Un rol pentru ipocretin (orexin) în comportamentul sexual masculin (2007)

Abstract

Introducere

De la descoperirea sa în 1990 (de Lecea și colab., 1998; Sakurai și colab., 1998), sistemul hipocretin (orexin; hcrt / orx) a fost privit în principal în contextul comportamentului excitant și al ingerării (Sutcliffe și de Lecea, 2002; Siegel, 2004). Șoarecii mutanți cu semnalizare hcrt / orx afectată prezintă semne de excitatie marcate de tranziții frecvente între somn și veghe (Mochizuki și colab., 2004). Se crede că peptidele hcrt / orx facilitează excitația neîntreruptă prin proiecții robuste la grupurile de celule aminergice active în tremurături în brainstem (de exemplu, locus ceruleus, raphe) (Peyron și colab., 1998; Nambu și colab., 1999; Saper și colab., 2005). În plus față de proiecțiile lor la situsurile care reglează vigilența și excitația, neuronii hcrt / orx se proiectează și la originea căii dopaminergice mezolimbice (DA) în zona tegmentală ventrală (VTA) (Fadel și Deutch, 2002). Acest model de conectivitate a determinat o serie de grupuri de cercetare să evalueze rolul hcrt / orx în armarea cu recompensă (DiLeone și colab., 2003; Harris și colab., 2005; Harris și Aston-Jones, 2006).

Studii privind animalele în mișcare ad libitum arată că neuronii hcrt / orx își măresc rata de ardere în perioadele de comportament experimentat (Mileykovskiy și colab., 2005) și că o ieșire locomotorie îmbunătățită după perfuzia intracerebroventriculară hcrt / orx este atenuată de blocarea receptorului DA (Nakamura și colab., 2000). Alte studii au demonstrat o creștere a activității celulelor DA in vitro de hcrt / orx (Korotkova și colab., 2003), precum și eliberarea nucleului accumbens augmentat (NAc) DA in vivo după aplicarea hcrt / orx către VTA (Narita și colab., 2006). Recent, studiile comportamentale au constatat că activarea sistemului hcrt / orx poate fi parte integrantă a motivației pentru droguri de abuz (Boutrel și colab., 2005; Harris și colab., 2005; Borgland și colab., 2006), precum și recompensele alimentare naturale a căror rezistență de întărire este determinată homeostatic de structurile hipotalamice (Hoebel, 1969; Rolls și colab., 1980; Fulton și colab., 2000; Thorpe și colab., 2005).

La fel cum hcrt / orx exogenă poate îmbunătăți hrănirea și căutarea alimentelor (Kotz, 2006), perfuzia intra-hipotalamică de hcrt / orx facilitează comportamentul sexual al șobolanilor masculi (Gulia și colab., 2003). În lumina studiilor clasice în care hrănirea sau comportamentul de copulație masculină a fost provocată de stimularea electrică a locurilor din zona hipotalamică laterală (LHA), care sunt acum cunoscute ca conținând neuroni hcrt / orx (Vaughan și Fisher, 1962; Caggiula și Hoebel, 1966; Swanson și colab., 2005), am căutat dovezi pentru activarea neuronilor hcrt / orx în timpul copulației și pentru deprecierea comportamentului de către receptorul orexin-1 (OX₁) blocada. De asemenea, am evaluat reglajul neuroendocrin al sistemului hcrt / orx prin măsurarea efectelor castrării și înlocuirii hormonale asupra conținutului hcrt / orx central și prin dubla imunozălzire pentru receptorii hcrt / orx și hormoni steroizi. În cele din urmă, am evaluat măsura în care sistemul DA mezolimbic ar putea fi activat de către hcrt / orx in vivo și dacă neuronii DA din VTA care primesc intrări hcrt / orx prezintă o imunoreactivitate crescută (ir) în timpul copulației.

Materiale și metode

Imunohistochimia Fos, comportamentul și numărul celulelor.

Adulți (~ 325 g), șobolani experimentați sexual de sex masculin Long-Evans (Harlan, Indianapolis, IN) au fost păstrați și utilizați în conformitate cu Institutul Național de Sănătate Ghid pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laboratorși toate procedurile au fost aprobate de comitetele instituționale de îngrijire și utilizare a animalelor ale universităților. În săptămâna anterioară testării, tuturor animalelor li s-a permis să aibă patru sesiuni zilnice de experiență sexuală de 1 oră cu o femeie ovariectomizată adusă la est de benzoat de estradiol (10 μg, sc) și progesteron 48 ore mai târziu (400 μg, sc; administrat cu 4 ore înainte testare; Sigma, St. Louis, MO). Testarea comportamentală în toate experimentele a fost efectuată la 2 ore în perioada nocturnă obișnuită a animalelor în cușca lor de acasă, sub lumina unui singur bec incandescent roșu de 40 W. Pentru experimentele de copulare, un grup (n = 6) dintre bărbați au fost lăsați să copuleze în cușca de acasă cu o femelă estro la o singură ejaculare, după care femela a fost îndepărtată. Toate animalele s-au montat aproape imediat și au intromis în <4 min. Latența medie a ejaculării pentru acest grup a fost de 632.6 ± 169.64 s (medie ± SEM; n = 6). Un grup de control (n = 6) a fost folosit pentru a controla nivelul de activitate. Aceste animale au fost monitorizate vizual pentru a verifica dacă erau treji și activi pentru o perioadă de 15 minute, care corespundea duratei perioadei de testare a copulării grupului experimental. Capacele cuștii au fost deschise și închise la începutul și la sfârșitul acestei perioade de 15 minute, dar în caz contrar, animalele au fost lăsate netulburate. Animalele de control care au fost în repaus în această perioadă nu au fost utilizate. Animalele au fost considerate ca fiind în repaus dacă par să stea pe flancul lor sau într-o postură cu capul în jos (adaptat din Espana și colab., 2003). La șaizeci de minute după începerea sesiunilor de copulare sau a observațiilor de control, animalele au fost anesteziate profund cu pentobarbital de sodiu (100 mg / kg) și perfuzate cu 0.1 m PBS, pH 7.4 și 4% paraformaldehidă în PBS. Creierii au fost crioprotecați în 20% zaharoză-PBS și fiecare altă secțiune de criostat 40 μm (30 per animal) din vecinătatea populației de celule hcrt / orx hipotalamice a fost imunologică pentru prepro-hcrt / orx (1: 100; Millipore, Billerica, MA) și Fos (1: 10,000; EMD Biosciences, San Diego, CA) cu 3 ', 3'-diaminobenzidina (DAB) și DAB intensificată cu nichel, conform procedurilor imunohistochimice descrise anteriorEspana și colab., 2003; Sato și colab., 2005). Numărătoarea celulelor a fost efectuată sub mărire mare utilizând un microscop Olympus (Tokyo, Japan) și o cameră pe o singură secțiune, la un nivel rostrocoedal consistent (vezi Fig. 1B,C) (2.45 mm posterior față de bregma) (Swanson, 2004). În fiecare emisferă, celulele care au căzut în două câmpuri de numărare 470 × 630 μm au fost marcate cu ajutorul unui software de analiză digitală a imaginilor (Image-Pro Plus, Media Cybernetics, Silver Spring, MD), de către un examen orb în condiții experimentale. În ambele emisfere, câmpurile de numărare laterală au folosit fornicii drept limita lor mediană. Câmpurile de numărare medii au folosit fornicii drept limita lor laterală. Au fost înregistrate numerele de celule Fos-only, hcrt / orx și cele dublu-etichetate atât cu hcrt / orx, cât și cu Fos-ir.

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 1. 

Creșterea imunoreactivității Fos în neuronii hcrt / orx în timpul copulației. A, Neuronul Hcrt / orx (pe dreapta) arătând Fos-ir. Scala barei, 25 μm. B, Microfotografie reprezentativă din câmpul de numărare a dreptului din emisfera stângă a masculului de control noncopulat. Scara de bare (în A), 200 μm. C, Micrograf de la masculul copulat. Scala barei, 200 μm. Săgețile indică neuronii hcrt / orx care prezintă Fos-ir; asteriscurile indică nuclei Fos-ir în celule non-hcrt / orx; fx, fornix.

