CRF-CRF1-рецепторная система в центральном и базолатеральном ядрах Амигдалы по-разному способствует чрезмерному употреблению полезной пищи (2013)

, 2013 ноябрь; 38 (12): 2456 – 2466.

Опубликовано онлайн 2013 Июль 10. Предварительно опубликовано: 2013 Jun 10. DOI:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Абстрактные

Пищевые продукты и диета являются основными факторами, способствующими развитию компульсивного приема пищи при ожирении и расстройствах пищевого поведения. Ранее мы продемонстрировали, что прерывистый доступ к приемлемой еде приводит к кортикотропин-рилизинг-фактору-1 (CRF1) обратимые антагонистами поведения рецептора, которые включают чрезмерное вкусное потребление пищи, гипофагия регулярного приема пищи и поведение, подобное беспокойству. Однако области мозга, опосредующие эти эффекты, до сих пор неизвестны. Самцов крыс Wistar либо кормили непрерывно в течение дня / недели 7 (Чау-чау группа), или кормили с перерывами 5 дней / неделю, а затем сахарозу, приемлемая диета 2 дней / недель (Chow / Palatable группа). После хронического чередования диеты, эффекты микроинфузии ХПН1 антагонист рецепторов R121919 (0, 0.5, 1.5 мкг / сторона) в центральном ядре миндалины (CeA), базолатеральном ядре миндалины (BlA) или ядре ложа терминальной части стрии (BNST) оценивали при чрезмерном потреблении аппетитной диеты, гипофагии и тревожного поведения. Кроме того, иммуноокрашивание CRF оценивали в мозге крыс с диетой. Intra-CeA R121919 блокировал как чрезмерное вкусное потребление пищи, так и тревожное поведение в Chow / Palatable крысы, не влияющие на гипофагию. И наоборот, интра-BlA R121919 уменьшал гипофагию при еде Chow / Palatable крысы, не влияющие на чрезмерное вкусное потребление пищи или поведение, подобное беспокойству. Лечение внутри BNST не имело эффекта. Лечение не изменило поведение Чау-чау крысы. Иммуногистохимия показала увеличение количества CRF-позитивных клеток в CeA, но не в BlA или BNST Chow / Palatable крысы, как во время отмены, так и при возобновлении доступа к приемлемой диете по сравнению с контрольной группой. Эти результаты являются функциональным доказательством того, что CRF-CRF1 Рецепторная система в CeA и BlA играет дифференцированную роль в опосредовании неадаптивного поведения, возникающего в результате приемлемого цикла питания.

Ключевые слова: кортикотропин-рилизинг-фактор, BNST, зависимость, тревожность, гипофагия, крыса

ВВЕДЕНИЕ

Считается, что продукты с высоким содержанием вкуса (например, продукты, богатые сахаром и / или жирами) являются основными факторами, способствующими появлению компульсивного приема пищи при определенных формах ожирения и расстройств пищевого поведения (; ). Существует много аналогий между наркоманией и чрезмерным потреблением очень вкусных продуктов, включая потерю контроля над наркотиками / продуктами питания, неспособность прекратить употребление / переедание, несмотря на негативные последствия, дистресс и дисфорию при попытке воздержаться от наркотиков / пищи (; ). Предполагается, что эти общие симптомы возникают из-за дисфункции мозговых цепей, которые перекрываются при наркомании и компульсивном питании.

Кортикотропин-рилизинг-фактор типа 1 (CRF1антагонисты рецепторов были предложены в качестве новых терапевтических мишеней при аддиктивных расстройствах из-за их способности снижать мотивационные эффекты абстиненции (). CRF является критическим медиатором эндокринных, симпатических и поведенческих реакций на стресс (; ). CRF в паравентрикулярном ядре гипоталамуса контролирует реакцию гипоталамус-гипофиз-надпочечник (HPA) на стресс, тогда как поведенческие эффекты CRF не зависят от HPA и опосредуются внегипоталамическими областями мозга (). Экстрагипоталамический CRF – CRF1 Рецепторная система рекрутируется в зависимости от всех известных наркотиков злоупотребления через циклы интоксикации / абстиненции, и эта гиперактивация считается общим элементом, способствующим чрезмерному потреблению наркотиков через отрицательно усиленный механизм (то есть, принудительное потребление наркотиков, вызванное снятием абстиненции). индуцированное негативное эмоциональное состояние; ; ; ).

Хотя сходства между наркотиками и едой широко изучались с точки зрения их положительных усиливающих свойств (то есть чрезмерного потребления пищи, вызванного получением приятного эффекта; ; ; ; ; ), гипотеза о том, что чрезмерное потребление пищи может быть результатом `` самолечения '' для снятия негативного эмоционального состояния, связанного с отказом от вкусной пищи, относительно мало изучена (; ; ).

Ранее мы показали, что отказ от хронического прерывистого доступа к очень вкусным продуктам питания вызывает привлечение внегипоталамической системы CRF и появление CRF.1 зависимые от рецепторов неадаптивные формы поведения, которые включают чрезмерное потребление пищи при возобновлении доступа к высоконадежной диете, гипофагия приемлемой в остальном рациона питания и поведение, подобное тревожности, во время воздержания ().

Тем не менее, прямые функциональные доказательства того, какая область мозга отвечает за ХПН1 рецептор-зависимые поведенческие адаптации, вызванные приемлемым циклом диеты, отсутствуют. Это исследование, следовательно, направлено на определение того, является ли сайт-специфический антагонизм CRF1 Рецепторы в центральном ядре миндалины (CeA), базолатеральном ядре миндалины (BlA) или ядре кровати stria Terminalis (BNST) были в состоянии блокировать чрезмерное потребление высокопривлекательной пищи, вызванной абстинентной гипофагией регулярного чау-чау и поведение, похожее на беспокойство. Кроме того, это исследование было направлено на определение того, была ли повышена экспрессия CRF в CeA, BlA и BNST у крыс с диетой в цикле по сравнению с контрольной группой с использованием иммуногистохимии. Хотя ранее мы показали, что отказ от приемлемой пищи связан с повышенной экспрессией CRF в СеА, влияние BlA и BNST на циклический рацион питания в настоящее время неизвестно.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Тематика

Самцы крыс Wistar (n= 140, из которых крысы 33 для экспериментов CeA, крысы 46 для экспериментов BlA, крысы 39 для экспериментов BNST и крысы 22 для эксперимента по иммуногистохимии; Дополнительный стол 1), весом 180 – 230 г и 41 – 47 дней по прибытии (Чарльз Ривер, Уилмингтон, Массачусетс, США), были размещены в одном корпусе в пластиковых клетках с проволочной крышкой (27 × 48 × 20 см) на обратном свете 12-h цикл (гаснет в часы 1100) в виварии, одобренном AAALAC для влажности (60%) и температуры (22 ° C). Крысы вволю доступ к кукурузному корму (Harlan Teklad LM-485 Diet 7012; 65% ккал углеводов, 13% жиров, 21% белков, метаболизируемой энергии 310 кал / 100 г; Harlan, Indianapolis, IN, USA) и воде, если не указано иное , Процедуры, использованные в этом исследовании, соответствовали Руководству по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здравоохранения (номер публикации NIH 85-23, пересмотренный 1996) и Принципам ухода за лабораторными животными, и были утверждены Медицинским кампусом Бостонского университета. Комитет по уходу и использованию животных.

