Cronica autoadministrarea alcoolului are ca rezultat creșterea ΔFosB: compararea șoarecilor hibrizi cu modele distincte de băut (2012)

BMC Neurosci. 2012 Oct 29;13:130. doi: 10.1186/1471-2202-13-130.
 

Sursă

Centrul Wagoner pentru alcoolism și Dependenta Cercetare, Institutul de Neuroștiințe, Universitatea din Texas, Austin, Austin, TX, 78712, SUA. [e-mail protejat]

Abstract

ABSTRACT:

FUNDAL:

Incapacitatea de a reduce sau regla aportul de alcool este un simptom distinctiv pentru tulburările de consum de alcool. Cercetările privind modelele comportamentale și genetice noi ale schimbărilor induse de experiență în urma experienței vor duce la cunoașterea noastră privind tulburările de consum alcool. Diferite comportamente de autoadministrare a alcoolului au fost observate anterior când au fost comparate două tulpini hibride F1 de șoareci: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) arată o preferință redusă de alcool după experiența cu concentrații mari de alcool și perioade de abstinență în timp ce C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) prezintă o preferință susținută de alcool. Aceste fenotipuri sunt interesante deoarece acești hibrizi demonstrează apariția aditivității genetice (BxN) și a supradominanței (BxF) în aportul de etanol într-o manieră dependentă de experiență.

În mod specific, BxF prezintă preferință susținută de alcool și BxN prezintă o preferință redusă de alcool după experiența cu concentrații ridicate de etanol; cu toate acestea, experiența cu concentrații scăzute de etanol produce preferință susținută de alcool pentru ambii hibrizi.

În studiul de față, am testat ipoteza că aceste fenotipuri sunt reprezentate de producția diferențială a factorului de transcripție inductibilă, ΔFosB, în regiuni ale creierului, recompensă, aversiune și stres.

REZULTATE:

Schimbările în plasticitatea neuronală (măsurate prin nivelele ΔFosB) au fost dependente de experiență, precum și regiunea creierului și specificul genotipului, susținând în continuare faptul că circuitele neuronale subliniază aspectele motivaționale ale consumului de etanol.

Șoarecii BxN care prezintă o preferință redusă a alcoolului au avut niveluri mai scăzute de ΔFosB în nucleul Edinger-Westphal decât șoarecii care prezintă preferință susținută de alcool și concentrații crescute ale ΔFosB în amigdala mediană centrală în comparație cu șoarecii de control.

Șoarecii BxN care prezintă o preferință de alcool susținută au prezentat niveluri mai mari ale ΔFosB în zona tegmentală ventrală, Nucleul Edinger-Westphal și amigdala (diviziuni centrale și laterale).

Mai mult decât atât, în Nivelele ΔFosB ale șoarecilor BxN în nucleul Edinger-Westphal și în regiunile tegmentale ventrale au fost corelate în mod pozitiv cu preferința și aportul de etanol. În plus, analiza ierarhică de grupare a evidențiat faptul că mulți șoareci naivi cu etanol, cu niveluri scăzute ale ΔFosB sunt într-un grup, în timp ce mulți șoareci care prezintă preferință susținută de alcool cu ​​niveluri ridicate ale ΔFosB sunt într-un grup împreună.

CONCLUZII:

Prin compararea și două fenotipuri de alcool, acest studiu demonstreaza ca circuitele reward- și legate de stres (inclusiv nucleul Edinger-Westphal, zona ventral tegmental, amigdala) sunt supuse plasticitate semnificative care se manifesta ca preferinta de alcool redus.

Context

Există factori de susceptibilitate cunoscuți, ecologici și genetici, asociate cu abuzul de alcool și alcoolismul. Abilitatea de a bea cantități abundente de alcool, cu o mică consecință asupra individului, este un simptom de debut primar al multor alcoolici, ceea ce indică faptul că un nivel scăzut de răspuns la alcool este un factor major de vulnerabilitate în dezvoltarea alcoolismului [1,2]. Definirea factorilor neurobiologici care contribuie la moderarea alcoolului ne va ajuta să înțelegem consumul și abuzul de alcool și este o strategie eficientă pentru dezvoltarea unor tratamente îmbunătățite pentru persoanele diagnosticate cu tulburări de consum alcool. Utilizarea modelelor de rozătoare pentru a imita bolile umane a fost un instrument puternic în avansarea înțelegerii acestei boli și îmbunătățirea tratamentelor. Există mai multe modele de rozătoare pentru a studia aspecte legate de abuzul de alcool și de alcoolism, cu toate acestea, niciun model de alcoolism complet. Măsura în care un șoarece va administra pe cale orală soluții de etanol în condiții similare de mediu depinde în mare măsură de fondul său genetic [3].

Recent, am constatat ca C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) și FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 șoareci hibrid autoadministreze niveluri neobișnuit de mari de alcool în timpul testelor de preferință două butelii (femele consuma 20-35 g / kg / zi și bărbați 7-25 g / kg / zi, în funcție de concentrație și paradigmă) [4]. Acest nou model genetic are un avantaj semnificativ în comparație cu tulpinile încrucișate existente, incluzând dovezi ale unui fenotip supradominant și consumul de alcool în sânge [4]. În plus, consumul ridicat de etanol expus de șoareci BxF este văzut în două paradigme suplimentare de consum de etanol (consumul în întuneric și acceptarea etanolului în timpul accesului la fluide)4]. Am observat apoi alcool comportamente autoadministrare distincte atunci când se compară două F1 tulpini hibride de șoareci: C57BL / 6J x NZB / B1NJ preferinta alcool (BxN) arată redus preferință alcool după experiența cu concentrații ridicate de alcool și a perioadelor de abstinență și BxF arată susținută [5]. Folosind o baterie de teste comportamentale, am aratat ca BxN sunt mai sensibile decat soarecii BxF la efectele aversive si sedative, dar nu satisfacatoare, ale etanolului [6].

Cercetările de bază privind noile modele comportamentale și genetice ale consumului ridicat de alcool și schimbările induse de experiența consumului de alcool vor duce la cunoașterea abuzului de alcool și a alcoolismului. Fenotipul de preferință a alcoolului redus este interesant deoarece șoarecii BxN prezintă inițial o preferință înaltă pentru soluțiile de etanol. Deși aspectul motivațional al reducerii aportului de alcool după experiența cu concentrații înalte de etanol și abstinență nu este cunoscut, șoarecii BxN ar putea fi asemănători consumatorilor de alcool moderat prin faptul că consumă încă soluții de etanol, dar la un nivel redus, probabil datorită unei experiențe aversive.

