Источник
Ваггонерский центр алкоголизма и Наркомания Исследования, Институт неврологии, Техасский университет в Остине, Остин, Техас, 78712, США. [электронная почта защищена].
Абстрактные
АБСТРАКТНЫЕ:
ЗАДНИЙ ПЛАН:
Неспособность уменьшить или регулировать потребление алкоголя является признаком симптом нарушений употребления алкоголя. Исследования новых поведенческих и генетических моделей вызванных опытом изменений в употреблении алкоголя будут способствовать дальнейшему распространению знаний о нарушениях употребления алкоголя. При сравнении двух гибридных штаммов F1 у мышей наблюдалось четкое поведение самолечения алкоголя: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BXN) демонстрируют пониженный алкогольный вкус после опыта с высокой концентрацией алкоголя и периодами воздержания в то время как C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) демонстрируют устойчивое употребление алкоголя. Эти фенотипы интересны тем, что эти гибриды демонстрируют наличие генетической аддитивности (BxN) и избыточности (BxF) при потреблении этанола в зависимости от опыта.
В частности, BxF демонстрирует устойчивое предпочтение от алкоголя, а BxN проявляет пониженное предпочтение от алкоголя после опыта с высокими концентрациями этанола; однако опыт с низкими концентрациями этанола вызывает устойчивое употребление алкоголя для обоих гибридов.
В настоящем исследовании мы протестировали гипотезу о том, что эти фенотипы представлены дифференциальным продуцированием индуцибельного фактора транскрипции ΔFosB в областях поражения, отвращения и стресса.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
Изменения в пластичности нейронов (измеряемые уровнями ΔFosB) были зависимыми от опыта, а также область мозга и специфичность генотипа, что еще больше подтвердило, что нейрональные схемы лежат в основе мотивационных аспектов потребления этанола.
У мышей BxN с пониженным содержанием алкоголя были более низкие уровни ΔFosB в ядре Эдингера-Вестфаля, чем у мышей, у которых наблюдалось устойчивое предпочтение от алкоголя, и повышались уровни ΔFosB в центральной медиальной миндалине по сравнению с контрольными мышами.
Мыши BxN, демонстрирующие устойчивый уровень алкоголя, демонстрировали более высокие уровни ΔFosB в брюшной тегментальной области, Ядра Эдингера-Вестфаля и миндалины (центральные и боковые отделы).
Кроме того, в BxN мышей ΔFosB в ядре Edinger-Westphal и вентральных тегментальных областях значительно положительно коррелировали с предпочтением и потреблением этанола, Кроме того, анализ иерархической кластеризации показал, что многие мыши, не имеющие этанола, с общими низкими уровнями ΔFosB находятся в кластере, тогда как многие мыши, демонстрирующие устойчивое предпочтение алкоголя с общими высокими уровнями ΔFosB, группируются вместе.
ВЫВОДЫ:
Сравнивая и противопоставляя два фенотипа алкоголя, это исследование демонстрирует, что схемы, связанные с наградами и стрессом (включая ядро Эдингера-Вестфалия, вентральную тегментальную область, миндалину), подвергаются значительной пластичности, что проявляется в снижении предпочтений от алкоголя.
проверка данных
Существуют известные факторы восприимчивости, экологические и генетические, связанные с злоупотреблением алкоголем и алкоголизмом. Способность пить обильное количество алкоголя с небольшим последствием для индивида является первичным симптомом начала многих алкоголиков, указывая на то, что низкий уровень реакции на алкоголь является основным фактором уязвимости в развитии алкоголизма [1,2]. Определение нейробиологических факторов, способствующих умеренности алкоголя, поможет нам понять употребление алкоголя и злоупотребления ими и станет эффективной стратегией для разработки улучшенных методов лечения людей с диагнозом расстройств, связанных с употреблением алкоголя. Использование моделей грызунов для имитации болезней человека стало мощным инструментом в продвижении понимания этого заболевания и улучшения лечения. Существует несколько моделей грызунов для изучения аспектов злоупотребления алкоголем и алкоголизма, однако ни одна модель алкоголизма полностью. Степень, в которой мышь будет устно самостоятельно вводить растворы этанола в одинаковых условиях окружающей среды, сильно зависит от генетического фона [3].
Недавно мы обнаружили, что гибридные мыши C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) и FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 самостоятельно вводят необычно высокие уровни алкоголя во время тестов с двумя бутылочными предпочтениями (женщины потребляют 20-35 г / кг / день и самцы 7-25 г / кг / день, в зависимости от концентрации и парадигмы) [4]. Эта новая генетическая модель обладает значительным преимуществом по сравнению с существующими инбредными штаммами, в том числе с подтверждением избыточного фенотипа и употреблением алкоголя до высокого уровня алкоголя в крови [4]. Кроме того, высокое потребление этанола, проявляемое мышами BxF, проявляется в двух дополнительных парадигмах употребления этанола (употребление в темноте и приема этанола во время планового доступа к жидкости) [4]. Затем мы наблюдали отличное поведение при самовосстановлении алкоголя при сравнении двух гибридных штаммов F1 у мышей: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) демонстрируют пониженное предпочтение от алкоголя после опыта с высокой концентрацией алкоголя и периодов воздержания, а BxF демонстрирует устойчивое употребление алкоголя [5]. Используя батарею поведенческих тестов, мы показали, что BxN более чувствительны, чем мыши BxF, к аверсивным и успокаивающим, но не полезным эффектам этанола [6].
Основные исследования по новым поведенческим и генетическим моделям потребления алкоголя с высоким содержанием алкоголя и вызванные опытом изменения в употреблении алкоголя будут способствовать дальнейшему распространению знаний о злоупотреблении алкоголем и алкоголизмом. Фенотип пониженного алкогольного предпочтения интересен тем, что мыши BxN изначально демонстрируют высокое предпочтение растворам этанола. Хотя мотивационный аспект сокращения потребления алкоголя после опыта с высокими концентрациями этанола и воздержанием неизвестен, мышей BxN можно сравнить с умеренными алкогольными напитками, поскольку они все еще потребляют растворы этанола, но на пониженном уровне, по-видимому, из-за аверсивного опыта.
