DeltaFosB zprostředkovává epigenetickou desenzitizaci genu c-fos po chronické expozici amfetaminem (2008)

Abstraktní

Molekulární mechanismy, které jsou základem přechodu z rekreačního užívání drog na chronickou závislost, zůstávají špatně pochopeny. Jednou molekulou zapojenou do tohoto procesu je AFosB, transkripční faktor, který se hromadí ve striatu po opakované expozici léku a zprostředkovává senzitizované behaviorální reakce na psychostimulanty a další zneužívané drogy. Následné transkripční mechanismy, kterými AFOS reguluje léky indukované chování, jsou neúplně pochopeny. Již dříve jsme popsali mechanismy remodelace chromatinu, kterými ΔFosB aktivuje expresi určitých genů, avšak mechanismy, na nichž je založena geneFosB-zprostředkovaná genová represe, zůstávají neznámé. Zde se identifikujeme c-fos, okamžitý časný gen rychle indukovaný ve striatu po psychostimulační expozici, jako nový downstream cíl, který je potlačen AFosB. Ukazujeme, že akumulace AFosB ve striatu po chronické léčbě amfetaminem desenzibilizuje c-fos indukce mRNA na následující dávku léčiva. FOSB znecitlivuje c-fos exprese rekrutováním histon deacetylázy 1 (HDAC1) do c-fos genový promotor, který zase deacetyluje okolní histony a zeslabuje genovou aktivitu. V souladu s tím místní vyřazení HDAC1 ve striatu ruší desenzibilizaci amfetaminem indukovanou c-fos gen. Ve shodě s tím chronický amfetamin zvyšuje metylaci histonu H3 na c-fos promotor, modifikace chromatinu, o které je také známo, že potlačuje genovou aktivitu, jakož i úrovně exprese H3 histon methyltransferázy, KMT1A / SUV39H1. Tato studie odhaluje novou epigenetickou cestu, kterou AFOSB zprostředkovává odlišné transkripční programy a nakonec behaviorální plasticitu s chronickou expozicí amfetaminu.

Klíčová slova: závislost, amfetamin, striatum, chromatin, modifikace histonu, regulace genu

Úvod

Opakované užívání psychostimulancií, jako je amfetamin a kokain, často vede k přechodu z rekreačního užívání drog do chronicky závislého stavu (). Jeden mechanismus zahrnutý v tomto procesu zahrnuje transkripční faktor ΔFosB, vysoce stabilní sestřihový produkt okamžitého časného genu fosB, který dimerizuje s proteiny Jun rodiny za vzniku funkčních transkripčních komplexů AP-1 (). ΔFosB se hromadí několikrát ve striatu po opakované expozici zneužívaným drogám a tato akumulace je spojena se zvýšenou odměnou za kokain, lokomotorickou senzibilizací a vlastním podáváním (; ; ), které společně naznačují roli v nervových mechanismech zapojených do přechodu mezi rekreačním a závislým užíváním drog. Podle této hypotézy funguje ΔFosB ve smyčce pozitivní zpětné vazby zvýšením chování při hledání léků, které zase indukuje více ΔFosB. Jednou z klíčových nevyřešených otázek je, jak osFosB zprostředkovává své účinky na chování související s drogami. Studie microarray na genomech u myší, které nadměrně exprimují ΔFosB ve striatu, poskytly první vhled do potenciálních cílových cílů (). Tato studie naznačuje, že AFos může sloužit jako transkripční aktivátor nebo represor v závislosti na cílovém genu. Studie však zkoumala transkripty regulované v nastavení nadměrné exprese, takže není jasné, které z těchto genů jsou přímé, fyziologické cíle FosB.

