Передняя психиатрии, 2017; 8: 230.
Опубликован онлайн 2017 Ноябрь 13. DOI: 10.3389 / fpsyt.2017.00230
PMCID: PMC5693873
Ри Ленер,1,2,* Джошуа Х. Балстерс,1,3 Александра Бюрглер,1 Тодд А. Хэйр,2,4 и Николь Вендерот1,2,5
Абстрактные
Было показано, что люди с ожирением проявляют аномальную чувствительность к сигналам вознаграждения и предсказания вознаграждения, как, например, сигналы, связанные с едой, которые часто используются в рекламе. Также было показано, что связанные с пищей сигналы могут усиливать целенаправленное поведение, но в настоящее время неизвестно, отличается ли этот эффект у людей с нормальным весом, избыточным весом и ожирением. Здесь мы исследуем этот вопрос, используя задачу перехода от Павлова к инструменту (PIT) в нормальном весе (N = 20), избыточный вес (N = 17) и ожирением (N = 17) лиц. Кроме того, мы применили отслеживание взгляда во время тренировки по Павлову, чтобы измерить условную реакцию участников как показатель значимости стимула предсказанной награды. Наши результаты показывают, что целенаправленное поведение людей с избыточной массой тела в большей степени зависело от прогнозов питания (т. Е. Более сильного эффекта PIT), чем у людей с нормальным весом и людей с ожирением (p <0.001). Весовые группы были сопоставлены по возрасту, полу, образованию и уровню образования родителей. Движения глаз во время Павловской подготовки также различались в зависимости от весовых категорий (p <0.05) и использовались для классификации людей на основе их стиля фиксации на «высокий глазной индекс» по сравнению с «низким глазным индексом». Наш главный вывод заключался в том, что стиль фиксации показал сложное взаимодействие с весовой категорией. Кроме того, мы обнаружили, что люди с нормальным весом из группы «высокий глазной индекс» имели более высокий индекс массы тела в пределах здорового диапазона, чем люди из группы «низкий глазной индекс» (p <0.001), но эта взаимосвязь не была обнаружена в группах с избыточным весом или ожирением (p > 0.646). Наши результаты во многом согласуются с теорией стимулирования сенсибилизации, согласно которой люди с избыточным весом более восприимчивы к сигналам, связанным с едой, чем контрольные люди с нормальным весом. Однако эта гиперчувствительность может уменьшаться у людей с ожирением, возможно, из-за привычного / компульсивного переедания или различий в оценке вознаграждения.
Введение
Увеличение числа людей с избыточным весом или ожирением во всем мире создает большое медицинское и психосоциальное бремя (1–4), особенно потому, что это состояние связано с рядом сопутствующих заболеваний, таких как сердечно-сосудистые заболевания, которые известны как ведущая причина смерти в мире (2, 4).
Один из факторов, который был предположительно влиять на принятие решений в контексте поведения и энергетического баланса (5, 6) является расширенный маркетинг продуктов питания (7–10) создание так называемой «ожиренной» среды, то есть клиенты окружены множеством сенсорных сигналов, связанных с едой, которые постоянно напоминают им о еде или напитках, как, например, изображения упаковки продуктов питания на вокзалах, рекламные ролики кока-колы по телевизору или два фильма. арки знака Макдональдса перед каждым магазином.
Недавние исследования на людях показали, что сигналы, связанные с едой, влияют на поведение, даже когда они пресыщаются или когда награды больше не доступны (11–14). Первоначальное поведение, направленное на получение вознаграждения, которое контролируется пищей, может привести к привычному и в конечном итоге компульсивному перееданию, как предполагает теория побудительной сенсибилизации (15–21). Теория подразумевает, что на первом этапе мотивационная ценность направлена на само вознаграждение, а на втором этапе - на подсказки и объекты, связанные с вознаграждением, превращая их в привлекательные стимулы (20). У животных этот процесс может быть измерен с помощью павловского условного подхода / реакции, т. Е. Когда животные начинают нюхать, лизать или кусать рычаг или поднос с едой, что предсказывает доставку вознаграждения (22–24). Такие подсказки могут затем стать мотиваторами и сами послужить подкреплением, ведущим к сильному поведению, стремящемуся к награде (15, 25, 26). Тем не менее, в настоящее время спорным обсуждаются, распространяется ли эта модель, разработанная в контексте наркомании также к ожирению (6, 19, 20, 27–31). Предыдущие исследования показали аномальную чувствительность к вознаграждениям и прогнозирующие награды сигналы у людей с ожирением (32–38) но не проверял, модулирует ли это целенаправленное поведение. Здесь мы решаем этот вопрос и исследуем, влияют ли сигналы предсказания пищи на целенаправленное поведение людей с нормальным весом, избыточным весом и ожирением. Мы использовали передачу Павлова-инструментального (PIT) [для обзора, см. Ref. (26)] для измерения влияния связанных с едой сигналов на целенаправленное поведение. Явление PIT широко исследовалось у обоих животных [см. Обзор. (25)] и люди (11–13, 26, 39–57), что делает эту парадигму полезной для трансляционных исследований.
Кроме того, мы использовали отслеживание глаз во время обусловленности Павлова как показатель стимулирующей значимости прогнозируемой награды, что может объяснить потенциальные индивидуальные различия. Несколько исследований на грызунах показали, что существуют значительные индивидуальные различия, когда оценивается степень, в которой люди приписывают мотивацию сигналам, предсказывающим награду (22, 23, 58–62). Тем не менее, в настоящее время неясно, как эти результаты исследований на животных переводят на людей, так как только два доступных исследования (49, 63) существенно отличались в том, как были определены и определены условные ответы.
Материалы и методы
Участниками
В целом, добровольцы 64 были набраны для этого исследования «случай-контроль». Использовались следующие стратегии набора персонала: объявления фонда Swiss Adiposity и реклама в местных клиниках, группах самопомощи, магазинах одежды больших размеров и на веб-сайте университета. Участники были включены, когда они соответствовали следующим критериям: возраст 18 – 65, говорящие на немецком языке, нормальное или скорректированное зрение с контактными линзами и отсутствие пищевой аллергии на какой-либо ингредиент четырех продуктов, используемых в эксперименте (то есть мальтезеры). шоколад, липкие медведи Haribo, крекеры TUC и чипсы Zweifel).
