bron
Afdeling Cel- en Neurobiologie, Keck School of Medicine, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, VS.
Abstract
Anabole-androgene steroïde (AAS) misbruik is wijdverbreid. Bovendien versterken AAS, zoals blijkt uit zelftoediening bij knaagdieren. De receptoren die de versterkende effecten van AAS transduceren, zijn echter onduidelijk. AAS kan binden aan klassieke nucleaire androgeenreceptoren (ARs) of membraanreceptoren. We hebben twee benaderingen gebruikt om de rol van nucleaire AR's in AAS-zelfbeheer te onderzoeken. Eerst testten we de zelftoediening door androgeen bij ratten met de testis-feminisatiemutatie (Tfm), die interfereert met de androgeenbinding. Als nucleaire AR's essentieel zijn voor AAS-zelftoediening, dienen Tfm-mannetjes geen zelf-toedienende androgenen toe te dienen. Tfm-mannetjes en wildtype (WT) nestgenoten hebben zelf toegediend het niet-aromatizable androgeen dihydrotestosteron (DHT) of intracerebroventriculair vehikel (ICV) in FR-schema's tot FR5. Zowel Tfm- als WT-ratten kregen een voorkeur voor de actieve neuspoke tijdens DHT-zelftoediening (66.4 + / - 9.6 responsen / 4 h voor Tfm en 79.2 + / - 11.5 voor WT responsen / 4 h), en neuspokken namen toe als de FR-eis verhoogd. Voorkeurscores waren significant lager bij het zelf-toedienende voertuig van ratten (42.3 + / - 5.3 responsen / 4 h voor Tfm en 19.1 + / - 4.0 responsen / 4 h voor WT). We hebben ook zelftoediening van DHT geconjugeerd aan runderserumalbumine (BSA) bij C3 en C17 getest, die beperkt is tot acties aan het celoppervlak. Hamsters mochten zelf DHT-, BSA- en DHT-BSA-conjugaten zelf toedienen voor 15-dagen op FR1. De hamsters vertoonden een significante voorkeur voor DHT (18.0 +/- 4.1 responsen / 4 h) of DHT-BSA conjugaten (10.0 +/- 3.7 responsen / 4 h en 21.0 +/- 7.2 responsen / 4 h), maar niet voor BSA (2.5 + / -2.4 antwoorden / 4 h). Samengenomen tonen deze gegevens aan dat nucleaire AR's niet vereist zijn voor zelfsturing door androgeen. Verder kan androgeen zelftoediening worden gemedieerd door plasmamembraanreceptoren.
Copyright 2010 Elsevier Ltd. Alle rechten voorbehouden.
Anabole-androgene steroïden (AAS) zijn drugs van misbruik. Deze testosteron (T) -derivaten worden gebruikt voor atletische en esthetische doeleinden (Yesalis et al., 1993). Bijwerkingen variëren van hypogonadisme en gynaecomastie tot hart- en leverstoornissen (Leshner, 2000). Bovendien groeit het bewijs dat AAS-misbruik stemmingsveranderingen veroorzaakt (Pope en Katz, 1994), agressie (Choi en paus, 1994, Kouri et al., 1995), en kan afhankelijk zijn (Brower et al., 1991, Brower, 2002). Ondanks de groeiende bezorgdheid zijn de onderliggende mechanismen van AAS-misbruik nog niet goed begrepen.
Bij mensen wordt betoogd dat de start van het gebruik van AAS grotendeels wordt gemotiveerd door anabole effecten, maar dat sommige misbruikers uiteindelijk afhankelijkheid ontwikkelen (Brower, 2002). Bewijs uit dieronderzoek ondersteunt deze hypothese. AAS induceren geconditioneerde plaatsvoorkeur (CPP) bij muizen (Arnedo et al., 2000) en ratten (Packard et al., 1997, Packard et al., 1998, Frye et al., 2002). Bovendien consumeren hamsters vrijwillig AAS via orale (Hout, 2002), intraveneus (Wood et al., 2004) en intracerebroventriculaire (ICV) zelftoediening (DiMeo and Wood, 2004, Triemstra en Wood, 2004, Wood et al., 2004, DiMeo and Wood, 2006b).
Hoewel ICV-zelftoediening centrale plaatsen van actie suggereert, zijn de specifieke hormonen en receptoren die AAS-versterking mediëren, onduidelijk. Huidig bewijs suggereert dat de versterkende effecten van T worden gemedieerd door androgenen, in plaats van door oestrogenen na aromatisering. Mannelijke hamsters zullen zelf dihydrotestosteron (DHT; DiMeo and Wood, 2006b) en andere niet-aromatizable androgenen (Ballard en Wood, 2005). Bovendien wordt T-zelftoediening geblokkeerd door het anti-androgeen-flutamide (Peters en Wood, 2004). De vraag wordt nu: hoe wordt het androgene signaal in de hersenen getransduceerd?
De androgeenreceptor (AR) is een klassieke nucleaire steroïdereceptor die functioneert als een transcriptiefactor. AR's zijn schaars in structuren geassocieerd met drugsmisbruik, zoals de nucleus accumbens (Acb) en het ventrale tegmentale gebied (VTA; Simerly et al., 1990, Wood en Newman, 1999). Er is ook bewijs voor gonadale steroïden die werken via celoppervlakreceptoren (Mermelstein et al., 1996, Zhu et al., 2003, Thomas et al., 2006, Vasudevan en Pfaff, 2007).
In de huidige studie hebben we twee benaderingen gebruikt om de rol van klassieke nucleaire AR in androgeenversterking te bepalen. Om mogelijke activering van oestrogeenreceptoren (ER) te minimaliseren, hebben we DHT-zelftoediening getest. In het eerste experiment werden ratten met de testis-feminisatiemutatie (Tfm) getest op ICV-zelftoediening van DHT. Tfm is een substitutie op basis van één base die resulteert in defecte AR's met beperkte ligandbinding (Yarbrough et al., 1990). Mannelijke Tfm-ratten vertonen een extern vrouwelijk fenotype vanwege onvoldoende androgene stimulatie tijdens de ontwikkeling (Zuloaga et al., 2008b). Als functionele AR's voor AAS zijn vereist voor AAS-versterking, mogen Tfm-ratten DHT niet zelf toedienen. In plaats daarvan konden Tfm-ratten DHT-zelftoediening verkrijgen. In het tweede experiment testten we ICV-zelftoediening van membraanondoorlatende vormen van DHT in hamsters. Wanneer DHT is geconjugeerd aan runderserumalbumine (BSA), zijn de werkingen beperkt tot celoppervlakreceptoren. Als nucleaire AR's zijn vereist voor androgeenversterking, dienen hamsters zelf DHT niet toe te dienen geconjugeerd aan BSA. Integendeel, de hamsters vertoonden een duidelijke voorkeur voor DHT geconjugeerd aan BSA. Samen laten deze studies zien dat nucleaire AR's niet vereist zijn voor zelfsturing door androgeen. In plaats daarvan kan androgeenversterking worden gemedieerd door membraan-AR's.
