J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.
Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM.
Sursă
Departamentul de Anatomie și Biologie Celulară, Scoala de Medicină și Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, Ontario N6A5C1, Canada.
Abstract
Utilizatorii de metamfetamină (Meth) au raportat o creștere a plăcerii sexuale, numeroși parteneri sexuali și implicarea în sex neprotejat din cauza pierderii controlului inhibitor. Acest comportament sexual compulsiv contribuie la creșterea prevalenței infecțiilor cu transmitere sexuală, dar baza neurală pentru acest lucru nu este cunoscută. Am stabilit anterior o paradigmă pentru comportamentul sexual compulsiv la șobolanii masculi în care boala viscerală indusă de clorura de litiu a fost asociată cu comportamentul sexual (Davis et al., 2010, Frohmader și colab., 2010a). Studiul actual a examinat efectele administrării repetate de Meth asupra performanței sexuale, a comportamentului sexual compulsiv și a sexului sau a recompensei Meth. În primul rând, rezultatele au demonstrat că șapte administrări zilnice de 2 mg / kg, dar nu 1 mg / kg, Meth au crescut latențele pentru a iniția împerecherea. Această afectare a fost evidentă după 30 min după ultima administrare de Meth, dar a fost disipată după 1 sau 7 d de abstinență ulterioară la medicament. 1 repetat mg / kg Expunerea la metaforă a determinat comportamentul compulsiv de a căuta sex 2 săptămâni după ultima administrare de Meth. Acest efect a fost dependent de administrarea Meth care a fost concurentă cu experiența sexuală și nu a fost observată la animale experimentate sexual care au primit numai Meth. Mai mult decât atât, Meth și experiența sexuală concurentă au îmbunătățit preferința pentru locația condiționată (CPP) pentru Meth și pentru Meth și marea concomitentă comparativ cu Meth sau doar împerecherea. În contrast, CPP pentru împerechere în monoterapie a scăzut. Împreună, aceste date indică faptul că asocierea dintre consumul de droguri și împerecherea poate fi necesară pentru exprimarea comportamentului sexual compulsiv și este corelată cu creșterea recompensei care caută o expunere simultană și o împerechere.
Introducere
Bolile legate de sănătatea sexuală în rândul populațiilor dependente au crescut gradul de conștientizare a efectelor drogurilor de abuz asupra comportamentului sexual, deoarece utilizarea cronică a drogurilor este asociată cu practici sexuale nesigure care au ca rezultat o prevalență crescută a infecțiilor cu transmitere sexuală, inclusiv virusul imunodeficienței umaneCrowe și George, 1989; Peugh și Belenko, 2001; Sánchez și colab., 2002; Raj și colab., 2007; Fisher și colab., 2011). Aceste efecte ale drogurilor asupra comportamentului sexual sunt bine documentate pentru metamfetamina psihostimulantă (Meth). Utilizatorii Meth declară adesea o dorință sexuală sporită, excitare și plăcere și identifică acești factori ca o motivație primară pentru consumul de droguri (Semple și colab., 2002; Schilder și colab., 2005; Verde și Halkitis, 2006). Mai mult, abuzul de Meth este asociat de obicei cu pierderea controlului inhibitor asupra comportamentului sexual sau a comportamentului sexual compulsiv (Halkitis și colab., 2001; McKirnan și colab., 2001; Rawson și colab., 2002; Verde și Halkitis, 2006) și creșterea prevalenței HIV (Frosch și colab., 1996; Halkitis și colab., 2001; Parsons și Halkitis, 2002).
Rapoartele umane care demonstrează că utilizarea Meth ca predictor al comportamentelor de risc sexual se bazează pe rapoarte de sine ale utilizatorilor cronici de Meth care nu dispun de o măsură de încredere pentru relația dintre utilizarea Meth și comportamentul sexual (Frohmader și colab., 2010b). Astfel, este necesară o investigație privind modificările metastatice induse de comportament sexual în condiții experimentale controlate folosind un model animal pentru a înțelege complexitatea asocierii dintre Meth și comportamentul sexual.
Recent, laboratorul nostru a examinat efectele Meth acute asupra căutării sexuale compulsive la șobolanii masculi (Frohmader și colab., 2010a). Aceste studii au folosit o paradigmă condiționată de aversiune sexuală în care șobolanii masculi au învățat să asocieze împerecherea cu o boală viscerală ulterioară (Peters, 1983; Agmo, 2002). Odată ce această asociere între împerechere și stimulul aversiv a fost stabilită, animalele nu ar iniția comportament de împerechere (Davis și colab., 2010; Frohmader și colab., 2010a). Tratarea precoce a unei singure injecții săptămâna înainte de condiționarea a perturbat dobândirea răspunsurilor sexuale inhibate (Frohmader și colab., 2010a). Astfel, șobolanii de sex masculin pretratat au căutat un comportament sexual chiar dacă împerecherea a fost asociată cu un stimul aversiv; acest lucru a fost numit împerechere maladaptivă sau compulsivă.
Deoarece studiile anterioare care testează efectele unei injecții acute de droguri și cercetările care investighează efectele Meth repetate asupra comportamentului sexual al șobolanilor masculi sunt limitate, scopul principal al studiului actual a fost de a investiga efectele administrării repetate de Meth asupra diferitelor aspecte ale comportamentului sexual, performanță, căutarea compulsivă a sexului și recompensa. În primul rând, efectele Meth repetate asupra împerecherii au fost testate după administrarea medicamentului și după perioade de abstinență a medicamentului pentru a distinge între efectele pe termen scurt și pe termen lung ale Meth asupra funcției sexuale. Apoi, s-au investigat efectele administrației Meth repetate asupra comportamentului sexual maladaptiv, implementând paradigma condiționată de aversiune sexuală. În plus, sa stabilit dacă asociațiile învățate dintre expunerea repetată de Meth și comportamentul sexual au fost esențiale pentru efectele lui Meth asupra comportamentului sexual maladaptiv. În cele din urmă, a fost testat dacă expunerea repetată la Meth are ca rezultat o recompensă sporită pentru Meth și / sau împerechere, așa cum este determinat de paradigmele preferențiale de preferință a locului (CPP).
