Источник
Отделение клеточной и нейробиологии, Медицинская школа Кека, Университет Южной Калифорнии, Лос-Анджелес, Калифорния 90033, США.
Абстрактные
Распространено злоупотребление анаболически-андрогенным стероидом (AAS). Более того, ААС усиливают, что подтверждается самоуправлением у грызунов. Однако рецепторы, которые трансформируют усиливающие эффекты AAS, неясны. ААС могут связываться с классическими рецепторами ядерных андрогенов (АР) или мембранными рецепторами. Мы использовали два подхода для изучения роли ядерных АР в самообмене ААС. Во-первых, мы тестировали самоорганизацию андрогенов у крыс с мутацией феминизации яичек (Tfm), которая препятствует андрогенному связыванию. Если ядерные AR необходимы для самоорганизации AAS, Tfm мужчины не должны самостоятельно управлять андрогенами. Самцы Tfm и однопометники дикого типа (WT) самостоятельно вводили неароматизируемый андрогенный дигидротестостерон (DHT) или интрацеребровентрикулярный носитель (ICV) с фиксированным отношением (FR) до FR5. У крыс Tfm и WT предпочтение отдавалось активному носовому трюку во время самообслуживания DHT (66.4 +/- 9.6-ответы / 4 h для Tfm и 79.2 +/- 11.5 для ответов WT / 4 h), а носовые наконечники увеличивались как Требование FR увеличилось. Значения преференций были значительно ниже у самоуправляемого носителя крыс (42.3 +/- 5.3-ответы / 4 h для ответов Tfm и 19.1 +/- 4.0 / 4 h для WT). Мы также тестировали самолечение DHT, конъюгированное с бычьим сывороточным альбумином (BSA), в C3 и C17, которое ограничено действиями на поверхности клетки. Хомякам было разрешено самостоятельно вводить конъюгаты DHT, BSA и DHT-BSA для дней 15 в FR1. Хомяки показали значительное предпочтение DHT (18.0 +/- 4.1 response / 4 h) или DHT-BSA-конъюгаты (10.0 +/- 3.7-ответы / 4 h и 21.0 +/- 7.2-ответы / 4 h), но не для BSA (2.5 + / -2.4-ответы / 4 h). В совокупности эти данные показывают, что ядерные AR не требуются для самоорганизации андрогенов. Кроме того, самоорганизация андрогенов может быть опосредована рецепторами плазматических мембран.
Copyright 2010 Elsevier Ltd. Все права защищены.
Анаболико-андрогенные стероиды (ААС) являются наркотиками. Эти производные тестостерона (Т) используются для спортивных и эстетических целей (Yesalis и др., 1993). Побочные эффекты варьируются от гипогонадизма и гинекомастии до сердечной и печеночной дисфункции (Leshner, 2000). Кроме того, накапливается доказательство того, что злоупотребление ААС вызывает изменения настроения (Папа и Кац, 1994), агрессия (Чой и папа, 1994, Kouri et al., 1995) и может вызвать зависимость (Brower и др., 1991, Браузер, 2002). Несмотря на растущую обеспокоенность, основные механизмы злоупотребления ААС не были хорошо поняты.
У людей утверждается, что инициирование использования ААС в значительной степени мотивировано анаболическими эффектами, но некоторые нарушители в конечном итоге развивают зависимость (Браузер, 2002). Данные исследования на животных подтверждают эту гипотезу. AAS индуцируют условное расположение (CPP) у мышей (Arnedo и др., 2000) и крыс (Packard et al., 1997, Packard et al., 1998, Frye et al., 2002). Кроме того, хомяки добровольно потребляют ААС через оральный (Дерево, 2002), внутривенное (Wood et al., 2004) и внутримолекулярное (ICV) самоуправление (DiMeo и Wood, 2004, Triemstra и Wood, 2004, Wood et al., 2004, DiMeo и Wood, 2006b).
В то время как ICV-самоуправление предлагает центральные сайты действия, конкретные гормоны и рецепторы, опосредующие подкрепление AAS, неясны. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что усиливающие эффекты T опосредуются андрогенами, а не через эстрогены после ароматизации. Мужские хомяки будут самостоятельно управлять дигидротестостероном (DHT; DiMeo и Wood, 2006b) и других неароматизируемых андрогенов (Баллард и Вуд, 2005). Кроме того, Т-самоуправление блокируется анти-андрогенным флутамидом (Peters and Wood, 2004). Теперь встает вопрос: как передается андрогенный сигнал в мозге?
Андрогенный рецептор (AR) представляет собой классический рецептор ядерных стероидов, который функционирует как фактор транскрипции. ОР редко используются в структурах, связанных со злоупотреблением наркотиками, такими как ядро accumbens (Acb) и вентральная тегментальная область (VTA; Simerly et al., 1990, Дерево и Ньюман, 1999). Имеются также данные о гонадальных стероидах, действующих через рецепторы клеточной поверхности (Mermelstein et al., 1996, Zhu et al., 2003, Томас и др., 2006, Васудеван и Пфафф, 2007).
В текущем исследовании мы использовали два подхода для определения роли классического ядерного AR в андрогенном усилении. Чтобы свести к минимуму возможную активацию рецепторов эстрогенов (ER), мы протестировали DHT-самоуправление. В первом эксперименте крыс с мутацией феминизации яичек (Tfm) тестировали на самолечение DHV DHT. Tfm представляет собой единственную базовую замену, которая приводит к дефектным AR с ограниченным лиганд-связыванием (Ярбро и др., 1990). Самцы крыс Tfm проявляют внешний женский фенотип из-за недостаточной андрогенной стимуляции во время развития (Zuloaga et al., 2008b). Если для усиления AAS требуются функциональные ядерные AR, крысы Tfm не должны самостоятельно управлять DHT. Вместо этого крысы Tfm смогли приобрести самообслуживание DHT. Во втором эксперименте мы протестировали ICV-самоуправление мембранно-непроницаемых форм DHT у хомячков. Когда DHT конъюгируют с бычьим сывороточным альбумином (BSA), его действия ограничены рецепторами на клеточной поверхности. Если для андрогенной арматуры требуются ядерные AR, хомяки не должны самостоятельно управлять DHT, конъюгированным с BSA. Напротив, хомяки показали явное предпочтение DHT, конъюгированное с BSA. Вместе эти исследования показывают, что ядерные AR не требуются для самоорганизации андрогенов. Вместо этого андрогенная арматура может быть опосредована мембранными АР.