Приоритетная модель предпочтения алкоголя также интересна, так как мыши BxF стабильно потребляют чрезвычайно высокие уровни этанола независимо от предыдущего опыта. Устойчивое и пониженное предпочтение от алкоголя может быть связано с эффектом лишения алкоголя, явлением, когда животные демонстрируют значительно повышенное потребление алкоголя после периода принудительного абстинентногоe [7]. Эффект лишения алкоголя является полезным явлением для изучения повышенного алкогольного поведения. Хотя экспериментальный график, который, как известно, вызывает эффект лишения алкоголя, сильно отличается от используемого здесь графика, сравнение постоянного и пониженного алкогольного предпочтения с эффектом лишения алкоголя связывает различные поведенческие фенотипы, обсуждаемые здесь, с важным явлением в моделях исследования алкоголя в грызунах. Превосходное предпочтение от алкоголя было бы противоположным эффекту лишения алкоголя, а устойчивое предпочтение от алкоголя можно было бы назвать отсутствием эффекта лишения алкоголя. Использование разнообразных генетических моделей животных, таких как BxF и BxN, в значительной степени способствует развитию поля, поскольку считается, что нарушения употребления алкоголя возникают из-за сложных взаимодействий между генетикой и окружающей средой. Идентификация дифференциальной непосредственной ранней экспрессии генов для этих гибридов дает представление о схемах мозга, важных для полезных и отвратительных свойств этанола.
Этанол и другие связанные с наркотиками нейросхемы были изучены в конкретных моделях грызунов с использованием молекулярных маркеров пластичности и / или активности нейронов [8–15]. Самостоятельный и управляемый экспериментатором этанол не приводит к эквивалентным картам обмена веществ мозга, предполагая, что определенные схемы лежат в основе усиливающих эффектов этанола [8,9].
Одним из ключевых компонентов, которые еще предстоит широко изучить в исследованиях на алкоголь, является исследование продолжительного и пониженного поведения предпочтений в отношении алкоголя и идентификация нейронных цепей, вовлеченных в это поведение. Цель этого эксперимента состояла в том, чтобы идентифицировать области мозга, занятые устойчивым и уменьшенным алкогольным предпочтением. Поскольку было показано, что хроническое введение алкоголя (наряду с другими наркотиками злоупотребления) вызывает региональные различия в уровне ΔFosB, мы протестировали гипотезу о том, что эти поведенческие фенотипы представлены дифференциальным продуцированием индуцибельного транскрипционного фактора ΔFosB в областях мозга, известных быть вовлеченным в награду, отвращение и стресс [10].
Хронические стимулы, которые вызывают региональные различия в уровнях ΔFosB, включают наркотики злоупотребления (алкоголь, кокаин, амфетамин, никотин, морфин и антипсихотические средства), хронический стресс (стресс, стресс, непредсказуемый шок стопы, электросудорожные судороги) и компульсивное колесо [11]. В качестве потенциального медиатора долгосрочных адаптаций в головном мозге, определение доминирующего варианта FosB (FosB или ΔFosB) в ответ на хроническое лечение этанолом является важным отличием.
Существует несколько исследований, которые измеряли FosB и ΔFosB после хронических раздражителей, для которых не было подтверждено, что ΔFosB является доминирующей изоформой (такой как описанная ниже). Однако есть веские доказательства того, что ΔFosB, а не FosB, является доминирующей изоформой после хронических раздражителей [10–12]. В исследовании Ryabinin and Wang (1998) было обнаружено, что у пациентов с низким содержанием алкоголя, предпочитающих мышей DBA / 2J, четыре дня повторных инъекций этанола приводили к устойчивому увеличению экспрессии FosB в следующих областях мозга: переднем кортикальном миндалевидном ядре, боковом перегородке вентральном, центральной миндалине , латеральная миндалина, латеральный гипоталамус, раковина окунания ядра, ядро лозы стрии и паравентрикулярное ядро таламуса [13]. Их результаты идентифицируют нейросхем, реагирующий на этанол. Экспрессия FosB также была измерена у высокого спирта, предпочитающего мышь C57BL / 6J при получении и поддержании самообслуживания этанолом в условиях ограниченного доступа. Во время приобретения самоуправления не было изменений в уровнях FosB [14]. Однако после двухнедельного автономного введения этанола с ограниченным доступом уровни FosB были увеличены в центральном медиальном ядре миндалины и ядра Edinger-Westphal [15]. В целом, отчеты идентифицируют новые регионы, занимающиеся самообслуживанием этанолом, а также участвуют в роли мезокортиколимбического пути и расширенной миндалины [16]. Тем не менее, важно отметить, что изменения уровня ΔFosB зависят от пути введения этанола, дозы и продолжительности времени, подвергаемого обработке или графику [13–15].
Мышиные штаммы, используемые в этом исследовании, представляют собой интересные модели для сравнения устойчивых и пониженных алкогольных предпочтений и лежащих в их основе механизмов, ответственных за эти различные реакции спирта. Это исследование демонстрирует, что мыши, демонстрирующие пониженное предпочтение от алкоголя, также демонстрируют значительную пластичность в схемах, связанных с наградами и стрессом (включая ядро Эдингера-Вестфаля, вентральную тегментальную область, миндалевидную оболочку, ядро и кипучую кору).
