Метамфетамин действует на субпопуляции нейронов, регулирующих сексуальное поведение у самцов крыс (2009)

Нейробиология. 2010 31 марта;166(3):771-84. doi: 10.1016/j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 4 января.

Фромадер К.С. , Вискерке Дж. , Уайз Р.А. , Леман М.Н. , Кулен Л.М.

Источник

Кафедра анатомии и клеточной биологии, Школа медицины и стоматологии им. Шулиха, Университет Западного Онтарио, Лондон, О.Н., Канада, N6A 5C1.

Резюме

Метамфетамин (мет) — это сильнодействующий стимулятор, вызывающий привыкание. Злоупотребление метамфетамином часто связано с рискованным сексуальным поведением и повышенной распространенностью вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), а потребители метамфетамина сообщают о повышенном сексуальном желании, возбуждении и сексуальном удовольствии. Биологическая основа этой связи между наркотиками и сексом неизвестна. Настоящее исследование демонстрирует, что введение метамфетамина самцам крыс активирует нейроны в областях мезолимбической системы головного мозга, участвующих в регуляции сексуального поведения. В частности, метамфетамин и спаривание совместно активируют клетки в ядре и оболочке прилежащего ядра, базолатеральной миндалевидной железе и передней поясной коре. Эти результаты показывают, что вопреки распространенному мнению, наркотики могут активировать те же клетки, что и естественный подкрепляющий фактор, то есть сексуальное поведение, и, в свою очередь, могут влиять на компульсивное стремление к этому естественному вознаграждению.

Ключевые слова: ядро, асфальс, базалатеральная миндалина, префронтальная кора, злоупотребление психоактивными веществами, размножение, наркомания

Мотивация и вознаграждение регулируются мезолимбической системой, взаимосвязанной сетью зон головного мозга, состоящей из вентрального тегментального пространства (VTA), прилежащего ядра (NAc), базалатеральной амигдалы и медиальной префронтальной коры (mPFC) (Kelley, 2004, Каливас и Волков, 2005). Существует множество доказательств того, что мезолимбическая система активируется в ответ на оба вещества,Ди Чиара и Императо, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) и, естественно, полезное поведение, такое как сексуальное поведение (Fiorino et al., 1997, Balfour и др., 2004). Мужское сексуальное поведение и, в частности, эякуляция, очень полезны и усиливаются в моделях животных (Pfaus et al., 2001). Мужские грызуны развивают условное предпочтение места (CPP) к совокуплению (Агмо и Беренфельд, 1990, Мартинес и Паредес, 2001, Тенк, 2008), и будет выполнять оперантные задачи, чтобы получить доступ к сексуально восприимчивой женщине (Everitt et al., 1987, Эверитт и Стейси, 1987). Препараты злоупотребления также полезны и усиливаются, и животные научатся самостоятельно вводить вещества, злоупотребляющие, включая опиаты, никотин, алкоголь и психостимуляторы (Мудрый, 1996, Пирс и Кумареш, 2006, Feltenstein и See, 2008). Хотя известно, что оба препарата злоупотребления и сексуального поведения активируют области мезолимбического мозга, в настоящее время неясно, влияют ли наркотики злоупотребления на те же самые нейроны, которые опосредуют сексуальное поведение.

Электрофизиологические исследования показали, что продукты питания и кокаин активируют нейроны в NAc. Однако два усилителя не активируют одни и те же ячейки внутри NAc (Carelli и др., 2000, Карелли и Вондоловски, 2003). Кроме того, самообслуживание пищи и сахарозы не вызывают долгосрочных изменений электрофизиологических свойств, вызванных кокаином (Chen et al., 2008). Напротив, совокупность данных свидетельствует о том, что сексуальное поведение и наркотики мужчины могут действительно действовать на одни и те же мезолимбические нейроны. Психостимуляторы и опиоиды изменяют выражение сексуального поведения у самцов крыс (Митчелл и Стюарт, 1990, Фиорино и Филлипс, 1999a, Фиорино и Филлипс, 1999b). Недавние данные из нашей лаборатории показали, что сексуальный опыт изменяет чувствительность к психостимуляторам, о чем свидетельствуют сенсибилизированные локомоторные ответы и сенсибилизированное восприятие вознаграждения d-амфетамину у сексуально опытных животных (Питчерс и др., 2009). Ранее подобный ответ наблюдался при многократном воздействии амфетамина или других наркотических средств (Lett, 1989, Shippenberg и Heidbreder, 1995, Shippenberg и др., 1996, Вандершурен и Каливас, 2000). Вместе эти данные показывают, что сексуальное поведение и реакции на наркотики злоупотребляют одними и теми же нейронами в мезолимбической системе. Следовательно, первая цель настоящего исследования - исследовать нейронную активацию мезолимбической системы с помощью сексуального поведения и введения лекарств у того же животного. В частности, мы протестировали гипотезу о том, что психостимулятор, метамфетамин (Meth), действует непосредственно на нейроны, которые обычно опосредуют сексуальное поведение.

Метамфетамин — один из наиболее распространенных нелегальных наркотиков в мире (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008 ), и его часто связывают с изменением сексуального поведения. Интересно, что потребители метамфетамина сообщают о повышенном сексуальном желании и возбуждении, а также об усилении сексуального удовольствия ( Semple et al., 2002 , Schilder et al., 2005 ). Более того, злоупотребление метамфетамином часто ассоциируется с компульсивным сексуальным поведением ( Rawson et al., 2002 ). Пользователи часто сообщают о наличии многочисленных сексуальных партнеров и реже используют средства контрацепции, чем другие наркоманы ( Somlai et al., 2003 , Springer et al., 2007 ). К сожалению, исследования, указывающие на употребление метамфетамина как на фактор, предсказывающий рискованное сексуальное поведение, ограничены, поскольку они основаны на неподтвержденных самоотчетах ( Elifson et al., 2006 ). Следовательно, для понимания этой сложной взаимосвязи между наркотиками и половой функцией необходимо исследование клеточных основ изменений полового поведения, вызванных метамфетамином, на животной модели.

Ввиду вышеизложенных данных, свидетельствующих о том, что наркотические вещества, и особенно метамфетамин, могут воздействовать на нейроны, обычно участвующие в регуляции сексуального поведения, целью настоящего исследования было изучение нейронной активации при сексуальном поведении и введении психостимулятора метамфетамина . В этом исследовании была применена нейроанатомическая методика с использованием иммуногистохимической визуализации ранних генов Fos и фосфорилированной MAP-киназы (pERK) для выявления одновременной нейронной активации при сексуальном поведении и введении метамфетамина соответственно. Ген Fos экспрессируется только в ядре клеток, достигая максимального уровня экспрессии через 30–90 минут после активации нейрона. Существует множество доказательств того, что сексуальная активность индуцирует экспрессию Fos в головном мозге ( Pfaus и Heeb, 1997 , Veening и Coolen, 1998 ), включая мезокортикально-лимбическую систему ( Robertson et al., 1991 , Balfour et al., 2004 ). Также имеются данные о том, что наркотические вещества индуцируют экспрессию pERK в мезокортикально-лимбической системе ( Valjent et al., 2000 , Valjent et al., 2004 , Valjent et al., 2005 ). В отличие от экспрессии Fos, фосфорилирование ERK является высокодинамичным процессом и происходит только через 5–20 минут после активации нейронов. Различные временные профили Fos и pERK делают их идеальным набором маркеров для последующей активации нейронов двумя различными стимулами.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ПРОЦЕДУРЫ