Modelul de preferință susținut de alcool este, de asemenea, interesant, deoarece șoarecii BxF consumă în mod constant niveluri extrem de ridicate de etanol, indiferent de experiența anterioară. Preferința susținută și redusă a alcoolului poate fi legată de un efect de deprivare a alcoolului, fenomen în care animalele prezintă un consum semnificativ crescut de alcool după o perioadă de abstinențăe [7]. Efectul de deprivare a alcoolului este un fenomen util pentru studierea comportamentului crescut de consum de alcool. Deși schema experimentală cunoscută a induce efectul de deprivare a alcoolului este destul de diferită de cea utilizată aici, compararea preferințelor de alcool susținută și redusă cu efectul deprivării alcoolului corelează diferitele fenotipuri de comportament discutate aici cu un fenomen important în modelele de cercetare a alcoolului în rozătoare. Reducerea preferinței de alcool ar fi opusul unui efect de deprivare a alcoolului, iar preferința susținută a alcoolului ar putea fi descrisă ca absența efectului de deprivare a alcoolului. Utilizarea diverselor modele genetice pe animale, cum ar fi BxF și BxN, contribuie foarte mult la avansarea domeniului, din moment ce se crede că tulburările de consum alcool provine din interacțiunile complexe dintre genetică și mediu. Identificarea expresiei genetice diferențiate imediate pentru acești hibrizi oferă o perspectivă asupra circuitelor creierului importante pentru proprietățile recompensatoare și aversive ale etanolului.

Etanolul și alte neurocircuite implicate în medicamente au fost studiate pe modele specifice de rozătoare utilizând markeri moleculari de plasticitate și / sau activitate neuronală [8-15]. Administrarea pe bază de etanol administrat etanol și experimentator nu are ca rezultat hărți echivalente metabolice ale creierului, sugerând că anumite circuite specifice stau la baza efectelor de întărire a etanolului [8,9].

O componentă cheie, care încă trebuie explorată pe larg în cercetarea privind alcoolul, este examinarea comportamentelor susținute și reduse ale preferințelor de alcool și identificarea circuitelor neuronale angajate în timpul acestor comportamente. Scopul acestui experiment a fost acela de a identifica regiunile creierului angajate prin preferința de alcool susținută și redusă. Deoarece administrarea cronic de alcool (împreună cu alte medicamente de abuz) a fost demonstrat de a provoca diferențe regionale cerebrale la niveluri ΔFosB, am testat ipoteza ca aceste fenotipuri comportamentale sunt reprezentate de producția diferențială a factorului de transcripție inductibili, ΔFosB, în regiunile creierului cunoscute a să fie implicat în recompensă, aversiune și stres [10].

stimuli cronice care provoacă diferențe regionale în nivelurile ΔFosB includ abuzul de medicamente (alcool, cocaină, amfetamine, nicotina, morfina, si antipsihotice), stresul cronic (stres de reținere, șoc picior imprevizibil, convulsii electrosocuri), și roata compulsivă de funcționare [11]. Ca mediator potențial al adaptărilor pe termen lung în creier, identificarea variantei dominante a FosB (FosB sau ΔFosB) ca răspuns la tratamentul cronic cu etanol este o distincție importantă.

Există mai multe studii care au măsurat FosB și ΔFosB după stimuli cronici pentru care nu a fost verificat faptul că ΔFosB este izoforma dominantă (cum ar fi cele descrise mai jos). Cu toate acestea, există dovezi puternice că ΔFosB, nu FosB, este izoforma dominantă după stimulii cronici [10-12]. Un studiu realizat de Ryabinin și Wang (1998) a constatat că, în cazul alcoolului slab preferat șoarecilor DBA / 2J, patru zile de injecții cu etanol repetate au dus la creșteri puternice ale expresiei FosB în următoarele regiuni ale creierului: nucleul amigdaloid cortic anterior, ventral lateral septum, amigdala centrală , amigdala laterală, hipotalamus lateral, coajă nucleu accumbens, nucleul patului stria terminalis și nucleul paraventricular al talamusului [13]. Rezultatele lor identifică un neurocircuit care răspunde la etanol. Exprimarea FosB a fost, de asemenea, măsurată în alcoolul înalt preferând șoarecele C57BL / 6J în timpul achiziționării și menținerii administrării etanolului în condiții de acces limitat. Nu s-au înregistrat modificări ale nivelurilor FosB în timpul achiziției de autoadministrare [14]. Totuși, după două săptămâni de autoadministrare cu etanol la acces limitat, nivelele FosB au fost crescute în nucleul central medial al nucleului amigdală și Edinger-Westphal [15]. În ansamblu, rapoartele identifică regiuni noi implicate în administrarea etanolului, precum și implică un rol pentru calea mezocorticolimbică și amigdala extinsă [16]. Cu toate acestea, este important de remarcat faptul că modificările nivelelor ΔFosB depind de calea de administrare a etanolului, de doză și de durata de timp expusă unui tratament sau program [13-15].

Tulpinile de șoarece folosite în acest studiu oferă modele interesante pentru compararea preferințelor de alcool susținută și redusă și a mecanismelor care stau la baza acestor răspunsuri distincte la alcool. Acest studiu demonstrează că șoarecii care prezintă preferințe reduse de alcool prezintă, de asemenea, o plasticitate semnificativă în circuitele legate de recompensă și stres (inclusiv nucleul Edinger-Westphal, zona tegmentală ventrală, amigdala, nucleus accumbens și cortexul cingular).

REZULTATE

Efectul concentrațiilor de alcool și perioadele de abstinență asupra administrării de sine la șoarecii BxF și BxN