Materiale și metode
Subiecții
Șobolani masculi adulți Sprague Dawley (210-225 g) au fost obținuți de la Charles River Laboratories și adăpați în perechi de același sex în cuști standard din plexiglas (cuști de origine) care conțin bucăți de țevi din PVC pentru îmbogățirea mediului. Animalele au fost adăpostite într-o încăpere menținută la un ciclu 12 / 12 h cu lumină întunecată / întunecată (se aprinde la 11: 00 AM) cu alimente și apă disponibile ad libitum. Toate testele au fost efectuate în timpul ciclului întunecat sub iluminare roșie. Femelele de stimulare (200-225 g; Charles River Laboratories) utilizate pentru comportamentul sexual au fost ovariectomizate bilateral și au primit un implant subcutanat care conține 5% benzoat de estradiol și 95% colesterol. Pentru a induce receptivitatea sexuală, femelele au fost administrate 0.5 mg de progesteron în 0.1 ml de ulei de susan (sc) 4 h înainte de comportamentul sexual. Procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul de îngrijire a animalelor de la Universitatea din Western Ontario și de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor din Universitatea Michigan și au fost în acord cu liniile directoare prezentate de Consiliul Canadian privind îngrijirea animalelor și Institutele naționale de sănătate.
Proiecte experimentale
Comportamentul sexual
Experimentul actual a investigat efectele Meth repetate asupra performanței și motivației sexuale imediat după injectarea medicamentului și după perioadele de abstinență a medicamentului. Treizeci și trei de șobolani masculi au obținut experiență sexuală în cuști de testare separate (arene de împerechere, 60 × 45 × 50 cm) care conțin așternut curat în timpul a cinci sesiuni de împerechere de două ori pe săptămână. În timpul fiecărei sesiuni de împerechere, bărbaților le-a fost permis să se împerecheze cu o femeie receptivă până la afișarea unei singure ejacule sau pentru 1 h, oricare ar fi avut loc mai întâi. La o săptămână după ultima sesiune de împerechere, bărbații au fost obișnuiți cu procedurile experimentale și au primit o injecție subcutanată de soluție 1 ml / kg de soluție salină timp de trei zile consecutive. După fiecare injecție, animalele au fost plasate în camere de activitate din locomotive din plexiglas (40.5 × 40.5 cm; Med Associates) echipate cu matrice de fotobeam 16 × 16; activitatea locomotorie a fost înregistrată pentru 30 min. În plus față de înregistrarea comportamentului ambulatoriu după injectarea tratamentului, plasarea masculilor în camerele locomotorii a asigurat un mediu asociat medicamentului diferit de cel al comportamentului de împerechere. Apoi, bărbații au primit o injecție zilnică de 1 sau 2 mg / ml / kg Meth sau vehicul (soluție salină, 1 ml / kg; n = 11 fiecare) pentru zile consecutive 7. După fiecare injecție, masculii au fost plasați în camerele de activitate locomotorie și activitatea locomotorie a fost înregistrată pentru 30 min, după care s-au întors în cuștile lor de reținere. În ultima zi a administrării Meth, bărbații au fost îndepărtați din camera de activitate locomotorie după 30 min și plasați în arena de împerechere pentru a testa efectele lui Meth asupra comportamentului sexual. Animalele au fost testate din nou pentru comportamentul sexual în câmpurile de împerechere după săptămâna 1 d sau 1 de abstinență medicamentoasă.
În timpul sesiunilor de împerechere au fost observate și înregistrate parametrii standardi pentru comportamentul sexual, incluzând latențele de la momentul montării (timpul de la introducerea femelei la primul copil) și intromisia (timpul de la introducerea femelei la prima intromisie), care indică motivația sexualăHull și colab., 2002), precum și latența la ejaculare (timpul de la prima intromisie până la ejaculare), numărul de momeli și intromisele înainte de ejaculare și intervalul postejaculator, care sunt măsuri de performanță sexualăHull și colab., 2002; Pfaus, 2009). Diferențele dintre grupuri au fost determinate pentru fiecare parametru al comportamentului sexual folosind analiza neparametrică Kruskal-Wallis și Dunn's post hoc comparații, la niveluri de semnificație ale 0.05.
Activitate locomotoare
Activitatea locomotorie după fiecare injecție de metanfetamină a fost analizată utilizând software-ul de analiză Med Associates ca distanță parcursă în intervale de 5 minute. Diferențele de grup au fost examinate utilizând analiza neparametrică Kruskal-Wallis și Dunn post hoc comparații. Pentru a examina sensibilizarea locomotoare indusă de Meth, activitatea activată în timpul ultimei 10 minute a testului a fost comparată între prima și cea de-a șaptea zi de injectare din cadrul fiecărui grup de tratament pentru doza de medicament, t teste. Un nivel de semnificație al 0.05 a fost aplicat tuturor comparațiilor.
Aversiunea sexuală condiționată
Experiment 1.