Nedávno jsme identifikovali cyklin-dependentní kinázu 5 (cdk5) gen jako přímý cíl pro endogenní AFosB, který propaguje Cdk5 transkripce ve striatu (). Mechanismy podílející se na potlačení FOSB cílových genů však zůstaly nepolapitelné. Jeden atraktivní kandidát je c-fos, gen, který je dramaticky indukován akutními psychostimulanty, ale pouze slabě po opakované expozici (; ; ), jsou-li hladiny komplexů AP-1 obsahujících AFosB a FosB (, ). Od roku c-fos gen obsahuje ve svém proximálním promotoru místo podobné AP-1 (), je to věrohodný kandidát pro osFosB-zprostředkovanou represi. Indukce c-fos je tradičně vnímán jako časný marker nervové aktivace, protože je rychle a přechodně indukován v reakci na různé podněty (). c-fos Gen je také důležitý pro behaviorální reakce na kokain, protože myši chybí c-fos v neuronech obsahujících dopaminový D1 receptor, typ neuronových buněk, kde ΔFosB je indukován psychostimulanty (), mají sníženou senzibilizaci chování na kokain (). Tato zjištění nás vedla k prozkoumání, zda kontroly FOSB c-fos genová aktivita po chronické expozici amfetaminu. Popisujeme zde nový epigenetický mechanismus, kterým se akumulace ΔFosB v reakci na chronický amfetamin vrací zpět do desenzibilizace c-fos indukce na následné dávky léku. Tato nová souhra ΔFosB a událostí remodelace chromatinu na c-fos promotor může být důležitým homeostatickým mechanismem pro regulaci citlivosti zvířete na opakovanou expozici léku.

Materiály a metody

Izolace a kvantifikace RNA

Zmrazená mozková tkáň byla rozmrazena v TriZol (Invitrogen, Carlsbad, CA) a zpracována podle protokolu výrobce. RNA byla purifikována pomocí RNAesy Micro kolon (Qiagen, Valencia, CA). Celková RNA byla reverzně transkribována pomocí Superscript III (Invitrogen). PCR v reálném čase pak byla prováděna s použitím SYBR Green (ABI, Foster City, CA) a kvantifikována pomocí metody ACt. Vidět Doplňková tabulka pro kompletní seznam primerů.

Chromatinová imunoprecipitace (ChIP)

Chromatin byl sonikován a poté imunoprecipitován (viz Doplňkové metody) za použití acetylovaných histonových protilátek (Millipore, Billerica, MA), anti-HDAC1 nebo anti-H3K9me2 od Abcam (Cambridge, Velká Británie), anti-FosB (C-terminus) (), anti-FosB (N-terminus) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, stát) nebo králičí IgG kontrola (Millipore). IP byl odebrán s použitím perliček proteinu A od Millipore. Po promytí byl chromatin eluován z kuliček a reverzně zesíťován v přítomnosti proteinázy K. DNA byla poté purifikována a kvantifikována pomocí PCR v reálném čase.

Imunoprecipitace

Buňky PC12 byly transfekovány pomocí V5-značeného HDAC1 (), FosB nebo osFosB, jak bylo popsáno výše (). Buněčné lyzáty byly rozděleny a inkubovány buď s neimunními IgG (Sigma) nebo anti-FosB protilátkami (sc-48, Santa Cruz) přes noc při 4 ° C. Imunoprecipitace byla prováděna s perličkami proteinu G (Sigma). Imunoprecipitované proteiny byly analyzovány pomocí SDS-PAGE a analyzovány westernovým přenosem za použití obvyklé polyklonální anti-FosB (N-terminus) protilátky () a anti-V5 protilátka (Abcam). K určení, zda jsou HDAC1 a ΔFosB vazebnými partnery in vivojsme použili opakované elektrokonvulzivní záchvaty k indukci vysokých hladin ΔFosB proteinu (). Kortikální tkáň byla vyříznuta z chronických (7 denně) křečí nebo falešně ošetřených potkanů, lyžována a imunoprecipitována, jak je popsáno výše, s anti-HDAC1 protilátkami (Abcam).