Наркотики

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-дипропил-пиразоло [2,3-a] пиримидин-7-амин, NBI 30775) синтезировали, как описано в ). R121919 является мощным непептидным высокоаффинным CRF1 антагониста рецептора (Ki= 2 – 5 нМ), что указывает на более слабую активность в 1000 в CRF2 рецептор, CRF-связывающий белок или 70 других типов рецепторов (). R121919 растворяли с использованием смеси 18: 1: 1 солевой раствор: этанол: кремофор.

Поведенческие тесты

Ad libitum вкусовая альтернатива доступа

Доступ к вволю вкусное чередование диеты выполняли, как описано ранее (, , ; ). Вкратце, после акклиматизации крыс разделили на две группы, подходящие по потреблению пищи, массе тела и эффективности кормления в предыдущие дни 3 – 4. Одна группа была затем обеспечена вволю доступ к рациону (чау-чау) в течение 7 дней в неделю (Чау-чау(контрольная группа этого исследования), в то время как второй группе был предоставлен бесплатный доступ к чау-чау в течение 5 дней в неделю, а затем 2 дней вволю к очень вкусной диете с высоким содержанием сахарозы со вкусом шоколада (аппетитный; Chow / Palatable группа). Все поведенческие тесты проводились на крысах, которые соблюдали диету не менее 7 недель. «Чау» диета представляла собой описанную выше кукурузную пищу от Harlan, тогда как вкусная диета представляла собой полноценную питательную диету с шоколадным вкусом и высоким содержанием сахарозы (50% ккал), основанную на AIN-76A, которая сопоставима по макроэлементам. пропорции и энергетическая ценность рациона питания (формула 5TUL со вкусом шоколада: 66.7% ккал углеводов, 12.7% жира, 20.6% белка, метаболическая энергия 344 ккал / 100 г (Test Diet, Richmond, IN, USA), сформулированная как точность 45 мг пищевые гранулы, чтобы повысить его предпочтительность). Для краткости первые 5 дней (только еда) и последние 2 дня (еда или вкусное блюдо в зависимости от экспериментальной группы) каждой недели во всех экспериментах обозначаются как C и P фазы. Вкусная диета была предоставлена ​​в кормушках GPF20 'J' (Ancare, Bellmore, NY, USA). Одновременно диет не существовало.

Эксперименты по приему пищи

Крысам давали предварительно взвешенную пищу в их домашних клетках в начале темного цикла. Лечение проводилось на крысах, у которых диета была циклической в ​​течение по крайней мере 7 недель после возобновления доступа к приемлемой диете (C→P фаза), или к диете (P→C фаза). R121919 микроинфузировали двусторонне в CeA, BlA или BNST (0, 0.5 и 1.5 мкг / сторона, 0.5 мкл / сторона, 30-min до предварительной обработки) с использованием рандомизированных образцов латинского квадрата в субъекте.

Тест светлый темный ящик

Крыс тестировали на наличие минимума 10 в прямоугольнике светло-темного цвета (50 × 100 × 35 см), в котором отделение отвращающего света (50 × 70 × 35 см) освещалось светом 60 lux. Темная сторона (50 × 30 × 35 см) имела непрозрачное покрытие и N0 люкс света. Два отсека были соединены открытым дверным проемом, который позволял субъектам свободно перемещаться между ними. Тестирование проводилось, по крайней мере, после 7 недель смены рациона, 5 – 9 через час после перехода от приемлемой диеты к диете с едой (P→C фаза); этот момент времени обеспечивает возникновение тревожного поведения, вызванного отказом от вкусной пищи, в Chow / Palatable крыс (, ). Перед проведением испытаний крыс содержали в тихой темной прихожей не менее 2 ч. Белый шум присутствовал во время привыкания и тестирования. В день тестирования крыс микроинфузировали двусторонне с R121919 в CeA, BlA или BNST (0, 0.5 и 1.5 мкг / сторона, 0.5 мкл / сторона) 30 мин перед помещением в темный отсек, обращенный к дверному проему. и поведение было записано видео для последующей оценки. Лечение проводилось с использованием межсубъектного дизайна. Время, проведенное в открытом отсеке, измерялось как показатель поведения, подобного беспокойству. Аппарат протирали водой и высушивали после каждого предмета.

Внутричерепные операции, процедура микроинфузии и установка канюли

Внутричерепные операции

Крысам стереотаксически имплантировали двусторонние внутричерепные канюли, как описано ранее (; ; ). Вкратце, направляющие канюли из нержавеющей стали (калибр 24, Plastics One, Роанок, Вирджиния, США) опускали с двух сторон на 2.0 мм выше CeA, BlA или BNST. Четыре ювелирных винта из нержавеющей стали были прикреплены к черепу крысы вокруг канюли. Были применены стоматологические реставрационные пломбы (Henry Schein, Мелвилл, Нью-Йорк, США) и акриловый цемент, образуя пьедестал, прочно закрепивший канюлю. Координаты канюли от брегмы, использованной для CeA, были: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (от черепа) с резцом, установленным на 5.0 мм выше межуральной линии, согласно атласу ). Координаты канюли, использованные для BlA, были: AP -2.64, ML-4.8, DV-6.5 (от черепа) с плоским черепом, в соответствии с ). Координаты канюли, использованные для BNST, были следующими: AP -0.6, ML-3.5, DV-4.8 (от черепа) с плоским черепом и углом наклона 14 °. Манекен из нержавеющей стали (Plastics One) сохранил проходимость канюли. После операции крысам был предоставлен период восстановления 7-день, в течение которого они обрабатывались ежедневно.

