De rol van Orexin-1-receptiemechanismen voor dwangvoeding in een model van eetaanvallen bij vrouwelijke ratten (2012)

Neuropsychopharmacology. 2012 aug; 37 (9): 1999-2011.

PMCID: PMC3398727

Dit artikel is geweest geciteerd door andere artikelen in PMC.

Ga naar:

Abstract

Orexinen (OX) en hun receptoren (OXR) moduleren voeding, opwinding, stress en drugsmisbruik. Neurale systemen die drugsmisbruik motiveren en versterken, kunnen ook ten grondslag liggen aan dwangmatig eten en inname. Daarom zijn de effecten van GSK1059865 (5-broom-N- [(2S,5S) -1- (3-fluor-2-methoxybenzoyl) -5-methylpiperidin-2-yl] methyl-pyridine-2-amine), een selectieve OX1R-antagonist, JNJ-10397049 (N- (2,4-dibroomfenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimethyl-4-fenyl-1,3-dioxan-5-yl] ureum), een selectieve OX2R-antagonist en SB-649868 (N- [((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide), a dual OX1/OS2R-antagonisten werden geëvalueerd in een eetaanval (BE) -model bij vrouwelijke ratten. BE van zeer smakelijk voedsel (HPF) werd opgeroepen door drie cycli van voedselbeperking gevolgd door stress, opgewekt door ratten bloot te stellen aan HPF, maar te voorkomen dat ze toegang hadden tot het voor 15 min. Farmacokinetische beoordelingen van alle verbindingen werden verkregen onder dezelfde experimentele omstandigheden die werden gebruikt voor de gedragsexperimenten. Topiramaat werd gebruikt als de referentieverbinding omdat het BE selectief blokkeert bij ratten en mensen. Dosisgerelateerde drempels voor slaapinducerende effecten van de OXR-antagonisten werden gemeten met behulp van polysomnografie in parallelle experimenten. SB-649868 en GSK1059865, maar niet JNJ-10397049, verminderden BE selectief voor HPF zonder de standaard inname van voedselpellets te beïnvloeden, bij doses die geen slaap veroorzaakten. Deze resultaten geven voor de eerste keer een belangrijke rol aan OX1R-mechanismen in BE, wat suggereert dat selectieve antagonisme bij OX1R kan een nieuwe farmacologische behandeling voor BE en mogelijk andere eetstoornissen met een compulsieve component vertegenwoordigen.

sleutelwoorden: orexin-1-receptorantagonist, orexin-2-receptorantagonist, eetaanvallen, vrouwelijke ratten, dwangmatige voedselconsumptie

INLEIDING

Afleveringen van eetaanvallen (BE) bij de mens worden gekenmerkt door een dwangmatige, niet-homeostatische consumptie van een ongewoon grote hoeveelheid zeer smakelijk voedsel (HPF) in een korte tijdsperiode. Hoewel ze geen honger hebben, eten mensen sneller dan normaal totdat ze zich ongemakkelijk vol voelen. Zoals beschreven door de DMS-IV-TR (American Psychiatric Association, 2000), deze episodes gaan gepaard met een subjectief gevoel van verlies van controle over eten, en worden geassocieerd met een gevoel van angst, walging, depressie, schuldig zijn aan te veel eten en alleen eten vanwege verlegenheid.

BE is een centraal kenmerk van boulimia nervosa, waarbij episoden van BE worden gevolgd door gedragingen die gericht zijn op het vermijden van gewichtstoename, zoals zelfopgewekt braken. Intense en aanhoudende BE-episodes vertegenwoordigen typische fenomenen die ook voorkomen bij personen die lijden aan eetbuien (BED) (Walsh en Devlin, 1998). BED wordt gekenmerkt door herhaalde afleveringen van BE in afwezigheid van compenserend gedrag om gewichtstoename te voorkomen. De diagnostische criteria voor BED in de DSM-IV-TR geven aan dat BE-episodes minimaal 2 dagen per week gedurende 6 maanden moeten plaatsvinden. BED houdt verband met aanzienlijke medische en psychiatrische co-morbiditeit (Javaras c.s., 2008; Grucza c.s., 2007; Fassino c.s., 2003). Men schat dat BE op enig moment tijdens hun leven ongeveer 5% van de Amerikaanse volwassen bevolking treft (Foulds Mathes c.s., 2009) en het draagt ​​bij tot het verergeren van obesitas en aanverwante pathologieën (Hudson c.s., 2007; Heath, 1998; Devlin c.s., 2000; Yanovski, 2003).

Huidige medicijnen, zoals topiramaat (McElroy c.s., 2007; McElroy c.s., 2009) of sibutramine (Appolinário c.s., 2000; Wilfley c.s., 2008), zijn gemeld om BE te verminderen in klinische onderzoeken. Hun toediening is echter geassocieerd met een verscheidenheid aan nadelige bijwerkingen, die ernstige problemen tijdens chronische behandeling vormen (McElroy c.s., 2009; voerman c.s., 2003; Yager, 2008). In het bijzonder is sibutramine onlangs uit de Europese markt gehaald, terwijl topiramaat bekend staat om zijn cognitieve stoornissen. Innovatieve behandelingen voor boulimia nervosa en BED zonder ernstige bijwerkingen zijn hard nodig.

In 1998 identificeerden twee groepen onafhankelijk een nieuwe klasse van neuropeptiden afkomstig van hypothalamische kernen (Sakurai c.s., 1998; de Lecea c.s., 1998). Deze peptiden, orexine-A (OXA) en orexin-B (OXB) (ook aangeduid als hypocretine 1 en hypocretine 2), worden geproduceerd uit proteolytische verwerking van het pre-pro-OX-peptide en binden aan twee GPCR's, namelijk OX- 1- en OX-2-receptoren (OX1R en OX2R) (ook aangeduid als HcrtR1 en HcrtR2). OS1R is gekoppeld aan Gq / 11, terwijl studies met neuronale cellen wijzen op OX2R is gekoppeld aan Gq-, Gs- en Gi-eiwitten. In het centrale zenuwstelsel, OX1R en OX2R tonen gedeeltelijk overlappende, maar grotendeels verschillende en complementaire distributiepatronen (Sakurai, 2007). Hersengebieden zoals de infralimbische cortex, hippocampus en locus coeruleus vertonen hoge expressie van OX1R, terwijl OX2R is de enige receptor die tot expressie wordt gebracht in de boogvormige nucleus, de tuberomammillary nucleus en de dorsomediale en laterale hypothalamus (LH). Beide receptoren zijn aanwezig in de prefrontale cortex, amygdala, bedkern van stria-terminis, paraventriculaire thalamische nucleus, dorsale raphe, ventrale tegmentale gebied (VTA) en laterodorsale tegmentale nucleus-peduncolo pontine nucleus (Lu c.s., 2000; Marcus c.s., 2001; Trivedi c.s., 1998). Deze bevindingen suggereren dat OXs en hun receptoren waarschijnlijk een brede regulerende rol spelen in het centrale zenuwstelsel.

De fysiologie van de wakker / slaaptoestand is een van de gebieden waarop de rol van OXs het meest uitgebreid is bestudeerd. Inderdaad produceerde de verstoring van OX-signalering in prepro-OX knockout-muizen een fenotype met kenmerken die opmerkelijk vergelijkbaar zijn met die van patiënten die lijden aan narcolepsie, een chronische aandoening die wordt gekenmerkt door overmatige slaperigheid die gepaard kan gaan met zeer ernstige slaapverlamming, hypnagogische hallucinaties en kataplexie. (CHEMELLI c.s., 1999). De buitensporige slaperigheid lijkt een manifestatie te zijn van het onvermogen om verlengd ontwaken te handhaven.

Bovendien is het gelijktijdige antagonisme van beide OX1R en OX2R of de selectieve remming van OX2R resulteert in de inductie van een sterk hypnotisch effect (Brisbare-Roch c.s., 2007; Dugovic c.s., 2009; Di Fabio c.s., 2011).

Gegevens in de literatuur ondersteunen ook een rol van het OX-systeem in het voedingsgedrag, bij de beheersing van zowel homeostatische als op beloning gebaseerde voedselinname. Naast het vertonen van een narcolepsiefenotype zijn OX knock-out muizen ook hypofagisch vergeleken met het gewicht en leeftijdsgenoten van nestgenoten, wat wijst op een rol voor OXs bij het moduleren van het voedings- en energiemetabolisme (Willie c.s., 2001). Injectie van OXA in het laterale ventrikel van ratten, tijdens de vroege lichtfase, veroorzaakte een dosisgerelateerde toename van de voedselinname bij ratten (Sakurai c.s., 1998), die werd geblokkeerd door voorbehandeling met de OX1R-antagonist SB-334867 (Haynes c.s., 2000; Rodgers c.s., 2001). De rol van OXs bij beloningsgebaseerde voedselinname is gedocumenteerd in een recente paper van Perello c.s. (2010), wat aantoont dat de toename van de lonende waarde van vetarm dieet geïnduceerd door ghreline OX-afhankelijk is; bovendien is gerapporteerd dat SB-334867 vetrijke zelftoediening van voedsel remt (Nair c.s., 2008). Activering van de OX1R is een noodzakelijk onderdeel van door voedsel versterkt antwoord, motivatie of beide (Sharf c.s., 2010). Daarnaast worden LH OX-neuronen geactiveerd door aanwijzingen die verband houden met consumerende beloningen zoals voedsel (Harris c.s., 2005), wat duidt op een mogelijke rol van het OX-systeem als reactie op externe omgevingsfactoren die verband houden met cognitieve aspecten van voeding.