Методы и материалы
Тематика
Крысы
Взрослых самцов крыс Tfm и однопометников дикого типа (WT) получали из колонии в Мичиганском государственном университете. Их генотип был подтвержден с помощью ПЦР, аналогично методам, описанным ранее (Фернандес и др., 2003). Короче говоря, ушные зажимы расщепляли в течение ночи при 55 ° C в буфере для лизиса, содержащем протеиназу K, а затем инактивировали нагреванием при 95 ° в течение 30 минут. AR амплифицировали с использованием прямого праймера 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'и обратного праймера 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3', получая продукт 135bp. Амплифицированные образцы затем расщепляли рестрикционным ферментом Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) в течение ночи при 37 ° C и проводили на агарозном геле 3%. Только WT AR разрезается этим рестрикционным ферментом, оставляя две полосы ниже 100bp, тогда как Tfm AR остается неразрешенным. Животные Tfm также были проверены фенотипом, наличием сосков, женской аногенитальной дистанции и брюшными тестами. Крысы Tfm ранее использовались для демонстрации негеномных андрогенных эффектов в гиппокампе (MacLusky et al., 2006). В начале эксперимента крысы WT находились между 75 и днем 140, а крысы Tfm находились между 75 и 138 днем.
Хомячки
Взрослые самцы сирийских хомяков (130 - 150 g) были получены у Charles River Laboratories (Уилмингтон, Массачусетс). Животные размещались отдельно на обратном световом цикле (14L: 10D) с доступными продуктами питания и водой вволю, Все экспериментальные процедуры были одобрены институциональными комитетами по уходу и использованию животных соответствующих учреждений и проводились в соответствии с Руководство по уходу и использованию лабораторных животных (NationalResearchCouncil, 1996).
Хирургия
Все животные были имплантированы канюлями из нержавеющей стали 22g (Plastic One, Roanoke, VA) в боковой желудочек [крыса: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ~ -5.0 (Паксинос и Ватсон, 1998); хомяк: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ~ -5.0 (Морин и Вуд, 2001), мм от bregma], под Na+ пентобарбитальная анестезия (крыса: 50 мг / кг, хомяк: 100mg / кг), как описано ранее (Wood et al., 2004). Все хирургические процедуры проводились в асептических условиях в соответствии с Принципы лабораторного ухода за животными (NIH, 1985). Животным разрешалось восстанавливаться в течение по крайней мере недели после операции перед тестированием.
Наркотики
DHT, DHT-карбоксиметил-оксим (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-гемисукцинат (Hemis) и DHT-Hemis-BSA получали из Steraloids (Newport, RI). В DHT-CMO-BSA DHT конъюгируется с BSA в положении C3 с CMO в качестве линкера. Аналогично, DHT связан с BSA в позиции C17 через Hemis для образования DHT-Hemis-BSA. Оба DHT-CMO-BSA (Gatson и др., 2006) и DHT-Hemis-BSA (Браун и Томас, 2003) ранее использовались для исследования возможных эффектов андрогенов на плазматической мембране. DHT растворяли в водном растворе 13% -циклодекстрина (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) при 1 мкг / мкл. Как было определено из нашего предыдущего исследования у хомячков, эта доза дает надежного операнта, отвечающего при самообслуживании ICV (DiMeo и Wood, 2006b). DHT-производные растворяли в одном и том же носителе при молярной эквивалентной концентрации DHT (DHT-CMO: 1.25 мкг / мкл, DHT-CMO-BSA: 8.7 мкг / мкл, DHT-Hemis: 1.34 мкг / мкл, DHT-Hemis-BSA : 8.83 мкг / мкл). BSA (Sigma-Aldrich) растворяли в одном и том же носителе при 7.45 мкг / мкл для достижения молярной эквивалентной концентрации BSA, как в DHT-CMO-BSA и DHT-Hemis-BSA. БСА-содержащие препараты готовили ежедневно непосредственно перед использованием, чтобы избежать деградации, и все растворы фильтровали через фильтр 0.22 мкм. Предыдущие исследования показали, что только небольшая часть стероида диссоциирует от BSA (Stevis et al., 1999), и этого количества недостаточно, чтобы вызвать значительные андрогенные эффекты (Либергер и Гросс, 1994, Gatson и др., 2006). Аналогичным образом, наше раннее исследование показало, что DHT самостоятельно вводится при 1.0 мкг / мкл, но не в 0.1 мкг / мкл (DiMeo и Wood, 2006b). Следовательно, маловероятно, что свободный DHT (> 10%) диссоциирует от BSA в количестве, достаточном для поддержки самостоятельного введения.
Аппараты
Животным разрешалось самостоятельно вводить лекарственное средство или транспортное средство 4 hrs / day, 5 дней / неделю в оперантной камере (Med Associates, St. Albans, VT), заключенном в звукоизоляционную камеру с принудительной вентиляцией. Каждая камера была оснащена светом для носа, 2, а также шприцевым насосом с компьютерным управлением, соединенным с жидкостью, вращающейся на балансе. Растворы из стеклянного шприца 100 μl доставлялись животному через трубки Tygon, соединенные с вертлюгом. Трубка, соединяющая вертлюг и канюлю ICV, была защищена металлической пружиной. Раствор лекарственного средства или носитель доставляли через внутреннюю канюлю 28-ga, вставленную в направляющую канюлю непосредственно перед тестированием. Каждая инфузия доставила 1 мкл раствора в количестве 0.2 мкл / с. Отверстия в носовой трубе находились на расстоянии 6 см от пола под домашним светом. Одно из отверстий для носа было обозначено как активное отверстие для носа. Реакция на это отверстие регистрировалась как активный носовой мешок (R: активный усиленный) и подсчитывалась по требованию ответа (FR1 до 5) для запуска инфузии. После запуска инфузии свет дома гаснул, и активное отверстие освещалось во время инфузии 5, чтобы помочь в выявлении активного отверстия для носа. В течение этого периода ожидания 5 был зарегистрирован носовой контакт в активном отверстии, но не учитывался в дальнейшем усилении (NR: активный-неармированный). Реакция на другое отверстие для носа-носа регистрировалась как неактивный носовой носок (I), но не приводила к какой-либо инфузии. Расположение активного отверстия для носового отверстия в передней или задней части камеры было сбалансировано для контроля боковых предпочтений. Данные были записаны программным обеспечением WMPC (Med Associate) на ПК с ОС Windows.