Итоги
Влияние концентрации алкоголя и периодов абстиненции на самообслуживание у мышей BxF и BxN
Чтобы продемонстрировать, что различные концентрации этанола и / или периоды абстиненции изменили последующее потребление этанола, мы разработали четыре графика (группы) для измерения потребления этанола (рисунок (Figure1a, б).1а, б). Для каждого гибрида было четыре экспериментальные группы: высокие концентрации, высокие концентрации с периодами абстиненции, низкие концентрации и низкие концентрации с периодами воздержания. Полные данные для предпочтения этанола (рисунок (Figure2)2) и потребления (рисунок (Figure3)3) (для всех групп и обоих генотипов) приведены для справки. Чтобы установить и проиллюстрировать поведенческие фенотипы устойчивого и пониженного предпочтения алкоголя, данные о предпочтениях и потреблении этанола 9% этанола представлены на рисунках Figures44 и and5.5, Эти поведенческие фенотипы основаны на сравнении предпочтений и потребления этанола 9% от первого, второго, третьего и четвертого представлений в группах с высокой концентрацией и соответствующих экспериментальных дней для групп с низкой концентрацией. Проведено двухстороннее ANOVA (генотип x время) предпочтения и потребления этанола 9% этанола. Для группы с высокими концентрациями предпочтение этанола (рис. (Figure4a)4а) и потребления (рисунок (Figure5a)5a) были больше для BxF, чем для BxN, и BxF демонстрировал устойчивое предпочтение и потребление алкоголя, в то время как BxN демонстрировал снижение предпочтения и потребления алкоголя (ПРЕДПОЧТЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие F (3,54) = 4.83, P <0, генотип F (01, 1,54) = 24.10, P <0.001, время F (3,54) = 9.92, P <0.0001; РАСХОД ЭТАНОЛА - взаимодействие N / S, генотип F (1,54) = 50.73, P <0.0001, время F (3,54, 11.68) = 0.0001, P <XNUMX). Для группы высоких концентраций с воздержанием, предпочтение отдается этанолу (рис. (Figure4b)4б) и потребление (рисунок (Figure5b)5b) были больше для BxF, чем для BxN, и BxF демонстрировал устойчивое предпочтение и потребление алкоголя, в то время как BxN демонстрировал снижение предпочтения и потребления алкоголя (ПРЕДПОЧТЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие F (3,132) = 15.89, P <0.0001, генотип F (1,132) = 250.43, P <0.0001, время F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ПОТРЕБЛЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие F (3,132) = 11.35, P <0.0001, генотип F (1,132) = 510.88, P <0.0001, время F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Для группы с низкой концентрацией предпочтение отдается этанолу (рис. (Figure4c)4c) и потребление (рисунок (Figure5c)5c) были больше для BxF, чем для BxN, и оба гибрида демонстрировали устойчивое предпочтение и потребление алкоголя (ПРЕДПОЧТЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие N / S, генотип F (1,54) = 12.2, P <0.01, время N / S; ПОТРЕБЛЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие N / S, генотип F (1,54) = 74.83, P <0.0001, время N / S). Для группы с низкой концентрацией и воздержанием, предпочтение отдается этанолу (рис. (Figure4d)4d) и потребления (рисунок (Figure5d)5d) были больше для BxF, чем для BxN, и оба гибрида демонстрировали умеренное снижение предпочтения и потребления алкоголя (ПРЕДПОЧТЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие N / S, генотип F (1,132) = 166.58, P <0.0001, время N / S; ПОТРЕБЛЕНИЕ ЭТАНОЛА - взаимодействие F (3,132) = 3.61, P <0.05, генотип F (1,132) = 480.64, P <0.0001, время F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Таким образом, в группах с высокими концентрациями (без воздержания) BxF демонстрировал устойчивое предпочтение алкоголя, в то время как BxN демонстрировал пониженное предпочтение алкоголя, а в группах с низкой концентрацией (без воздержания) как BxF, так и B6xN демонстрировали устойчивое предпочтение алкоголя. Поскольку интересующие фенотипы лучше всего фиксируются в группах без воздержания, они находятся в центре внимания оставшейся части исследования.
Уровни ΔFosB
Количественное определение и анализ ΔFosB использовали для идентификации хронической активации нейроциркуляторной системы в течение продолжительного и пониженного уровня алкоголя. Для каждого гибрида были три экспериментальные группы: высокие концентрации, низкие концентрации и вода (контроль). Данные ΔFosB представлены как процентные положительные нейроны ΔFosB [(# из положительных нейронов ΔFosB) / (# из положительных нейронов ΔFosB + # Ниссль-положительных нейронов)] (Таблица (Table1).1). Предыдущие работы показали, что опыт этанола может вызвать нейродегенерацию [17]. Поэтому мы исследовали нейронные числа в этом исследовании и не сообщали о существенной разнице, основанной на генотипе или группе для областей мозга, количественно определенных в этом исследовании. Были проведены следующие три анализа данных ΔFosB: трехфакторная ANOVA (генотип x группа x область мозга), 1) двухсторонняя ANOVA (группа x области мозга) для каждого генотипа и 2) корреляционные матрицы были разработаны для сопоставления корреляции сетей.
Повторные измерения трехфакторного дисперсионного анализа (генотип x группа x область мозга) выявили взаимодействие генотипа x области мозга [F (15,375 2.01) = 05, P <15.375], взаимодействие группы x области мозга [F (1.99) = 0.01, P <15,375], и основной эффект области мозга [F (43.36 000) = 2,374, P <11.79]. Повторные измерения двухфакторным дисперсионным анализом (область мозга x группа) для каждого генотипа показали, что существует основной эффект группы и области мозга как для BxF, так и для BxN [BxF - F (0001) = 15,374, P <25.64, основной эффект группа; F (0001 2,360) = 43.38, P <0001, основной эффект области мозга; BxN - F (15,360) = 23.73, P <0001, основной эффект группы; F (XNUMX) = XNUMX, P <XNUMX, основной эффект генотипа]. Апостериорный анализ выявил шесть значимых групповых различий для BxN (рис. (Figure6a-с).6переменный ток). Процент ΔFosB был выше в группе с низкими концентрациями, чем в группе воды в La, CeC / CeL, EW и VTA. Процент ΔFosB был выше в группе с высокими концентрациями, чем в группе воды в CeMPV. Процент ΔFosB был выше в группе с низкими концентрациями, чем в группе с высокими концентрациями в EW. Данные ΔFosB для всех других количественно определяемых областей мозга представлены в таблице Table1.1. Корреляционный анализ Пирсона был использован для определения того, коррелирует ли% ΔFosB-положительных нейронов в данной области мозга с потреблением или предпочтениями этанола. Потребление и предпочтение этанола продемонстрировало значительную положительную корреляцию с% ΔFosB в EW и VTA мышей BxN (ПОТРЕБЛЕНИЕ ЭТАНОЛА - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ПРЕДПОЧТЕНИЕ ЭТАНОЛА - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05. для всех).