Recente rapporten ondersteunen een rol voor OX-signalering in de neurologische en motivationele effecten van misbruik drugs (Harris c.s., 2005; Borgland c.s., 2006; Jupp c.s., 2011; voor een beoordeling, zie Bonci en Borgland, 2009; Martin-Fardon c.s., 2010). Dus blokkade van OX1R verlaagt ethanol (Lawrence c.s., 2006) en nicotine zelftoediening (Nederlander c.s., 2008), remt cue-geïnduceerde herinstallatie van ethanol- (Lawrence c.s., 2006), cocaïne- (smid c.s., 2010) en op morfine lijkende (Harris c.s., 2005), en verzwakt stress-geïnduceerd herstel van cocaïne- (Boutrel c.s., 2005) en ethanolzoekende (Richards c.s., 2008). Bovendien bracht recent bewijs ook OX in verband2R-selectieve mechanismen voor alcoholbeloning en zoekgedrag (Shoblock c.s., 2011).

Er is bewijs dat de overmatige inname van bepaalde voedingsmiddelen onder specifieke omstandigheden gedrag en veranderingen in de hersenen veroorzaakt die lijken op een verslaving-achtige toestand (Tijdloos goud c.s., 2003; Kenny, 2011; Pelchat c.s., 2004; haver c.s., 2008; Ifland c.s., 2009; Gearhardt c.s., 2011a). Neurale systemen die drugsmisbruik motiveren en versterken, zijn ook voorgesteld om ten grondslag te liggen aan gedrag dat samenhangt met dwangmatig eten en voedselinname (Johnson en Kenny, 2010; Hoebel, 1985; Volkow en Wise, 2005; Corwin c.s., 2011; Gearhardt c.s., 2011b; Wang c.s., 2011). Deze bevindingen doen de vraag rijzen of het OX-systeem ook een rol kan spelen bij eetstoornissen die worden gekenmerkt door compulsieve episodes van het vogelpesttype, zoals boulimia nervosa en BED.

Daarom was deze studie gericht op het onderzoeken van het effect van de dubbele OX1/OS2R-antagonist SB-649868 (N-[((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide) (Di Fabio c.s., 2011), de selectieve OX1R-antagonist GSK1059865 (5-broom-N- [(2S,5S)-1-(3-fluoro-2-methoxybenzoyl)-5-methylpiperidin-2-yl]methyl-pyridin-2-amine) (Gozzi c.s., 2011) en de selectieve OX2R-antagonist JNJ-10397049 (N- (2,4-dibroomfenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimethyl-4-fenyl-1,3-dioxan-5-yl] ureum) (McAtee c.s., 2004; Dugovic c.s., 2009) in het BE-model beschreven door Cifani c.s. (2009), waarin BE-episoden voor HPF worden opgeroepen bij vrouwelijke ratten door cycli van voedselbeperking / hervoeding en acute stress. De drie antagonisten werden eerst geëvalueerd in vitro in rat recombinant OX1R en OX2R om hun potentie te bepalen en hun selectiviteit voor de twee receptorsubtypen te bevestigen. Hun farmacokinetiek (PK's) werd vervolgens geëvalueerd en de doses die hypnotische effecten kunnen induceren werden bepaald in een slaap-ratmodel. Ten slotte werden de verbindingen getest in de gedefinieerde doses in het BE-model.

MATERIALEN EN METHODES

Dieren

Al het onderzoek met dieren werd uitgevoerd in overeenstemming met de Europese richtlijn 86/609 / EEG inzake dierenwelzijn en -bescherming, die wordt erkend door het Italiaanse wetsbesluit nr. 116, 27 januari 1992, en volgens interne beoordeling uitgevoerd door de GlaxoSmithKline Committee on Animal Research & Ethics (CARE) en volgens het bedrijfsbeleid inzake de verzorging en het gebruik van proefdieren.

Drugs

SB-649868 (Di Fabio c.s., 2011), GSK1059865 (Gozzi c.s., 2011) en JNJ-10397049 (McAtee c.s., 2004) werden gesynthetiseerd in GSK-laboratoria. OXA werd geleverd door California Peptides Research (cat.nr. 471-99, CA). Myo- [1,2-3H(N)] inositol (NET-906, specifieke activiteit: 51 Ci / mol) en yttriumsilicaat-RNA-bindingsparels (RPNQ0013) werden gekocht bij Perkin-Elmer (Italië). Topiramate (Topamax; Janssen-Cilag) werd gekocht van Janssen-Cilag. Het was verkrijgbaar in tabletten, die vóór toediening werden verkleind tot poeder.

Experiment 1: antagonisme van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 bij Rat OX1R en Rat OX2R

Cel cultuur

Ratten basophil leukemiecellen stabiel getransfecteerd met OX van de rat1R (rOX1R) of OX van de rat2R (rOX2R) werden gekweekt in a-MEM (Invitrogen / GIBCO) aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS, PAA), 100 U / ml penicilline G, 100 U / ml streptomycine (Pen / Strep; Invitrogen / GIBCO) en 400 μg / ml geneticine (Invitrogen / GIBCO), bij 37 ° C met 5% CO2 in een vochtige atmosfeer.

Accumulatie van [3H] inositolfosfaten (IP's)

Accumulatie van [3H] inositolfosfaten (IP's) werden gemeten zoals eerder beschreven (Zwaaien c.s., 2003) met de volgende wijzigingen. De cellijnen die stabiel RXO tot expressie brengen1R of ROX2R werd gezaaid in 96-putjes weefselkweekplaten bij 3 x 104 cellen per putje en 1.5 × 104 cellen per putje respectievelijk in a-MEM aangevuld met 10% FBS en Pen / Strep zonder geneticine. Na 24 h werd kweekmedium afgezogen en werd 100 μl vers medium aangevuld met 10 μCi / ml NET-906 (Perkin-Elmer) aan cellen toegevoegd; aldus werd 1 μCi radioactief gemerkt inositol per putje gebruikt. Na 16 h van incubatie werden de cellen twee keer gewassen met de testbuffer (1 x HBSS, 20 mM HEPES (pH 7.4), plus 0.1% runderserumalbumine en 10 mM LiCl), vóór de toevoeging van agonisten of antagonisten. Antagonisten werden geïncubeerd voor 30 min bij 37 ° C vóór stimulering met agonist. Concentratie-responscurves (CRC's) van OXA variërend van 0.0001 tot 10 μM werden uitgevoerd. Na 1 h incubatie bij 37 ° C, werd de assaybuffer afgezogen, 80 pl per putje 0.1 M ijskoud mierenzuur werd toegevoegd en cellen werden achtergelaten voor 30 min incubatie bij kamertemperatuur. Een maat van 20 pl van het celextract werd toegevoegd aan 80 pl van yttriumsilicaatparels (YSi SPA; Perkin-Elmer; 12.5 mg / ml), geschud voor 1 h bij kamertemperatuur en bij 4 ° C gelaten voor 2 h vóór rekenen op een Packard Top-Count NXT microtiterplaatscintillatieteller.

Gegevens werden uitgedrukt als% maximale agonistrespons, als volgt berekend:% maximale agonistrespons = ((cpmantagonist-cpmbasis-) / Cpmmaxagonistresponse-cpmbasis-) × 100.

In-vitro gegevensanalyse

CRC's werden gepast door sigmoïdale niet-lineaire regressieanalyse met behulp van de GraphPad Prism 5.0-software (GraphPad Software, San Diego, CA) om agonist EC te verkrijgen50 (agonistconcentratie vereist om 50% van de maximale respons te verkrijgen).

De potentie (KB= antagonist-dissociatieconstante) van niet-overdraagbare antagonisten werd bepaald door toepassing van de vergelijking van het operationele model voor niet-competitieve antagonisten (Kenakin c.s., 2006). De KB waarde voor overkombare antagonisten werd berekend door Schild's analyse (Arunlakshana en Schild, 1959). Voor SB-649868 alleen de antagonist IC50 werd berekend. We hebben de respons van 1 μM OXA geplot in de afwezigheid en in de aanwezigheid van vier verschillende concentraties antagonisten. IC50 wordt gedefinieerd als de antagonistconcentratie die vereist is om met 50% de door de agonist geproduceerde respons te remmen. Resultaten worden uitgedrukt als pEC50 (-log10 EC50), pKB (-log10 KB) of pIC50 (-log10 IC50) en ze worden weergegeven als gemiddelde ± SEM of als gemiddelde met 95% betrouwbaarheidslimieten (95% CL) van ten minste drie onafhankelijke experimenten. Alle geteste geneesmiddelen werden opgelost in dimethylsulfoxide (DMSO) en verder verdund in de bepalingsbuffer om een ​​uiteindelijke DMSO-concentratie te geven die niet hoger was dan 0.5%.

Experiment 2: PK-bepalingen bij mannelijke en vrouwelijke ratten

Om PK-bloedblootstelling voor de slaap- en BE-onderzoeken te evalueren, zijn PK-profielen van verbindingen geanalyseerd bij mannelijke en vrouwelijke ratten in dezelfde experimentele omstandigheden van slaap- en BE-experimenten. De PK-profielen werden onderzocht na toediening door sondevoeding van 3 mg / kg SB-649868 bij vrouwelijke en mannelijke ratten, intraperitoneale toediening van 10 mg / kg bij vrouw en 5 mg / kg bij mannelijke ratten van JNJ-10397049 en toediening via sondevoeding in vrouwelijke ratten en intraperitoneale toediening bij mannelijke ratten van 10 mg / kg GSK1059865. Bloedmonsters werden verzameld via de dijader met intervallen tot 4 h na toediening. Hersenen monsters werden verzameld aan het einde van het experiment. De concentratie van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 in bloed- en hersenmonsters werd bepaald met behulp van een methode op basis van eiwitprecipitatie gevolgd door HPLC-MS / MS-analyse. Niet-compartimentele PK-parameters werden verkregen uit de bloedconcentratie-tijdprofielen met behulp van het softwarepakket WinNonlin v.4.0 (Pharsight, Mountain View, CA). PK-parameters worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD (Lezen en Braggio, 2010).