Mikrodisekce laserem

Pomocí stereotaktické chirurgie byly ventrální striata myší infikovány adeno-asociovaným virem (AAV) exprimujícím uvedený gen nebo GFP na opačných stranách mozku. Po ošetření amfetaminem byly zmrazené mozky zpracovány na 8 um silné koronální řezy a namontovány na membránová sklíčka (Lieca, Wetzlar, Německo). Oblasti infikované AAV byly disekovány laserem (Leica), aby se vyloučily neinfikované buňky a byly zpracovány pomocí extrakční soupravy PicoPure RNA (MDS, Sunnyvale, CA). RNA byla amplifikována pomocí soupravy RiboAmp HS (MDS) a reverzně přepsána, jak je popsáno výše. Vidět Doplňkové metody Veškeré podrobnosti.

výsledky

FOSB znecitlivuje c-fos Indukce mRNA ve striatu po chronické expozici amfetaminu

Zjistit, zda znecitlivění c-fos Exprese mRNA je buněčná adaptace řízená AFOSB, ošetřovali jsme krysy fyziologickým roztokem nebo akutním nebo chronickým amfetaminem a nechali jsme je stáhnout do své domácí klece po dobu 1 až 10 dní. Krysy byly poté analyzovány 1 h po stimulované dávce fyziologického roztoku nebo amfetaminu. Jak bylo prokázáno dříve (viz Úvod), c-fos mRNA byla indukována 4-krát ve striatu akutním podáním amfetaminu. U potkanů, kteří byli dříve vystaveni chronickému amfetaminu, se však projevuje c-fos v reakci na výzvu k léku byl významně zmírněn až po 5 dní po vysazení léku (Obrázek 1A), ve kterém ΔFosB zůstává v této mozkové oblasti zvýšená (). Kromě toho jsme u krys, které byly odebrány z chronického amfetaminu po dobu 5 dní, jsme zjistili, že bazální c-fos Exprese mRNA byla snížena pod hladiny nalezené v kontrolních vzorcích ošetřených fyziologickým roztokem (Obrázek 1A). Důležité je, že velikost c-fos indukce k amfetaminové expozici byla významně oslabena v den 1 od vysazení ve srovnání se zvířaty ošetřenými fyziologickým roztokem. Společně tato zjištění ukazují účinek chronického amfetaminu na bazální i indukovaný c-fos hladiny mRNA, i když se dvěma účinky dochází s komplexním časovým průběhem.

Obrázek 1  

FOSB znecitlivuje c-fos Indukce mRNA ve striatu po chronické expozici amfetaminu

K určení, zda akumulace AFOS po chronickém amfetaminu přímo přispívá k desenzibilizaci c-fos exprese, nejprve jsme provedli ChIP pro ΔFosB na c-fos genový promotor ve striatu. Jak je uvedeno v Obrázek 1Bse c-fos promotor se významně více vázá na FosB po chronické expozici amfetaminu, což je účinek pozorovaný po dobu alespoň 5 dnů po vysazení léku. Tato data korelují obsazenost AFOS na c-fos promotor s kinetikou redukce c-fos genová aktivita. Dále přímo vyzkoušejte, zda ΔFosB způsobuje snížení c-fos indukci v reakci na amfetaminovou výzvu, použili jsme AAV vektor k nadměrné expresi ΔFosB nebo GFP jako kontroly ve striatu. Infikované striatum jsme poté izolovali laserovou mikrodisekcí (Obrázek 1C) a provedli qRT-PCR pro c-fos mRNA. Pozorovali jsme výrazně méně c-fos mRNA indukovaná po akutní dávce amfetaminu ve striatální tkáni infikované AAV-ΔFosB ve srovnání s kontralaterální stranou infikovanou AAV-GFP, zatímco hladiny P-tubulin mRNA zůstala nezměněna (Obrázek 1D). Tato data naznačují, že c-fos desenzibilizace je zprostředkována akumulací AFosB na jeho promotoru po chronické expozici amfetaminu.