Тематика

Взрослых самцов крыс породы Спраг-Доули (210–225 г), полученных из лаборатории Charles River Laboratories (Монреаль, Квебек, Канада), содержали по две особи в стандартных клетках из плексигласа (домашние клетки). В помещении для животных поддерживался 12-часовой световой цикл (свет выключался в 12:10.00). Корм ​​и вода были доступны в неограниченном количестве. Все эксперименты проводились в первой половине темной фазы при слабом красном освещении. Самкам, используемым в качестве стимулов для изучения полового поведения, проводили двустороннюю овариэктомию под глубокой анестезией (13 мг/кг кетамина и 87 мг/кг ксилазина) и имплантировали подкожно 5% бензоата эстрадиола (ЭБ) и 95% холестерина. Половую восприимчивость индуцировали подкожным (п/к) введением 500 мкг прогестерона в 0.1 мл кунжутного масла за 4 часа до эксперимента. Все процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными при Университете Западного Онтарио и соответствуют рекомендациям Канадского совета по уходу за животными.

Экспериментальные образцы

Эксперименты 1 и 2: Самцам крыс (n=37) разрешалось спариваться с восприимчивой самкой до одной эякуляции (E) или в течение 30 минут, в зависимости от того, что наступит раньше, в чистых тестовых клетках (60 × 45 × 50 см) в течение пяти предварительных сессий спаривания, проводимых дважды в неделю, для получения сексуального опыта. В течение последних двух сессий регистрировались все стандартные параметры сексуальной активности, включая: латентность спаривания (ML; время от введения самки до первого спаривания), латентность интромиссии (IL; время от введения самки до первого спаривания с вагинальным проникновением), латентность эякуляции (EL; время от первого интромиссии до эякуляции), постэякуляционный интервал (PEI; время от эякуляции до первого последующего интромиссии), количество спариваний (M) и количество интромиссий (IM) ( Agmo, 1997 ). Всем самцам ежедневно вводили 1 мл/кг 0.9% раствора NaCl (физиологический раствор; подкожно) в течение 3 последовательных дней до дня тестирования для привыкания к манипуляциям и инъекциям. За день до дня тестирования все самцы содержались поодиночке. У опытных самцов Fos может быть индуцирован условными контекстными сигналами, связанными с предыдущим сексуальным опытом ( Balfour et al, 2004 ). Поэтому все манипуляции с спариванием и контрольные манипуляции во время заключительных тестов проводились в домашней клетке (избегая предсказуемых условных сигналов), чтобы предотвратить активацию, вызванную условными сигналами, у неспарившихся контрольных самцов. Самцы были распределены на восемь экспериментальных групп, которые не различались ни по одному показателю сексуальной активности в течение последних двух сессий спаривания (данные не показаны). Во время заключительного теста самцам либо разрешалось спариваться в своей домашней клетке до эякуляции (половое спаривание), либо они не получали самку-партнера (отсутствие полового спаривания). Все спарившиеся самцы были подвергнуты перфузии через 60 минут после начала спаривания для анализа экспрессии Fos, вызванной спариванием. Самцам вводили инъекцию 4 мг/кг метформина или 1 мл/кг физиологического раствора (подкожно) (n=4 в каждой группе) за 10 (эксперимент 1) или 15 (эксперимент 2) минут до перфузии для анализа фосфорилирования MAP-киназы, вызванного препаратом. Дозировка и время до перфузии были основаны на предыдущих исследованиях ( Choe et al., 2002 , Choe and Wang, 2002 , Chen and Chen, 2004 , Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006 ). Контрольные группы включали самцов, которые не спаривались, но получали метамфетамин за 10 (n=7) или 15 (n=5) минут до умерщвления, или инъекции физиологического раствора за 10 (n=5) или 15 (n=4) минут до умерщвления. После умерщвления головной мозг обрабатывали для иммуногистохимического анализа.

Эксперимент 3: Поскольку в эксперименте 1 и 2 использовалась высокая доза Meth, был проведен дополнительный нейроанатомический эксперимент для исследования того, что сексуальное поведение и более низкая доза Meth индуцируют зависимые от дозы образцы перекрывающейся нервной активации. Это исследование проводилось аналогично экспериментам 1 и 2. Тем не менее, в последнем тесте, mated и unmated группы (n = 6 каждый) получили 1 мг / кг Meth (sc) 15 мин до жертвоприношения.

Эксперимент 4: Чтобы проверить, является ли нейронная активация, вызванная полом и метамфетамином, специфичной именно для метамфетамина, в этом эксперименте исследовалось, можно ли наблюдать аналогичные паттерны перекрывающейся нейронной активации при воздействии психостимулятора d-амфетамина (Амфетамина). Этот эксперимент проводился аналогично экспериментам 1 и 2. Однако в заключительном тесте самцам вводили либо Амфетамин (5 мг/кг), либо физиологический раствор (1 мг/кг) (подкожно) за 15 минут до умерщвления (по 5 особей в каждой группе). Контрольным неспаренным самцам вводили физиологический раствор или Амфетамин за 15 минут до умерщвления. Обзор экспериментальных групп, использованных в экспериментах 1–4, представлен в таблице 1.

Таблица 1       

Обзор экспериментальных групп, включенных в эксперименты 1-4.

Подготовка ткани

Животных анестезировали пентобарбиталом (270 мг / кг; ip) и перфузировали транскрипционно с помощью 5 мл физиологического раствора, а затем 500 мл 4% параформальдегида в фосфатном буфере 0.1 M (PB). Мозги удаляли и фиксировали для 1 h при комнатной температуре в том же фиксаторе, а затем погружали в 20% сахарозу и 0.01% азида натрия в 0.1 M PB и хранили при 4 ° C. Корональные срезы (35 мкм) разрезали на замораживающем микротоме (H400R, Micron, Germany), собранном в четырех параллельных рядах в растворе криопротектора (30% сахарозы и 30% этиленгликоля в 0.1 M PB) и хранили при 20 ° C до следующего обработка.

Иммуногистохимия

Все инкубации проводились при комнатной температуре с легким перемешиванием. Свободно плавающие срезы тщательно промывали 0.1 М фосфатно-буферным раствором (PBS) между инкубациями. Срезы инкубировали в 1% H₂O₂ в течение 10 мин, затем блокировали в инкубационном растворе (PBS , содержащий 0.1% бычьего сывороточного альбумина и 0.4% Тритона X-100) в течение 1 ч.

Перк / Фо

Ткань инкубировали в течение ночи с поликлональными антителами кролика против киназ p42 и p44 MAP ERK1 и ERK2 (pERK; 1:400, эксперимент 1, партия 19; 1:4.000, эксперименты 2 и 3, партия 21; Cell Signaling, кат. № 9101), после чего проводили инкубацию в течение 1 часа с биотинилированными антителами осла против IgG кролика (1:500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) и комплексом авидин-пероксидаза хрена (ABC Elite; 1:1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Затем ткань инкубировали в течение 10 мин с биотинилированным тирамидом (BT; 1:250 в PBS + 0.003% H₂O₂ ; набор для усиления сигнала тирамида , NEN Life Sciences, Бостон, Массачусетс) и в течение 30 мин со стрептавидином, конъюгированным с Alexa 488 (1:100; Jackson Immunoresearch Laboratories, Вест-Гроув, Пенсильвания). Далее ткань инкубировали в течение ночи с кроличьими поликлональными антителами против c-Fos (1:500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Санта-Круз, Калифорния), после чего проводили 30-минутную инкубацию с козьими антителами против кроличьих антител Alexa 555 (1:200; Jackson Immunoresearch Laboratories, Вест-Гроув, Пенсильвания). После окрашивания срезы тщательно промывали в 0.1 М фосфатном буфере, монтировали на предметные стекла с помощью 0.3% желатина в дистиллированной воде и покрывали покровными стеклами с использованием водной среды для монтирования (Гельватол), содержащей антивыцветающий агент 1,4-диазабицикло(2,2)октан (DABCO; 50 мг/мл, Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури). В качестве иммуногистохимического контроля использовали исключение одного или обоих первичных антител, что приводило к отсутствию метки на соответствующей длине волны.