Самообслуживание ICV
Крысы
Самолечение DHT у крыс Tfm и WT сопровождалось графиком восходящего фиксированного отношения (FR) от FR1 до FR5. Сначала крыс обучали на FR1, где каждый ответ на активный носовой наконечник был усилен. После этого количество ответов, необходимых для получения инфузии, было увеличено на каждые каждые 5 дней. В FR5 для инфузии требовалось пять ответов на активное отверстие для носа. В целом, крысы были протестированы на FR1 для дней 10 и FR2 до FR5 (каждый день 5), всего за 30 дней. Крысы из каждого генотипа были случайным образом назначены либо в группы DHT, либо в транспортном средстве (Veh), и им разрешалось самостоятельно назначать DHT или транспортное средство βCD соответственно. Тридцать шесть крыс (nWT = 19, nTfm = 17) были использованы в этом эксперименте.
Хомячки
Хомяки были протестированы в расписании FR1 для дней 15. В предыдущих исследованиях 15 дней самообучения ICV T было достаточно, чтобы получить предпочтение активному носу. Хомяки были случайным образом назначены для DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8 ) или BSA (n = 9).
Анализ данных
Крысы
Ежедневные баллы предпочтений для активного носового мешка определялись путем вычитания неактивных носовых колосьев из суммы активных и активных неармированных носовых пиков (R + NR-I). Средняя оценка предпочтения была рассчитана для каждого животного из последних дней 5 FR1 и во время FR2 до FR5. Кроме того, сравнивалось среднее количество подкреплений за сеанс для каждого животного в каждом FR.
Данные анализировали с помощью 3-way ANOVA с генотипом (WT или Tfm), лекарственным средством (DHT или транспортным средством) и графиком FR (1 ~ 5) в качестве факторов между субъектами. Расписание FR рассматривалось как один из факторов, так как некоторые животные не смогли завершить все дни тестирования 30 из-за закупоривания канюли направляющей ICV. В этих случаях в анализы были включены только данные из завершенных графиков. Число животных, включенных в каждое условие, показано в Таблица 1, Трехфакторный ANOVA сопровождался соответствующими младшими ANOVA для простых эффектов. В случае необходимости использовался тест Newman-Keuls для сопоставлений по методу после штока.
Таблица 1
Хомячки
Для анализа данных использовались индивидуальные средства R, NR и I. Оценка предпочтения для каждого животного определялась путем вычитания среднего неактивного носового мешка (I) из среднего активного носового мешка (R + NR-I). Среднюю оценку предпочтения анализировали с помощью одного образца t-test против 0 (то есть без предпочтений) для каждой группы. Кроме того, количество полученных подкреплений было усреднено для каждого животного. Среднее усиление, полученное для каждой группы лекарств, сравнивали с средней степенью усиления контролей BSA с независимыми образцами 2 t-тестовое задание. Животные, которые не смогли выполнить минимум сеансов 5, были исключены из анализа (1 каждый из групп DHT-Hemis и DHT-Hemis-BSA).
Все статистические анализы проводились с использованием SPSS 12 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс). Для всего анализа, p <0.05 считалось статистически значимым. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего за 4-часовой сеанс.
Итоги
Крысы WT и Tfm самостоятельно управляют DHT
Ответ оператора
Рис. 1 иллюстрирует среднее предпочтение активного толчка носом (R + RN - I) в каждой FR для групп DHT и Veh. Крысы, принимавшие ДГТ самостоятельно, показали большее предпочтение активному тыкаю носом (73.1 ± 7.6 респ / 4 ч) по сравнению с контрольным носителем (29.8 ± 3.5 респ / 4 ч; F1,145 = 31.77, p <0.001). Также был основной эффект графика FR (F4,145 = 4.25, p <0.01), взаимодействие генотип-лекарственное средство (F1,145 = 5.27, p = 0.02), а также взаимодействие между FR и FR (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Не было никакого основного эффекта генотипа, и другие взаимодействия были незначительными.
Рисунок 1
Пост-ходовые тесты показали, что самоконтролируемая крысами крыс показала значительно большее предпочтение по сравнению с графиком FR (F4,73 = 4.18, p <0.01), увеличивая предпочтение от FR1 (33.4 ± 4.4 соотв. / 4ч) до FR4 (110.8 ± 26.7 соотв. / 4ч) и FR5 (106.4 ± 18.9 соотв. / 4ч). В этой группе не наблюдалось влияния генотипа (график генотип-FR: F4,73 = 0.13, ns; генотип: F1,73 = 0.86, ns).
Напротив, самоконтролируемые крысы Veh не изменили предпочтения по сравнению с графиком FR (F4,72 = 0.31, ns), и никакого взаимодействия графиков-графиков FR (F4,72 = 0.12, ns). В отличие от DHT, крысы Tfm показали большую предпочтительность, чем WT в этой группе (42.3 ± 5.3 и 19.1 ± 4.0 соответственно / 4h соответственно; F4,72 = 11.81, p <0.01).
Настои
Среднее количество инфузий DHT и Veh, полученных в каждом FR, показано в Рис 2, В целом, крысы получали больше инфузий, когда им позволяли самостоятельно вводить DHT (26.9 ± 2.2 мкг / 4h) против транспортного средства (15.4 ± 1.9 мкл / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Также был основной эффект графика FR (F1,145 = 3.32, p = 0.01) и взаимодействия генотипа с лекарственным средством (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Все другие взаимодействия и основные эффекты были незначительными.
Рисунок 2
Среднее суточное потребление DHT во всех графиках FR было одинаковым у крыс Tfm (24.3 ± 2.9 мкг / 4hr) и WT (29.4 ± 3.4 мкг / 4h). В обеих группах потребление препарата оставалось постоянным по мере увеличения графика FR (F4,73 = 0.54, ns). Во время FR1, Tfm и WT самцы самостоятельно вводили DHT в 24.5 ± 2.3 мкг / 4h и 37.3 ± 6.7 мкг / 4h, соответственно. В расписании FR5 самообслуживание DHT усредняло 18.3 ± 4.5 мкг / 4h для Tfm и 23.9 ± 5.9 мкг / 4h для крыс WT. Эта группа не обнаружила различий в генотипе или генотипе-FR (F)1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, соответственно).