Участники с диагнозом какого-либо психологического или неврологического заболевания, злоупотребления наркотиками в прошлом, глазных проблем или приема психиатрических или нейролептических препаратов в течение последних месяцев 6 были исключены (т.е. три участника). Пять дополнительных участников были исключены, потому что они не смогли изучить инструментальные и / или павловские ассоциации. Мы использовали классификацию индекса массы тела (ИМТ) согласно Всемирной организации здравоохранения (64), чтобы различать нормальный вес (ИМТ <25 кг / м2), избыточный вес (25 кг / м2 ≥ ИМТ <30 кг / м2) и лиц с ожирением (ИМТ ≥ 30 кг / м2). ИМТ рассчитывали путем деления веса человека (килограммы) на квадрат роста человека (в метрах). Вес измеряли по плоской шкале (Seca 635, Seca, Гамбург, Германия) и по высоте с помощью механического телескопического измерительного стержня (Seca 222, Seca, Гамбург, Германия). Чтобы принять во внимание, что высокий ИМТ может возникнуть из-за высокой мышечной массы, участников с ИМТ ≥ 25 попросили оценить, было ли это связано с увеличением мышечной или жировой массы. Выбор варианта мышечной массы привел к исключению (то есть двух участников). Окончательная выборка включала пятьдесят четыре участника (средний возраст = 31 ± 10 лет, среднее значение ± SD, самый старый участник = 55 лет, 55.6% женщина). Хотя возрастной диапазон нашей выборки был широким, изменения в стратегии выживания и сопутствующих заболеваниях в течение жизни не должны смешивать наши результаты из-за сопоставления групп. Случаи и контрольные случаи были сопоставимы по возрасту, полу, образованию и родительскому воспитанию. Окончательные характеристики образца приведены в таблице. Table11.
Все субъекты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. Протокол был одобрен Комитетом по этике кантона Цюрих. Участникам выплачивали швейцарские франки 20 в час и перекус (то есть пакет с выбранной едой и яблоком).
Косвенные меры для жира в организме: ИМТ и окружность талии
Переедание высококалорийной и вкусной пищи в основном приводит к накоплению висцерального жира (65), что отражается в измерениях окружности талии (см. таблицу Table1) .1). Окружность талии измеряли по приблизительной средней линии между вершиной кости таза и нижним краем наиболее хвостового пальпируемого разрыва. Его измеряли, держа измерительную ленту горизонтально на полу (64, 66).
Анкетирование
Все участники заполнили ряд анкет на немецком языке (см. Таблицу Table1) .1). Были получены следующие личные данные: пол, дата рождения, образование участника, а также образование родителей. Участники заполнили стандартную анкету (67) определить доминирующую руку для нажатия кнопок во время выполнения заданий.
Мы включили показатель самоотчетов по импульсивности с помощью короткой версии 15-шкалы импульсивности Барратта [BIS; (68–70)]. BIS имеет хорошую внутреннюю согласованность и надежность повторного тестирования (71). Он различает три подшкалы импульсивности: непланируемая, двигательная и концентрационная импульсивность.
Мы измерили симптомы депрессии, о которых сообщали сами, с помощью версии 21, описанной в описи депрессии Бека [BDI-II; (72–74)]. BDI-II демонстрирует высокую внутреннюю согласованность и надежность тестирования и повторного тестирования (74).
Кроме того, была оценена предпочтительная закуска из четырех различных вариантов. Были использованы четыре вкусные высококалорийные закуски, потому что ранее было показано, что эффект PIT был сильнее для этих пищевых продуктов (14). Наш выбор включал два сладких, кусочки шоколада и липких медведей, и два несладких, крекеры и чипсы. На первом этапе участники должны были оценить их в соответствии с тем, насколько они им понравились (1 = мне нравится больше всего, 4 = мне нравится меньше всего). На втором этапе визуальная аналоговая шкала использовалась для количественной оценки того, насколько им понравился их первый выбор. Картина выбора участника была впоследствии использована в качестве награды / результата в эксперименте PIT.
После выполнения инструментальной задачи и задачи Павлова участники ответили на вопрос, чтобы проверить правильность ассоциаций (т. Е. Ответ-результат в инструментальной обусловленности, стимул-результат в павловской обусловленности). В конце фазы обучения участники оценивали, как они воспринимают нейтральный результат по визуальной аналоговой шкале (0 = нейтральный, 10 = наказание).
Не было никаких существенных различий между весовыми группами по импульсивности, симптомам депрессии, вкусу пищи и восприятию нейтрального результата между тремя весовыми группами (тест ANOVA / Kruskal-Wallis, таблица Table11).
Поведенческий эксперимент
Экспериментальная установка
Экспериментальная установка состояла из устройства отслеживания движения глаз с соответствующим монитором (Tobii TX300 Eye Tracker, Tobii Technology, Стокгольм, Швеция), изготовленной на заказ подставкой для подбородка и компьютером (HP EliteDesk 800 G1, ПК малого форм-фактора, HP Inc., HP Inc., Пало-Альто, Калифорния, США).
Мы использовали два серых шкала фракталов в качестве стимулов во время задания условий Павлова и PIT, которые были сопоставлены по яркости и сложности (75). Кроме того, мы использовали изображения шоколада Maltesers, липких медведей Haribo, крекеров TUC и чипсов Zweifel на черном фоне в качестве подкрепляющего пищевого эффекта во время инструментального и павловского кондиционирования (рисунок (Figure1) .1). В качестве подкрепляющего результата в последующих заданиях использовался только любимый выбор блюд участника. Обратите внимание, что участники были проинструктированы, что эти изображения представляли реальные пищевые награды, которые были собраны в течение всего эксперимента и получены в конце. Соответствующие сигналы нейтрального исхода имели форму и цвет, сходные с исходным продуктом (т. Е. Желтый овал для чипсов), но без полезного свойства. Учитывая, что визуальные свойства результатов были сопоставлены, различия в движениях глаз можно сузить до полезных свойств конечного продукта.
Общая процедура
Мы использовали стандартную парадигму PIT [для обзора см. Ref. (26)], состоящий из трех задач: инструментальная задача подготовки (т.е. были изучены ассоциации «ответ-результат»), Павловская задача подготовки (то есть, ассоциации «стимул-результат») и, наконец, тест PIT. Эксперимент был запрограммирован в Matlab (версия R2013b, The Mathworks Inc., Natick, MA, USA) с помощью Psychtoolbox [версия 3; (76)].