Комплексная связь между экспрессией ΔFosB, генотипом, областью мозга и потреблением этанола была дополнительно исследована с использованием анализа основных компонентов и иерархической кластеризации. Анализ основных компонентов показал, что большая часть изменчивости (~ 80%) в данных была представлена компонентами 5. Затем была выполнена упорядоченная иерархическая кластеризация (сгруппированная индивидами и областями мозга) и упорядочивалась с использованием первого основного компонента (рисунок (Figure7).7). Индивидуальная кластеризация выявила сильные, но не идеальные формы группировки на основе потребления этанола, независимо от генотипа. Многие из мышей, не имеющих этанола, группировались вместе и демонстрировали менее общий ΔFosB, чем средний, и многие из мышей, которые проявляли устойчивое предпочтение от алкоголя, группировались вместе и демонстрировали более общий ΔFosB, чем средний. Эти два кластера были самыми расходящимися. Три кластера между ними представляли собой более чем, менее чем и среднее сочетание значений ΔFosB и фенотипов употребления этанола.
Обсуждение
При сравнении двух гибридных штаммов F1 у мышей наблюдалось четкое поведение при самовосстановлении алкоголя: BxN демонстрирует пониженное предпочтение от алкоголя после опыта с высокой концентрацией алкоголя и периодов воздержания, в то время как BxF демонстрирует устойчивое предпочтение от алкоголя. BxF моделирует стабильное, высокое потребление (устойчивое предпочтение от алкоголя) и BxN моделирует умеренное употребление алкоголя (снижение потребления алкоголя). Пластическая активность нейронов (или активность, измеренная уровнями ΔFosB) была различной в зависимости от опыта этанола, что еще больше поддерживало основную роль специфических нейронных схем в устойчивом и уменьшенном алкогольном предпочтении.
Для штамма с высоким содержанием алкоголя, C57BL / 6, предпочтение и потребление этанола сильно зависят от начальной концентрации этанола, длины абстиненции и суб-штамма (C57BL / 6Cr или C57BL / 6J) [7,18]. Мы обнаружили, что предпочтения и потребление этанола, наблюдаемые у мышей BxF, были последовательно выше (и более стабильны, чем в BxN) в четырех разных проверенных графиках. Умеренно высокий уровень этанола и его потребление в BxN поддерживались только одним графиком хронического питья (низкие концентрации без абстиненции), тогда как снижение предпочтений и потребления наблюдалось при всех других проверенных хронических сценариях выпивки. Препарат BxN с пониженным содержанием алкоголя предлагает новую модель для животных, в которой опыт (повторное представление этанола после опыта с несколькими высокими концентрациями этанола и / или несколько кратковременных периодов воздержания) резко снижает их реакцию на ранее высокоприоритетную концентрацию этанола.
Самостоятельный и управляемый экспериментатором этанол продуцирует различные метаболические карты мозга, предполагая, что определенные схемы лежат в основе усиливающих эффектов этанола [8,9]. Мы протестировали гипотезу о том, что поведенческие фенотипы устойчивого и пониженного алкоголя представлены дифференциальным производством индуцибельного транскрипционного фактора ΔFosB в областях мозга, которые, как известно, участвуют в награде, отвращении и стрессе. ΔFosB является транскрипционным фактором с уникальной долговременной стабильностью и не снижает чувствительность к стимулам, как c-Fos, скорее, он накапливается во время хронических процедур. Увеличение ΔFosB связано с увеличением активности нейронов и, как полагают, отражает долговременную пластичность нейронов. Мы обнаружили, что процент положительных нейронов ΔFosB в областях мозга зависит от генотипа (BxF и BxN) и группы (контроль воды, низкие концентрации и высокие концентрации).
Fили BxN, пост-hoc-анализ показал, что добровольное потребление этанола привело к увеличению ΔFosB в ядре EW, VTA и амигдале: указывает на увеличение пластичности нейронов в областях мозга, которые, как известно, участвуют в реакции этанола, вознаграждения и стресса. Мыши BxN в группе с высокими концентрациями (снижение потребления алкоголя) уменьшили пластичность нейронов в EW, предполагая, что эти нейроны реагируют на потребление алкоголя с зависимой от опыта пластичностью. В группе с низкой концентрацией (демонстрирует устойчивое предпочтение от алкоголя) пластичность нейронов в EW больше, чем в группах с высокой концентрацией и контролем воды. Хотя проведенные с использованием различных парадигм употребления этанола и моделей генетических мышей наши результаты в EW мышей BxN согласуются с предыдущими исследованиями потребления этанола [14,15]. Недавно не-преганглиональный ЭО был охарактеризован как содержащий периокуломоторный урокортин (Ucn) -содержащие нейроны [19]. Ucn1 представляет собой кортикотропин-освобождающий фактор (CRF) -подобный пептид, который связывает рецепторы CRF1 и CRF2. Предыдущие исследования с использованием генетических, фармакологических и патологических подходов показали, что Ucn1 участвует в регулировании потребления алкоголя [19–22]. Tвот известная генетическая предрасположенность к употреблению алкоголя во многих грызунах, что коррелирует с более высокими базальными уровнями Ucn1 в EW и LSi [23]. Таким образом, отсутствие пост-hoc-значения, которое мы наблюдали в EW для высокого алкоголя, предпочитающего и потребляющего мышей BxF, было неожиданным. Возможно, это связано с слегка повышенными процентными уровнями ΔFosB в водной группе BxF по сравнению с водной группой BxN. Действительно, процентные уровни ΔFosB для всех мышей, проявляющих устойчивое предпочтение от алкоголя (группа BXF с высокой концентрацией, группа низких концентраций BxF и группа низких концентраций BxN), были весьма схожими.