Experimente de castrare și imunoblotting.

Bărbați adulți (~ 325 g la începutul experimentelor) Șobolanii Long-Evans au fost anesteziați (75 mg / kg ketamină HCI și 10 mg / kg xilazină HCI, ip) și castrați. Animalelor li s-au permis 7, 14 sau 28 d de timp de supraviețuire după o intervenție chirurgicală înainte de a fi anesteziați și perfuzate și creierul lor a fost imunologiat pentru prepro-hcrt / orx ca mai sus (toate grupurile, n = 5). Aceste animale au fost comparate cu un grup de operații fictive care a primit o incizie scrotală sub anestezie identică (n = 5). Shams au fost de asemenea uciși la 28 d. Numărarea celulelor s-a efectuat ca mai sus la același plan coronal sub mărire mai mică.

Într-un experiment separat, 28 d caracterizează (n = 5) și controalele tratate în mod fals (n = 5) au fost profund anesteziate cu pentobarbital de sodiu (100 mg / kg), iar creierul lor a fost îndepărtat și congelat rapid în 2-metilbutan răcit de gheață uscată. Hipotalamii înghețați au fost apoi blocați de două tăieturi coronare, una prin zona preoptică medială (mPOA) doar rostrală la decuzia comisurii anterioare, iar cealaltă prin nucleul hipotalamic posterior doar caudală la divizarea celui de-al treilea ventricul în hipotalamic și adâncituri mamilare. Blocurile au fost apoi tăiate cu două tăieturi sagittale la capătul medial al oricărui peduncul cerebral și printr-o tăietură orizontală la capătul dorsal al adânciturii hipotalamice a celui de-al treilea ventricul. Blocurile de țesuturi au fost apoi omogenizate cu sonicare, proteina a fost extrasă într-un tampon de radioimunoprecipitare modificat, pH 8.0, cu inhibitori de protează (amestec de protează Roche Complete Mini; Roche Diagnostics, Indianapolis, IN), iar extractele au fost alicotate după centrifugare. După determinarea concentrației totale de proteine ​​pentru extracte de la fiecare subiect, 40 μg de proteine ​​de la fiecare animal au fost încărcate în godeuri separate dintr-un gel SDS-PAGE de 15%. Separarea electroforetică, transferul către membranele de difluorură de poliviniliden (Bio-Rad, Hercules, CA) și imunomarcarea au fost efectuate conform metodei Laemmli (Cleveland și colab., 1977), utilizând 1: 1000 din anticorpul anterior anti-prepro-hcrt / orx și ulterior 1: 2000 anti-beta-actina (Sigma) și 1: 5000 IgG anti-iepure de capră (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA ) în lapte praf 5% în soluție salină tamponată cu Tris. Banda de proteine ​​a fost vizualizată prin intermediul unor filme bioMax îmbunătățite (ECL; GE Healthcare, Piscataway, NJ) și Kodak (Rochester, NY). Filmele au fost expuse pentru 40 s și scanate digital, iar densitățile optice au fost măsurate utilizând software-ul ImageJ disponibil publicului. Pentru fiecare animal, s-au determinat valorile densității optice pentru hcrt / orx ca procent din controlul de încărcare β-actină și s-au supus analizei statistice.

Într-un al treilea experiment, șobolanii masculi, așa cum au fost descriși mai sus, au primit operații falsn = 3) sau castrați și injectați la fiecare două zile pentru 28 d cu dihidrotestosteron (500 μg, sc; n = 4), benzoat de estradiol (20 μg, sc; n = 3) sau vehicul cu motor (0.1 μl; n = 3). Ambii hormoni au fost achiziționați de la Sigma. Dozele hormonale au fost alese pentru capacitatea lor în studiile anterioare de a menține copulația în castrați (Putnam și colab., 2005). În ziua 28 după operațiile chirurgicale, animalele au fost ucise și hipotalamii lor au fost blocați pentru măsurarea conținutului prepro-hcrt / orx prin imunoblot occidental așa cum s-a descris mai sus.

Receptorul hormonului steroid și imunohistochimia dublu etichetă hcrt / orx.

Secțiunile de creier din LHA de la masculi adulți intacți sexual invazi (~ 350 g) Șobolanii Long-Evans au fost imunologiați pentru receptorul androgen (AR) (1: 750; n = 6; Santa Cruz Biotechnology) sau receptorul de estrogen (ERα) (1: 2500; n = 9; Santa Cruz Biotechnology) folosind DAB intensificat cu nichel. Ulterior, secțiunile marcate cu AR au fost marcate dublu pentru prepro-hcrt / orx (ca mai sus), iar secțiunile marcate cu ERa au fost dublu colorate pentru prepro-hcrt / orxn = 5). După montare, secțiuni care se potriveau îndeaproape cu unul din cele patru straturi coronale ale LHA în atlasul lui Swanson (2004) au fost desenate manual sub microscop folosind un aparat de fotografiat Lucida atașat, și celulele marcate cu dublă și singură în fiecare secțiune au fost etichetate. Desenele au fost scanate digital și suprapuse pe nivelele atlasului utilizând Adobe (San Jose, CA) Illustrator și fiecare populație de celule a fost cartografiată pe ilustrații atlas (Swanson, 2004). În cazul secțiunilor marcate cu ERα-plus-hcrt / orx, s-au numărat numărul de neuroni hcrt / orx dublu și unic marcat.

Farmacologie și comportamentul copulator.

Bărbați adulți (~ 350 g la începutul experimentelor) Șobolani Long-Evans (n = 9) li s-au dat patru sesiuni de experiență sexuală de 1 oră cu o femeie receptivă sexual în timpul săptămânii înainte de testarea comportamentală. Animalele care nu au reușit să ejaculeze cel puțin o dată în primele 30 de minute ale testului final au fost excluse din experiment. Sesiunile de experiență și testarea comportamentală au fost efectuate sub o lumină incandescentă roșie de 40 W la 2 ore în perioada nocturnă a animalului. Testele de comportament copulator au fost efectuate în cușca de acasă a bărbatului și au durat 30 de minute. Trăsăturile distincte ale comportamentului copulator masculin (adică monturi, intromisiuni și ejaculații) au fost punctate de un observator orb la tratamentele experimentale folosind software de calculator personalizat care a înregistrat frecvența și latența datelor pentru fiecare eveniment comportamental. Cu XNUMX de minute înainte de testarea comportamentală, animalelor li s-a injectat fie OX₁ adversar N- (2-metil-6-benzoxazolil) -N "-1,5-naftiridin-4-il uree (SB 334867) (20 mg / kg, ip) sau vehicul DMSO (0.5 ml / kg). Experimentul a urmat un design simplu contrabalansat în cadrul subiecților, astfel încât cinci animale au primit injecții de droguri în prima zi de testare și restul de patru au primit vehicul. După o perioadă de 48 de ore de spălare a medicamentelor, animalelor tratate cu droguri în prima zi li s-a administrat vehicul și invers.

Electrofiziologie.