Pentru a demonstra că diferitele concentrații de etanol și / sau perioadele de abstinență au modificat consumul de etanol ulterior, am proiectat patru programe (grupe) pentru a măsura consumul de etanol (Figura (Figure1a, b).1a, b). Au fost patru grupuri experimentale pentru fiecare hibrid: concentrații înalte, concentrații mari cu perioade de abstinență, concentrații scăzute și concentrații scăzute cu perioade de abstinență. Datele complete privind preferința pentru etanol (figura (Figure2)2) și a consumului (Figura (Figure3)3) (pentru toate grupele și ambele genotipuri) sunt prezentate ca referință. Pentru a stabili și a ilustra fenotipurile comportamentale ale preferinței de alcool susținută și redusă, datele preferențiale și consumul de etanol 9% sunt prezentate în Figurile Figures44 și and5.5. Aceste fenotipuri comportamentale se bazează pe compararea preferinței și consumului de etanol 9% din prima, a doua, a treia și a patra prezentare în grupurile de concentrații înalte și zilele experimentale corespunzătoare pentru grupurile cu concentrații scăzute. A fost efectuată o preferință și un consum de etanol în două sensuri ANOVA (genotip x timp) de etanol 9%. Pentru grupul cu concentrații înalte, preferința pentru etanol (figura (Figure4a)4a) și a consumului (Figura (Figure5a)5a) au fost mai mari pentru BxF decât BxN, iar BxF au prezentat preferință și consum de alcool susținut, în timp ce BxN a prezentat preferință și consum redus de alcool (PREFERENȚĂ ETANOL - interacțiune F (3,54) = 4.83, P <0 01, genotip F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, timp F (9.92) = 0.0001, P <1,54; CONSUM DE ETANOL - interacțiune N / S, genotip F (50.73) = 0.0001, P <3,54, timp F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). Pentru grupul cu concentrații ridicate cu abstinență, preferința etanolului (fig (Figure4b)4b) și consumul (figura (Figure5b)5b) au fost mai mari pentru BxF decât BxN, iar BxF au prezentat preferință și consum de alcool susținut, în timp ce BxN a prezentat preferință și consum redus de alcool (PREFERENȚĂ ETANOL - interacțiune F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotipul F (1,132) = 250.43, P <0.0001, timp F (3,132) = 27.48, P <0.0001; CONSUM DE ETANOL - interacțiune F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotip F (1,132) = 510.88, P <0.0001, timp F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Pentru grupul cu concentrații scăzute, preferința etanolului (Figura (Figure4c)4c) și consumul (Figura (Figure5c)5c) au fost mai mari pentru BxF decât BxN și ambii hibrizi au prezentat preferință și consum de alcool susținut (PREFERENȚĂ ETANOL - interacțiune N / S, genotip F (1,54) = 12.2, P <0.01, timp N / S; CONSUM DE ETANOL - interacțiune N / S, genotipul F (1,54) = 74.83, P <0.0001, timpul N / S). Pentru grupul cu concentrații scăzute, cu abstinență, preferința etanolului (Figura (Figure4d)4d) și consumul (figura (Figure5d)5d) au fost mai mari pentru BxF decât BxN și ambii hibrizi au prezentat reduceri moderate ale preferinței și consumului de alcool (PREFERENȚĂ ETANOL - interacțiune N / S, genotip F (1,132) = 166.58, P <0.0001, timp N / S; CONSUM DE ETANOL - interacțiune F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotipul F (1,132) = 480.64, P <0.0001, timpul F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Pe scurt, în grupurile cu concentrații ridicate (fără abstinență), BxF a prezentat o preferință de alcool susținută, în timp ce BxN a prezentat o preferință redusă de alcool, iar în grupurile cu concentrații scăzute (fără abstinență), atât BxF cât și B6xN au prezentat o preferință de alcool susținută. Deoarece fenotipurile de interes sunt cel mai bine surprinse în grupuri fără abstinență, acestea sunt punctul central al restului studiului.

Figura 1  

Program experimental pentru consumul continuu de consum voluntar de etanol. a. Schema experimentală pentru grupurile cu concentrații scăzute și concentrații înalte. b. Program experimental pentru concentrații scăzute cu perioade de abstinență și concentrații înalte ...
Figura 2  

Preferința de etanol este dependentă de concentrația de genotip și de etanol. a. În grupurile cu concentrații înalte, preferința pentru etanol (consumul de etanol / consumul total de lichide) este mai mare pentru BxF decât BxN și variază în funcție de concentrația de etanol oferită. b ...
Figura 3  

Consumul de etanol este dependent de concentrația de genotip și de etanol. a. În grupurile cu concentrații mari, consumul de etanol (g / kg / zi etanol pur) este mai mare pentru BxF decât BxN și variază în funcție de concentrația de etanol oferită. b. În concentrațiile mari ...
Figura 4  

Sustinute si reduse fenotipuri comportamentale preferate de alcool. Comparația preferințelor de etanol 9% din prima, a doua, a treia și a patra prezentare se dovedește a stabili fenotipurile comportamentale ale preferințelor de alcool susținute sau reduse. a. ...
Figura 5  

Consolidate și reduse consumul de alcool fenotipuri comportamentale. Compararea consumului de etanol 9% din prima, a doua, a treia și a patra prezentare se dovedește a stabili fenotipurile comportamentale ale consumului de alcool susținut sau redus. ...

Nivelurile ΔFosB

Analiza și analiza ΔFosB au fost utilizate pentru a identifica neurochirurgia activată cronic în timpul preferințelor prelungite și reduse ale alcoolului. Au existat trei grupuri experimentale pentru fiecare hibrid: Concentrații înalte, concentrații scăzute și apă (Control). Datele ΔFosB sunt prezentate ca procent neuron pozitiv ΔFosB [(# de neuroni pozitivi ΔFosB) / (# de neuroni pozitivi ΔFosB + # de neuroni Nissl pozitivi]] (Tabel (Table1).1). Lucrările anterioare au arătat că experiența în etanol poate induce neurodegenerarea [17]. Prin urmare, am investigat numerele neuronale în acest studiu și nu raportăm diferențe semnificative bazate pe genotip sau grup pentru regiunile creierului cuantificate în acest studiu. Următoarele trei analize ale datelor ΔFosB au fost efectuate: 1) cu trei căi ANOVA (grupul genotip x grup x regiunea creierului), 2) în două grupe ANOVA (grupul de creiere x grup) pentru fiecare genotip și 3) matrice de corelare au fost dezvoltate pentru a corela corelația rețele.

