Струйное регулирование DeltaFosB, FosB и cFos во время самообслуживания и отмены кокаина (2010)

J Neurochem. Авторская рукопись; доступно в PMC Oct 1, 2011.
Опубликовано в окончательной отредактированной форме как:
J Neurochem. Oct 2010; 115 (1): 112-122.

Опубликован онлайн Aug 3, 2010. DOI:  10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x

Окончательная редакция этой статьи издателя доступна по адресу J Neurochem
См. Другие статьи в PMC, которые цитата опубликованной статьи.

Абстрактные

Хроническое воздействие лекарственного средства индуцирует изменения в профилях экспрессии генов, которые, как полагают, лежат в основе развития наркомании. В настоящем исследовании изучалась регуляция Fos-семейства факторов транскрипции, в частности cFos, FosB и ΔFosB, в полосатых субрегионах во время и после хронического внутривенного введения кокаина у самообслуживающих и крытых крыс. Мы обнаружили, что cFos, FosB и ΔFosB демонстрируют региональные и временные отличительные образцы экспрессии с большим накоплением белка FOSB в оболочке ядра и ядра ядра (NAc) после хронического введения кокаина, тогда как ΔFosB увеличивается в хвостато-putamen (CPu) как при остром, так и при хроническом введении. Напротив, толерантность развивалась к кокаиновой индуцированной мРНК для ΔFosB во всех половых популяциях 3 с хроническим введением. Толерантность также была разработана для выражения FosB, особенно в оболочке NAc и CPu. Интересно, что толерантность к индуцированной кокаином индукции cFos зависела от волевого контроля за потреблением кокаина в вентральных, но не дорсальных полосатых областях, тогда как регуляция FosB и ΔFosB была сходной у самцов кокаина и животных, подвергнутых курению. Таким образом, опосредованные ΔFosB нейроадаптации в CPu могут возникать раньше, чем считалось ранее с началом внутривенного использования кокаина, и вместе с большим накоплением ΔFosB в NAc могли бы способствовать увеличению зависимости от кокаина в зависимости от зависимости.

Ключевые слова: кокаин, самоуправление, уход, стриатум, Fos

Введение

Повторное заражение наркотиками вызывает нейроадаптации в пути распространения мозгов, которые, как полагают, лежат в основе как развития компульсивного употребления наркотиков, так и сохраняющейся тяги и рецидива к наркотическому поведению при отмене. Многие из этих нейроадаптаций являются результатом индукции факторов транскрипции и последующей регуляции экспрессии генов, которая может иметь потенциально долгосрочные последствия для структуры и функции нейронов (Zhang и другие 2006). Семейство факторов транскрипции Fos представляет особый интерес, так как члены этого семейства демонстрируют дифференциальные индукционные картины в полосатых областях после острого и хронического воздействия кокаина. Когда кокаин вводится остро в пассивном, неконкурентном способе (т. Е. Путем внутрибрюшинной (IP) инъекции), он увеличивает мРНК и белок FOSB и белок как на дорсальном (хвостато-путамен, CPu), так и вентральном (ядро accumbens, NAc) полосатое тело (Graybiel и другие 1990; молодой и другие 1991; Надежда и другие 1992), в то время как толерантность к этому ответу возникает при хроническом пассивном введении (Надежда и другие 1992, 1994; Алибхай и другие 2007). Напротив, полосатые уровни ΔFosB (35-37 kDa), стабильный усеченный сплайс-вариант fosB ген, повышен после хронического, но не острого пассивного воздействия кокаина (Надежда и другие 1994; Най и другие 1995; Chen и другие 1995, 1997). Эти стабильные изоформы AFosB могут гетеродимеризоваться с различными белками семейства Jun, чем cFos или FosB (Chen и другие 1995), а также могут формировать функциональные гомодимеры с собой (Йориссен и другие 1997), предполагая, что дифференциальное образование комплексов активаторов-1 (AP-1) после хронического кокаина может влиять на экспрессию генов в AP-1-сайтах таким образом, который отличается от экспрессии генов, вызванных острым воздействием кокаина (Надежда, 1998; Kelz и Nestler, 2000). Дифференциальные изменения в профилях экспрессии генов также происходят в зависимости от того, являются ли высоты ΔFosB краткосрочными или долгосрочными, и эти изменения могут привести к дифференцированному выражению поведения, обусловленного кокаином (McClung и Nestler, 2003). Хроническое воздействие других препаратов, включая амфетамин, морфин, Δ9-THC, никотин, этанол и фенциклидин также приводит к накоплению устойчивых изоформ AOSSOS в полосатых областях (McClung и другие 2004; Perrotti и другие 2008). Кроме того, недавние данные показывают отрицательное взаимодействие между накоплением ΔFosB и индуцированными амфетамином cFos, которые могут объяснять толерантность к индукции cFos, обнаруженную после воздействия хронического стимулятора (Renthal и другие 2008). Вместе эти результаты привели к гипотезе о том, что стабильные изоформы AFosB могут действовать как «молекулярный переключатель» и способствовать переходу от первоначального употребления наркотиков к более зависимым биологическим состояниям (Нестлер и другие 2001; Nestler, 2008).