Adulți masculi de șobolani Sprague Dawley (~ 350 g) au fost anesteziați cu hidrat de cloral (400 mg / kg, ip pentru inducție; 100 mg · kg^-1 · H^-1 după aceea pentru întreținere) și montat pe un instrument stereotaxic. Craniul și dura peste regiunea brainstem care conține VTA au fost îndepărtate. Fiecare animal a primit mai întâi o infuzie de CSF artificial (aCSF) [0.5 μl / 5 min; de la lambda, anteroposterior, + 2.6 sau + 3.4 mm; mediolateral, ± 0.8 mm; dorsoventral, -7.0 mm; craniu plat conform unui atlas stereotaxic (Paxinos și Watson, 1998)], cu o seringă 32 ga Hamilton (0.5 μl / 5 min) pe o parte a VTA. Apoi, 10 min mai târziu, procedura de eșantionare a celulelor pe șir a fost efectuată pe partea ipsilaterală a VTA. Animalele au primit ulterior o perfuzie cu hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol, n = 4; 1.4 nmol, n = 5; sau 140 nmol, n = 6 dizolvat în aCSF; American Peptide, Sunnyvale, CA) în VTA contralateral înainte de procedura de celule-pe-pistă a fost repetată pe acea parte. Injecțiile au fost contrabalansate prin emisferă și prin locul injectării anterioare sau posterioare. Înregistrările extracelulare unice au fost efectuate cu micropipete din sticlă cu un singur butoi (diametrul exterior 1.5 mm înainte de tragere, World Precision Instruments, Sarasota, FL) umplute cu 2 m NaCl și spate. Impedanța electrodului a variat de la 2 la 4 MΩ la 135 Hz. DA neuronii au fost identificați prin potențialul lor de acțiune extra-negativ pozitiv-negativ, care au adesea o pauză inițială proeminentă / somatodendritică (IS / SD), o durată de acțiune largă, un ritm lent de ardere și un tipar neregulat de spike sau spargereGrace și Bunney, 1983). Pentru a efectua experimentul de celule pe pistă, electrodul de înregistrare a fost trecut sistematic printr-un bloc definit stereotaxic în VTA (2.8-3.4 mm anterior la lambda; 0.6-1.0 mm lateral până la linia mediană; 6.5-8.5 mm sub suprafața creierului) de sase ori. Fiecare neuron DA identificat a fost înregistrat pentru 2-5 min on-line utilizând sistemul de colectare a datelor diagramă (Instrumente AD, Mountain View, CA). Numărul mediu al neuronilor DA activ spontan întâlniți pe calea electrodului de la fiecare animal (celule per cale) a fost indicele pentru activitatea populației neuronale VTA DA. Rata medie de ardere a neuronilor DA a fost determinată de la toți neuronii DA incluși în eșantion de la toate animalele din fiecare grup.

Pentru testarea inactivării depolarizării în grupul 140 nmol hcrt / orx, apomorfina HCI (20 μg / kg, ip; n = 4; Sigma) a fost administrat imediat după finalizarea eșantionării post-hcrt-1 / orx-A. La zece minute după injectarea apomorfinei s-au prelevat șase piese electrod suplimentare în partea laterală a VTA care a primit anterior hcrt-1 / orx-A.

Comportament, imunohistochimie triplă etichetă și număr de celule.

Adulți (~ 300 g) masculi de șobolani Long-Evans li s-au dat patru sesiuni de experiență sexuală 1 h cu o femeie receptivă ca mai sus. Înainte de (1 h) anestezia, perfuzia și prepararea țesutului pentru imunozălțătoare, animalele (n = 6) li sa permis să coopereze la o singură ejaculare. Așa cum am arătat mai sus, animalele montate și implantate aproape imediat și o lăudare medie a ejaculării pentru acest grup au fost 588.50 ± 85.03 s (media ± SEM). Grupul experimental a fost comparat cu controalele experimentate sexual, cărora nu le-a fost acordat accesul la femelele estroase pentru copulare (n = 6). Ca mai sus, testarea a avut loc la 2 ore în perioada nocturnă obișnuită a animalului sub lumină incandescentă roșie. După ce animalele au fost ucise, fixate și secționate cu microtomul rece (ca mai sus), patru secțiuni din fiecare animal reprezentând patru niveluri rostrocaudale de VTA au fost selectate pentru imunohistochimie. Pentru numărul de subiecți (n) utilizate pentru numărul de celule la fiecare nivel, a se vedea Tabelul 4. Secțiunile au fost etichetate pentru Fos (1: 7500; Santa Cruz Biotechnology) cu DAB ca mai sus. Secțiunile au fost apoi marcate pentru prepro-hcrt / orx (1: 500) și hidroxilază tirozină (TH; 1: 2000; Millipore) cu anticorpi secundari fluorescenți conjugați cu cianină (1: 200; Cy3 și, respectiv, Cy2; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Numărul de celule a fost efectuat sub mărire mare (40 ×) pe a Leica (Nussloch, Germania) folosind microscopul DM 4000B Detectiv stereo software (MBF Bioscience, Williston, VT) de către un experimentator orb la condițiile de tratament. Detectiv stereo software-ul a fost folosit pentru a defini un câmp de numărare care a inclus toate celulele DA în fiecare nivel al VTA. La o singură lungime focală în fiecare din cele patru nivele rotrocaudale ale VTA, cinci tipuri de celule au fost etichetate: neuroni TH pozitivi, neuroni TH pozitivi care prezintă Fos-ir, neuroni pozitivi TH prezentând aprecierea directă (pe plasmalemma somatică) prin hcrt / fibrele orxice, neuronii TH pozitivi care prezintă atît aprecierea Fos-ir, cît și hcrt / orxul și, în final, nucleele solo Fos-pozitive nu în neuronii TH.

Analiza datelor.

Grupul înseamnă pentru numărul de celule în experimentul Fos și măsurătorile de densitate optică ale bloturilor Western de la primul astfel de experiment au fost comparate prin eșantioane independente t Test. Matched-eșantioane t testarea a fost efectuată pe mijloace de la OX₁ antagonist experimental comportamental. Numărarea celulelor în experimentele de castrare, triple-etichetare și rata medie de ardere și măsurători pe celule au fost supuse ANOVA.

REZULTATE

Castrarea scade imunoreactivitatea hcrt / orx și proteina în hipotalamus

În comparație cu controalele tratate cu fals, numărul de neuroni hcrt / orx-ir a prezentat o scădere semnificativă a numărului celular 28 d după castrare (Fig. 2A) (F_(3,16) = 7.60; p <0.005). Aceasta reprezintă o scădere cu 31.8% a numărului de celule din populația observată. Post hoc (Tukey) nu a evidențiat diferențe semnificative între numărul de șobolani tratați cu ficuie sau castrați 7 sau 14 d. Analiza imunoblotă ulterioară a prepro-hcrt / orx-ului hipotalamic a determinat o scădere semnificativă a densității optice medii a benzilor hcrt / orx de la castraturi 28 d în comparație cu martorii tratați simulat (Fig. 2B) (t₍₈₎ = 2.99; p <0.05.).

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 2. 

Castrarea scade hcrt / orx-ir la hipotalamus de șobolan mascul. A, Micrografele reprezentative ale neuronilor marcați hcrt / orx într-o emisferă arată scăderi semnificative ale numărului de celule prin 28 d după castrare. Valorile inserției reprezintă numărul mediu de celule pentru ambele emisfere ± SEM; **p <0.005. Bara de scalare, 200 μm; fx, fornix. B, Imunobloturile occidentale arată scăderi semnificative ale prepro-hcrt / orxului hipotalamic al castratului 28 d. Fiecare banda reprezinta semnalul unui animal din fiecare grup. Valorile sunt medii ± unități de densitate optică SEM (od) pentru hcrt / orx față de β-actină; *p <0.05. C, Imunobloturile pentru prepro-hcrt / orx în 28 d castrate arată E₂ pentru a menține conținutul de hcrt / orx al hipotalamelor echivalent cu cel al shams în comparație cu controalele tratate cu ulei. Grupurile cu aceeași literă mică nu sunt semnificativ diferite (p <0.05).

ERα este coextensiv cu hcrt / orx și este coexprimat într-o populație distinctă anatomică a neuronilor hcrt / orx

AR nucleară a fost îndepărtată ventral din populația principală de neuroni hcrt / orx, răspândindu-se mediolateral de la nucleul arcuat la tractul optic. În niciun caz nu s-au găsit AR nucleare și hcrt / orx în același neuron (datele nu sunt prezentate). Deși ERα a prezentat un model similar de distribuție în extensia ventrală a hipotalamusului, etichetarea ERα a fost mai extinsă în nucleul ventromedial. Mai mult dorsal, marcarea ERα a fost găsită în benzile conice de celule care se extindeau medial de la capsula internă sub zona incertă până la hipotalamusul dorsomedial (DMH). Eticheta pentru ERα a fost găsită rar în neuronii hcrt / orx (<1% din populația chestionată). Când s-a observat că ERα se colocalizează cu hcrt / orx, acesta a fost de obicei în neuroni din interiorul sau doar rostral către DMH (Fig. 3). Astfel, deși foarte puțini neuroni hcrt / orx din hipotalamus exprimă ERα, o proporție mare (~ 65%) a celor localizați în sau lângă DMH face (Fig. 3).