Анализ данных

Сексуальное поведение

Для всех четырех экспериментов стандартные параметры сексуальной активности регистрировались, как описано выше, и анализировались с использованием анализа дисперсии (ANOVA). Анализ данных о сексуальном поведении в течение заключительного испытательного дня не выявил существенных различий между группами по любому из параметров половой деятельности.

Количество клеток PERK / Fos

Подсчет клеток с одиночной и двойной меткой Fos и pERK проводился на каудальных уровнях субрегионов ядра и оболочки прилежащего ядра (NAc), базолатеральной миндалевидной железы (BLA), заднедорсальной медиальной миндалевидной железы (MEApd), центральной миндалевидной железы (CeA), медиального преоптического ядра (MPN), заднемедиального и заднелатерального ядра ложа терминальной полоски (BNSTpm и BNSTpl), а также в субрегионах передней поясной области (ACA), прелимбической (PL) и инфралимбической (IL) областей медиальной префронтальной коры (mPFC). Изображения были получены с помощью охлаждаемой ПЗС-камеры (Microfire, Optronics), подключенной к микроскопу Leica (DM500B, Leica Microsystems, Ветцлар, Германия), и программного обеспечения Neurolucida (MicroBrightfield Inc) с фиксированными настройками камеры для всех испытуемых (с использованием объективов 10x). С помощью программного обеспечения Neurolucida области анализа были определены на основе ориентиров ( Swanson, 1998 ), уникальных для каждого региона мозга (см. рисунок 1 ). Стандартные области анализа использовались во всех областях, за исключением ядра и оболочки NAc. В последних областях экспрессия pERK и Fos была неоднородной и проявлялась в виде пятнистых паттернов. Поэтому все ядро ​​и оболочка были очерчены на основе ориентиров (боковой желудочек, передняя комиссура и островки Каллехи). Области анализа не различались между экспериментальными группами и составляли 1.3 мм² в ядре и оболочке NAc. Стандартные области анализа для остальных областей составляли: 1.6 мм² в BLA, 2.5 и 2.25 мм² в MEApd и CeA соответственно, 1.0 мм² в MPN, 1.25 мм² в субрегионах BNST и mPFC и 3.15 мм² в VTA. Для каждого животного подсчитывали количество клеток в двух срезах с обеих сторон мозга, а также рассчитывали число клеток с одиночной и двойной меткой pERK и Fos, а также процент клеток pERK, экспрессирующих маркер Fos. Для экспериментов 1, 2 и 4 средние значения по группам сравнивали с использованием двухфакторного дисперсионного анализа (факторы: спаривание и препарат) и критерия Фишера LSD для апостериорных сравнений при уровне значимости 0.05. Для эксперимента 3 средние значения по группам сравнивали с использованием непарного t-критерия при уровне значимости 0.05.

Рисунок 1       

Схематические чертежи и изображения, иллюстрирующие области анализа мозга. Указанные области анализа были основаны на ориентирах, уникальных для каждой области мозга, не отличались между экспериментальными группами и составляли 1.25 мм2 в субрегионах mPFC (a), 1.3 мм2 в ...

Фотографии

Цифровые изображения для рисунка 3 были получены с помощью ПЗС-камеры (DFC 340FX, Leica), установленной на микроскопе Leica (DM500B), и импортированы в программное обеспечение Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, Сан-Хосе, Калифорния). Изображения не подвергались никаким изменениям, за исключением регулировки яркости.

Рисунок 3       

Представительные изображения участков NAc, иммунизированных для Fos (красный, a, d, g, j) и pERK (зеленый, b, e, h, k) животных каждой экспериментальной группы: No Sex + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i) и Sex + Meth (j, k, l). Правые панели ...

РЕЗУЛЬТАТЫ

Нейронная активация лимбической системы по половому поведению и методам

Эксперимент 1: Анализ клеток с одинарной и двойной меткой на наличие Fos, индуцированного спариванием, и pERK, индуцированного метамфетамином, у самцов, получивших метамфетамин за 10 минут до эвтаназии, выявил наличие Fos, индуцированного спариванием, в MPN, BNSTpm, ядре и оболочке NAc, BLA, VTA и всех субрегионах mPFC, что согласуется с предыдущими исследованиями, демонстрирующими экспрессию Fos, индуцированную спариванием, в этих областях ( Baum and Everitt, 1992 , Pfaus and Heeb, 1997 , Veening and Coolen, 1998 , Hull et al., 1999 ). Введение метамфетамина за 10 минут до эвтаназии индуцировало экспрессию pERK в ядре и оболочке прилежащего ядра, миндалевидном теле, медиальном ядре апикального отдела, центральном ядре миндалевидного тела, лобном ядре лобного отдела префронтальной коры и областях медиальной префронтальной коры, что согласуется с паттернами активации, вызываемыми другими психостимуляторами ( Valjent et al., 2000 , Valjent et al., 2004 , Valjent et al., 2005 ).

Более того, были обнаружены три модели совместной экспрессии нейронной активации, вызванной сексуальным поведением и метамфетамином: Во-первых, были идентифицированы области мозга, где пол и наркотики активировали неперекрывающиеся нейронные популяции ( таблица 2 ). В частности, в CeA, MEApd, BNSTpl и mPFC наблюдалось значительное увеличение как индуцированного наркотиками pERK (F(1,16)=7.39–48.8; p=0.015–<0.001), так и индуцированного полом Fos (F(1,16)=16.53–158.83; p<0.001). Однако в этих областях не наблюдалось значительного увеличения количества нейронов с двойной меткой у самцов, получавших метамфетамин и спарившихся друг с другом. Единственным исключением была MEApd, где был обнаружен эффект спаривания на количество клеток с двойной меткой (F(1,16)=9.991; p=0.006). Однако общего эффекта от медикаментозного лечения не наблюдалось, а двойная маркировка в группах, получавших метамфетамин, не была значительно выше, чем в группах, получавших физиологический раствор, следовательно, она не была вызвана препаратом ( таблица 2 ). Во-вторых, были выявлены области мозга, где нейронная активация индуцировалась только спариванием ( таблица 3 ). В частности, MPN, BNSTpm и VTA активировались только при спаривании и содержали значительное увеличение Fos, индуцированного спариванием (F(1,16)=14.99–248.99; p ≤ 0.001), но не содержали pERK, индуцированного метамфетамином.

Таблица 2       

Обзор индуцированной спариванием Fos и Meth-индуцированной экспрессии pERK в областях мозга, где секс и наркотики активируют непересекающиеся нейронные популяции.
Таблица 3       

Обзор индуцированной спариванием Fos и Meth-индуцированной экспрессии pERK в областях мозга, где нейральная активация индуцировалась только путем спаривания.