ΔFosB rekrutuje HDAC1 na c-fos promotér zprostředkovat c-fos genová represe

Prozkoumat mechanismy, kterými ΔFosB zprostředkovává c-fos desenzibilizace, zaměřili jsme se na čas, ve kterém c-fos byl nejvýznamněji potlačen: 5 dní po vysazení chronického amfetaminu. Klíčový mechanismus zapojený do c-fos aktivace v reakci na různé podněty, včetně kokainu (), je acetylace histonu. Měli jsme tedy zájem zjistit, zda se histonová acetylace na c-fos genový promotor byl také indukován akutním amfetaminem a to, zda opakovaná expozice léku tuto reakci oslabila. Akutní amfetamin skutečně zvýšil acetylaci histonu H4 na c-fos promotor a po chronické léčbě amfetaminem tato indukce již nebyla pozorována (Obrázek 2A). Acetylace H4 byla specifická, protože nebyl pozorován žádný účinek pro H3 (není zobrazen). Tato data naznačují, že snížená acetylace histonu, spojená s kompaktnější a neaktivní strukturou chromatinu (), přispívá k znecitlivění c-fos gen po chronické expozici amfetaminu. Pro přímé testování této hypotézy jsme ošetřili krysy chronickým amfetaminem a po 5 dnech od stažení jsme podali inhibitor HDAC, butyrát sodný nebo jeho vehikulum. Zjistili jsme, že butyrát sodný zvrátil amfetaminem indukovanou represi c-fos výraz (Obrázek 2B), přímo podporující myšlenku hypoacetylace na internetu c-fos promotor je klíčový mechanismus spočívající v desenzibilizaci genu.

Obrázek 2  

Nábor HDAC1 zprostředkovává akci FosB na c-fos

Abychom pochopili, jak ΔFosB inhibuje acetylaci histonu na c-fos Jako promotor jsme zkoumali, zda AFosB interaguje s enzymy, které snižují acetylaci histonu, konkrétně HDAC. Nejprve jsme prozkoumali HDAC1 a HDAC2, protože tyto enzymy tvoří komplexy s řadou transkripčních faktorů, které potlačují expresi genů (). Od předběžných studií ChIP bylo zjištěno významné vázání HDAC1 na c-fos promotor (viz níže), ale žádný detekovatelný HDAC2 (není zobrazen), provedli jsme koimunoprecipitační experimenty, abychom určili, zda AFosB fyzicky interaguje s HDAC1. Ve skutečnosti jsme zjistili, že imunoprecipitace AFosB také potlačila HDAC1 v buňkách PC12 (Obrázek 2D). Důležité je, že tato interakce je specifická pro ΔFosB, jako FosB s plnou délkou, který se po chronickém psychostimulačním podání nehromadí (), nekomunikoval s HDAC1. Provedli jsme opačný experiment in vivo indukcí velkého množství AFOS s elektrokonvulzivními záchvaty. V souladu s našimi údaji o buněčné kultuře imunoprecipitace protilátkou proti HDAC1 stáhla ΔFosB z mozkové tkáně (Obrázek 2E).

Na základě těchto zjištění ΔFosB a HDAC1 fyzicky interagují in vitro a in vivo, předpokládali jsme, že chronicFosB po chronickém amfetaminu rekrutuje HDAC1 do c-fos genový promotor. Ve skutečnosti ChIP striatálních lyzátů našel výrazně vyšší hladinu HDAC1 na internetu c-fos promotor po chronické expozici amfetaminu (Obrázek 2C), zatímco amfetamin nezměnil vazbu HDAC1 na p-aktin genový promotor. Chcete-li přímo určit, zda HDAC1 stačil k útlumu c-fos indukci, transfekovali jsme HEK293T buňky pomocí HDAC1 nebo GFP a stimulovali je 5% sérem (viz Doplňkové metody). Zjistili jsme, že to indukuje sérum c-fos exprese byla významně snížena v buňkách nadměrně exprimujících HDAC1 (Obrázek 2F). Tyto studie byly rozšířeny in vivo použitím floxovaných HDAC1 myší infikovaných AAV-GFP na jedné straně jejich striata a AAV-CreGFP k vyvolání lokálního knockoutu hdac1 gen v kontralaterálním striatu. AAV-CreGFP se snížil Hdac1 Exprese mRNA v infikované tkáni (izolovaná laserovou mikrodisekcí) o> 75% ve srovnání s kontrolami injikovanými AAV-GFP, zatímco Hdac2 výraz zůstal nezměněn (Obrázek 2G). Myši byly poté ošetřeny chronickým amfetaminem a následně 5 dny vysazeno. Myši byly analyzovány 30 minut po amfetaminové expozici a infikované striatální oblasti byly mikrodisekovány. Zjistili jsme, že amfetamin indukuje výrazně více c-fos mRNA ve striatální tkáni infikované AAV-CreGFP ve srovnání s AAV-GFP (Obrázek 2G), což dokazuje, že HDAC1 je nezbytný pro chronickou amfetaminem indukovanou represi c-fos výraz. Tato data naznačují, že akumulace AFOSB u potkanů ​​po chronické léčbě amfetaminem vede k většímu vázání AFOSB na c-fos promotor, nábor HDAC1, menší acetylace histonu a nakonec menší aktivita genu.