В то время как в большинстве предыдущих исследований использовались повторные пассивные кокаиновые обработки для изучения экспрессии белков семейства Fos, и имеется относительно немного примеров этой регуляции, когда кокаин вводится внутривенно (IV) в течение нескольких часов, характерных для моделей злоупотребления человеком. В одном из исследований было обнаружено, что мРНК cFos повышается в CPu после однократного сеанса самоконтроля кокаина 30-min у мышей (Kuzmin and Johansson, 1999), в то время как в CPu крыс не было обнаружено изменений после либо субхронического ( 3 дней) или хронических (6-12 недель) кокаина самообслуживания (Daunais и другие 1993, 1995). После периода изъятия кокаин-опосредованное увеличение белка cFos в NAc снижается у крыс с использованием предшествующего эскалации потребления кокаина (Бен-Шахар и другие 2004), тогда как повышенные уровни cFos обнаруживаются на всей полосатой полости после воздействия кокаино-ассоциированных сигналов (Neisewander и другие 2000; Kufahl и другие 2009). В отличие от cFos, повышенные уровни белка ΔFosB были показаны во всей полосатой полости после хронического кокаина самообслуживания, и это накопление может сохраняться, по крайней мере, в течение 1-дня в результате отмены (Пич и другие 1997; Перотти и другие 2008). Однако нет сообщений, которые сравнивают изменения в реакции нескольких белков семейства Fos с таким внутривенным введением кокаина с острым или хроническим воздействием. Учитывая потенциальные взаимодействия между ΔFosB и cFos, способность дифференциального образования комплекса AP-1 создавать дифференциальные эффекты на экспрессию генов и возможное влияние этих различий на опосредованное кокаином поведение, также важно подтвердить, что изменения в экспрессия cFos, FosB и ΔFosB, которые возникают после неконтингентного введения, также обнаруживаются, когда кокаин вводится самостоятельно, и для определения того, как долго эти изменения могут сохраняться после прекращения введения кокаина. Поэтому в настоящем исследовании мы сравнивали влияние хронического введения кокаина IV на экспрессию ΔFosB, FosB и cFos в полосатых субрегионах во время как введения кокаина, так и отмены. Мы сравнили норму, полученную при волевом самоуправлении, с регуляцией у животных, получавших одинаковое количество и временную картину кокаина через нерегулярные яичные инфузии после либо острого, либо хронического воздействия. Учитывая, что FosB и ΔFosB являются сплайсинговыми вариантами того же fosB ген, мы также сравнили регуляцию мРНК для FosB и ΔFosB с регуляцией на уровне белка.

Экспериментальные процедуры

Предметы и операции

Взрослые самцы Крысы Sprague-Dawley, первоначально взвешивающие приблизительно 250-300 g, размещались в среде с контролируемой температурой и влажностью в темно-темном цикле 12 h (загорается на 7: 00 AM). Животных кормили пищей и водой вволю во все времена, за исключением того, что их поддерживали на 85% от их свободного веса при тренировке рычага-пресса для гранул сахарозы (45 мг, BioServ). Обучение лев-пресса проводилось в вентилируемых камерах-оперантах (Med Associates, Georgia, VT) до тех пор, пока не были выполнены критерии отбора (гранулы 100 за сеанс для последовательных сеансов 3) в соответствии с графиком подкрепления фиксированным отношением 1 (FR1). Затем животных кормили вволю по крайней мере, за 24 h до операции. Для хирургии крысам был дан атропин (0.04 мг / кг, подкожный) для дыхания адей и хронический постоянный катетер был вставлен в правую яремную вену под анестезией пентобарбитала (50 мг / кг, IP) в соответствии с ранее опубликованными процедурами (Эдвардс и другие 2007a). После операции крысам вводили инъекцию пенициллина (200,000 IU / кг, внутримышечно), чтобы предотвратить заражение, а катетеры ежедневно промывали 0.2 мл гепаринизированного (20 IU / мл) бактериостатического солевого раствора, содержащего гентамицинсульфат (0.33 мг / мл). Все экспериментальные процедуры проводились в соответствии с Национальным институтом здравоохранения Руководство по уходу и использованию лабораторных животных, и были одобрены Комитетом UT Юго-Западного медицинского центра по удержанию и использованию животных (IACUC).

Приборы и процедуры самообслуживания

После восстановления 1 wk после операции животных разделили на несколько экспериментальных групп / время вывода (Рис. 1A) и возвращаются в операционные испытательные камеры в ежедневные сеансы, как описано ранее (Эдвардс и другие 2007b). Крысы в ​​необработанной контрольной группе были размещены отдельно и обрабатывались ежедневно в своих домашних клетках без воздействия среды самообслуживания. Крысам в группе самообслуживания кокаина (CSA) было разрешено добровольно вводить кокаин (0.5 мг / кг / 50 мкл инфузия) в соответствии с графиком 1 (FR1) с фиксированным отношением 4 (FR6) в ежедневных сеансах 18 h, проводимых 2.5-днями / wk, в общей сложности 12.5 дней. Каждый активный рычажный пресс вызывал инфузию кокаина 4, связанную с освещением световой метки над активным рычагом. Свет дома гаснул во время вливаний кокаина, и после инфузии, в которой свет дома оставался, был дополнительный период ожидания 24. Рычаг, отвечающий во время инфузии и периода ожидания, был записан, но не имел никакого значения. В камерах присутствовал дополнительный неактивный рычаг, но ответ на этот рычаг был без последствий. Крысы в ​​группе хронического хомута (CY) спаривались с активными самоконтролирующими крысами и получали пассивные вливания кокаина в количествах и временных структурах, идентичных их партнерам по самообслуживанию. Крыс в группе острого иго (AY) также спаривали с крысами в хронической группе CSA, но получали пассивные солевые вливания вместо кокаина до последнего дня самолечения, когда они получали одно сеанс пассивных вливаний кокаина для первого время. Наконец, группе Saline SA было позволено самостоятельно вводить физиологический раствор для выявления потенциальных изменений, связанных с хирургией, тестированием или другими экспериментальными процедурами, по сравнению с необработанными контрольными средствами. Сравнение между группами AY и CY использовалось для выявления изменений чувствительности cFos, FosB или ΔFosB с острым и хроническим воздействием кокаина, тогда как группы CSA и CY сравнивались для выявления изменений экспрессии cFos, FosB или ΔFosB, которые были особенно связанных с полезными и фармакологическими эффектами кокаина. Ткань из всех исследовательских групп была собрана сразу после заключительного сеанса 3 h для сравнения кокаин-индуцированной регуляции cFos, FosB и ΔFosB, а персистентность изменений, вызванных кокаином, была определена для некоторых исследовательских групп с собранной тканью XNUMX h или XNUMX wk после заключительной тестовой сессии. Количественные процедуры вестерн-блоттинга и ОТ-ПЦР использовались для рассечения полосатых субрегионов, чтобы обойти потенциальные проблемы, связанные с перекрестной реактивностью антител, и улучшить чувствительность для обнаружения изменений.

Рисунок 1  

(A) Временная шкала, описывающая схемы введения и отмены кокаина (WD). Сплошные линии указывают на внутривенное введение вливаний кокаина (0.5 мг / кг / инфузия) при хроническом самообслуживании кокаина (CSA) и хронических одиозных (CY) животных для общего ...