Участникам было предложено воздерживаться от приема пищи в течение 4 за час до эксперимента, чтобы повысить стимулирующую ценность пищи и реплики, связанной с едой (60). Эксперимент проводился между 8 am и 7.30 pm в зависимости от лаборатории, экспериментатора и наличия участников. Контрольный анализ не выявил влияния времени тестирования на ЯМ (r = −0.08, p = 0.550), весовые группы не различались по времени тестирования (ANOVA, p = 0.208). Обратите внимание, что мы не контролировали количество или качество сна в ночь, предшествующую экспериментальному дню, что может изменить стимулирующую ценность еды (77) и выполнение по визуальным и познавательным задачам (78, 79). Кроме того, мы не собирали данные о фазе менструального цикла и, следовательно, не можем оценить или контролировать влияние менструальной фазы на наши показатели интереса. Было показано, что концентрации циркулирующего эстрадиола влияют на потребление энергии (80) и может снизить потребление пищи за счет снижения нервной активности по отношению к сигналам пищи в зрительных корковых путях, связанных с вознаграждением (80, 81).
Участники получили общие устные инструкции перед экспериментом. Перед каждым заданием одна из двух женщин-экспериментаторов показала три-четыре примера испытаний, чтобы исключить недопонимание. Во время заданий участники должны были расположить подбородок на опоре для подбородка. Они были проинструктированы смотреть на экран в течение всего эксперимента, чтобы поддерживать устойчивое положение головы и моргать как можно меньше. Важно отметить, что им сказали, что они получат все пищевые результаты, собранные во время всего эксперимента PIT после эксперимента. Следовательно, участники не знали точно, сколько наград они получили в инструментальном и павловском задании, что снижает возможный эффект насыщения. Свет был выключен в течение всего эксперимента, чтобы улучшить качество слежения за глазами и поддерживать постоянные условия для всех трех задач эксперимента PIT.
Инструментальная задача кондиционирования
Цель этой задачи состояла в том, чтобы участники узнали ассоциации «ответ - результат» (рисунок (Figure1A) .1А). Участник мог свободно выбирать между двумя вариантами ответа (левым или правым), используя свою доминирующую руку, чтобы сделать стрелку влево или клавишу со стрелкой вправо. Один из этих ключей был назначен на еду (например, хрустящий), другой - на нейтральный результат, который имел форму и цвет, сходный с пищей (т.е. желтый овал). Ответ, который привел к вознаграждению, назывался «вознаграждением с ответом», другой - «нейтральным ответом». После ответа вознаграждение или нейтральный результат показывались для 1 в верхнем или нижнем квадрате в зависимости от рандомизации. Частичное расписание подкрепления использовалось с переменным интервалом времени между 4 и 12 с (интервал 4 / 12 с). Это означает, что после вознагражденного ответа, за которым следует вознагражденный результат, последующие вознагражденные ответы за период задержки 4 – 12 привели к нейтральному результату. Эта задача длилась 6 мин. Участников попросили собрать как можно больше наград и запомнить, какой ключ был связан с наградой. Участникам сказали, что не каждый «вознагражденный ответ» приведет к вознаграждению (т. Е. Осведомленность о графике частичного подкрепления). Непосредственно после выполнения задания участники были протестированы на ассоциации «ответ-результат». В среднем, только 20% всех ответов были вознаграждены.
Павловская задача кондиционирования
Цель этой задачи состояла в том, чтобы изучить ассоциации «сигнал-результат» (рисунок (Figure1B) .1Б). Для измерения движений глаз использовали оптический трекер для глаз (Tobii TX300 Eye Tracker, Tobii Technology, Стокгольм, Швеция). Движения глаз были записаны при 60 Гц, чтобы проанализировать количество времени, проведенного в двух областях, представляющих интерес. Интересующие области были определены как верхний и нижний квадрат (8.4 см2), где были представлены кий и результат. Движения глаз в этих двух областях, представляющих интерес (т. Е. Верхний и нижний квадрат), были взяты в качестве меры для условного ответа, который возникает во время задачи Павлова об кондиционировании (49). Этот условный ответ был позже использован для классификации участников на трекеры и знаки. Случайно одна из двух возможных подсказок отображалась либо в верхней, либо в нижней части экрана для 1. Один сигнал был связан с вознаграждением за еду, который назывался «вознагражденный сигнал», а другой - с нейтральным исходом, который назывался «нейтральный сигнал». Связи «сигнал-результат» были уравновешены между участниками. Результаты были представлены в том же квадрате, что и во время инструментального кондиционирования, а сигналы были представлены в противоположном квадрате. После представления стимула появился нейтральный экран с четырьмя пустыми квадратами. Движения глаз были записаны во время показа кия и нейтрального экрана. Этот нейтральный экран был использован, потому что в противном случае движения глаз естественным образом смещены в сторону видимых сигналов. Презентация нейтрального экрана дрожала между 2.5 и 3.5. После дрожания награда или нейтральный результат, зависящий от представленной реплики, отображался для 1. За вознагражденным сигналом последовало вознаграждение в 80% испытаний и нейтральный результат в 20% испытаний, тогда как нейтральный результат всегда был последующим после нейтрального сигнала (100%). Участнику было сказано запомнить непредвиденные обстоятельства. Был интервал между испытаниями (ITI) продолжительностью 3.6 – 4 с. ITI (среднее значение = 3.8 с) было специально выбрано, чтобы быть длиннее, чем дрожание (среднее = 3 с), чтобы обеспечить близкую временную близость сигнала к условному результату. Было выполнено 30 испытаний на условие, и вся задача заняла около 8 мин. В общей сложности за эту задачу были получены награды 24.
PIT Test
Целью этой задачи было измерить влияние ранее изученных ассоциаций на поведение ответа (рисунок (Figure1C) .1С). Во время теста PIT был представлен ответный ответ задачи инструментального кондиционирования вместе с сигналами из кондиционирования Павлова. В блоках 30 s вознагражденный и нейтральный сигнал были случайным образом отображены в квадрате, соответствующем тому, который использовался во время кондиционирования Павлова. Опять же, здесь участники были свободны сделать столько ответов своей доминирующей рукой, сколько они хотели. Тест был выполнен при номинальном угасании, что означает, что их ответ не привел к какому-либо отображаемому результату, но участники были проинструктированы, что награды были посчитаны на заднем плане. Участникам явно не было сказано собрать как можно больше наград или не обращать внимания ни на то, чтобы игнорировать павловские реплики. Задание длилось 6 мин, каждая реплика была показана для 30 и шесть раз.