Наконец, были обнаружены области мозга, где пол и наркотики активировали перекрывающиеся популяции нейронов ( рис. 2 и 3 ). В ядре и оболочке NAc, BLA и ACA наблюдались общие эффекты спаривания (F(1,16)=7.87–48.43; p=0.013–<0.001) и лечения наркотиками (F(1,16)=6.39–52.68; p=0.022–<0.001), а также взаимодействие между этими двумя факторами (F(1,16)=5.082–47.27; p=0.04–<0.001; в ACA значимого взаимодействия не обнаружено) на количество клеток, экспрессирующих как индуцированный спариванием Fos, так и индуцированный метамфетамином pERK. Постфактумный анализ показал, что количество нейронов с двойной меткой было значительно выше у самцов, которым вводили метамфетамин после спаривания, по сравнению с самцами, которым метамфетамин не вводили после спаривания (p=0.027-<0.001), или самцами, которым вводили физиологический раствор после спаривания (p=0.001-<0.001) ( рисунок 2 и 3 ). При выражении данных в процентах от количества активированных препаратом нейронов, 39.2 ± 5.3% в ядре NAc, 39.2 ± 5.8% в оболочке NAc, 40.9 ± 6.3% в BLA и 50.0 ± 5.3% нейронов ACA были активированы как спариванием, так и метамфетамином.

Рисунок 2       

Сексуальная индуцированная FOS и Meth-индуцированная экспрессия pERK в NAc, BLA и ACA нейронах 10 мин после введения 4 мг / кг Meth. Средние числа ± sem из Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойные (c, f, i, l) помеченные ячейки в ядре NAc (a, ...

Неожиданным наблюдением стало то, что половое поведение влияло на уровень pERK, индуцированный метамфетамином. Хотя метамфетамин значительно повышал уровень pERK как в группах самцов, которым вводили метамфетамин, так и в группах самцов, которым его вводили без спаривания, в NAc, BLA и ACA уровень pERK был значительно ниже у самцов, которым вводили метамфетамин и которым его вводили без спаривания, по сравнению с самцами, которым его вводили без спаривания ( рис. 2b, e, h, k ; p=0.017-<0.001). Это открытие может дополнительно подтвердить гипотезу о том, что пол и наркотики действуют на одни и те же нейроны, но оно также может указывать на изменения в поглощении или метаболизме наркотиков, вызванные спариванием, которые, в свою очередь, вызывают изменение нейронных реакций на метамфетамин. Чтобы исследовать, вызывает ли половое поведение другой временной паттерн активации, индуцированной наркотиками, срезы NAc, BLA и ACA были окрашены у самцов, умерщвленных в более поздний момент времени (15 мин) после введения наркотика (эксперимент 2).

Эксперимент 2: Анализ клеток с одинарной и двойной меткой подтвердил описанные выше результаты, согласно которым половое поведение и последующее воздействие метамфетамина за 15 минут до эвтаназии привели к значительному увеличению иммуномечения Fos и pERK в ядре и оболочке NAc, BLA и ACA. Кроме того, в этих областях снова была обнаружена значительная коэкспрессия Fos, индуцированного спариванием, и pERK, индуцированного метамфетамином ( Рисунок 4 ; эффект спаривания: F(1,12)=15.93–76.62; p=0.002–<0.001; эффект препарата: F(1,12)=14.11–54.41; p=0.003–<0.001). Количество нейронов с двойной меткой у спарившихся самцов, которым вводили метамфетамин, было значительно выше по сравнению с неспарившимися самцами, получавшими метамфетамин (p<0.001), или спарившимися самцами, получавшими физиологический раствор (p<0.001). Когда данные были выражены в процентах от количества нейронов, активированных препаратом, 47.2 ± 5.4% (ядро NAc), 42.7 ± 7.6% (оболочка NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) и 59.5 ± 5.1% (ACA) нейронов, активированных при спаривании, также были активированы метамфетамином. Более того, уровень pERK, индуцированный препаратом, не различался между спарившимися и неспарившимися животными ( рис. 4b, e, h, k ) во всех областях, кроме ACA (p<0.001). Эти данные указывают на то, что половое поведение действительно вызывает изменение временной картины индукции pERK метамфетамином.

Рисунок 4       

Сексуальная индуцированная FOS и Meth-индуцированная экспрессия pERK в NAc, BLA и ACA нейронах 15 мин после введения 4 мг / кг Meth. Средние числа ± sem из Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойные (c, f, i, l) помеченные ячейки в ядре NAc (a, ...

Нейронная активация после полового поведения и 1 мг / кг Meth

Полученные результаты показали, что половое поведение и 4 мг/кг метамфетамина активировали перекрывающиеся популяции нейронов в ядре и оболочке прилежащего ядра (NAc), базолатеральной миндалевидной железе (BLA) и передней мозговой артерии (ACA). Для исследования влияния дозы препарата на это перекрытие в активации были также изучены паттерны нейронной активации с использованием более низкой дозы метамфетамина. Ядро и оболочка прилежащего ядра (NAc), BLA и ACA были проанализированы на предмет активации, вызванной половым поведением и метамфетамином. Действительно, половое поведение и последующее воздействие метамфетамина привели к значительному увеличению иммуномечения Fos и pERK в субрегионах ядра и оболочки прилежащего ядра (NAc), BLA, а также нейронов в области ACA медиальной префронтальной коры (mPFC) ( рис. 5 ). Интересно, что более низкая доза метамфетамина привела к аналогичному количеству нейронов, помеченных pERK, как и при дозе 4 мг/кг метамфетамина в четырех анализируемых областях мозга. Что еще более важно, в ядре и оболочке NAc, BLA и ACA наблюдалось значительное увеличение числа клеток с двойной меткой ( рис. 5c, f, i, l ) по сравнению с неспаренными самцами, которым вводили метамфетамин (p=0.003-<0.001). При выражении данных в процентах от активированных препаратом нейронов, 21.1 ± 0.9% и 20.4 ± 1.8% в ядре и оболочке NAc соответственно, 41.9 ± 3.9% в BLA и 49.8 ± 0.8% нейронов ACA были активированы в зависимости от пола и воздействия метамфетамина.

Рисунок 5       

Сексуальная индуцированная FOS и Meth-индуцированная экспрессия pERK в NAc, BLA и ACA нейронах 15 мин после введения 1 мг / кг Meth. Средние числа ± sem из Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойные (c, f, i, l) помеченные ячейки в ядре NAc (a, ...

