалентен одной инфузии). Затем фиксированное соотношение (то есть цена) увеличивалось через день (FR3, FR6, FR9, FR12 и FR24), так что крысы выполняли две сессии по каждой цене. Анализ проводился на второй сессии, когда крысы выполнялись по каждой цене. Количество самостоятельных инфузий (т. Е. Потребление) было установлено на кривой экспоненциального спроса, установленной Хуршем и Сильбербергом (2008; Хурш и Рома, 2013): журнал Q = log Q0 + k(e-α (Q0×C) - 1). Эта кривая используется для оценки уровня «мотивации» для потребления препарата (Hursh, 1993) и способ, с помощью которого потребление кокаина сопротивляется повышению цены (т. е. «эластичность спроса на кокаин») (Bickel и др., 2000). Таким образом, это считается хорошим методом оценки злоупотреблений (Hursh, 1993). Q представляет собой потребление (количество самовнусов) и Q0 это уровень потребления по самой низкой цене. C представляет собой цену (т. е. отношение) и k устанавливается на константу, которая учитывает предполагаемый диапазон потребления в логарифмических единицах (k = 0.91 в этих исследованиях). α называется «существенной ценностью» и представляет собой эластичность спроса на кокаин. Поведение считается «неупругим», когда потребление нечувствительно к цене (т. Е. Потребление сохраняется, несмотря на увеличение цены), и оно переключается на «эластичное», когда потребление чувствительно к цене (т. Е. Потребление снижается с ростом цены). Более крутое падение равно более эластичному поведению и большему α (Хурш и Сильберберг, 2008) относительно неупругого поведения. Используя это уравнение, мы можем вычислить PМакс, которая является ценой, при которой поведение сдвигается от неупругого к эластичному (Bickel и др., 2000).

Эксперимент 4: возрастные различия в уровнях кокаина и его метаболитов

Отдельной когорте крыс было позволено самостоятельно вводить умеренную дозу кокаина (600 мкг / кг на инфузию) для 1.5 h ежедневно для 2 d. Эти первоначальные сеансы самообслуживания (дни 1 и 2) были включены для сведения к минимуму любых нежелательных эффектов, вызванных последующими неконфликтными вскармливаниями кокаина (Twining и др., 2009). Затем крысы получили 21 компьютерные вливания кокаина во время 1.5 h ежедневных сеансов для следующего 5 d. Вливания доставляли с интервалом времени, каждый 1.5 мин для первых трех вливаний и каждые 5 мин для остальных. Цель этого проекта заключалась в том, чтобы имитировать сеанс самостоятельного администрирования, обеспечивая при этом равное воздействие кокаина на группы. В день испытания (день 7) крысы обезглавливали через 2 мин после получения последней вливания кокаина. Магистральную кровь собирали в пробирках 5 мл, содержащих фторид натрия (10 мг) и оксалат калия (8 мг); Затем пробирки хранили при -20 ° C. После извлечения и удаления мозжечка мозги замерзали на сухом льду и хранили при -80 ° C. Образцы были отправлены в Центр токсикологии человека штата Юта, где кокаин и метаболиты (бензоилконины, экгониновый этиловый эфир, норкокаин) измеряли с использованием жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (Lin et al., 2001, 2003).

в естественных условиях внеклеточная регистрация дофаминовых нейронов VTA

Отдельную когорту крыс анестезировали хлоральгидратом (400 мг / кг, ip). Боковая хвостовая вена была канюлирована для внутривенного введения дополнительных анестетиков или лекарств. Крыс помещали в стереотаксический аппарат (David Kopf Instruments). Температура тела контролировалась ректальным термометром (Medline Industries) и поддерживалась на уровне 37 ± 0.5 ° C с греющей насадкой (Fintronics). Мы контролировали глубину анестезии, обеспечив отсутствие реакции на щепотку ладоней и обеспечив скорость дыхания 60-80 дыхания / мин для подростков и вдохов 52-72 / мин для взрослых. В некоторых экспериментах показатели состояния сна и сна были собраны с помощью кортикальных электроэнцефалограмм для дальнейшего обеспечения стабильного состояния анестезии. Стеклянный электрод вытягивали из стеклянной пипетки 2-mm-внешнего диаметра с помощью вертикального съемника электрода (Narishige PE-2) и разбивали под микроскопом на диаметр наконечника 1-2 мкм. Электрод заполняли быстрым зеленым красителем 1% (Thermo Fisher Scientific) в растворе 2 m NaCl. Сопротивление электрода было 1.5-2.1 MΩ, измеренное на 135 Гц (Winston Electronics BL1000-B). Буровое отверстие было просверлено над VTA (см. Ниже координаты). Электрод был опущен 5 или 6 мм вентрально к корковой поверхности для подростков и взрослых соответственно, а затем медленно продвигался в область тел нейронов допамина с помощью гидравлического микропривода (David Kopf Instruments). Электроды были опущены в области VTA по заранее определенным «дорожкам» (0.2 мм друг от друга); область, отобранная у взрослых, была 3.2-4.0 мм перед лямбдой, 0.2-1.4 мм латеральной от средней линии и 7.5-8.5 мм вентральной от поверхности коры для взрослых. Площадь, отобранная у подростков, была 2.4-3.4 мм перед лямбдой, 0.3-0.7 мм латерально от средней линии и 7.5-8.5 мм вентральной от поверхности коры. Эти координаты были масштабированы, чтобы обеспечить аналогичные участки конечной записи, несмотря на различия в размерах головного мозга в возрасте.

Во время внеклеточной регистрации дофаминовых нейронов электрические сигналы подавались в высокоимпедансный усилитель (Fintronics), полосовой фильтр, фильтрованный на 400 и 500 Гц, или на 50 и 800 Гц, отображаемый на осциллографе (Tektronix R5110) и контролируемый дискриминатором окна и аудиоусилитель (Grass AM8; Grass Instruments). Цифровые выходы передавались через интерфейс (Digidata 1200 series, Molecular Devices) на персональный компьютер с программным обеспечением AxoScope (Molecular Devices), который определял активность стрельбы в Интернете и сохранял все данные для будущего анализа. Сохраненные данные анализировались с помощью специальной программы, которая определяет характеристики обжига.

Дофаминовые нейроны идентифицировали по анатомическому расположению в VTA и в соответствии со стандартными физиологическими критериями (Bunney et al., 1973). Вкратце, эти критерии следующие: характерная трехфазная (+ / - / +) форма волны с большой продолжительностью 2.5–3.5 мс, измеренная от начала до конца с использованием фильтров 400–500 Гц или> 1.1 мс от начала до минимума отрицательного пика. с использованием фильтров 50–800 Гц. Характер возбуждения также показывает низкую частоту спонтанного возбуждения 0.5–10 Гц (Грейс и Банни, 1984; Marinelli и др., 2006) с прерывистыми всплесками, которые являются кластерами высокочастотных шипов (Грейс и Банни, 1983). Эти критерии имеют точность ~90% при обнаружении нейронов допамина (Ungless и Grace, 2012). Чтобы изучить возрастные различия в активности дофаминовых нейронов, мы собрали максимум от трех до четырех клеток на крысу. Каждая запись включала не менее 3 минут стабильной активности (отклонение <5%). Мы проанализировали скорость стрельбы (всплески с течением времени) и схему стрельбы. Для последнего количество всплесков активности рассчитывалось как процент всплесков, излучаемых всплесками, от общего числа всплесков. Мы также рассчитали частоту всплесков событий и свойства всплесков (количество всплесков / всплесков и длительность всплеска в миллисекундах).

В конце записи крысам был глубоко анестезирован дополнительный хлоралгидрат. Положение наконечника электрода было отмечено пропусканием катодного тока 28 μA через электрод в течение ~30 мин. Это осаждало дискретное пятно красителя. Затем мозги удаляли и хранили в 10% Formalin, пока серийные корональные срезы (40 мкм) не разрезали на замораживающем микротоме (Leica Microsystems). Разделы были смонтированы, а расположение электродов проверено с помощью световой микроскопии с использованием внутренних атласов для взрослых и взрослых крыс весов, эквивалентных таковым в этом исследовании. Поскольку на одну крысу регистрировали до четырех клеток, и только конечная клетка у каждой крысы была отмечена красителем; местоположения других клеток экстраполировались на основании их зарегистрированного расстояния от конечной ячейки. Учитывая разницу в размере мозга в возрасте, мы использовали поправочный коэффициент для экстраполяции этих расстояний у подростков. Это было рассчитано путем сравнения длины, ширины и высоты среднего мозга у подростков и взрослых. Поправочными факторами были 1.14 для переднезадней, 1.06 для медиолатеральной и 1.09 для дорсовентрального. Затем мы проверили, что все клетки находятся в допаминергической области VTA, сопоставляя их на дополнительном внутреннем атласе, показывающем допаминергические области VTA (иммуногистохимическое окрашивание для тирозингидроксилазы).