Experiment 3: effect van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 op ratten-slaapmodel

Dieren

Mannelijke Sprague-Dawley-ratten (275-300 g; Charles River, Calco, Como, Italië) werden afzonderlijk gehuisvest op een 12-h licht-donkercyclus (licht aan op 0300 h) 1 week voor de operatie. Toegang tot voedsel en water was toegestaan ad libitum. Om de biopotentiële signalen te verzamelen, werd een miniatuur multikanaals telemetrische zender (TL10M3-F40-EET; Data Sciences Int.) Intraperitoneaal in de dieren geïmplanteerd. Twee elektroden werden permanent met tandcement aan de schedel bevestigd om het corticale elektro-encefalogram (EEG) te registreren. Ze hadden direct contact met de dura mater door twee geboorde gaten in het fronto-pariëtale gebied. Twee andere elektroden werden bevestigd aan de skeletspieren van de nek, voor het opnemen van elektromyogram (EMG) of in het periorbitale gebied van het oog om elektro-oculogram (EOG) te registreren.

Opnemen

Na herstel van de operatie werden de dieren in hun thuishavens in een temperatuurgecontroleerde omgeving (21 ± 1 ° C) met toegang tot voedsel en water gehouden ad libitum. Geïmplanteerde dieren vertoonden onmiddellijk na herstel na een operatie een normaal gedragsrepertoire. Om echter normale slaappatronen opnieuw te kunnen instellen, werden dieren gebruikt na een 3-weekperiode. De hierboven beschreven omgevingscondities werden gehandhaafd gedurende de slaapstudies. Voor de duur van de testperiode bleven vrij bewegende dieren in hun huiskooien op individuele ontvangers. EEG- en EMG- of EOG-signalen werden continu opgenomen met behulp van DSI Dataquest ART. Het EEG-spoor, verdeeld in 10-s epochs, werd digitaal getransformeerd (FFT-transformatie) om de vermogensspectra van δ, θ, α en β banden om drie verschillende activiteitspatronen in de rat te onderscheiden (waak-, NREM-slaap- en REM-slaap). De markeringen toegewezen door het geautomatiseerde scoresysteem (slaapfase, DSI) werden overgebracht naar het EEG digitale signaal en vervolgens bevestigd door visueel onderzoek van de EEG- en EMG / EOG-sporen door getrainde operatoren, blind voor de medicamenteuze behandeling. Analyse van de slaapparameters omvatte: latentie tot NREM-slaap (tijdsinterval tot de eerste zes opeenvolgende NREM-slaapperioden na injectie), latentie tot REM-slaap (tijdsinterval tot het eerste REM-slaapperiode na injectie), NREM-slaap, REM-slaap en totaal bedtijd.

Behandeling met geneesmiddelen

Geneesmiddelbehandelingen werden uitgevoerd volgens een gerandomiseerd gepaarde cross-over ontwerp waarbij, in afzonderlijke experimentele sessies, elk dier een vehiculum- of medicamenteuze behandeling ontving. Ratten werden behandeld met experimentele verbinding of het respectievelijke vehikel, in een volume van 2 ml / kg, 6 h na uitschakeling van het licht (Circadiaanse tijd (CT) 18). Er werden opnames gemaakt voor de volgende 3-h testperiode. SB-649868 werd opgelost in 0.5% HPMC (hydroxy-propyl-methyl-cellulose) (w / v) in gedestilleerd water en werd toegediend door middel van sondevoeding in doses van 3 en 10 mg / kg. JNJ-10397049 werd opgelost in mygliol 812N en intraperitoneaal toegediend in doses 5 en 25 mg / kg. GSK1059865 werd opgelost in 0.5% HPMC (w / v) in gedestilleerd water en intraperitoneaal toegediend in doses van 5 en 25 mg / kg.

Data-analyse

Alle gegevens worden uitgedrukt als het gemiddelde ± SEM. De resultaten werden geanalyseerd met behulp van een one-way variantieanalyse (ANOVA). Post-hoc vergelijkingen werden uitgevoerd met de test van Dunnett. Statistische significantie werd vastgesteld op P

Experiment 4: eetbuien

Dieren

Vrouwelijke Sprague-Dawley-ratten (Charles River) werden gebruikt. Hun lichaamsgewicht was 225-250 g aan het begin van de experimenten. Ratten werden geacclimatiseerd aan individuele kooien onder een 12-h licht / donker cyclus (licht aan bij 0800 h) met ad libitum voer en water voor 2 weken vóór de experimenten. Ze werden bewaard in een ruimte met een constante temperatuur (20-22 ° C) en vochtigheid (45-55%). Ratten werden in individuele kooien gehouden met metalen wanden; de vloer en de voormuur waren gemaakt van een metalen rooster. De afmetingen van de kooivloer waren 30 cm x 30 cm; de kooi was 30 cm hoog. Een voordeur (30 cm × 20 cm) bestaande uit een metalen rooster was aanwezig in de voorste wand van de kooi om toegang te krijgen tot de binnenkant van de kooi. Het resterende deel van de voormuur was voorzien van een drinkburet.

Dieet

Dieren werden standaard rattenvoederkorrels aangeboden, 4RF18 (Mucedola; Settimo Milanese, Milano, Italië; 2.6 kcal / g). De HPF was een pasta bereid door het mengen van Nutella (Ferrero, Alba, Torino, Italië) chocoladeroom (5.33 kcal / g; 56%, 31% en 7% van respectievelijk koolhydraten, vetten en eiwitten), geaarde voedselpellets ( 4RF18; Mucedola; Settimo Milanese) en water in de volgende verhouding gewicht / gewichtspercentages: 52% Nutella, 33% voedselpellets en 15% water. Het HPF-dieet had een calorische waarde van 3.63 kcal / g. Standaard pellets werden aangeboden in een metalen roostercontainer die aan de voorste wand van de kooi werd gehangen; het werd uit de kooi verwijderd om zijn gewicht te meten om de inname van voedselpellets te bepalen. HPF werd aangeboden in een koffiekopje; het handvat van de beker werd in het metalen rooster van de voorste wand van de kooi gestoken en aan de muur bevestigd.

De stress-procedure

Voor 15 min. Werd de China-koffiekop met HPF in een metalen rastercontainer geplaatst die aan de voorste wand van de kooi was opgehangen. In deze omstandigheden was het dier in staat om de beker te zien waarin HPF werd ontvangen op dagen 5, 6, 13 en 14 van de eerste twee cycli, was in staat om de HPF zelf te zien en ook om de geur te ruiken. In deze 15-min periode was de rat betrokken bij herhaalde bewegingen van de voorpoten, het hoofd en de romp, gericht op het verkrijgen van de HPF, maar deze kon deze niet bereiken.

Dit veroorzaakte een mild stressvolle toestand die een significante stijging van de serumcorticosteronspiegels veroorzaakt (Cifani c.s., 2009). Na 15 min. Werd de beker in de kooi van ratten van de stressgroepen geplaatst, zodat HPF voor hen toegankelijk werd.

Behandeling met geneesmiddelen

Op dag 25 werden verbindingen of respectieve vehikels gegeven vóór toegang tot HPF. SB-649868 werd opgelost in 0.5% HPMC (w / v) in gedestilleerd water en werd toegediend door middel van sondevoeding in doses van 1 en 3 mg / kg. Topiramaat werd opgelost in 0.5% HPMC (w / v) in gedestilleerd water en werd toegediend door middel van sondevoeding in de dosis 60 mg / kg. JNJ-10397049 werd opgelost in 0.5% HPMC (w / v) in gedestilleerd water en werd intraperitoneaal toegediend in doses van 1 en 3 mg / kg. GSK1059865 werd opgelost in 0.5% HPMC (w / v) in gedistilleerd water en toegediend door middel van sondevoeding in doses van 10 en 30 mg / kg. Alle geneesmiddelen of hun drager kregen 1 h toegediend voordat ze toegang kregen tot HPF.

Experiment 4A: effect van SB-649868 en Topiramate

Om de rol van OXR-antagonisten in BE te evalueren, werd de niet-selectieve OXR-antagonist, SB-649868, getest in ons BE-model.