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 3. 

ERα este coextensiv cu hcrt / orx. Esțele ERα sunt reprezentate de cercuri închise, neuronii hcrt / orx sunt reprezentați de cercuri deschise, iar celulele ERa plus dublu-etichetate plus celulele hcrt / orx sunt reprezentate de stele. Numerele sunt în milimetri caudale până la bregma. AHN, nucleul anterior hipotalamic; fx, fornix; ot, tractul optic; PVN, nucleul paraventricular; VMH, hipotalam ventromedial; 3v, al treilea ventricul.

Hcrt-1 / orx-A crește VTA DA rata de ardere a neuronului și activitatea populației și induce inactivarea depolarizării

Cea mai mică doză de hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) a crescut viteza medie de ardere a neuronului VTA DA comparativ cu martorii tratați cu vehicul (Fig. 4B,C) (comparație pereche; F_(1,18) = 13.83, p <0.01; după un ANOVA mixt 2 × 3, F_(1,10) = 13.67, p <0.005), dar nicio altă doză de hcrt-1 / orx-A nu a avut acest efect. Această doză pare responsabilă pentru un efect principal semnificativ al hcrt / orx asupra ratei de tragere detectată în ANOVA 2 × 3. A post hoc (Tukey) nu a evidențiat o diferență semnificativă în rata dintre grupurile de control tratați cu aCSF în întreaga doză. Doza 1.4 nmol de hcrt-1 / orx-A a crescut semnificativ activitatea populației neuronale VTA DA (numărul de neuroni activi spontan detectați pe fiecare cale de electrod (Fig. 4D) (comparație pereche, F_(1,24) = 6.42, p <0.05; după o interacțiune semnificativă într-un ANOVA mixt 2 × 3, F_(2,10) = 16.71, p <.001). Cea mai mare doză de hcrt-1 / orx-A testată (140 nmol) a scăzut semnificativ activitatea populației neuronilor DA (celule pe cale) (Fig. 4D) (măsurători repetate cu o singură direcție ANOVA pe doza 140 nmol, F_(2,6) = 12.20; p <0.01). Această scădere a fost inversată prin injecția sistemică de apomorfină (Tukey's post hoc Test).

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 4. 

Hcrt / orx reglează activitatea neuronală VTA DA in vivo. A, Forma de undă a neuronului tip VTA DA care prezintă potențial larg de acțiune caracteristic și o pauză IS / SD. B, Sus, rata de ardere și modelul aceluiași neuron tratat cu vehicul care prezintă activitate tipică de spargere; inferior, un neuron rapid de ardere observat după perfuzia locală a 0.014 nmol de hcrt 1 / orx A (n = 4). C, D, Raportul dozei de hcrt-1 / orx-A infuzat local cu privire la rata de ardere și activitatea populației neuronilor VTA DA. Hcrt-1 / orx-A (1.4 nmol; n = 5) crește activitatea populației. Activitatea scăzută a populației după 140 nmol de hcrt 1 / orx A (n = 4) a fost inversat prin apomorfină sistemică (20 μg / kg). Numărul din fiecare bara indică numărul de neuroni înregistrați. Sunt prezentate mijloacele ± SEM. *p <0.05; **p <0.01.

Discuție

Fos-ir crescut în neuronii hcrt / orx din LHA după copulare sugerează că activarea acestor celule însoțește comportamentul reproductiv al bărbatului (Morgan și Curran, 1991). Aceste date sunt în concordanță cu studiile anterioare cu 2-deoxiglucoză care indică o creștere a activității metabolice în LHA după expunerea la mirosurile femeilor estroase (Orsini și colab., 1985). Acest efect poate reflecta transmisia hcrt / orx îmbunătățită în zone terminale neuronale hcrt / orx, cum ar fi mPOA, în care sa demonstrat că hcrt / orx facilitează comportamentul copular masculin (Gulia și colab., 2003). Inducerea Fos legată de sex în neuronii hcrt / orx este în concordanță cu noțiunea că neuronii hcrt / orx sunt sensibili la întăritorii naturali. Un studiu recent a demonstrat că Fos-ir a crescut în neuronii hcrt / orx de șobolani condiționați să se aștepte la o recompensă alimentară și că această creștere a Fos-ir a fost corelată cu scorul de preferință al animalelor în paradigma condiției de preferință a loculuiHarris și colab., 2005). Activarea neuronilor hcrt / orx poate fi un fenomen legat de recompensă, deoarece studiul de mai sus a arătat o lipsă de creșteri robuste în celulele Fos-ir hcrt / orx la animale expuse unui nou stimul de obiect. Acești autori raportează, de asemenea, procentele neuronilor hcrt / orx care exprimă Fos-ir (15%), 18% și 50% (12%) care sunt compatibile cu cele pe care le raportăm aici (40% % induse de copulare). Aceste observații sugerează că neuronii hcrt / orx sunt activate prin recompense naturale, cum ar fi alimentele și sexul.

Reglementarea estrogenică a hcrt / orx descrisă aici oferă dovezi suplimentare pentru un posibil control hipocretinergic al comportamentului sexual masculin. Este de remarcat faptul că durata de timp a pierderii hcrt / orx raportată aici este compatibilă cu datele clasice de comportament care arată că comportamentul sexual masculin durează câteva săptămâni după declinul castrării și, în plus, că este E₂ mai degrabă decât DHT care este necesară pentru reluarea comportamentului (Hull și colab., 2006). Fără un experiment suplimentar, putem specula doar mecanismele care stau la baza prezenței continue a hcrt / orx în absența E₂. Cea mai simplă explicație ar putea fi aceea că timpul de întârziere la scăderea nivelurilor hcrt / orx reflectă latența unei epuizări cuantificabile cu ușurință în depozitele veziculoase ale transmițătorului. Așa cum este discutat mai jos, absența ER în neuronii hcrt / orx sugerează reglarea expresiei hcrt / orx prin intrări din neuronii care conțin acei receptori. Deoarece sinteza neuropeptidelor (Enyeart și colab., 1987), motilitate (Shakiryanova și colab., 2005) și eliberarea sunt fenomene dependente de activitate (Fulop și colab., 2005), orice postcastrare scade în excitabilitatea neuronală hcrt / orx (Smith și colab., 2002) poate afecta negativ aceste procese, încetinind cinetica eliberării peptidei astfel încât nivele reduse de sinteză să nu fie vizibile de ceva timp. Prin orice mecanism, se pare că acțiunea steroidului este primul element al unei cascade complexe responsabile de menținerea nivelelor bazale ale peptidei.

Așa cum neuronii hcrt / orx par să reglementeze consumul de alimente ca răspuns la factorii umorali legați de echilibrul energetic (Olszewski și colab., 2003; Burdakov și colab., 2006), neuronii hcrt / orx par să fie sensibili la mediul hormonal și pot facilita comportamentul reproductiv într-o manieră similară. Datele prezentate aici sugerează că expresia bazală hcrt / orx este menținută de E₂. La animale gonadal intacte care exprimă complementul completă a hcrt / orx, acest transmițător ar facilita prelucrarea în structuri importante pentru comportamentul sexual masculin și recompensă. Neuronii hcrt / orx se bucură de conexiuni reciproce substanțiale cu zone cum ar fi mPOA, nucleul patului stria terminalis (BNST) și VTA (Peyron și colab., 1998; Sakurai și colab., 2005), despre care se știe că sunt importante pentru exprimarea comportamentului sexual masculin (pentru revizuire, a se vedea Hull și colab., 2006). Scăderea hcrt / orxului după castrare ar fi de așteptat să diminueze o sursă importantă de input excitator la aceste structuri, afectând astfel comportamentul.