Процедура микроинфузии

Препарат был микроинфузирован в мозг крыс, как описано ранее (; ). Для внутричерепной микроинфузии фиктивный стилет был удален из направляющей канюли и был заменен инжектором из нержавеющей стали калибра 31, выступающим на 2 мм за кончик направляющей канюли; инжектор был подсоединен через трубку PE 20 к микрошприцу Hamilton (Гамильтон, Рено, штат Невада), приводимый в действие многошприцевым микроинфузионным насосом (KD Scientific / Biological Instruments, Холлистон, Массачусетс, США). Микроинфузии выполняли в объеме мкл 0.5, доставленном в течение мин 2; Форсунки были оставлены на месте для дополнительной минуты 1, чтобы минимизировать обратный поток.

Размещение канюли

Размещение канюли было проверено в конце всех испытаний (см. Рисунок 1). Субъекты были анестезированы (изофлуран, 2 – 3% в кислороде) и подвергнуты транскардиальной перфузии ледяным 4% параформальдегидом (PFA) в воде (pH 7.4) и микроинфузированы крезиловым фиолетовым (0.5 мкл / сторона). Затем мозг фиксировали в течение ночи в 4% PFA и уравновешивали в 30% сахарозе в PFA. Корональные срезы 40 мкм собирали, используя криостат (Thermo Scientific HM-525), и размещения проверяли под микроскопом. Сорок субъектов (14 для CeA, 16 для BlA и 10 для BNST) были исключены из анализа из-за неправильного размещения канюли. Данные о неправильных местах размещения были проанализированы, чтобы помочь интерпретировать специфические особенности сайта.

Рисунок 1 

Рисование срезов головного мозга крыс. Точки представляют собой места инъекции в центральном ядре миндалины (CeA) (a), базолатеральном ядре миндалины (BlA) (b) и ядре ложа терминальной полосы (BNST) (c), включенных в анализ данных. ...

CRF Иммуногистохимия

Поведенческая процедура, перфузия и иммуногистохимия

Крысы (n= 22) были подвергнуты циклическому рациону в течение недель 7, анестезированы и перфузированы 2 – 4 в ч после переключения либо с приемлемой диеты на диету с едой (P→C фаза) или от рациона к еде на вкусную диету (C→P фаза). Крыс анестезировали и затем транскардиально перфузировали физиологическим раствором + 2% (мас. / Об.) Нитрита натрия (pH = 7.4) сначала, а затем 4% параформальдегидом, забуференным в буре (pH = 9.5), затем. Затем крыс декапитировали и мозг сразу собирали, помещали в ~ 20 мл 4% PFA и хранили в 30% сахарозе в 4% PFA растворе при 4 ° C до насыщения.

Для визуализации CRF мозг разрезали на коронковые срезы размером 40 мкм с использованием криостата и впоследствии хранили в криопротекторном средстве при -20 ° C. Каждый шестой срез (на расстоянии 240 мкм) всего CeA, BlA и BNST был выбран систематическим случайным образом и обработан для иммуноцитохимии. Свободно плавающие срезы промывали калий-фосфатным буферным солевым раствором (KPBS). После первоначальной промывки срезы инкубировали в 0.3% растворе пероксида водорода KPBS в течение 30 минут для блокирования эндогенных пероксидаз. Затем срезы снова промывали и помещали в блокирующий раствор (3% нормальная козья сыворотка, 0.25% Triton X100 и 0.1% бычий сывороточный альбумин) на 2 часа. Затем срезы переносили в первичное антитело (разведение 1: 100, анти-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) в блокирующем растворе и инкубировали в течение 72 часов при 4 ° C. После дополнительной промывки срезы инкубировали со вторичным антителом (разведение 1: 1000, биотинилированное антитело против кролика (BA-1000) Vector Laboratories, Burlingame, California) в блокирующем растворе в течение 2 часов при комнатной температуре. Срезы промывали, а затем инкубировали в растворе авидин-биотин пероксидазы хрена ABC (Vector Laboratories) в блокирующем растворе в течение 1 ч. Затем срезы инкубировали с использованием набора диаминобензидиновых субстратов (Vector Laboratories) в соответствии с инструкциями производителя, и после завершения реакции срезы промывали в KPBS, наносили на предметные стекла и оставляли сушиться в течение ночи. На следующий день слайды обезвоживали с использованием спирта с изменяемой концентрацией и закрывали покровным стеклом DPX (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Количественная оценка CRF + клеточных тел

Количественное определение клеточных тел CRF + проводили в соответствии с непредвзятым стереологическим подходом. Серия срезов была проанализирована для каждой партии окрашивания. Срезы анализировали с использованием микроскопа BX-51 Olympus (Center Valley, PA, USA), оснащенного видеокамерой Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Canada), трехосной моторизованной сцены MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, Нью-Йорк, США) и рабочая станция для персонального компьютера. Все подсчеты клеток были сделаны на закодированных слайдах следователем, слепым к условиям лечения. Каждая область была очерчена фактически на оцифрованном изображении каждой случайно выбранной секции, используя модуль рабочего процесса оптического фракционатора программного обеспечения Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, USA). Все контуры были нарисованы при небольшом увеличении с использованием объектива Olympus PlanApo N 2X с числовой апертурой 0.08 и подсчитаны с использованием объектива Olympus UPlanFL N 40X с числовой апертурой 0.75. Рамка сетки и счетная рамка были установлены на 275 × 160 мкм. Использовали защитную зону 2 мкм и высоту диссектора 20 мкм. Замороженные срезы были первоначально нарезаны с номинальной толщиной 40 мкм. Иммуноокрашивание и монтаж приводят к измененной толщине среза, которая измерялась на каждом участке подсчета. Среднюю толщину среза вычисляли с помощью программного обеспечения и использовали для оценки общего объема области образца и общего количества клеток CRF +.