De dieren werden elk verdeeld in vier groepen 27-dieren, afgestemd op lichaamsgewicht en dagelijkse voedselinname: (1) de niet-beperkte en niet-blootgesteld aan stress (NR + NS) groep; (2) de beperkte en niet-blootgesteld aan stress (R + NS) groep; (3) de niet-beperkte en blootgestelde aan stress (NR + S) groep; en (4) de groep voor beperkt en blootgesteld aan stress (R + S). Eenmaal toegewezen aan een van deze groepen, bleven de ratten gedurende de hele studie in die groep. De ratten blootgesteld aan stress werden geacclimatiseerd in een andere kamer dan die van de groepen die niet waren blootgesteld aan stress. Ratten werden blootgesteld aan drie opeenvolgende 8-dagcycli gevolgd door de laatste test op dag 25 (Tabel 1):

Tabel 1 

Het schema dat is goedgekeurd om eetbuien op te roepen
  1. de NR + NS-groep had voer ad libitum voor 4-dagen ontvingen ze op dagen 5 en 6 chow + HPF voor 2 h; op dagen 7 en 8 hadden ze voer ad libitum; en op dag 25 werden ze niet blootgesteld aan stress;
  2. de tweede groep had voer en HPF als NR + NS, maar op de testdag (dag 25) werden ze blootgesteld aan stress (NR + S);
  3. de derde groep (R + NS) had chow beperkt tot 66% van de normale inname voor 4-dagen, ze kregen chow en HPF (2 h) aangeboden op dagen 5 en 6 en alleen chow op dagen 7 en 8; op dag 25 werden ze niet blootgesteld aan stress.
  4. de R + S-groep had chow beperkt tot 66% van de normale inname voor 4-dagen, ze kregen chow en HPF (2 h) aangeboden op dagen 5 en 6 en alleen chow op dagen 7 en 8; en op dag 25 werden ze blootgesteld aan stress.

De 8-dagcyclus werd driemaal herhaald, maar in de derde cyclus hadden de dieren geen toegang tot HPF-voedsel.

Op dag 25 werd elke groep van 27-ratten verdeeld in drie subgroepen en respectievelijk behandeld met vehiculum, SB-649868, 1 of 3 mg / kg, toegediend via gavage 1 h voor toegang tot HPF.

HPF-inname werd uitgedrukt als gemiddeld ingenomen kcal / kg ± SEM; HPF-inname werd gemeten bij 15, 30, 60 en 120 min. Na het begin van de toegang. De inname van voedselpellets werd alleen gemeten bij 120 min, vanwege de bevindingen van eerdere onderzoeken die aantoonden dat de inname van voedselpellets erg klein was en om verstoring van de dieren tijdens de test te voorkomen.

Topiramaat, gebruikt als referentieverbinding voor dit experimentele paradigma (Cifani c.s., 2009), werd getest in dezelfde ratten, 10 dagen na het einde van het SB-649868-experiment. Van deze 108-dieren werden 72 verdeeld in dezelfde vier groepen (18-dieren voor elke groep) die eerder zijn beschreven. Na een vrije dag aan het einde van de eerste test ontvingen deze groepen ratten een extra 8-dagcyclus: NR + NS- en NR + S-groepen hadden 8-dagen van voer ad libitum, terwijl de R + NS- en R + S-groepen 4-dagen hadden waarbij het voer beperkt was tot 66% van de normale inname gevolgd door 4-dagen van voer ad libitum. In deze aanvullende cyclus hadden alle groepen geen toegang tot HPF. De volgende dag werden NR + S- en R + S-groepen blootgesteld aan stress, terwijl NR + NS- en R + NS-groepen dat niet waren. Op deze dag werd topiramaat (60 mg / kg) of het vehikel ervan toegediend via sondevoeding 1 h voor toegang tot HPF.

Experiment 4B: Effect van JNJ-10397049 en GSK1059865

Het onderzoeken van de OXR die betrokken is bij het verminderen van BE-episoden, de selectieve OX2R-antagonist, JNJ-10397049 en de selectieve OX1R-antagonist, GSK1059865, werd getest in ons BE-model.

Een extra vrouwelijke 54-rat, verdeeld in twee groepen (NR + NS en R + S) van 27-ratten, werden onderworpen aan dezelfde experimentele procedure als in Experiment 4A. Slechts twee groepen ratten werden in dit experiment gebruikt omdat zowel NR + S- als R + NS-ratten geen BE laten zien. Op de testdag (dag 25), 1 h voor toegang tot HPF, werden ratten intraperitoneaal behandeld met JNJ-10397049 (1 en 3 mg / kg) of het vehikel.

Na een vrije dag aan het einde van de JNJ-10397049-test ontving dezelfde groep ratten een extra 8-dagcyclus gevolgd op dag 10 (zoals beschreven in het vorige experiment) door behandeling met GSK1059865. GSK1059865 (10 en 30 mg / kg) of het vehikel ervan werden toegediend via maagsonde 1 h voor toegang tot HPF.

Data-analyse

Alle gegevens worden uitgedrukt als het gemiddelde ± SEM en elke waarde geeft het gemiddelde aantal dieren per groep weer zoals beschreven in de legenda. Gegevens werden geanalyseerd door tweewegs-ANOVA met vergelijkingen tussen proefpersonen voor experimentele groepen of medicamenteuze behandelingen en binnen-subjectvergelijking voor waarnemingstijd. Post-hoc vergelijkingen werden uitgevoerd door de Bonferroni-test. Statistische significantie werd vastgesteld op P

RESULTATEN

Experiment 1: antagonisme van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 bij rOX1R en ROX2R

OXA (0.1 nM-10 μM) verhoogde de [3H] IP's accumulatie op een concentratieafhankelijke manier met een pEC50 waarde van 7.79 ± 0.04 (n= 16) en 7.68 ± 0.04 (n= 16) bij rOX1R en ROX2R, respectievelijk. Bij rOX1R, JNJ-10397049 (1 μM-33 μM; Figuur 1a) en GSK1059865 (0.3 nM-10 nM; Figuur 2a) produceerde niet-overweldigend antagonisme met een dosisafhankelijke rechtse verschuiving van de OXA EC50 en een gelijktijdige afname van de maximale respons van de agonist. De berekende pKB waarden waren 5.73 ± 0.16 (n= 3) en 8.77 ± 0.12 (n= 3) voor respectievelijk JNJ-10397049 en GSK1059865. SB-649868 (0.1, 0.3, 0.6 en 1 nM) (Figuur 3a) veroorzaakte een significante vermindering van de maximale respons van OXA, zonder een verschuiving van de agonistische EC50. De geschatte pIC50 waarde was 9.46 ± 0.02 (n= 3). Bij rOX2R JNJ-10397049 (10 nM-0.3 μM) (Figuur 1b) en GSK1059865 (0.1-3.3 μM) (Figuur 2b) produceerde een klassiek opneembaar profiel met parallelle rechtse verschuiving van de OXA EC50 zonder onderdrukking van de agonist maximale respons. De hellingen die werden verkregen met de regressieanalyse van Schild waren 1.17 (95% CL 0.92-1.42) en 0.86 (95% CL 0.71-1.00) voor respectievelijk JNJ-10397049 en GSK1059865, en ze waren niet statistisch verschillend van één (P> 0.05). De hellingen beperken tot één, de pKB waarden waren 8.49 (95% CL 8.34-8.63; n= 3) en 6.90 (95% CL 6.80-6.99; n= 3) voor respectievelijk JNJ-10397049 en GSK1059865. SB-649868 (0.1-3.3 nM) (Figuur 3b) veroorzaakte een dosisafhankelijke rechtse verschuiving van de OXA-EC50, vergezeld van een vermindering van de maximale respons van de agonist. Door het operationele model toe te passen voor analyse van niet-competitieve antagonismen, zoals beschreven in Materialen en methoden, pKB waarde van 9.35 ± 0.15 (n= 3) berekend.

Figuur 1 

[3H] inositol fosfaten (IP's) accumulatie opgewekt door concentratie-respons curven (CRC) van orexin-A (OXA) (•) in ratten basophil leukemie (RBL) cellen die: OX van de rat tot expressie brengen1R (rOX1R) (a) in de aanwezigheid van 1 (Δ), 3.3 (▾), 10 ...
Figuur 2 

[3H] inositol fosfaten (IP's) accumulatie opgewekt door concentratie-respons curven (CRC) van orexin-A (OXA) (•) in ratten basophil leukemie (RBL) cellen die: rOX tot expressie brengen1R (a) in aanwezigheid van 0.3 (▴), 1 (▾), 3.3 (♦) ...
Figuur 3 

[3H] inositol fosfaten (IP's) accumulatie opgewekt door concentratie-respons curven (CRC) van orexin-A (OXA) (•) in ratten basophil leukemie (RBL) cellen die: rOX van de rat tot expressie brengen1R (rOX1R) (a) in de aanwezigheid van 0.1 (□), 0.3 (Δ), ...

Experiment 2: PK-bepalingen bij mannelijke en vrouwelijke ratten

PK-bepalingen bij mannelijke ratten werden onderzocht onder dezelfde experimentele omstandigheden als Experiment 3, en ze worden getoond in Tabel 2.

Tabel 2 

Farmacokinetische parameters van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 in mannelijke Sprague-Dawley-ratten

Cmax van SB-649868 bij 3 mg / kg was 333 ± 52 ng / ml en AUC 1260 ± 262 ng*h / ml.

Cmax van JNJ-10397049 bij 5 mg / kg was 14.2 ± 1.0 ng / ml en AUC 64 ± 4.3 ng*h / ml.

Cmax van GSK1059865 bij 10 mg / kg was 366 ± 70 ng / ml en AUC 1290 ± 320 ng*h / ml.

PK-bepalingen bij vrouwelijke ratten werden onderzocht onder dezelfde experimentele omstandigheden als Experiment 4, en ze worden weergegeven in Tabel 3.

Tabel 3 

Farmacokinetische parameters van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 bij vrouwelijke Sprague-Dawley-ratten

Cmax van SB-649868 bij 3 mg / kg was 572 ± 115 ng / ml en AUC 1708 ± 331 ng*h / ml.

Cmax van JNJ-10397049 bij 10 mg / kg was 369 ± 97 ng / ml en AUC 457 ± 224 ng*h / ml.

Cmax van GSK1059865 bij 10 mg / kg was 268 ± 29 ng / ml en AUC 768 ± 46 ng*h / ml.