Нейронная активация после полового поведения и введения d-амфетамина

Чтобы проверить, являются ли вышеуказанные результаты специфичными для метамфетамина, был проведен дополнительный эксперимент по изучению нейронной активации, вызванной спариванием и амфотерицином. Анализ клеток с одиночной и двойной меткой на pERK и Fos показал, что половое поведение и последующее воздействие амфотерицина привели к значительному увеличению иммуномечения Fos и pERK в ядре и оболочке NAc и BLA ( рис. 6 ; эффект спаривания: F(1,15)=7.38–69.71; p=0.016-<0.001; эффект препарата: F(1,15)=4.70–46.01; p=0.047-<0.001). Более того, количество нейронов с двойной меткой было значительно выше у самцов, подвергнутых воздействию амфотерицина С после спаривания, по сравнению с самцами, подвергнутыми воздействию амфотерицина С без спаривания (p=0.009-<0.001) или самцами, подвергнутыми воздействию физиологического раствора после спаривания (p=0.015-<0.001) ( рис. 6c, f, i ). При выражении данных в процентах от количества активированных препаратом нейронов, 25.7 ± 2.8% и 18.0 ± 3.2% в ядре и оболочке NAc соответственно, и 31.4 ± 2.0% нейронов BLA были активированы как спариванием, так и амфотерицином С. Область ACA медиальной префронтальной коры демонстрировала значительный уровень Fos, индуцированного спариванием ( рис. 6j ; F(1,15)=168.51; p<0.001). Однако, в отличие от метамфетамина, амфетамин не привел к значительному увеличению уровня pERK, индуцированного препаратом, в передней мозговой артерии ( рис. 6k ) или количества нейронов с двойной меткой в ​​передней мозговой артерии ( рис. 6l ) по сравнению как с самцами, которым вводили физиологический раствор, так и с самцами, которым его вводили без спаривания.

Рисунок 6       

Сексуальная индуцированная FOS и индуцированная амфом экспрессия pERK в NAc, BLA и ACA нейронах 15 мин после введения 5 мг / кг Amph. Средние числа ± sem из Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойные (c, f, i, l) помеченные ячейки в ядре NAc (a, ...

ОБСУЖДЕНИЕ

Нынешнее исследование демонстрирует на клеточном уровне перекрытие между нейронной активацией естественным усилением сексуального поведения и психостимулятором Meth. Поэтому эти данные показывают, что наркотики действуют не только на те же мозговые области, которые регулируют естественную награду, но на самом деле лекарства активируют одни и те же клетки, участвующие в регулировании естественной награды. В частности, здесь было показано, что сексуальное поведение и Meth совместно активируют популяцию нейронов в ядре NAC и оболочке, BLA и области ACA mPFC, идентифицируя потенциальные сайты, где Meth может влиять на сексуальное поведение.

Существующий вывод о том, что сексуальное поведение и введение Meth активирует перекрывающиеся популяции нейронов в NAc, BLA и ACA, отличается от результатов других исследований, показывающих, что различные популяции NAc нейронов кодируют лекарство и естественную награду.

В частности, электрофизиологические исследования, сравнивавшие нейронную активацию во время самовведения естественных вознаграждений (пищи и воды) и внутривенного введения кокаина, показали, что самовведение кокаина активировало дифференцированную, неперекрывающуюся популяцию нейронов, которая, как правило, не реагировала во время оперантного реагирования на подкрепление в виде воды и пищи (92%). Только 8% нейронов прилежащего ядра демонстрировали активацию как при введении кокаина, так и при получении естественного вознаграждения ( Carelli et al., 2000 ).

Напротив, большинство (65%) клеток в прилежащем ядре демонстрировали активацию под воздействием различных естественных вознаграждений (пища и вода), даже если одно из подкреплений было более приятным на вкус (сахароза) ( Roop et al., 2002 ).

Несколько факторов, возможно, способствовали расхождению с текущими результатами. Во-первых, для исследования нейронной активности были использованы различные технические подходы. В настоящем исследовании использовался нейроанатомический метод для обнаружения одновременной нейронной активации двумя различными стимулами с использованием двойной флуоресцентной иммуноцитохимии для Fos и pERK, что позволяет исследовать активацию одной клетки на больших участках мозга. Напротив, исследования Карелли и его коллег использовали электрофизиологические записи, ограничивающие NAc поведения животных, чтобы решить, активирует ли самолечение наркотических средств одни и те же нервные схемы, используемые естественными наградами.

Во-вторых, в данном исследовании изучалось другое естественное вознаграждение, а именно сексуальное поведение, в отличие от предыдущих исследований, в которых использовались пища и вода у крыс с ограниченным доступом к пище ( Carelli, 2000 ). Пища и вода могут иметь меньшую вознаграждающую ценность, чем спаривание. Сексуальное поведение очень вознаграждающее, и крысы легко формируют условное предпочтение места (УПЗ) для спаривания ( Agmo и Berenfeld, 1990 , Martinez и Paredes, 2001 , Tenk, 2008 ). Хотя крысы с ограниченным доступом к пище формируют УПЗ для воды ( Agmo et al., 1993 , Perks и Clifton, 1997 ) и пищи ( Perks и Clifton, 1997 ), крысы без ограничений в питании предпочитают потреблять и формировать УПЗ для более вкусной пищи ( Jarosz et al., 2006 , Jarosz et al., 2007 ).

Во-третьих, в наших исследованиях использовались другие наркотические вещества по сравнению с предыдущими исследованиями, а именно метамфетамин и амфетамин вместо кокаина. Полученные результаты показывают, что именно метамфетамин, и в меньшей степени амфетамин, вызывали активацию нейронов, также активируемых сексуальным поведением. Опыт употребления наркотиков также мог сыграть роль в наших результатах. В текущих исследованиях использовались животные, имевшие сексуальный опыт, но не употреблявшие наркотики. В отличие от этого, в электрофизиологических исследованиях Карелли и соавторов использовались «хорошо обученные» животные, которые подвергались многократному воздействию кокаина.

Следовательно, возможно, что вызванная метамфетамином активация нейронов, активируемых половым поведением, изменяется у крыс, ранее употреблявших наркотики. Однако предварительные исследования нашей лаборатории показывают, что употребление наркотиков вряд ли является основным фактором, поскольку половое поведение и лечение метамфетамином у самцов, хронически получавших метамфетамин, приводили к одновременной активации аналогичных процентов нейронов, активируемых наркотиками, как и в настоящем исследовании (20.3 ± 2.5 % в ядре прилежащего ядра и 27.8 ± 1.3 % в оболочке прилежащего ядра; Фрохмадер и Кулен, неопубликованные наблюдения).

Наконец, в данном исследовании изучалось «прямое» действие наркотиков с использованием пассивного введения. Поэтому данный анализ не раскрывает информацию о нейронных цепях, участвующих в поиске наркотиков или в сигналах, связанных с вознаграждением за употребление наркотиков, а скорее выявляет нейронную активность, вызванную фармакологическим действием препарата . В предыдущих электрофизиологических исследованиях нейронная активность в прилежащем ядре, возникающая в течение нескольких секунд после подкрепляемых реакций, не является результатом фармакологического действия кокаина, а в значительной степени зависит от ассоциативных факторов в рамках парадигмы самовведения ( Carelli, 2000 , Carelli, 2002 ). В частности, нейронная активность NAc находится под влиянием независимых от реакции предъявлений стимулов, связанных с внутривенным введением кокаина, а также инструментальных условий (например, нажатия рычага), присущих этой поведенческой парадигме ( Carelli, 2000 , Carelli and Ijames, 2001 , Carelli, 2002 , Carelli and Wightman, 2004 ). В целом, наши данные о совместной активации, вызванной естественным и наркотическим вознаграждением, могут быть специфичны для активации, вызванной сексуальным поведением и пассивным введением метамфетамина и амфетамина.