Напротив, у крыс Tfm и WT количество вливаний транспортных средств значительно уменьшилось по мере увеличения потребности в FR (F4,72 = 4.73, p <0.01). Несколько удивительно, что крысы Tfm самостоятельно вводили примерно вдвое больше носителя (20.7 ± 2.4 мкл / 4 ч), чем крысы WT (10.7 ± 1.4 мкл / 4 ч, F1,72 = 7.77, p <0.01). У крыс Tfm при FR1 количество инфузий носителя (39.9 ± 13.2 мкл / 4 ч) превышало количество инфузий DHT (24.5 ± 2.3 мкл / 4 ч). Однако к концу эксперимента количество самостоятельного введения носителя снизилось до 10.3 ± 2.4 мкл / 4 ч. Аналогичным образом, крысы WT самостоятельно вводили 18.6 ± 4.1 мкл / 4 ч носителя в FR1, что снизилось до 6.6 ± 1.8 мкл / 4 ч в FR5.
Средний вес тела в начале каждого графика FR и количество животных в каждом состоянии показано в Таблица 1, Крысы WT были значительно тяжелее, чем крысы Tfm (F1,174 = 144.62, p <0.001), и все группы со временем прибавили в весе (F5,174 = 5.59, p <0.001). Не наблюдалось влияния лекарственного состояния (DHT vs Veh) на массу тела (F1, 174 = 0.31, ns) или любое взаимодействие. Прием DHT, скорректированный на массу тела, был одинаковым в обоих генотипах как у FR1 (WT: 77.9 мкг / кг, Tfm: 65.4 мкг / кг), так и FR5 (WT: 46.5 мкг / кг, Tfm: 42.6 мкг / кг).
Сирийские хомяки самостоятельно управляют DHT, конъюгированным с BSA
Ответ оператора
Хомяки, самостоятельно вводимые DHT и DHT, конъюгированные с BSA, но не только BSA. Рис. 3a показывает среднее предпочтение (активный - неактивный тычок в нос) для DHT, BSA, DHT-CMO-BSA и DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. В соответствии с нашими предыдущими исследованиями, хомяки выработали предпочтение к активному тычению носом во время самостоятельного введения ДГТ (t7 = 4.34, p <0.01), но не продемонстрировал предпочтения при самостоятельном введении BSA (t8 = 1.03, ns). Аналогичным образом, хомяки показали предпочтение активному носу-носу как с DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) и DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). С DHT, прикрепленным только к линкерам, хомяки самостоятельно управляют DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), но не показали значительного предпочтения при самостоятельном введении DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). С помощью DHT-Hemis ответы на активный носовой сок (40.5 ± 10.3 resp / 4h) были подобны ответам для DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), но у этих мужчин также наблюдались повышенные ответы на неактивный нос -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) по сравнению с таковыми для DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
Рисунок 3
Настои
Количество инфузий, полученных для каждой группы, показано в Рис. 3b, Хомяки получали значительно больше DHT-, чем BSA-инфузии (t15 = 3.04, p = 0.01). Аналогичным образом, хомяки получали больше инфузий, когда им разрешалось самостоятельно назначать DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) или DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) по сравнению с BSA. Количество инфузий, полученных для групп DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 мкл / 4hr) и DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 мкл / 4hr), было сходным с теми самоконтролируемыми DHT, DHT-Hemis-BSA и DHT- CMO. Тем не менее, хомяки не получали значительно больше DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) или DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) по сравнению с BSA.
Передозировка
Одиннадцать из хомяков 55 умерли до завершения всех тестовых сессий 15. Ранее были описаны смертельные случаи, вызванные передозировкой андрогена во время самообслуживания тестостерона (Peters and Wood, 2005). В настоящем исследовании 2 из 8 мужчин (25%) умер во время самообслуживания DHT, аналогично 24%, зарегистрированному для передозировки тестостерона (Peters and Wood, 2005). Самоуправление DHT-CMO и DHT-Hemis было связано с наибольшими потерями (каждый 3 из 8 на группу, 38%), тогда как среди хомячков, которым управляют BSA (1 9, 11%) или DHT, было мало смертей -Hemis-BSA (0 8). Как и при передозировке тестостерона, ни один из хомячков в настоящем исследовании не умер во время самостоятельного лечения. Вместо этого хомяки скончались через несколько часов в своих домашних клетках, с сильным двигательным движением и угнетением дыхания.
Передозировка тестостерона тесно коррелирует с потреблением тестостерона, особенно максимальным потреблением за сеанс (Peters and Wood, 2005). Рис 4 сравнивает оценки предпочтений, количество полученных подкреплений и пиковое потребление хомяков, которые завершили все сеансы 15, а также те, кто этого не сделал. Обе группы продемонстрировали значительное предпочтение активному носу-носу (p <0.05). Однако предпочтение было значительно больше у хомяков, умерших во время самостоятельного введения (25.7 ± 5.2 соотв. / 4 ч), по сравнению с выжившими (9.5 ± 2.0 соотв. / 4 ч, t53 = 3.42, p <0.01). Хомяки, которые не завершили 15 сеансов, получали более чем в два раза больше инфузий за сеанс (31.2 ± 5.0 инф / 4 ч), чем те, кто завершил все сеансы (14.8 ± 1.1 инф / 4 ч, t53 = 5.05, p <0.001). Кроме того, для хомяков, умерших во время исследования, максимальное потребление за сеанс было значительно выше (77.0 ± 9.8 инф / 4 ч), чем для выживших самцов (36.1 ± 2.9 инф / 4 ч, t53 = 5.41, p <0.001).
Рисунок 4
Обсуждение
Самолечение андрогена может быть опосредовано связанным с мембраной, но не ядерными андрогенными рецепторами
В текущем исследовании показано, что классические ядерные АР не являются существенными для самоорганизации андрогенов. У крыс Tfm и WT предпочтение отдается активному носовому трюку во время самообслуживания DHT. Кроме того, они смогли реагировать на восходящий график FR, увеличивая активные носовые пики, тем самым поддерживая устойчивый уровень приема препарата независимо от графика FR. Напротив, крысы, получавшие транспортное средство, не смогли ответить на изменения в расписании FR. Их активные носовые пики существенно не увеличивались в ответ на изменения в расписании FR, и они получали меньше инфузий по мере увеличения потребности в ответах. Поскольку связывание лиганда с «классическим» ядерным андрогенным рецептором скомпрометировано у мутантов Tfm, это подтверждает нашу гипотезу о том, что андрогенное усиление опосредуется альтернативными путями.