Анализ
Отслеживание данных
Отслеживание глаз первой секунды каждого испытания (т. Е. Во время представления сигнала) было отброшено, потому что все участники зафиксировали сигнал. Из остатка вычислялась переменная «глазной индекс» для каждого участника, каждого сигнала (вознагражденного или нейтрального) и для шести корзин из пяти испытаний задачи «Павловская обусловленность». Мы рассматривали только периоды фиксации, превышающие 116 мс, как предлагалось в предыдущей литературе (49). Индекс глаза рассчитывался как время на локации вознаграждения в процентах от общего времени, потраченного на локацию награды и метки (т. Е. Верхний и нижний квадрат):
Несмотря на то, что большинство участников тратили больше времени на локацию вознаграждения, были отдельные различия в том, как долго участники смотрели на локацию подсказки. Таким образом, «стиль фиксации» был выведен для каждого участника на основе медианного разделения глазного индекса на основе данных из второй половины (испытания 16 – 30) условия вознаграждения. Мы использовали вторую половину данных, потому что обучение на случай непредвиденных обстоятельств было стабильным на более поздних этапах экспериментов по кондиционированию в Павлове (49). Лица группы «низкий индекс глаза» смотрели относительно долго в месте расположения кия, чем люди из группы «высокий индекс глаза».
Поведенческие данные
«Эффект PIT» определяется как взаимодействие между «условием» и «ответом», т. Е. Когда участники дают больше вознаграждений, чем нейтральных, во время представления сигнала прогнозирования вознаграждения и наоборот для нейтрального кия. Чем выше эффект PIT, тем сильнее влияние сигнала Павлова на целенаправленное поведение.
Показатели
Данные были проанализированы с использованием моделей смешанных эффектов в SPSS 23 (IBM Corp., Armonk, NY, USA). Модели со смешанными эффектами более устойчивы к ненормальным распределенным данным и лучше подходят для повторных измерений, чем обычные ANOVA (82, 83). В зависимости от анализа состояние и время или состояние и ответ моделировались как фиксированные эффекты, а субъекты всегда моделировались как случайный эффект. Мы использовали составную симметричную ковариационную структуру, которая предполагает почти одинаковую дисперсию и ковариацию по факторам и, следовательно, хорошо подходит для повторных измерений (84). На основании предыдущей литературы (49, 52, 85–87), мы добавили импульсивность и депрессию как ковариаты, не представляющие интереса для нашей статистической модели ЯМ. Бонферроните коррекцию Постфактум Тесты применялись, если был обнаружен значительный основной эффект линейных моделей смешанных эффектов. Мы сообщаем о Коэне d в качестве меры для размера эффекта (маленький d = 0.20–0.49, средний d = 0.50–0.80, большой d > 0.80) (88).
Итоги
Инструментальное задание
Участники (N = 54) выбирали ответ с вознаграждением значительно чаще, чем нейтральный ответ, что указывает на то, что они успешно усвоили связи между ответом и результатом (рис. (Figure2A; 2A; Таблица Table2) .2). Этот эффект обучения можно считать сильным (p <0.001, d = 2.9). Весовая категория не оказала существенного влияния на количество поощренных и нейтральных или на общее количество ответов при инструментальном кондиционировании (таблица (Table2) .2). Нейтральные нажатия клавиш участников по-прежнему составляют примерно 25% от всех ответов, что, вероятно, связано с графиком частичного подкрепления, применяемым во время инструментального задания.
Павловская задача кондиционирования
Наш анализ движений глаз показал, что все участники (N = 54) успешно научились ассоциациям «стимул – результат» во время Павловской обусловленности. В частности, мы проанализировали движения глаз участников после появления стимула до того, как был отображен результат (т. Е. Во время нейтрального экрана, см. Рис. Figure11Б).
Индекс глаза был проанализирован в подборках из пяти испытаний, чтобы захватить эффекты обучения для вознагражденного и нейтрального состояния (рисунок (Figure2B) 2Б) и каждой весовой категории (рисунки (Figures2C-Е; 2С-Е; Таблица Table3) .3). Условие вознаграждения показало значительно более высокий глазной индекс, чем нейтральное состояние (p <0.001, d = 0.41, рисунок Figure2B) .2Б). Этот вывод указывает на то, что для условия вознаграждения и на протяжении всей задачи подготовки участники тратили больше времени на фиксацию вознаграждения, чем на местоположение подсказки. Это отличалось от нейтрального условия, в котором участники тратили относительно больше времени на фиксацию местоположения кия.
Мы обнаружили значительное взаимодействие между состоянием, временем и весовой категорией (p <0.05, цифры Figures2C-Е; 2С-Е; Таблица Table3) .3). Этот эффект был обусловлен особенностями фиксации по состоянию и времени в каждой из трех весовых групп. Участники с нормальным весом последовательно зацикливались на месте вознаграждения для вознагражденных сигналов и месте расположения для нейтральных сигналов после первого временного интервала. Напротив, участники с избыточным весом зацикливались, в основном, на месте вознаграждения, независимо от того, видели ли они вознагражденный или нейтральный сигнал, и эта схема фиксации была стабильной во времени. Тучные участники продемонстрировали еще один паттерн фиксации в том, что они сразу же одобрили расположение вознаграждения за вознагражденные подсказки и первоначально одобрили местоположение подсказки в нейтральных испытаниях. Однако во второй половине испытаний субъекты с ожирением переключились на предпочтительное место для нейтральных сигналов.
В контрольном анализе мы проанализировали процент времени, потраченного участниками на просмотр других областей, отличных от определенной области интереса (т. Е. Верхнего и нижнего квадратов), для первой и второй половины испытаний в каждом условии (таблица (Table4) .4). Участники провели немного больше времени за пределами области интереса после нейтральной по сравнению с поощряемым стимулом (награда = 19.13 ± 15.58, нейтральная = 22.85 ± 15.72, p <0.001, d = -0.24). Кроме того, во второй половине эксперимента участники проводили немного больше времени за пределами интересующей области по сравнению с первой половиной эксперимента (первая = 19.85 ± 15.20, вторая = 22.13 ± 16.23, p <0.05, d = -0.15). Кроме того, процент времени, в течение которого движения глаз невозможно было отследить, например, из-за моргания или отсутствия фокусировки на экране (т. Е. Отсутствующие значения), значительно изменился с течением времени (первый = 7.58 ± 11.39, второй = 10.79 ± 14.66, d = −0.24, p <0.001), а после нейтральной реплики она была немного выше (награда = 8.60 ± 12.58, нейтральная = 9.76 ± 13.82, p = 0.090) (Таблица (Table4) .4). Приблизительно 9% данных отслеживания глаз было исключено из анализа. Важно отметить, что весовая категория не оказала существенного влияния на время, проведенное за пределами целевых областей, или на пропущенные значения, когда отслеживание глаз не удалось.