În primul rând, șobolanii de sex masculin 50 au fost obișnuiți cu injecții saline timp de trei zile consecutive, iar bărbații au obținut experiență sexuală în timpul a trei sesiuni de împerechere. Înainte de fiecare sesiune de împerechere, animalele au fost injectate cu 1 mg / kg Meth sau 1 ml / kg salină (sc), plasate în arene de împerechere și, 30 min mai târziu, au fost lăsate să se cupleze cu o femeie receptivă până la ejaculare sau 1 h. Parametrii pentru comportamentul sexual au fost înregistrați și analizați (vezi comportamentul sexual, de mai sus). Două săptămâni mai târziu, animalele au fost supuse unei paradigme condiționate de aversiunea sexuală. Bărbații au fost împărțiți în patru grupe experimentale în funcție de tratamentul prealabil (metale sau cu soluție salină) și condiționarea [clorură de litiu (LiCl) sau a peretelui]; grupele au fost neparate în saramură (n = 12), Meta-neparat (n = 12), pereche salin (n = 13) și Meth-pair (n = 13). Paradigma condiționată a aversiunii a constat din opt studii de condiționare 2 consecutive. În prima zi, toți masculii au fost plasați în arena de împerechere pentru o perioadă de obișnuință 10 min, după care a fost introdusă o femeie receptivă. Femelele au fost parfumate prin umectarea uleiului de migdale pe gât și pe baza cozii înainte de împerechere, deoarece indicațiile olfactive s-au dovedit a facilita comportamentul masculilor de apropiere și pentru a întări condiționarea (Lawrence și Kiefer, 1987; Agmo, 2002). Bărbaților li sa permis să se îmbine pentru 30 min sau până la o ejaculare. Dacă intromisiile nu au avut loc în primul minut 15, împerecherea a fost încheiată. La un minut după ejaculare sau la terminarea trialului, bărbaților li s-a administrat o injecție intraperitoneală 127.2 mg / kg 10 ml / kg LiCl (bărbați perechi) sau soluție salină (bărbați nepartimi). LiCl sau soluție salină au fost administrate indiferent dacă a avut loc împerechere. În ziua următoare, bărbații neparticipați au primit o injecție 10 ml / kg de LiCl în timp ce bărbații perechi au primit soluție salină. Animalele au fost returnate în casă după injecții.
Experiment 2.
Pentru a testa dacă efectele tratamentului pre-tratament Meth asupra aversiunii sexuale condiționate au fost dependente de expunerea simultană la Meth și de împerechere sau de Meth în monoterapie, a fost efectuat un experiment suplimentar. Șobolani masculi (n = 20) au beneficiat de experiență sexuală în timpul a cinci sesiuni de împerechere, dar fără tratamente cu metale sau cu soluții saline (n = 10 fiecare). În schimb, săptămâna 1 după experiența sexuală, au primit sapte săptămâni de injecții o dată pe zi, fie din Meth (1 mg / kg, sc), fie din seringă, iar 2 săptămâni mai târziu au fost supuse paradigmei condiționate a aversiunii sexuale (a se vedea Experimentul 1, de mai sus).
Pentru ambele experimente și în timpul fiecărui studiu de condiționare, au fost analizați parametrii pentru comportamentul sexual și s-au determinat diferențele de grup pentru fiecare studiu de condiționare folosind un ANOVA cu două sensuri (factori: pretratarea metalelor saline, condiționarea). Pearson χ2 analiza a fost utilizată pentru a compara diferențele dintre grupuri în procentele masculilor care au prezentat monturi, intromisiuni sau ejaculare în cadrul fiecărei poteci de condiționare.
Condiție preferată de locație
Pentru a testa dacă pretratamentul cu metanfetamină a afectat recompensa pentru metanfetamină sau comportamentul sexual, s-au efectuat experimente CPP. Un aparat cu trei compartimente (Med Associates) conținând două camere exterioare mai mari (28 × 22 × 21 cm) cu indicii vizuale și tactile distincte și separate de un mic compartiment central (13 × 12 × 21 cm), a fost utilizat pentru toate experimentele CPP . Ușile de pe ambele părți ale compartimentului central separau camerele și puteau fi ridicate pentru a permite mișcarea liberă a animalelor în tot aparatul sau coborâte pentru a le limita la o anumită zonă. Aparatul a fost echipat cu raze foto pentru a măsura timpul petrecut în fiecare cameră. În prima zi, a fost efectuată o testare de 15 minute pentru a determina preferința inițială a camerei fiecărui animal, prin care fiecărui animal i s-a permis să circule liber între camerele aparatului CPP. Nu s-au detectat preferințe semnificative pentru ambele camere între grupurile experimentale. Animalele au fost excluse din studiu dacă au afișat o preferință extinsă pentru o cameră specifică (o diferență peste 120 s; prezentată de <10% din subiecți). Condiționarea a fost efectuată în zilele 2 și 3. În timpul condiționării, camera inițial nepreferită (camera asociată) a fost asociată cu o manipulare a recompensei timp de 30 de minute. Camera preferată inițial (camera nepereche) a fost asociată cu o manipulare de control. Ordinea în care animalele au fost expuse camerelor pereche și nepereche a fost contrabalansată în cadrul fiecărui grup experimental. Un test post care a fost identic din punct de vedere procedural cu testul preliminar a fost efectuat în a patra și ultima zi.
Experiment 1.
În primul rând, șobolanii de sex masculin 50 au fost obișnuiți cu injecții saline timp de trei zile consecutive, iar bărbații au obținut experiență sexuală în timpul a trei sesiuni de împerechere. În timpul fiecărei sesiuni de împerechere, animalele au fost injectate cu 1 mg / kg Meth sau 1 ml / kg salin (sc), plasate în cuști de testare și 30 min mai târziu, lăsate să se îmbine cu o femeie receptivă până la ejaculare sau 1 h. Parametrii pentru comportamentul sexual au fost înregistrați și analizați (pentru descriere, vezi comportamentul sexual, de mai sus). O săptămână mai târziu, animalele au fost distribuite în patru grupuri experimentale potrivite pentru tratamentul medicamentos și performanțele sexuale pentru testarea CPP. În timpul condiționării, masculii au fost injectați fie cu Meth, fie cu soluție salină (care corespunde tratamentului anterior medicamentului), iar 30 min mai târziu au fost lăsați să se împerecheze până la ejaculare. La un minut după ejaculare, animalul a fost plasat în camera pereche. Camera nepereche a fost asociată fie cu o injecție (Meth sau cu soluție salină), fie cu împerechere fără injecție. În urma posttestului, un scor de preferință (procentul de timp petrecut în camera pereche în timpul testului pretest și posttest, calculat ca timpul petrecut în camera pereche împărțit în timp în camera + pereche + pereche nepartizată × 100) și scorul CPP (Experiment 1; timpul petrecut în camera pereche în timpul testului post-minus pretest) a fost calculat pentru fiecare subiect. Scorurile de preferință au fost comparate în cadrul grupurilor experimentale utilizând perechea t testele și scorurile CPP au fost comparate între grupurile experimentale utilizând un ANOVA unidirecțional și testul diferenței cel mai puțin semnificativ pentru Fisher post hoc comparații, toate cu niveluri de încredere 95%.