Неожиданно высокий уровень реакции на крыло крыс Tfm вряд ли будет вызван самим автомобилем. Мы наблюдали подобные явления в отдельной группе крыс Tfm, которые не получали никаких инфузий (данные не показаны). Вместо этого это может быть связано с феминизированными поведенческими чертами у мужчин Tfm. Увеличенные носовые наконечники крыс Tfm могут быть аналогичны более высоким провальным провалам головы, наблюдаемым у самок крыс (Браун и Немес, 2008). Альтернативно, крысы и мыши Tfm, как известно, проявляют повышенное тревожное поведение (Zuloaga и др., 2006, Zuloaga и др., 2008a). Возможно, седативное / анксиолитическое действие DHT (Agren и др., 1999, Arnedo и др., 2000, Фрай и Селига, 2001, Berbos et al., 2002, Peters and Wood, 2005) притупило тревожное поведение, когда крысы Tfm самостоятельно управляли DHT.
Кроме того, самоорганизация конъюгатов DHT-BSA у самцов хомяков свидетельствует о том, что андрогены могут действовать на нейронную плазматическую мембрану, чтобы усиливать действие. Хомяки проявляли значительное предпочтение как для конъюгатов DHT-BSA. Введенные дозы согласуются с нашими предыдущими исследованиями на Т, ДГТ и широко распространенных стероидах (Баллард и Вуд, 2005, DiMeo и Wood, 2006b). Напротив, хомяки не проявили предпочтения только BSA. Данные о смертности и потреблении наркотиков показывают, что ДГТ и ее производные могут быть летальными, расширяя наши предыдущие данные по передозировке Т (Peters and Wood, 2005).
В текущем исследовании раскрывается видоспецифическая модель ответа операнта. Хомяки не предпочли активного носового сустава, в то время как самообслуживающего транспортного средства, как было продемонстрировано ранее (Джонсон и Вуд, 2001, Дерево, 2002, DiMeo и Wood, 2004, Triemstra и Wood, 2004, Wood et al., 2004, Баллард и Вуд, 2005, DiMeo и Wood, 2006b). Однако у крыс было явное предпочтение активному носу-носу независимо от получаемого препарата. Мы наблюдали аналогичную тенденцию в нашем предыдущем исследовании по IV самоуправлению Т у крыс, хотя он не был статистически значимым (Wood et al., 2004). Основываясь на такой видовой специфической поведенческой разнице в самоуправлении, следует соблюдать осторожность при сравнении поведенческих данных с крысами и хомяками.
Существует несколько предостережений, которые необходимо учитывать при интерпретации текущего исследования. Во-первых, ядерные AR с значительно ослабленным связыванием лигандов все еще присутствуют у крыс Tfm (Ярбро и др., 1990), в отличие от мышей Tfm (Он и др., 1991). Возможно, что эти мутированные ядерные AR являются достаточными для опосредования эффектов андрогенов в сверхфизиологических дозах. Во-вторых, конъюгаты DHT-BSA могут ухудшаться в естественных условиях, что приводит к свободному ДГТ. Хотя это не является существенной проблемой в пробирке (Либергер и Гросс, 1994, Gatson и др., 2006), степень и время деградации DHT-BSA в естественных условиях в мозгу в настоящее время неизвестно. Наконец, конъюгаты DHT-BSA не могут значительно проникать в ткань головного мозга. DHT-BSA значительно больше, чем DHT, поэтому эффекты DHT-BSA, наблюдаемые в текущем исследовании, скорее всего, будут опосредованы на участках, близких к желудочкам.
Несмотря на эти оговорки, эти два разных подхода дали последовательные результаты, которые аргументируют решимость против необходимости ядерного AR в андрогенном усилении. Кроме того, самоорганизация конъюгатов BSA позволяет предположить, что андрогены могут действовать на плазматической мембране в андрогенном усилении. Насколько нам известно, настоящее исследование в естественных условиях доказательства поведенчески значимых эффектов андрогенов на плазматической мембране.
Андрогены оказывают быстрое ядерное AR-независимое воздействие на награду
Несколько других исследований по награде андрогенов показали результаты, согласующиеся с негеномными или плазматическими мембранными эффектами. CPP развивается в течение 30 мин системной T-инъекции (Александр и др., 1994), временный курс, соответствующий острым негеномным эффектам T. CPP, также может индуцироваться внутривенным вливанием T или его метаболита (Packard et al., 1997, Frye et al., 2002), хотя Acb имеет несколько геномных AR. Кроме того, VTA выражает Fos в ответ на T-инфузию ICV (Димео и Вуд, 2006a), несмотря на отсутствие значительного классического выражения AR там. В текущем исследовании не содержится информации о месте действия в головном мозге. Тем не менее, это указывает на то, что относительная нехватка ядерной АР сама по себе не является достаточной причиной для исключения структур, таких как Acb и VTA, из потенциальных сайтов, которые могут опосредовать андрогенные эффекты.
Быстрые плазменные мембранные эффекты стероидов в дорзальной и вентральной полосатых полотнах не ограничиваются андрогенами. Известно, что прогестины индуцируют СРР, возможно, через гамма-аминомасляную кислоту (ГАМК) -рецепторы в Acb (Фрай, 2007). Эстрогены также оказывают быстрое, опосредованное мембранными рецепторами действие в дорсальном полосатом теле (Mermelstein et al., 1996, Беккер и Рудик, 1999). Мембранно-ассоциированный рецептор уже выделен для прогестинов (Zhu et al., 2003), и данные накапливаются для рецепторов клеточной поверхности для эстрогенов (см. Васудеван и Пфафф, 2007) и андрогенов (см. Томас и др., 2006). В то время как эстрогены также усиливают (DiMeo и Wood, 2006b), усиливающие эффекты T оказываются преимущественно андрогенными. Хомяки самостоятельно управляют неароматизируемыми андрогенами, такими как дростанолон и DHT (Баллард и Вуд, 2005, DiMeo и Wood, 2006b). Кроме того, анти-андрогенный флутамид может блокировать Т-самоуправление (Peters and Wood, 2004). Хотя это может показаться противоречащим роли мембранной АР, описанной в этом исследовании, флутамид, как сообщается, блокирует активацию АБ мембраны (Браун и Томас, 2003, Браун и Томас, 2004).