Тканевая коллекция

Крыс жертвовали микроволновым облучением, направленным на область головы (5 kW, 1.5 s, Murimachi Kikai, Tokyo, Japan). Мозги быстро расчленялись и охлаждались, а двусторонние тканевые пуансоны (14-калибр) оболочки ядра (NAc), ядро ​​NAc и caudate-putamen (CPu) были получены из коронарных срезов 1.5 мм на основе координат, полученных из Паксинос и Ватсон (1998, иллюстрированный в Рисунок 1B). Образцы тканей гомогенизировали ультразвуком в буфере для лизиса, содержащем ингибиторы протеазы и фосфатазы. Гомогенаты затем кипятили в течение 5 мин, помещали на лед и затем анализировали Лоури для определения концентрации белка. Гомогенаты затем аликвотировали в образцах 20 мкг и хранили при -80 ° C до использования.

Вестерн-блот

Образцы тканей загружали на полиакриламидные гели 12% для разделения электрофорезом в забуференном солевым раствором Трис / Глицин / натрий додецилсульфат (TGS, Bio-Rad, Hercules, CA). После разделения образцы переносили электрофорезом (250 mA для 18 h) на мембраны из поливинилиденфторида (PVDF, Amersham, Piscataway, NJ) и затем блокировали в неочищенном сухом молоке 3% и забуференном солевом растворе 1 × Tris / Tween (TTBS; Bio -Rad, Hercules, CA) в течение ночи в течение 4 ° C. Мембраны затем инкубировали в растворе 1: 1000 первичного антитела Fra (любезно предоставленного доктором Майклом Иадаролой, Национальными институтами здоровья, Bethesda, MD) в растворе 3% молока / 1 × TTBS в течение ночи при 4 ° С. Мембраны промывали в 1 × TTBS (4 раз, 15 мин каждый) и инкубировали в 1 × TTBS, содержащем разложение 1: 25000 козьего кроличьего вторичного антитела, конъюгированного с пероксидазой хрена (Bio-Rad, Hercules, CA) для 1 h в комнате температура. Мембраны снова промывали, а затем разра- ботывали с помощью микроскопии Pierce Super Signal West Dura (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL) на Hyperfilm (ECL plus, Amersham). Локализация полос белка cFos, FosB и ΔFosB проиллюстрирована в Рисунок 1C, Мы решили изучить только стабильно выраженные формы ΔFosB (то есть 35-37 kDa) в этом исследовании, поскольку именно эти формы, как полагают, накапливаются при хроническом употреблении наркотиков и вызывают нейропластичность, лежащую в основе зависимости (Нестлер и другие 2001). Scion Image (Frederick, MD) использовали для определения абсолютной иммунореактивности к полосам, а для получения цифровых изображений пленок использовался сканер. После обнаружения мембраны были удалены и повторно исследованы для β-тубулина (1: 200000, Cell Signaling, Danvers, MA). Уровни β-тубулина использовали в качестве контроля загрузки для нормализации уровней связанных с Fos белков.

ОТ-ПЦР

Количественную RT-ПЦР (qRT-PCR) использовали для немедленного определения изменений мРНК FosB и ΔFosB и 24 h после введения кокаина. Животные были подвергнуты эвтаназии быстрым обезглавливанием, а ядро ​​NAc, оболочка NAc и CPu были выделены, как описано (Грэхем и другие 2007; Bachtell и другие 2008). Отдельные образцы немедленно гомогенизировали в RNA-STAT-60 (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswood, TX) и замораживали на сухом льду до тех пор, пока мРНК не экстрагировалась в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, к каждому образцу добавляли хлороформ и после центрифугирования выделяли водный слой. Тотальную мРНК осаждали изопропанолом в присутствии линейного акриламида (Ambion, Austin, TX). Образцы центрифугировали, осадок экстрагированной мРНК промывали 70% этанолом и ресуспендировали в воде DEPC. Тотальную мРНК обрабатывали ДНКазой (Ambion, Foster City, CA) и подвергали обратной транскрипции в кДНК с помощью случайных гексамеров с использованием Superscript III (Invitrogen, Carlsbad, CA). Последовательности праймеров, использованные для амплификации FosB, ΔFosB и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH), представляли собой 5'-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 'и 5'-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3', 5'-AGGCAGAGCTGGAGTCGACT и 3'-AGGCAGAGCTGGAGTCGACT и 5'-AGGCAGAGCTGGAGTCGACT 'и 'И 3'-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-5' и 3'-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-5 'соответственно. Пороги цикла (cT) рассчитывали из трех реакций, используя вторую производную кривой амплификации. Значения FosB и ΔFosB cT были нормализованы к значениям cT GAPDH (ΔcT), поскольку GAPDH не регулируется кокаином. Изменения складок были рассчитаны с использованием метода ΔΔcT, как описано ранее (руководство Applied Biosystems).

статистический анализ

Уровни каждого белка были выражены как% изменения по сравнению с необработанными контролями для каждой области мозга и временной точки, и исследуемые группы сравнивали с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с уровнем значимости, установленным на p <0.05. За общими эффектами следовали апостериорные сравнения с использованием тестов LSD Фишера. Корреляция между потреблением кокаина и изменениями уровня белка оценивалась с помощью линейной регрессии.

Итоги

Животные в группе CSA, которым разрешалось добровольно вводить кокаин, демонстрировали стабильные закономерности самообеспечения кокаина на третью неделю SA (дни 13-18). За последнюю неделю SA среднее ежедневное потребление кокаина у крыс CSA и их партнеров CY составляло 46.9 (± 1.8) мг / кг / день (диапазон: 37-60 мг / кг / день). В заключительный день испытаний, CSA-крысы в ​​группе 0 h изъятия (WD) самостоятельно вводили 44.5 (± 2.5) мг / кг кокаина (диапазон 25.5-57.5 мг / кг) и одинаковое количество кокаина получали их CY и партнеры AY.