Methods and Materials
vakken
Ratten
Volwassen mannelijke Tfm-ratten en wildtype (WT) nestgenoten werden verkregen van een kolonie op de Michigan State University. Hun genotype werd geverifieerd met PCR, vergelijkbaar met eerder beschreven methoden (Fernandez et al., 2003). In het kort werden oorklemmen gedurende de nacht gedigereerd bij 55 ° C in lysisbuffer die proteinase K bevat, vervolgens hitte geïnactiveerd bij 95 ° gedurende 30 minuten. AR werd geamplificeerd met behulp van de voorwaartse primer 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'en omgekeerde primer 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3', waardoor een 135bp-product werd verkregen. Geamplificeerde monsters werden vervolgens gedigereerd met Sau96I restrictie-enzym (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) overnacht bij 37 ° C en uitgevoerd op een 3% agarosegel. Alleen de WT AR wordt geknipt met dit restrictie-enzym, waardoor twee banden onder 100bp blijven, terwijl de Tfm AR ongesneden blijft. Tfm-dieren werden ook geverifieerd door fenotype, door de aanwezigheid van tepels, vrouwelijke ano-genitale afstand en abdominale teelballen. Tfm-ratten zijn eerder gebruikt om niet-genomische androgeeneffecten in de hippocampus aan te tonen (MacLusky et al., 2006). Aan het begin van het experiment waren WT-ratten tussen 75 tot 140 een dag oud en Tfm-ratten waren tussen 75 en 138 een dag oud.
hamsters
Volwassen mannelijke Syrische hamsters (130 - 150 g) werden verkregen van Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Dieren werden afzonderlijk op een omgekeerde lichtcyclus gehuisvest (14L: 10D) met voedsel en water beschikbaar ad libitum. Alle experimentele procedures werden goedgekeurd door institutionele dierenzorg en gebruikscommissies van de respectieve instellingen en uitgevoerd in overeenstemming met de Handleiding voor verzorging en gebruik van laboratoriumdieren (NationalResearchCouncil, 1996).
Chirurgie
Alle dieren werden geïmplanteerd met een 22g roestvrijstalen geleidecanule (Plastic One, Roanoke, VA) in het laterale ventrikel [rat: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ~ -5.0 (Paxinos en Watson, 1998); hamster: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ~ -5.0 (Morin and Wood, 2001), mm van bregma], onder Na+ pentobarbital anesthesie (rat: 50 mg / kg, hamster: 100mg / kg) zoals eerder beschreven (Wood et al., 2004). Alle chirurgische procedures werden uitgevoerd onder aseptische omstandigheden volgens Principes van Laboratorium Dierverzorging (NIH, 1985). Dieren mochten gedurende ten minste een week na de operatie herstellen voor het testen.
Drugs
DHT, DHT-carboxymethyl-oxime (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisuccinaat (Hemis) en DHT-Hemis-BSA werden verkregen van Steraloids (Newport, RI). In DHT-CMO-BSA is DHT geconjugeerd aan BSA op de C3-positie met CMO als de linker. Evenzo is DHT gekoppeld aan BSA op de C17-positie via Hemis om DHT-Hemis-BSA te vormen. Beide DHT-CMO-BSA (Gatson et al., 2006) en DHT-Hemis-BSA (Braun en Thomas, 2003) zijn eerder gebruikt om mogelijke effecten van androgenen op het plasmamembraan te onderzoeken. DHT werd opgelost in een waterige oplossing van 13% ß-cyclodextrine (ß CD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) bij 1μg / μl. Zoals vastgesteld in onze vorige studie met hamsters, produceert deze dosis een robuuste operante respons tijdens ICV-zelftoediening (DiMeo and Wood, 2006b). DHT-derivaten werden in dezelfde drager opgelost in de molaire equivalente concentratie van DHT (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) werd opgelost in hetzelfde vehiculum bij 7.45 μg / μl om de molaire equivalente concentratie van BSA te bereiken zoals in DHT-CMO-BSA en DHT-Hemis-BSA. BSA-bevattende geneesmiddelen werden dagelijks direct voorafgaand aan gebruik bereid om degradatie te voorkomen en alle oplossingen werden door een 0.22 μm-filter gefiltreerd. Eerdere studies hebben aangetoond dat slechts een klein deel van de steroïden dissocieert van BSA (Stevis et al., 1999), en deze hoeveelheid is onvoldoende om significante androgene effecten te veroorzaken (Lieberherr en Grosse, 1994, Gatson et al., 2006). Evenzo heeft ons eerdere onderzoek aangetoond dat DHT zelf toegediend wordt met 1.0 μg / μl, maar niet met 0.1 μg / μl (DiMeo and Wood, 2006b). Daarom is het onwaarschijnlijk dat vrije DHT (> 10%) in voldoende hoeveelheid dissocieert van BSA om zelftoediening te ondersteunen.
Apparaat
Dieren mochten zelf medicijn- of drageroplossing 4 uur / dag, 5 dagen / week in een operante kamer (Med Associates, St. Albans, VT) toedienen ingesloten in een geluiddempende kamer met geforceerde ventilatie. Elke kamer was uitgerust met een huislamp, 2-neusponggaten en een computergestuurde spuitpomp die was verbonden met een vloeistofdraaiknop op een balansarm. Oplossingen van een 100 μl glazen spuit werden aan het dier afgeleverd via Tygon-slang die op de wartel was aangesloten. De buis die de wartel en de ICV-canule verbindt, werd beschermd door een metalen veer. Geneesmiddeloplossing of vehiculum werd afgeleverd via een 28-ga-inwendige canule die direct voor het testen in de geleidecanule werd gestoken. Elke infusie leverde 1 μl oplossing op 0.2 μl / s. De neusgatengaten bevonden zich 6 cm van de vloer onder het huislicht. Eén van de neus-gaten was aangeduid als de actieve neus-opening. Een reactie op dit gat werd geregistreerd als een actieve neuspoke (R: actief versterkt) en geteld in de richting van de responsvereiste (FR1 tot 5) voor het triggeren van een infuus. Nadat een infuus was geactiveerd, was het huislampje gedoofd en brandde het actieve gat tijdens de infusie van de 5 ter ondersteuning van de discriminatie van het actieve neusgat. Neuspikken in het actieve gat tijdens deze 5-timeoutperiode werd geregistreerd maar telt niet mee voor verdere versterking (NR: actief-niet-versterkt). Een reactie op het andere neus-porgat werd geregistreerd als een inactieve neuspoke (I) maar resulteerde niet in een infusie. De locatie van het actieve neusmondgat aan de voorkant of de achterkant van de kamer was uitgebalanceerd om te regelen voor zijvoorkeuren. De gegevens zijn vastgelegd door WMPC-software (Med Associate) op een Windows-pc.