Metylace histonu je zvýšena na c-fos promotor po chronické expozici amfetaminu

Represe genové aktivity často zahrnuje několik epigenetických modifikací, ke kterým dochází paralelně (; ). Jednou z nejlépe charakterizovaných modifikací histonu spojenou se sníženou genovou aktivitou je methylace histonu H3 na lysinu 9 (H3K9). Tato modifikace histonu, je-li nalezena v promotorových oblastech, je spojena s transkripční represí rekrutováním ko-represorů, jako je HP1 (heterochromatinový protein 1) (). Proto jsme analyzovali, zda hypoacetylace c-fos Gen, pozorovaný po chronickém podání amfetaminu, je také spojen se změnami methylace H3K9. V souladu s touto hypotézou ChIP prováděné na striatální tkáni potkanů ​​ošetřených chronickým amfetaminem odhalilo, že di-methylovaný H3K9 (H3K9me2) byl významně zvýšen na c-fos promotér (Obrázek 3A), účinek nebyl pozorován na p-aktin genový promotor. Jedním z klíčových enzymů, který zprostředkovává methylaci H3K9, je KMT1A / SUV39H1, který vyvolává otázku, zda byla exprese tohoto enzymu regulována chronickou expozicí amfetaminu. Provedli jsme qRT-PCR na striatu potkanů ​​ošetřených chronickým amfetaminem a pozorovali jsme významnou upregulaci Kmt1a / Suv39h1 mRNA, zatímco odlišný enzym modifikující chromatin, Hdac5, zůstaly nedotčeny (Obrázek 3B). Na rozdíl od HDAC1 však koimunoprecipitační experimenty neodhalily žádnou detekovatelnou interakci mezi AFOS a KMT1A / SUV39H1, ani jsme nebyli schopni identifikovat významné obohacení methyltransferázy na c-fos promotor pomocí ChIP (není zobrazen). Bez ohledu na to tato zjištění naznačují, že upregulace KMT1A / SUV39H1 může hypermethylovat H3 na c-fos a přispět k omezení mechanismů c-fos genová aktivita po chronické expozici amfetaminu.

Obrázek 3  

Metylace histonu po chronické expozici amfetaminu

Diskuse

Tato studie byla identifikována c-fos jako nový downstream cílový gen AOSos ve striatu po chronickém podání amfetaminu. Poskytujeme přímý důkaz, že se endogenní ΔFosB váže na c-fos promotor in vivo, kde AFOS rekrutuje HDAC1 k deacetylaci okolních histonů a ke snížení transkripční aktivity c-fos gen. Farmakologická inhibice HDAC a indukovatelné knockout HDAC1 byly dostatečné ke zmírnění c-fos znecitlivění a zvýšení c-fos exprese ve striatu u zvířat ošetřených chronickým amfetaminem. Našli jsme také souběžné zvýšení represivní metylace histonu na H3K9 na internetu c-fos promotor, adaptace spojená s amfetaminem indukovanou upregulací histonmethyltransferázy, KMT1A / SUV39H1. Společně tato zjištění poskytují v zásadě nový pohled na mechanismy, kterými ΔFosB potlačuje aktivitu určitých genů, a ilustruje novou souhru mezi dvěma klíčovými cestami, které řídí behaviorální reakce na psychostimulanty: osFosB indukce () a remodelace chromatinu (). Naše zjištění ukazují, jak se tyto dvě cesty sbíhají c-fos promotor po chronické expozici amfetaminu ke změně aktivity genu.