Дифференциальное регулирование белка ΔFosB в полосатых субрегионах после острого или хронического кокаина

Дифференциальная регуляция белка ΔFosB была обнаружена в полосатых субрегионах сразу после 4 h внутривенного введения кокаина (0 h WD). В оболочке NAc только хронический кокаин вызывал значительное увеличение CSA и CY-групп (45-61%) по сравнению с необработанными контрольными средствами (Рис. 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005). В ядре NAc значительное увеличение ΔFosB (41%) было обнаружено после острого воздействия в группе AY (2B, F4,60 = 17.04, p <0.001), и еще большее увеличение (89-95%) было обнаружено после хронического употребления кокаина. В отличие от большего накопления ΔFosB в NAc при хроническом введении кокаина, CPu продемонстрировал аналогичное увеличение ΔFosB (86-102%) как в острой, так и в хронической группе кокаина (Рис. 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001). Не было разницы в увеличении ΔFosB между группами CSA и CY в любом субрегионе полосатого тела, что указывает на то, что регулирование было связано с воздействием кокаина независимо от преднамеренного потребления кокаина. Регулирование ΔFosB сохранялось в течение как минимум 24 часов после хронического введения кокаина в оболочку NAc (F2,32 = 5.19, p = 0.02), NAc core (F4,60 = 4.53, p = 0.02) и CPu (F2,34 = 12.13, p <0.001), но вернулся к исходному уровню через 3 недели. Аналогичное увеличение ΔFosB было обнаружено, когда группы, принимавшие кокаин, сравнивали с группой, получавшей физиологический раствор SA, за исключением того, что меньшие увеличения NAc-оболочки животных AY достигли значимости по сравнению с физиологическим раствором SA, но не с необработанным контролем. Однако не наблюдалось значительной регуляции ΔFosB у животных, которые самостоятельно вводили физиологический раствор во время тренировки, по сравнению с необработанными контрольными животными, что указывает на то, что регулирование ΔFosB было связано с кокаином, а не в результате хирургических процедур или процедур тестирования.

Рисунок 2  

Регуляция ΔFosB сразу после введения кокаина и на 24 h и 3 неделях WD. Уровни ΔFosB (35-37 kDa) выражаются как среднее изменение ± SEM-процент от необработанных контрольных контролей (Control). Ткань из физиологического раствора ...

Толерантность к регуляции белка FosB после хронического кокаина

В отличие от регуляции ΔFosB, однократное воздействие 4 h введения кокаина IV приводило к значительному увеличению белка FosB во всех полосах стриатальной ткани 3, но значительная толерантность к этому ответу развилась после хронического введения кокаина. В оболочке NAc FosB увеличил (260%) сразу после 4 h острого введения кокаина у животных AY, но эти увеличения были снижены (до 142-146%) после хронического введения как в CY, так и в группах CSA (Рис. 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001). Аналогичное увеличение FosB (295%) было обнаружено в CPu животных AY, которое также снизилось (до 135-159%) после хронического введения кокаина в группах CY и CSA (Рис. 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001). В ядре NAc острое введение кокаина приводило к менее значительному увеличению FosB (164%) у животных AY по сравнению с другими областями мозга; тем не менее, это увеличение было все же больше, чем после хронического приема (109-112%) в группах CY и CSA (3B, F4,57 = 20.23, p <0.001). Как было обнаружено с ΔFosB, регуляция FosB после хронического приема кокаина не модулировалась произвольным контролем потребления кокаина. Однако, в отличие от ΔFosB, увеличение белка FosB не сохранялось ни в оболочке, ни в ядре NAc через 24 часа, хотя остаточное увеличение (38-52%) сохранялось в CPu (F2,32 = 3.590, p <0.05). На уровни FosB не повлияли хирургические процедуры или процедуры тестирования у животных, которым вводили физиологический раствор.

Рисунок 3  

Регуляция FosB сразу после введения кокаина и на 24 h и 3 неделях WD. Уровни белка FosB (46-50 kDa) выражаются как среднее изменение ± SEM-процент от необработанных контрольных контролей (см. Рисунок 2 легенда для сокращений) ...

Ослабление индукции мРНК ΔFosB и FosB после хронического кокаина

Острая экспозиция 4 h внутривенного введения кокаина вызывала подобное увеличение (11-16 fold) в мРНК ΔFosB в оболочке NAc (F3,19 = 15.82, p <0.001), ядро ​​NAc (F3,19 = 13.275, p <0.001, а CPu (F3,11 = 5.78, p = 0.03) по сравнению с контролем Saline SA (0 h WD, Рис. 4A). Однако этот ответ сильно подавлялся в группах CY и CSA после хронического введения кокаина в оболочке NAc (складка 3-4), ядро ​​NAc (складка 4) и CPu (складка 3). Несмотря на то, что острое введение кокаина IV приводило к большему увеличению белка FosB по сравнению с ΔFosB, острое введение кокаина вызывало относительно более низкое увеличение мРНК для FosB (4-9 fold), чем для ΔFosB (11-16 fold) во всех половых популяциях 3 (4B). Этот ответ был практически отменен после хронического кокаина в оболочке NAc (F3,19 = 26.22, p <0.001) и CPu (F3,11 = 4.24, p <0.05), хотя небольшое, но значительное увеличение (в 2 раза) осталось в группах CY и CSA в ядре NAc (F3,19 = 11.10, p <0.001). Вызванное кокаином увеличение как ΔFosB, так и FosB у животных AY не сохранялось после 24 часов WD по сравнению с той же контрольной группой с физиологическим раствором SA. Дальнейший анализ отношения уровней мРНК FosB к ΔFosB в момент времени 0 часов WD показал, что введение кокаина заметно снижает относительное количество мРНК FosB к ΔFosB в оболочке NAc (F3,19 = 4.79, p = 0.02), NAc core (F3,19 = 4.49, p = 0.02) и CPu (F3,11 = 5.59, p = 0.03) из-за большего образования изоформы ΔFosB и независимо от существенной толерантности к вызванному кокаином ответом в обеих мРНК после хронического введения (Рис. 4C). Не было существенной разницы в этих соотношениях, независимо от того, вводился ли кокаин самостоятельно или принимался пассивно путем инфузии, и относительные отношения FosB: ΔFosB возвращались к норме во всех трех областях головного мозга по времени 24h WD (данные не показаны).

Рисунок 4  

Регуляция мРНК для FosB и ΔFosB сразу после введения кокаина и в 24 h WD. Количественная RT-ПЦР транскриптов для ΔFosB (A), FosB (B) и отношения FosB / ΔFosB транскриптов (C) выражаются как среднее ± ...