ICV zelfbeheer
Ratten
Zelftoediening van DHT in Tfm- en WT-ratten volgde een stijgend schema met vaste verhoudingen (FR) van FR1 naar FR5. De ratten werden aanvankelijk getraind op FR1, waarbij elke reactie op de actieve neuspoke werd versterkt. Daarna werd het aantal responsen vereist voor het verkrijgen van een infusie met één elke 5-dagen verhoogd. Bij FR5 waren vijf reacties op het actieve neusgat vereist voor een infusie. Over het algemeen werden ratten getest op FR1 voor 10-dagen en FR2 tot FR5 (elk 5-dagen), voor een totaal van 30-dagen. Ratten van elk genotype werden willekeurig toegewezen aan DHT- of vehikel (Veh) -groepen en mochten zelf DHT of het ßCD-vehikel zelf toedienen. Dertig zes ratten (nWT = 19, ntfm = 17) werden in dit experiment gebruikt.
hamsters
Hamsters werden getest onder een FR1-schema voor 15-dagen. In eerdere studies volstaan 15 dagen van ICV T zelf-toediening om een voorkeur te krijgen voor de actieve neus-zak. Hamsters werden willekeurig toegewezen aan DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8 ), of BSA (n = 9) -groepen.
Data-analyse
Ratten
Dagelijkse voorkeursscores voor de actieve neuspoke werden bepaald door inactieve neuspokes af te trekken van de som van actieve versterkte en actieve niet-versterkte neuspokes (R + NR-I). De gemiddelde voorkeursscore werd berekend voor elk dier van de laatste 5-dagen van FR1 en tijdens FR2 tot FR5. Bovendien werd het gemiddelde aantal versterkingen per sessie voor elk dier bij elke FR vergeleken.
Gegevens werden geanalyseerd met 3-way ANOVA, met genotype (WT of Tfm), medicijn (DHT of vehikel) en FR-schema (1 ~ 5) als tussen-subjectfactoren. FR-schema werd behandeld als een tussenfactor, omdat sommige dieren de hele 30-testdag niet konden voltooien vanwege de verstopping van de ICV-leidcanule. In die gevallen werden alleen de gegevens van de voltooide planningen in de analyses opgenomen. Het aantal dieren in elke conditie is weergegeven in Tabel 1. Een drieweg-ANOVA werd gevolgd door passende ANOVA's van lagere orde voor eenvoudige effecten. De Newman-Keuls-test voor post-hoc paarsgewijze vergelijkingen werd gebruikt wanneer dat nodig was.
Tabel 1
hamsters
De afzonderlijke middelen van R, NR en I werden gebruikt voor gegevensanalyse. De voorkeursscore voor elk dier werd bepaald door het aftrekken van de gemiddelde inactieve neuspoke (I) van de gemiddelde actieve neuspoke (R + NR-I). De gemiddelde voorkeursscore werd geanalyseerd met een één monster t-test tegen 0 (dwz geen voorkeur) voor elke groep. Bovendien werd het aantal ontvangen versterkingen voor elk dier gemiddeld. De gemiddelde versterking die werd ontvangen voor elke geneesmiddelgroep werd vergeleken met die van BSA-controles met een 2 onafhankelijke monsters t-test. Dieren die een minimum aan 5-sessies niet hadden voltooid, werden uitgesloten van analyse (1 elk van DHT-Hemis- en DHT-Hemis-BSA-groepen).
Alle statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Voor alle analyse, p <0.05 werd als statistisch significant beschouwd. De gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM per sessie van 4 uur.
Resultaten
WT- en Tfm-ratten voeren DHT zelf toe
Operant reageert
Fig. 1 illustreert de gemiddelde voorkeur voor actieve neus-poke (R + RN - I) bij elke FR voor DHT- en Veh-groepen. Ratten die zelf DHT toedienden, vertoonden een grotere voorkeur voor de actieve neus-poke (73.1 ± 7.6 resp / 4 uur), vergeleken met voertuigcontroles (29.8 ± 3.5 resp / 4 uur; F1,145 = 31.77, p <0.001). Er was ook een hoofdeffect van het FR-schema (F.4,145 = 4.25, p <0.01), genotype-geneesmiddelinteractie (F.1,145 = 5.27, p = 0.02) en een interactie tussen geneesmiddel en FR-schema (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Er was geen hoofdeffect van het genotype en andere interacties waren niet significant.
Post-hoc-testen onthulden dat de zelf-toedienende DHT van de ratten een significant grotere voorkeur vertoonde ten opzichte van het FR-schema (F4,73 = 4.18, p <0.01), toenemende voorkeur van FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4 uur) naar FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4 uur) en FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4 uur). In deze groep werd geen effect van genotype waargenomen (genotype-FR-schema: F.4,73 = 0.13, ns; genotype: F1,73 = 0.86, ns).
Daarentegen vertoonde de zelfbeherende Veh van de ratten geen voorkeurswijziging ten opzichte van het FR-schema (F4,72 = 0.31, ns), en geen interactie tussen genotype en FR-schema (F4,72 = 0.12, ns). Anders dan voor DHT vertoonden Tfm-ratten in deze groep een grotere voorkeur dan WT (42.3 ± 5.3 en 19.1 ± 4.0 resps / 4h, respectievelijk; F4,72 = 11.81, p <0.01).
Infusie
Het gemiddelde aantal DHT- en Veh-infusies dat bij elke FR wordt ontvangen, wordt weergegeven in Fig 2. Over het algemeen ontvingen ratten meer infusies wanneer ze DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) versus vehikel zelf mochten toedienen (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Er was ook een hoofdeffect van het FR-schema (F.1,145 = 3.32, p = 0.01) en genotype-geneesmiddelinteractie (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Alle andere interacties en hoofdeffecten waren niet significant.
De gemiddelde dagelijkse inname van DHT in alle FR-schema's was vergelijkbaar in Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) en WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h) ratten. In beide groepen bleef de inname van geneesmiddelen constant toen het FR-schema toenam (F4,73 = 0.54, ns). Tijdens FR1, Tfm en WT mannen zelf-toegediend DHT bij respectievelijk 24.5 ± 2.3 μg / 4h en 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Onder een FR5-schema was de zelftoediening door DHT gemiddeld 18.3 ± 4.5 μg / 4h voor Tfm en 23.9 ± 5.9 μg / 4h voor WT-ratten. Deze groep vertoonde geen genotype- of genotype-FR schema-gebaseerde verschillen (F1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, respectievelijk).