Tabelul 1  

Procentul de neuroni pozitivi ΔFosB

Măsurile repetate ANOVA cu trei căi (genotipul x grupul x regiunea creierului) au evidențiat o interacțiune a regiunii creierului genotip x [F (15,375) = 2.01, P <05], o interacțiune a regiunii creierului grup [x (15.375) = 1.99, P <0.01] și un efect principal al regiunii creierului [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Măsurile repetate ANOVA bidirecțională (regiunea creierului x grup) pentru fiecare genotip au arătat că a existat un efect principal al regiunii grupului și creierului atât pentru BxF, cât și pentru BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, efectul principal al grup; F (15,374) = 25.64, P <.0001, efectul principal al regiunii creierului; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, efectul principal al grupului; F (15,360) = 23.73, P <.0001, efectul principal al genotipului]. Analiza post-hoc a relevat șase diferențe semnificative de grup pentru BxN (Figura (Figure6a-c).6ac). Procentul de nivele ΔFosB a fost mai mare în grupul de concentrații scăzute decât în ​​grupul de apă din La, CeC / CeL, EW și VTA. Procentul ΔFosB a fost mai mare în grupul de concentrații înalte decât în ​​grupul de apă din CeMPV. Procentul ΔFosB a fost mai mare în grupul de concentrații scăzute decât în ​​grupul cu concentrații înalte din EW. DFosB datele pentru toate celelalte regiuni ale creierului cuantificate sunt prezentate în Tabelul Table1.1. Analiza corelațională a lui Pearson a fost utilizată pentru a determina dacă% din neuronii positiveFosB pozitivi într-o anumită regiune a creierului s-au corelat cu consumul sau preferința de etanol. Consumul și preferința de etanol au prezentat o corelație pozitivă semnificativă cu% ΔFosB în EW și VTA la șoareci BxN (CONSUM DE ETANOL - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; PREFERENȚĂ ETANOL - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 pentru toți).

Figura 6  

Preferința susținută și redusă a alcoolului induce ΔFosB în amigdala, EW și VTA. Procentul neuronilor pozitivi ΔFosB în regiunile amigdalei (a.), EW (b.) și VTA (c.). d. și e. Imagini reprezentative ale colorării ΔFosB / Nissl ...

Relația complexă dintre expresia ΔFosB, genotipul, regiunea creierului și consumul de etanol a fost explorată în continuare utilizând analiza componentelor principale și gruparea ierarhică. Principalele analize ale componentelor au arătat că majoritatea variabilității (~ 80%) în date a fost reprezentată de componentele 5. Clasificarea ierarhică nesupravegheată (grupată de indivizi și regiuni ale creierului) a fost apoi efectuată și comandată utilizând prima componentă principală (Figura (Figure7).7). Gruparea individuală a evidențiat modele puternice, dar nu perfecte, de grupare pe baza consumului de etanol, indiferent de genotip. Mulți dintre șoarecii naivi cu etanol au grupat împreună și au prezentat mai puțin DFosB total decât media și mulți șoareci care au prezentat preferința de alcool susținută și au prezentat mai mult ΔFosB mai mult decât media. Aceste două clustere au fost cele mai divergente. Cele trei grupuri între ele au reprezentat o valoare mai mare decât, mai mică decât și o medie a valorilor ΔFosB și a fenotipurilor de băut în etanol.

Figura 7  

Nivelurile ΔFosB nu sunt conduse numai de consumul de etanol. S-a efectuat gruparea ierarhică și s-a arătat harta de căldură rezultată a nivelurilor individuale ΔFosB și consumul de etanol 9% corespunzător. Verde = ΔFosB mai mic de ...

Discuție

Au fost observate comportamente de autoadministrare cu alcool distinct atunci când se compară două tulpini hibride F1 de șoareci: BxN arată o preferință redusă a alcoolului după experiența cu concentrații ridicate de alcool și perioade de abstinență, în timp ce BxF arată preferința susținută de alcool. Modelele BxF stabilesc consumul ridicat, consumul ridicat (preferința susținută de alcool) și modelele BxN moderat de băut (preferință redusă de alcool). Plastilitatea neuronală (sau activitatea, măsurată prin nivelurile ΔFosB) a fost diferită în funcție de experiența etanolului, susținând în continuare un rol esențial al circuitelor neuronale specifice în preferința de alcool susținută și redusă.

Pentru tulpina consumatoare de alcool ridicat, C57BL / 6, preferința și consumul de etanol sunt foarte dependente de concentrația inițială de etanol, de durata abstinenței și de subtensiunea (C57BL / 6Cr sau C57BL / 6J) [7,18]. Am constatat că preferința și consumul de etanol observate la șoarecii BxF au fost în mod constant mai mari (și mai stabili decât în ​​BxN) în cele patru programe diferite testate. Preferința și consumul moderat de etanol în BxN s-au menținut numai cu un program de consum cronic (concentrații scăzute fără abstinență), în timp ce reducerile de preferință și consum au fost observate cu toate celelalte programe cronice de băuturi testate. Preferința de alcool redus BxN oferă un nou model animal în care experiența (prezentarea repetată a etanolului după experiență cu concentrații multiple în etanol și / sau câteva perioade scurte de abstinență) reduce dramatic răspunsul lor la o concentrație de etanol preferată în trecut.

Administrarea individuală și administrarea etanolului prin experimetrie produc diferite hărți metabolice ale creierului, sugerând că anumite circuite specifice stau la baza efectelor de întărire a etanolului [8,9]. Am testat ipoteza că fenotipurile comportamentale preferate de alcool susținut și redus sunt reprezentate de producția diferențială a factorului de transcripție inductibilă, ΔFosB, în regiunile creierului despre care se știe că sunt implicate în recompensă, aversiune și stres. ΔFosB este un factor de transcripție cu o stabilitate unică pe termen lung și nu desensibilizează la stimuli, așa cum face c-Fos, ci se acumulează în timpul tratamentelor cronice. Creșterile în ΔFosB se datorează creșterii activității neuronale și se consideră că reflectă plasticitatea neuronală de lungă durată. Am constatat că procentul neuronilor pozitivi ΔFosB din regiunile creierului depinde de genotipul (BxF și BxN) și de grup (controlul apei, concentrații scăzute și concentrații înalte).

Fsau BxN, analiza post-hoc a arătat că consumul voluntar de etanol a determinat creșterea ΔFosB în nucleul EW, VTA și amigdala: indicând o creștere a plasticității neuronale în regiunile creierului despre care se știe că sunt implicate în răspunsurile la etanol, recompensă și stres. Șoarecii BxN din grupul cu concentrații înalte (preferința redusă a alcoolului) au redus plasticitatea neuronală în EW, sugerând că acești neuroni răspund la aportul de alcool cu ​​o plasticitate dependentă de experiență. În grupul cu concentrații scăzute (prezentat preferință susținută de alcool), plasticitatea neuronală în EW este mai mare decât în ​​grupurile de concentrații înalte și de control al apei. Desi efectuate folosind paradigme diferite de consum de etanol si modele genetice de mouse-ul, constatarile noastre in EW de soareci BxN sunt de acord cu studiile anterioare consumul de etanol [14,15]. EW non-preganglionică a fost recent caracterizată ca fiind conținând neuroni conținând pericolumotor urocortin (Ucn)19]. Ucn1 este o peptidă cu factor de eliberare a corticotropinei (CRF) care leagă receptorii CRF1 și CRF2. Studiile anterioare care utilizează abordări genetice, farmacologice și leziuni au arătat că Ucn1 este implicat în reglementarea consumului de alcool [19-22]. Taici este o predispoziție genetică cunoscută pentru consumul ridicat de alcool la rozătoare, care este corelată cu nivelele bazale ridicate ale Ucn1 în EW și LSi [23]. Astfel, lipsa semnificației post-hoc pe care am observat-o în EW pentru alcoolii înalți care preferă și consumă șoareci BxF a fost neașteptată. Poate că acest lucru se datorează nivelurilor ușor mai ridicate ale ΔFosB din grupul de apă BxF în comparație cu grupul de apă BxN. Într-adevăr, nivelele procentuale ΔFosB pentru toți șoarecii care prezintă preferință susținută de alcool (grupul BxF High Concentrations, grupul BxF Low Concentrations și grupul BxN Low Concentrations) au fost destul de asemănători.