Статистический анализ

Ученики t-тесты были использованы для анализа факторов с двумя уровнями. ANOVAs были выполнены для анализа факторов с более чем двумя уровнями. После значительного омнибусного эффекта ANOVA (p<0.05), LSD Фишера Постфактум Были использованы сравнительные тесты. Тест Даннета был использован для определения того, нормализовало ли потребление R121919 Chow / Palatable крысы к обработанному транспортным средством Чау-чаууровни. Были использованы следующие программные / графические пакеты: Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Чикаго, Иллинойс, США), InStat 3.0 (GraphPad, Сан-Диего, Калифорния, США), Statistica 7.0 (Statsoft, Талса, Оклахома, США) и PASW. Статистика 18.0 (SPSS, Чикаго, Иллинойс, США).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Эффекты микроинфузии R121919 в CeA

Чрезмерное потребление вкусной пищи

Чтобы определить, является ли CRF1 Рецепторы в СеА опосредуют чрезмерное потребление вкусной пищи у крыс с диетой циклически, мы микроинфузировали сайт, в частности, селективный CRF1 антагонист рецептора R121919 в эту область мозга и измерял потребление пищи в начале P фаза. Как показано в Рисунок 2a, потребление обработанного носителем вкусовой диеты Chow / Palatable крысы были в два раза выше, чем у контрольного корма Чау-чау крысы. Антагонизм CeA CRF1 рецепторы полностью блокировали это чрезмерное употребление вкусной пищи в Chow / Palatable крысы, не влияющие на потребление пищи у контрольных крыс (Чау-чау, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc сравнение показало, что самая высокая доза R121919 (1.5 мкг / сторона) значительно снижала вкус пищи по сравнению с носителем в Chow / Palatable крысы. Потребление Chow / Palatable крысы после микроинфузии 1.5 мкг / боковая доза существенно не отличались от потребления обработанного носителем Чау-чау крысы. Подтверждение специфичности эффектов для CRF1 рецепторов в CeA, никакого эффекта не наблюдалось при приеме пищи у субъектов с неуместными канюлями (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Рисунок 2 

Эффекты микроинфузии селективного кортикотропин-рилизинг-фактора-1 (CRF1) антагонист рецептора R121919 (0, 0.5, 1.5 мкг / сторона) в центральном ядре миндалины (CeA) при чрезмерном употреблении в пищу вкусной пищи, гипофагии регулярного ...

Гипофагия регулярного рациона

Чтобы определить, является ли CRF1 Рецепторы в СеА опосредуют гипофагию рациона чау-чау у крыс с циклическим рационом, мы микроинфузировали R121919 в эту область мозга и измерили потребление пищи в начале C фаза. Как показано в Рисунок 2b, потребление обработанных транспортным средством Chow / Palatable крысы составляли ∼1 / 3 от потребления обработанного транспортным средством Чау-чау крысы (гипофагия). Лечение R121919 не влияло на гипофагию регулярного приема пищи в Chow / Palatable крыс (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Подтверждение результатов, полученных в P фаза, микроинфузия R121919 в CeA не влияла на потребление пищи в контроле Чау-чау крыс (Чау-чау, F (2, 20) = 0.01, NS).

Острое, вызванное синдромом тревоги поведение, подобное

Чтобы определить, является ли CeA CRF1 Рецепторы опосредуют негативное эмоциональное состояние, вызванное изъятием вкусной пищи у циклических крыс, мы микроинфузировали сайт R121919 специфически в эту область мозга и измерили поведение, похожее на тревогу, используя тест светлой темной коробки 5 h C фаза. Как показано в Рисунок 2cу крыс, остро отстраненных от хронического прерывистого доступа к высоконадежной диете, наблюдалось значительное уменьшение времени, проведенного в светлом отделении светло-темного ящика. Микроинфузия 1.5 мкг / сторона R121919 в CeA, дозе, которая эффективно снижала чрезмерное употребление в пищу вкусной пищи, полностью блокировала поведение, подобное беспокойству, увеличивая время, проведенное в светлой области коробки в Chow / Palatable крысы, не влияющие на поведение в Чау-чау крысы (ДОЗА: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Подтверждение специфичности эффектов для ХПН1 рецепторов в CeA, никакого эффекта не наблюдалось при приеме пищи субъектами с неправильно расположенными канюлями (ДОЗА: F (2, 2) = 4.32, NS).

Эффекты микроинфузии R121919 в BlA

Чрезмерное потребление вкусной пищи

Чтобы определить, является ли BlA CRF1 Рецепторы опосредуют чрезмерное употребление вкусной пищи у крыс с циклическим рационом, мы микроинфузировали сайт R121919 специально в эту область мозга и измерили потребление пищи в начале P фаза. В отличие от того, что наблюдалось после введения R1219191 в CeA, как показано на Рисунок 3a двусторонняя микроинфузия селективного ХПН1 антагонист рецептора в BlA не влиял значительно на приемлемое потребление пищи в Chow / Palatable крыс (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Точно так же регулярное потребление пищи в Чау-чау крысы не были затронуты микроинфузией R121919 (Чау-чау, F (2, 18) = 0.52, NS).

Рисунок 3 

Эффекты микроинфузии селективного кортикотропин-рилизинг-фактора-1 (CRF1антагонист рецепторов R121919 (0, 0.5, 1.5 мкг / сторона) в базолатеральном ядре миндалины (BlA) при чрезмерном употреблении в пищу вкусной пищи, гипофагии регулярного ...

Гипофагия регулярного рациона

Чтобы определить, является ли CRF1 Рецепторы в BlA опосредуют гипофагию пищи у циклических крыс, мы микроинфузировали R121919 в эту область мозга и измерили потребление пищи в начале C фаза. Как показано в Рисунок 3bпосле микроинфузии ХПН наблюдалось значительное увеличение регулярного приема пищи1 антагонист рецептора в BlA Chow / Palatable крыс (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Действительно, самая высокая доза (1.5 мкг) R121919 микроинфузилась в BlA во время C фаза значительно увеличила потребление обычной пищи в рационе на 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) по сравнению с обработанным носителем Чау-чау крысы. R121919 ослаблял, но не полностью блокировал вызванную отменой гипофагию при введении максимальной дозы. Подтверждение данных, полученных в P фаза, микроинфузия R121919 не влияла на регулярное потребление пищи в Чау-чау крыс (Чау-чау, F (2, 20) = 0.25, NS). Подтверждение специфичности эффектов для CRF1 рецепторов в BlA, никакого эффекта не наблюдалось при приеме пищи у субъектов с неуместными канюлями (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Острое, вызванное синдромом тревоги поведение, подобное

Чтобы определить, является ли BlA CRF1 Рецепторы опосредуют отрицательное эмоциональное состояние, вызванное острым изъятием вкусной пищи у циклических крыс, мы микроинфузировали сайт, специфически R121919, в эту область мозга и измерили поведение, подобное тревожному, 5 h в C фаза. Как показано в Рисунок 3c, вкусная еда-снята Chow / Palatable крысы проводили меньше времени в светлом отсеке по сравнению с Чау-чау крысы (ДИЕТА: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, микроинфузированный в BlA, не оказывал значительного влияния на время, проведенное в светлой зоне (ДОЗА: F (1, 39) = 0.01, NS).

