КОММЕНТАРИИ: ранний эксперимент, демонстрирующий, что допамин влияет на уровни DeltaFosb.
Eur J Neurosci. 1996 Feb; 8 (2): 365-81.
Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS.
Источник
Факультет фармакологии, Университет Оттавы, Оттава, Онтарио, Канада. K1H 8M5.
Резюме
Используя антитело, которое распознает продукты всех известных членов семейства fos немедленных ранних генов, было продемонстрировано, что разрушение нигростриатального пути поражениями 6-гидроксидофамина (6-OHDA) медиального пучка переднего мозга вызывает длительное (> 3 месяцев) повышение Fos-подобной иммунореактивности в полосатом теле. Используя методы ретроградного отслеживания тракта, мы ранее показали, что это увеличение Fos-подобной иммунореактивности локализуется преимущественно в нейронах полосатого тела, которые проецируются на бледный шар. В настоящем исследовании вестерн-блоттинг проводился на ядерных экстрактах интактного и денервированного полосатого тела крыс с поражением 6-OHDA для определения природы Fos-иммунореактивного белка (ов), ответственного за это увеличение. Приблизительно через 6 недель после поражения 6-OHDA экспрессия двух Fos-родственных антигенов с кажущейся молекулярной массой 43 и 45 кДа была усилена в денервированном полосатом теле. Хроническое введение галоперидола также избирательно увеличивало экспрессию этих Fos-связанных антигенов, предполагая, что их индукция после дофаминергической денервации опосредована сниженной активацией D2-подобных рецепторов дофамина.
Вестерн-блоттинговое иммуноокрашивание с использованием антитела, которое распознает N-конец FosB, указывает на то, что связанные с 43 и 45 kDa Fos-антигены, индуцированные дофаминергической денервацией и хроническим галоперидолом, могут быть связаны с усеченной формой FosB, известной как deltaFosB. В соответствии с этим предложением ретроградные эксперименты по отслеживанию подтвердили, что дельтаФос-подобная иммунореактивность в деафферентной полосатой была расположена преимущественно в стриатопаллидных нейронах.
Эксперименты по сдвигу геля показали, что повышенная активность связывания AP-1 в денервированных стриатах содержала FosB-подобный белок (ы), что указывает на то, что усиленные уровни deltaFosB могут опосредовать некоторые эффекты длительного истощения дофамина на генах, регулируемых AP-1, в стриатопаллидных нейронах. Напротив, хроническое введение агониста D1-подобного рецептора CY 208243 на крыс, пораженных 6-OHDA, резко улучшало дельта-FosB-подобную иммунореактивность в полосатых нейронах, проецирующихся на основной нигр. Вестерн-блоттинговое иммуноокрашивание показало, что дельтаFosB и, в меньшей степени, FosB повышаются при хроническом применении агониста, подобного D1. Как количественная обратная транскриптаза-полимеразная цепная реакция, так и анализ защиты от рибонуклеазы продемонстрировали, что уровни мРНК deltafosB были существенно увеличены в денервированном полосатом теле с помощью хронического введения агониста, подобного D1.
Наконец, мы исследовали влияние хронического введения агонистов дофаминовых рецепторов D1-подобного и D2-подобного типов на экспрессию дельта-FosB в полосатом теле в модели болезни Паркинсона, вызванной 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридином (MPTP) у приматов. У обезьян, у которых болезнь Паркинсона была вызвана MPTP, наблюдалось умеренное увеличение количества белка(ов), подобного дельта-FosB, в то время как развитие дискинезии, вызванное хроническим введением агониста D1-подобного типа, сопровождалось значительным увеличением количества белка(ов), подобного дельта-FosB. Напротив, введение длительно действующего агониста D2-подобного типа каберголина, которое облегчало симптомы болезни Паркинсона без развития дискинезии, снижало уровень дельта-FosB почти до нормы. В совокупности эти результаты демонстрируют, что хронические изменения дофаминергической нейротрансмиссии приводят к стойкому повышению уровня белка(ов), подобного дельта-FosB, как в полосатом теле грызунов, так и приматов.