Experiment 3: effect van SB-649868, JNJ-10397049 en GSK1059865 op ratten-slaapmodel

Het hypnotische profiel van de OXR-antagonisten werd geëvalueerd over een 3-h-periode in de actieve fase van de rat, waarbij de opnamefase bij CT 18 (lichten uit bij CT 12) van de licht-donkercyclus van de rat werd gestart. CT 18 werd specifiek gekozen om een ​​maximaal venster mogelijk te maken om de hypnotische effecten van verbindingen te beoordelen.

In deze experimentele omstandigheden, de dubbele OX1/OS2R-antagonist SB-649868 (3 en 10 mg / kg, door sondevoeding) veroorzaakte een sterke afname in waakzaamheid (F (2, 21) = 22.9; P<0.01), en een afname van de slaaplatentie (F (2, 21) = 9.11; P<0.01) vergeleken met de controlegroep. De Dunnett-test na ANOVA toonde een statistisch significant effect aan bij 3 en 10 mg / kg (P<0.01) in beide slaapparameters. De analyse van slaappatronen duidt op een toename van zowel NREM- als REM-slaap bij beide doses (Tabel 4a).

Tabel 4a 

Effect van SB-649868 (door Gavage) op slaapparameters bij ratten

De selectieve OX2R-antagonist JNJ-10397049 (5 en 25 mg / kg, intraperitoneaal) vertoonden een hypnotisch effect, zoals blijkt uit de afname van waakzaamheid (F (2, 14) = 18.8; P<0.01) en slaaplatentie (F (2, 14) = 4.8; P<0.05). De Dunnett-test na ANOVA toonde aan dat de afname statistisch significant was bij zowel 5 als 25 mg / kg (P<0.01 voor waakzaamheid en P<0.05 voor slaaplatentie). Een toename van NREM-slaap werd waargenomen bij beide doses (P<0.01), maar er werd geen effect waargenomen op de REM-slaap (Tabel 4b).

Tabel 4b 

Effect van JNJ-10397049 (ip) op slaapparameters in ratten

De selectieve OX1R-antagonist GSK1059865 (5 en 25 mg / kg, intraperitoneaal) produceerde een trend naar vermindering van waakzaamheid (F (2, 14) = 3.27; P<0.05) en slaaplatentie (F (2, 20) = 1.73; P> 0.05). De analyse van slaappatronen liet alleen een toename zien in NREM-slaap, statistisch significant bij de hoogste geteste dosis (P<0.05 Dunnett-test volgens ANOVA); er werd geen effect waargenomen in de REM-slaap (Tabel 4c).

Tabel 4c 

Effect van GSK1059865 (ip) op slaapparameters in ratten

Experiment 4A. BE: Effect van SB-649868 en Topiramate

De ANOVA onthulde een zeer significant verschil in 2-h HPF-inname in de vier groepen ratten na toediening van het voertuig (F (3, 32) = 13.81; P<0.01). Zoals getoond in Figuur 4, na toediening van het vehiculum was de HPF-inname in de R + S-groep duidelijk hoger dan die van de controlegroep (NR + NS). HPF-inname van R + S-ratten was zeer uitgesproken in de eerste 15 min van toegang tot het; HPF-inname van de NR + S-groep was niet significant verschillend van die van controles (NR + NS), wat aangeeft dat stress niet voldoende was om BE te induceren. Bovendien was de HPF-inname van de R + NS-groep niet significant verschillend van die van controles (NR + NS), wat aangeeft dat cycli van voedselbeperking niet voldoende zijn om BE te induceren. Daarom kan BE worden veroorzaakt door een unieke interactie tussen diëten en stress.

Figuur 4 

Effect van SB-649868 (1 en 3 mg / kg, via sondevoeding) of het voer- tuig op voedselinname (HPF). Waarden worden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM van negen ratten. **P<0.01, verschil met met drager behandelde ratten; waar niet aangegeven, ...

De inname van standaardvoedselpellets was erg klein (ongeveer 3-4% van de totale calorie-inname in de 2 h-test), en het werd niet beïnvloed door voedselbeperking, stress of door de combinatie van beide.

Zoals getoond in Figuur 4, SB-649868 verminderde de inname van HPF in de R + S-groep significant (F (2, 24) = 18.63; P<0.01), maar niet in de andere groepen: NR + NS (F (2, 24) = 0.91; P> 0.05); R + NS (F (2, 24) = 0.16; P> 0.05); NR + S (F (2, 24) = 1.1; P> 0.05). Post-hoc vergelijkingen onthulden dat het effect van SB-649868 in de R + S-groep op alle tijdstippen statistisch significant was als reactie op de hoogste dosis 3 mg / kg. De dosis 1 mg / kg in de groep R + S vertoonde een trend naar vermindering die niet statistisch significant was.

De topiramaattest onthulde een zeer significant verschil in 2-h HPF-inname (F (3, 32) = 3.93; P<0.01) van de verschillende groepen na toediening van het voertuig. Topiramaat toegediend met een selectiviteit van 60 mg / kg verminderde de HPF-opname (F (1, 16) = 6.57; P<0.01) in de R + S-groep (Figuur 5), maar niet in NR + NS-, NR + S- en R + NS-groepen. Gegevens van de groepen NR + S en R + NS worden niet getoond.

Figuur 5 

Effect van topiramaat (60 mg / kg, per maagsonde) of het voer- tuig op voedsel dat zeer smakelijk is (HPF). Waarden worden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM van negen ratten. *P<0.05, verschil met met drager behandelde ratten; waar niet aangegeven, het verschil ...

Experiment 4B. BE: Effect van JNJ-10397049 en GSK1059865

Net als bij het vorige experiment bevestigde de ANOVA dat de R + S-groep een significante toename van de HPF-inname vertoonde (F (1, 16) = 16.17; P<0.01). JNJ-10397049 had ook geen invloed op de voeding in de NR + NS-groep (F (2, 26) = 0.23; P> 0.05) of in de R + S-groep (F (2, 24) = 0.49; P> 0.05) (Figuur 6a).

Figuur 6 

Effect van JNJ-10397049 (1 en 3 mg / kg, intraperitoneaal) (a) of GSK1059865 (10 en 30 mg / kg, per sondevoeding) (b) op inname van voedsel dat zeer smakelijk is (HPF). Waarden worden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM van negen ratten. *P<0.05, verschil ...

De verkregen resultaten tonen aan dat OX2R-antagonisme had geen invloed op het voedingsgedrag. Daarom werd het effect dat eerder werd waargenomen met SB-649868 vermoedelijk gemedieerd via OX1R-mechanismen. Om deze bevinding te bevestigen, de selectieve OX1R-antagonist GSK1059865 (10 en 30 mg / kg) werd getest. De ANOVA toonde een significant verschil tussen de groepen in reactie op vehikelbehandeling (F (1, 16) = 17.1; P<0.01), wat het BE-effect in de R + S-groep bevestigt. GSK1059865 (in de doses van 10 en 30 mg / kg) had geen invloed op de voeding in de NR + NS-groep (F (2, 24) = 0.10; P> 0.05). In de R + S-groep vertoonde de ANOVA een significant effect (F (2, 23) = 4.20, P<0.05) (Figuur 6b). Post-hoc Vergelijkingen toonden aan dat het effect van GSK1059865 in de R + S-groep bij de doses van 10 en 30 mg / kg statistisch significant was bij 15, 30 en 60 min na vrije toegang tot HPF.

DISCUSSIE

Een grote hoeveelheid bewijs suggereert dat dieet, stress en negatieve affectieve toestanden mogelijke triggers van BE kunnen zijn bij patiënten die lijden aan BED of boulimia nervosa (Wardle c.s., 2000; Freeman en Gil, 2004). Stippe periodes zijn inderdaad gebruikelijk in de geschiedenis van vreetbuien, hoewel honger zelf niet voldoende lijkt om BE te veroorzaken bij afwezigheid van stress en negatieve affectieve toestand (Polivy c.s., 1994; Wateren c.s., 2001). Aanzienlijk bewijs suggereert dat BE kan worden veroorzaakt door een unieke interactie tussen diëten en stress; dus kunnen omgevingsstress en een geschiedenis van cyclische voedselbeperkingen verantwoordelijk zijn voor de neerslag en het onderhoud ervan (Stice c.s., 2001; Crowther c.s., 2001; Wolff c.s., 2000). Dienovereenkomstig zijn terugkerende voedselrestricties consequent de sterkste voorspeller van te veel eten als reactie op stress (Wardle c.s., 2000).

De combinatie van diëten en stress speelt ook een belangrijke rol in de ontwikkeling van BE in ons preklinisch model. In het model ontwikkeld door Cifani c.s. (2009), BE wordt opgewekt door jojo-dieet en stressvolle blootstelling aan HPF. In dit model worden vrouwelijke ratten blootgesteld aan herhaalde beperkingscycli en een stressvolle procedure die wordt gekenmerkt door blootstelling van dieren aan HPF zonder de mogelijkheid om er toegang toe te hebben.

Zoals vermeld in de inleiding, zijn OX-mechanismen betrokken bij de beheersing van zowel homeostatische als op beloning gebaseerde voeding, alsook bij de motivatie voor drugsmisbruik (Bonci en Borgland, 2009). In overeenstemming met het idee dat neurale systemen die drugsmisbruik motiveren en versterken, ook ten grondslag liggen aan gedrag dat verband houdt met het zoeken naar voedsel en de inname (Gearhardt c.s., 2011b), deze studie onderzocht het vermogen van de OXR-antagonist om BE-episodes te blokkeren en om de betrokkenheid van OX te evalueren1 en OX2 mechanismen in de controle van BE-afleveringen.