PIT Задача
Чтобы проверить эффект PIT и возможные различия между весовыми категориями и стилем фиксации, измеренными во время кондиционирования по Павлову, мы добавили эти факторы как факторы между субъектами в линейную модель смешанных эффектов. Весовые категории были сформированы на основе ИМТ и стиля фиксации на основе медианного разделения на условный ответ глаза на вознагражденный сигнал во второй половине павловской обусловленности (см. Анализ, для более подробной информации). Кроме того, мы добавили суммарные показатели импульсивности (BIS) и депрессии (BDI) в качестве ковариат, не представляющих интереса для нашей статистической модели PIT. Это было основано на предыдущей литературе, которая показала, что на эффект PIT может влиять депрессия и что условный ответ связан с импульсивностью (49, 52, 85–87).
Мы обнаружили, что эффект PIT таков, что участники выбирали вознагражденный ответ чаще, чем нейтральный ответ, когда отображался вознагражденный сигнал, и наоборот, для нейтрального сигнала. Сила эффекта PIT была модулирована в зависимости от статуса веса участника, на что указывает значительный эффект УСЛОВИЕ * ОТВЕТ ТИПА * ВЕСОВАЯ КАТЕГОРИЯ (p <0.001, таблицы Tables55 и and6; 6; фигура Figure3) .3). Этот эффект отражает, что эффект ЯМ был самым сильным у людей с избыточным весом (Figure3B, 3B, pСОСТОЯНИЕ * ОТВЕТ НА ВЕСЕ <0.001), которые были очень чувствительны к присутствию вознагражденного сигнала (вызывая явное предпочтение для выбора вознагражденного ключа). Эффект PIT у участников с нормальным весом и ожирением также присутствовал, но явно меньше (pСОСТОЯНИЕ * ОТВЕТ В НОРМАЛЬНОМ ВЕСЕ <0.001, pСостояние * Ответ в ожирении <0.025). Участники нажимали нейтральную клавишу также во время награжденного представления реплики, предположительно из-за графика частичного подкрепления, используемого в инструментальной задаче кондиционирования.
Мы также сообщили о значительном основном эффекте ВЕСОВОЙ КАТЕГОРИИ (pВЕСОВАЯ КАТЕГОРИЯ <0.05, таблица Table5) .5). Однако различия в общем количестве ответов между весовыми категориями были в очень небольшом диапазоне (нормальный вес = 57 ± 38, избыточный вес = 55 ± 41, ожирение = 54 ± 32). Поэтому мы не считаем, что это представляет собой общую разницу в мотивации для выполнения задачи.
Затем мы проверили связь между поведением условного ответа, измеренным во время обусловленности Павлова (т. Е. Стилем фиксации), и эффектом PIT. Таким образом, мы определили две группы «низкий индекс глаза» (т.е. лица, которые преимущественно фиксировали местоположение кия) по сравнению с «высоким индексом глаза» (то есть лица, которые преимущественно зафиксировали местоположение награды), которые были аналогичным образом распределены по весовым категориям (рисунок (Figure4A) .4А). Статистика показала, что эффект PIT модулируется стилем фиксации, но этот эффект модуляции дополнительно зависит от весовой категории (четырехстороннее взаимодействие СОСТОЯНИЕ * ТИП ОТВЕТА * КАТЕГОРИЯ ВЕСА * СТИЛЬ ФИКСАЦИИ, таблица Table6; 6; фигуры Figures4B-Д) .4Б-Д). В обоих нормальных весах (рисунок (Figure4B) 4Б) и тучных групп (рисунок (Figure4C), 4C) лица, демонстрирующие высокий индекс глаз, демонстрируют более сильный эффект PIT, вызванный сигналами вознаграждения, чем люди, демонстрирующие низкий индекс глаз. Напротив, у участников с избыточной массой тела эта диссоциация отсутствовала, т.е. мы наблюдали высокий эффект PIT независимо от того, проявлялись ли у индивидуумов склонности к низкому или высокому индексу глаза во время кондиционирования. Интересно, что люди с ожирением с высоким индексом глаз (рисунок (Figure4D) 4D) были не только чувствительны к наградному кию, но и в значительной степени нечувствительный к нейтральному сигналу, так как они выбрали конгруэнтный и неконгруэнтный ключ с почти равной вероятностью для этого последнего условия.
Наконец, мы проверили, существует ли связь между стилем фиксации, наблюдаемым во время кондиционирования по Павлову, и ИМТ, запустив отдельные модели со смешанным эффектом в каждой из весовых групп. Неожиданно мы обнаружили, что у людей с нормальным весом в группе с «высоким индексом глаза» наблюдался повышенный ИМТ в пределах здорового диапазона (d = 1.7, p <0.001, рисунок Figure4E) .4E). Этот эффект был удивительно сильным и не был обнаружен у людей с избыточным весом или ожирением (p > 0.646).
Обсуждение
Здесь мы проверили, является ли чувствительность к вознаграждениям и сигналам, предсказывающим вознаграждение, ненормальной у лиц с избыточной массой тела и ожирением по сравнению с контрольной группой с нормальным весом, и могут ли такие различия в чувствительности вознаграждения модулировать целенаправленное поведение. Мы рассмотрели этот вопрос с помощью эксперимента PIT и исследовали, влияют ли сигналы предсказания пищи на целенаправленное поведение людей с нормальным весом, избыточным весом и ожирением. Кроме того, мы применили отслеживание глаз во время обусловленности Павлова как показатель стимулирующей значимости прогнозируемой награды. Наши результаты предполагают, что контролируемое поведение может быть изменено у людей с избыточным весом и ожирением, как более подробно обсуждается ниже.