In zowel Tfm- als WT-ratten daalde het aantal infusies van het voer aanzienlijk, omdat de behoefte aan FR toenam (F4,72 = 4.73, p <0.01). Enigszins verrassend toedienden Tfm-ratten zelf ongeveer tweemaal zoveel vehiculum (20.7 ± 2.4 μl / 4 uur) als WT-ratten (10.7 ± 1.4 μl / 4 uur, F1,72 = 7.77, p <0.01). Bij Tfm-ratten bij FR1 was het aantal voertuiginfusies (39.9 ± 13.2 μl / 4 uur) groter dan het aantal DHT-infusies (24.5 ± 2.3 μl / 4 uur). Aan het einde van het experiment was de zelftoediening van het voertuig echter gedaald tot 10.3 ± 2.4 μl / 4 uur. Evenzo dienden WT-ratten zelf 18.6 ± 4.1 μl / 4 uur drager toe bij FR1, die daalde tot 6.6 ± 1.8 μl / 4 uur bij FR5.
Het gemiddelde lichaamsgewicht aan het begin van elk FR-schema en het aantal dieren in elke conditie wordt weergegeven in Tabel 1. De WT-ratten waren significant zwaarder dan Tfm-ratten (F1,174 = 144.62, p <0.001), en alle groepen kwamen in de loop van de tijd aan in gewicht (F.5,174 = 5.59, p <0.001). Er was geen effect van de medicijnconditie (DHT versus Veh) op het lichaamsgewicht (F.1, 174 = 0.31, ns) of elke interactie. De DHT-inname gecorrigeerd voor het lichaamsgewicht was vergelijkbaar in beide genotypen bij zowel FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg) en FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).
Syrische hamsters geven zelftoediening aan DHT geconjugeerd aan BSA
Operant reageert
Hamsters zelf-toegediend DHT en DHT geconjugeerd aan BSA, maar niet alleen BSA. Fig. 3a toont de gemiddelde voorkeur (actief - inactieve neus-pokes) voor DHT, BSA, DHT-CMO-BSA en DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. In overeenstemming met onze eerdere onderzoeken ontwikkelden hamsters een voorkeur voor de actieve neus-por tijdens zelftoediening door DHT (t7 = 4.34, p <0.01), maar vertoonde geen voorkeur bij zelftoediening van BSA (t8 = 1.03, ns). Evenzo toonden hamsters een voorkeur voor de actieve neuspoke met zowel DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) en DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Met DHT gekoppeld aan linkers alleen, hamsters zelf-toegediend DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), maar vertoonde geen significante voorkeur bij zelftoediening van DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). Bij DHT-hemis waren de responsen op de actieve neuspoke (40.5 ± 10.3 resp / 4h) vergelijkbaar met die voor DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), maar deze mannen vertoonden ook verhoogde responsen voor de inactieve neus -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) vergeleken met die voor DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
Infusie
Het aantal ontvangen infusies voor elke groep wordt weergegeven in Fig. 3b. Hamsters ontvingen significant meer DHT- dan BSA-infusies (t15 = 3.04, p = 0.01). Evenzo ontvingen hamsters meer infusies wanneer ze zelf DHT-hemis-BSA mochten toedienen (t15 = 2.72, p = 0.02) of DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) vergeleken met BSA. Het aantal infusies ontvangen voor DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) en DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) groepen waren vergelijkbaar met die zelf-toedienende DHT, DHT-Hemis-BSA en DHT- CMO. Niettemin ontvingen de hamsters niet significant meer DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) of DHT-hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) vergeleken met BSA.
Overdosering
Elf van 55-hamsters stierven voordat ze alle 15-testsessies hebben voltooid. Sterfgevallen door overdosering met androgenen tijdens zelftoediening door testosteron zijn eerder beschreven (Peters en Wood, 2005). In de huidige studie stierf 2 van 8-mannetjes (25%) tijdens zelftoediening door DHT, vergelijkbaar met het 24% gemeld voor overdosering met testosteron (Peters en Wood, 2005). Zelf-toediening van DHT-CMO en DHT-hemis werd geassocieerd met de hoogste verliezen (elke 3 van 8 per groep, 38%), terwijl er maar weinig sterfgevallen onder hamsters waren zelf-toedienende BSA (1 van 9, 11%) of DHT -Hemis-BSA (0 van 8). Zoals bij een overdosis testosteron stierf geen van de hamsters in het huidige onderzoek tijdens zelftoediening. In plaats daarvan stierven hamsters enkele uren later in hun kooien, met ernstige locomotorische en ademhalingsdepressie.
Overdosis testosteron is nauw gecorreleerd aan de testosteroninname, met name de maximale inname per sessie (Peters en Wood, 2005). Fig 4 vergelijkt voorkeurencores, het aantal ontvangen versterkingen en piekopname voor hamsters die alle 15-testsessies hebben voltooid, en degenen die dat niet hebben gedaan. Beide groepen toonden een aanzienlijke voorkeur voor de actieve neus-zak (p <0.05). De voorkeur was echter significant groter bij hamsters die stierven tijdens zelftoediening (25.7 ± 5.2 resp / 4 uur) vergeleken met hamsters die overleefden (9.5 ± 2.0 resp / 4 uur, t53 = 3.42, p <0.01). Hamsters die 15 sessies niet voltooiden, ontvingen meer dan twee keer zoveel infusies per sessie (31.2 ± 5.0 inf / 4 uur) als degenen die alle sessies voltooiden (14.8 ± 1.1 inf / 4 uur, t53 = 5.05, p <0.001). Bovendien was voor hamsters die stierven tijdens het onderzoek de maximale inname per sessie significant hoger (77.0 ± 9.8 inf / 4 uur) dan voor mannen die het overleefden (36.1 ± 2.9 inf / 4 uur, t53 = 5.41, p <0.001).
Discussie
Androgene zelftoediening kan worden gemedieerd door membraan-geassocieerde, maar niet door nucleaire androgeenreceptoren
De huidige studie toont aan dat klassieke nucleaire AR's niet essentieel zijn voor zelfsturing door androgeen. Zowel Tfm- als WT-ratten ontwikkelden een voorkeur voor de actieve neuspiek tijdens zelftoediening door DHT. Bovendien waren ze in staat om te reageren op het stijgende FR-schema door actieve neuspokes te vergroten, waardoor een stabiel niveau van geneesmiddelinname werd gehandhaafd, ongeacht het FR-schema. Daarentegen reageerden ratten die een voertuig ontvingen niet op de veranderingen in het FR-schema. Hun actieve neuspokes namen niet significant toe als reactie op veranderingen in het FR-schema en zij ontvingen minder infusies naarmate de responsvereiste toenam. Omdat ligandbinding aan de "klassieke" nucleaire androgeenreceptor in Tfm-mutanten wordt aangetast, ondersteunt dit onze hypothese dat androgeenversterking wordt gemedieerd via alternatieve paden.