Эффекты препаратов, которые влияют на активность допаминовых нейронов на самообслуживание кокаина

Отдельной когорте крыс было позволено самостоятельно вводить умеренную дозу кокаина (600 мкг / кг на инфузию) для 1.5 h ежедневно для 6 d. Во время первого 2 d мы использовали FR1 (один носовой мешок эквивалентен одной инфузии). Затем FR был увеличен до 3 (три носовых пика эквивалентны одной инфузии) для следующего 4 d. За десять минут до начала последней сессии крысы получали инъекцию лекарственного средства, которое либо увеличивало, либо уменьшало активность дофаминовых нейронов среднего мозга, действуя на дофамин D2-классные авторецепторы (в дальнейшем называемые «D»2 рецепторы»). В частности, крысам давали D2 рецепторного агониста quinpirole [20 мкг / кг, sc, ауторецептор-селективная доза, которая снижает активность дофаминовых нейронов (Marinelli и др., 2003)], D2 рецептор антагониста eticlopride [20 мкг / кг, sc, доза, которая увеличивает активность дофаминовых нейронов (Marinelli и др., 2003)], или физиологический раствор (подкожно) в качестве контроля. Учитывая, что подростки и взрослые проявляют сходную чувствительность D2 рецепторов (McCutcheon и др., 2012), эти фармакологические манипуляции должны приводить к аналогичным эффектам на скорость горения дофаминовых нейронов в возрасте.

Наркотики

Cocaine HCl был щедро предоставлен Национальным институтом по злоупотреблению наркотиками или был приобретен у Sigma-Aldrich и растворен в растворе соляного раствора 0.9%; рН раствора поддерживали на 6.5-7.0 с помощью 0.1N NaOH. Бревитал, гидрохлорид квинпирола и гидрохлорид этиклоприда были приобретены у Генри Шейна и растворены в растворе соляного раствора 0.9. Изофлуран и раствор 0.9% солевого раствора были приобретены у Батлера Шейна. Гидрат хлора был приобретен у Сигма-Олдрича и растворен в деионизированной воде.

Статистический анализ

Носовые выходы и инфузии анализировали с помощью ANOVA, используя, при необходимости, между субъектными факторами возраста (подростки и взрослые или препубертатные подростки, подростки и взрослые), дозу (физиологический раствор против кокаина) и состояние доступа (ShA vs LgA) и внутрисубъектные факторы дыры (активные против неактивных), дни обучения (разные длительности в соответствии с экспериментом), фиксированное отношение (FR1, FR3, FR6, FR9, FR12 и FR24), а также время (предварительная обработка против лечение после). Тест Newman-Keuls использовался для Постфактум анализы. Долю крыс, достигших заражения, оценивали с помощью точного теста Фишера. Активность дофаминовых нейронов анализировали с помощью t тест (подростки против взрослых). Уровни кокаина и его метаболитов в крови и мозге также анализировались с помощью программы Стьюдента. t тест (подростки против взрослых), если образцы не были ниже порога обнаружения; в данном случае мы использовали метод Манна – Уитни U тест (подростки против взрослых). Вышеприведенные данные были проанализированы Statistica (StatSoft). Эластичность спроса была проанализирована с помощью Prism 6 (GraphPad Software). Различия в показателях экспоненциальной кривой спроса Q0 и α анализировали с использованием F тестовое задание (Cassidy и Dallery, 2012). Уровень значимости был 0.05 для всех тестов.

Итоги

Самообслуживание кокаина

Эксперимент 1: возрастные различия в приобретении самоуправлений

ША.

Мы сравнили поведение самолечения для физиологического раствора и пять доз кокаина. Для всех доз потребление кокаина обычно стабилизировалось после 2 d самообслуживания кокаина (данные не показаны); поэтому профили поглощения, показанные в Рисунок 1A включают только данные с дня 3.

Рисунок 1. 

Приобретение поведения по самоконтролю кокаина в дозах кокаина. A, Потребление сахара или кокаина при очень низком уровне (75 мкг / кг на инфузию), низкий (150 мкг / кг на инфузию), умеренно низкий (300 мкг / кг на инфузию), умеренный (600 мкг / кг на инфузию), или высокой (1200 мкг / кг на инфузию) дозу во время ежедневного ShA (1.5 h). Каждая точка представляет среднее ± SEM каждой группы в каждом из сеансов самообслуживания 1.5 h. Подростки (n = 6, 8, 8, 16, 20 и 12) и взрослых (n = 6, 8, 9, 11, 18 и 13) в дозах 0, 75, 150, 300, 600 и 1200 мкг / кг на инфузию соответственно; n = 14 для препубертатных подростков в дозе 300 мкг / кг на инфузию. B, Приобретение самоконтроля кокаина при различных дозах кокаина у подростков по сравнению со взрослыми. Каждая точка представляет собой среднее ± SEM последних дней самостоятельного введения 3 в дозах, показанных в A.

As Рисунок 1A показывает, подростки и взрослые самостоятельно вводили аналогичные количества физиологического раствора (возрастной эффект, F(1,10) = 0.01, ns), кокаин при очень низкой дозе (75 мкг / кг на инфузию, возрастной эффект, F(1,14) = 0.03, ns) и кокаина при высокой дозе (1200 мкг / кг на инфузию, возрастной эффект, F(1,23) = 0.22, ns). Подростки самостоятельно вводили больше кокаина, чем взрослые, при низкой дозе (150 мкг / кг на инфузию, возрастной эффект, F(1,15) = 11.27, p <0.01), умеренно низкая доза (300 мкг / кг на инфузию, эффект возраста, F(2,38) = 9.85, p <0.001) и умеренная доза (600 мкг / кг на инфузию, эффект возраста, F(1,36) = 19.83, p <0.001). Препубертатных крыс также тестировали при умеренно низкой дозе (300 мкг / кг на инфузию). Потребление различается в зависимости от возраста (возраст, F(2,38) = 2.85, p <0.001). В частности, подростки препубертатного возраста и взрослые показали одинаковое потребление кокаина (ns), тогда как подростки показали большее потребление, чем подростки препубертатного возраста и взрослые (p <0.001). Рисунок 1B показывает среднее потребление для каждой дозы, в течение последнего 3 d самообслуживания при каждой дозе. Прямые групповые сравнения не проводились, потому что разные дозы тестировались в отдельных экспериментах в течение нескольких месяцев. Самая низкая доза (75 мкг / кг) не включалась, потому что средние показатели были искажены одной подростковой крысой, а одна взрослая крыса имела очень высокое количество приема лекарственного средства, поскольку это часто бывает при очень низких дозах. На рисунке показана классическая перевернутая U-образная кривая зависимости доза для самообслуживания кокаина (Линч и Кэрролл, 2001) в обеих возрастных группах.

Затем мы рассмотрели вопрос о том, приобретают ли подростки самоуправление быстрее, чем взрослые, путем изучения доли крыс, которые достигли приобретения самообслуживания кокаина, и количества дней, которые потребовались для приобретения. Для выполнения этого эксперимента мы установили критерий приобретения, предложенный Mitchell et al. (2005) используя корыто бимодального распределения ответов на активном устройстве, накапливаемое по всем сеансам самостоятельного администрирования. Корыто представляет собой точку изменения поведения, при которой крысы, отвечающие меньше, чем значение корыта, еще не изучили связь между высушиванием носа и вознаграждением, тогда как крысы, ответившие больше, чем значение корыта, приобрели поведение при самоуправлении. Мы использовали отдельную большую когорту крыс (подростков, n = 55; Взрослые, n = 58), в котором подростки снова показали большее потребление, чем взрослые (Рис 2A; возрастной эффект, F(1,111) = 26.89, p <0.001). Взрослые показали бимодальное распределение тычков в нос, с желобом на 15 тычков. Напротив, у подростков не было бимодального распределения, потому что у них не было высокой доли низких показателей ответа (Рис 2C), что предполагает более быстрое приобретение самоуправления. Фактически, используя критерий приобретения инфузий 15, подростки показали более быструю и большую скорость приобретения, чем взрослые (Рис 2B; Фишер точный, двусторонний, p = 0.001). Кроме того, к последнему дню 29% взрослых не смогли выполнить критерии приобретения, а не только 5% у подростков. Поэтому подростки чаще, чем взрослые, приобретают самообслуживание кокаина и быстрее приобретают его.