Pentru BxN, consumul de etanol în grupul de concentrații scăzute a crescut plasticitatea neuronală în VTA (mai mare decât în ​​grupurile de concentrații înalte și de control al apei). Consumul și preferința de etanol au fost, de asemenea, mai mari pentru grupul cu concentrații scăzute. Lipsa semnificației post-hoc pe care am observat-o în VTA pentru alcoolii înalți care preferă și consumă șoareci BxF a fost neașteptată și se poate datora nivelurilor bazale ușor mai mari ale ΔFosB în grupul de control al apei. Procentul de ΔFosB a fost ușor crescut în grupul de apă BxF în comparație cu grupul de apă BxN, în timp ce procentul ΔFosB a fost destul de similar pentru toți șoarecii care prezintă preferință susținută de alcool (grupul BxF High Concentrations, grupul BxF Low Concentrations și grupul BxN Low Concentrations) . Sistemul dopaminei VTA joacă un rol major în medierea efectelor de întărire ale etanolului și participă la multe conexiuni reciproce importante pentru etanol și comportamente legate de recompense [24-26]. În plus, VTA proiectează nucleul amigdală și EW. Șobolanii au demonstrat că auto-administrează etanol direct în VTA [27]. De asemenea, expunerea la etanol crește rata de ardere a neuronilor dopaminergici în VTA [28,29]. Rata crescută de ardere ar putea fi legată de inducerea ΔFosB în VTA pe care am observat-o după administrarea voluntară cronică de etanol în BxN.

Dependența de alcool provoacă neuroadaptări pe termen lung, ducând la stări emoționale negative; un mecanism important în armarea negativă este semnalizarea factorului de eliberare a corticotropinei (CRF) în amigdala [30]. Manipularea farmacologică a neuronilor din CeA a vizat receptorii GABA, CRF, opioid, serotonin, dynorfin și norepinefrină [25,31-34]. GAntagoniștii ABA, precum și antagoniștii CRF, scad consumul de etanol [32,33,35]. Leziunile CeA scad consumul continuu de etanol voluntare [36]. Constatările noastre susțin în continuare un rol pentru CeA în regulamentul de consum de alcool. Neuronii GABAergici din amigdala centrală formează o populație heterogenă ale cărei legături apar în legătură cu conținutul lor de peptide. Acești neuroni GABAergici integrează activitatea de ieșire a CeA. După cum a fost revizuit în [Wee și Koob (2010]), sstudiile everale au identificat un rol pentru receptorii opioizi dynorfin și kappa în menținerea și creșterea esențială a consumului de etanole [37]. Mai recent, Walker și colab. Au demonstrat că antagonistul receptorului-opioid, nor-binaltorfimina, în amigdala extinsă, reduce în mod selectiv administrarea de etanol pe animale dependente [38]. Kappa receptorul de opiacee de semnalizare rămâne un interes cheie de cercetare la intersecția de stres, recompensă și aversiune. S-a demonstrat, de asemenea, că auto-administrarea indusă de stres este mediată de semnalizarea receptorilor opioizi kappa [39]. CeA central poate fi subdivizat în ventriculul latero-capsular (CeL / CeC) și medial posterior. Neuronii GABAergici ai CeL / CeC primesc inervații dopaminergice din VTA; după cum sa menționat anterior, acești neuroni sunt activi după administrarea acută de etanol și prezintă șoareci ΔFosB crescuți care prezintă o preferință de alcool susținută. De asemenea, vezi Mc [Mireasa (2002]) pentru o excelentă revizuire a CE și a efectelor alcoolului [40]. În studiul nostru, șoarecii BxN cu preferință susținută de alcool (grupul cu concentrații scăzute) au prezentat o creștere a plasticității neuronale la șoarecii CeC / CeL și La și BxN cu preferință redusă de alcool (grupul cu concentrații mari) prezintă o plasticitate neuronală crescută în CeMPV. Aceste rezultate sugerează că experiența specifică a etanolului implică plasticitatea în neuronii GABAergici din amigdală. Cu aceste date, împreună cu modificările corespunzătoare ale plasticității neuronale în VTA și EW, propunem ca acest circuit să sufere o plasticitate semnificativă în condițiile preferențiale de preferință a alcoolului.

Cercetările anterioare au arătat că șoarecii C57BL / 6J pot atinge niveluri ridicate de alcool în sânge prin consumarea a două sticle, cu toate acestea, aceste niveluri de alcool din sânge nu sunt susținute și adesea consumul nu satisface criteriile de motivare farmacologică stabilite de Dole and Gentry (1984) [41,42]. Șoareci BxN care prezintă o preferință redusă a alcoolului consumată mai puțin decât s-ar fi așteptat de la un șoarece tipic C57BL / 6J [1]. Prin urmare, deși nu am luat probe de alcool din sânge, este puțin probabil ca șoarecii BxN care prezintă o preferință redusă a alcoolului să atingă niveluri susținute de alcool din sânge relevante din punct de vedere farmacologic, sugerând că concentrațiile mari de alcool din sânge nu sunt necesare pentru a induce plasticitate în aceste regiuni ale creierului. Este important de observat că un efect semnificativ al grupului există și în BxF, chiar dacă rezultatele post-hoc (corectate pentru comparații multiple) pentru regiunile creierului BxF nu au indicat schimbări semnificative în procentul neuronilor ΔFosB pozitivi pentru orice regiune după consumul cronic de etanol cu aceste programe diferite.