De onverwacht hoge respons voor voertuigen door Tfm-ratten is waarschijnlijk niet te wijten aan het voertuig zelf. We hebben soortgelijke verschijnselen waargenomen in een afzonderlijke groep van Tfm-ratten die geen infusies ontvingen (gegevens niet getoond). In plaats daarvan kan het te maken hebben met gefeminiseerde gedragskenmerken bij de Tfm-mannetjes. De toegenomen neus-pokes door Tfm-ratten kunnen analoog zijn aan hogere verkennende hoofddips waargenomen bij vrouwelijke ratten (Brown en Nemes, 2008). Het is ook bekend dat de Tfm-ratten en -muizen verhoogde angstgevoelens vertonen (Zuloaga et al., 2006, Zuloaga et al., 2008a). Misschien zijn de sedatieve / anxiolytische effecten van DHT (Agren et al., 1999, Arnedo et al., 2000, Frye en Seliga, 2001, Berbos et al., 2002, Peters en Wood, 2005) stompte het angstgevoelige gedrag af wanneer Tfm-ratten zelf-toegediend DHT waren.
Bovendien verschaft zelftoediening van DHT-BSA-conjugaten in mannelijke hamsters het bewijs dat androgenen kunnen werken op het neuronale plasmamembraan om een versterkende werking te hebben. Hamsters vertoonden een significante voorkeur voor beide DHT-BSA-conjugaten. De doses die zelf worden toegediend, zijn in overeenstemming met onze eerdere onderzoeken naar T, DHT en vaak misbruikte steroïden (Ballard en Wood, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). In tegenstelling hiermee toonden hamsters geen voorkeur voor BSA alleen. De gegevens over mortaliteit en inname van geneesmiddelen tonen aan dat DHT en zijn derivaten dodelijk kunnen zijn, waardoor onze eerdere gegevens over T-overdosering worden uitgebreid (Peters en Wood, 2005).
De huidige studie onthult een soortspecifiek patroon van operantrespons. Hamsters hadden niet de voorkeur aan de actieve neus-zak terwijl het zichzelf toedienende voertuig, zoals eerder aangetoond (Johnson en Wood, 2001, Hout, 2002, DiMeo and Wood, 2004, Triemstra en Wood, 2004, Wood et al., 2004, Ballard en Wood, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). Bij ratten was er echter een duidelijke voorkeur voor een actieve neuspoke, ongeacht het ontvangen medicijn. We zagen een vergelijkbare trend in ons vorige onderzoek naar IV zelftoediening van T in ratten, hoewel het niet statistisch significant was (Wood et al., 2004). Op basis van dergelijk soortspecifiek gedragsverschil in zelftoediening, moet voorzichtigheid worden betracht bij het vergelijken van gedragsgegevens van ratten en hamsters.
Er zijn verschillende kanttekeningen die moeten worden beschouwd bij de interpretatie van de huidige studie. Ten eerste zijn nucleaire AR's met significant gestoorde ligandbinding nog steeds aanwezig in Tfm-ratten (Yarbrough et al., 1990), in tegenstelling tot in Tfm-muizen (Hij et al., 1991). Het is mogelijk dat deze gemuteerde nucleaire AR's voldoende zijn om effecten van androgenen in supra-fysiologische doses te mediëren. Ten tweede kunnen de DHT-BSA conjugaten degraderen in vivo, resulterend in gratis DHT. Hoewel dit geen belangrijk probleem lijkt te zijn in vitro (Lieberherr en Grosse, 1994, Gatson et al., 2006), de mate en het verloop van de afbraak van DHT-BSA in vivo in de hersenen is momenteel onbekend. Ten slotte kunnen DHT-BSA-conjugaten niet significant doordringen in het hersenweefsel. DHT-BSA is aanzienlijk groter dan DHT, dus de effecten van DHT-BSA die in de huidige studie zijn waargenomen, worden waarschijnlijk gemedieerd op plaatsen dicht bij de kamers.
Ondanks deze kanttekeningen, produceerden deze twee verschillende benaderingen consistente resultaten die sterk tegen de noodzaak van nucleair AR in androgeenversterking strijden. Bovendien suggereert de zelftoediening van BSA-conjugaten dat androgenen kunnen werken op het plasmamembraan bij androgeenversterking. Voorzover ons bekend, biedt de huidige studie de eerste in vivo bewijs voor gedragsrelevante effecten van androgenen op het plasmamembraan.
Androgenen oefenen snelle nucleaire AR-onafhankelijke effecten op beloning uit
Verschillende andere studies over androgeenbeloning hebben resultaten laten zien die consistent zijn met niet-genomische of plasmamembraaneffecten. CPP ontwikkelt zich binnen 30 min van systemische T-injectie (Alexander et al., 1994), kan een tijdsverloop consistent met acute niet-genomische effecten van T. CPP ook worden geïnduceerd met intra-Acb-infusies van T of zijn metaboliet (Packard et al., 1997, Frye et al., 2002), hoewel Acb weinig genomische AR heeft. Verder brengt de VTA Fos tot expressie in reactie op ICV T-infusie (Dimeo en Wood, 2006a), ondanks het ontbreken van significante klassieke AR-expressie daar. De huidige studie geeft geen informatie over de plaats van actie in de hersenen. Desalniettemin geeft het aan dat het relatieve gebrek aan nucleaire AR alleen niet voldoende reden is om structuren zoals Acb en VTA uit te sluiten van de potentiële plaatsen die androgene effecten kunnen veroorzaken.
Snelle plasmamembraaneffecten van steroïden in dorsaal en ventraal striatum zijn niet beperkt tot androgenen. Van progestines is bekend dat ze CPP induceren, mogelijk via gamma-aminoboterzuur (GABA) -receptoren in Acb (Frye, 2007). Oestrogenen oefenen ook snelle, membraanreceptor-gemedieerde effecten uit in het dorsale striatum (Mermelstein et al., 1996, Becker en Rudick, 1999). Een membraan-geassocieerde receptor is al geïsoleerd voor progestagenen (Zhu et al., 2003), en het bewijsmateriaal accumuleert voor celoppervlakreceptoren voor oestrogenen (besproken in Vasudevan en Pfaff, 2007) en androgenen (besproken in Thomas et al., 2006). Hoewel oestrogenen ook versterken (DiMeo and Wood, 2006b), lijken de versterkende effecten van T overwegend androgeen te zijn. Hamsters beheren zelf niet-aromatizable androgenen, zoals drostanolone en DHT (Ballard en Wood, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). Bovendien kan het anti-androgeen-flutamide T-zelftoediening blokkeren (Peters en Wood, 2004). Hoewel dit in tegenspraak lijkt te zijn met de rol van membraan-AR die in deze studie is gerapporteerd, is gemeld dat flutamide membraan-AR-activering eveneens blokkeert (Braun en Thomas, 2003, Braun en Thomas, 2004).