Рисунок 2. 

Приобретение схемы самообслуживания кокаина при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию) во время ShA (1.5 h). A, Потребление в когорте, используемое с целью установления критериев приобретения. Каждая точка представляет среднее ± SEM каждой группы в каждом из сеансов самообслуживания 1.5 h. Inset, представительные записи инфузий от подростка и взрослой крысы через сеанс самостоятельного администрирования 1.5 h. B, Приобретение курса самообслуживания кокаина. Линии представляют процент крыс, которые удовлетворяют критериям приобретения. C, Распределение носовых колосьев в активном отверстии во время приобретения самообслуживания кокаина. Количество носовых копков от всех крыс и всех сеансов забивается с интервалом 5. Бары - это число активных отверстий носа носа в каждом конкретном интервале интервала. Подростки, n = 55; Взрослые, n = 58.

LGA.

Для обеспечения того, чтобы различия в потреблении кокаина не были связаны с недостаточным временем отбора проб, мы также сравнили поведение при приеме подростков и взрослых крыс во время LgA на самообслуживание кокаина. Как Рисунок 3 показывает, что подростки показали большее потребление кокаина по сравнению со взрослыми в процедуре LgA (сеансы 6 h) (возрастной эффект, F(1,19) = 25.45, p <0.001; эффект сеанса, F(9,171) = 9.89, p <0.001; возраст × сеанс взаимодействия, F(9,171) = 3.41, p <0.001).

Рисунок 3. 

Приобретение поведения по самоконтролю кокаина при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию) во время LgA (6 h). Каждая точка представляет собой среднее значение ± SEM инфузий каждой группы в каждом из сеансов самостоятельного администрирования 6. Подростки, n = 9; Взрослые, n = 12.

Эксперимент 2: возрастные различия при эскалации самообслуживания кокаина

Чтобы уравнять потребление между группами, во время тренировок, которые предшествовали испытанию на эскалацию, потребление было ограничено инфузией 15-20 за сеанс (Рис 4A; возрастной эффект, F(1,18) = 2.56, ns; эффект сеанса, F(7,126) = 3.53, p <0.01; возраст × сеанс взаимодействия, F(7,126) = 0.39, ns). Во время этих тренировок подростки были быстрее взрослых при достижении инфузий 15-20 (Рис 4A, вставка; t(20) = -2.92, p <0.01). Затем крысы были разделены на группы ShA и LgA с аналогичным потреблением во время обучения (эффект условий доступа, F(1,18) = 0.006, ns; возраст × групповое взаимодействие, F(1,18) = 0.12, ns).

Рисунок 4. 

Эскалация самообслуживания кокаина при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию). A, Ограниченные учебные занятия, в которых все группы были ограничены самостоятельным введением инфузий 15-20 за сеанс, два раза в день для 4 d, причем каждый сеанс длился максимум 3 h. Вставка, время, необходимое для достижения инфузий 15-20 за сеанс (черная полоса, подростки, белая полоса, взрослые). B, Прием во время сеансов 6 h LgA. C, Прием во время 1.5 h в группе ShA и первый 1.5 h в группе LgA. Каждая точка представляет собой среднее значение ± SEM инфузий каждой группы в каждом сеансе самостоятельного администрирования. Подростки LgA, n = 5; подростки ShA, n = 5; взрослые LgA, n = 6; и взрослые ША, n = 6. *p <0.05; **p <0.01; ***p <0.001 по сравнению с 1-м днем.

Сначала мы проанализировали потребление через 6 h в группах LgA. Как Рисунок 4B показывает, что подростки потребляют больше кокаина, чем взрослые в целом (возрастной эффект, F(1,9) = 12.27, p <0.01); потребление изменилось со временем (эффект сеанса, F(11,99) = 6.76, p <0.001), и отношения между возрастными группами также менялись со временем (возраст × взаимодействие во время сеанса, F(11,99) = 8.31, p <0.001). Фактически, рост потребления кокаина наблюдался у подростков (эффект сеанса у подростков, F(11,44) = 3.4, p <0.002), но не у взрослых (эффект сеанса у взрослых, F(11,55) = 1.2, ns). В частности, потребление кокаина у подростков начало увеличиваться с сеанса 4 (p <0.05 по сравнению с сеансом 1) и продолжали расти после этого (все p значения <0.01). Напротив, потребление кокаина взрослыми никогда не увеличивалось (нс для всех сеансов по сравнению с сеансом 1).

Затем мы сравнивали эскалацию в условиях ShA и LgA, анализируя потребление с первого 1.5 h каждого сеанса от обеих групп крыс (Ахмед и Кооб, 1998); это было сделано с условием возраста и доступа как между субъектными факторами и сеансом как внутри-субъектный фактор. Как Рисунок 4C опять же, подростки потребляют больше кокаина, чем взрослые в целом (возрастной эффект, F(1,18) = 13.04, p <0.001); потребление изменилось со временем (эффект сеанса, F(11,99) = 3.54, p <0.001), и соотношение между возрастными группами и условиями доступа также изменилось со временем (возраст × взаимодействие сеанса, F(11,198) = 4.55, p <0.001; условие доступа × сеанс взаимодействия, F(11,198) = 1.84, p <0.05). Последующий анализ каждой группы (разделенной по возрасту и условиям доступа) выявил основной эффект сеанса только у крыс-подростков в условиях LgA (подростковый LgA, F(11,44) = 3.38, p <0.01; взрослый LgA, F(11,55) = 1.20, ns; подростковый ША, F(11,44) = 1.78, ns; взрослый ShA, F(11,55) = 1.65, ns). Post hoc тесты показали, что для подростков с LgA потребление увеличилось с сеанса 8 вперед относительно сеанса 1 (p <0.05). Таким образом, даже если рассматривать только первые 1.5 часа тестирования, эскалация потребления кокаина наблюдалась у подростков с LgA, но не у подростков с ShA или у взрослых в условиях ShA или LgA.

Эксперимент 3: возрастные различия в потреблении кокаина в зависимости от цены

As Рисунок 5A показывает, что новорожденный нос высушивается больше, чем взрослый для кокаина при высокой дозе (1200 мкг / кг на инфузию). Для активного отверстия реакция возрастала по мере увеличения требования FR (т. Е. Цены) (коэффициент отношения, F(4,68) = 15.55, p <0.001), и это происходило чаще у подростков, чем у взрослых (Рис 5; возрастной эффект, F(1,17) = 11.38, p <0.01; возраст × соотношение взаимодействия, F(4,68) = 2.85, p <0.05). В частности, подростки ответили больше, чем взрослые на высокие цены (FR6, p <0.01; FR12, p <0.05; и FR24, p <0.05), но не по низким ценам (FR1 и FR3, нс). Реакция неактивной лунки не изменилась по мере увеличения отношения (эффект отношения, F(4,68) = 1.77, ns) в любой возрастной группе (возрастный эффект, F(1,17) = 3.04, ns; возраст × соотношение, F(4,68) = 0.41, ns). Дискриминация между активной и неактивной дырой проявлялась устойчиво по мере увеличения отношения, причем дискриминация проявлялась на ранней стадии у подростков, чем у взрослых (эффект дыры, F(1,17) = 63.09, p <0.001; отношение × взаимодействие отверстий, F(4,68) = 21.10, p <0.001; отношение × отверстие × возраст взаимодействие, F(4,68) = 3.71, p <0.01). В частности, подростки различались по FR6, FR12 и FR24 (p <0.05), тогда как взрослые различались только по FR12 и FR24 (p <0.05).

Рисунок 5. 

Самоуправление кокаином (1200 мкг / кг на инфузию) в зависимости от цены. A, Количество носа выдает, когда цена кокаина увеличивается, увеличивая FR для получения препарата. B, Потребление кокаина (количество самовнусов) в зависимости от цены (т. Е. Отношение), построенное по логарифмической шкале и соответствующее по уравнению экспоненциального спроса. Q0, Уровень потребления по самой низкой цене; α, эластичность спроса на кокаин; пМакс, цена, при которой поведение переходит от неупругого к эластичному. R2, квадрат коэффициента корреляции (т. е. коэффициент определения) для кривой. Каждая точка представляет среднее значение ± SEM для каждой группы во второй день для каждого отношения. Подростки, n = 7; Взрослые, n = 12. *p <0.05; **p <0.01 по сравнению со взрослыми.