Om deze reden hebben drie verbindingen die in de literatuur worden vermeld een verschillende selectiviteit vs OX1 en OX2 menselijke receptoren werden getest: de dubbele OX1/OS2R-antagonist (SB-649868), de selectieve OX2R-antagonist (JNJ-10397049) en de selectieve OX1R-antagonist (GSK1059865). Om farmacologisch relevante doses te gebruiken, werden de drie OXR-antagonisten eerst beoordeeld in vitro in rat recombinant OX1R en OX2R om de potentie te bepalen en hun selectiviteit bij deze diersoort te bevestigen. De verschillende OX1/OS2R-selectiviteit werd bevestigd bij ratten met [3H] inositol-assay.

Om PK-bloedblootstelling te evalueren ter ondersteuning van de slaap- en BE-onderzoeken, zijn PK-profielen van verbindingen geanalyseerd bij mannelijke en vrouwelijke ratten, aangezien deze het geslacht waren dat respectievelijk in de slaap- en BE-experimenten werd gebruikt.

Vervolgens werden de doses die hypnotische effecten kunnen induceren bepaald in een slaap-ratmodel. Ten slotte werden de verbindingen getest in de gedefinieerde doses in het BE-model.

OX1R en OX2R-antagonisten worden in de literatuur beschreven als zijnde betrokken bij de beheersing van slaap, in het bijzonder voor het induceren van hypnotische effecten (Di Fabio c.s., 2011; Gozzi c.s., 2011; Dugovic c.s., 2009). In een preklinisch hypnotisch slaapmodel bij mannelijke ratten toonden de verkregen resultaten aan dat de dubbele OX1/OS2R-antagonist, SB-649868, veroorzaakte een robuust hypnotisch effect, zowel op het vermogen om slaap te induceren en te behouden, tot een statistisch significant effect bij 3 mg / kg. Vergelijkbaar met SB-649868, de OX2R-antagonist JNJ-10397049 vertoonde een goed hypnotisch effect met een significante afname van de tijd die wakend was doorgebracht met 5 mg / kg. Integendeel, de OX1R-antagonist GSK1059865 vertoonde een zeer slecht hypnotiserend vermogen om slaap te induceren en te handhaven. Deze bevindingen komen overeen met andere rapporten die suggereren dat OX2R is mogelijk belangrijker dan OX1R in het mediëren van het OX-effect op slaap (Sakurai, 2007; Brisbare-Roch c.s., 2007; Malherbe c.s., 2009; Dugovic c.s., 2009; Di Fabio c.s., 2011).

SB-649868, getest in de vier verschillende condities van stress en voedselrestrictie (NR + NS, R + NS, NR + S, R + S), kon de HPF-inname alleen in de R + S-groep verminderen. Bij 3 mg / kg had SB-649868 een effect dat vergelijkbaar was met dat van topiramaat. Net als met topiramaat, veranderde SB-649868 de inname van HPF niet in de andere condities van voedselbeperking en stress.

De OX2R-antagonist, JNJ-10397049, getest onder dezelfde omstandigheden, vertoonde geen enkel effect op de HPF-inname in alle vier de geteste omstandigheden.

Deze resultaten geven duidelijk aan dat de OX1R is betrokken bij de controle van BE-episodes en suggereerde een mogelijke rol van OX1R-antagonisten voor het omkeren van BE-episodes veroorzaakt door stress en beperkt dieet. Om deze hypothese te verifiëren, de selectieve OX1R-antagonist GSK1059865 werd geëvalueerd bij dieren met beperkte en gestresste dieren. De verkregen resultaten bevestigden dat de OX1R-antagonisten remden de toename in HPF-inname in R + S-ratten, zonder de voedselconsumptie in controles te beïnvloeden (NR + NS).

Het ontbreken van een effect van JNJ-10397049 kan niet worden toegeschreven aan een onvoldoende blootstelling aan verbindingen bij de dieren die zijn ingediend bij het BE-model. De PK-evaluatie van JNJ-10397049 duidde op een sekse-verschil, waarbij vrouwen meer werden blootgesteld dan mannelijke ratten met dezelfde dosis JNJ-10397049 (10 mg / kg). De geschatte AUC-waarden waren 64 ng*h / ml bij mannelijke ratten vs 457 ng*h / ml bij vrouwelijke ratten (ongeveer zeven keer hoger). Daarom werd geconcludeerd dat de blootstelling van dieren in het BE-model bij 1 en 3 mg / kg JNJ-10397049 ruim boven die waren die werden bereikt in het slaaponderzoek bij 5 en 25 mg / kg. Aan de andere kant werden er geen sekseverschillen waargenomen in de PK van zowel SB-649868 en GSK1059865, en blootstelling aan de twee verbindingen overlappen elkaar bij mannelijke en vrouwelijke ratten.

Zoals vermeld in de inleiding, is stress een belangrijke bepalende factor voor BE. Verschillende gegevensverzamelingen zijn in het afgelopen decennium geproduceerd die een rol ondersteunen voor OX-peptiden in hoge arousale toestanden, waaronder stress, waarbij de laatste wordt geassocieerd met aanzienlijk hogere percentages van OXergic neurotransmissie. OX-neuronen in de perifornical-dorsomediale hypothalamus zijn voorgesteld om stressactivatie te mediëren (Harris en Aston-Jones, 2006, voor een overzicht, zie Koob, 2008). Mogelijk activeert OXA van dit hypothalamische gebied CRF-expresserende neuronen in de paraventriculaire kern van de hypothalamus en in de centrale kern van de amygdala (Sakamoto c.s., 2004). Dienovereenkomstig OX1R-antagonisten remmen het herstel van het zoeken naar ethanol en sucrose veroorzaakt door de farmacologische stressor yohimbine (Richards c.s., 2008) en OXA herstelt het zoekgedrag tegen cocaïne (Boutrel c.s., 2005). Kort geleden, Kuwaki (2011) ontdekte dat het OX-systeem een ​​van de essentiële modulatoren is in de neurale circuits die autonome functies en emotioneel gedrag controleren. Eerdere bevindingen van Johnson c.s. (2010) toonde aan dat de selectieve OX1R-antagonist SB334867 verzwakte het angstachtige gedrag en blokkeerde de verhogingen van de motoriek, hartslag en bloeddrukrespons, veroorzaakt door de natriumlactaatuitdaging bij ratten.

Verschillende studies suggereren dat een gewijzigde regulatie van striatale dopamine (DA) mogelijk bestaat bij patiënten met boulimia nervosa en BED (Bello en Hajnal, 2010; Broft c.s., 2011; Wang c.s., 2011). De studies van Hoebel en collega's (voor een overzicht, zie Avena en Bocarsly, 2011) hebben veranderingen in striatale DA-afgifte en receptorbinding geopenbaard, vergelijkbaar met die gezien in respons op drugs van misbruik. Neuropeptiden die in de LH worden geproduceerd, kunnen de activiteit van VTA-DA en striatale neuronen moduleren. OX-bevattende neuronen projecteren van de LH naar de VTA, waar de OX1R speelt een sleutelrol bij het reguleren van mesolimbische DA-transmissie en de lonende eigenschappen van verschillende drugs- en voedselmisbruiken (Cason c.s., 2010; Uramura c.s., 2001; Zheng c.s., 2007). Bovendien kunnen BE-afleveringen worden gecontroleerd door een specifieke invloed op belonings- en versterkingsprocessen voor HPF. In dit opzicht is het interessant om op te merken dat OX-neuronen in de LH zijn voorgesteld als bemiddelaar voor beloningsactivatie (voor een review, zie Koob, 2008). Er wordt dus gesuggereerd dat OX-neuronen in de LH worden geactiveerd door aanwijzingen in verband met beloningen, zoals voedsel of geneesmiddelen, en stimulatie van OX-neuronen in de LH herstelt het zoeken naar geneesmiddelen bij ratten (Harris c.s., 2005).

Onze groep heeft onlangs aangetoond door middel van een preklinische MRI-benadering die OX1R in plaats van OX2R selectief het mesolimbische hersengebied en het corticale deel van de insula moduleren, gebieden die betrokken zijn bij het belonen van de verwerking (Gozzi c.s., 2011). Deze gegevens bevestigen en breiden de eerdere bevindingen uit dat OX1R speelt een rol bij beloningsverwerking en neerslag van drugszoekgedrag (Boutrel c.s., 2005; Lawrence c.s., 2006; Nederlander c.s., 2008; smid c.s., 2010). Er zal dus verder onderzoek nodig zijn om te evalueren of het onderdrukkende effect op BE door OX wordt opgeroepen1R-antagonisten houden verband met hun invloed op stress- of beloningsmechanismen, of op beide.

Concluderend, de resultaten verkregen in deze studie met behulp van drie OXR-antagonisten met verschillende selectiviteit voor OX1R vs OX2R toonde duidelijk de verschillende rol aan van OXR bij de controle van BE-episodes en bij de modulatie van slaap. Onze gegevens bevestigden de belangrijkste rol van OX2R-mechanismen in slaapbeheersing. Bovendien laten ze voor het eerst die OX zien1R-mechanismen spelen een belangrijke rol bij de controle van BE-episodes. Deze bevindingen suggereren dat gericht op OX1R zou een interessante nieuwe farmacologische benadering kunnen zijn voor de behandeling van BE-gerelateerde stoornissen.

Dankwoord

We danken dr. Charles Pickens voor de stilistische correctie van het manuscript.