Pentru a vizualiza relațiile potențiale dintre variabile s-a efectuat gruparea ierarhică. Diagrama termică a analizei rezultate arată o tendință generală între nivelul ΔFosB și consumul de etanol, indiferent de genotip. Nivelurile mai ridicate ale ΔFosB au fost asociate cu consumul ridicat de alcool și nivelurile inferioare ale ΔFosB au fost asociate cu animalele de control; cu toate acestea, puterea relației nu a fost suficientă pentru a prezice cu exactitate fenotipurile de băut bazate exclusiv pe nivelurile ΔFosB.

concluzii

Au fost observate comportamente de autoadministrare alcoolică distinctă cu două tulpini hibride de F1: BxN prezintă preferință redusă de alcool după experiența cu concentrații mari de alcool, în timp ce BxF prezintă preferința susținută de alcool. Modelele BxF stabilesc consumul ridicat, consumul ridicat (preferința susținută de alcool) și modelele BxN moderat de băut (preferință redusă de alcool). Schimbările în plasticitatea neuronală (măsurate prin nivelurile ΔFosB) au fost dependente de experiență, precum și regiunea creierului și specificul genotipului, definind în continuare circuitele neuronale care stau la baza aspectelor motivaționale ale consumului de etanol. Aceste rezultate arată că schimbarea unei linii parentale la șoarecii hibrizi are ca rezultat modificări ale tiparelor consumului de alcool și schimbări semnificative în modelele expresiei ΔFosB, sugerând că rețelele distincte de creier sunt implicate în aceste șoareci hibrizi diferiți.

Metode

Etică

Acest studiu a fost realizat în strictă conformitate cu recomandările din Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator din cadrul Institutelor Naționale de Sănătate. Protocolul a fost aprobat de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor instituționale al Universității Texas din Austin (AUP 2010-00028). Toate intervențiile chirurgicale au fost efectuate sub anestezie cu pentobarbital de sodiu, și toate eforturile au fost făcute pentru a reduce la minimum suferința.

animale

Studiile au fost efectuate utilizând șoareci hibrizi F1 intercross femele derivate din C57BL / 6J și fie șoareci FVB / NJ, fie NZB / B1NJ (BxF F1 și BxN F1, tulpina maternă tulpina paternă x). Crescătorii C57BL / 6J, FVB / NJ și NZB / B1NJ au fost achiziționați de la The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) și au fost împerecheați la săptămâni 7-8. Descendenții au fost înțărcați în grupuri isosexuale din fiecare dintre genotipuri (BxF F1, BxN F1). Am testat numai soareci de sex feminin pentru a facilita compararea cu datele colectate anterior [1,5,6]. Șoarecii au fost adăpostiți în cuști standard cu alimente și apă furnizate ad libitum. Sala de colonii și sala de testare se afla pe o lampă 12 h: 12 h ciclu întunecat (luminile sunt aprinse la 07: 00).

Două test de preferință pentru preferința de etanol în sticlă

Metoda de alegere a două sticle a fost utilizată pentru a determina modelele de administrare voluntară a etanolului la femelele BxF și BxN de sex feminin [1,6]. F1 șoareci de sex feminin hibrid (în vârstă de 63 zile) au fost adăpostiți individual în cuști standard, în timp ce se găzduiesc timp de o săptămână la sticle cu tuburi de sipper care conțin apă înainte de introducerea unei soluții de etanol. După obișnuință, șoarecii au avut acces la două sticle identice: una care conținea apă și cealaltă conținea o soluție de etanol. Pozițiile din tub au fost schimbate zilnic pentru a controla preferințele de poziție. Pentru a ține cont de eventualele vărsări și evaporări, greutatea medie epuizată de la tuburile din cuștile de control fără șoareci a fost scăzută din valorile individuale de băut în fiecare zi. Șoarecii au fost cântăriți în fiecare zi 4 pe tot parcursul experimentului. Toate consumurile de fluide au fost măsurate zilnic pe tot parcursul experimentului. Cantitatea de etanol consumată și preferința pentru etanol au fost calculate pentru fiecare șoarece, iar aceste valori au fost medii pentru fiecare concentrație de etanol. Efectul concentrațiilor de alcool și perioadele de abstinență asupra autoadministrării la șoarecii BxF și BxN a fost demonstrat prin desemnarea unui grup experimental cu acces la concentrații înalte (escaladarea accesului la soluții etanol 3-35%, urmate de cicluri 3 repetate ale 9, 18, și 27% etanol, terminând cu o prezentare finală a etanolului 9%) și un alt grup cu concentrații scăzute (accesul la etanol 3-9%, restul experimentului efectuat cu acces la etanol 9%). Fiecare dintre aceste grupuri a avut un subgrup care a făcut sau nu experiența a trei perioade de abstinență de o săptămână. Șoarecii de control au prezentat condiții similare în același timp cu șoarecii experimentali, dar li sa oferit doar o sticlă de apă.

În total, au existat cinci grupe pentru fiecare hibrid: Apă (n = 14-16), Concentrații înalte (n = 10), Concentrații înalte cu perioade de abstinență (n = 20) cu perioade de abstinență (n = 10). Consultați Figura Figure11 pentru detalierea a două programe de alegere a grupului de sticle.