Мы проанализировали, как потребление (например, количество самоинфузий) изменяется в зависимости от цены (т. Е. Соотношения) путем подгонки данных к экспоненциальной кривой спроса, установленной Хурш и Зильберберг (2008), Данные как у подростков, так и у взрослых хорошо подходят для кривой (R2 = 0.94 для подростков; R2 = 0.96 для взрослых), а значения этих кривых показаны в Рисунок 5B. Q0 (максимальное потребление по самой низкой цене) было одинаковым по возрасту (F(1,5) = 0.001, ns). Потребление снизилось как функция цены, и снижение было менее крутым у подростков и взрослых. То есть подростки имели меньшую α, чем взрослые (F(1,5) = 10.45, p <0.05), что указывает на то, что спрос у подростков был более неэластичным, чем у взрослых.

Эксперимент 4: возрастные различия на уровнях кокаина и его метаболитов в мозге

Была тенденция к тому, что подростки имели более низкий уровень кокаина в крови (923.24 ± 67.32 против 1119.73 ± 66.94 нг / мл, t(9) = -2.05, p = 0.070), но не в мозге (5135.20 ± 281.25 vs 6947.00 ± 971.28 ng / g, t(9) = -1.64, ns). Была также тенденция к тому, что подростки имели более низкие уровни метаболита кобальта бензоилконина в крови (754.72 ± 81.09 против 1086.70 ± 133.07 нг / мл, t(9) = -2.02, p = 0.074) и в мозге (123.30 ± 13.80 против 184.38 ± 25.15 ng / g, t(9) = -2.00, p = 0.076). Не было значительных возрастных различий в уровнях метаболизма кокаина ecgonine-methyl-ester в крови (105.84 ± 5.08 против 87.27 ± 9.48 нг / мл, t(9) = 1.62, ns) или мозга (138.54 ± 9.62 против 146.44 ± 5.36 ng / g, U(11) = 14.00, Z = -0.09, ns). Также не было различий в метаболите норкокаина в крови (8.28 ± 0.96 против 11.77 ± 1.72, t(9) = -1.67, ns). Уровни норкокаина в головном мозге были необнаружимыми в большинстве образцов (данные не показаны).

в естественных условиях внеклеточная регистрация нейронов VTA

По сравнению с взрослыми подростки демонстрировали более высокие скорости обжига нейронов допамина VTA на ~1 Гц (~24%) (Рис 6A; t(41) = 2.33; p <0.05). Количество взрывов было одинаковым для разных возрастов. Это было измерено как процент выбросов, испускаемых всплесками (Рис 6A; t(41) = 0.30; ns) и частота событий всплеска (0.46 ± 0.08 против 0.51 ± 0.09 Гц, t(41) = -0.40; нс). Тем не менее, подростки демонстрировали более крупные вспышки, чем взрослые, с большим количеством спайков за взрыв (Рис 6A; t(41) = 2.28; p <0.05) и тенденция к увеличению продолжительности всплеска (256.76 ± 35.12 против 157.60 ± 33.40 мс, t(47) = 2.01, p = 0.051). Как Рисунок 6B показывает, что площадь отобранного VTA была сопоставимой по возрасту (возрастной эффект, F(1,41) = 2.71, ns; возраст × структура взаимодействия, F(2,82) = 0.28, ns). Координаты (в миллиметрах) для подростков и взрослых были следующими: anteroposterior, 3.57 ± 0.04 и 3.66 ± 0.05; mediolateral, 0.84 ± 0.05 против 0.97 ± 0.07; dorsoventral, 7.79 ± 0.05 против 7.84 ± 0.04. Результаты были схожи, если был проанализирован только последний записанный элемент, отмеченный быстрым зеленым красителем (данные не показаны).

Рисунок 6. 

A, Активность дофаминовых нейронов. Слева, скорость стрельбы; средние, разрывные шипы (в процентах); правые, всплески за взрыв. Каждая вертикальная полоса представляет собой среднее ± SEM каждой группы. Подростки, n = Клетки 24 от крыс 11; Взрослые, n = Клетки 19 от крыс 11. *p <0.05 по сравнению со взрослыми. B, Расположение дофаминовых нейронов, отобранных в VTA. Месторождения (в миллиметрах) являются переднезадними от лямбда (АР), медиолатеральными от срединной линии (МЛ) и дорсовентральными от поверхности коры (ДВ). Каждый круг / квадрат представляет собой местоположение одного дофаминового нейрона. C, Репрезентативные гистологические изображения из клеток, представленные квадратами в B, Размещение электрода отмечено черной стрелкой. Черная линия является эталонным маркером и является частью окулярной части микроскопа.

Эффекты препаратов, которые влияют на активность допаминовых нейронов на самообслуживание кокаина

Мы проверили взаимосвязь между активностью дофаминовых нейронов и самоорганизацией путем фармакологически модифицирующей активности нейронов допамина и изучили его влияние на самообслуживание кокаина при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию). Quinpirole, D2 рецепторного агониста, использовали для снижения активности нейронов и этиклоприда, D2 антагониста рецептора, использовали для увеличения активности нейронов (Marinelli и др., 2003). Крыс сначала обучали в FR1 для 2 d (данные не показаны); затем они прошли обучение в FR3 для 4 дополнительных дней. Крыс затем делили на три группы с аналогичным потреблением кокаина (эффект препарата, F(2,61) = 2.08, ns), которые должны были получать физиологический раствор, квинпирол (0.2 мкг / кг, sc) или этиклоприд (0.2 мкг / кг, sc). Как показано в Рисунок 7, во время предварительной обработки во всех группах поддерживались подростковые и взрослые различия в потреблении кокаина (возрастной эффект, F(1,61) = 31.08, p <0.001; лекарственный эффект, F(2,61) = 2.08, ns; возраст × наркотиков взаимодействия, F(2,61) = 1.68, ns). Затем мы сравнивали поведение до (предварительная обработка, среднее значение 3 d перед лечением) по сравнению с после лечения (посттерапия). Это было сделано с использованием временной точки (pre vs post) как внутри-субъектного фактора и возраста (подростков и взрослых) и лекарственного средства (физиологический раствор, квинпирол, этиклоприд) как между субъектами. Поведение изменялось в соответствии с назначенным лекарственным средством (время взаимодействия с лекарственным средством: F(2,61) = 14,43, p <0.001) и возраст испытуемых (возраст × время взаимодействия, F(1,61) = 11.96, p <0.001; возраст × препарат × взаимодействие во времени, F(2,61) = 6.84, p <0.01). В частности, солевой раствор не оказывал эффекта ни на одну из возрастных групп, так что подростки сохраняли более высокий уровень потребления кокаина, чем взрослые (после лечения подростки по сравнению со взрослыми, p <0.05; предварительная обработка против последующей обработки, нс). Квинпирол подавлял потребление кокаина у подростков, делая подростков «подобными взрослым» (для постобработки, подростки по сравнению со взрослыми, ns; подростки до лечения по сравнению с подростками после лечения, p <0.05). Этиклопрайд увеличивал потребление кокаина взрослыми, делая их «подобными подросткам» (после лечения, подростки по сравнению со взрослыми, ns; взрослые до лечения по сравнению со взрослыми после лечения, p <0.001). Чтобы гарантировать, что эффект квинпирола не является артефактом поведения подростков с высоким исходным уровнем (пре-квинпирол), мы повторили наш анализ после исключения трех крыс-подростков с высоким исходным уровнем потребления в этой группе. Результаты были аналогичными, даже после удаления этих крыс (данные не показаны).

Рисунок 7. 

Самообслуживание кокаина при умеренной дозе (600 мкг / кг на инфузию) до (Pre) и после (пост) введения лекарств, которые изменяют активность дофаминовых нейронов. Каждая вертикальная полоса представляет собой среднее значение ± SEM инфузий / 1.5 h каждой группы. Предварительные значения являются средними в течение 3 d до введения препарата. Последующие значения сразу после введения препарата. Подростки, n = 11, 12 и 11 для физиологического раствора, квинпирола и этиклоприда соответственно; Взрослые, n = 11 в каждой группе. *p <0.05; ***p <0.001 по сравнению со взрослыми. #p <0.05; ###p <0.001 по сравнению с Pre.

Обсуждение

Наши результаты показывают, что по сравнению со взрослыми подростки демонстрируют более высокий уровень потребления кокаина, быстрее приобретают самообслуживание кокаина, демонстрируют эскалацию потребления кокаина, усердно работают с лекарством и менее чувствительны к увеличению цены (т. Е. Являются более неупругими) , Кроме того, повышенное кокаинное самоуправление ассоциировалось с повышенной активностью нейронов дофамина VTA и могло быть отменено с помощью квинпирола, лекарственного средства, которое подавляет активность этих нейронов.