Opmerkingen

EM-P is voltijds medewerker van GSK.

Referenties

  • American Psychiatric Association. Diagnostisch en statistisch handboek voor psychische stoornissen, IV-TR. American Psychiatric Association: Washington, DC; 2000.
  • Appolinario JC, Godoy-Matos A, Fontenelle LF, Carraro L, Cabral M, Vieira A, et al. Een open-label trial van sibutramine bij obese patiënten met een eetbuistoornis. J Clin Psychiatry. 2000, 63: 8-30. [PubMed]
  • Arunlakshana O, Schild HO. Enkele kwantitatieve toepassingen van drugsantagonisten. Br J Pharmacol Chemother. 1959, 14: 48-58. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME. 2011Regulatie van hersenbeloningssystemen bij eetstoornissen: neurochemische informatie van diermodellen voor eetaanvallen, boulimia nervosa en anorexia nervosa Neuropharmacologye-pub Vooruitblik 27 November 2011. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Bewijs voor suikerverslaving: gedrags- en neurochemische effecten van intermitterende, overmatige suikerinname. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20-39. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Bello NT, Hajnal A. Dopamine en eetbuien. Pharmacol Bioichem Behav. 2010, 97: 25-33. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Bonci A, Borgland S. De rol van orexin / hypocretine en CRF bij de vorming van geneesmiddelafhankelijke synaptische plasticiteit in het mesolimbische systeem. Neurofarmacologie. 2009, 56: 107-111. [PubMed]
  • Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A in de VTA is van cruciaal belang voor de inductie van synaptische plasticiteit en gedragssensibilisatie voor cocaïne. Neuron. 2006, 49: 589-601. [PubMed]
  • Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF, et al. De rol van hypocretine bij het veroorzaken van stress-geïnduceerde herstel van cocaïne-zoekgedrag. Proc Natl Acad Sci USA. 2005, 102: 19168-19173. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Brandewijn PE, Hill LA, Zheng W, Scolnick EM. Scintillatie-nabijheidstest van inositolfosfaten in celextracten: meting met hoge doorvoer van aan G-eiwit gekoppelde receptoractivering. Anal Biochem. 2003, 313: 311-318. [PubMed]
  • Brisbare-Roch C, Dingemanse J, Koberstein R, Hoever P, Aissaoui H, Flores S, et al. Bevordering van slaap door zich te richten op het orexin-systeem bij ratten, honden en mensen. Nat Med. 2007, 13: 50-155. [PubMed]
  • Broft AI, Berner LA, Martinez D, Walsh BT. Boulimia nervosa en bewijs voor striatale dopamine-ontregeling: een conceptuele beoordeling. Physiol Behav. 2011, 104: 122-127. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Carter WP, Hudson JI, Lalonde JK, Pindyck L, Mcelroy SL, Pope HG., Jr Farmacologische behandeling van eetbuistoornis. Int J Eat Disord. 2003; 34 (suppl: S74-S88. [PubMed]
  • Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. De rol van orexin / hypocretine bij beloning zoeken en verslaving: implicaties voor obesitas. Physiol Behav. 2010, 100: 419-428. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, et al. Narcolepsie in orexine knockout-muizen: moleculaire genetica van slaapregulatie. Cel. 1999, 98: 437-451. [PubMed]
  • Cifani C, Polidori C, Melotto S, Ciccocioppo R, Massi MA. Preklinisch model van eetaanvallen veroorzaakt door jojo-dieet en stressvolle blootstelling aan voedsel: effect van sibutramine, fluoxetine, topiramaat en midazolam. Psychopharmacology. 2009, 204: 113-125. [PubMed]
  • Corwin R, Avena NM, Boggiano MM. Gevoel en beloning: perspectief van drie rattenmodellen van eetaanvallen. Physiol Behav. 2011, 104: 87-97. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Crowther JH, Sanftner J, Bonifazi DZ, Shepherd KL. De rol van dagelijkse beslommeringen bij eetaanvallen. Int J Eat Disord. 2001, 29: 449-454. [PubMed]
  • de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, et al. De hypocretinen: hypothalamus-specifieke peptiden met neuro-exciterende activiteit. Proc Natl Acad Sci USA. 1998, 95: 322-327. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Devlin MJ, Yanovski SZ, Wilson GT. Obesitas: wat professionals in de geestelijke gezondheidszorg moeten weten. Am J Psychiatry. 2000, 157: 854-866. [PubMed]
  • Di Fabio R, Pellacani A, Faedo S, Roth A, Piccoli L, Gerrard P, et al. Ontdekkingsproces en farmacologische karakterisering van een nieuwe duale orexine 1 en orexine 2 receptorantagonist nuttig voor de behandeling van slaapstoornissen. Biorg Med Chem Lett. 2011, 21: 5562-5567. [PubMed]
  • Dugovic C, Shelton JE, Aluisio LE, Fraser IC, Jiang X, Sutton SW, et al. Blokkade van orexine-1-receptoren verzwakt door orexine-2-receptorantagonisme geïnduceerde slaappromotie bij de rat. J Pharmacol Exp Ther. 2009, 330: 142-151. [PubMed]
  • Fassino S, Leombruni P, Pierò A, Abbate-Daga G, Giacomo Rovera G. Stemming, houding en woede bij vrouwen met obesitas met en zonder eetbuistoornis. J Psychosom Res. 2003, 54: 559-566. [PubMed]
  • Foulds Mathes W, Brownley KA, Mo X, Bulik CM. De biologie van eetaanvallen. Eetlust. 2009, 52: 545-553. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Freeman LM, Gil KM. Dagelijkse stress, coping en voedingsbeperkingen bij eetaanvallen. Int J Eat Disord. 2004, 36: 204-212. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Corbin WR, Brownell KD. Voedselverslaving: een onderzoek naar de diagnostische criteria voor afhankelijkheid. J Addict Med. 2011a; 3: 1-7. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Yokum S, Orr PT, Stice E, Corbin WR, Brownell KD. Neurale correlaten van voedselverslaving. Arch Gen Psychiatry. 2011b; 68: 808-816. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Gold MS, Frost-Pineda K, Jacobs WS. Overmatig eten, eetaanvallen en eetstoornissen als verslavingen. Psychiatr Ann. 2003, 33: 112-116.
  • Gozzi A, Turrini G, Piccoli L, Massagrande M, Amantini D, Antolini M, et al. Functionele magnetische resonantie beeldvorming onthult verschillende neurale substraten voor de effecten van orexine-1 en orexine-2 receptorantagonisten. PLoS One. 2011, 6: e16406. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Grucza RA, Przybeck TR, Cloninger CR. Prevalentie en correlaten van eetbuistoornis in een steekproef van de gemeenschap. Compr Psychiatry. 2007, 48: 124-131. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Harris GC, Aston-Jones G. Opwinding en beloning: een dichotomie in orexine-functie. Trends Neurosci. 2006, 29: 571-577. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Een rol voor laterale hypothalamische orexine neuronen bij beloning zoeken. Natuur. 2005, 437: 556-559. [PubMed]
  • Haynes AC, Jackson B, Chapman H, Tadayyon M, Johns A, Porter RA, et al. Een selectieve orexine-1-receptorantagonist vermindert de voedselconsumptie bij mannelijke en vrouwelijke ratten. Regul Pept. 2000, 96: 45-51. [PubMed]
  • Heath AC. Eetbuien en boulimia: potentiële inzichten in etiologie en pathofysiologie door middel van genetische epidemiologische studies. Biol Psychiatry. 1998, 44: 1208-1209. [PubMed]
  • Hoebel BG. Hersenenneurotransmitters bij voedsel- en drugsbeloning. Am J Clin Nutr. 1985; 42 (suppl: 1133-1150. [PubMed]
  • Hollander JA, Lu Q, Cameron MD, Kamenecka TM, Kenny PJ. Insulaire hypocretinetransmissie reguleert de nicotinebeloning. Proc Natl Acad Sci USA. 2008, 105: 19480-19485. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hudson JI, Hiripi E, Pope HG, Jr, Kessler RC. De prevalentie en correlaten van eetstoornissen in de replicatie van het nationale comorbiditeitonderzoek. Biol Psychiatry. 2007, 61: 348-358. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Ifland JR, Preuss HG, Marcus MT, Rourke KM, Taylor WC, Burau K, et al. Verfijnde voedselverslaving: een klassieke verslavingsziekte. Med Hypotheses. 2009, 72: 518-526. [PubMed]
  • Kenakin T, Jenkinson S, Watson C. Bepaling van de potentie en het moleculaire werkingsmechanisme van onoverwinnelijke antagonisten. J Pharmacol Exp Ther. 2006, 319: 710-723. [PubMed]
  • Kenny PJ. Gemeenschappelijke cellulaire en moleculaire mechanismen bij obesitas en drugsverslaving. Nat Rev Neurosci. 2011, 12: 638-651. [PubMed]
  • Koob GF. Een rol voor hersenstress in verslaving. Neuron. 2008, 59: 11-34. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Kuwaki T. Orexin koppelt emotionele stress aan autonome functies. Auton Neurosci. 2011, 161: 20-27. [PubMed]