Эффекты микроинфузии R121919 в BNST

Чрезмерное потребление вкусной пищи

Чтобы определить, является ли BNST CRF1 рецепторы опосредуют чрезмерное употребление в пищу вкусной пищи у крыс с циклическим рационом, R121919 был специфически микроинфузирован в эту область мозга, и потребление пищи было измерено в начале P фаза. Как показано в Рисунок 4bдвусторонняя микроинфузия селективного ХПН1 антагонист рецепторов в BNST существенно не влияет на приемлемое потребление пищи в Chow / Palatable крыс (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Точно так же регулярное потребление пищи в Чау-чау крысы не были затронуты микроинфузией R121919 (Чау-чау, F (2, 20) = 1.03, NS).

Рисунок 4 

Эффекты микроинфузии селективного кортикотропин-рилизинг-фактора-1 (CRF1) антагонист рецептора R121919 (0, 0.5, 1.5 мкг / сторона) в ядре ложа stria Terminalis (BNST) при чрезмерном употреблении в пищу вкусной пищи, гипофагии ...

Гипофагия регулярного рациона

Чтобы определить, является ли BNST CRF1 рецепторы опосредуют гипофагию рациона чау-чау у циклических крыс, мы микроинфузировали R121919 в эту область мозга и измерили потребление пищи в начале C фаза. Как показано в Рисунок 4aМикроинфузия R121919 не влияла на регулярное употребление пищи Чау-чау крыс (Чау-чау, F (2, 14) = 0.03, NS). Аналогично, лечение R121919 не влияло на гипофагию регулярного приема пищи в Chow / Palatable крыс (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Острое, вызванное синдромом тревоги поведение, подобное

Чтобы определить, является ли BNST CRF1 Рецепторы опосредуют негативное эмоциональное состояние, вызванное острым изъятием вкусной пищи у циклических крыс, мы микроинфузировали сайт, специфически R121919, в эту область мозга и измерили поведение, подобное тревожному, 5 через час после переключения с P→C фаза. Как показано в Рисунок 4c, вкусная еда-снята Chow / Palatable крысы проводили меньше времени в светлом отсеке по сравнению с контролем Чау-чау крысы (ДИЕТА: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, двусторонне микроинфузированный в дозе 1.5 мкг / сторону в BNST, не оказал значительного влияния на время, проведенное в светлой зоне (ДОЗА: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF Иммуногистохимия

Рисунок 5 иллюстрирует репрезентативные микрофотографии клеток CRF + в CeA, BlA и BNST в Чау-чау и Chow / Palatable крысы, следуя вволю вкусная процедура чередования диеты. Анализ CRF иммунореактивности CeA показал, что значительная разница между Chow / Palatable и Чау-чау крысы во время обоих C и P фаза (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Статистически значимых различий между группами не наблюдалось ни в BlA (F (2, 17) = 1.13, NS), ни в BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Рисунок 5 

Репрезентативные микрофотографии иммунореактивности кортикотропин-рилизинг-фактора (CRF) в центральном ядре миндалины (CeA) (a – d), базолатеральном ядре миндалевидного тела (BlA) (e – h) и ядре ложа stria Terminalis (BNST) ) (я – л) ...

ОБСУЖДЕНИЕ

Это исследование было разработано для функциональной идентификации участка головного мозга, ответственного за CRF-опосредованное чрезмерное потребление высокопривлекательной пищи у крыс в режиме чередования рациона. Наши результаты доказывают важную роль CeA в обеспечении чрезмерного употребления очень вкусной пищи. Кроме того, мы демонстрируем, что система CRF в BlA, в отличие от CeA, играет роль в процессе девальвации, который происходит при понижении величины вознаграждения за еду.

Ранее мы показали, что повторяющиеся циклы доступа к сладкой, очень вкусной диете и ее острый отказ приводят к чрезмерному употреблению вкусной пищи, а также к острой зависимой от абстиненции гипофагии регулярного рациона и едоподобному поведению (; , ). Наблюдаемое здесь чрезмерное употребление пищи предположительно обусловлено отрицательным эмоциональным состоянием, вызванным повторными эпизодами острого отказа от очень вкусных продуктов через экстрагипоталамический CRF-CRF1 механизм, опосредованный рецепторной системой, который напоминает процесс, подобный «киндлингу», лежащий в основе аддиктивных расстройств (; ; ; ).

Результаты этого исследования показывают, что CRF1 рецепторы CeA и BlA по-разному опосредуют адаптацию питания и поведение, подобное тревожности, у крыс с хронической диетой. Администрация селективного CRF1 антагонист рецепторов в СеА блокировал как чрезмерное питание, так и поведение, подобное беспокойству Chow / Palatable крысы, не влияющие на гипофагию из-за неосвоенной, регулярной диеты. Интересно, что введение R121919 в BlA ослабляло гипофагию менее аппетитной диеты (то есть повышенного регулярного приема пищи) в Chow / Palatable крысы, не влияющие на чрезмерное питание или поведение, подобное беспокойству. При микроинфузии в BNST R121919 не влиял ни на одну из переменных, измеренных в Chow / Palatable крысы (чрезмерное употребление очень вкусной диеты, регулярное питание с едой и острое вызванное синдромом беспокойства поведение). Наблюдаемые фармакологические эффекты были селективными для Chow / Palatable крысы, потому что R121919, микроинфузированный в CeA, BlA или BNST Чау-чау контрольные крысы не оказывали никакого эффекта. Следовательно, CRF – CRF1 Рецепторная система CeA и BlA, по-видимому, по-разному опосредует поведенческие результаты, возникающие в результате хронической приемлемой циклической диеты. С другой стороны, CRF – CRF1 Рецепторная система BNST, по-видимому, не участвует в поведенческих адаптациях, вызванных приемлемым чередованием диеты.