Участники с избыточным весом демонстрируют более высокий эффект PIT, чем люди с нормальным весом или ожирением
Участники с избыточной массой тела показали самый сильный эффект PIT по сравнению с субъектами с нормальной массой тела и ожирением (см. PIT ЗадачаЦифры Figures3A-С) .3А-С). Этот вывод расширяет предыдущие наблюдения о том, что взрослые с избыточным весом и ожирением демонстрировали повышенную реактивность к пищевым стимулам во время пассивного наблюдения за стимулами, задачи зрительного точечного зонда, различных версий задачи Stroop или в анкетах (37, 87, 89). Эти исследования позволили количественно определить реактивность пищевого кия путем измерения времени реакции, длительности отслеживания и отклонения глаз, диаметра зрачка, электроэнцефалографии и функциональной магнитно-резонансной томографии (37). Отслеживание глаз, в частности, выявило длительность, ориентирующуюся на метки пищи и уменьшение диаметра зрачка [маркер норадренергического увеличения и повышенного вовлечения внимания (90, 91)] к высококалорийным продуктам у лиц с избыточным весом и ожирением (92–94). Наши результаты расширяют эти предыдущие отчеты, показывая, что на целенаправленное поведение у людей с избыточным весом сильно влияют сигналы, связанные с пищевым вознаграждением, как проверено парадигмой PIT, в то время как влияние нейтральных сигналов было аналогично группе с нормальным весом. Интересно, что подобного специфичного для вознаграждения эффекта PIT не наблюдалось для группы людей с ожирением. Обратите внимание, что не было никаких групповых различий в еде. Несмотря на то, что этот результат у людей с ожирением на первый взгляд вызывает недоумение, он соответствует недавнему исследованию, которое также показало, что люди с ожирением имели эффект ЯМ, сопоставимый с субъектами с нормальным весом (57). Однако Watson et al. (57) показал повышенный эффект PIT для высококалорийных и низкокалорийных продуктов, который был обнаружен только у субъектов с ожирением (57). Одно из возможных объяснений того, что эффект PIT одинаков у тучных и здоровых людей, заключается в том, что привычное потребление плотных диет может вызвать навязчивый стиль питания, нечувствительный к воздействиям окружающей среды (см. Физиологический механизм и открытые вопросы).
Взятые вместе, наш вывод о том, что мотивация, вызванная связанными с вознаграждением сигналами, увеличивается у людей с избыточным весом, соответствует стимулирующей теории сенсибилизации зависимости (15–21). Теория склонности к стимулирующей сенсибилизации предсказывает смещение внимания к сигналам, связанным с вознаграждением, что соответствует результатам нашего движения глаз во время обусловленности Павлова, и патологическое побуждение к вознаграждениям и сигналам, связанным с вознаграждением (то есть, компульсивное «желание») (17, 20). Патологическая мотивация к сигналам пищи и предсказания пищи была в настоящем исследовании, продемонстрированном увеличенным эффектом PIT у людей с избыточным весом. Некоторые исследования на людях, исследующие влияние сигналов Павлова на инструментальную реакцию при зависимости от вещества, также показали усиление эффекта PIT у наркоманов по сравнению с контрольной группой (48, 57, 95). Тем не менее, есть некоторые доказательства отсутствия связи между ЯМ и зависимостью от веществ в других исследованиях (11, 42, 43, 50, 56, 96).
Тем не менее, наши данные также указывают на то, что как только будет достигнут статус ожирения, стимулирующая сенсибилизация может вернуться к нормальному уровню. Заманчиво предположить, что гиперчувствительность может быть снижена у людей с ожирением из-за привычного / компульсивного переедания (97, 98), но это не было непосредственно проверено в настоящем исследовании. Также возможно, что люди, страдающие ожирением, могут обращать меньше внимания на небольшие вознаграждения за еду (как здесь используется) и / или их предпочтения могут быть перенесены на стимулы с большей субъективной ценностью (например, более приемлемые и богатые калориями награды), что было показано значительно влиять на ЯМ (53). Мы не собирали данные о значении субъективного вознаграждения в настоящем исследовании. Следовательно, возможные различия в оценке вознаграждения между весовыми группами могут предложить альтернативное объяснение эффекта снижения PIT, наблюдаемого у людей с ожирением.
Движения глаз при кондиционировании по Павлову отличаются у людей с нормальным весом, избыточным весом и ожирением
Мы использовали отслеживание глаз, чтобы измерить поведенческие изменения во время обусловленности Павлова. Отслеживание глаз использовалось ранее для измерения реактивности на пассивно наблюдаемые пищевые раздражители (34, 37) и исследовать индивидуальные различия в том, в какой степени индивиды приписывают стимул значимости предсказывающим награду сигналам по сравнению с самой наградой (49). Здесь мы выполнили слежение за глазами в период между просмотром кия и получением вознаграждения, т. Е. Пока участники видели только нейтральный экран, но никаких визуальных стимулов. Мы решили изменить предыдущие парадигмы (49) потому что взгляд автоматически притягивается к визуальным сигналам, если только эти движения глаз не будут активно подавлены.
В нашем исследовании условная реакция глаз на вознаграждение и нейтральное расположение метки во время павловской обусловленности модулировалась по-разному в зависимости от состояния веса участника (см. Павловская задача кондиционированияЦифры Figures2C-Е) .2С-Е). Более конкретно, мы обнаружили, что во время условий Павлова у людей с избыточным весом обнаруживалось общее смещение ориентации в сторону местоположения вознаграждения, независимо от того, выполняли ли они испытание с вознаграждением или исследование с нейтральным сигналом. Это отсутствие четкой диссоциации между наградами и нейтральными испытаниями оставалось относительно стабильным в разных условиях и в целом согласуется с наблюдением, что взрослые с избыточным весом демонстрировали повышенную реактивность к пищевым стимулам во время пассивного наблюдения за стимулами, визуального точечного зондового задания, различных версий Stroop. задание или в анкетах (37, 87, 89). В частности, мы подтвердили и расширили эти исследования, показав, что у людей с избыточным весом наблюдается общая ориентация на длительность в сторону местоположения награды, что свидетельствует о большей чувствительности к ожидаемому вознаграждению, что согласуется с более значительным эффектом PIT для сигналов, связанных с едой награды. Кроме того, люди, страдающие ожирением, отличались от контролей с нормальным весом, но в основном в течение начальной половины условий Павлова, где они демонстрировали четкое различие между условными реакциями на сигналы вознаграждения (которые вызывали длительную фиксацию на месте вознаграждения) и нейтральными сигналами (которые приводили к в более длительных периодах фиксации местоположения кия). Однако эта сильная начальная дифференциация была явно уменьшена в конце обусловленности Павлова.