Толерантность, связанная с армированием, кокаин-индуцированные cFos в NAc

В отличие от регуляции продуктов гена FosB, которые представляли собой фармакологический ответ на кокаин независимо от пассивного или волевого введения, регулирование cFos в субрегионах NAc сильно зависело от контекста самообслуживания кокаина по сравнению с животными, получавшими кокаин пассивными инфузиями. Воздействие кокаина увеличивало уровни белка cFos (109-126%) как в оболочке NAc, так и в сердечнике с острым или хроническим введением в AY и CY-группы (Рис. 5A-B). Однако, когда вливания кокаина были поставлены контингентным образом у самоорганизационных животных, этот ответ был уменьшен (до 55%) в оболочке NAc (F4,60 = 9.14, p <0.001) и не смог значительно увеличить cFos в ядре NAc (F4,57 = 5.92, p <0.001). В CPu толерантность к индуцированным кокаином cFos развивалась при хроническом пассивном или произвольном введении кокаина (Рис. 5C) и индукция cFos у животных AY (164%) была снижена (до 45-57%) как в CY, так и в группах CSA (F4,67 = 13.29, p <0.001), что аналогично развитию толерантности к индукции белка FosB во всех 3 субрегионах полосатого тела. Таким образом, связанная с подкреплением толерантность к индуцированным кокаином cFos проявлялась специфически в мезолимбических областях полосатого тела. Во всех трех областях полосатого тела увеличение cFos не было обнаружено у животных, получавших физиологический раствор, и оно не сохранялось после 3 часов WD.

Рисунок 5  

Регулирование cFos сразу после введения кокаина и в 24 h WD. Уровни белка cFos (52-58 кДа) у контрольных крыс (Control, Saline SA) у крыс, которые получали пассивный копчик кокаина (AY) или хронически (CY), и у крыс, которым ...

Взаимосвязь между потреблением кокаина, cFos и ΔFosB в субрегионах стриатума

Поскольку количество самообслуживания кокаина варьировалось у отдельных животных и их партнеров-партнеров, мы сравнивали количество потребления кокаина с индукцией уровней белка cFos, FosB и ΔFosB с помощью нескольких анализов линейной регрессии (см. Дополнительная таблица 1 для результатов всех возможных корреляций). Существовали значительные корреляции между потреблением кокаина и уровнями cFos у крыс, которые получали острое введение кокаина пассивными инфузиями, и эти отношения отличались в дорзальных и вентральных полосатых субрегионах. В ядре NAc индукция cFos сразу после 4 h острого введения кокаина IV была сильно и отрицательно коррелирована с потреблением кокаина, тогда как аналогичная, но незначительная связь была обнаружена в оболочке NAc (Рис 6). Напротив, индукция cFos была положительно коррелирована с потреблением кокаина в CPu. Не было существенных корреляций между потреблением кокаина (активным или пассивным) и уровнем белка FosB или ΔFosB в любой полосатой субрегионе. Тем не менее, была сильная положительная корреляция между уровнями cFos и ΔFosB в оболочке NAc 24 h после кокаина, но только у животных, которые получали кокаин через волевое самоуправление (Рис 7) и, несмотря на то, что общие уровни cFos не изменялись при 24 h WD. Аналогичные тенденции (p <0.07) для положительной корреляции между уровнями белков cFos и ΔFosB были обнаружены сразу после 4 часов самостоятельного введения кокаина в ядро ​​NAc, а также в CPu животных, впервые получавших кокаин (группа AY).

Рисунок 6  

Региональная корреляция между потреблением кокаина и иммунореактивностью cFos после острого кокаина (AY). Процентное увеличение иммунореактивности cFos отрицательно коррелирует с потреблением кокаина в заключительной сессии в ядре NAc (A) и положительно коррелирует ...
Рисунок 7  

Существенная корреляция между cFos и ΔFosB в оболочке NAc у самоорганизующихся животных. Процентное увеличение иммунореактивности cFos положительно коррелирует с иммунореактивностью ΔFosB после 24 h WD при самообслуживании кокаина ...

Обсуждение

В настоящем исследовании мы изучили влияние острого и хронического внутривенного воздействия кокаина или хронического самоорганизации на регуляцию уровней ΔFosB, FosB и cFos в оболочке NAc, NAc и CPu полосатых субрегионах. Предыдущие исследования последовательно обнаружили, что ΔFosB увеличивается только после многократного воздействия, а не после острого введения кокаина с использованием пассивных инъекций кокаина ИП (Надежда и другие 1994, Най и другие 1995; Chen и другие 1995). Аналогичным образом, мы обнаружили, что хроническая экспозиция кокаина IV повышала ΔFosB во всех исследованных полосатых субрегионах независимо от того, была ли она введена волевой или пассивной. Однако существенное отличие от предыдущих исследований заключается в том, что острое введение кокаина увеличивало уровни белка FOSB как в ядре NAc, так и в CPu, и приблизилось к значению в оболочке NAc (p <0.1). Одним из возможных объяснений этой разницы может быть доза и / или продолжительность воздействия кокаина, поскольку крысы в ​​группе AY получали многократные внутривенные инфузии кокаина в течение одного 4-часового сеанса, в результате чего общее потребление кокаина варьировалось от 25.5 до 57.5 ​​мг / кг. отдельных животных, которые намного превышают дозы 10-20 мг / кг, обычно применяемые при однократной внутрибрюшинной болюсной инъекцииНадежда и другие 1994; подветренный и другие 2006). Кроме того, кокаин вводили через более прямой путь введения, который дает более высокие пиковые уровни мозга кокаина и дофамина, которые сохраняются на протяжении всего сеанса, тогда как эти эффекты обычно ослабевают в течение часа после инъекции ИП (Брэдберри, 2002). Таким образом, способность ΔFosB накапливаться после одного острого воздействия кокаина, вероятно, зависит как от силы, так и от продолжительности стимула кокаина, используемого в настоящем исследовании. В любом случае обнаружение, что ΔFosB может накапливаться после однократного воздействия кокаина, указывает на то, что ΔFosB может проявлять свои эффекты быстрее, чем считалось ранее, возможно, в результате первоначального самообслуживания.