Modul în care activarea ER menține expresia bazică hcrt / orx așteaptă un studiu suplimentar; totuși, este probabil să fie condus de aferenți din zonele creierului care exprimă ERα care se proiectează la LHA (Simerly și colab., 1990; Yoshida și colab., 2006), în special acele structuri găsite a avea unele proiecții excitatorii [de exemplu, BNST și mPOA (Georges și Aston-Jones, 2002; Henny și Jones, 2006)]. Nu raportăm nici o colocalizare a AR cu hcrt / orx și, deși câțiva neuroni hcrt / orx au fost imunopozitivi ERα, aceste celule nu sunt suficient de numeroase pentru a explica efectele marcate ale castrării și nici nu se înregistrează cu aceia care se văd că diminuează Conținutul hcrt / orx după castrare (Fig. 2A, 3). De asemenea, raportăm că nucleele ERα-ir și neuronii hcrt / orx sunt adesea juxtapuse, crescând posibilitatea de reglare locală a activității neuronale și a expresiei genice hcrt / orx de către celulele vecine ERa conținând ER. Importanța activității circuitului excitator local de acest tip a fost descrisă în sistemul hcrt / orx (Li și colab., 2002). Totuși, până când experimentele anatomice necesare arată sinapse excitatorii produse de celulele care conțin ERa pe neuronii hcrt / orx, expresia hcrt / orx dependentă de hormon, dependentă de hormon, nu poate fi presupusă. Hcrt expresie fluctuează diurnal (Taheri și colab., 2000), în timpul sarcinii (Kanenishi și colab., 2004) și ca răspuns la diferite manipulări dietetice (Cai și colab., 1999; Griffond și colab., 1999). Mecanismele moleculare care reglementează dinamica hcrt expresia nu a fost caracterizată, urmărind astfel o cale de la nucleu la membrană și numirea moleculelor de semnalizare candidate care pot afecta expresia hcrt / orx este dificilă în acest moment.

Noțiunea că semnalarea hcrt / orx este implicată în întărirea comportamentelor precum sexul este, de asemenea, susținută de date care arată deteriorări ale comportamentului sexual după tratamentul cu OX₁ antagonist SB 334867 (Tabelul 2). La o doză similară cu cea utilizată pentru a bloca reintegrarea indusă de stres prin autoadministrarea cocainei (Boutrel și colab., 2005), SB 334867 a crescut semnificativ latența intromisiei și numărul redus de ejaculări, sugerând că blocarea transmiterii hcrt / orx poate afecta proprietățile stimulative ale femelelor estroase.

DA este un neurotransmițător important pentru recompensă, motivare stimulativă și comportament adaptiv (Berridge și Robinson, 1998; Ikemoto și Panksepp, 1999; Înțelept, 2004). Am observat un puternic efect excitator dependent de doză al hcrt / orx asupra activității neuronului VTA DA. Această constatare susține rolul hcrt / orx în armare și sugerează că sistemul mezolimbic DA este un locus în afara mPOA în care proiecțiile hcrt / orx pot acționa pentru a spori comportamentul sexual masculin. La cea mai mică doză testată (0.014 nmol), hcrt / orx a crescut rata de ardere fără a afecta activitatea populației (celule / cale) (Fig. 4C). La doza intermediară (1.4 nmol), activitatea populațională a neuronilor DA a fost crescută, indicând faptul că neuronii hiperpolarizați anterior au fost activi (Fig. 4D). La doza cea mai mare (140 nmol), activitatea populației neuronilor VTA DA a scăzut. Interesant, reducerea indusă de hcrt / orx în activitatea populației neuronului VTA DA a fost inversată prin administrarea acută a agonistului DA apomorfină (Fig. 4D). La animalele normale, apomorfina hiperpolarizează neuronii DA prin activarea autoreceptorilor și reducerea ratei lor de ardere și a activității populației. Cu toate acestea, după tratamentul antipsihotic cronic sau tratamentul repetat cu medicamente de abuz, apomorfina poate inversa scăderea activității populației induse de medicament (Grace și colab., 1997; Shen și Choong, 2006). Apomorfina este considerată a inversa inactivarea depolarizării prin repolarizarea suficientă a celulelor supraexcitate pentru a relua arderea. Împreună, aceste date sugerează că hcrt / orx exercită un efect excitator dependent de doză asupra neuronilor VTA DA, în conformitate cu precedentele in vitro muncă (Korotkova și colab., 2003).

Importanța căilor descendente de la LHA la VTA a fost explorată într-un număr de experimente (Bielajew și Shizgal, 1986; Shizgal, 1989; You et al., 2001). Aceste date sugerează că creșteri ale NAc DA în timpul comportamentelor motivate hipotalamic cum ar fi copularea (Pfaus și colab., 1990; Wenkstern și colab., 1993) sau hrănire (Hernandez și Hoebel, 1988; Rada și colab., 2005) se pot baza pe aceste proiecții descendente. Astfel de proiecții conțin hcrt / orx este susținută de experimente în care efluxul NAc DA este văzut că crește după injectarea intra-VTA a hcrt / orxNarita și colab., 2006). În cadrul hipotalamusului, serotonina [5-hidroxitriptamina (5-HT)] poate hiperpolariza neuronii hcrt / orx în LHA (Li și colab., 2002). Inhibitorii selectivi de reabsorbție a serotoninei sau 5-HT în sine, dializați invers în LHA, în apropierea populației principale a celulelor care exprimă hcrt / orx, reduc eliberarea NAc DA bazată și feminină și împiedică copulareaLorrain și colab., 1997, 1999). În lumina datelor prezentate mai sus care arată activarea neuronilor hcrt / orx în timpul copulației și a neuronilor VTA DA de către hcrt / orx, susținem că proiecțiile descendente hcrt / orx la VTA ar putea media eliberarea NAc DA legată de sex. Mai mult, inhibarea acestor proiecții prin intravenous LHA 5-HT poate explica efectul inhibitor al 5-HT asupra eliberării NAc DA și a comportamentului sexual.

Un substrat anatomic pentru interacțiunile hcrt / orx-DA este evident în constatarea noastră că neuronii VTA TH-pozitivi sunt inervați de sistemul hcrt / orx și prezintă Fos-ir crescut cu expunerea la stimulente recompensatoare cum ar fi copulațiaFig. 5, Tabelul 4). Acest efect a arătat atât relevanța comportamentală, cât și specificitatea spațială, deoarece inducția Fos în neuronii TH hcrt / orx a fost detectată numai în VTA anterioară de copulație a animalelor. Este posibil să nu mai remarcăm că acest model de activare apare în această porțiune a VTA, deoarece celulele DA sunt doar caudale pentru populația principală a neuronilor hcrt / orx, ale căror fibre descendente traversează această zonă înainte de a se debpara la ținte mai îndepărtate în brainstemPeyron și colab., 1998).

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 5. 

Copularea determină inducerea Fos-ir în neuronii VTA DA hcrt / orx. A, Micrografe care prezintă TH, hcrt / orx și etichetarea Fos în VTA. Săgețile denotă neuronii TH pozitivi cu apariții hcrt / orx; asteriscurile marchează neuronii dublu etichetați fără apostolii. Scala barei, 45 μm. B, Detaliu a neuronilor TH pozitivi cu săgeți indicând situsuri de bouton hcrt / orx în apoziție. C, Secțiuni coronale care prezintă nivele rostrocaudale de VTA utilizate în numărare (întunecate în întuneric). Numerele din partea stângă sus a fiecărei secțiuni sunt exprimate în milimetri din bregma. Numerele din partea dreaptă sus sunt medii ± SEM estimări ale densității celulare la acel nivel. Caseta indică zona micrografelor din A.