Индивидуальные различия в условных реакциях дифференциально влияют на эффекты PIT у лиц с нормальным весом, избыточным весом и ожирением
Мы использовали поведение движения глаз, чтобы обнаружить индивидуальные различия и классифицировать участников в группу лиц с «низким индексом глаза», то есть они фиксировали преимущественно местоположение кия или «высокий индекс глаза», т.е. они фиксировали преимущественно место награды , Наш эксперимент показал, что люди с нормальным весом из группы «высокий индекс глаза» показали более сильный PIT-эффект для награды, чем люди из группы «низкий индекс глаза» (Рисунки (Figures4B, Е) .4БЫТЬ). Существует только одна группа исследователей, которые провели аналогичный эксперимент, чтобы исследовать влияние индивидуального стиля фиксации на ЯМ (49). Вопреки нашим результатам, они обнаружили, что более сильная условная реакция движения глаз к реплике привела к усилению модуляции целенаправленного поведения. Тем не менее, они количественно определяли движения глаз, пока сигнал находился на экране, предполагая, что поведение движения глаз было косвенным показателем поведения подхода сигнала, наблюдаемого у животных, также известного как «отслеживание признаков» (22, 23, 58, 99, 100). В отличие от этого, мы проверили условную реакцию глаз во время нейтрального экрана, предполагая, что поведение движения глаз может в основном отражать стимулирующую значимость предсказанного вознаграждения (см. Рисунок Figure1B) .1Б). Мы обнаружили, что индивидуальные различия при кондиционировании по Павлову (т. Е. «Низкий» по сравнению с «высоким индексом глаз») взаимодействовали с весовой категорией, влияя на ЯМ.
Как в группе с нормальным весом, так и в группе с ожирением в группе с «высоким индексом глаза» наблюдался более сильный эффект PIT, вызванный сигналами вознаграждения, чем в группе с «низким индексом глаза». Напротив, у участников с избыточной массой тела мы наблюдали высокий эффект PIT независимо от того, демонстрировали ли индивидуумы высокие или низкие тенденции индекса глаза во время кондиционирования. Однако эти данные следует интерпретировать с осторожностью, потому что подгруппы были довольно малы. Одно из возможных объяснений индивидуальных различий в эффекте PIT заключается в том, что не только стимул, но и сдерживающий контроль влияет на то, как на целенаправленное поведение влияют павловские реплики. Лица с нормальной массой тела и ожирением, выражающие «низкий индекс глаз», могут демонстрировать меньший эффект PIT, потому что они выражают механизм сдерживающего контроля, который регулирует влияние подсказок, связанных с вознаграждением, на целенаправленное поведение. Однако при избыточном весе, выражающем «низкий индекс глаза», этот тормозной механизм может быть изменен так, чтобы он выражал более сильный эффект PIT, что означает, что эти участники более восприимчивы к влиянию сигналов. Ингибирование ответа, например, с помощью задачи Go / Nogo, в настоящем исследовании не проверялось. Тем не менее, ранее было показано, что снижение подавления реакции связано с перееданием и неудачной диетой (101, 102). Наш вывод также согласуется с Trick et al. (103) которые показали, что более высокий условный отклик, измеренный во время обусловленности Павлова, автоматически не переводится в более высокий PIT. То же относится и к электрофизиологическим реакциям (т. Е. P300), которые не коррелировали с эффектом PIT у социальных пьющих (96).
Кроме того, мы обнаружили, что нормальный вес, выражающий «высокий глазной индекс», показал повышенный ИМТ в пределах здорового диапазона. Это может быть связано с предыдущими исследованиями, предполагающими, что повышенное внимание к еде как к фактору риска для увеличения веса (37). Однако недавний обзор литературы показал, что внимание к сигналам пищи или лекарств является слабым показателем проблемного поведения (104).
Интерпретационные вопросы
В нашей исследовательской работе представлен новый взгляд на то, как пищевые сигналы влияют на движения глаз и целенаправленное поведение у людей с избыточным весом и ожирением. Однако интерпретация наших выводов подвержена определенным ограничениям.
Во-первых, индивидуальные различия в оценке вознаграждения могли повлиять на поведение с контролем. Мы попытались преодолеть эту проблему, протестировав всех участников в одном и том же состоянии питания (то есть голодных) и позволив им выбрать свою любимую закуску из четырех вариантов. Вознаграждение, основанное на визуальной аналоговой шкале, не отличалось между группами (ВЕСОВАЯ КАТЕГОРИЯ, ФИКСАЦИОННЫЙ СТИЛЬ) и не влияло ни на условную реакцию глаз, ни на ЯМ.
Во-вторых, наш эксперимент не позволяет нам определить, сохраняется ли чувствительность людей с избыточным весом к сигналам окружающей среды только для сигналов, специфичных для пищи, или же эти люди в целом проявляют повышенную чувствительность к сигналам, предсказывающим награду. Как общие, так и специфические эффекты вознаграждения были обнаружены в предыдущих исследованиях на пациентах с алкогольной зависимостью (45, 48) и курильщики (95). Таким образом, хотя диссоциация общих и специфических для пищи эффектов вознаграждения не была предметом настоящего исследования, она представляет собой важный вопрос для будущих исследований.