Experiment 2.
Pentru a testa dacă efectele pre-tratamentului Meth asupra CPP pentru Meth sau împerecherea au fost dependente de expunerea simultană la Meth și de împerechere sau de Meth în monoterapie, a fost efectuat un experiment suplimentar. Șobolanii masculi au primit Meth (1 mg / kg) și s-au împerecheat simultan pentru zile consecutive 4 (n = 10). Două grupuri de control au rămas naivi sexuali și au primit fie Meth, fie soluție salină (n = 10 fiecare). O săptămână mai târziu, a fost condusă CPP pentru Meth. Toți bărbații au primit o injecție de Meth în camera pereche și o injecție salină a fost asociată cu camera neparat. Valorile de preferință au fost calculate și comparate în cadrul grupurilor experimentale utilizând perechea t teste cu nivel de semnificație al 0.05.
Experiment 3.
Pentru a testa dacă expunerea simultană la Meth și împerecherea este critică pentru recompensa sexuală modificată, a fost efectuat un studiu CPP de împerechere. Șobolanii masculi au primit fie Meth (1 mg / kg), fie salină simultan cu împerecherea timp de patru zile consecutive (n = 10 fiecare). O săptămână mai târziu, a fost testat CPP pentru comportamentul sexual. Toți bărbații au fost plasați în camera pereche după împerechere și nici o împerechere nu a fost asociată cu camera neparatată. Valorile de preferință au fost calculate și comparate în cadrul grupurilor experimentale utilizând perechea t teste cu nivel de semnificație al 0.05.
Aversiunea condiționată a locului
Pentru a testa dacă expunerea Meth modifică sensibilitatea la boala indusă de LiCl, a fost efectuat un experiment cu aversiune localizată (CPA). Analiza CPA a fost efectuată în prima jumătate a perioadei întunecate, utilizând același aparat ca cel folosit pentru experimentele CPP (a se vedea secțiunea Preferință de locație condiționată, de mai sus). Timp de trei zile consecutive, șobolanii masculi au obținut experiență sexuală concomitent cu Meth (1 mg / kg) sau cu soluție salină (n = 10 fiecare). O săptămână mai târziu, toți bărbații au primit o injecție LiCl (10 ml / kg, ip) asociată cu camera preferată inițial, în timp ce o doză echivalentă de salin a fost asociată cu camera inițial nepreparată. În urma posttestului, scorul mediu de preferință (procentul de timp petrecut în camera pereche în timpul testului pretest și posttest, calculat ca timpul petrecut în camera pereche împărțit în timp în camera pereche + nepărpătată × 100) și scorul CPA (diferența dintre timpul petrecut în camera pereche în timpul testului post-minus pretest) au fost calculate pentru fiecare subiect. Scorurile de preferință au fost comparate în cadrul grupurilor experimentale utilizând perechea t teste, în timp ce scorurile CPA au fost comparate între grupurile experimentale care utilizează neparticiparea t teste, toate cu nivel de semnificație al 0.05.
REZULTATE
Comportamentul sexual
Meth a afectat semnificativ inițierea comportamentului sexual atunci când împerecherea a fost testată 30 min după ultima injecție de medicament. Acest efect a fost dependent de doză la 2 mg / kg, dar nu 1 mg / kg, Meth. Meth a crescut în mod semnificativ latențele de montare și intromisiune (p = 0.001 și, respectiv, 0.002) comparativ cu controlul salinei (Fig. 1A). Meth nu a afectat procentele bărbaților care au inițiat comportamentul, iar 100% dintre bărbați s-au îmbogățit în toate cele trei grupuri de tratament. Meth nu a avut efecte pe termen lung asupra inițierii comportamentului sexual, deoarece bărbații cu metale prepretrate nu au prezentat un comportament de împerechere modificat în comparație cu controlul prealabil tratat cu soluție salină, atunci când împerecherea a fost testată în timpul zilelor de abstinență a medicamentului 1 și 7Fig. 1B,C). În cele din urmă, Meth nu a afectat performanțele sexuale în orice moment, deoarece nu au existat efecte asupra latenței la ejaculare (Fig. 1) sau numere de mounts și intromisiuni (datele nu sunt prezentate). Astfel, repetarea Meth a afectat inițierea împerecherii atunci când a fost testată la scurt timp după administrare, dar nu a avut efecte pe termen lung asupra motivației sau performanței sexuale.
Efectele Meth repetate asupra performanței sexuale. A-C(ML), intromisie (IL) și ejaculare (EL) după administrarea 0, 1 sau 2 mg / kg Meth 30 min după a șaptea și ultima injectare de droguri (A) și zile de abstinență de droguri 1 (B) și 7 (C). Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative de la bărbații injectați cu soluție salină (p <0.05).
Activitate locomotoare
Meth la doze de 1 sau 2 mg / kg a crescut activitatea locomotorie comparativ cu martorii (p <0.001, 1 și 2 mg / kg; Fig. 2A,B). Administrarea repetată de Meth a determinat un răspuns locomotor sensibilizat - masculii cărora li s-au administrat 1 mg / kg Meth a prezentat o activitate locomotorie semnificativ mai mare după ultima injecție de medicament comparativ cu prima injecție (p = 0.042; Fig. 2C). În contrast, 2 mg / kg Meth a dus la scăderea semnificativă a activității locomotorii în ultima zi comparativ cu prima zi (p = 0.009; Fig. 2C), care poate indica o creștere a comportamentelor stereotipice.
Efectele Meth repetate asupra activității locomotorii. A, B, Distanța parcursă de bărbații cărora li s-au administrat 0, 1 sau 2 mg / kg Meth după prima (A) și ultima (BSe injectează. Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative față de control pentru toate grupurile de tratament (p <0.05); #diferențe semnificative între 1 mg / kg Meth și numai control (p <0.05). C, Răspunsul locomotor sensibilizat indus de metastaze. Distanța parcursă de bărbații cărora li s-au administrat 0, 1 sau 2 mg / kg Meth după prima și ultima injecție Meth în ultimul 10 min de înregistrări ale activității locomotorii. Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative față de bărbații naivi sexuali din același grup de tratament (p <0.05).