ΔFosB Imunohistochimie și cuantificare

Imunohistochimia osFosB (IHC) a fost măsurată în 16 regiuni cerebrale de la șoareci care au avut 72 de zile de acces continuu fie la apă (martor), fie la apă și alcool [Concentrații mari și concentrații scăzute]. Efectul concentrațiilor ridicate asupra preferinței și consumului de etanol a fost mult mai mare decât efectul abstinenței; prin urmare, grupurile care au prezentat perioade de abstinență nu au fost incluse în măsurătorile HFosB IHC. Mai mult, experimentul a fost realizat dincolo de prima apariție a preferinței de alcool susținute sau reduse pentru a arăta că fenotipurile comportamentale sunt stabile, cu cicluri repetate de modificări ale concentrației de etanol pentru a examina efectele consumului cronic de etanol. La patru până la opt ore după îndepărtarea alcoolului în a 73-a zi a experimentului, șoarecii au fost anesteziați profund (175 mg / kg pentobarbital de sodiu) și perfuzați intracardic cu 20 ml de soluție salină tamponată cu fosfat 0.01 M (PBS), urmată de 100 ml de 4% paraformaldehidă în PBS. Creierele au fost îndepărtate, fixate în 4% paraformaldehidă la 4 ° C, încorporate în agaroză 3%, secționate (50 um, coronală) pe un vibratom, plasate în crioprotector (30% zaharoză, 30% etilen glicol și 0.1% polivinil pirolidonă în PBS) peste noapte la 4 ° C și păstrată la -20 ° C până când este procesată pentru IHC. Secțiunile decongelate au fost spălate cu PBS, tratate cu 0.3% H2O2 și incubate timp de o oră în ser normal de capră 3% pentru a minimiza marcarea nespecifică. Secțiunile de țesut au fost apoi incubate peste noapte la 4 ° C în ser normal de capră 3% și anti-FosB (SC-48, diluție 1: 5000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Secțiunile au fost spălate, incubate în Ig capră biotinilată anti-iepure (diluție 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA) timp de o oră, spălate și incubate în complex avidin-biotină (diluție 1: 200, kit Elite-Laboratoare Vector) . Activitatea peroxidazei a fost vizualizată prin reacție cu 0.05% diaminobenzidină (conținând 0.015% H2O2). Secțiunile de țesut au fost contrafăcute cu Nissl (folosind albastru de metilen / azure II). Diapozitivele au fost codate pentru numărătoarea orbelor. Neuronii ΔFosB-IR au fost numărați la mărirea 50X (ulei) utilizând metoda fracționatorului optic și software-ul de calculator StereoInvestigator. Informații despre parametrii de eșantionare: cadrul de numărare (50um x 50um x 10um) a fost același pentru toate regiunile cuantificate; totuși dimensiunea grilei a fost determinată pentru fiecare regiune a creierului pentru a se asigura că numărul total de celule bilaterale va fi egal cu 100-300 pentru a obține un coeficient de variație mai mic decât 0.1. Datele au fost calculate ca procent din nucleele pozitive ΔFosB (numărul de nuclee pozitive ΔFosB / numărul de neuroni) pentru fiecare regiune.

Anticorpul FosB utilizat în acest studiu (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) a fost ridicat împotriva unei regiuni interne a FosB și recunoaște atât FosB, cât și ΔFosB. Deși acest anticorp recunoaște atât FosB cât și ΔFosB, neuronii imunopozitivi cuantificați în acest studiu vor fi denumiți neuroni pozitivi ai ΔFosB, deoarece sa demonstrat că medicamentele de abuz, incluzând alcoolul, induc în mod specific ΔFosB, nu FosB, în neuroni. Perrotti și colab. ([2008]) a determinat inducerea ΔFosB (ca răspuns la administrarea cronică a medicamentelor de abuz, inclusiv alcoolul) utilizând două anticorpi: unul care recunoaște FosB și ΔFosB (SC-48) și unul selectiv pentru ΔFosB (nu este disponibil comercial) studiat, imunoreactivitatea observată utilizând anticorpul FosB (SC-48) se datorează ΔFosB, deoarece nu au detectat nici un neuron imunoreactiv utilizând un anticorp selectiv pentru FosB cu lungime întreagă [10]. În plus, este cunoscut faptul că ΔFosB este indus într-o manieră specifică regiunii cerebrale și celulară, prin diferite tratamente cronice și sunt disponibile recenzii excelente pe această temă [11,43,44].

Abrevieri și locații ale structurilor neuroanatomice

Il - cortex infralimbic (+1.70 mm); Cg1 - cortex cingulat 1 (+1.1 mm); Cg2 - cortex cingulat 1 (+1.10 mm); Miez NAcc - nucleu accumbens core (+1.10 mm); NAcc shell - nucleu accumbens shell (+1.10 mm); LSi - sept lateral intermediar (+1.10 mm); La - amigdala laterală (-1.22 mm); Bla - amigdala basolaterală (-1.22 mm); CeC / CeL - amigdala centrală capsulară și laterală centrală (-1.22 mm); CeMPV - porțiune posterioară centrală a nucleului central al amigdalei (-1.22 mm); PAG - gri periaquaductal (−3.64 mm); EW - nucleu Edinger-Westphal (−3.64 mm); VTA - zona tegmentală ventrală (−3.64 mm); DR - rafe dorsală (- 4.60 mm); PBN - nucleu parabrahial (−5.2 mm); NTS - nucleu tractus solitarius (-6.96 mm). Brainul mouse-ului în coordonatele stereotaxice[45] a fost folosit pentru a se potrivi subiectiv unul sau trei secțiuni pentru cuantificarea fiecărei regiuni ale creierului.

Proceduri statistice

Datele sunt raportate ca medie ± SEM, cu excepția cazurilor în care se specifică altfel. Datele au fost în mod normal distribuite. Statisticile au fost realizate utilizând statisticile versiunea 6 (StatSoft, Tulsa, OK, SUA) și GraphPad Prism versiunea 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, SUA). Au fost efectuate măsurători repetate ANOVA cu două căi pentru consumul de etanol și date de preferință pentru a evalua diferențele dintre grupuri. S-au efectuat ANOVA cu două și trei căi pentru datele ΔFosB pentru a evalua interacțiunile și efectele principale pentru grup (Concentrații înalte, concentrații scăzute și apă), regiunea creierului și genotipul. Corecția lui Bonferroni pentru comparații multiple și post-hoc lui Bonferroni au fost efectuate atunci când este cazul. În mod specific, am emis ipoteza că circuitul de stres și recompensă ar fi crescut FosB la șoareci, arătând o preferință redusă a alcoolului. Pentru fiecare cruce hibrid, r Pearson's a fost utilizat pentru a identifica prezența unor corelații semnificative între nivelele ΔFosB și preferința și consumul de etanol la șoarecii experimentați cu etanol.

S-a efectuat gruparea ierarhică pentru a vizualiza modul în care datele co-variază și pentru a evalua modul în care grupul de date împreună. Valorile medii imputate înlocuiesc lipsa procentului datelor ΔFosB, care nu depășesc 15% din date. Deși există un grad mai mare de incertitudine decât dacă valorile imputate ar fi fost de fapt observate, analiza ierarhică de grupare necesită o aderare completă sau o ștergere completă pentru comparații de la caz la caz. Struparea ierarhică a fost efectuată utilizând metoda Ward și grupurile rezultate au fost ordonate de către prima componentă principală a analizei principale a componentelor (JMP®, Version 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Pentru grupurile cu experiență în apă și etanol, datele ΔFosB pentru fiecare regiune a creierului au fost transformate în scorul z și s-a efectuat analiza componentelor principale pentru a determina numărul de clustere. Datele au fost apoi grupate de regiuni ale creierului și indivizi utilizând analiza ierarhică de grupare supravegheată.

Interese concurente

Autorii declară că nu au interese concurente.

Contribuțiile autorilor

ARO, YAB, RAH, TAJ au contribuit la proiectarea studiului. ARO a achiziționat datele. ARO, IP, RDM au analizat datele. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB și RAH au fost implicate în redactarea și revizuirea manuscrisului. Toți autori au citit și aprobat manuscrisul final.