Физиологический механизм и открытые вопросы
Что именно может быть основным механизмом для выявления различий в условной реакции глаз и, возможно, также целенаправленного поведения у людей с нормальным весом, избыточным весом и ожирением? Хорошо известно, что употребление в пищу вкусной пищи увеличивает активность мозга в регионах, вовлеченных в процесс вознаграждения (например, полосатый мозг, средний мозг, миндалина, орбитофронтальная кора) и приводит к выбросу дофамина в дорсальном полосатом теле. Количество дофамина связано с оценками приятности (то есть «симпатия») и калорийностью награды / еды [для обзоров, см. Ref. (20, 21)]. Ожидаемое потребление пищи или воздействие сигналов / изображений пищи увеличивает активность в областях мозга, известных оценкой стимулирующего вознаграждения (то есть миндалина, орбитофронтальная кора) (21, 105, 106) и приводит к аналогичному выбросу дофамина в качестве вознаграждения (107). Модель стимулирующей сенсибилизации утверждает, что многократное потребление высококалорийной вкусовой пищи приводит к увеличению мозговой активности в регионах, участвующих в оценке стимулов, к сигналам, связанным с приемлемым потреблением пищи. с помощью обусловливание тяги и переедания, когда эти сигналы доступны (15, 17, 20, 21). Существуют убедительные доказательства того, что дофаминергические нейроны, выступающие в стриатум и вентральный паллидум, реагируют на получение приемлемой пищи, но после многократного спаривания между едой и сигналом запускаются в ответ на сигнал, связанный с пищей, и больше не в ответ на получение пищи. еда [для обзора, см. Ref. (107)]. Этот сдвиг во время обучения атрибутов стимула-результата ценен для самих сигналов и, таким образом, направляет мотивированное поведение (59, 107–109). Этот процесс может способствовать перееданию и увеличению веса. В соответствии с теорией стимулирующей сенсибилизации люди с ожирением показали повышенную активность в областях мозга, связанных с вознаграждением и мотивацией, в областях мозга, связанных с двигательными реакциями, и в областях мозга, связанных с вниманием к фотографиям еды, подсказкам еды или рекламе еды (20, 21, 27, 110–114). Эта большая чувствительность к сигналам, связанным с пищей, может быть отражена в увеличенной условной реакции глаза у людей с ожирением, наблюдаемых в нашем эксперименте. Связанный с едой сигнал, связанный с побудительным признаком, может затем вызвать действия для получения пищи (то есть, увеличенное «желание») (20). В нашем исследовании это увеличенное «желание» / мотивация из-за связанных с едой подсказок является потенциальной причиной для наблюдения более сильных эффектов ПИТ при избыточном весе. Тем не менее, наше исследование показывает, что это, вероятно, не так для участников с ожирением. Из экспериментов на животных и людях есть некоторые доказательства того, что обычное потребление рационов с высоким содержанием жиров снижает передачу сигналов дофамина в цепи вознаграждения (21, 115, 116). Это согласуется с экспериментами на кокаине и алкоголизированных людях (117, 118). Однако привычные процессы не были измерены нашей экспериментальной парадигмой.
Сочетание нашей поведенческой парадигмы с дополнительными методами, такими как нейровизуализация или фармакологические вмешательства, позволит лучше понять основной механизм. Это также способствовало бы интеграции наших результатов в исследования на животных по индивидуальной изменчивости, обусловленной мотивации, перееданию и зависимости. Кроме того, было бы интересно исследовать влияние экологических факторов в группе пациентов после бариатрической операции или после других вмешательств (например, диеты, поведенческой тренировки, см. Клиническое значение).
Клиническое значение
Наши результаты могут оказаться полезными с практической точки зрения, потому что мы показываем, что обусловленная реакция глаз и целенаправленное поведение группы с избыточным весом, как правило, более восприимчивы к влиянию сигналов окружающей среды. Таким образом, может быть полезно обратиться к ментальным стратегиям, чтобы противостоять связанным с едой сигналам также в психологическом / поведенческом лечении людей с избыточным весом [например, тренировка вымирания, тренировка контроля внимания, тренировка реагирования (60, 119–121)]. Управление смещением внимания на сигналы лекарств с помощью было показано, что методы контроля внимания снижают некоторые признаки поведенческого контроля над наркоманами (60, 122–124). Насколько нам известно, существует только одно исследование, в котором применялась программа модификации смещения внимания (АБМ), используемая при аддиктивных расстройствах для людей с избыточным весом и ожирением (то есть, едоков разгула) (125). Это исследование выявило снижение веса, симптомы расстройства пищевого поведения, переедание и потерю контроля и чувствительности к еде после тренировки ПРО 8-недели (125). Однако эти результаты следует интерпретировать с осторожностью из-за небольшого размера выборки и открытого исследования в одной группе. Комбинация реакции на еду и тренировки внимания успешно подавила сети мозга за вознаграждение и внимание и уменьшила жировые отложения (120, 121). Для людей, страдающих ожирением, которые в нашем исследовании не отличались от контроля нормального веса в отношении влияния внешних сигналов на целенаправленное поведение, возможно, более подходящими являются другие методы лечения, поскольку неадаптивное пищевое поведение уже консолидировано [например, когнитивно-поведенческая терапия, мотивация интервьюирование, тренировка по изменению привычек, тренировка по контролю торможения (102, 126)]. Находка настоящего исследования вместе с предыдущими исследованиями (8, 9, 14, 57) также следует учитывать при разработке новой политики и руководящих принципов для рекламы продуктов питания.
Заключение
Мы обнаружили, что эффекты PIT для поощрения пищи различались в зависимости от статуса веса. В частности, на людей с избыточным весом больше влияли пищевые стимулы, чем на людей с ожирением и нормальным весом. Движения глаз при кондиционировании по Павлову не были связаны с силой эффекта PIT у людей с избыточным весом или ожирением. Тем не менее, люди с нормальным весом с более сильной условной реакцией на место вознаграждения показали более сильный эффект PIT и, возможно, имеют риск набрать вес. Наши результаты в целом соответствуют теории стимулирующей сенсибилизации, предсказывающей, что люди с избыточным весом более восприимчивы к сигналам, связанным с пищевыми продуктами, чем контроли с нормальным весом. Мы предполагаем, что эта гиперчувствительность может быть снижена у тучных участников из-за привычного / компульсивного переедания или различий в оценке вознаграждения.
Заявление о этике
Все субъекты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. Протокол был одобрен Комитетом по этике кантона Цюрих.
Авторские вклады
Все авторы задумали и разработали эксперимент; Р.Л. запрограммировал эксперимент, проанализировал данные, написал основной текст рукописи и подготовил рисунки; AB собрал данные; все авторы прочитали, исправили и одобрили окончательный вариант рукописи.
Заявление о конфликте интересов
Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Благодарности
Авторы хотели бы поблагодарить доктора Дэниела Вулли за техническую помощь и доктора мед. Ренвард С. Хаузер и доктор мед. Филипп Гербер за ценные идеи и рекомендации по набору пациентов.
Сноски
Финансирование. Эта работа стала возможной благодаря финансированию, полученному из гранта Eat2Learn2Move Фонда исследований ETH.
Рекомендации