Свойства мембранных андрогенных рецепторов
Исторически сложилось так, что эффекты стероидов, в том числе андрогенов, считаются трансдуцированными ядерными рецепторными процессами. Однако сообщения о быстрых эффектах андрогенов, предположительно опосредуемых мембранно-ассоциированными рецепторами, доступны уже несколько десятилетий. Например, в медиальной преоптической области андрогены могут изменять нейронную стрельбу в течение нескольких секунд (Ямада, 1979) до минут (Пфафф и Пфаффманн, 1969). Кроме того, Орсини и его коллеги (Орсини, 1985, Orsini et al., 1985) показали быструю модификацию частоты обжига нейронов андрогенами в латеральном гипоталамусе (LHA). Этот эффект андрогенов в LHA может иметь особое значение для настоящего исследования, поскольку, как известно, LHA участвует в схеме вознаграждения (Olds and Milner, 1954) и LHA orexin / hypocretin регулируется гонадальными стероидами (Muschamp et al., 2007).
Типы клеток с возможными мембранными АР включают глиальные (Gatson и др., 2006), гонадаль (Браун и Томас, 2003, Браун и Томас, 2004) и иммунных клеток (Benten и др., 1999, Guo et al., 2002), миоциты (Эстрада и др., 2003) и остеобласты (Либергер и Гросс, 1994). Хотя молекулярная идентичность еще не определена, кандидаты на мембрану АР включают мембранные рецепторы с известными сайтами связывания стероидов, такими как ГАМК-А (см. Lambert et al., 2003) и NR2 субъединиц рецепторов N-метил-D-аспарагиновой кислоты (Малаев и др., 2002). Альтернативно, Томас и его коллеги (2004) сообщили о наличии нового рецептора, связанного с G-белком, в качестве мембраны AR. Кроме того, эффекты андрогенов, не связанных с конкретным рецептором, не могут быть исключены в текущем исследовании.
Недавние в пробирке исследования показывают, что существует несколько мембранных АР или более одного сайта связывания на одном рецепторе, как предложено для мембранного рецептора прогестерона (Ramirez и др., 1996). Во многих типах клеток мембрана AR, по-видимому, представляет собой мембранный рецептор, связанный с Gq / o (Либергер и Гросс, 1994, Benten и др., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Эстрада и др., 2003). Однако характеристики связывания стероидов и чувствительность к антиандрогенам предполагаемой мембраны АР сильно различаются в зависимости от типа клетки. Например, антиандрогены могут блокировать эффекты DHT на клетках яичника скелетных клеток (Браун и Томас, 2003, Браун и Томас, 2004), в то время как они не эффективны в других типах клеток (Либергер и Гросс, 1994, Benten и др., 2004, Gatson и др., 2006) или могут даже оказывать агонистическое действие в клетках гиппокампа (Pike, 2001, Nguyen и др., 2007) и нескольких линий раковых клеток (Peterziel et al., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou и др., 2000, Papakonstanti et al., 2003). Кроме того, для разных органов у рыб были зарегистрированы различные характеристики Т-связывания (Браун и Томас, 2004).
Наш опыт работы с распространенным AAS указывает на то, что основные модификации (а) на A-кольце (в C2 и / или C3) и в C17 имеют тенденцию мешать самоуправлению (Баллард и Вуд, 2005). Например, станозолол, который имеет большую модификацию в C2 и C3, а также метильную группу, присоединенную к C17, не вводится самостоятельно. В текущем исследовании хомяки самостоятельно вводили оба BSA, конъюгированные в C3 (DHT-CMO-BSA) и C17 (DHT-Hemis-BSA). Дальнейшие исследования необходимы для выяснения характеристик самоорганизации андрогенов.
Клиническое значение
AAS, особенно T, на сегодняшний день являются наиболее распространенными агентами повышения эффективности, используемыми спортсменами, на которые приходится почти половина положительных допинговых тестов (Всемирное антидопинговое агентство, 2006). Учитывая такое широкое использование, злоупотребление ААС имеет самые серьезные последствия для здоровья. Сердечные и печеночные побочные эффекты злоупотребления ААС хорошо известны (Leshner, 2000). Эти и анаболические эффекты AAS, как полагают, опосредуются с помощью ядерного AR. Однако возможные ядерные AR-независимые эффекты андрогенов предполагают, что влияние AAS может значительно превосходить структуры с выражением ядерного AR.
Что касается сходства с другими наркотиками, то ААС оказывает различное воздействие и имеет различные механизмы воздействия со стороны стимуляторов. В отличие от стимуляторов (Graybiel и др., 1990), AAS индуцируют активацию c-Fos только в VTA, а не в Acb (Димео и Вуд, 2006a). Кроме того, AAS ослабляет индуцированный стимулятором Acb DA-релиз (Birgner и др., 2006) и резко ингибируют высвобождение DA (Triemstra et al., 2008). Поведенчески, AAS не индуцирует локомоторную активацию, характерную для стимуляторов (Peters and Wood, 2005).
Вместо этого поведенческие реакции на острый ААС напоминают поведенческие реакции на опиоиды или бензодиазепины, возможно, при одновременном применении аддитивных эффектов. Острая экспозиция AAS снижает автономные функции, включая дыхание и температуру тела (Peters and Wood, 2005). AAS-индуцированная вегетативная депрессия напоминает симптомы передозировки опиоидами и блокируется опиоидным антагонистом налтрексоном (Peters and Wood, 2005). Кроме того, нандролон, обычно используемый AAS, потенцирует гипотермические эффекты морфина и усугубляет синдром отмены морфина налоксоном (например,Celerier и др., 2003). Кроме того, хорошо известно, что острые ААС являются седативными / анксиолитическими (Agren и др., 1999, Arnedo и др., 2000, Фрай и Селига, 2001, Berbos et al., 2002, Peters and Wood, 2005), возможно опосредуемые их прямым воздействием на ГАМК-А-рецепторы (Масонис и Маккарти, 1995, Масонис и Маккарти, 1996). Увеличение потребления этанола у крыс, хронически обработанных ААС, также может быть отражением измененной функции ГАМКергика (Johansson et al., 2000).
Наши выводы о передозировке вызывают дополнительную озабоченность в отношении здоровья. В настоящее время классификация AAS в качестве контрольных веществ основана на их анаболических свойствах (Закон о контролируемых веществах, 1991). Однако в настоящем исследовании показано, что анаболическая эффективность AAS не обязательно соответствует их усиливающим свойствам и рискам передозировки. В дополнение к конъюгатам DHT-BSA, DHT-CMO, используемый в этом исследовании, не является контролируемым веществом, хотя его усиливающие свойства и смертность от его передозировки, по-видимому, очень похожи на DHT и T (Peters and Wood, 2005). Модель передозировки также напоминала ранее описанную для T (Peters and Wood, 2005), где высокое потребление привело к смерти 24 до 48 через час. В свете этих выводов критерии, используемые для планирования стероида в качестве контролируемого вещества, могут потребовать пересмотра для учета его ответственности за злоупотребление и токсичности в дополнение к его анаболической активности.