Mulţumiri

Aș dori să mulțumim doctorilor. Jody Mayfield și Colleen McClung pentru discuții utile și Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour și Darshan Pandya pentru asistență tehnică. Această cercetare a fost susținută de către Inițiativa de integrare a Neuroștiințelor privind Consorțiul de Alcoolism Grant AA13520 și Institutul Național pentru Abuzul de Alcool și Alcoolismul acordă AA06399-S și AA16424.

Referinte

  • Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Mitul sursei de apă și răspunsul la alcool în indienii misiunii. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
  • Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Constatări în cadrul subgrupurilor privind nivelul de răspuns la alcool ca factor de risc pentru tulburările de consum alcool: o populație de colegiu de femei și latine. Alcool Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
  • Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Consumul voluntar de etanol în tulpinile de șoareci încrucișați 15. Psychopharmacology. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Cross Ref]
  • Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hybrid C57BL / 6J x FVB / NJ șoareci consumă mai mult alcool decât șoarecii C57BL / 6J. Alcool Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. și colab. Șoarecii hibrizi ca modele genetice de consum ridicat de alcool. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Diferențele comportamentale dintre șoarecii hibridi C57BL / 6JxFVB / NJ și C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1: relația cu controlul consumului de etanol. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Dezvoltarea unui efect de deprivare și escaladare a alcoolului în C57BL / 6J. Alcool Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Efectele autoadministrării etanolului și etanolului / zaharzei asupra ratelor de utilizare a glucozei cerebrale la șobolani. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
  • Williams-Hemby L, Porrino LJ. Datele cu doze mici și moderate de etanol produc modele distincte de modificări metabolice cerebrale la șobolani. Alcool Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Modele distincte ale inducției DeltaFosB în creier prin medicamente de abuz. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: un comutator molecular pentru adaptarea pe termen lung în creier. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB se acumulează într-o populație de celule GABAergic în coada posterioară a zonei tegmentale ventrale după tratamentul psihostimulant. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Wang YM. Administrarea repetată de alcool influențează diferențiat imunoreactivitatea c-Fos și proteina FosB la șoarecii DBA / 2J. Alcool Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. Expresia ITF în creierul mouse-ului în timpul achiziției de auto-administrare a alcoolului. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Consumul de alcool produce schimbări selective ale regiunii cerebrale în expresia factorilor de transcripție inductibili. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kalivas PW. Cum determinăm care schimbări neuroplastice induse de medicamente sunt importante? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Cross Ref]
  • Crews FT, Nixon K. Mecanisme de neurodegenerare și regenerare în alcoolism. Alcool. 2009;44: 115-127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Cross Ref]
  • Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Caracterizarea efectului de deprivare a etanolului în substraturile șoarecilor C57BL / 6. Alcool. 2006;40: 119-126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Distribuția de Urocortin 1 în creierul mouse-ului este dependentă de tulpini. Neuroscience. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE. Leziunile nucleului Edinger-Westphal la șoarecii C57BL / 6J distrug hipotermia indusă de etanol și consumul de etanol. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Microinjecția Urocortin 1 în septul lateral al șoarecelui reglează dobândirea și exprimarea consumului de alcool. Neuroscience. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Turek VF, Țivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lē AD, Ryabinin AE. Expresia Urocortin 1 în cinci perechi de linii de șobolan crescuți selectiv pentru diferențe în consumul de alcool. Psychopharmacology. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Weitemier AZ. Neurocircuitul urocortin 1: sensibilitatea la etanol și implicarea potențială în consumul de alcool. Brain Res Apocalipsa 2006;52: 368-380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Administrarea alcoolului: rolul dopaminei mezolimbice. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • McBride WJ, Li TK. Modele animale de alcoolism: neurobiologia comportamentului ridicat al alcoolului la rozătoare. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Cross Ref]
  • Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Obiectivele de neurochirurgie în rata și dependența de etanol. Alcool Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Administrarea intracraniană a etanolului în zona tegmentală ventrală a șobolanilor masculi Wistar: dovada implicării neuronilor dopaminergici. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Dozele mici de etanol activează neuronii dopaminergici în zona tegmentală ventrală. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Etanolul crește rata de ardere a neuronilor dopaminergici din zona tegmentală ventrală a șobolanului in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Cross Ref]
  • Heilig M, Koob GF. Un rol-cheie al factorului de eliberare a corticotropinei în dependența de alcool. Tendințe Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Dyr W, Kostowski W. Dovada că amigdala este implicată în efectele inhibitoare ale antagoniștilor receptorilor 5-HT3 asupra consumului de alcool la șobolani. Alcool. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Cross Ref]
  • Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Efectele antagoniștilor receptorului CRF1 și ale receptorilor opioizi asupra creșterii induse de dependență de băuturi alcoolice de către șobolani care preferă alcoolul (P). Alcool Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Hyytiä P, Koob GF. Antagonismul receptorului GABAA în amigdala extinsă descrește administrarea etanolului la șobolani. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Cross Ref]
  • Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Etanolul mărește transmisia GABAergică la ambele situsuri pre- și postsynaptice în neuronii amigdali centrali de șobolan. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Muscimol intra-amigdală scade administrarea auto-etanșă operantă la șobolanii dependenți. Alcool Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Scăderea anxietății experimentale și a consumului voluntar de etanol la șobolani după leziunile centrale, dar nu bazolaterale, ale amigdalelor. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wee S, Koob GF. Rolul sistemului opioid dynorfină-kappa în efectele de întărire ale medicamentelor de abuz. Psihofarmacologie (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Direcționarea sistemelor receptorilor opioizi dynorfin / kappa pentru tratamentul abuzului și dependenței de alcool. Alcool. 2012;46: 359-370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Medierea capo-opioid endogenă a potențării induse de stres a preferințelor locului condiționate de etanol și a autoadministrării. Psihofarmacologie (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Cross Ref]
  • McBride WJ. Nucleul central al amigdelor și efectele consumului de alcool și băuturi alcoolice la rozătoare. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. Spre un analog al alcoolismului la șoareci: Factorii scalei din model. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. Spre un analog al alcoolismului la șoareci: Criterii de recunoaștere a băuturilor motivate farmacologic. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nestler EJ. Neurobiologia neurologică a dependenței. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: un mediator molecular al plasticității neuronale și comportamentale pe termen lung. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Franklin KJ, Paxinos G. Creierul mouse-ului în coordonate stereotaxice. 2. San Diego, CA: Academic; 2001.