Для BxN потребление этанола в группе с низкими концентрациями увеличивало пластичность нейронов в VTA (больше, чем в группах с высокой концентрацией и контролем воды). Желание и потребление этанола были также выше для группы с низкими концентрациями, Отсутствие пост-hoc-значения, которое мы наблюдали в VTA для высокого употребления алкоголя, предпочитающего и потребляющего мышей BxF, было неожиданным и может быть связано с чуть более высокими базальными уровнями ΔFosB в группе контроля воды. Процентные уровни ΔFosB были слегка повышенными в водной группе BxF по сравнению с водной группой BxN, тогда как процентные уровни ΔFosB были весьма схожими для всех мышей с устойчивым предпочтением от алкоголя (группа высоких концентраций BxF, группа низких концентраций BxF и группа BxN Low Concentrations) , Система допамина VTA играет важную роль в опосредовании усиливающих эффектов этанола и участвует во многих взаимозависимых связях, важных для этанола и поведения, связанного с наградами [24–26]. Кроме того, VTA разрабатывается для ядра миндалины и EW. Было показано, что крысы самостоятельно вводят этанол непосредственно в VTA [27]. Кроме того, воздействие этанола увеличивает скорость обжига дофаминергических нейронов в VTA [28,29]. Повышенная скорость обжига может быть связана с индукцией ΔFosB в VTA, которую мы наблюдали после хронического добровольного применения этанола в BxN.
Алкогольная зависимость вызывает длительные нейроадаптации, приводящие к отрицательным эмоциональным состояниям; важным механизмом отрицательного усиления является передача сигналов кортикотропин-рилизинг-фактор (ОФД) в миндалине [30]. Фармакологические манипуляции с нейронами в CeA нацелены на рецепторы ГАМК, CRF, опиоидов, серотонина, динорфина и норэпинефрина [25,31–34]. гАнтагонисты ABA, а также антагонисты CRF уменьшают потребление этанола [32,33,35]. Поражения CeA уменьшают потребление добровольного этанола непрерывного доступа [36]. Наши результаты также подтверждают роль СеА в регулировании алкогольного поведения. ГАМКергические нейроны в центральной миндалине образуют гетерогенную популяцию, связи которой связаны с их содержанием пептидов. Эти ГАМКергические нейроны объединяют активность CeA. Как рассмотрено в [Уи и Кооб (2010]), sвечные исследования выявили роль дипольных и каппа-опиоидных рецепторов в поддержании и эскалации ингалята этанолаe [37]. Совсем недавно Уокер и др. Продемонстрировали, что антагонист κ-опиоидного рецептора, ни-binaltorphimine, в расширенной миндалине выборочно уменьшает самоопределение этанола у зависимых животных [38]. Передача сигналов опиоидного рецептора каппа остается ключевым интересом исследований на пересечении стресса, награды и отвращения. Было также продемонстрировано, что стресс-индуцированное самолечение этанола опосредуется сигнальной сигнализацией опиоидных рецепторов каппа [39]. Центральный CeA можно подразделить на латеро-капсульные (CeL / CeC) и медиальные задние вентральные. ГАМКергические нейроны CeL / CeC получают дофаминергические иннервации от VTA; как отмечалось ранее, эти нейроны активируются после введения острой этанола и показывают увеличенные мыши с ΔFosB, демонстрирующие устойчивое употребление алкоголя. Кроме того, см. Mc [Невеста (2002]) для превосходного обзора CeA и эффектов алкоголя [40]. В нашем исследовании мышей BxN с устойчивым алкогольным предпочтением (группа низких концентраций) проявлялась повышенная пластичность нейронов у мышей CeC / CeL и La и BxN с пониженным содержанием алкоголя (группа высоких концентраций) демонстрировали повышенную пластичность нейронов в CeMPV. Эти результаты показывают, что специфический опыт этанола включает пластичность в ГАМКергических нейронах в миндалине. С этими данными, наряду с соответствующими изменениями пластичности нейронов в VTA и EW, мы предлагаем, чтобы эта схема подвергалась значительной пластичности в условиях устойчивого использования алкоголя.
Предыдущие исследования показали, что мыши C57BL / 6J могут достичь высокого уровня алкоголя в крови за счет выбора двух бутылочных напитков, однако эти уровни алкоголя в крови не поддерживаются, и часто употребление алкоголя не соответствует критериям фармакологической мотивации, предложенным Dole and Gentry (1984) [41,42]. Мыши BxN, демонстрирующие снижение потребления алкоголя, потребляли меньше, чем ожидалось от обычной мыши C57BL / 6J [1]. Поэтому, хотя мы не принимали образцы спирта крови, маловероятно, что мышей BxN, демонстрирующих пониженное предпочтение от алкоголя, достигали устойчивых фармакологически значимых уровней алкоголя в крови, что предполагает высокую концентрацию алкоголя в крови, чтобы не вызвать пластичность в этих областях мозга. Важно отметить, что очень существенное влияние группы также существует в BxF, даже несмотря на то, что постходовые результаты (скорректированные для множественных сравнений) для областей мозга BxF не указывают на значительные изменения в процентах положительных нейронов в процентах ΔFosB для любого региона после хронического потребления этанола с этими разными графиками.
Чтобы визуализировать потенциальные отношения между переменными, была выполнена иерархическая кластеризация. Тепловая карта полученного анализа показывает общую тенденцию между уровнями ΔFosB и потреблением этанола независимо от генотипа. Более высокие уровни ΔFosB были связаны с высоким уровнем питья, а более низкие уровни ΔFosB были связаны с контрольными животными; однако прочность связи была недостаточной для точного прогнозирования фенотипов употребления, основанных исключительно на уровнях ΔFosB.
Выводы
Характерное поведение алкоголя в самолечении наблюдалось с двумя гибридными штаммами F1 у мышей: BxN демонстрирует пониженное предпочтение от алкоголя после опыта с высокими концентрациями алкоголя, тогда как BxF демонстрирует устойчивое предпочтение от алкоголя. BxF моделирует стабильное, высокое потребление (устойчивое предпочтение от алкоголя) и BxN моделирует умеренное употребление алкоголя (снижение потребления алкоголя). Изменения в пластичности нейронов (измеряемые уровнями ΔFosB) были зависимыми от опыта, а также областью мозга и генотипом, в дальнейшем определяющие нейронные схемы лежат в основе мотивационных аспектов потребления этанола. Эти результаты показывают, что изменение одной родительской линии у гибридных мышей приводит к изменениям в структуре потребления алкоголя и заметным изменениям в образцах экспрессии ΔFosB, предполагая, что различные мозговые сети задействованы в этих разных гибридных мышах.