Наши поведенческие и фармакологические результаты были подтверждены наблюдением, что иммунореактивность CRF в СеА Chow / Palatable крысы были значительно увеличены по сравнению с Чау-чау контрольные крысы, во время отказа от и после возобновления доступа к очень вкусной диете (). Интересно, что в пределах BlA или BNST не наблюдалось значительного различия в иммунореактивности CRF между группами. Повышенная иммунореактивность CRF, наблюдаемая в СеА Chow / Palatable крысы согласуются с нашими предыдущими данными о том, что острая абстиненция от аппетитной диеты связана с повышенным выделением CRF в CeA (). Однако, в отличие от того, что было показано ранее, возобновление доступа к приемлемой диете не приводило к возврату экспрессии CRF в СеА к контрольным уровням. Расхождение между результатами, полученными здесь, и предыдущим наблюдением может быть связано с разным моментом времени сбора мозга и разным анатомическим разрешением методов, принятых для измерения экспрессии CRF. Тем не менее, наблюдаемое увеличение экспрессии CRF в CeA во время абстиненции и после возобновления доступа к приемлемой диете согласуется с селективными эффектами блокады поведения, подобного тревожности (во время абстиненции) и чрезмерного приема пищи (возобновление доступа) в Chow / Palatable крысы. Таким образом, явное несоответствие между этими двумя исследованиями можно интерпретировать следующим образом: во время острого аппетита к пище повышается экспрессия CRF в CeA у крыс с цикличным рационом питания по сравнению с контрольной группой, что является причиной возникновения негативного аффекта. Экспрессия CeA CRF остается измененной вплоть до первых часов очень приятного доступа, вызывая чрезмерное потребление пищи. Однако после чрезмерного вкуса пищи CRF возвращается к контрольным уровням ().

Представленные поведенческие, фармакологические и молекулярные результаты подтверждают гипотезу о том, что CRF-CRF1 Рецепторная система в CeA играет важную роль в опосредовании отрицательного аффективного состояния и чрезмерного потребления приемлемой пищи у крыс с диетой в цикле, аналогично тому, что было широко продемонстрировано для алкогольной и лекарственной зависимости (). Действительно, этанолзависимые крысы демонстрируют повышенное внеклеточное высвобождение CRF в СеА во время абстиненции, и введение антагониста рецептора CRF в СеА способно блокировать эскалацию самостоятельного введения этанола во время абстиненции (; ). Аналогично, опиат-зависимые животные демонстрируют повышенную экспрессию CRF в СеА во время абстиненции () и блокада рецепторов CRF в CeA, но не в BNST, снижает поведенческие признаки абстиненции (; ). Ключевая роль для CRF – CRF1 Система в CeA также была продемонстрирована в зависимости от никотина. Действительно, выведение никотина из-за осаждения мекамиламином связано с гиперактивацией CRF-CRF1 рецепторная система в CeA () и внутри-CeA, но не внутри-BlA, микроинфузия CRF1 антагонист рецептора снижает зависимое от отмены никотина повышение порога вознаграждения мозга (). У каннабиноид-зависимых крыс ускоренная абстиненция связана с заметным повышением концентрации внеклеточного CRF в CeA (). В целом, это доказательство убедительно подтверждает гипотезу о том, что CRF-CRF1 Рецепторная система в CeA является ключевым медиатором острого негативного воздействия, вызванного отменой, наряду с чрезмерным потреблением наркотиков и алкоголя во время зависимости. Наши результаты расширяют эти знания до чрезмерного употребления очень вкусной пищи, предполагая, что происходят аналогичные нейроадаптации.

Результаты этого исследования показывают, что аппетитная пищевая зависимая гипофагия в рационе менее аппетитного рациона снижается за счет микроинфузии в BlA селективного CRF.1 антагонист рецепторов, в то время как лечение лекарственными препаратами внутри BA не влияло на чрезмерное питание и поведение, подобное беспокойству. Дифференциальная вовлеченность BlA CRF – CRF1 Рецепторная система в результатах циклического рациона предполагает, что гипофагия пищи может представлять собой поведенческий процесс, независимый от поведения, подобного тревожному. Скорее, эти результаты согласуются с гипотезой, что BlA опосредует сенсорные и стимулирующие аспекты мотивационно значимых событий. Действительно, существуют значительные доказательства того, что АБК критически важен в качестве посредника в процессах девальвации и отрицательных реакциях на уменьшение вознаграждения (т.е. эффект Креспи, последовательный отрицательный контраст, девальвация вознаграждения и т. Д .; ; ; ) и, следовательно, гипофагия, возникающая в результате перехода с диеты с высоким содержанием вкуса на менее аппетитную пищу, может представлять собой процесс гедонической девальвации, а не механизм, зависящий от энергетического гомеостаза (т. е. не зависящий от предыдущего потребления энергии или увеличения массы тела). ; , ). Блокада ХПН1 следовательно, предполагается, что рецепторы в BlA уменьшают гипофагию пищи (то есть увеличивают потребление пищи), ослабляя процесс девальвации, который происходит при переходе от еды с высоким содержанием вкуса к менее аппетитной еде. В этом контексте также имеет место очевидное несоответствие между молекулярными и поведенческими / фармакологическими результатами, полученными в BlA. Хотя CRF1 антагонист рецептора был способен уменьшать величину гипофагии при еде при инъекции внутри B1, при этом не наблюдалось существенных различий в иммунореактивности CRF в этой области при сравнении крыс с контрольным циклом и рационом. Это очевидное несоответствие может быть объяснено с учетом того, что зависимые от BlA процессы девальвации альтернативных вознаграждений происходят физиологически и имеют важное эволюционное значение при выборе продуктов, которые дают наибольшее значение вознаграждения / энергии (). Таким образом, можно утверждать, что посредничество этих процессов в BlA не требует нейроадаптации в системе CRF (аналогично тем, которые наблюдаются в CeA). В поддержку этой гипотезы, в то время как чрезмерное питание требует развития хронического циклического рациона питания, гипофагия менее предпочтительного альтернативного рациона питания происходит после самого первого перехода от диеты с высоким содержанием вкуса обратно к обычному рациону (). Кроме того, важно подчеркнуть, что на основании результатов, полученных путем введения антагониста рецептора CRF1 в BlA и CeA, CRF1 наблюдаемая здесь рецептор-зависимая гипофагия, по-видимому, представляет собой иной поведенческий процесс, чем ангедония, наблюдаемая при отмене препарата. Тем не менее, было продемонстрировано, что острая абстиненция от прерывистого доступа к приемлемой еде вызывает другие реакции, подобные гипоэдоническим, такие как повышенная неподвижность в тесте принудительного плавания и пониженное реагирование в режиме подкрепления с прогрессивным соотношением (; ).