Aversiunea sexuală condiționată
Comportamentul sexual
În timpul fazei de pretratament Meth din experimentul 1, comportamentul sexual nu a fost afectat de tratamentul cu 1 mg / kg Meth pe parcursul fiecăreia dintre cele trei sesiuni ulterioare, comparativ cu bărbații prealiate cu soluție salină (Tabelul 1). Aceste rezultate confirmă lipsa efectelor acestei doze de Meth asupra comportamentului sexual, chiar și atunci când sunt administrate în același mediu. Mai mult, pre-tratamentul Meth nu a modificat comportamentul sexual în prima zi a paradigmei de condiționare (înainte de asocierea cu LiCl; Tabelul 1) sau în timpul oricăreia dintre studiile de condiționare în grupurile lipsite de LiCl. Aceste rezultate confirmă faptul că Meth nu a avut efecte pe termen lung asupra comportamentului sexual.
Prezentare generală a comportamentului sexual
Comportament sexual compulsiv
Experiment 1.
În contrast, tratamentul repetat cu Meth a îmbunătățit căutarea sexului compulsiv. La control, animalele tratate cu ser fiziologic, aversiunea sexuală condiționată a inhibat semnificativ comportamentul sexual. Mai exact, procentajele scăzute de bărbați perechi cu LiCl care au fost montați și intromitați în comparație cu bărbații neparticipați cu prealabil cu soluție salină au fost mai întâi evideni la al șaseleap = 0.039) și a persistat prin studiul de condiționare 7 (p = 0.005; datele nu sunt afișate) și 8 (p <0.001; Fig. 3B). O diferență semnificativă în procentajul bărbaților care au ejaculat a fost prima dată evidentă la al patrulea (p = 0.041) și a persistat pe parcursul condiționării (p <0.001; Fig. 3C). Cu toate acestea, pre-tratamentul Meth a afectat aversiunea sexuală condiționată, deoarece bărbații cu metale prepreate asociate cu LiCl nu au atins inhibarea semnificativă a comportamentului sexual până la ultimul studiu de condiționare în comparație cu bărbații nerepuți cu metale prepreate. În mod specific, procentul bărbaților perechi cu LiCl cu prelevare de metale care au prezentat intromisele și ejacularea au fost semnificativ scăzuți numai în timpul studiului de condiționare 8p = 0.03 și p = 0.011, respectiv). Astfel, tratamentul prealabil Meth cu 2 săptămâni înainte de debutul condiționării a avut ca rezultat un comportament neadecvat sau compulsiv de căutare sexuală.
Efectele de împerechere concomitentă (sex) și pre-tratament Meth asupra aversiunii sexuale condiționate (Experiment 1). A, Grupurile experimentale au inclus bărbați saline (Sal) sau met-pretrenați care au primit LiCl după împerechere (masculi împerecheați) și bărbați cu prealabil tratat cu soluție salină sau cu metale care au primit salină după împerechere (bărbați neparticipați). În a doua zi a fiecărui studiu de condiționare, bărbații perechi au primit ser fiziologic și bărbații neparticipați au primit LiCl. B, C, Procentul de montare masculi (B) și ejacularea (C) în timpul aversiunii sexuale condiționate după tratamentul prealabil Meth administrat simultan cu experiența sexuală. * Diferențe semnificative față de bărbații neparticipați în prealabil cu soluție salină (p <0.05); #diferență semnificativă de la masculii neprotejați cu metale preexistente (p <0.05).
Experiment 2.
Efectele pre-tratamentului Meth asupra aversiunii sexuale condiționate au fost dependente de experiența Meth concurentă și de împerechere. Mai exact, aversiunea sexuală condiționată nu a fost afectată de bărbații cu experiență sexuală care au beneficiat de tratamentul prealabil al Meth și experiența de împerechere în momente diferite (nonconcurrent). Procentajele bărbaților perechi cu LiCl cu metale preexistente care au prezentat suporții și ejacularea nu au fost diferiți de bărbații perechi preparate cu soluție salină (Fig. 4). Aceste date sugerează că asocierea inițială dintre Meth și experiența sexuală a fost un factor care contribuie la efectele lui Meth asupra comportamentului sexual compulsiv.
Efectele de împerechere neconcurente (sex) și Meth pretreatment asupra aversiunii sexuale condiționate (Experiment 2). Procentul de montare masculi (A) și ejacularea (B) în timpul aversiunii sexuale condiționată de LiCl, după tratamentul prealabil al Meth care nu este asociat cu experiența sexuală. Au fost incluse două grupuri: perechi LiCl pre-tratate cu soluție salină și perechi LiCl pre-tratate cu Meth.
Aversiunea condiționată a locului
Experimentele de control suplimentare au arătat că incapacitatea de a inhiba împerecherea după tratamentul prealabil cu Meth nu se datorează unei sensibilități neclare la boala viscerală indusă de LiCl, deoarece toți bărbații au format o aversiune față de cameră asociată cu o singură doză de LiCl. În mod specific, atât bărbații cu masă salină, cât și cei pre-tratați cu metale au cheltuit semnificativ mai puțin timp în camera perechei LiCl în timpul posttestului, comparativ cu pretestulp = 0.037 și, respectiv, 0.045; Fig. 5A). Mai mult decât atât, diferența de timp petrecută în camera perechei LiCl după posttest față de pretest a fost identică în grupurile tratate cu Meth și cu grupuri prealabile cu soluție salinăFig. 5B).
Efectele de împerechere concomitentă (sex) și pre-tratament Meth asupra CPA indusă de LiCl. A, B, Scorul de preferință (timpul petrecut pe camera pereche împărțit în timp în camera + pereche + pereche nepărtată × 100; A) și scorul CPA (diferența de timp petrecută în camera pereche în timpul testului post-test minus pretest; B) la masculi îmbolnăviți prealati cu soluție salină (sal; sex + salin) sau Meth (sex + Meth). Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative față de pretest în cadrul aceluiași grup experimental (p <0.05).