Aceste date sugerează o cale nouă prin care steroizii gonadali pot afecta o intrare hipotalamică la sistemele DA implicate în comportamentul motivat (Fig. 6). Ele adaugă, de asemenea, un comportament sexual la lista tot mai mare a comportamentelor care sunt reglementate de hcrt / orx, incluzând excitația, comportamentul ingerator și căutarea de droguri.

 

Vedeți versiunea mai mare: 

• În această pagină
• Într-o fereastră nouă
• Descărcați ca prezentare PowerPoint

Figura 6. 

Model pentru reglarea hcrt / orxului de steroizi gonadali și VTA DA de către hcrt / orx. Estradiolul, sintetizat din testosteron gonadal de aromatază, acționează asupra neuronilor care conțin ERa în BNST, mPOA și LHA. Aceste structuri se proiectează la neuronii hcrt / orx hipotalamici. Proiecțiile excitatorii din aceste structuri pot influența activitatea de expresie neuronală și genetică a hcrt / orx într-o manieră sensibilă la steroizi. Proiecțiile Hcrt / orx la VTA sporesc activitatea neuronală DA midbrain în timpul comportamentului sexual masculin. Acest efect poate fi blocat prin perfuzii intra-LHA de 5-HT care inhibă activitatea hcrt / orx, afectând comportamentul sexual și eliberarea NAc DA.

Note de subsol

• A primit aprilie 21, 2006.
• Revizia a fost primită în ianuarie 23, 2007.
• Acceptat în februarie 8, 2007.

• Această lucrare a fost susținută de Granturile din Statele Unite pentru servicii de sănătate publică MH073314 (JWM), MH40826 și MH01714 (EMH) și AA12435 (R.-YS). Îi mulțumim Dr. Samir Haj-Dahmane pentru sfatul său util și Dr. Zuoxin Wang pentru echiparea echipamentelor de microscopie.

• Corespondența trebuie adresată lui John Muschamp, Departamentul de Psihologie, Universitatea de Stat din Florida, Tallahassee, FL 32306-1270. [e-mail protejat]

Referinte

1. ↵
   1. Berridge KC,
   2. Robinson TE

   (1998) Care este rolul dopaminei în recompensă: impactul hedonic, învățarea recompensă sau caracterul stimulativ? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

   CrossRefMedlineGoogle Academic
2. ↵
   1. Bielajew C,
   2. Shizgal P

   (1986) Dovezi care implică fibre descendente în autostimularea mănunchiului median de antebraț. J Neurosci 6: 919-929.

   Abstract
3. ↵
   1. Borgland SL,
   2. Taha SA,
   3. Sarti F,
   4. Domeniile HL,
   5. Bonci A

   (2006) Orexina A din VTA este critică pentru inducerea plasticității sinaptice și a sensibilizării comportamentale la cocaină. Neuron 49: 589-601.

   CrossRefMedlineGoogle Academic
4. ↵
   1. Boutrel B,
   2. Kenny PJ,
   3. Specio SE,
   4. Martin-Fardon R,
   5. Markou A,
   6. Koob GF,
   7. de Lecea L

   (2005) Rolul pentru ipocretin în medierea restabilirii induse de stres a comportamentului care caută cocaina. Proc Natl Acad Sci SUA 102: 19168-19173.

   Rezumat / Text complet gratuit
5. ↵
   1. Burdakov D,
   2. Jensen LT,
   3. Alexopoulos H,
   4. Williams RH,
   5. Fearon IM,
   6. O'Kelly I,
   7. Gerasimenko O,
   8. Fugger L,
   9. Verkhratsky A

   (2006) Canalele K + ale porilor tandemului mediază inhibarea neuronilor de orexină prin glucoză. Neuron 50: 711-722.

   CrossRefMedlineGoogle Academic
6. ↵
   1. Caggiula AR,
   2. Hoebel BG

   (1966) "Site-ul de recompensare-recompensare" în hipotalamusul posterior. Ştiinţă 153: 1284-1285.

   Rezumat / Text complet gratuit
7. ↵
   1. Cai XJ,
   2. Widdowson PS,
   3. Harrold J,
   4. Wilson S,
   5. Buckingham RE,
   6. Arch JR,
   7. Tadayyon M,
   8. Clapham JC,
   9. Wilding J,
   10. Williams G

   (1999) Expresia hipotalamică a orexinei: modularea prin glucoza din sânge și hrănirea. Diabet 48: 2132-2137.

   Abstract
8. ↵
   1. Cleveland DW,
   2. Fischer SG,
   3. Kirschner MW,
   4. Laemmli UK

   (1977) Cartografierea peptidelor prin proteoliză limitată în dodecil sulfat de sodiu și analiză prin electroforeză în gel. J Biol Chem 252: 1102-1106.

   Rezumat / Text complet gratuit
9. ↵
   1. de Lecea L,
   2. Kilduff TS,
   3. Peyron C,
   4. Gao X,
   5. Foye PE,
   6. Danielson PE,
   7. Fukuhara C,
   8. Battenberg EL,
   9. Gautvik VT,
   10. Bartlett FS II.,
   11. Frankel WN,
   12. van den Pol AN,
   13. Bloom FE,
   14. Gautvik KM,
   15. Sutcliffe JG

   (1998) Hipocretinele: peptide specifice hipotalamusului cu activitate neuroexcitatoare. Proc Natl Acad Sci SUA 95: 322-327.

   Rezumat / Text complet gratuit
10. ↵
    1. DiLeone RJ,
    2. Georgescu D,
    3. Nestler EJ

    (2003) Neuropeptide hipotalamice laterale în recompensă și dependență de droguri. Life Sci 73: 759-768.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
11. ↵
    1. Enyeart JJ,
    2. Sheu SS,
    3. Hinkle PM

    (1987) Modulatoarele de dihidropiridină ale canalelor sensibile la tensiune Ca2 + reglează în mod specific producția de prolactină de către celulele tumorale ale glandei pituitare GH4C1. J Biol Chem 262: 3154-3159.

    Rezumat / Text complet gratuit
12. ↵
    1. Espana RA,
    2. Valentino RJ,
    3. Berridge CW

    (2003) Imunoreactivitatea Fos în neuronii care exprimă receptori de hipocretin și ipocretin-1: efectele trezirii spontane diurne și nocturne, a stresului și a hipocretinului-1. Neuroştiinţe 121: 201-217.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
13. ↵
    1. Fadel J,
    2. Deutch AY

    (2002) Substraturi anatomice ale interacțiunilor de orexin-dopamină: proiecții hipotalamice laterale în zona tegmentală ventrală. Neuroştiinţe 111: 379-387.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
14. ↵
    1. Fulop T,
    2. Radabaugh S,
    3. Smith C

    (2005) Eliberarea diferențială a emițătorului dependentă de activitate în celulele cromafinelor suprarenale de șoarece. J Neurosci 25: 7324-7332.

    Rezumat / Text complet gratuit
15. ↵
    1. Fulton S,
    2. Woodside B,
    3. Shizgal P

    (2000) Modularea circuitelor de recompensare a creierului prin leptină. Ştiinţă 287: 125-128.

    Rezumat / Text complet gratuit
16. ↵
    1. Georges F,
    2. Aston-Jones G

    (2002) Activarea celulelor din zona tegmentală ventrală de către nucleul patului stria terminalis: o intrare nouă a aminoacidului excitator la neuronii dopaminei midbrain. J Neurosci 22: 5173-5187.