Nejprve jsme pozorovali desenzibilizaci c-fos Exprese mRNA po chronické léčbě kokainem před 15 lety (), ale nebyl k dispozici žádný mechanistický pohled na to, jak by mohlo dojít k tak výrazně odlišným transkripčním odpovědím mezi akutní versus chronickou expozicí léku. Ve snaze porozumět následným činnostem ΔFosB jsme znovu provedli kontrolu nad c-fos výraz kvůli této rozdílné regulaci mezi akutní a chronickou expozicí psychostimulancií. Protože ΔFosB je několikrát zvýšen po chronické expozici léčivu, tato diferenciální indukce c-fos mRNA, stejně jako místo podobné AP-1 c-fos proximální promotor, navrhl potenciální regulační roli pro FosB. Toto také dělalo c-fos gen přitažlivý kandidát, se kterým studovat represivní účinky AFOSB na genovou expresi ().

Chronický amfetamin zeslabil c-fos indukce mRNA nebo její základní hladiny ve striatu po dobu přibližně 5 dnů po vysazení léku, časový průběh, který je v souladu se stabilitou AFosB () a jeho obsazenost na c-fos promotor. Přestože ΔFosB lze detekovat i po delším období stažení, v průběhu času postupně klesá (; ) a může být nedostatečná k udržení represí c-fos gen daleko za 5 denním časovým bodem. Nicméně časový průběh c-fos desenzibilizace je komplexní, s potlačením její násobné indukce amfetaminovým stimulačním maximem v 1 den odstoupení, ale potlačení jejích bazálních hladin maximum v 5 dnech odstoupení. Naše ChIP data ukazují, že ΔFosB je vázán na c-fos promotor v obou časových bodech, což naznačuje, že rozdílná aktivita c-fos Gen pozorovaný mezi 1 a 5 dny od odstoupení může být způsoben dalšími transkripčními regulátory přijatými do genu s velmi komplikovaným časovým průběhem. K pochopení podrobných zapojených mechanismů jsou zapotřebí další studie.

Význam chování zprostředkovaného AFOSB c-fos desenzibilizace může být homeostatická, protože myši, kterým chybí c-fos gen v neuronech obsahujících receptor dopaminu D1 vykazuje snížené behaviorální odpovědi na kokain (). Kromě toho inhibitory HDAC, které blokují AFosB-zprostředkovanou desenzibilizaci c-fos, zvýšit citlivost zvířete na behaviorální účinky kokainu (; ). Tato zjištění naznačují, že zatímco ΔFosB je čistým účinkem, je podporovat senzitizované behaviorální reakce na psychostimulanty (; ), iniciuje také nový transkripční program c-fos znecitlivění, aby se omezila velikost stejného chování. FOSB by ve skutečnosti titroval behaviorální reakce na psychostimulanty prostřednictvím komplexní řady downstream transkripčních událostí, zahrnujících indukci nebo represi mnoha cílových genů (), které kromě zde uvedeného genu kódujícího c-Fos zahrnují také podjednotku glutamátového receptoru AMPA GluR2 (), serin-threonin kináza Cdk5 () a opioidní peptid dynorfin (), mezi ostatními (). Některé z těchto genů jsou aktivovány AFOSB (kde AFOSB přijímá transkripční koaktivátory) (), zatímco ostatní jsou potlačeni ΔFosB (kde ΔFosB, jak je zde ukázáno, rekrutuje transkripční ko-represory). Hlavním úkolem budoucího výzkumu je identifikovat faktory, které určují, zda AFos aktivuje nebo potlačuje cílový gen, když se váže na promotor genu.