De eigenschappen van membraan androgeenreceptoren
Historisch gezien werden de effecten van steroïden, waaronder androgenen, beschouwd als getransduceerd door nucleaire receptor-gemedieerde processen. Er zijn echter al tientallen jaren meldingen bekend van snelle androgene effecten, vermoedelijk gemedieerd door membraan-geassocieerde receptoren. In het mediale preoptische gebied kunnen androgenen het neuronale vuren binnen enkele seconden veranderen (Yamada, 1979) tot minuten (Pfaff en Pfaffmann, 1969). Verder Orsini en collega's (Orsini, 1985, Orsini et al., 1985) hebben een snelle wijziging van de neuronale afvuurfrequentie door androgenen in de laterale hypothalamus (LHA) aangetoond. Dit effect van androgenen in LHA kan van bijzonder belang zijn voor de huidige studie, omdat bekend is dat de LHA betrokken is bij de beloningscircuits (Olds en Milner, 1954) en LHA orexin / hypocretine wordt gereguleerd door gonadale steroïden (Muschamp et al., 2007).
De celtypes met mogelijke membraan-AR's omvatten gliale (Gatson et al., 2006), gonadal (Braun en Thomas, 2003, Braun en Thomas, 2004) en immuuncellen (Benten et al., 1999, Guo et al., 2002), myocyten (Estrada et al., 2003) en osteoblasten (Lieberherr en Grosse, 1994). Hoewel de moleculaire identiteit nog moet worden bepaald, omvatten kandidaten voor het membraan AR membraanreceptoren met bekende steroïde bindingsplaatsen, zoals GABA-A (besproken in Lambert et al., 2003) en NR2-subeenheden van N-methyl-D-asparaginezuurreceptoren (Malayev et al., 2002). Als alternatief hebben Thomas en collega's (2004) bewijs voor een nieuwe aan G-eiwit gekoppelde receptor als een membraan-AR gerapporteerd. Bovendien kunnen de effecten van androgenen die niet verwant zijn met een specifieke receptor in het huidige onderzoek niet worden uitgesloten.
Recent in vitro studies suggereren dat er meerdere membraan-AR's zijn, of meer dan één bindingsplaats op een enkele receptor, zoals voorgesteld voor de membraan-progesteronreceptor (Ramirez et al., 1996). In veel celsoorten lijkt het membraan AR een membraanreceptor te zijn gekoppeld aan Gq / o (Lieberherr en Grosse, 1994, Benten et al., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Estrada et al., 2003). De steroïde-bindingskarakteristieken en de gevoeligheid voor anti-androgenen van het vermeende membraan AR variëren echter sterk afhankelijk van het celtype. Antiandrogenen kunnen bijvoorbeeld de effecten van DHT op croaker ovariumcellen blokkeren (Braun en Thomas, 2003, Braun en Thomas, 2004), terwijl ze niet effectief zijn in andere celtypen (Lieberherr en Grosse, 1994, Benten et al., 2004, Gatson et al., 2006), of kan zelfs agonistische effecten in hippocampuscellen uitoefenen (Pike, 2001, Nguyen et al., 2007) en verschillende kankercellijnen (Peterziel et al., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou et al., 2000, Papakonstanti et al., 2003). Verder zijn verschillende T-bindingskenmerken gerapporteerd voor verschillende organen in vissen (Braun en Thomas, 2004).
Onze ervaring met algemeen misbruikte AAS geeft aan dat belangrijke modificatie (s) aan de A-ring (bij C2 en / of C3) en bij C17 de neiging hebben om interfereren met zelftoediening (Ballard en Wood, 2005). Stanozolol, dat een belangrijke wijziging heeft bij C2 en C3, evenals een methylgroep die aan C17 is bevestigd, is bijvoorbeeld niet zelf toegediend. In het huidige onderzoek, hamsters zelf toegediend zowel BSA geconjugeerd op C3 (DHT-CMO-BSA) en C17 (DHT-Hemis-BSA). Verder onderzoek is nodig om de kenmerken van androgenen, zelf toegediend, op te helderen.
Klinische betekenis
AAS, met name T, zijn verreweg de meest voorkomende prestatieverhogende middelen die worden gebruikt door atleten, goed voor bijna de helft van de positieve dopingtests (Wereld Anti-Doping Agentschap, 2006). Gezien dergelijk wijdverspreid gebruik heeft AAS-misbruik verstrekkende gevolgen voor de gezondheid. Cardiale en hepatische bijwerkingen van AAS-misbruik zijn goed ingeburgerd (Leshner, 2000). Men denkt dat deze en de anabole effecten van AAS worden gemedieerd via nucleaire AR. De mogelijke nucleaire AR-onafhankelijke effecten van androgenen suggereren echter dat de invloed van AAS mogelijk veel verder reikt dan structuren met nucleaire AR-expressie.
Wat betreft gelijkenis met andere drugs van misbruik, produceren AAS verschillende effecten en hebben verschillende werkingsmechanismen van stimulerende middelen. In tegenstelling tot stimulerende middelen (Graybiel et al., 1990), Induceert AAS c-Fos-activering alleen in de VTA en niet in Acb (Dimeo en Wood, 2006a). Verder verzwakt AAS stimulant-geïnduceerde Acb DA-afgifte (Birgner et al., 2006), en remt DA-afgifte acuut (Triemstra et al., 2008). Gedrag, AAS induceert niet de locomotorische activering die kenmerkend is voor stimulantia (Peters en Wood, 2005).