Condiție preferată de locație
experimentul 1
Studiile pe bază de auto-raport arată că utilizarea Meth sporește plăcerea sexuală și este o motivație primară pentru consumul de droguri (Semple și colab., 2002; Schilder și colab., 2005; Verde și Halkitis, 2006). Această îmbunătățire indusă de Meth a plăcerii sexuale nu a fost testată în modelul rozătoarelor. Prin urmare, paradigma CPP a fost utilizată pentru a testa dacă comportamentul sexual cu Meth este mai avantajos decât fie împerecherea, fie administrarea Meth singur. În acord cu studiile anterioare (Agmo și Berenfeld, 1990; Pfaus și Phillips, 1991; Tenk și colab., 2009), împerecherea în cazul bărbaților de control prealabil cu soluție salină a determinat ca bărbații CPP să-și petreacă mai mult timp în camera cu pereche de sex + pereche de pereți decât cea cu pereche salină în timpul posttestării (p = 0.001; Fig. 6C,D). În plus, bărbații de control nu au format o preferință pentru camera + pereche cu pereți salinați peste camera cuplată cu sex, demonstrând că o injecție salină înainte de împerechere nu a afectat recompensa sexuală (Fig. 6C,D). Rezultatele au aratat ca Meth a crescut CPP pentru sex, comparativ cu imperecherea sau numai cu Meth. Bărbații au petrecut mai mult timp în timpul posttestului în camera de sex + pereche de perechi decât în camera de cuplu (p <0.001; Fig. 6C) sau camera metamorfă (p = 0.02; Fig. 6C) sau comparativ cu grupul martor (p = 0.002 și, respectiv, 0.05; Fig. 6D). Prin urmare, comportamentul sexual concomitent cu Meth pare să fie mai plăsmuitor decât comportamentul sexual sau Meth singur în cazul animalelor care au fost pre-tratate cu comportament sexual și Meth în același timp.
Efectele de împerechere concomitentă (sex) și pre-tratament Meth asupra CPP indusă de Mating și Meth (Experiment 1). Au fost incluse patru grupuri. A, Două grupuri au primit tratament prealabil pentru sex + salină (Sal) și tratamentul următor în camera pereche / neparat: sex + salină / sex, sex + salină / soluție salină. Primul grup a servit ca un control negativ, deoarece nu era de așteptat ca serul să modifice CPP pentru sex. Al doilea grup a servit drept un control pozitiv, deoarece sexul ar fi cauzat CPP. B, Celelalte două grupuri au primit pre-tratare sexuală + Meth și următoarele în camerele pereche / neparate: sex + Meth / sex sau sex + Meth / Meth. Ordinea în care animalele au fost expuse la camerele pereche și neparate a fost contrabalansată în cadrul fiecărui grup experimental. C, Scorul de preferință (timpul petrecut în camera pereche împărțit în timp în camera + pereche + pereche nepărtată × 100). Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative față de pretest în cadrul aceluiași grup experimental (p <0.05). D, Scorul CPP (diferența de timp petrecută în camera pereche în timpul testului post-minus pretest). Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferențe semnificative față de sex + salină / grupul de sex (p <0.05).
experimentul 2
Apoi, sa determinat dacă pre-tratamentul concomitent al Meth și sexului a influențat CPP numai pentru Meth în comparație cu tratamentul cu soluție salină în camera nepereche. Într-adevăr, bărbații cu metale prepreate care s-au împerecheat concomitent cu fiecare injecție de medicament au format o preferință pentru camera Meta-pereche (p = 0.01; Fig. 7). În schimb, bărbații care au primit injecții saline sau Meth repetate fără contextul împerecherii nu au prezentat o preferință crescută pentru camera Meth-pereche în timpul posttestului.
Efectele de împerechere concomitentă (sex) și pre-tratament Meth asupra CPP indus de Meth (Experiment 2). Scorul de preferință (timpul petrecut pe camera pereche împărțit în timp în camera + pereche + pereche neparatată × 100) la bărbații tratați anterior cu salină (Sal), Meth sau sex + Meth. Datele sunt prezentate ca medie ± SEM. * Diferență semnificativă față de pretest în cadrul aceluiași grup experimental (p <0.05).
experimentul 3
În cele din urmă, a fost testat dacă Meth concomitent și pre-tratamentul de împerechere afectat CPP pentru împerechere în monoterapie. Bărbații pretreați cu Meth și împerecherea nu constituiau o preferință pentru comportamentul sexual, evidențiată de lipsa timpului crescut în camera de cuplu. În schimb, bărbații care au fost tratați cu soluție salină și împerechere au constituit o preferință pentru camera cu perechi de sex (p = 0.003; Fig. 8). Impreuna, aceste date sugereaza ca asocierea dintre Meth si imperecherea are ca rezultat o crestere a stimulentei pentru Meth in absenta imperecherii si a imperecherii concomitent cu Meth, dar reducerea stimulentelor pentru imperechere in absenta medicamentului.
Efectele de împerechere concomitentă (sex) și tratamentul Meth asupra CPP indusă de împerechere (Experiment 3). Scorul de preferință (timpul petrecut pe camera pereche împărțit în timp în camera + pereche + pereche neparatată × 100) la bărbații pretrenați cu sex + salină (Sal) sau sex + Meth. Datele sunt prezentate ca medie ± SEM.
Discuție
Studiul actual a testat efectele Meth repetate asupra comportamentului sexual, concentrându-se în special pe performanța sexuală, căutarea sexuală prostuită sau compulsivă și împerecherea și / sau recompensa Meth. TPrincipala constatare a acestui studiu a fost că tratamentul prealabil al Meth nu a afectat expresia comportamentului sexual, ci a determinat comportament sexual compulsiv în săptămânile care urmează tratamentului prealabil. Acest efect asupra comportamentului sexual compulsiv a fost dependent de experiența concomitentă cu Meth și de împerechere. În plus, pre-tratamentele Meth și îmbarcare concurentă au sporit recompensa Meth, dar au redus recompensa sexuală. Împreună, aceste studii arată că o asociere între Meth și împerechere este esențială pentru dezvoltarea sau exprimarea comportamentului sexual compulsiv și a schimbărilor în recompense sexuale și de droguri.