Meth и sex активировали перекрывающиеся популяции нейронов в ядре NAC и оболочке дозозависимым образом. Соавторизованные нейроны в NAc могут опосредовать потенциальные эффекты Meth на мотивацию и полезные свойства сексуального поведения как повреждения NAc нарушающего сексуальное поведение (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Кроме того, эти нейроны потенциально являются локусом для зависимых от дозы эффектов препарата при спаривании, поскольку нижняя доза Meth (1 мг / кг) уменьшала количество двойных меченых клеток по 50% по сравнению с более высокой дозой Meth (4 мг / кг). Хотя это исследование не идентифицирует химический фенотип коактивированных нейронов, предыдущие исследования показали, что индуцированная лекарством экспрессия pERK и Fos в NAc зависит как от дофамина (DA), так и от глутаматных рецепторов (Valjent и др., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent и др., 2005, Sun и др., 2008). Хотя неясно, зависит ли связанная с ней нервная активация в NAc от этих рецепторов, это было продемонстрировано в других областях мозга, особенно в медиальной преоптической области (Lumley and Hull, 1999, Dominguez и др., 2007). Tмуж, Meth может воздействовать на нейроны, также активируемые во время сексуального поведения посредством активации дофамина и глутаматных рецепторов. Роль глутамата NAc в сексуальном поведении в настоящее время неясна, но хорошо известно, что DA играет критическую роль в мотивации к сексуальному поведению (Халл и др., 2002, Халл и др., 2004, Pfaus, 2009). Исследования микродиализа сообщили об увеличении оттока NAc DA во время аппетитных и завершающих этапов мужского сексуального поведения (Фиорино и Филлипс, 1999a, Lorrain и др., 1999) и мезолимбический выброс ДА коррелировали с облегчением инициирования и поддержания сексуального поведения крыс (Pfaus и Everitt, 1995). Кроме того, исследования DA-манипуляции показывают, что антагонисты DA в NAc ингибируют сексуальное поведение, тогда как агонисты облегчают начало сексуального поведенияр (Everitt et al., 1989, Pfaus и Phillips, 1989). Таким образом, Meth может влиять на мотивацию сексуального поведения посредством активации DA-рецепторов.

В отличие от NAc, количество двойных меченых клеток в BLA и ACA оставалось относительно неизменным независимо от дозы Meth. БЛА имеет решающее значение для дискретного ассоциативного обучения и активно участвует в условном подкреплении и оценке вознаграждения во время инструментального реагирования (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, См. 2002). BLA пораженные крысы демонстрируют снижение нажатия рычага для условных раздражителей в паре с пищей (Everitt et al., 1989) или сексуального подкрепления (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). Напротив, эта манипуляция не влияет на завершающую фазу кормления и сексуального поведения (Cardinal et al., 2002). BLA также играет ключевую роль в памяти условных раздражителей, связанных с лекарственными стимулами (Грейс и Розенкранц, 2002, Лавиолетт и Грейс, 2006). Поражения или фармакологические инактивации блока BLA блокируют приобретение (Whitelaw и др., 1996) и выражение (Grimm and See, 2000), обусловленное восстановлением кокаина, не влияя на процесс введения лекарственного средства. Более того, Амф, введенный непосредственно в BLA, приводит к потенцированному восстановлению лекарственного средства в присутствии условных сигналов (См. Et al., 2003). Следовательно, возможно, что передача DA с улучшенным психостимулятором в БЛА приводит к потенцированному эмоциональному воздействию и поиску (Ledford et al., 2003) сексуальной награды, тем самым способствуя усилению сексуального влечения и желания, о которых сообщают лица, злоупотребляющие метадом (Semple и др., 2002, Зеленый и Халкит, 2006).

В ACA нейронная активация половых нейронов была независимой от дозы и специфичной для метамфетамина, в отличие от амфетамина. Хотя метамфетамин и амфетамин обладают схожими структурными и фармакологическими свойствами, метамфетамин является более мощным психостимулятором, чем амфетамин, с более длительным эффектом (NIDA, 2006). Исследования Гудвина и др. показали, что метамфетамин вызывает больший отток дофамина и более эффективно ингибирует клиренс локально применяемого дофамина в прилежащем ядре крысы, чем амфетамин. Эти характеристики могут способствовать аддиктивным свойствам метамфетамина по сравнению с амфетамином ( Гудвин и др., 2009 ) и, возможно, различиям в нейронной активации, наблюдаемым между двумя препаратами. Однако неясно, обусловлены ли различные закономерности результатов различиями в эффективности препаратов или проблемами с потенцией, связанными с используемыми дозами, и требуются дальнейшие исследования.

Совместная активация Meth и сексом не наблюдалась в других субрегионах mPFC (IL и PL). У крысы ACA широко изучали с помощью аппетитных задач, поддерживая роль в ассоциациях стимул-усилителей (Everitt et al., 1999, См. 2002, Cardinal et al., 2003). Имеются достаточные доказательства того, что mPFC участвует в тяге к наркотикам и рецидиве в отношении наркотиков и наркотиков, как у людей, так и у крыс (Grant et al., 1996, Childress и др., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin and See, 2003, Shaham et al., 2003, Каливас и Волков, 2005). Яn с этим было высказано предположение о том, что дисфункция mPFC, вызванная многократным воздействием наркотических средств, может быть ответственна за снижение импульсного контроля и повышенное лекарственное поведение, наблюдаемое у многих наркоманов (Jentsch и Taylor, 1999). Недавние данные нашей лаборатории показали, что поражение mPFC приводит к продолжению поиска сексуального поведения, когда это связано с аверсивным стимулом (Дэвис и др., 2003). Несмотря на то, что это исследование не исследовало ACA, оно поддерживает гипотезу о том, что mPFC (и ACA специфически) опосредует эффекты Meth на потерю ингибирующего контроля над сексуальным поведением, о чем сообщают злоупотребляющие люди (Salo et al., 2007).

В заключение, вместе эти исследования образуют критический первый шаг к лучшему пониманию того, как наркотики злоупотребляют воздействием на нервные пути, которые обычно обеспечивают естественные награды. Более того, эти данные показывают, что в отличие от нынешнего убеждения, что наркотики злоупотребления не активируют одни и те же клетки в мезолимбической системе как естественную награду, Meth и, в меньшей степени, Amph, активируют те же клетки, что и сексуальное поведение. В свою очередь, эти коактивированные нейронные популяции могут влиять на получение естественной награды после воздействия препарата. Наконец, результаты этого исследования могут в значительной степени способствовать нашему пониманию основы наркомании в целом. Сравнение сходств и различий, а также изменения в нейральной активации мезолимбической системы, вызванной сексуальным поведением, и наркотиками, могут привести к лучшему пониманию злоупотребления психоактивными веществами и связанных с ними изменений в природной награде.

Благодарности

Это исследование было поддержано грантами от Национального института здоровья R01 DA014591 и Канадских институтов исследования здоровья RN 014705 до LMC.