По сравнению со взрослыми подростки показали больший прием кокаина при дозах с низкой до умеренной (150-600 мкг / кг на инфузию). Повышенное потребление кокаина наблюдалось, когда крысам давали либо ShA, либо LgA кокаину, что указывало на то, что разница между подростками и взрослыми не была артефактом недостаточного времени отбора проб. Наши результаты соответствуют двум исследованиям, показывающим, что подростки самостоятельно вводят больше кокаина, чем взрослым, в умеренно низкой дозе [400 мкг / кг на инфузию (Анкер и Кэрролл, 2010)] или умеренно высокая доза [800 мкг / кг на инфузию (Schramm-Sapyta и др., 2011)]. Мы расширили эту работу, используя более широкий диапазон доз, что позволяет нам определить, что подростки более чувствительны, чем взрослые к кокаину. Приобретение потребления кокаина при аналогичных дозах с низкой дозой может быть использовано для проверки различий в чувствительности к полезным эффектам кокаина (Piazza et al., 1989).

Поведенческие различия были специфическими для кокаина, потому что не было возрастных различий в ответах на физиологический раствор. Аналогично, различия не наблюдались при очень низкой дозе кокаина (75 мкг / кг на инфузию), которая может быть ниже порога для крыс, чтобы приобрести самообслуживание. При высокой дозе (1200 мкг / кг на инфузию) подростки и взрослые не отличались при потреблении кокаина. Это ожидалось, потому что различия в чувствительности к лекарствам не наблюдались при таких высоких дозах (Piazza et al., 2000). Этот вывод также согласуется с исследованиями, которые не показали большего потребления у подростков и взрослых с использованием высоких доз кокаина (Kantak et al., 2007; Kerstetter и Kantak, 2007).

Предполагается, что у людей начало полового созревания совпадает с началом злоупотребления психоактивными веществами (Patton et al., 2004). Здесь мы обнаружили, что повышение самообслуживания кокаина произошло только у подростков-крыс, в которых произошло половое созревание, а не раньше. Это подчеркивает постпубертатный подростковый возраст как уязвимое «окно» для кокаиновой зависимости. Это может помочь объяснить, почему в некоторых исследованиях, использующих более молодых подростков-крыс, не было обнаружено различий в потреблении между подростками и взрослыми (Лесли и др., 2004; Belluzzi и др., 2005; Frantz et al., 2007; Kantak et al., 2007; Kerstetter и Kantak, 2007; Harvey et al., 2009; Ли и Франц, 2009). Различия в экспериментальных манипуляциях также могут влиять на другие расхождения. Например, два исследования, которые не обнаружили различий в потреблении кокаина для подростков и взрослых (Лесли и др., 2004; Belluzzi и др., 2005) были выполнены во время неактивной, а не активной фазы цикла свет / темнота. Кроме того, в вышеприведенных исследованиях крысы были размещены отдельно, а не в группе. Мы решили сгруппировать домашних подростков-крыс, потому что подростковый возраст характеризуется сильными социальными взаимодействиями и игровым поведением (Копье и тормоз, 1983; Vanderschuren et al., 1997; Douglas et al., 2004). Другим важным фактором может быть возраст отлучения, который влияет на экспериментальные результаты (Wiley и Evans, 2009). Крысы, приобретенные у коммерческих поставщиков, отнимаются в любое время от P17 до P24 (Harlan) или P19 до P23 (Charles River). Мы попросили, чтобы отлучение произошло именно на P21, чтобы предотвратить нежелательные эффекты от изменчивости отнятия.

Потребление кокаина обострилось у постпубертатных подростков, но не у взрослых. Эскалация моделирует явление у наркоманов, когда потребление наркотиков переходит от устойчивого к чрезмерному употреблению (Ахмед, 2011). Этот тип поведения является маркером зависимости от наркотиков в соответствии с Диагностическим и статистическим руководством по психическим расстройствам, издание IV (Американская психиатрическая ассоциация 2000). Следовательно, увеличение эскалации у подростков, чем у взрослых, является дополнительным показателем большей ответственности за зависимость. В соответствии с этим недавнее исследование показало, что подростки, но не взрослые, эскалировали потребление кокаина или метамфетамина (Anker и др., 2012; Zlebnik et al., 2012). Существует несколько возможных причин, по которым мы не наблюдали эскалации у взрослых. Наиболее вероятным фактором является то, что длительная (~10 d) подготовка необходима для последующего развития эскалации (Ahmed и др., 2000; Knackstedt и Kalivas, 2007; Ахмед, 2011). Учитывая ограниченную продолжительность подросткового возраста, мы ограничились короткой подготовкой (4 d), которая, возможно, предотвратила эскалацию взрослых. Кроме того, эскалация зависит от деформации и субстрата (Freeman и др., 2009; Picetti et al., 2010); он устойчив в Long-Evans (Quadros и Miczek, 2009), Wistar (Ахмед и Кооб, 1998) и крыс Sprague Dawley, приобретенных у Harlan (Ferrari et al., 2005; Mantsch et al., 2008), но кажется менее надежным у крыс Sprague Dawley, приобретенных у Charles River (Knackstedt и Kalivas, 2007; Келамангалат и Вагнер, 2010), которые мы использовали в этом исследовании.

Еще одна особенность наркомании заключается в том, что наркоманы тратят много времени и усилий на получение наркотиков (Американская психиатрическая ассоциация 2000) и что их потребление нечувствительно к повышению цены (Bickel и др., 2011). Мы смоделировали это, измерив количество рабочих крыс, которые будут делать, чтобы получить кокаин при постепенном увеличении цены кокаина (Griffiths и др., 1978; Risner и Silcox, 1981). Мы также оценили способ изменения потребления в зависимости от цены путем подгонки наших данных к экспоненциальной кривой спроса (Bickel и др., 2000; Хурш и Сильберберг, 2008). Наши исследования показывают, что постпубертатные подростки работали больше, чем взрослые, чтобы получить кокаин. Кроме того, их потребление кокаина было менее чувствительным к увеличению цены (т. Е. Их поведение было более неупругим). Вместе эти данные свидетельствуют о том, что подростки проявляют поведенческие черты зависимости.

Каковы механизмы, лежащие в основе усиления ответственности за зависимость в подростковом возрасте? Подростковый мозг претерпевает обширные организационные и функциональные изменения, включая изменения в мезолимбической допаминовой системе (Андерсен и др., 1997; Копье, 2000; Wahlstrom et al., 2010). Ранее мы показали, что активность пиков дофаминовых нейронов VTA в подростковом возрасте (McCutcheon и Marinelli, 2009; McCutcheon и др., 2012). Здесь мы воспроизвели эти результаты с использованием другой субстраты крыс (Crl: Sprague Dawley из Charles River в текущем исследовании против Hsd: Sprague Dawley из Harlan в предыдущем исследовании); мы обнаружили, что активность допамин-нейронов у крыс-подростков составляет ~24% выше, чем активность у взрослых. Было показано, что в другой предполагаемой модели склонности к зависимостям - высокореакторной и низкореспондерной крысам - аналогичное увеличение активности нейронов допамина связано с повышенным самолечением (Маринелли и Уайт, 2000; McCutcheon и др., 2009). Такая повышенная активность допаминовой системы может предрасполагать подростков к злоупотреблению наркотиками (Doremus-Fitzwater и др., 2010). Мы стремились установить причинность между потреблением лекарственного средства и активностью дофаминового нейрона, манипулируя активностью дофаминовых нейронов либо с помощью D2 агониста рецептора, для снижения активности или антагониста для увеличения активности. Путем введения этих препаратов мы отменили возрастные различия в потреблении кокаина, указывая на то, что различия в поведении зависели от активности нейронов допамина. Это указывает на причинную связь между нашими нейрофизиологическими и поведенческими результатами и раскрывает возможный механизм для терапевтических целей. Системная доставка фармакологических агентов может иметь подводные камни; однако мы выбрали ауторецептор-селективную дозу, которая действует централизованно на тела нейронов допамина (Пукак и Грейс, 1991). Доза, которую мы выбрали, сопоставима с дозами, используемыми нами и другими для получения изменений в облучении дофаминовых нейронов, высвобождении дофамина и поведении (Робертсон и др., 1993; Marinelli и др., 2003; Zeeb et al., 2009). Маловероятно, что доза квинпирола, которую мы использовали, значительно активировала постсинаптический D2-классовые рецепторы, поскольку активация этих рецепторов увеличивается, а не уменьшает потребление лекарств (Howell и др., 1997).