методы
Этика
Это исследование проводилось в строгом соответствии с рекомендациями Руководства по уходу и использованию лабораторных животных национальных институтов здоровья. Протокол был одобрен Институтом по уходу за животными и его использованием в Техасском университете в Остине (AUP 2010-00028). Все операции проводились под анестезией пентобарбиталом натрия, и все усилия были направлены на минимизацию страданий.
Животные
Исследования проводились с использованием гибридных мышей FXXUMX с межкрестными самками, полученных из C1BL / 57J, и мышей FVB / NJ или NZB / B6NJ (BxF F1 и BxN F1, материнского штамма x отцовского штамма). Собаки C1BL / 57J, FVB / NJ и NZB / B6NJ были приобретены в Лаборатории Джексона (Bar Harbor, ME) и спарены в течение 1-7 недель. Потомство отлучили от изосексуальных групп каждого из генотипов (BxF F8, BxN F1). Мы тестировали только самцов мышей, чтобы облегчить сравнение с ранее собранными данными [1,5,6]. Мышей размещали в стандартных клетках с продуктами питания и водой вволю, Комната колоний и испытательная комната были на 12 h light: 12 h темный цикл (загорается на 07: 00).
Тест на выбор этанола с двумя бутылками
Метод выбора двух бутылок был использован для определения добровольных этапов самообмена этанола у женщин BxF и BxN мышей [1,6]. Гибридные мышиные мыши F1 (возраст 63 дней) индивидуально размещались в стандартных клетках, при этом в течение одной недели приготавливали бутылки с пробирками для сапфира, содержащие воду перед введением раствора этанола. После привыкания мыши имели доступ к двум идентичным бутылкам: один из которых содержал воду, а другой - раствор этанола. Позиции трубок менялись ежедневно, чтобы контролировать предпочтения позиции. Для учета потенциального разлива и испарения средний вес, истощенный из труб в контрольных клетках без мышей, каждый день вычитался из индивидуальных значений выпивки. Мышей взвешивали каждые 4 дней на протяжении всего эксперимента. Все потребление жидкости измерялось ежедневно в течение всего эксперимента. Количество потребляемого этанола и предпочтение этанола были рассчитаны для каждой мыши, и эти значения были усреднены для каждой концентрации этанола. Влияние концентрации алкоголя и периодов абстиненции на самообслуживание у мышей BxF и BxN было продемонстрировано путем назначения экспериментальной группы с доступом к высоким концентрациям (эскалация доступа к растворам этанола 3-35% с последующими повторными циклами 3 9, 18, и этанол 27%, заканчивающийся окончательной презентацией 9% этанола) и еще одна группа с низкими концентрациями (эскалация доступа к этанолу 3-9%, с остальной частью эксперимента, проведенного с доступом к 9% этанолу). У каждой из этих групп была подгруппа, которая имела или не испытывала трех недельных периодов воздержания. Контрольные мыши испытывали аналогичные условия одновременно с экспериментальными мышами, но им предлагали только одну бутылку воды.
В общей сложности для каждого гибрида было пять групп: вода (n = 14-16), высокие концентрации (n = 10), высокие концентрации с периодами абстиненции (n = 20), низкие концентрации (n = 10) и низкие концентрации с периодами абстиненции (n = 20). См. Рисунок Figure11 для подробных двух расписаний выбора бутылок.
ΔFosB Иммуногистохимия и количественная оценка
Иммуногистохимический анализ ΔFosB (ИГХ) был измерен в 16 областях мозга мышей, у которых в течение 72 дней непрерывный доступ либо к воде (контроль), либо к воде и спирту [высокие и низкие концентрации]. Влияние высоких концентраций на предпочтение и потребление этанола было намного сильнее, чем эффект воздержания; следовательно, группы, у которых были периоды воздержания, не были включены в измерения ΔFosB IHC. Кроме того, эксперимент проводился после первого появления устойчивого или пониженного предпочтения алкоголя, чтобы показать, что поведенческие фенотипы стабильны с повторяющимися циклами изменения концентрации этанола для изучения эффектов хронического потребления этанола. Через четыре-восемь часов после удаления алкоголя на 73-й день эксперимента мышей подвергали глубокой анестезии (175 мг / кг пентобарбитала натрия) и перфузировали внутрикардиально 20 мл 0.01 М фосфатно-солевого буфера (PBS), а затем 100 мл 4% раствора. параформальдегид в PBS. Мозг удаляли, после фиксировали в 4% параформальдегиде при 4 ° C, заключали в 3% агарозу, делали срезы (50 мкм, коронарные) на вибратоме, помещали в криопротектор (30% сахарозы, 30% этиленгликоля и 0.1% поливинилацетата). пирролидон в PBS) в течение ночи при 4 ° C и хранили при -20 ° C до обработки для ИГХ. Размороженные срезы промывали PBS, обрабатывали 0.3% H2O2 и инкубировали в течение одного часа в 3% нормальной козьей сыворотке для минимизации неспецифического мечения. Затем срезы тканей инкубировали в течение ночи при 4 ° C в 3% нормальной козьей сыворотке и анти-FosB (SC-48, разведение 1: 5000, Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния). Срезы промывали, инкубировали в биотинилированном козьем антикроличьем Ig (разведение 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA) в течение одного часа, промывали и инкубировали в комплексе авидин-биотин (разведение 1: 200, Elite kit-Vector Laboratories). . Активность пероксидазы визуализировали по реакции с 0.05% диаминобензидином (содержащим 0.015% H2O2). Секции тканей были обозначены Нисслом (с использованием метиленового синего / лазурного II). Слайды были закодированы для слепых подсчетов. Нейроны FOSB-IR были подсчитаны при увеличении 50X (масло) с использованием метода оптической фракции и программного обеспечения StereoInvestigator. Информация о параметрах выборки: счетный кадр (50um x 50um x 10um) был одинаковым для всех регионов с количественной оценкой; однако размер сетки определялся для каждой области мозга, чтобы гарантировать, что суммарный объем двусторонних клеток будет равен 100-300, чтобы достичь коэффициента вариации, меньшего, чем 0.1. Данные были рассчитаны как процент положительных ядер ΔFosB (число положительных ядер ΔFosB / количество нейронов) для каждого региона.