Интересно, что количество накопления ΔFosB различалось между дорзальной и брюшной полосатыми регионами в течение хронического введения кокаина. В ядре NAc количество ΔFosB, обнаруженное сразу после окончательного дня хронического введения (0 h WD), было более чем в два раза больше количества, которое было обнаружено после острого введения, а меньшее увеличение ΔFosB в оболочке NAc достигало значимости только после хронического введения , независимо от того, вводился ли кокаин самостоятельно или принимался пассивной иглообразной инфузией. Увеличение при хроническом введении кокаина, вероятно, отражает накопление высокостабильного белка ΔFosB, поскольку они сохраняются, по крайней мере, в течение 24 часов после последнего воздействия. Напротив, значительное увеличение количества ΔFosB в CPu не отличалось острым или хроническим воздействием, что потенциально отражало потолок, вызванный острым воздействием в этой области мозга. Однако даже в CPu накопление белка ΔFosB, вероятно, способствовало устойчиво увеличивающимся уровням ΔFosB после хронического воздействия, поскольку значительная толерантность развилась к кокаиновой индуцированной мРНК для ΔFosB во всех областях мозга 3 с хроническим введением.

Острое введение кокаина внутривенно также увеличивало уровни белка FosB полной длины, причем в CPu и оболочке NAc больше, чем в ядре NAc. Однако мРНК для FosB индуцировалась почти в 10 раз в оболочке NAc и менее чем в 5 раз в CPu и ядре NAc. Существенная толерантность к способности кокаина индуцировать и мРНК, и белок для FosB при хроническом введении развивалась, хотя более низкая индукция белка FosB оставалась и потенциально могла конкурировать с ΔFosB за партнеров по связыванию AP-1. Относительное соотношение мРНК FosB / ΔFosB также снижалось при остром введении кокаина из-за относительно большей индукции ΔFosB, что согласуется с предыдущими сообщениями с использованием амфетамина (Алибхай и другие 2007). В отличие от предыдущих исследований с повторной обработкой амфетамином, снижение относительного отношения мРНК FosB / ΔFosB острым кокаином оставалось после хронического введения, что отражает относительно более высокую остаточную индукцию ΔFosB, чем FosB.

Тот факт, что уровни ΔFosB увеличиваются после даже острого кокаина с использованием моделей и продолжительности введения, более характерных для внутривенного употребления наркотиков у людей, имеет важные последствия для процесса зависимости. Таким образом, ΔFosB может способствовать связыванию AP-1 с первоначальным использованием кокаина, если адекватные дозы вводят самостоятельно. Однако ΔFosB будет конкурировать как с FosB, так и cFos для активности связывания AP-1, что приведет к экспрессии генов ниже по потоку и нейропластичности, отличной от хронического введения, когда ΔFosB повышен с существенно уменьшенными cFos и FosB. Следовательно, ΔFosB может иметь больший эффект после хронического введения кокаина из-за как большего накопления в брюшном полосатом теле, так и снижения конкуренции для партнеров, связывающих AP-1 как в дорсальном, так и вентральном полосатом теле. Учитывая, что полосатая специфическая избыточная экспрессия ΔFosB увеличивает мотивацию кокаина (Colby и другие 2003), такое быстрое накопление ΔFosB с начальным воздействием кокаина может увековечить использование кокаина на очень ранних стадиях процесса наркомании. Более того, такая известная и широко распространенная экспрессия ΔFosB во всей полосатой полости с острым воздействием изменила бы связывающую активность AP-1 таким образом, который мог бы способствовать формированию компульсивных привычек через раннее вовлечение дорзальных полосатых контуров (Белин и Эверитт, 2008).

Учитывая стабильность изоформ ΔFosB, уровни ΔFosB оставались заметно увеличенными через 24 часов после последнего сеанса введения кокаина, что согласуется с предыдущими исследованиями с использованием хронического внутривенного введения кокаина (Пич и другие 1997; Перотти и другие 2008). Другие исследования с использованием пассивного экспериментального введения инъекций IP-кокаина показали, что накопление ΔFosB может сохраняться в течение 1-2 недель отмены (Надежда и другие 1994; Brenhouse и Stellar, 2006; подветренный и другие 2006), хотя мы не обнаружили никаких доказательств этих изменений через 3 недели после прекращения приема кокаина. В совокупности эти исследования показывают, что накопление ΔFosB может сохраняться в течение относительно коротких периодов отмены (<3 недель) и напрямую способствовать продолжающемуся употреблению кокаина, но не может напрямую способствовать большей склонности к рецидивам при длительной отмене. Однако иммунореактивность ΔFosB была обнаружена в нейронах полосатого тела, содержащих рецептор D1, после 30 дней отказа от повторного приема кокаина у мышей (подветренный и другие 2006). Такая клеточная специфическая выборка может быть более чувствительной к остаточному накоплению ΔFosB, чем анализ цельной ткани, используемый в настоящем исследовании, или, возможно, изменения ΔFosB просто сохраняются дольше у мышей, чем у крыс. Также возможно, что ΔFosB индуцирует каскад транскрипционных событий, приводящих к длительным морфологическим изменениям, таким как образование дендритного позвоночника в D1-содержащих полосатых нейронах (подветренный и другие 2006; Лабиринт и другие 2010). В связи с этим, после хронического кокаина увеличиваются несколько мишеней ΔFosB, включая Cdk5 и NFκB, и эти факторы могут изменять схему захвата ядра через изменения структурной и / или функции нейронов (Анг и другие 2001; Бенавидес и Бибб, 2004; Nestler, 2008). Таким образом, возможно, что устойчивое накопление ΔFosB во время изъятия не является необходимым для его долговременного воздействия на будущее поведение при приеме лекарств или -видимости, но вместо этого может представлять собой «молекулярный переключатель», который инициирует множественные клеточные процессы, которые облегчают переход к большему зависимые биологические состояния (Нестлер и другие 2001).