Celkově naše zjištění identifikují nový epigenetický mechanismus, jehož prostřednictvím ΔFosB zprostředkuje část svých transkripčních účinků ve striatu po chronické expozici amfetaminu. Tato studie také poskytuje důležité nové poznatky o základních transkripčních a epigenetických mechanismech in vivo podílející se na desenzibilizaci (tj. toleranci) rozhodujícího genu pro psychostimulačně indukované behaviorální reakce.

 

Doplňkový materiál

Poděkování

Tato práce byla podpořena granty od NIDA

Reference

  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Účinky chronické expozice kokainu jsou regulovány neuronálním proteinem Cdk5. Příroda. 2001: 410: 376 – 380. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomálně závislý a nezávislý mechanismus pro destabilizaci FosB: identifikace FosB degron domén a důsledky pro stabilitu DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Nadměrná exprese DeltaFosB specifického pro typ buňky zvyšuje motivaci kokainu. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  • Grozinger CM, Schreiber SL. Enzymy deacetylázy: biologické funkce a použití inhibitorů s malou molekulou. Chem Biol. 2002; 9: 3 – 16. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulace okamžité časné genové exprese a vazby AP-1 v jádru krysy akumuluje chronický kokain. Proc Natl Acad Sci US A. 1992: 89: 5764 – 5768. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Naděje BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukce dlouhotrvajícího AP-1 komplexu složeného ze změněných proteinů typu Fos v mozku chronickým kokainem a dalšími chronickými léčebnými postupy. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. Neurální mechanismy závislosti: role odměňování a paměti. Annu Rev Neurosci. 2006; 29: 565-598. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Exprese transkripčního faktoru deltaFosB v mozku řídí citlivost na kokain. Příroda. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  • Kouzarides T. Chromatinové modifikace a jejich funkce. Buňka. 2007; 128: 693 – 705. [PubMed]
  • Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatinová remodelace je klíčovým mechanismem, který je základem plasticity vyvolané kokainem ve striatu. Neuron. 2005; 48: 303 – 314. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulace genové exprese a odměny kokainu CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulární přepínač pro dlouhodobou adaptaci v mozku. Brain Res Mol Brain Res. 2004: 132: 146 – 154. [PubMed]
  • Montgomery RL, Davis CA, Potthoff MJ, Haberland M, Fielitz J, Qi X, Hill JA, Richardson JA, Olson EN. Histon deacetylázy 1 a 2 redundantně regulují srdeční morfogenezi, růst a kontraktilitu. Genes Dev. 2007; 21: 1790 – 1802. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimul-transkripční vazba v neuronech: úloha buněčných bezprostředně časných genů. Trendy Neurosci. 1989: 12: 459 – 462. [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologické studie regulace chronické indukce antigenu FOS souvisejícího s kokainem v striatu a nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  • Persico AM, Schindler CW, O'Hara BF, Brannock MT, Uhl GR. Exprese faktoru transkripce mozku: účinky akutního a chronického amfetaminu a injekční stres. Brain Res Mol Brain Res. 1993; 20: 91–100. [PubMed]
  • Renthal W, Maze I, Krishnan V, Covington HE, 3rd, Xiao G, Kumar A, Russo SJ, Graham A, Tsankova N, Kippin TE, Kerstetter KA, Neve RL, Haggarty SJ, McKinsey TA, Bassel-Duby R, Olson EN, Nestler EJ. Histon deacetyláza 5 epigeneticky řídí přizpůsobení chování chronickým emočním podnětům. Neuron. 2007; 56: 517 – 529. [PubMed]
  • Steiner H, Gerfen CR. Kokainem indukovaná c-fos messengerová RNA je nepřímo spjata s expresí dynorphinu ve striatu. J Neurosci. 1993; 13: 5066 – 5081. [PubMed]
  • Tsankova N, Renthal W, Kumar A, Nestler EJ. Epigenetická regulace u psychiatrických poruch. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 355 – 367. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Podstatná role DeltaFosB v nucleus accumbens při morfinovém působení. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos usnadňuje získávání a zánik trvalých změn vyvolaných kokainem. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]