Некоторые исследования показывают, что уровни кокаина в головном мозге сходны между подростками и взрослыми после внутрибрюшинной или внутривенной доставки (Caster et al., 2005; Frantz et al., 2007; Schramm-Sapyta и др., 2011). Наши результаты показывают, что уровни метаболитов кокаина и кокаина несколько ниже у подростков, чем у взрослых. Однако маловероятно, что различия в уровнях кокаина или метаболизме объясняют увеличение потребления кокаина подростками. По сравнению с взрослыми подростки показали более высокое потребление высокой дозы кокаина, когда цена на препарат была увеличена, но у них было подобное потребление по низкой цене (FR1). Любое компенсирующее метаболизм увеличение потребления кокаина было бы замечено как по низким, так и по высоким ценам.

Моральные изменения в когнитивных и поведенческих мерах могут также участвовать в возрастных различиях в самообслуживании кокаина. Подростки считаются «субъектами риска» и демонстрируют более высокое предпочтение и исследование новых условий, чем взрослые (Douglas et al., 2003; Стэнсфилд и Кирстейн, 2006). Было высказано предположение о том, что риск в подростках проистекает из несоответствия между новизной и сенсацией (которая возрастает в подростковом возрасте) и саморегуляцией (которая созревает во взрослую жизнь) (Steinberg, 2004). Подобным образом убедительные данные свидетельствуют о том, что уточнение тормозного контроля как зрелых животных может объяснить снижение рискованного поведения (Ridderinkhof и van der Molen, 1997; Geier и др., 2010) и большее поведенческое торможение (Sturman et al., 2010; Andrzejewski и др., 2011) во взрослом возрасте, чем во время подросткового возраста. Хотя мы не тестировали эти признаки здесь, эти факторы могут способствовать повышенному риску наркомании у подростков.

Вместе наши результаты показывают, что послепубертатные подростки более восприимчивы, чем взрослые, к аддиктивным свойствам кокаина. Кроме того, эта повышенная ответственность за зависимость в подростковом возрасте связана с повышенной активностью нейронов дофамина VTA и может быть отменена с помощью препарата, который подавляет активность этих нейронов. Поэтому наши выводы дают представление о нейронных механизмах ответственности подростков за зависимость, выделяя нейроны допамина как ключевой элемент риска зависимости. Наши результаты также показывают, что повышенная восприимчивость к наркомании кокаина является продуктом нейробиологии подростков и может быть продемонстрирована в отсутствие внешних социальных и экономических влияний. Поэтому терапевтическим стратегиям, которые нацелены на биологические факторы риска в подростковом возрасте, следует уделять первоочередное внимание, поскольку подростковый возраст обеспечивает такую ​​сильную восприимчивость к привыканию к привыканию.

Сноски

  • Получен Март 8, 2012.
  • Версия была принята в декабре 28, 2012.
  • Принят январь 26, 2013.

  • Эта работа была поддержана Национальным институтом здравоохранения Грант R01DA020654. Мы благодарим Митча Бэйла и Лорису Ламуре за техническую помощь, д-р Серж Ахмед за полезный вклад в процедуры эскалации и д-р Роберт Мессинг за полезные комментарии к этой рукописи. Мы благодарим доктора Дейва Муди и сотрудников Центра токсикологии человека Университета штата Юта за анализ уровней кокаина мозга при поддержке Национального института по борьбе со злоупотреблением наркотиками N01DA-9-7767. Мы благодарим д-ра Пете Рома из Института ресурсов поведения (www.ibrinc.org) за его рекомендации по анализу данных с использованием Экспоненциальной модели спроса.

  • Авторы не заявляют никаких конкурирующих финансовых интересов.

  • Корреспонденцию следует направлять Микеле Маринелли, отдел клеточной и молекулярной фармакологии, Университет медицины и науки Розалинды Франклин, Чикагская медицинская школа, 3333 Green Bay Road, North Chicago, IL 60064. [электронная почта защищена]

Рекомендации

  1. ↵
    1. Ахмед С

    (2011) в моделях животных наркомании, Neuromethods, Эскалация употребления наркотиков, ed Olmstead M (Humana, New York).

  2. ↵
    1. Ахмед SH,
    2. Koob GF

    (1998) Переход от умеренного к чрезмерному употреблению наркотиков: изменение гедонистической уставки. Наука 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ахмед SH,
    2. Уокер Дж. Р.,
    3. Koob GF

    (2000) Постоянное увеличение мотивации принимать героин у крыс с историей эскалации наркотиков. Нейропсихофармакологии 22: 413-421.

  4. ↵
    1. Американская психиатрическая ассоциация

    (2000) Диагностическое и статистическое руководство по психическим расстройствам (American Psychiatric Association, Washington, DC) Text Revision Edition, Ed 4.

  5. ↵
    1. Андерсен С.Л.,
    2. Рутштейн М.,
    3. Benzo JM,
    4. Hostetter JC,
    5. Teicher MH

    (1997) Половые различия в перепроизводстве и элиминации рецепторов допамина. Neuroreport 8: 1495-1498.

  6. ↵
    1. Andrzejewski ME,
    2. Schochet TL,
    3. Feit EC,
    4. Харрис Р.,
    5. McKee BL,
    6. Келли А.Е.

    (2011) Сравнение поведения взрослых и подростков с крысами в экспериментах по изучению, исчезновению и поведенческому торможению. Behav Neurosci 125: 93-105.

  7. ↵
    1. Anker JJ,
    2. Кэрролл МЭ

    (2010) Восстановление кокаина, вызванного наркотиками, репликами и стрессом у подростков и взрослых крыс. Психофармакология (Berl) 208: 211-222.

  8. ↵
    1. Anker JJ,
    2. Baron TR,
    3. Злебник Н.Е.,
    4. Кэрролл МЭ

    (2012) Эскалация самоконтроля метамфетамина у подростков и взрослых крыс. Наркомания Зависимость 124: 149-153.

  9. ↵
    1. Энтони JC,
    2. Petronis KR

    (1995) Раннее употребление наркотиков и риск поздних проблем с наркотиками. Наркомания Зависимость 40: 9-15.

  10. ↵
    1. Belluzzi JD,
    2. Ван Р,
    3. Лесли ФМ

    (2005) Ацетальдегид усиливает поглощение никотином самообслуживания у крыс-подростков. Нейропсихофармакологии 30: 705-712.

  11. ↵
    1. Bickel WK,
    2. Marsch LA,
    3. Кэрролл МЭ

    (2000) Деконструкция относительной усиливающей эффективности и определение мер фармакологического укрепления с поведенческой экономикой: теоретическое предложение. Психофармакология (Berl) 153: 44-56.

  12. ↵
    1. Bickel WK,
    2. Jarmolowicz DP,
    3. Mueller ET,
    4. Gatchalian KM

    (2011) Поведенческая экономика и нейроэкономика артериальной патологии: последствия для этиологии и лечения зависимости. Curr Psychiatry Rep 13: 406-415.

  13. ↵
    1. Bunney BS,
    2. Walters JR,
    3. Roth RH,
    4. Агаджанян ГК

    (1973) Допаминергические нейроны: влияние антипсихотических препаратов и амфетамина на активность отдельных клеток. J Pharmacol Exp Ther 185: 560-571.

  14. ↵
    1. Кэссиди Р.Н.,
    2. Dallery J

    (2012) Влияние типа экономики и никотина на существенную ценность пищи у крыс. J Exp Anal Behav 97: 183-202.

  15. ↵
    1. Caster JM,
    2. Walker QD,
    3. Kuhn CM

    (2005) Улучшенный поведенческий ответ на кокаин с повторной дозой у подростков-крыс. Психофармакология (Berl) 183: 218-225.

  16. ↵
    1. Палаты РА,
    2. Тейлор Дж. Р.,
    3. Potenza MN

    (2003) Развитие нейроциркуляторной мотивации в подростковом возрасте: критический период уязвимости к наркомании. Am J Psychiatry 160: 1041-1052.

  17. ↵
    1. Chen CY,
    2. Storr CL,
    3. Энтони JC

    (2009) Раннее начало употребления наркотиков и риск проблем с наркотической зависимостью. Addict Behav 34: 319-322.

  18. ↵
    1. Doremus TL,
    2. Brunell SC,
    3. Раджендран П.,
    4. Копье LP

    (2005) Факторы, влияющие на повышенное потребление этанола у подростков по сравнению с взрослыми крысами. Алкоголь 29: 1796-1808.

  19. ↵
    1. Doremus-Fitzwater TL,
    2. Варлинская Е.И.,
    3. Копье LP

    (2010) Мотивационные системы в подростковом возрасте: возможные последствия для возрастных различий в злоупотреблении психоактивными веществами и других рискованных поведениях. Мозг Cogn 72: 114-123.