Pre-tratamentul Meth, când a fost asociat cu împerecherea, a avut efecte pe termen lung asupra capacității paradigmei condiționate de aversiune sexuală de a inhiba comportamentul sexual. Acest efect nu poate fi explicat cu ușurință prin deficitul de învățare sau de memorie, deoarece bărbații cu metale preexistente nu au prezentat nicio dovadă de depresie în timpul paradigmelor de aversiune sexuală induse de CPP sau LiCl. În plus, este puțin probabil ca administrarea repetată a dozei scăzute de Meth să provoace tulburări cognitive și neurotoxicitate observate în mod obișnuit după expunerea cronică la doze mari de Meth la șobolani (Walsh și Wagner, 1992; Friedman și colab., 1998; Chapman și colab., 2001; Schröder și colab., 2003) și oameni (Ornstein și colab., 2000; Simon și colab., 2002; Kalechstein și colab., 2003), deoarece paradigmele Meth bingeing pe o singură zi, utilizând aceeași doză ca și studiul curent, nu au afectat învățarea recunoașterii obiectului și nu au dus la neurotoxicitate (Marshall și colab., 2007). O altă explicație alternativă pentru achiziția sau expresia afectată a aversiunii sexuale condiționate este o pierdere de sensibilitate pentru LiCl. Cu toate acestea, animalele au fost în egală măsură capabile să obțină o aversiune condiționată într-o cameră combinată anterior cu LiCI. Prin urmare, bărbații cu metale prepreate nu aveau memorie asociativă afectată sau sensibilitate redusă la boala indusă de LiCl sau LiCl. Se pare că tratamentul prealabil al Meth a cauzat căutarea de sex maladaptivă sau compulsivă, în ciuda consecințelor negative învățate, care este în concordanță cu rapoartele umane (Frosch și colab., 1996; Halkitis și colab., 2001; McKirnan și colab., 2001; Rawson și colab., 2002; Somlai și colab., 2003; Verde și Halkitis, 2006; Springer și colab., 2007).
Mai mult, efectul Meth și tratamentul prealabil asupra inhibării reduse a comportamentului sexual maladaptiv nu este ușor explicat printr-o recompensă sporită asociată împerecherii. În contrast, la animalele care au beneficiat de Meth concurent și experiența de împerechere, a fost redusă căutarea de recompense asociată cu împerecherea. De aceea, trebuie să se propună o altă explicație pentru efectele Meth concurent și tratamentul prealabil asupra expresiei comportamentului sexual maladaptiv. Un studiu recent neuroanatomic din laboratoarele noastre a identificat zonele creierului în care Meth poate să medieze efectele asupra comportamentului sexual (Frohmader și colab., 2010c). Aici, activarea neurală indusă prin împerechere sau Meth a fost examinată utilizând markeri de activitate neurală, cum ar fi Fos sau fosforilarea MAPK, respectiv. Meth și împerecherea neuronilor coactivați în nucleul accumbens, amigdala bazolaterală și zona cingulară anterioară a cortexului prefrontal medial (Frohmader și colab., 2010c) și în cortexul orbitofrontal (Frohmader și Coolen, 2010). Cortexul prefrontal și orbitofrontal prezintă un interes deosebit deoarece contribuie la comportamente dependente (Kalivas și Volkow, 2005; Kalivas și colab., 2005; Lasseter și colab., 2010; Winstanley și colab., 2010). Mai mult, hipoactivitatea acestor zone ale creierului a fost corelată cu mai multe stări psihiatrice asociate cu pierderea controlului inhibitor (Graybiel și Rauch, 2000; Taylor și colab., 2002; London și colab., 2005). Aceste linii de dovezi sugerează că Meth poate acționa în aceste cortex frontal pentru a provoca alterarea pe termen lung care, la rândul său, mediază comportamentul sexual compulsiv. În concordanță cu aceasta, s-a arătat că incidența crescută a comportamentului sexual compulsiv se suprapune cu alte tulburări psihiatrice, incluzând dependența de droguri, anxietatea și tulburările de dispoziție (Bancroft, 2008). De asemenea, disfuncțiile induse de medicamente ale cortexului medial prefrontal și orbitofrontal sunt presupuse a fi responsabile pentru controlul impulsului redus (Brewer și Potenza, 2008; Fineberg și colab., 2010) și a crescut comportamentul orientat spre sex, observat la mulți dependenți (Jentsch și Taylor, 1999; Bancroft, 2008). eun acord cu aceasta, leziunile cortexului prefrontal medial la șobolanii masculi au condus la comportament compulsiv de căutare a sexului în paradigma condiționată de aversiune sexuală utilizată în studiile curente (Davis și colab., 2010).
Studiile anterioare au arătat că administrarea repetată la psihostimulante sau opiacee îmbunătățește recompensa indusă de medicamente măsurată prin CPP (Lett, 1989; Shippenberg și Heidbreder, 1995; Shippenberg și colab., 1996). În plus, experiența sexuală a provocat o sensibilizare ulterioară a d-amfetamină recompensă (Pitchers și colab., 2010). În studiul actual, efectele Meth și / sau experiența sexuală asupra Meth CPP au fost testate în condiții care nu au fost de așteptat să ducă la medicamentul CPP: doză mică de Meth, un studiu de condiționare unică și testarea în faza întunecată a zilei în momentele cele mai scăzute CPP (Webb și colab., 2009a,b). Regimurile de sensibilizare a Meth repetat sau a experienței sexuale utilizate în studiul actual nu au provocat Meth îmbunătățit CPP. Cu toate acestea, pre-tratamentul Meth concomitent cu împerecherea a sporit Meth recompense, indicând faptul că această asociere între Meth și împerechere a provocat o creștere a recompensei în căutarea lui Meth. Aceste rezultate par a fi în concordanță cu rapoartele umane despre creșterea Meth care caută identificarea plăcerii sexuale în timpul tratamentului cu Meth ca un prim drive pentru consumul de droguri (Semple și colab., 2002; Schilder și colab., 2005; Verde și Halkitis, 2006). În prezent, nu este clar ce componente ale comportamentului sexual sunt critice pentru asocierea dintre Meth și împerechere. În studiul actual, toți bărbații s-au împerecheat cu ejacularea. Cu toate acestea, concluziile noastre anterioare sugerează că interacțiunile sociale pot fi suficiente pentru a induce un comportament maladaptiv de căutare a sexului (Frohmader și colab., 2010a).