СОКРАЩЕНИЯ

  • азбука
  • пероксидазный комплекс авидин-биотин-хрена
  • ACA
  • передняя поясница
  • Amph
  • d-амфетамин
  • БЛА
  • базолатеральная амигдала
  • BNSTpl
  • заднелатеральное ядро ​​острия стрии
  • BNSTpm
  • заднечелюстное ядро
  • BT
  • биотинилированный тирамид
  • CeA
  • центральная миндалина
  • CPP
  • предпочтительное место
  • E
  • эякуляция
  • EL
  • латентность эякуляции
  • IF
  • инфралимическая область
  • IL
  • латентность при введении
  • IM
  • впуск
  • M
  • монтировать
  • MAP Kinase
  • митоген-активированная протеинкиназа
  • MEApd
  • заднедоральная медиальная амигдала
  • Мет
  • метамфетамина
  • ML
  • латентность монтирования
  • MPFC
  • медиальная префронтальная кора
  • MPN
  • медиальное преоптическое ядро
  • NAc
  • ядро Accumbens
  • PB
  • фосфатный буфер
  • PBS
  • забуференный фосфатом физиологический раствор
  • ПЭИ
  • промежуток после эякуляции
  • привилегия
  • фосфорилированная MAP-киназа
  • PL
  • прелимбическая область
  • VTA
  • брюшная тегментальная область

Сноски

Предупреждение издателя: Это PDF-файл неотредактированной рукописи, принятой к публикации. В качестве услуги для наших клиентов мы предоставляем эту предварительную версию рукописи. Перед публикацией в окончательном цитируемом виде рукопись пройдет корректуру, верстку и проверку корректуры. Обратите внимание, что в процессе подготовки могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержание, и все применимые к журналу юридические оговорки остаются в силе.