  20. ↵
    1. Дуглас Л.А.,
    2. Варлинская Е.И.,
    3. Копье LP

    (2003). Обоснование нового объекта для взрослых и взрослых самцов и самок крыс: последствия социальной изоляции. Физиол Бехав 80: 317-325.

  21. ↵
    1. Дуглас Л.А.,
    2. Варлинская Е.И.,
    3. Копье LP

    (2004) Вознаграждение свойств социальных взаимодействий у взрослых и взрослых крыс-самцов: влияние социального и изолированного жилья субъектов и партнеров. Dev Psychobiol 45: 153-162.

  22. ↵
    1. Ferrario CR,
    2. Gorny G,
    3. Crombag HS,
    4. Li Y,
    5. Kolb B,
    6. Робинсон Т.Е.

    (2005) Нейронная и поведенческая пластичность, связанная с переходом от управляемого к эскалации кокаина. Biol психиатрии 58: 751-759.

  23. ↵
    1. Франц К.Дж.,
    2. O'Dell LE,
    3. Parsons LH

    (2007). Поведенческие и нейрохимические реакции на кокаин у крыс с периодонтальным и взрослым. Нейропсихофармакологии 32: 625-637.

  24. ↵
    1. Freeman KB,
    2. Kearns DN,
    3. Kohut SJ,
    4. Райли А.Л.

    (2009) Различия между штаммами в моделях приема лекарств при длительном доступе к самоуправлению кокаина. Behav Neurosci 123: 156-164.

  25. ↵
    1. Geier CF,
    2. Terwilliger R,
    3. Teslovich T,
    4. Веланова К.,
    5. Луна Б

    (2010) Имматумы в обработке вознаграждения и его влияние на ингибиторный контроль в подростковом возрасте. Cereb Cortex 20: 1613-1629.

  26. ↵
    1. Грейс А.А.,
    2. Bunney BS

    (1983) Внутриклеточная и внеклеточная электрофизиология нигрных допаминергических нейронов. 1. Идентификация и характеристика. неврология 10: 301-315.

  27. ↵
    1. Грейс А.А.,
    2. Bunney BS

    (1984) Контроль шаблона обжига в nigral дофаминовых нейронах: одиночный импульс стрельбы. J Neurosci 4: 2866-2876.

  28. ↵
    1. Гриффитс Р.Р.,
    2. Brady JV,
    3. Snell JD

    (1978). Прогрессивное соотношение, поддерживаемое инфузионными препаратами: сравнение кокаина, диэтилпропиона, хлорфентермина и фенфлурамина. Психофармакология (Berl) 56: 5-13.

  29. ↵
    1. Харви RC,
    2. Дембро К.А.,
    3. Rajagopalan K,
    4. Mutebi MM,
    5. Кантак К.М.

    (2009). Эффекты самообслуживания кокаина у взрослых и взрослых самцов крыс на орбитофронтальном нейрокогнитивном функционировании, связанном с корой. Психофармакология (Berl) 206: 61-71.

  30. ↵
    1. Howell LL,
    2. Czoty PW,
    3. Byrd LD

    (1997) Фармакологические взаимодействия между серотонином и дофамином по поведению у белки обезьяны. Психофармакология (Berl) 131: 40-48.

  31. ↵
    1. Hursh SR

    (1993) Поведенческая экономика наркомании: введение. Наркомания Зависимость 33: 165-172.

  32. ↵
    1. Hursh SR,
    2. Рома ПГ

    (2013) Поведенческая экономика и эмпирическая государственная политика. J Exp Anal Behav 99: 98-124.

  33. ↵
    1. Hursh SR,
    2. Зильберберг А

    (2008) Экономический спрос и существенная ценность. Psychol Rev 115: 186-198.

  34. ↵
    1. Johnston LD,
    2. О'Мэлли П.М.,
    3. Бахман JG,
    4. Schulenberg JE

    (2011) Мониторинг будущих национальных результатов в отношении употребления наркотиков среди подростков: обзор основных результатов, 2010 (Институт социальных исследований, Мичиганский университет, Анн-Арбор, Мичиган).

  35. ↵
    1. Kandel DB,
    2. Ямагучи К.,
    3. Чен К

    (1992) Этапы прогрессирования наркомании от подросткового возраста до взрослой жизни: еще одно доказательство теории шлюзов. J Stud Alcohol 53: 447-457.

  36. ↵
    1. Кантак К.М.,
    2. Goodrich CM,
    3. Урибе V

    (2007) Влияние секса, эстрального цикла и возраста, вызванного наркотиками, на самообслуживание кокаина у крыс (Rattus norvegicus) Exp Clin Psychopharmacol 15: 37-47.

  37. ↵
    1. Kelamangalath L,
    2. Wagner JJ

    (2010) D-серин уменьшает восстановление кокаина на крысах после расширенного доступа к самообслуживанию кокаина. неврология 169: 1127-1135.

  38. ↵
    1. Керстеттер К.А.,
    2. Кантак К.М.

    (2007) Дифференциальные эффекты самоконтроля кокаина у подростков и взрослых крыс на обучение стимулам-наградам. Психофармакология (Berl) 194: 403-411.

  39. ↵
    1. Knackstedt LA,
    2. Kalivas PW

    (2007). Расширенный доступ к самообслуживанию кокаина улучшает восстановление, вызванное наркотиками, но не повышает чувствительность к поведению. J Pharmacol Exp Ther 322: 1103-1109.

  40. ↵
    1. Kolho KL,
    2. Никула Х,
    3. Хухтаниеми I

    (1988). Сексуальное созревание самцов крыс, получавших постнатально антагонистом гонадотропин-рилизинг-гормона. J Endocrinol 116: 241-246.

  41. ↵
    1. Лесли FM,
    2. Loughlin SE,
    3. Ван Р,
    4. Перес Л,
    5. Lotfipour S,
    6. Belluzzia JD

    (2004). Развитие подросткового развития реакции стимулятора переднего мозга: понимание исследований на животных. Ann NY Acad Sci 1021: 148-159.

  42. ↵
    1. Левин Э.Д.,
    2. Лоуренс С.С.,
    3. Petro A,
    4. Хортон К,
    5. Резвани А.Х.,
    6. Seidler FJ,
    7. Слоткин Т.А.

    (2007). Подростки против самоподготовки никотина взрослого самца у самцов крыс: продолжительность эффекта и дифференциальные корреляции никотиновых рецепторов. Neurotoxicol Teratol 29: 458-465.

  43. ↵
    1. Li C,
    2. Frantz KJ

    (2009) Аттенуированная инкубация кокаина, ищущего у самцов крыс, обученных самообслуживанию кокаина во время периодонтального периода. Психофармакология (Berl) 204: 725-733.

  44. ↵
    1. Lin SN,
    2. Moody DE,
    3. Bigelow GE,
    4. Foltz RL

    (2001). Метод химической ионизации-тандемной масс-спектрометрии атмосферного давления методом жидкостной хроматографии для количественного определения кокаина и бензоилэггонина в плазме человека. J Anal Toxicol 25: 497-503.

  45. ↵
    1. Lin SN,
    2. Уолш С.Л.,
    3. Moody DE,
    4. Foltz RL

    (2003). Обнаружение и временное течение N-оксида кокаина и других метаболитов кокаина в плазме человека методом жидкостной хроматографии / тандемной масс-спектрометрии. Anal Chem 75: 4335-4340.

  46. ↵
    1. Lynch WJ,
    2. Кэрролл МЭ

    (2001) Регулирование приема лекарств. Exp Clin Psychopharmacol 9: 131-143.

  47. ↵
    1. Манчес Дж. Р.,
    2. Юферов В.,
    3. Матье-Кия А.М.,
    4. Ho A,
    5. Kreek MJ

    (2004). Эффекты расширенного доступа к дозам высокого и низкого кокаина при самообмене, восстановлении кокаина и уровнях мРНК мозга у крыс. Психофармакология (Berl) 175: 26-36.

  48. ↵
    1. Манчес Дж. Р.,
    2. Бейкер Д.А.,
    3. Фрэнсис Д.М.,
    4. Katz ES,
    5. Хокс М.А.,
    6. Serge JP

    (2008). Снижение стресса и кортикотропина, вызванное восстановлением и активные поведенческие реакции, связанные с напряжением, дополняются после длительного доступа кокаина к самоконтролю крыс. Психофармакология (Berl) 195: 591-603.

  49. ↵
    1. Маринелли М,
    2. Белый FJ

    (2000) Усиленная уязвимость к самоуправлению кокаина связана с повышенной импульсной активностью нейранов дофамина среднего мозга. J Neurosci 20: 8876-8885.