Tон сообщил, что исследование показало, что кокаиновое опосредованное накопление ΔFosB не зависит от волевого контроля за потреблением кокаина у самоорганизующихся животных в соответствии с предыдущими исследованиями с использованием иммуногистохимических процедур и множественных наркотических средств (Перотти и другие 2008; Пич и другие 1997). Это указывает на то, что индуцированные кокаином увеличения в ΔFosB и FosB, вероятно, связаны с фармакологическим ответом на кокаин или другие последующие события передачи сигналов с помощью моноаминергических рецепторов. В отличие от ΔFosB, мы обнаружили, что развитие толерантности к кокаину-индуцированным cFos существенно зависит от волевого контроля за потреблением кокаина в NAc, но не в CPu. Таким образом, толерантность к кокаину, индуцированная cFos в NAc, не встречалась у животных, получавших кокаин пассивно с помощью хронической точной инфузии по сравнению с острой иглообразной инфузией, Эти данные существенно отличаются от многочисленных сообщений о толерантности к индуцированным психостимуляром cFos в NAc, когда препараты вводятся пассивной инъекцией IP (Надежда и другие 1994; Най и другие 1995; Chen и другие 1995, 1997; Алибхай и другие 2007). Учитывая, что толерантность к cFos у самообслуживающих животных кокаина параллельна нескольким исследованиям с повторными инъекциями ИП, отсутствие толерантности с хроническим внутривенным введением в организм может быть связано со стрессом, связанным с множественными и непредсказуемыми инъекциями кокаина (например,Goeders 1997). Потеря толерантности в брюшной, а не дорсальной полосатой будет согласуется с избирательным воздействием на лимбические цепи, связанные с мотивационными и эмоциональными реакциями. Кроме того, несмотря на то, что толерантность к индукции cFos имела место у животных-кокаинов, управляющих самообслуживанием, по-прежнему наблюдалось существенное увеличение белка cFos на XXUMX% в оболочке NAc сразу после их окончательного сеанса самостоятельного администрирования и тенденция (p <0.1) для cFos увеличение также происходило в активной зоне. Причины этого несоответствия, вероятно, отражают различия между внутрибрюшинной инъекцией и несколькими внутривенными инфузиями в течение 4-часового периода, как обсуждалось выше. Остаточная индукция cFos в NAc после хронического самостоятельного введения кокаина - это новое открытие, которое заставляет пересмотреть его роль в процессе привыкания, в результате чего комплексы AP-1, содержащие cFos, ΔFosB и FosB, будут в некоторой степени сосуществовать после хронического воздействия. .

Учитывая недавние данные о том, что cFos непосредственно снижается с помощью накопления ΔFosB в дорсальном полосатом теле (Renthal и другие 2008), интересно, что индуцированные кокаином cFos в CPu были параллельны увеличением ΔFosB с острым воздействием кокаина. Одна из возможностей заключается в том, что накопление ΔFosB с острым введением происходит слишком поздно в сеансе 4 h, чтобы влиять на индукцию cFos, тогда как его присутствие 24 h после кокаина у хронически обработанных животных препятствует индукции cFos с последующим воздействием кокаина. Эта идея согласуется с трендом (p = 0.067) для умеренной положительной корреляции между уровнями cFos и ΔFosB в CPu с острым назначением кокаина (0 h WD). Это понятие также согласуется с сильной положительной корреляцией между индукцией cFos и потреблением кокаина в CPu острых одиозных животных. Эти данные свидетельствуют о том, что, подобно ΔFosB, ответ cFos может отражать дозу кокаина, которая была получена. Однако в NAc большее накопление ΔFosB с хроническим курением кокаина не может объяснить отсутствие толерантности в реакции cFos у этих животных. Более того, хотя толерантность к индукции cFos была очевидна у самоорганизующихся животных, сильная положительная корреляция между остаточными cFos и уровнями ΔFosB в оболочке NAc после отмены 24 h не поддерживает отрицательного взаимодействия между cFos и ΔFosB в брюшном полосатом теле. Другое отличие от данных CPu заключается в том, что cFos в ядре NAc отрицательно, а не положительно коррелирует с потреблением кокаина сразу после острого введения кокаина, что может отражать внутрисессионную тахифилаксию, которая возникает при более высоком дозе в брюшном полосатом теле.

В целом, результаты настоящего исследования показывают, что cFos, FosB и ΔFosB подвергаются четким региональным образцам экспрессии после острого и хронического внутривенного введения кокаина. Эти образцы экспрессии однозначно зависят как от продолжительности, так и от количества лекарственного средства, а толерантность к кокаину, индуцированная cFos, сильно зависит от вовлечения волевого кокаина. Результаты также показывают, что ΔFosB может накапливаться как при остром, так и при хроническом введении кокаина путем внутривенной инъекции, поддерживая идею о том, что накопление ΔFosB может быть важным в ранних процессах, которые способствуют усилению поведения кокаина и способствуют развитию кокаиновой зависимости. В конечном счете, будет важно понять, как ΔFosB может косвенно влиять на постоянную тягу к наркотикам при отмене через относительно кратковременное влияние на экспрессию генов во время использования кокаина и ранних сроков отмены. Усилия по выявлению различных нисходящих целей и их влиянию на морфологию и / или функцию нейронов в конечном итоге прояснят роль ΔFosB и других связанных с Fos антигенов в экспрессии аддиктивного поведения.

Дополнительный материал

Таблица Supp S1

Дополнительная таблица 1. Общие результаты корреляции для линейного регрессионного анализа. Три левые панели содержат корреляции между потреблением кокаина и уровнями cFos (верхняя панель), FosB (средняя панель) или ΔFosB (нижняя панель). Три правые панели содержат корреляции между cFos и ΔFosB (верхняя панель), cFos и FosB (средняя панель) и FosB и ΔFosB (нижняя панель). Относительные области мозга и временные точки WD показаны для каждого отдельного анализа вместе с соответствующими значениями r и p. * р <0.05, T0.1> р> 0.05.

Благодарности

Авторы не заявляют о конфликте интересов в отношении этой работы. Эта работа была поддержана грантами NIH DA 10460 и DA 08227, а также профессором Уэсли Джиллиланда в области биомедицинских исследований.

Используемые сокращения

  • ЦПУ
  • хвостатая-скорлупа
  • NAc
  • прилежащего ядра
  • AY
  • острое ярмо
  • CY
  • хронический ярм
  • CSA
  • самообслуживание кокаина
  • WD
  • выводов
  • IV
  • внутривенное
  • IP
  • внутрибрюшинного.