Референсы

  1. Agmo A. Мужское крысовое сексуальное поведение. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Усиление свойств эякуляции у мужской крысы: роль опиоидов и дофамина. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Вознаграждение и укрепление, производимое питьевой водой: роль подтипов опиоидов и дофаминовых рецепторов. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Сексуальное поведение и связанные с сексом экологические сигналы активируют мезолимбическую систему у самцов крыс. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Повышенная экспрессия c-fos в медиальной преоптической области после спаривания у самцов крыс: роль афферентных входов из средней тегментальной области средней миндалины и среднего мозга. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Роль префронтальной коры в восстановлении кокаина, вызванного стрессом и кокаином у крыс. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Кардинал Р. Н., Паркинсон Дж. А., Холл Дж., Эверит Б. Дж. Эмоции и мотивация: роль миндалины, вентрального полосатого тела и префронтальной коры. Неврология и биоповеденческие обзоры. 2002. 26: 321–352. [PubMed]
  8. Кардинал Р.Н., Паркинсон Ю.А., Марбини Х.Д., Тонер А.Ю., Бусси Т.Дж., Роббинс Т.В., Эверитт Б.Ю. Роль передней коры хвоста в контроле над поведением павловскими условными раздражителями у крыс. Поведенческая нейронаука. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Карелли Р.М. Активация стрельбы из апкменских клеток стимулами, связанными с доставкой кокаина во время самообслуживания. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Активизация клеток Nucleus accumbens во время целенаправленного поведения кокаина по сравнению с «естественным» подкреплением. Физиология и поведение. 2002. 76: 379–387. [PubMed]
  11. Карелли Р.М., Иджамс С.Г. Селективная активация нейронов accumbens сопутствующими кокаином стимулами во время многократного расписания воды / кокаина. Исследование мозга. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Доказательства того, что отдельные нейронные цепи в ядре accumbens кодируют кокаин против «естественного» (воды и пищи) вознаграждения. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Функциональная микроциркуляция в зависимости от наркомании: понимание сигналов в реальном времени во время поведения. Текущее мнение в нейробиологии. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Селективное кодирование кокаина в сравнении с естественными наградами нейронными системами neumons accumens не связано с хроническим воздействием лекарственного средства. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Чжан Цзи, Чжан Л, Джанак П.Ф., Вудворд DJ. Нейронные ответы в префронтальной коре и прилежащем ядре при вождении героина в свободно движущихся крысах. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Кокаин, но не естественное вознаграждение Самоуправление и пассивная инфузия кокаина производят стойкую LTP в VTA. Neuron. 2008; 59: 288-297. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Усиленная активность Cdk5 и p35-транслокация в брюшном стриатуме острых и хронических крыс, обработанных метамфетамином. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Лимбическая активация во время вызванной кией кокаиновой тяги. Am J Psychiatry. 1999; 156: 11-18. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Амфетамин увеличивает фосфорилирование внеклеточных сигнально-регулируемых киназ и транскрипционных факторов в стриатуме крысы через рецепторы метаботропного глутамата группы I. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII регулирует фосфорилирование ERK1 / 2, вызванное амфетамином, в полосатых нейронах. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Общество поведенческой нейроэндокринологии. Том 44. Цинциннати, Огайо: гормоны и поведение; 2003. Поражения медиальной префронтальной коры не нарушают сексуального поведения у самцов крыс; п. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Препараты, злоупотребляемые людьми, преимущественно повышают концентрацию синаптических дофаминов в мезолимбической системе свободно движущихся крыс. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274-5278. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Спаривание активирует NMDA-рецепторы в медиальной преоптической области самцов крыс. Поведенческая нейронаука. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Предикторы сексуального риска среди новых потребителей наркотиков. Журнал сексуальных исследований. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Фармакотерапия метамфетаминовой зависимости: обновление. Злоупотребление алкоголем или наркотиками. 2008; 29: 31-49. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  26. Эверитт BJ. Сексуальная мотивация: нейронный и поведенческий анализ механизмов, лежащих в основе аппетитных и копулятивных ответов самцов крыс. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Взаимодействия между миндалевидной и вентральной полосатой в ассоциациях стимула-вознаграждения: исследования, использующие график сексуального подкрепления второго порядка. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Исследования инструментального поведения с сексуальным усилением у самцов крыс (Rattus norvegicus): I. Контроль с помощью коротких визуальных раздражителей в сочетании с восприимчивой самкой. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Ассоциативные процессы в зависимости и вознаграждении Роль амигдала-вентральных стриатальных подсистем. Анналы Нью-Йоркской академии наук. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Исследования инструментального поведения с сексуальным усилением у самцов крыс (Rattus norvegicus): II. Воздействие преоптических поражений области, кастрации и тестостерона. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, см. RE. Нейроциркуляция наркомании: обзор. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  32. Фергюсон С.М., Нортон К.С., Уотсон С.Я., Акил Х, Робинсон Т.Е. Выраженная амфетамином экспрессия мРНК c-fos в каудате-putamen: влияние антагонистов DA и NMDA-рецепторов варьируется в зависимости от фенотипа нейронов и экологического контекста. Журнал нейрохимии. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Динамические изменения приращения дофамина в ядре при эффекте Кулиджа у самцов крыс. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Содействие сексуальному поведению и усиленному дофаминовому эффекту в ядре акцепсов самцов крыс после индуцированной D-амфетамином поведенческой сенсибилизации. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Содействие сексуальному поведению у крыс-мужчин после индуцированной d-амфетамином поведенческой сенсибилизации. Психофармакологии. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Амфетамин и метамфетамин по-разному влияют на допамин-транспортеры in vitro и in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  37. Грейс А.А., Розенкранц Я.А. Регуляция условных ответов базолатеральных нейронов миндалины. Физиология и поведение. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Активация цепей памяти во время вызванной кией кокаиновой тяги. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040-12045. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  39. Зеленый А.И., Халкитис ПН. Кристаллический метамфетамин и сексуальная социальность в городской гей-субкультуре: выборная близость. Культура, здоровье и сексуальность. 2006. 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, см. RE. Диссоциация первичных и вторичных целевых лимбических ядер на животной модели рецидива. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormone-нейротрансмиттерные взаимодействия в борьбе с сексуальным поведением. Поведенческие исследования мозга. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Мужское сексуальное поведение. В: Pfaff DW и др., Редакторы. Гормон и поведение гормонов. Сан-Диего, Калифорния: Elsevier Science (США); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Допамин и серотонин: влияние на мужское сексуальное поведение. Физиология и поведение. 2004. 83: 291–307. [PubMed]
  44. Исикава К, Нитта А, Мизогучи Х, Мохри А, Мурай Р., Миямото Й, Нода Й, Китаити К., Ямада К., Набешима Т. Эффекты однократного и повторного применения метамфетамина или морфина на экспрессию гена нейрогликана С в мозге крысы. Международный журнал нейропсихофармакологии. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Условные предпочтения места (CPP) к высококалорийным «закускам» в штаммах крыс, генетически подверженных резистентности к ожирению, вызванному диетой: устойчивость к блокаде налтрексона. Фармакология Биохимия и поведение. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Ярош П.А., Сехон П., Косчина Д.В. Влияние опиоидного антагонизма на условные предпочтения места для закуски. Фармакология Биохимия и поведение. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Импульсивность, возникающая в результате лобовой боли при злоупотреблении наркотиками: последствия для контроля поведения посредством стимулов, связанных с вознаграждением. Психофармакология (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Каливас П.В., Волков Н.Д. Нейронная основа зависимости: патология мотивации и выбора. Am J Psychiatry. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Келли А.Е. Память и зависимость: общие нейронные схемы и молекулярные механизмы. Neuron. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Противоположные роли ямы и передней боковой области гипоталамуса в борьбе с сексуальным поведением у самцов крысы. Европейский журнал неврологии. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Каннабиноиды потенцируют эмоциональное обучение. Пластичность в нейронах медиальной префронтальной коры через входы Базолатеральной Амигдалы. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, см. RE. Потенциальное восстановление поведения, вызванного кокаином, после инфузии D-амфетамина в базалатеральную амигдалу. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Повторные экспозиции усиливают, а не уменьшают полезное действие амфетамина, морфина и кокаина. Психофармакология (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Лю YC, Sachs BD, Salamone JD. Сексуальное поведение у крыс-самцов после радиочастотных или допамин-разрушающих поражений в ядре accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Боковой гипоталамовый серотонин ингибирует ядро ​​аксамбса допамина: последствия для сексуального насыщения. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Влияние антагониста D1 и сексуального опыта на индуцированную копуляцией Фос-подобную иммунореактивность в медиальном преоптическом ядре. Исследование мозга. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Мартинес I, Паредес Р.Г. Только саморазрушающееся спаривание полезно для крыс обоих полов. Хорм Бехав. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, см. RE. Селективная инактивация дорсомедиальной префронтальной коры и базалатеральной миндалины ослабляет обусловленное восстановление потушенного поведения кокаина у крыс. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Митчелл Дж. Б., Стюарт Дж. Содействие сексуальному поведению у самцов крысы в ​​присутствии стимулов, ранее сопряженных с системными инъекциями морфина. Фармакология Биохимия и поведение. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Правила вознаграждения метамфетамином за счет внеклеточного сигнально-регулируемого киназа 1 / 2 / ets-like Gene-1 Сигнальный путь через активацию допамина NIDA ( Серия исследований: злоупотребление метамфетамином и аддикон. 2006 NIH Номер публикации 06-4210. [PubMed]
  61. Льготы SM, Clifton PG. Переоценка подкрепления и предпочтение условного места. Физиология и поведение. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Пути сексуального желания. Журнал сексуальной медицины. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Психофармакология сексуального поведения. В: Bloom FE, Kupfer DJ, редакторы. Психофармакология: четвертое поколение прогресса. Нью-Йорк: Ворон; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Последствия немедленной ранней индукции гена в мозге после половой стимуляции женских и мужских грызунов. Бюллетень исследований мозга. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Кондиционирование и сексуальное поведение: обзор. Хорм Бехав. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Дифференциальные эффекты антагонистов рецептора допамина на сексуальное поведение крыс-самцов. Психофармакологии. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Пирс Р.К., Кумаресан В. Мезолимбическая дофаминовая система: последний общий путь усиления эффекта злоупотребления наркотиками? Неврология и биоповеденческие обзоры. 2006. 30: 215–238. [PubMed]
  68. Кувшины К.К., Бальфур М.Е., Леман М.Н., Ричтанд Н.М., Ю.Л., Кулен Л.М. Сексуальный опыт вызывает функциональную и структурную пластичность в мезолимбической системе. Биологическая психиатрия. 2009 В прессе.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Дофаминовые колебания в ядре упиваются во время поддержания, вымирания и восстановления внутривенного введения Д-амфетамина. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Наркотики и сексуальные эффекты: роль типа наркотиков и пола. Журнал лечения злоупотребления психоактивными веществами. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Сексуальное поведение увеличивает экспрессию c-fos в переднем мозге мужской крысы. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Аккумуляторная активность во время множественного расписания для усиления воды и сахарозы у крыс. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Контроль над мышлением и уровни метаболизма мозга у лиц, злоупотребляющих метамфетамином. Биологическая психиатрия. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Кристалл метамфетамина и экстази отличаются по отношению к небезопасному сексу среди молодых геев. Канадский журнал общественного здравоохранения. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. См. RE. Нейронные субстраты обусловленного рецидивированием поведения, связанного с наркотиками. Фармакология Биохимия и поведение. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. См. RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Наркомания, рецидив и Амигдала. Анналы Нью-Йоркской академии наук. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Грант I. Мотивы, связанные с использованием метамфетамина среди ВИЧ-инфицированных мужчин, имеющих половые контакты с мужчинами. Журнал лечения злоупотребления психоактивными веществами. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Модель восстановления рецидива лекарств: история, методология и основные выводы. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Сенсибилизация к условным полезным эффектам кокаина: фармакологические и временные характеристики. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Сенсибилизация к условным полезным эффектам морфина: фармакология и временные характеристики. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Предикторы ВИЧ-инфицированного сексуального поведения в образце сообщества мужчин и женщин, употребляющих инъекционные наркотики. СПИД и поведение. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Использование метамфетамина и поведение в отношении сексуального риска у учащихся средней школы в США: выводы из опроса национальных рисков. Профилактика. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Эффекты допамина и NMDA-рецепторов на индуцированную кокаином экспрессию Fos в полосатом теле крыс Fischer. Исследование мозга. 2008; 1243: 1-9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, редактор. Мозговые карты: структура мозга крысы. Амстердам: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Сексуальное вознаграждение у самцов крыс: влияние сексуального опыта на условное место предпочтения, связанные с эякуляцией и интродукциями. Хорм Бехав. 2008 [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pages C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Вовлечение внеклеточного сигнально-регулируемого киназного каскада для полезных для кокаина свойств. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pages C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Захватывающие и не вызывающие привыкания препараты вызывают различные и специфические закономерности активации ERK в мозге мыши. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Регулирование каскада белковой фосфатазы позволяет конвергентным сигналам дофамина и глутамата активировать ERK в полосатом теле. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491-496. [Бесплатная статья PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Изменения в дофаминергической и глутаматергической передаче при индукции и экспрессии поведенческой сенсибилизации: критический обзор доклинических исследований. Психофармакология (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Нейронная активация после полового поведения в мозге мужской и женской крысы. Поведенческие исследования мозга. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Экситотоксические поражения базалатеральной миндалины нарушают приобретение кокаинового поведения в соответствии с графиком подкрепления второго порядка. Психофармакологии. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Мудрый РА. Нейробиология зависимости. Текущее мнение в нейробиологии. 1996; 6: 243-251. [PubMed]