  50. ↵
    1. Маринелли М,
    2. Cooper DC,
    3. Baker LK,
    4. Белый FJ

    (2003) Импульсная активность нейранов дофамина среднего мозга модулирует поведение, связанное с наркотиками. Психофармакология (Berl) 168: 84-98.

  51. ↵
    1. Маринелли М,
    2. Рудик С.К.,
    3. Hu XT,
    4. Белый FJ

    (2006) Возбудимость дофаминовых нейронов: модуляция и физиологические последствия. Целевые наркотики ЦНС Neurol Disord 5: 79-97.

  52. ↵
    1. McCutcheon JE,
    2. Маринелли М

    (2009) Возраст имеет значение. Eur J Neurosci 29: 997-1014.

  53. ↵
    1. McCutcheon JE,
    2. Белый FJ,
    3. Маринелли М

    (2009) Индивидуальные различия в нейроадаптациях допамин-клеток после самоконтроля кокаина. Biol психиатрии 66: 801-803.

  54. ↵
    1. McCutcheon JE,
    2. Конрад К.Л.,
    3. Carr SB,
    4. Ford KA,
    5. McGehee DS,
    6. Маринелли М

    (2012) Допамин-нейроны в брюшной тегментальной области быстрее стреляют у крыс-подростков, чем у взрослых. J Neurophysiol 108: 1620-1630.

  55. ↵
    1. Mitchell JM,
    2. Cunningham CL,
    3. Марк Г.П.

    (2005) Локомоторная активность предсказывает приобретение поведения при самоуправлении, но не потребление кокаина. Behav Neurosci 119: 464-472.

  56. ↵
    1. Patton GC,
    2. McMorris BJ,
    3. Toumbourou JW,
    4. Hemphill SA,
    5. Донат S,
    6. Catalano RF

    (2004) Половое созревание и начало употребления и злоупотребления психоактивными веществами. Педиатрия 114: e300-e306.

  57. ↵
    1. Piazza PV,
    2. Deminière JM,
    3. Le Moal M,
    4. Саймон Х

    (1989) Факторы, которые предсказывают индивидуальную уязвимость к самоуправлению амфетаминов. Наука 245: 1511-1513.

  58. ↵
    1. Piazza PV,
    2. Deroche-Gamonent V,
    3. Rouge-Pont F,
    4. Le Moal M

    (2000). Вертикальные сдвиги в функциях доза-ответ в режиме самоконтроля предсказывают фенотип, чувствительный к наркотикам, предрасположенный к наркомании. J Neurosci 20: 4226-4232.

  59. ↵
    1. Picetti R,
    2. Ho A,
    3. Бутельман Э.Р.,
    4. Kreek MJ

    (2010). Предпочтение дозы и увеличение дозы при использовании кокаина с расширенным доступом у крыс Fischer и Lewis. Психофармакология (Berl) 211: 313-323.

  60. ↵
    1. Pucak ML,
    2. Грейс А.А.

    (1991) Частичные дофаминовые выделения приводят к повышенной чувствительности остаточных нейронов допамина к апоморфину. Synapse 9: 144-155.

  61. ↵
    1. Quadros IM,
    2. Miczek KA

    (2009) Два режима интенсивного кокаина bingeing: повышенная стойкость после стресса социального поражения и увеличение скорости приема из-за расширенных условий доступа у крыс. Психофармакология (Berl) 206: 109-120.

  62. ↵
    1. Reboussin BA,
    2. Энтони JC

    (2006) Существуют ли эпидемиологические данные для поддержки идеи о том, что синдром кокаиновой зависимости возникает вскоре после начала употребления кокаина? Нейропсихофармакологии 31: 2055-2064.

  63. ↵
    1. Ridderinkhof KR,
    2. van der Molen MW

    (1997) Психические ресурсы, скорость обработки и ингибиторный контроль: перспектива развития. Biol Psychol 45: 241-261.

  64. ↵
    1. Risner ME,
    2. Silcox DL

    (1981) Психостимуляторное самоуправление собаками биглей в парадигме прогрессивного отношения. Психофармакология (Berl) 75: 25-30.

  65. ↵
    1. Робертсон Г.С.,
    2. Tham CS,
    3. Wilson C,
    4. Якубович А,
    5. Fibiger HC

    (1993) Сравнение in vivo эффектов квинпирола и предполагаемых пресинаптических допаминергических агонистов B-HT 920 и SND 919 на удаление половых дофаминов и ацетилхолина. J Pharmacol Exp Ther 264: 1344-1351.

  66. ↵
    1. Schramm-Sapyta NL,
    2. Walker QD,
    3. Caster JM,
    4. Левин Э.Д.,
    5. Kuhn CM

    (2009) Являются ли подростки более уязвимыми к наркомании, чем взрослые? Данные из моделей на животных. Психофармакология (Berl) 206: 1-21.

  67. ↵
    1. Schramm-Sapyta NL,
    2. Cauley MC,
    3. Stangl DK,
    4. Glowacz S,
    5. Stepp KA,
    6. Левин Э.Д.,
    7. Kuhn CM

    (2011) Роль индивидуальных и различий в развитии при добровольном потреблении кокаина у крыс. Психофармакология (Berl) 215: 493-504.

  68. ↵
    1. Шахбази М,
    2. Моффетт А.М.,
    3. Уильямс Б.Ф.,
    4. Frantz KJ

    (2008) Возрастное и зависимое от пола амфетаминовое самоуправление у крыс. Психофармакология (Berl) 196: 71-81.

  69. ↵
    1. Siegmund S,
    2. Vengeliene V,
    3. Певец М.В.,
    4. Spanagel R

    (2005) Влияние возраста на начало употребления алкоголя на долгосрочное самолечение этанола с фазами депривации и стресса. Алкоголь 29: 1139-1145.

  70. ↵
    1. Копье LP

    (2000) Подростковый мозг и возрастные поведенческие проявления. Neurosci Biobehav Rev 24: 417-463.

  71. ↵
    1. Spear LP,
    2. Тормоз SC

    (1983). Периатогенность: возрастное поведение и психофармакологическая чувствительность у крыс. Dev Psychobiol 16: 83-109.

  72. ↵
    1. Stansfield KH,
    2. Kirstein CL

    (2006) Влияние новизны на поведение у подростков и взрослых крыс. Dev Psychobiol 48: 10-15.

  73. ↵
    1. Steinberg L

    (2004) Возрождение риска в подростковом возрасте: какие изменения и почему? Ann NY Acad Sci 1021: 51-58.

  74. ↵
    1. Штурман Д.А.,
    2. Mandell DR,
    3. Moghaddam B

    (2010) Подростки демонстрируют поведенческие различия у взрослых во время инструментального обучения и вымирания. Behav Neurosci 124: 16-25.

  75. ↵
    1. Twining RC,
    2. Болан М,
    3. Григсон П.С.

    (2009) Якорная доставка кокаина отвратительна и защищает от мотивации к препарату у крыс. Behav Neurosci 123: 913-925.

  76. ↵
    1. Ungless MA,
    2. Грейс А.А.

    (2012) Ты или нет? Проблемы, связанные с физиологической идентификацией дофаминовых нейронов. Тенденции Neurosci 35: 422-430.

  77. ↵
    1. Vanderschuren LJ,
    2. Niesink RJ,
    3. Van Ree JM

    (1997) Нейробиология поведения социальной игры у крыс. Neurosci Biobehav Rev 21: 309-326.

  78. ↵
    1. Wahlstrom D,
    2. Collins P,
    3. Белый T,
    4. Luciana M

    (2010) Изменения в развитии нейротрансмиссии допамина в подростковом возрасте: поведенческие последствия и проблемы в оценке. Мозг Cogn 72: 146-159.

  79. ↵
    1. Wiley JL,
    2. Эванс Р.Л.

    (2009) Размножаться или не размножаться? Эмпирическая оценка воздействия препарата у крыс-подростков. Int J Dev Neurosci 27: 9-20.

  80. ↵
    1. Zeeb FD,
    2. Роббинс Т.В.,
    3. Winstanley CA

    (2009) Серотонинергическая и дофаминергическая модуляция поведения азартных игр, оцениваемая с использованием новой задачи азартных игр крыс. Нейропсихофармакологии 34: 2329-2343.

  81. ↵
    1. Злебник Н.Е.,
    2. Anker JJ,
    3. Кэрролл МЭ

    (2012) Упражнение для снижения эскалации самообслуживания кокаина у подростков и взрослых крыс. Психофармакология (Berl) 224: 387-400.