    Rezumat / Text complet gratuit
17. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS

    (1983) Electrofiziologia intracelulară și extracelulară a neuronilor dopaminergici nigrali. 1. Identificarea și caracterizarea. Neuroştiinţe 10: 301-315.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
18. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS,
    3. Moore H,
    4. Todd CL

    (1997) Blocul de depolarizare a celulelor dopamină ca model pentru acțiunile terapeutice ale medicamentelor antipsihotice. Tendințe Neurosci 20: 31-37.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
19. ↵
    1. Griffond B,
    2. Risold PY,
    3. Jacquemard C,
    4. Colard C,
    5. Fellmann D

    (1999) Hipoglicemia indusă de insulină mărește mRNA preprohypocretin (orexin) în zona hipotalamică laterală a șobolanului. Neurosci Lett 262: 77-80.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
20. ↵
    1. Gulia KK,
    2. Mallick HN,
    3. Kumar VM

    (2003) Aplicația Orexin A (ipocretin-1) la zona preoptică mediană potențează comportamentul sexual masculin la șobolani. Neuroştiinţe 116: 921-923.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
21. ↵
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2006) Arousal și recompensă: o dihotomie în funcția de orexină. Tendințe Neurosci 29: 571-577.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
22. ↵
    1. Harris GC,
    2. Wimmer M,
    3. Aston-Jones G

    (2005) Un rol pentru neuronii laterali de hipotalamică de orexină în căutare de recompense. Natură 437: 556-559.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
23. ↵
    1. Henny P,
    2. Jones BE

    (2006) Inovarea neuronilor de orexină / ipocretină de către terminalele GABAergic, glutamatergice sau colinergice bazale ale creierului de mână, evidențiate prin imunozălțarea pentru transportor vezicular presinaptic și proteine ​​postsynaptice de schele. J. Comp. Neurol 499: 645-661.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
24. ↵
    1. Hernandez L,
    2. Hoebel BG

    (1988) Recompensa alimentară și cocaina măresc dopamina extracelulară în nucleul accumbens măsurată prin microdializă. Life Sci 42: 1705-1712.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
25. ↵
    1. Hoebel BG

    (1969) Hrănire și auto-stimulare. Ann NY Acad Sci 157: 758-778.

    MedlineGoogle Academic
26. ↵
    1. Hull EM,
    2. Lemn RI,
    3. McKenna KE

    (2006) în fiziologia reproducerii Knobil și Neill, Neurobiologia comportamentului sexual masculin, ed Neill JD (Elsevier, New York), Ed 3, pp 1729-1824.

    Google Academic
27. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Panksepp J

    (1999) Rolul nucleului accumbens dopamină în comportamentul motivat: o interpretare unificatoare, cu referire specială la căutarea de recompense. Brain Res Brain Res Rev 31: 6-41.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
28. ↵
    1. Kanenishi K,
    2. Ueno M,
    3. Momose S,
    4. Kuwabara H,
    5. Tanaka H,
    6. Sato C,
    7. Kobayashi T,
    8. Hino O,
    9. Sakamoto H,
    10. Hata T

    (2004) Exprimarea mRNA de prepro-orexin la creierul de șobolan este crescută în timpul sarcinii. Neurosci Lett 368: 73-77.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
29. ↵
    1. Korotkova TM,
    2. Sergeeva OA,
    3. Eriksson KS,
    4. Haas HL,
    5. Brown RE

    (2003) Excizia neuronilor dopaminergici și nondopaminergici ventriculari ventrali cu orexine / ipocretinuri. J Neurosci 23: 7-11.

    Rezumat / Text complet gratuit
30. ↵
    1. Kotz CM

    (2006) Integrarea hranei și activității fizice spontane: rolul orexinei. Physiol Behav 88: 294-301.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
31. ↵
    1. Li Y,
    2. Gao XB,
    3. Sakurai T,
    4. van den Pol AN

    (2002) Hypocretin / orexin excită neuronii hipocretinelor printr-un neuron local de glutamat - un mecanism potențial de orchestrare a sistemului de excitație hipotalamic. Neuron 36: 1169-1181.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
32. ↵
    1. Lorrain DS,
    2. Matuszewich L,
    3. Friedman RD,
    4. Hull EM

    (1997) Serotonina extracelulară în zona hipotalamică laterală este crescută în timpul intervalului postejaculator și afectează copularea la șobolanii masculi. J Neurosci 17: 9361-9366.

    Rezumat / Text complet gratuit
33. ↵
    1. Lorrain DS,
    2. Riolo JV,
    3. Matuszewich L,
    4. Hull EM

    (1999) Serotonina hipotalamică laterală inhibă nucleul accumbens dopamina: implicații pentru sațietate sexuală. J Neurosci 19: 7648-7652.

    Rezumat / Text complet gratuit
34. ↵
    1. Mileykovskiy BY,
    2. Kiyashchenko LI,
    3. Siegel JM

    (2005) Corelațiile comportamentale ale activității în neuronii hipocretin / orexin identificați. Neuron 46: 787-798.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
35. ↵
    1. Mochizuki T,
    2. Crocker A,
    3. McCormack S,
    4. Yanagisawa M,
    5. Sakurai T,
    6. Scammell TE

    (2004) Instabilitatea de stare a comportamentului la șoarecii cu șoareci de tip orexin. J Neurosci 24: 6291-6300.

    Rezumat / Text complet gratuit
36. ↵
    1. Morgan JI,
    2. Curran T

    (1991) Cuplaj de stimulare-transcripție în sistemul nervos: implicarea proto-oncogene fos și jun inductibile. Annu Rev Neurosci 14: 421-451.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
37. ↵
    1. Nakamura T,
    2. Uramura K,
    3. Nambu T,
    4. Yada T,
    5. Goto K,
    6. Yanagisawa M,
    7. Sakurai T

    (2000) Hiperlocomoția indusă de orexină și stereotipia sunt mediate de sistemul dopaminergic. Brain Res 873: 181-187.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
38. ↵
    1. Nambu T,
    2. Sakurai T,
    3. Mizukami K,
    4. Hosoya Y,
    5. Yanagisawa M,
    6. Du-te la K

    (1999) Distribuția neuronilor de orexină în creierul adult de șobolan. Brain Res 827: 243-260.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
39. ↵
    1. Narita M,
    2. Nagumo Y,
    3. Hashimoto S,
    4. Khotib J,
    5. Miyatake M,
    6. Sakurai T,
    7. Yanagisawa M,
    8. Nakamachi T,
    9. Shioda S,
    10. Suzuki T

    (2006) Implicarea directă a sistemelor orexinergice în activarea căii dopaminergice mezolimbice și a comportamentelor asociate induse de morfină. J Neurosci 26: 398-405.

    Rezumat / Text complet gratuit
40. ↵
    1. Olszewski PK,
    2. Li D,
    3. Grace MK,
    4. Billington CJ,
    5. Kotz CM,
    6. Levine AS

    (2003) Baza neurală a efectelor orexigene ale ghrelinului care acționează în hipotalamus lateral. peptide 24: 597-602.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
41. ↵
    1. Orsini JC,
    2. Jourdan F,
    3. Cooper HM,
    4. Monmaur P

    (1985) Influența mirosurilor feminine asupra hipotalamusului lateral la șobolanul mascul. Analiza deoxiglucoză semicantitativă. Physiol Behav 35: 509-516.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
42. ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (1998) Creierul șobolanului în coordonate stereotaxice (Academic, New York), Ed 4.

    Google Academic
43. ↵
    1. Peyron C,
    2. Tighe DK,
    3. van den Pol AN,
    4. de Lecea L,
    5. Heller HC,
    6. Sutcliffe JG,
    7. Kilduff TS

    (1998) Neuroni care conțin ipocretin (orexin) proiect pentru mai multe sisteme neuronale. J Neurosci 18: 9996-10015.