  • Javaras KN, Pope HG, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM, et al. Gelijktijdig optreden van eetbuistoornis met psychiatrische en medische aandoeningen. J Clin Psychiatry. 2008, 269: 266-273. [PubMed]
  • Johnson PL, Truitt W, Fitz SD, Minick PE, Dietrich A, Sanghani S, et al. Een sleutelrol voor orexin in paniekangst. Nat Med. 2010, 16: 111-115. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Johnson PM, Kenny PJ. Dopamine D2-receptoren in verslaving-achtige beloningsdisfunctie en dwangmatig eten bij obese ratten. Nat Neurosci. 2010, 13: 635-641. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Jupp B, Krivdic B, Krstew E, Lawrence AJ. De orexin1-receptorantagonist SB-334867 dissocieert de motivatie-eigenschappen van alcohol en sucrose bij ratten. Brain Res. 2011, 1391: 54-59. [PubMed]
  • Lawrence AJ, Cowen MS, Yang HJ, Chen F, Oldfield B. Het orexin-systeem reguleert alcohol-zoeken bij ratten. Br J Pharmacol. 2006, 148: 752-759. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Lu XY, Bagnol D, Burke S, Akil H, Watson SJ. Differentiële distributie en regulatie van OX1 en OX2 orexin / hypocretin receptor messenger RNA in de hersenen bij vasten. Horm Behav. 2000, 37: 335-344. [PubMed]
  • Malherbe P, Borroni E, Pinard E, Wettstein JG, Knoflach F. Biochemische en elektrofysiologische karakterisering van almorexant, een dubbele orexine 1-receptor (OX1) / orexin 2-receptor (OX2) -antagonist: vergelijking met selectieve OX1- en OX2-antagonisten. Mol Pharmacol. 2009, 76: 618-631. [PubMed]
  • Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, et al. Differentiële expressie van orexine-receptoren 1 en 2 in het brein van de rat. J Comp Neurol. 2001, 435: 6-25. [PubMed]
  • Martin-Fardon R, Zorrilla EP, Ciccocioppo R, Weiss F. De rol van aangeboren en door drugs geïnduceerde ontregeling van hersenstress en opwindingssystemen bij verslaving: focus op corticotropine-afgevende factor, nociceptine / orphanine FQ en orexin / hypocretine. Brain Res. 2010, 1314: 145-161. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • McAtee LC, Sutton SW, Rudolph DA, Li X, Aluisio LE, Phuong VK, et al. Nieuwe gesubstitueerde 4-fenyl- [1,3] dioxanen: krachtige en selectieve orexinereceptor 2 (OX2R) -antagonisten. Bioorg Med Chem Lett. 2004, 14: 4225-4229. [PubMed]
  • McElroy SL, Guerdjikova AI, Martens B, Keck PE, Jr, Pope HG, Hudson JI. De rol van anti-epileptica bij de behandeling van eetstoornissen. CNS Drugs. 2009, 23: 139-156. [PubMed]
  • McElroy SL, Hudson JI, Capece JA, Beyers K, Fisher AC, Rosenthal NR. Topiramaat voor de behandeling van eetbuistoornis geassocieerd met obesitas: een placebo-gecontroleerde studie. Biol Psychiatry. 2007, 61: 1039-1048. [PubMed]
  • Nair SG, Golden SA, Shaham Y. Differentiële effecten van de hypocretine 1-receptorantagonist SB 334867 op vetrijke voedselzelftoediening en herstel van het zoeken naar voedsel bij ratten. Br J Pharmacol. 2008, 154: 406-416. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Pelchat ML, Johnson A, Chan R, Valdez J, Ragland JD. Beelden van begeerte: voedsel-hunkerende activering tijdens fMRI. NeuroImage. 2004, 23: 1486-1493. [PubMed]
  • Perello M, Sakata I, Birnbaum S, Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA, et al. Ghrelin verhoogt de lonende waarde van vetrijk dieet op een orexin-afhankelijke manier. Biol Psych. 2010, 67: 880-886. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Polivy J, Zeitlin SB, Herman CP, Beal AL. Voedselbeperking en vreetbuien: een onderzoek naar ex-krijgsgevangenen. J Abnorm Psychol. 1994, 103: 409-411. [PubMed]
  • Lees KD, Braggio S. Hersenvrije fractie beoordelen bij vroege ontdekking van geneesmiddelen. Expert Opin Drug Metab Toxicol. 2010, 6: 337-344. [PubMed]
  • Richards JK, Simms JA, Steensland P, Taha SA, Borgland SL, Bonci A, et al. Remming van orexine-1 / hypocretine-1-receptoren remt door yohimbine geïnduceerd herstel van het zoeken naar ethanol en sucrose bij Long-Evans-ratten. Psychopharmacology. 2008, 199: 109-117. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Rodgers RJ, Halford JC, Nunes de Souza RL, Canto de Souza AL, Piper DC, Arch JR, et al. SB-334867, een selectieve orexine-1-receptorantagonist, verhoogt het gedragsevenwicht en blokkeert het hyperfage-effect van orexine-A bij ratten. Eur J Neurosci. 2001, 13: 1444-1452. [PubMed]
  • Sakamoto F, Yamada S, Ueta Y. Centraal toegediende orexin-A activeert corticotropine-afgevende factor die neuronen bevat in de hypothalamische paraventriculaire kern en centrale amygdaloid nucleus van ratten: mogelijke betrokkenheid van centrale orexins op stress-geactiveerde centrale CRF-neuronen. Reg Pept. 2004, 118: 183-191. [PubMed]
  • Sakurai T. Het neurale circuit van orexin (hypocretine): behoud van slaap en wakker zijn. Nat Rev Neurosci. 2007, 8: 171-181. [PubMed]
  • Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​et al. Orexinen en orexine-receptoren: een familie van hypothalamische neuropeptiden en G-eiwit-gekoppelde receptoren die het voedingsgedrag reguleren. Cel. 1998, 92: 573-585. [PubMed]
  • Sharf R, Sarhan M, Brayton CE, Guarnieri DJ, Taylor JR, DiLeone RJ. Orexinesignalering via OX1R medieert operant die reageert op voedselversterking. Biol Psychiatry. 2010, 67: 753-760. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Shoblock JR, Welty N, Aluisio L, Fraser I, Motley ST, Morton K, et al. Selectieve blokkade van de orexin-2-receptor verzwakt ethanol zelftoediening, plaatst de voorkeur en herstelt. Psychopharmacology. 2011, 215: 191-203. [PubMed]
  • Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Aston-Jones G. Orexin / hypocretin is noodzakelijk voor context-gestuurde cocaïne zoeken. Neurofarmacologie. 2010, 58: 179-184. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Stice E, Agras WS, Telch FC, Halmi KA, Mitchell JE, Wilson T. Subtypering van eetaangeïnteresseerde vrouwen met een eetaanval langs diëten en negatieve affectdimensies. Int J Eat Disord. 2001, 30: 11-27. [PubMed]
  • Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Verdeling van orexine receptor-mRNA in de hersenen van de rat. FEBS Lett. 1998, 438: 71-75. [PubMed]
  • Uramura K, Funahashi H, Muroya S, Shioda S, Takigawa M, Yada T. Orexin-a activeert fosfolipase C en proteïne kinase C gemedieerde Ca2+ signalering in dopamine-neuronen van het ventrale tegmentale gebied. NeuroReport. 2001, 12: 1885-1889. [PubMed]
  • Volkow ND, Wise RA. Hoe kunnen drugsverslaving ons obesitas helpen begrijpen? Nat Neurosci. 2005, 8: 555-560. [PubMed]
  • Yager J. Binge eetstoornis: de zoektocht naar betere behandelingen. Am J Psychiatry. 2008, 165: 4-6. [PubMed]
  • Yanovski SZ. Binge-eating disorder and obesity in 2003: zou de behandeling van een eetstoornis een positief effect kunnen hebben op de obesitas-epidemie. Int J Eat Disord. 2003; 34 (suppl: S117-S120. [PubMed]
  • Walsh BT, Devlin MJ. Eetstoornissen: vooruitgang en problemen. Wetenschap. 1998, 280: 1387-1390. [PubMed]
  • Wang GJ, Geliebter A, Volkow ND, Telang FW, Logan J, Jayne MC, et al. Verbeterde striatale dopamine-afgifte tijdens voedselstimulatie tijdens eetbuistoornis. Obesitas. 2011, 19: 1601-1608. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Wardle J, Steptoe A, Oliver G, Lipsey Z. Stress, voedselbeperking en voedselinname. J Psychosom Res. 2000, 48: 195-202. [PubMed]
  • Waters A, Hill A, Waller G. Interne en externe antecedenten van episodes van eetaanvallen bij een groep vrouwen met boulimia nervosa. Int J Eat Disord. 2001, 29: 17-22. [PubMed]
  • Wilfley DE, Crow SJ, Hudson JI, Mitchell JE, Berkowitz RI, Blakesley V, et al. Sibutramine eetstoornis onderzoeksgroep. Werkzaamheid van sibutramine voor de behandeling van eetbuistoornis: een gerandomiseerde multicenter placebo-gecontroleerde dubbelblinde studie. Am J Psychiatry. 2008, 165: 51-58. [PubMed]
  • Willie JT, Chemelli RM, Sinton CM, Yanagisawa M. Eten of slapen? Orexin in de regulatie van voeding en waakzaamheid. Annu Rev Neurosci. 2001, 24: 429-458. [PubMed]
  • Wolff GE, Crosby RD, Roberts JA, Wittrock DA. Verschillen in dagelijkse stress, gemoedstoestand, coping en eetgedrag bij vrouwen die niet kunnen binge-eat en non-binge-eating. Addict Behav. 2000, 25: 205-216. [PubMed]
  • Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Orexinesignalering in het ventrale tegmentale gebied is vereist voor vetarme eetlust die wordt veroorzaakt door opioïde stimulatie van de nucleus accumbens. J Neurosci. 2007, 27: 11075-11082. [PubMed]