Используемое в этом исследовании антитело FosB (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) было создано против внутренней области FosB и распознает как FosB, так и ΔFosB. Хотя это антитело распознает как FosB, так и ΔFosB, иммуноположительные нейроны, количественно определенные в этом исследовании, будут упоминаться как положительные нейроны ΔFosB, поскольку было показано, что препараты злоупотребления, включая алкоголь, специально индуцируют ΔFosB, а не FosB, в нейронах. Perrotti et al. ([2008]) измеряли индукцию ΔFosB (в ответ на хроническое введение лекарств злоупотребления, включая алкоголь) с использованием двух антител: один, который распознает FosB и ΔFosB (SC-48) и один селективный для ΔFosB (не коммерчески доступен) и обнаружил, что для всех лекарств исследованная иммунореактивность, наблюдаемая с использованием антитела FosB (SC-48), обусловлена ΔFosB, поскольку они не обнаруживали никаких иммунореактивных нейронов с использованием антитела, избирательного для полноразмерного FosB [10]. Кроме того, известно, что ΔFosB индуцируется в зависимости от типа мозга и клеточного типа, различными хроническими процедурами и отличными отзывами по этой теме [11,43,44].
Сокращения и расположение нейроанатомических структур
Il - инфралимбическая кора (+1.70 мм); Cg1 - поясная корка 1 (+1.1 мм); Cg2 - поясная корка 1 (+1.10 мм); Ядро NAcc - ядро прилежащего ядра (+1.10 мм); Оболочка NAcc - оболочка прилежащего ядра (+1.10 мм); LSi - промежуточная латеральная перегородка (+1.10 мм); La - боковая миндалина (-1.22 мм); Bla - базолатеральная миндалина (-1.22 мм); CeC / CeL - центральная капсульная и центральная боковая миндалины (-1.22 мм); CeMPV - медиальная задне-вентральная часть центрального ядра миндалины (-1.22 мм); ПАГ - периаквадуктальный серый (−3.64 мм); EW - ядро Эдингера-Вестфаля (−3.64 мм); ВТА - вентральная область покрышки (−3.64 мм); DR - дорсальный шов (- 4.60 мм); PBN - парабрахиальное ядро (−5.2 мм); NTS - nucleus tractus solitarius (−6.96 мм). Мозг мыши в стереотаксических координатах[45] был использован для субъективного соответствия от одного до трех разделов для количественной оценки каждой области мозга.
Статистические процедуры
Данные сообщаются как среднее ± SEM, за исключением случаев, когда указано иное. Данные обычно распространялись. Статистика была выполнена с использованием Statistica версии 6 (StatSoft, Tulsa, OK, США) и версии GraphPad Prism 4.00 (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США). Для оценки различий между группами были проведены повторные измерения двухсторонних ANOVA для потребления этанола и данных о предпочтениях. Для данных ΔFosB были проведены два и трехсторонние ANOVA для оценки взаимодействия и основных эффектов для группы (высокие концентрации, низкие концентрации и вода), область мозга и генотип. Поправки Бонферрони для множественных сравнений и пост-hoc Bonferroni проводились, когда это было необходимо. В частности, мы предположили, что схема напряжения и вознаграждения увеличила бы FosB у мышей, демонстрируя пониженное предпочтение от алкоголя. Для каждого гибридного кросса, Pearson's r использовался для определения наличия значительных корреляций между уровнями ΔFosB и предпочтениями и потреблением этанола у опытных мышей с этанолом.
Иерархическая кластеризация была выполнена для того, чтобы визуализировать, как данные ковариационно меняются и оценивают, как группа данных вместе. Вмененные медианные значения заменяли отсутствующие проценты данных ΔFosB, которые не превышали 15% данных. Хотя существует большая степень неопределенности, чем если бы фактически вменяемые значения были соблюдены, иерархический анализ кластеризации требует полного членства или полного удаления для случайных сравнений. Иерархическая кластеризация была выполнена с использованием метода Уорда, и полученные кластеры были упорядочены по первому основному компоненту анализа основных компонентов (JMP®, версия 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Для групп, подвергшихся воздействию воды и этанола, данные ΔFosB для каждой области мозга были преобразованы z-баллом и проведен анализ основных компонентов для определения количества кластеров. Затем данные группировались группами мозга и лицами, использующими контролируемый иерархический анализ кластеризации.
Вклад авторов
ARO, YAB, RAH, TAJ внесли свой вклад в разработку исследования. Данные ARO были получены. ARO, IP, RDM проанализировали данные. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB и RAH участвовали в разработке и пересмотре рукописи. Все авторы прочитали и утвердили окончательную рукопись.
Благодарности
Мы хотели бы поблагодарить доктора. Джоди Мэйфилд и Коллин МакКлунг за полезные обсуждения и Марни Мартинес, Дженнифер Стоукс, Мишель Фошат, Хосе Сьенфуэгос, Джейми Сеймур и Даршан Пандиа за техническую помощь. Это исследование было поддержано Инициативой интегративной нейронауки по гранту консорциума по борьбе с алкоголизмом AA13520 и Национальным институтом по борьбе с алкоголизмом и алкоголизмом, предоставленным AA06399-S и AA16424.