Следует отметить, что, хотя Chow / Palatable у крыс был хронический рацион питания, показанные здесь поведенческие и нейрохимические изменения происходят во время острого, а не хронического отказа от приемлемой диеты. Акцентирование внимания на этом аспекте особенно актуально, поскольку в исследованиях наркомании существуют глубокие различия в поведенческих, фармакологических и нейрохимических последствиях острого vs наблюдается длительное воздержание (; ). Будущие исследования будут полезны для определения того, как длительная абстиненция может повлиять на результаты циклов диеты.

Уместным вопросом обсуждения является вопрос о том, можно ли считать чрезмерное потребление вкусной пищи, которое мы наблюдаем в контексте этой модели на животных, «компульсивным». В доклинических исследованиях зависимости термин `` компульсивный '' широко использовался для описания чрезмерного потребления наркотиков во время отмены, которое вызвано негативным аффективным состоянием и облегчается при возобновлении доступа к препарату (; ). Такое понимание термина `` компульсивное '' основано на концептуальной структуре, согласно которой компульсивные расстройства характеризуются тревогой и стрессом перед совершением компульсивного поведения и освобождением от стресса путем выполнения компульсивного поведения (; ). В контексте модели на животных, использованной здесь, чрезмерное пищевое поведение можно интерпретировать как форму `` компульсивного '' поведения, учитывая ранее опубликованные доказательства того, что крысы с периодическим доступом к вкусной диете демонстрируют негативное эмоциональное состояние во время отказа от вкусной пищи, характеризуемого тревожным и депрессивным поведением, которое облегчается при возобновлении доступа (, ; ).

Таким образом, результаты этого исследования предоставляют критические функциональные доказательства того, что CRF-CRF1 Рецепторная система CeA и BlA играет дифференцированную роль в опосредовании неадаптивного поведения, возникающего в результате прерывистого доступа к приемлемой еде. В CeA CRF – CRF1 Рецепторная система является ключевым медиатором чрезмерного поедания вкусной пищи и отрицательного аффекта, зависимого от отмены, тогда как в BlA она опосредует отвращающие реакции субъектов, вызванные снижением вознаграждения.

ФИНАНСИРОВАНИЕ И РАСКРЫТИЕ

Авторы объявили, что нет никаких конфликтов интересов.

Благодарности

Мы благодарим Дункана Момани, Адити Р. Нараян, Джину Квак за техническую помощь и Тамару Зерич за техническую и редакционную помощь. Мы также благодарим Елену Ф. Кроуфорд за полезные предложения, касающиеся иммуногистохимии CRF. Эта публикация стала возможной благодаря грантам под номерами DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 и AA016731, предоставленным Национальным институтом злоупотребления наркотиками (NIDA), Национальным институтом психического здоровья (NIMH) и Национальным институтом злоупотребления алкоголем и алкоголизмом ( NIAAA), профессором Питера Пола по развитию карьеры (PC) и Программой исследовательских возможностей для студентов Бостонского университета (UROP). Это исследование также было поддержано программами внутренних исследований NIH Национального института злоупотребления наркотиками и Национального института злоупотребления алкоголем и алкоголизмом, NIH, DHHS. Его содержание является исключительной ответственностью авторов и не обязательно отражает официальную точку зрения Национальных институтов здравоохранения.

Сноски

 

Дополнительная информация сопровождает документ на веб-сайте нейропсихофармакологии (http://www.nature.com/npp)

 

 