    Rezumat / Text complet gratuit
44. ↵
    1. Pfaus JG,
    2. Damsma G,
    3. Nomikos GG,
    4. Wenkstern DG,
    5. Blaha CD,
    6. Phillips AG,
    7. Fibiger HC

    (1990) Comportamentul sexual îmbunătățește transmiterea centrală a dopaminei la șobolanii masculi. Brain Res 530: 345-348.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
45. ↵
    1. Putnam SK,
    2. Sato S,
    3. Riolo JV,
    4. Hull EM

    (2005) Efectele metaboliților de testosteron asupra copulației, dopaminei medii pre-dopatice și imunoreactivității NOS la șobolanii masculi castrați. Hormonul Behav 47: 513-522.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
46. ↵
    1. Rada P,
    2. Avena NM,
    3. Hoebel BG

    (2005) Zgomotul zilnic pe zahăr eliberează în mod repetat dopamină în cochilia accumbens. Neuroştiinţe 134: 737-744.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
47. ↵
    1. Rolls ET,
    2. Burton MJ,
    3. Mora F

    (1980) Analiza neurofiziologică a recompensei stimulării creierului în maimuță. Brain Res 194: 339-357.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
48. ↵
    1. Sakurai T,
    2. Amemiya A,
    3. Ishii M,
    4. Matsuzaki I,
    5. Chemelli RM,
    6. Tanaka H,
    7. Williams SC,
    8. Richardson JA,
    9. GP Kozlowski,
    10. Wilson S,
    11. Arch JR,
    12. Buckingham RE,
    13. Haynes AC,
    14. Carr SA,
    15. Annan RS,
    16. McNulty DE,
    17. Liu WS,
    18. Terrett JA,
    19. Elshourbagy NA,
    20. Bergsma DJ,
    21. et al.

    (1998) Orexinele și receptorii de orexină: o familie de neuropeptide hipotalamice și receptori cuplați cu proteine ​​G care reglează comportamentul alimentar. Celulă 92: 573-585.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
49. ↵
    1. Sakurai T,
    2. Nagata R,
    3. Yamanaka A,
    4. Kawamura H,
    5. Tsujino N,
    6. Muraki Y,
    7. Kageyama H,
    8. Kunita S,
    9. Takahashi S,
    10. Goto K,
    11. Koyama Y,
    12. Shioda S,
    13. Yanagisawa M

    (2005) Introducerea neuronilor de orexină / ipocretină dezvăluită de un marker genetic codificat la șoareci. Neuron 46: 297-308.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
50. ↵
    1. Saper CB,
    2. Scammell TE,
    3. Lu J

    (2005) Reglarea hipotalamică a somnului și a ritmurilor circadiene. Natură 437: 1257-1263.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
51. ↵
    1. Sato S,
    2. Braham CS,
    3. Putnam SK,
    4. Hull EM

    (2005) Sintaza oxidului nitric neuronal și interacțiunea cu steroizi gonadali în MPOA la șobolanii masculi: co-localizarea și restabilirea indusă de testosteron a copulației și imunoreactivitatea nNOS. Brain Res 1043: 205-213.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
52. ↵
    1. Shakiryanova D,
    2. Tully A,
    3. Hewes RS,
    4. Deitcher DL,
    5. Levitan ES

    (2005) Eliberarea dependentă de activitate a veziculelor neuropeptidice sinaptice. Nat Neurosci 8: 173-178.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
53. ↵
    1. Shen RY,
    2. Choong KC

    (2006) Diferite adaptări în neuronii dopaminergici din zona tegmentală ventrală la șobolanii cu control și expuși la etanol după tratamentul cu metilfenidat. Biol Psihiatrie 59: 635-642.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
54. ↵
    1. Shizgal P

    (1989) Spre o analiză celulară a autostimulării intracraniene: contribuții ale studiilor de coliziune. Neurosci Biobehav Rev 13: 81-90.

    MedlineGoogle Academic
55. ↵
    1. Siegel JM

    (2004) Hypocretin (orexin): rol în comportamentul normal și neuropatologie. Annu Rev Psychol 55: 125-148.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
56. ↵
    1. Simplu RB,
    2. Chang C,
    3. Muramatsu M,
    4. Swanson LW

    (1990) Distribuția celulelor care conțin ARN-receptor de androgen și receptor de estrogen în creierul de șobolan: un studiu de hibridizare in situ. J. Comp. Neurol 294: 76-95.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
57. ↵
    1. Smith MD,
    2. Jones LS,
    3. Wilson MA

    (2002) Diferențele sexuale în excitabilitatea plantelor hipocampale: rolul testosteronului. Neuroştiinţe 109: 517-530.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
58. ↵
    1. Sutcliffe JG,
    2. de Lecea L

    (2002) Hipocretinele: stabilirea pragului de excitare. Nat Rev Neurosci 3: 339-349.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
59. ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Hărți Brain III: structura creierului de șobolan (Elsevier, New York), Ed 3.

    Google Academic
60. ↵
    1. Swanson LW,
    2. Sanchez-Watts G,
    3. Watts AG

    (2005) Compararea modelelor de exprimare a hormonului de concentrare a melaninei și a modelelor de expresie ale mRNA ipocretin / orexin într-o nouă schemă de parcelare a zonei hipotalamice laterale. Neurosci Lett 387: 80-84.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
61. ↵
    1. Taheri S,
    2. Sunter D,
    3. Dakin C,
    4. Moyes S,
    5. Sigiliul L,
    6. Gardiner J,
    7. Rossi M,
    8. Ghatei M,
    9. Bloom S

    (2000) Variația diurnă a imunoreactivității orexinei A și a ARNm prepro-orexinei în sistemul nervos central al șobolanului. Neurosci Lett 279: 109-112.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
62. ↵
    1. Thorpe AJ,
    2. Cleary JP,
    3. Levine AS,
    4. Kotz CM

    (2005) Orexina A administrată central mărește motivația pentru peleții dulci la șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 182: 75-83.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
63. ↵
    1. Vaughan E,
    2. Fisher AE

    (1962) Comportamentul sexual al bărbatului indus de stimularea electrică intracraniană. Ştiinţă 137: 758-760.

    Rezumat / Text complet gratuit
64. ↵
    1. Wenkstern D,
    2. Pfaus JG,
    3. Fibiger HC

    (1993) Transmiterea de dopamină crește în nucleul accumbens al șobolanilor masculi în timpul primei expuneri la șobolani de sex feminin receptivi sexual. Brain Res 618: 41-46.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
65. ↵
    1. Wise RA

    (2004) Dopamina, învățarea și motivația. Nat Rev Neurosci 5: 483-494.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
66. ↵
    1. Yoshida K,
    2. McCormack S,
    3. Espana RA,
    4. Crocker A,
    5. Scammell TE

    (2006) Aferentă neuronilor de orexin ai creierului de șobolan. J. Comp. Neurol 494: 845-861.

    CrossRefMedlineGoogle Academic
67. ↵
    1. Sunteți ZB,
    2. Chen YQ,
    3. Wise RA

    (2001) Eliberarea de dopamină și glutamat în nucleul accumbens și zona tegmentală ventrală a șobolanului după autostimularea hipotalamică laterală. Neuroştiinţe 107: 629-639.

    CrossRefMedlineGoogle Academic

articole care citeaza acest articol

• Ameliorarea completă a tratamentului refractar al sindromului SUNCT primar cu citrat de clomifen (un modulator medicinal hipotalamic al creierului profund) Cefalalgie, 1 Octombrie 2014, 34 (12): 1021-1024
  • Abstract
  • Full text
  • Text integral (PDF)
• Hypocretin (orexin) facilitează recompensarea prin atenuarea efectelor antiretrate ale cotrobinatorului său din zona tegmentală ventrală PNAS, 22 aprilie 2014, 111 (16): E1648-E1655
  • Abstract
  • Full text
  • Text integral (PDF)
• Orexin / Hypocretin Modulează răspunsul Neuronilor Ventrali Tegmentali ai Dopaminei la Activarea Prefrontală: Influențe Diurne Journal of Neuroscience, 17 Noiembrie 2010, 30 (46): 15585-15599
  • Abstract
  • Full text
  • Text integral (PDF)
• Orexin A / Hypocretin-1 promovează selectiv motivația pentru armături pozitive Journal of Neuroscience, 9 septembrie 2009, 29 (36): 11215-11225
  • Abstract
  • Full text
  • Text integral (PDF)
• O cascadă de kinază MAP stimulată de orexină este activată prin căi multiple de semnalizare a proteinei G în celulele adrenocorticale H295R umane: roluri diferite pentru orexinele A și B Jurnalul de Endocrinologie, 1 August 2009, 202 (2): 249-261
  • Abstract
  • Full text
  • Text integral (PDF)