Рекомендации
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Миф о пожаротушении и реакция на алкоголь в индейцах миссии. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Выводы по подгруппам относительно уровня реакции на алкоголь как фактор риска для злоупотребления алкоголем: колледж населения женщин и латиноамериканцев. Alcohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Добровольное потребление этанола в 15 инбредных штаммах мыши. Психофармакологии. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Крест Ref]
- Бледнов Ю.А., Меттен П., Финн Д.А., Родос Дж. С., Бергесон С.Е., Харрис Р.А., Крэбб Дж. Гибридные мыши C57BL / 6J x FVB / NJ потребляют больше алкоголя, чем мыши C57BL / 6J. Alcohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Бледнов Ю.А., Озбурн А.Р., Уокер Д., Ахмед С., Белннап Дж. К.. и другие. Гибридные мыши как генетические модели потребления алкоголя. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Озбурн А.Р., Харрис Р.А., Бледнов Ю.А. Поведенческие различия между гибридными мышами C57BL / 6JxFVB / NJ и C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1: отношение к контролю потребления этанола. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Развитие лишения алкоголя и эскалации в C57BL / 6J. Alcohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Воздействие самолечения этанола и этанола / сахарозы на показатели локального использования глюкозы в мозге у крыс. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Уильямс-Хемби Л, Поррино Л.Ю. Низкие и умеренные дозы этанола вызывают различные изменения мозговых метаболических изменений у крыс. Alcohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Отличительные закономерности индукции DeltaFosB в головном мозге наркотиками. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: молекулярный переключатель для долговременной адаптации в мозге. Мозг Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB накапливается в популяции GABAergic клеток в заднем хвосте брюшной тегментальной области после лечения психостимулянтами. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Рябинин А.Е., Ван Й.М. Повторное введение алкоголя дифференциально влияет на иммунореактивность белка c-Fos и FosB у мышей DBA / 2J. Alcohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Рябинин А.Е., Бахтелл Р.К., Фримен П., Ризингер Ф.О. ITF-экспрессия в мозге мыши при приобретении самолечения алкоголя. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Крест Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Рябинин А.Е. Алкогольное употребление вызывает селективные изменения в области экспрессии индуцибельных транскрипционных факторов мозга. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Крест Ref]
- Каливас П.В. Как мы определяем, какие наркотические нейропластические изменения важны? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Крест Ref]
- Экипажи FT, Никсон К. Механизмы нейродегенерации и регенерации в алкоголизме. Алкоголь. 2009;44: 115-127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Крест Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Характеристика эффекта липирования этанола в субстратах мышей C57BL / 6. Алкоголь. 2006;40: 119-126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Рябинин А.Е. Распределение Urocortin 1 в мозге мыши зависит от штамма. Neuroscience. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Крест Ref]
- Рябинин А.Е. Поражения ядра Edinger-Westphal у мышей C57BL / 6J нарушают вызванное этанолом гипотермию и потребление этанола. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Рябинин А.Е., Йонейма Н., Танчук М.А., Марк Г.П., Финн Д.А. Микроинъекция Urocortin 1 в боковую перегородку мыши регулирует приобретение и выражение потребления алкоголя. Neuroscience. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Турек В.Ф., Цывковская Н.О., Гития П., Хардинг С., Лек А.Д., Рябинин А.Е. Экспрессия Urocortin 1 в пяти парах крысиных линий селективно разводится для различий в употреблении алкоголя. Психофармакологии. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Крест Ref]
- Рябинин А.Е., Вейтемье А.З. Урокортин 1 нейросхемой: чувствительность этанола и потенциальное участие в потреблении алкоголя. Brain Res Откр. 2006;52: 368-380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Крест Ref]
- Самсон Х.Х., Толливер Г.А., Харагути М., Ходж Х.В. Самоуправление алкоголем: роль мезолимбического дофамина. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Крест Ref]
- McBride WJ, Li TK. Модели животных алкоголизма: нейробиология высокого алкогольного поведения у грызунов. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Крест Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Цели нейроциркуляции в качестве этанола и зависимости. Alcohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Внутричерепное самолечение этанола в брюшной тегментальной области самцов крыс Wistar: доказательства участия дофаминовых нейронов. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Крест Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Низкие дозы этанола активируют дофаминергические нейроны в брюшной тегментальной области. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Крест Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Этанол увеличивает скорость обжига дофаминовых нейронов вентральной тесной области крысы in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Крест Ref]
- Хейлиг М, Кооб Г.Ф. Ключевая роль фактора, снижающего кортикотропин в алкогольной зависимости. Тенденции Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Доказательства того, что амигдала участвует в ингибирующих действиях антагонистов рецепторов 5-HT3 при употреблении алкоголя на крысах. Алкоголь. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Крест Ref]
- Гилпин Н.В., Ричардсон Х.Н., Кооб Г.Ф. Влияние антагонистов CRF1-рецепторов и опиоидных рецепторов на индуцированные зависимостью рост алкоголя, употребляемого спиртоподобными (P) крысами. Alcohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. Антагонизм рецептора ГАМКА в расширенной миндале уменьшает самообладание этанола у крыс. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Крест Ref]
- Роберто М, Мадамба С.Г., Мур С.Д., Таллент М.К., Сиггинс Г.Р. Этанол увеличивает передачу GABAergic как в пред-, так и постсинаптических сайтах в центральных нейронах центральной нервной системы крысы. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Робертс AJ, Коул М, Кооб Г.Ф. Внутриамилгала-муксимол уменьшает самостоятельное введение этанола в зависимые крысы. Alcohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Крест Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Снижение экспериментальной тревоги и добровольного потребления этанола у крыс после центральных, но не базалатеральных поражений миндалин. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Крест Ref]
- Wee S, Koob GF. Роль системы опиоидов динорфин-каппа в усилении воздействия наркотиков. Психофармакология (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Уолкер Б.М., Вальдес Г.Р., Маклафлин Ю.П., Бакалкин Г. Ориентация систем опиоидных рецепторов динорфин / каппа для лечения злоупотребления алкоголем и зависимости. Алкоголь. 2012;46: 359-370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Эндогенное каппа-опиоидное опосредование индуцированного стрессом потенцирования предпочтения и самообладания, обусловленного этанолом. Психофармакология (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Крест Ref]
- McBride WJ. Центральное ядро миндалины и последствия алкогольного и алкогольного поведения у грызунов. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Крест Ref]
- Доул В.П., Джентри Р.Т. К аналогу алкоголизма у мышей: Масштабные факторы в модели. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Доул В.П., Джентри Р.Т. К аналогу алкоголизма у мышей: критерии признания фармакологически мотивированного питья. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
- Nestler EJ. Молекулярная нейробиология зависимости. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Крест Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: молекулярный медиатор долговременной нейронной и поведенческой пластичности. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Крест Ref]
- Франклин К.Дж., Паксинос Г. Мышь мозга в стереотаксических координатах. 2. Сан-Диего, Калифорния: Академический; 2001.
;