Рекомендации

  • Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ. Регулирование fosB и ΔfosB мРНК: исследования in vivo и in vitro. Brain Res. 2007; 1143: 22-33. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Индукция ядерного фактора-κB в ядрах при хроническом введении кокаина. J Neurochem. 2001; 79: 221-224. [PubMed]
  • Bachtell RK, Choi KH, Simmons DL, Falcon E, Monteggia LM, Neve LN, Self DW. Роль экспрессии GluR1 в ядрах нейронных клеток при сенсибилизации кокаина и поведении кокаина. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2229-2240. [PubMed]
  • Белин Д., Эверитт Б.Ю. Причины кокаинового поиска зависят от допамин-зависимой последовательной связи, связывающей вентральный с дорзальной полосатой. Neuron. 2008; 57: 432-441. [PubMed]
  • Benavides DR, Bibb JA. Роль Cdk5 в злоупотреблении наркотиками и пластичности. Ann NY Acad Sci США. 2004; 1025: 335-344. [PubMed]
  • Ben-Shahar O, Ahmed SH, Koob GF, Ettenberg A. Переход от контролируемого к компульсивному употреблению наркотиков связан с потерей сенсибилизации. Brain Res. 2004; 995: 46-54. [PubMed]
  • Bradberry CW. Динамика внеклеточного допамина при острых и хронических действиях кокаина. Невролог. 2002; 8: 315-322. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos и ΔFosB дифференциально изменяются в отдельных субрегионах оболочки ядра accumbens у крыс, подверженных кокаину. Behav Neurosci. 2006; 137: 773-780. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Регулирование ΔFosB и FosB-подобных белков путем электросудорожного захвата и лечения кокаином. Mol Pharmacol. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Хронические связанные с Fos антигены: стабильные варианты ΔFosB, индуцированные в мозге при хронических методах лечения. J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Сверхражение стриатальной клетки, специфическое для избыточной экспрессии ΔFosB, повышает стимул для кокаина. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW. Связанные с зависимостью изменения в D1 и D2 дофаминовых рецепторных реакций после хронического самоконтроля кокаина. Neuropsychopharm. 2007a; 32: 354-366. [PubMed]
  • Edwards S, Graham DL, Bachtell RK, Self DW. Региональная толерантность к кокаин-регулируемому цАМФ-зависимому протеиновому фосфорилированию после хронического самоорганизации. Eur J Neurosci. 2007b; 25: 2201-2213. [PubMed]
  • Конец NE. Нейроэндокринная роль в усилении кокаина. Psychoneuroendocrinol. 1997; 22: 237-259. [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Амфетамин и кокаин индуцируют специфическую для лекарств активацию гена c-fos в клетках с матрицей стриозомы и лимбических отделах полосатого тела. Proc Natl Acad Sci USA. 1990; 87: 6912-6916. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, DiLeone RJ, Rios M, Self DW. Динамическая активность BDNF в прилежащих ядрах с использованием кокаина увеличивает самообслуживание и рецидив. Nat Neurosci. 2007; 10: 1029-1037. [PubMed]
  • Надежда Б, Косовский Б., Хайман С.Э., Нестлер Е.Ю. Регулирование немедленной ранней экспрессии генов и связывание AP-1 в ядре крысы при хроническом кокаине. Proc Natl Acad Sci USA. 1992; 89: 5764-5768. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Индукция долговременного комплекса AP-1, состоящего из измененных Fos-подобных белков в головном мозге при хроническом кокаине и других хронических методах лечения. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  • Надежда Б.Т. Кокаин и комплекс транскрипционных факторов AP-1. Ann NY Acad Sci. 1998; 844: 1-6. [PubMed]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Димеризация и ДНК-связывающие свойства транскрипционного фактора ΔFosB. Биохимия. 2007; 46: 8360-8372. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, et al. Выражение фактора транскрипции ΔFosB в головном мозге контролирует чувствительность к кокаину. Природа. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL. c-Fos, связанное с восстановлением поведения, вызванного кокаином, с помощью условно-обусловленных ответных реакций. Synapse. 2009; 63: 823-835. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Lee K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Образование коллайновского дендритного позвоночника в D1 и D2, содержащих дофаминовые рецепторы, спинные нейроны в ядре accumbens. Proc Natl Acad Sci USA. 2006; 103: 3399-3404. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Существенная роль гистон-метилтрансферазы G9a в кокаино-индуцированной пластичности. Наука. 2010; 327: 213-216. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: молекулярный переключатель для долговременной адаптации в мозге. Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LTL, Palmer A, Marshall JF. Fos и кокаиноподобное поведение у крыс после воздействия среды самообслуживания кокаина. J Neurosci. 2000; 20: 798-805. [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: устойчивый молекулярный переключатель для наркомании. Proc Natl Acad Sci USA. 2001; 98: 11042-11046. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Nestler EJ. Транскрипционные механизмы зависимости: роль ΔFosB. Phil Trans R Soc B. 2008; 363: 3245-3255. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Фармакологические исследования регуляции хронической FOS-связанной антигенной индукции кокаином в стриатуме и ядре accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  • Перротти Л.И., Хадеиши Й, Ульри П.Г., Барро М., Монтеггия Л., Думан Р.С., Нестлер Е.Ю. Индукция ΔFosB в структурах мозга, связанных с вознаграждением, после хронического стресса. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, et al. Отличительные закономерности индукции ΔFosB в головном мозге наркотиками. Synapse. 2008; 62: 358-369. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson GC. Мозг крысы в ​​стереотаксических координатах. 4th. Нью-Йорк: Академическая пресса; 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Общие нейронные субстраты для аддиктивных свойств никотина и кокаина. Наука. 1997; 275: 83-86. [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I и др. ΔFosB опосредует эпигенетическую десенситизацию с-FOS гена после хронического воздействия амфетамина. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, et al. Влияние DeltaFosB в ядре упирается в естественное поведение, связанное с вознаграждением. 2008; 28: 10272-10277. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Young ST, Porrino LJ, Iadarola MJ. Кокаин индуцирует полосатые c-Fos-иммунореактивные белки через дофаминергический D1 рецепторы. Proc Natl Acad Sci USA. 1991; 88: 1291-1295. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Чжан Дж, Чжан Л, Цзяо Х, Чжан Q, Чжан Д, Лу Д, Кац Дж. Л., Сюй М. c-Фос облегчает приобретение и исчезновение постоянных изменений, вызванных кокаином. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]