Substraturile neurale care pot să medieze efectele de ameliorare ale Meth concurent și pre-tratamentul de împerechere pe Meth recompense includ nucleul accumbens și amigdala bazolaterală. Schimbările de lungă durată în densitatea și morfologia coloanei dendritice din accumbens rezultă din administrarea repetată a medicamentului (Brown și Kolb, 2001; Robinson și colab., 2002; Li și colab., 2003; Robinson și Kolb, 2004) sau experiență sexuală (Meisel și Mullins, 2006; Pitchers și colab., 2010) și sunt ipotezați pentru a media medicația locomotorie și de sensibilizare indusă de medicamente (Pierce și Kalivas, 1997; Vanderschuren și Kalivas, 2000; Li și colab., 2004). Amigdala bazolaterală este critică pentru memoria stimulilor condiționați asociate cu stimulii de droguri (Grace și Rosenkranz, 2002; Laviolette și Grace, 2006) și implicat în sensibilizarea și întărirea recompensei (Everitt și colab., 1999; Cardinal și colab., 2002; Vezi, 2002). Leziunile sau inactivările amigdalei bazolaterale blochează achiziția (Whitelaw și colab., 1996) și expresie (Grimm și vezi, 2000) din restabilirea condiționată a cocainei. Mai mult decât atât, leziunile bazilaterale ale amigdalelor determină o reducere a răspunsului pentru stimulii condiționați în combinație cu alimentele (Everitt și colab., 1989) sau armare sexuală (Everitt și colab., 1989; Everitt, 1990) la șobolani. Prin urmare, este posibil ca modificările induse de psihostimulant și de împerechere în accumbens și amigdala bazolaterală să aibă ca rezultat o manifestare potențială de recompensă a Meth.
S-au dovedit că regimente de sensibilizare a medicamentelor facilitează comportamentul sexual. Sensibilizarea pretratamentelor d-amfetamina (injecții 10 zilnice de 1.5 mg / kg) facilitează comportamentul sexual (Fiorino și Phillips, 1999a,b), precum și comportamentul de abordare a stimulilor sexuali (Nocjar și Panksepp, 2002). Studiile la șobolanii femele pretreate cu Meth (trei injecții zilnice de 5 mg / kg) au dus la creșterea comportamentelor receptive (Holder și colab., 2010). În contrast, studiul actual nu a evidențiat efectele unui regiment sensibilizant al tratamentului Meth asupra comportamentului sexual. Posibilele explicații pentru această discrepanță includ reducerea dozei de medicament utilizată în studiul actual, evaluări diferite ale motivației sexuale și diferențe de sex (Becker și Hu, 2008).
Studiile asupra modelelor de rozătoare ale dependenței de Meth s-au concentrat recent asupra paradigmelor de bingei de droguri pentru a investiga deficiențele comportamentale induse de Meth (Belcher și colab., 2008; Izquierdo și colab., 2010; O'Dell și colab., 2011), modificări neuroplastice (Brennan și colab., 2010) și neurotoxicitate (Moszczynska și colab., 1998; Kuczenski și colab., 2007; Graham și colab., 2008). Obiectivul principal al acestor studii a fost acela de a atinge nivele de medicament din plasmă la șobolani apropiate de cele găsite în dependenții de Meth uman. În contrast, studiul actual a demonstrat că administrarea pasivă, o dată pe zi, a Meth cu doze mici a fost suficientă pentru a provoca un comportament sexual compulsiv de lungă durată. O paradigmă de bingeing nu a fost utilizată din motive practice: dozele mari de Meth afectează comportamentul sexual (Frohmader și colab., 2010a) și utilizatorii umani folosesc adesea medicamente care îmbunătățesc performanța sexuală pentru a menține funcția sexuală (Semple și colab., 2009). Accentul actualului set de studii a fost de a investiga recompensarea sexuală și împerecherea compulsivă la animale cu comportament de împerechere neimprovizionat. Rezultatele demonstrează că comportamentul sexual compulsiv și schimbarea consumului de droguri și a recompensei sexuale pot fi cauzate de o expunere foarte scăzută la medicament odată cu concomitent cu experiența sexuală și nu depind de inducerea nivelurilor de bingeing ale Meth în creier.
Împreună, setul actual de studii reprezintă un pas important spre o mai bună înțelegere a efectelor lui Meth asupra comportamentului sexual compulsiv și a asocierilor dintre recompensa sexuală și cea sexuală. Mai mult decât atât, aceste date sunt paralele cu cele raportate la dependenții umani; astfel, modelul de șobolan masculin poate fi folosit în continuare pentru a examina mecanismele moleculare și structurale ale efectelor Meth asupra comportamentului sexual și poate contribui potențial la viitoarele terapii de dependență de droguri.
Note de subsol
- Primit August 4, 2011.
- Revizuirea a fost primită Septembrie 8, 2011.
- Admis Septembrie 23, 2011.
Această lucrare a fost susținută de institutele canadiene de cercetare în domeniul sănătății RN 014705 la LMC
Autorii nu declară interese financiare concurente.
- Corespondența trebuie adresată lui Lique M. Coolen, Universitatea din Michigan, Departamentul de Fiziologie Moleculară și Integrativă, Științe Medicale II, Camera 7732B, Str. 1137 E. Catherine, Ann Arbor, MI 48109-5663. [e-mail protejat]
- Copyright © 2011 autorii 0270-6474 / 11 / 3116473-10 $ 15.00 / 0
Referinte
;