Результаты текущего исследования показывают, что ядерный AR, единственный AR, выделенный до сих пор, не является существенным для андрогенного усиления. Вместо этого результаты показывают, что андрогенная арматура трансдуцируется на плазматической мембране. Таким образом, дальнейшие исследования в отношении идентичности предполагаемого мембранного АР, их функциональных характеристик и анатомического распределения необходимы для выяснения основополагающего механизма злоупотребления ААС и его клинических последствий.
Сноски
Отказ от ответственности издателя: Это файл PDF из неотредактированной рукописи, который был принят для публикации. В качестве сервиса для наших клиентов мы предоставляем эту раннюю версию рукописи. Рукопись будет подвергаться копированию, набору и обзору полученного доказательства до его публикации в его окончательной форме. Обратите внимание, что во время производственного процесса могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержимое, и все юридические заявления об отказе от ответственности, которые применяются к журналу.
Рекомендации
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Поведенческие анксиолитические эффекты терапии анаболических андрогенных стероидов с низкой дозой у крыс. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Тестостерон обладает хорошими аффективными свойствами у самцов крыс: последствия для биологической основы сексуальной мотивации. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Арнедо МТ, Сальвадор А, Мартинес-Санчис С., Гонсалес-Боно Е. Награждение свойств тестостерона у нетронутых самцов мышей: экспериментальное исследование. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Внутрисердечно-внутрижелудочковое самоуправление широко распространенных анаболически-андрогенных стероидов у мужских хомячков (Mesocricetus auratus): нандролон, дростанолон, оксиметолон и станозолол. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Беккер Дж. Б., Рудик С. К.. Быстрые эффекты эстрогена или прогестерона на увеличение амфетаминов в дозе утяжеления половым актом усиливаются при праймировании эстрогенами: исследование микродиализа. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Быстрые эффекты андрогенов в макрофагах. Стероиды. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Передача тестостерона через интрализуемые поверхностные рецепторы в макрофагах, не содержащих рецепторов андрогенов. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Острый поведенческий эффект анаболических стероидов: тревожность, стереотипия и локомоторная активность. Хорм Бехав. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Изменены внеклеточные уровни ДОПАК и HVA в оболочке ракушечного ядра крысы в ответ на субхроническое введение нандролона и последующий вызов амфетамина. Neurosci Lett 2006
- Браун А.М., Томас П. Андрогены ингибируют синтез эстрадиола-17beta в яичниках атлантического кроука (Micropogonias undulatus) с помощью негеномного механизма, инициированного на поверхности клетки. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. Биохимическая характеристика мембранного андрогенового рецептора в яичнике атлантического горбыля (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Brower KJ. Нарушение анаболических стероидов и зависимость. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Симптомы и корреляции анаболически-андрогенной стероидной зависимости. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brown GR, Nemes C. Исследовательское поведение крыс в аппарате с отверстиями: опускание головы по действительной мере неофилии? Процессы Behav. 2008;78: 442-448. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Влияние нандролона на острые ответы морфина, толерантность и зависимость у мышей. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, Pope HG., Jr Насилие в отношении женщин и незаконное использование андрогенно-анаболических стероидов. Энн Клиника Психиатрия. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Раздел 21, Глава 13 - Предупреждение злоупотребления наркотиками и борьба с ним Закон о контролируемых веществах. 1991
- DiMeo AN, Wood RI. Циркулирующие андрогены повышают чувствительность к самоконтролю тестостерона у мужских хомячков. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. ICV тестостерон индуцирует Fos у мужчин сирийского мозга хомяка. Психонейроэндокринология. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Wood RI. Самоуправление эстрогенами и дигидротестостероном у мужских хомячков. Хорм Бехав. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Тестостерон стимулирует внутриклеточное высвобождение кальция и митоген-активированные протеинкиназы через G-белковый рецептор в клетках скелетных мышц. Эндокринологии. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Снижение регуляции трансформации бета-рецепторов фактора роста андрогеном в раковых клетках яичников. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Фернандес Р., Колладо П, Гарсиа Доваль С, Гарсия-Фалгерас А, Гильямон А. Пасаро Е. Молекулярный метод классификации генотипов, полученных в колонии размножения из яичников феминизированных (Tfm) крыс. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Прогестины влияют на мотивацию, вознаграждение, кондиционирование, стресс и / или реакцию на наркотики. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Ядро принимает участие в качестве сайта действия для награждения свойствами тестостерона и его метаболитов, уменьшенных на 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Селига А.М. Тестостерон увеличивает анальгезию, анксиолиз и когнитивные характеристики самцов крыс. Когнитивная, аффективная и поведенческая неврология. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Дигидротестостерон дифференциально модулирует митоген-активированную протеинкиназу и фосфоинозитидные пути 3-киназы / Akt через ядерный и новый мембранный андрогенный рецептор в клетках C6. Эндокринологии. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Амфетамин и кокаин индуцируют специфическую для лекарств активацию гена c-fos в клетках с матрицей стриозомы и лимбических отделах полосатого тела. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Негеномная сигнализация кальция тестостерона. Генотропные действия в макрофагах, не содержащих рецепторы андрогена. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Он WW, Кумар М.В., Tindall DJ. Мутация мутационного сдвига в генах рецептора андрогена вызывает полную невосприимчивость к андрогенам у мыши, ориентированной на яичка. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Анаболические андрогенные стероиды влияют на потребление алкоголя, защитное поведение и опиоидные пептиды мозга у крысы. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Устное введение тестостерона у мужчин хомяков. Нейроэндокринология. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Кури Е.М., Лукас С.Е., Папа Х.Г., младший, Олива П.С. Повышенная агрессивная реакция у добровольцев-мужчин после введения постепенно возрастающих доз тестостерона ципионата. Наркотик Алкоголь. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Ламберт Дж. Дж., Белелли Д, Педен Д.Р., Варди А.В., Петерс Дж. Нейростероидная модуляция GABAA-рецепторов. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Лешнер А.И. (Серия отчетов NIDA Research Report).Анаболические нарушения стероидов. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgens увеличивают внутриклеточную концентрацию кальция и образование инозитола 1,4,5-трифосфата и диацилглицерина через чувствительный коклюшный токсин G-белок. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Влияние андрогенов на показатели синусита позвоночника гиппокампа CA1 сохраняются у крыс Tfm-мужчин с дефектными рецепторами андрогенов. Эндокринологии. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Малаев А., Гиббс Т.Т., Фарб Д.Х. Ингибирование NMDA-ответа прегненолоновым сульфатом обнаруживает подтип селективной модуляции NMDA-рецепторов сульфатированными стероидами. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Масонис А.Е., Маккарти М.П. Прямые эффекты анаболических / андрогенных стероидов, станозолола и 17 альфа-метилтестостерона, при связывании бензодиазепина с. гамма-аминомасляной кислоты (а). Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Масонис А.Е., Маккарти М.П. Влияние андрогенного / анаболического стероидного станозолола на функцию рецептора ГАМКА: GABA-стимулированный 36Cl-приток и [35S] TBPS-связывание. J фармакологической и экспериментальной терапии. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Эстрадиол уменьшает течения кальция в нейроатальных нейронах крысы через мембранный рецептор. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Морин Л.П., Вуд Р.И. Стереотаксический атлас Мозга Золотого Хомяка. Академическая пресса; Сан-Диего: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Роль гипокретина (orexin) в мужском сексуальном поведении. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Совет NR, редактор. Национальный исследовательский совет. Руководство по уходу и использованию лабораторных животных. Национальный исследовательский совет; Вашингтон, округ Колумбия: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Флутамид и ципротерон ацетат оказывают агонистическое действие: индуцирование андроген-рецептор-зависимой нейропротекции. Эндокринологии. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Принцип лабораторного ухода за животными. Национальный институт здравоохранения; Бетесда, штат Мэриленд: 1985.