In plaats daarvan lijken gedragsreacties op acute AAS op die van opioïden of benzodiazepinen, mogelijk met additieve effecten wanneer ze samen worden gebruikt. Acute blootstelling aan AAS drukt autonome functies, waaronder ademhaling en lichaamstemperatuur (Peters en Wood, 2005). AAS-geïnduceerde autonome depressie doet denken aan de symptomen van een overdosis opioïden en wordt geblokkeerd door de opioïde antagonist naltrexon (Peters en Wood, 2005). Bovendien versterkt nandrolon, een veel gebruikte AAS, hypotherme effecten van morfine en verergert het de naloxon-geprecipiteerde morfineontwenningsverschijnselen (Celerier et al., 2003). Bovendien is het goed vastgesteld dat acute AAS sedatief / anxiolytisch zijn (Agren et al., 1999, Arnedo et al., 2000, Frye en Seliga, 2001, Berbos et al., 2002, Peters en Wood, 2005), mogelijk gemedieerd door hun directe effecten op GABA-A-receptoren (Masonis en McCarthy, 1995, Masonis en McCarthy, 1996). Verhoogd ethanolgebruik bij ratten chronisch behandeld met AAS kan ook een weerspiegeling zijn van de veranderde GABAergische functie (Johansson et al., 2000).
Onze bevindingen over een overdosis verhogen een extra zorg voor de gezondheid. Momenteel is de classificatie van AAS als controlestoffen gebaseerd op hun anabole eigenschappen (Wet gereguleerde stoffen, 1991). De huidige studie toont echter aan dat de anabole werkzaamheid van AAS niet noodzakelijk overeenkomt met hun versterkende eigenschappen en risico's van overdosis. Naast DHT-BSA-conjugaten is DHT-CMO dat in dit onderzoek wordt gebruikt, geen gereguleerde stof, hoewel zijn versterkende eigenschappen en sterfte door overdosis erg lijken op DHT en T (Peters en Wood, 2005). Het patroon van overdosis leek ook op dat wat eerder werd gerapporteerd voor T (Peters en Wood, 2005), waar hoge inname resulteerde in mortaliteit 24 tot 48 uur later. In het licht van deze bevindingen, kunnen de criteria die worden gebruikt voor het plannen van een steroïde als gereguleerde stof, herzieningen vereisen om rekening te houden met de mate van misbruik en toxiciteit, naast de anabolische potentie.
De resultaten van de huidige studie suggereren dat nucleaire AR, de enige AR die tot nu toe is geïsoleerd, niet essentieel is voor de androgeenversterking. In plaats daarvan suggereren de resultaten dat androgeenversterking wordt getransduceerd aan het plasmamembraan. Derhalve zijn verdere onderzoeken naar de identiteit van vermeend membraan-AR, hun functionele kenmerken en anatomische verdeling nodig om het onderliggende mechanisme van AAS-misbruik en de klinische implicaties ervan te verhelderen.
voetnoten
Disclaimer uitgever: Dit is een PDF-bestand van een onbewerkt manuscript dat is geaccepteerd voor publicatie. Als service aan onze klanten bieden wij deze vroege versie van het manuscript. Het manuscript zal een copy-editing ondergaan, een typografie en een review van het resulterende bewijs voordat het in zijn definitieve citeervorm wordt gepubliceerd. Houd er rekening mee dat tijdens het productieproces fouten kunnen worden ontdekt die van invloed kunnen zijn op de inhoud en alle wettelijke disclaimers die van toepassing zijn op het tijdschrift.
Referenties
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Behaviorale anxiolytische effecten van laaggedoseerde anabole androgene steroïdebehandeling bij ratten. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteron heeft lonende affectieve eigenschappen bij mannelijke ratten: implicaties voor de biologische basis van seksuele motivatie. Gedrag Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Belonende eigenschappen van testosteron bij intacte mannelijke muizen: een pilotstudie. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventriculaire zelftoediening van vaak misbruikte anabole androgene steroïden bij mannelijke hamsters (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolon, oxymetholon en stanozolol. Gedrag Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Snelle effecten van oestrogeen of progesteron op de amfetamine-geïnduceerde toename van striatale dopamine worden versterkt door oestrogeen-priming: een microdialyse-onderzoek. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Snelle effecten van androgenen in macrofagen. Steroïden. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosteronsignalering door middel van internaliseerbare oppervlakte-receptoren in androgeen-receptorvrije macrofagen. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Acute gedragseffecten van anabole steroïden: angst, stereotypie en locomotorische activiteit. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Veranderde extracellulaire niveaus van DOPAC en HVA in de kern van de rattenkern accumbens als reactie op subchronische toediening van nandrolon en een daaropvolgende uitdaging met amfetamine. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgenen remmen estradiol-17beta-synthese in Atlantic croaker (Micropogonias undulatus) eierstokken door een niet-genoom mechanisme geïnitieerd aan het celoppervlak. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. Biochemische karakterisering van een membraan androgeenreceptor in de eierstok van de atlantische croaker (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Brower KJ. Anabole steroïde misbruik en afhankelijkheid. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symptomen en correlaten van anabole-androgene steroïde afhankelijkheid. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brown GR, Nemes C. Het verkennend gedrag van ratten in het gondelapparaat: is een valide maat voor neofilie een feit? Gedragsprocessen. 2008;78: 442-448. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Effecten van nandrolon op acute morfine responsen, tolerantie en afhankelijkheid bij muizen. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, Pope HG., Jr Geweld tegen vrouwen en ongeoorloofd gebruik van androgenen en anabolen. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Titel 21, hoofdstuk 13 - Preventie en bestrijding van drugsmisbruik Controlled Substances Act. 1991
- DiMeo AN, Wood RI. Circulerende androgenen verhogen de gevoeligheid voor zelftoediening van testosteron bij mannelijke hamsters. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. ICV-testosteron induceert Fos in mannelijke hersenen van Syrische hamsters. Psychoneuroendocrinology. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Wood RI. Zelf-toediening van oestrogeen en dihydrotestosteron bij mannelijke hamsters. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteron stimuleert intracellulaire calciumafgifte en door mitogeen geactiveerde proteïnekinasen via een G-eiwit-gekoppelde receptor in skeletspiercellen. Endocrinology. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Neerwaartse regulatie van transformerende groeifactor beta-receptoren door androgeen in eierstokkankercellen. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Een moleculaire methode voor het classificeren van de genotypen verkregen in een kweekkolonie van testiculaire gefeminiseerde (Tfm) ratten. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Progestinen beïnvloeden de motivatie, beloning, conditionering, stress en / of reactie op misbruik drugs. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. De nucleus accumbens als een plaats van actie voor het belonen van eigenschappen van testosteron en zijn 5alpha-gereduceerde metabolieten. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seliga AM. Testosteron verhoogt analgesie, anxiolysis en cognitieve prestaties van mannelijke ratten. Cognitieve, affectieve en gedragsneurowetenschappen. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosteron moduleert op differentiële wijze het mitogeen-geactiveerde eiwitkinase en de fosfoinositide 3-kinase / Akt-routes door de nucleaire en nieuwe membraan androgeenreceptor in C6-cellen. Endocrinology. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamine en cocaïne induceren geneesmiddel-specifieke activering van het c-fos-gen in striosoom-matrixcompartimenten en limbische onderverdelingen van het striatum. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomic testosteron calcium signalering. Genotrope acties in androgeen-receptor-vrije macrofagen. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Hij WW, Kumar MV, Tindall DJ. Een frame-shift-mutatie in het androgeenreceptorgen veroorzaakt volledige androgeenongevoeligheid in de testikel-gefeminiseerde muis. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabole androgene steroïden beïnvloeden de alcoholinname, defensief gedrag en hersenopioïdepeptiden bij de rat. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Orale testosteron zelftoediening bij mannelijke hamsters. Neuro-endocrinologie. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, Pope HG, Jr, Oliva PS. Verhoogde agressieve respons bij mannelijke vrijwilligers na toediening van geleidelijk toenemende doses testosteroncypionaat. Drug Alcohol Depend. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroïde modulatie van GABAA-receptoren. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Anabole steroïde misbruik. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgenen verhogen intracellulaire calciumconcentratie en inositol 1,4,5-trisfosfaat en diacylglycerolvorming via een pertussis-toxine-gevoelig G-eiwit. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgene effecten op hippocampus CA1-spinasynaps-aantallen worden behouden in mannelijke Tfm-ratten met defecte androgeenreceptoren. Endocrinology. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Remming van de NMDA-respons door pregnenolonsulfaat onthult subtype selectieve modulatie van NMDA-receptoren door gesulfateerde steroïden. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Directe effecten van de anabole / androgene steroïden, stanozolol en 17 alpha-methyltestosteron, op benzodiazepine die aan de. gamma-aminoboterzuur (a) receptor. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Effecten van het androgene / anabole steroïde stanozolol op de GABAA-receptorfunctie: door GABA gestimuleerde 36Cl-influx en [35S] TBPS-binding. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol vermindert de calciumstromen in rattenneostriatale neuronen via een membraanreceptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Morin LP, Wood RI. Een stereotaxische atlas van de hersenen van de gouden hamster. Academische pers; San Diego: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Een rol voor hypocretine (orexine) in mannelijk seksueel gedrag. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- NR van de Raad, redacteur. NationalResearchCouncil. Handleiding voor de verzorging en het gebruik van proefdieren. Nationale Onderzoeksraad; Washington, DC: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamide en cyproteronacetaat oefenen agonistische effecten uit: inductie van androgeenreceptorafhankelijke neuroprotectie. Endocrinology. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Principe van laboratoriumverzorging door dieren. National Institute of Health; Bethesda, Maryland: 1985.
- Olds J, Milner PM. Positieve versterking veroorzaakt door elektrische stimulatie van het septumgebied en andere gebieden van het brein van de rat. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Directe effecten van androgenen op laterale hypothalamische neuronale activiteit bij de mannelijke rat: II. Een drukuitstootstudie. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Directe effecten van androgenen op laterale hypothalamische neuronale activiteit bij de mannelijke rat: I. Een micro-iontoforetische studie. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Beloning van affectieve eigenschappen van intra-nucleus accumbens-injecties van testosteron. Gedrag Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. De voorkeur voor expressie van door testosteron geconditioneerde plaats wordt geblokkeerd door perifere of intra-accumbens injectie van alfa-flupenthixol. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Een snelle, niet-genomische, signaleringsroute reguleert de actine reorganisatie die wordt geïnduceerd door activering van membraantestosteronreceptoren. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. The Rat Brain: in sterotaxische coördinaten. 4th. Academische pers; New York: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Anabole-androgene steroïde verslaving omvat androgeen en opioïde receptoren. Proceedings van de 34th Annual Meeting van de Society for Neuroscience; San Diego, CA. 2004.
- Peters KD, Wood RI. Androgeenafhankelijkheid bij hamsters: overdosis, tolerantie en potentiële opioïdergische mechanismen. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Snelle signalering door androgeenreceptor in prostaatkankercellen. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Olfactorische en hormonale invloeden op de basale voorhersenen van de mannelijke rat. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. Testosteron verzwakt bèta-amyloïde toxiciteit in gekweekte hippocampale neuronen. Hersenenonderzoek. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Pope HG, Jr, Katz DL. Psychiatrische en medische effecten van het gebruik van anabole en androgene steroïden. Een gecontroleerde studie van 160-atleten. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membraanreceptoren voor oestrogeen, progesteron en testosteron in het brein van de rat: fantasie of realiteit. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Simpelweg RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Verdeling van androgeen en oestrogeen mRNA-bevattende cellen in de hersenen van de rat: een in situ hybridisatie-onderzoek. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Differentiële effecten van estradiol en estradiol-BSA-conjugaten. Endocrinology. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestine, oestrogeen en androgeen G-eiwit gekoppelde receptoren in vissengonaden. Steroïden. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosteron en nucleus accumbens dopamine in de mannelijke Syrische hamster. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Zelftoediening door testosteron bij vrouwelijke hamsters. Gedrag Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Door membraan geïnitieerde acties van oestrogenen in neuro-endocrinologie: opkomende principes. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Wood RI. Orale zelftoediening van testosteron bij mannelijke hamsters: dosis-respons, vrijwillige lichaamsbeweging en individuele verschillen. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Versterking van testosteron: intraveneuze en intracerebroventriculaire zelftoediening bij mannelijke ratten en hamsters. Psychopharmacology (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Androgeenreceptor immunoreactiviteit in de mannelijke en vrouwelijke hersenen van de Syrische hamster. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Ongunstige analytische bevindingen gerapporteerd door geaccrediteerde laboratoria. Wereld Anti-Doping Agentschap; Montreal, Canada: 2006.
- Yamada Y. De effecten van testosteron op de activiteit van de eenheid in rattenhypothalamus en septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. Een enkele basismutatie in het androgeenreceptorgen veroorzaakt androgeenongevoeligheid in de testikel-gefeminiseerde rat. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabole-androgene steroïde gebruik in de Verenigde Staten. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgen stimuleert door mitogeen geactiveerd proteïnekinase in menselijke borstkankercellen. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Cloning, expressie en karakterisering van een membraan-progestinereceptor en bewijs dat het een intermediair is in de meiotische rijping van eicellen van vissen. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Zuloaga DG, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Muizen met de testis feminisatie-mutatie vertonen een rol voor androgeenreceptoren in de regulatie van angstgerelateerd gedrag en de hypothalamus-hypofyse-bijnieras. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. De rol van androgeenreceptoren bij de vermannelijking van hersenen en gedrag: wat we hebben geleerd van de testiculaire feminisatiemutatie. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. Ratten met de testis feminisatie-mutatie (TFM) vertonen verhoogde indices van angst. Proceedings van de 36th Annual Meeting van de Society for Neuroscience; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.
;