Дополнительный материал

Рекомендации

  • Ахмед Ш., Кооб Г. Ф. Переход к наркомании: модель отрицательного подкрепления, основанная на аллостатическом снижении функции вознаграждения. Психофармакология (Берл) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
  • Авена Н.М., Бокарсли М.Е., Хебель Б.Г. Животные модели сахарного и жирового переедания: связь с пищевой зависимостью и увеличением массы тела. Методы Мол Биол. 2012; 829: 351-365. [PubMed]
  • Бакши В.П., Калин Н.Х. Кортикотропин-рилизинг-гормон и модели тревоги на животных: взаимодействие гена и окружающей среды. Биол Психиатрия. 2000; 48: 1175-1198. [PubMed]
  • Тюк TL. Чувствительность к стрессу: нарушение регуляции путей ХПН и развитие заболевания. Horm Behav. 2005; 48: 1-10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Сабино V, Petrosino S, Steardo L, Райс KC. 2013aRimonabant ускоряет беспокойство у крыс, отказавшихся от вкусной пищи: роль центральной миндалины Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
  • Blasio A, Steardo L, Сабино V, Cottone P. 2013bОпиоидная система в медиальной префронтальной коре опосредует еду, похожую на выпивку. Наркоман Биолдой: 10.1111 / adb.12033 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
  • Бриз Г.Р., Оверстрит Д.Х., Кнапп DJ. Концептуальные основы этиологии алкоголизма: гипотеза «разжигания» / стресса. Психофармакология (Berl) 2005; 178: 367–380. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M, et al. Блокада рецепторов CRF1 в центральном ядре миндалины ослабляет дисфорию, связанную с отменой никотина у крыс. Pharmacol Biochem Behav. 2012; 101: 62-68. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Конструкция 2,5-диметил-3- (6-диметил-4-метилпиридин-3-ил) -7-дипропиламинопиразоло [1,5-a] пиримидин (NBI 30775 / R121919) и структура - отношения активности ряда и ряда р активные антагонисты рецептора рилизинг-фактора кортикотропина. J Med Chem. 2004; 47: 4787-4798. [PubMed]
  • Корвин Р.Л. Крылатые крысы: модель перемежающегося чрезмерного поведения. Аппетит. 2006; 46: 11-15. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Корвин Р.Л., Григсон П.С. Обзор симпозиума - пищевая зависимость: факт или вымысел. J Nutr. 2009; 139: 617-619. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Коттон П, Сабино В., Надь Т.Р., Косчина Д.В., Зоррилла Е.П. Микроструктура питания у диеты, вызванной ожирением, в сравнении с резистентными крысами: центральные эффекты урокортина 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, et al. Подбор системы CRF опосредует темную сторону компульсивного питания. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016-20020. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Коттон П, Сабино V, Стеардо Л, Zorrilla EP. Прерывистый доступ к предпочтительной пище снижает усиливающую эффективность пищи у крыс. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066-R1076. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Коттон П, Сабино В., Стерео Л, Зоррилла Э.П. Комплексная, связанная с беспокойством и метаболическая адаптация у крыс-женщин с чередованием доступа к предпочтительным продуктам питания. Психонейроэндокринология. 2009b; 34: 38-49. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Антагонизм сигма-1 рецепторов блокирует компульсивно-подобную пищу. Neuropsychopharmacology. 2012; 37: 2593-2604. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF опосредует анксиогенный и анти-полезный, но не аноректический эффект PACAP Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.113 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Крест Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Кроуфорд Э.Ф., Кооб Г.Ф. Кортикотропин-высвобождающий фактор в центральном ядре миндалины опосредует усиленное самообладание этанолом у отобранных, зависимых от этанола крыс. J Neurosci. 2006; 26: 11324-11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH, et al. Активация системы CRF-CRF1 опосредует вызванное отменой повышение уровня самостоятельного введения никотина у никотин-зависимых крыс. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198-17203. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, et al. В пробирке Характеристика R121919: нового антагониста рецептора непептидного кортикотропин-рилизинг-фактора 1 (CRF1) для потенциального лечения депрессии и связанных с тревогой расстройств. Общество нейробиологии. 2000; Абстрактная 807: 4 – 9.
  • Хаган М.М., Чендлер П.К., Вауфорд П.К., Рыбак Р.Дж., Освальд К.Д. Роль приемлемой пищи и голода как триггерных факторов в модели стресса, вызванного перееданием на животных. Int J Eat Disord. 2003; 34: 183-197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Нейротоксические поражения базолатеральных, но не центральных миндалевидных желез влияют на эффекты кондиционирования и девальвации усилителя Павлова второго порядка. J Neurosci. 1996; 16: 5256-5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Острая абстиненция, длительное воздержание и негативные последствия при алкоголизме: связаны ли они. Наркоман Биол. 2010; 15: 169-184. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Хейлиг М, Кооб Г.Ф. Ключевая роль кортикотропин-рилизинг-фактора в алкогольной зависимости. Тенденции Neurosci. 2007; 30: 399-406. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Подавление фактора, снижающего кортикотропин в амигдале, ослабляет аверсальные последствия отмены морфина. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74-80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, et al. Отказ от хронического прерывистого доступа к очень вкусной пище вызывает депрессивное поведение у крыс с компульсивным поеданием. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593-602. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Роль систем стресса мозга в зависимости. Neuron. 2008; 59: 11-34. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Кооб Г.Ф. Нейробиологические субстраты для темной стороны принудительности в зависимости. Нейрофармакология. 2009; 56 (Доп. 1: 18 – 31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Роль CRF и связанных с CRF пептидов в темной стороне зависимости. Brain Res. 2010; 1314: 3-14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Кооб Г.Ф., Хайнрихс С.К. Роль рилизинг-фактора кортикотропина и урокортина в поведенческих реакциях на стрессоры. Brain Res. 1999; 848: 141-152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Пластичность вознаграждения нейросхемой и «темной стороной» наркомании. Nat Neurosci. 2005; 8: 1442-1444. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Обзор. Нейробиологические механизмы для мотивационных процессов противника в зависимости. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113-3123. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Кооб Г.Ф., Волков Н.Д. Нейроциркуляция наркомании. Neuropsychopharmacology. 2010; 35: 217-238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Логрип М.Л., Кооб Г.Ф., Зоррилла Е.П. Роль кортикотропин-рилизинг-фактора в наркомании: потенциал для фармакологического вмешательства. ЦНС Наркотики. 2011; 25: 271-287. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Влияние морфина и кокаина на биосинтез CRF в центральном ядре крысы миндалины. Neuropeptides. 2003; 37: 105-110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. Роль кортикотропин-рилизинг-гормона в миндалине и ядре кровати stria Terminalis в поведенческих, болевых и эндокринных последствиях отмены опиатов. Neuroscience. 2002; 112: 605-617. [PubMed]
  • Мерло Пич Е., Лоранг М., Еганех М., Родригес де Фонсека Ф., Рабер Д., Кооб Г.Ф. и др. Повышение уровней иммунореактивности, подобной внеклеточному кортикотропин-рилизинг-фактору, в миндалине бодрствующих крыс во время стресса сдерживания и отмены этанола, как измерено микродиализом. J Neurosci. 1995; 15: 5439-5447. [PubMed]
  • Мюррей E, Wise S, Rhodes S. 2011Что могут делать разные мозги с наградой In Готфрид Дж. А. (ред.). Нейробиология ощущений и вознаграждений, глава 4 CRC Press: Бока-Ратон, Флорида, США [PubMed]
  • Парылак С.Л., Кооб Г.Ф., Зоррилла Е.П. Темная сторона пищевой зависимости. Physiol Behav. 2011; 104: 149-156. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007Мозг крысы в ​​стереотаксических координатах6th edn.Academic Press
  • Пеллегрино А. Стереотаксический атлас мозга крысы. Пленум: Нью-Йорк; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Активация фактора, снижающего кортикотропин в лимбической системе при удалении каннабиноида. Наука. 1997; 276: 2050-2054. [PubMed]
  • Сабино V, Коттон П, Стеардо Л, Шмидхаммер Н, Зоррилла ЕР. 14-метоксиметопон, высокоэффективный му-опиоидный агонист, оказывает двухфазное влияние на потребление этанола у сардинских крыс, предпочитающих алкоголь. Психофармакология (Берл) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
  • Салинас JA, Родитель MB, McGaugh JL. Поражения иботеновой кислотой базолатерального комплекса миндалины или центрального ядра по-разному влияют на реакцию на уменьшение вознаграждения. Brain Res. 1996; 742: 283-293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. Роль CRF и других нейропептидов в восстановлении наркотиков, вызванных стрессом. Brain Res. 2010; 1314: 15-28. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Характеристика пептида гипоталамуса овцы с остатком 41, который стимулирует секрецию кортикотропина и бета-эндорфина. Наука. 1981; 213: 1394-1397. [PubMed]
  • Волков Н.Д., О'Брайен С.П. Вопросы для DSM-V: следует ли включать ожирение как нарушение мозга. Am J Psychiatry. 2007. 164: 708–710. [PubMed]
  • Веллман Л.Л., Гейл К., Малкова Л. ГАМК-опосредованное ингибирование базолатеральной миндалины блокирует снижение вознаграждения у макак. J Neurosci. 2005; 25: 4577-4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Эпидемиологические и экономические последствия глобальных эпидемий ожирения и диабета. Nat Med. 2006; 12: 62-66. [PubMed]