- Olds J, Milner PM. Положительное усиление, вызванное электрической стимуляцией зоны перегородки и других областей мозга крыс. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Прямые эффекты андрогенов на латеральную гипоталамическую активность нейронов у мужской крысы: II. Исследование эмиссии давления. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Орсини Й.С., Бароне ФК, Армстронг Д.Л., Уэйнер МЮ. Прямые эффекты андрогенов на латеральную гипоталамическую активность нейронов у мужской крысы: I. Микроионтофоретическое исследование. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Корнелл А.Х., Александр ГМ. Награждение аффективных свойств инъекций интрануклеарных приемов тестостерона. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Выражение предпочтения условного места тестостерона блокируется периферической инъекцией альфа-флупентиксола или интра-акцепсом. Хорм Бехав. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Быстрый, негеномный, сигнальный путь регулирует реорганизацию актина, вызванную активацией мембранных тестостероновых рецепторов. Моль Эндокринол. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Крыса мозга: в стереотаксических координатах. 4th. Академическая пресса; Нью-Йорк: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Анаболико-андрогенная зависимость от стероидов включает андрогенные и опиоидные рецепторы. Материалы 34-го ежегодного собрания Общества нейронауки; Сан-Диего, Калифорния. 2004.
- Peters KD, Wood RI. Андрогенная зависимость у хомячков: передозировка, толерантность и потенциальные опиоидерические механизмы. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Быстрая сигнализация с помощью рецептора андрогена в клетках рака предстательной железы. Онкогенов. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Ольфакторное и гормональное воздействие на базальный передний мозг мужской крысы. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. Тестостерон ослабляет бета-амилоидную токсичность в культивируемых нейронах гиппокампа. Исследование мозга. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Папа Х.Г., младший, Кац Д.Л. Психиатрические и медицинские эффекты использования анаболических андрогенных стероидов. Контролируемое исследование спортсменов 160. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Рамирес В.Д., Чжэн Дж., Сиддик К.М. Мембранные рецепторы для эстрогена, прогестерона и тестостерона в мозге крысы: фантазия или реальность. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Сильно RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Распределение андрогенов и эстрогенов мРНК-содержащих клеток в мозге крысы: исследование гибридизации in situ. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Дифференциальные эффекты конъюгатов эстрадиола и эстрадиола-БСА. Эндокринологии. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Томас П, одевание G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Прогестин, эстроген и андроген G-белковые рецепторы в рыбных гонадах. Стероиды. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Тестостерон и ядро приспосабливают допамин у самца сирийского хомяка. Психонейроэндокринология. 2008;33: 386-394. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Самоконтроль тестостерона у женщин-хомяков. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Мембранные действия эстрогенов в нейроэндокринологии: новые принципы. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Wood RI. Устное введение тестостерона у мужчин хомяков: доза-реакция, добровольное упражнение и индивидуальные различия. Хорм Бехав. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Усиление тестостерона: внутривенное и внутричерепно-мозговое самолечение у самцов крыс и хомяков. Психофармакология (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Иммунореактивность рецептора андрогена в мужском и женском мозге сирийского хомяка. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Неблагоприятные аналитические данные, представленные аккредитованными лабораториями. Всемирное антидопинговое агентство; Монреаль, Канада: 2006.
- Ямада Ю. Влияние тестостерона на активность единицы в гипоталамусе крысы и перегородке. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. Одна базовая мутация в гене рецептора андрогена вызывает нечувствительность андрогенов в яичной феминизированной крысе. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Использование анаболических андрогенных стероидов в Соединенных Штатах. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Андроген стимулирует митоген-активированную протеинкиназу в клетках рака молочной железы человека. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Cloning, экспрессия и характеристика мембранного рецептора прогестина и доказательство того, что он является посредником в мейотической созревании ооцитов рыб. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Зулоага Д.Г., Моррис Ю.А., Иордания К.Л., Бридлове С.М. Мыши с мутацией феминизации яичек демонстрируют роль рецепторов андрогенов в регуляции поведения, связанного с тревожностью, и оси гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы. Хорм Бехав. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Сулоага Д.Г., Путс Д.А., Джордан С.Л., Бридлав С.М. Роль андрогенных рецепторов в маскулинизации мозга и поведения: что мы узнали из мутации феминизации яичек. Хорм Бехав. 2008b;53: 613-626. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
- Зулоага Д.З., Иордания К.Л., Бридлове С.М. Крысы с мутацией феминизации яичек (TFM) показывают повышенные показатели тревоги. Материалы 36-го ежегодного собрания Общества нейронауки; Атланта, Джорджия. 2006. Программа # 152.118.
;
