Receptorii CRF din nucleul accumbens modulează preferința partenerului în prerile voles (2007)

Hormonul Behav. Manuscris de autor; disponibil în PMC Dec 10, 2007.

Publicat în formularul final modificat ca:

PMCID: PMC2128037

NIHMSID: NIHMS22254

Versiunea editată finală a acestui articol este disponibilă la Hormonul Behav

Vezi alte articole din PMC că citează articolul publicat.

Du-te la:

Abstract

Dovezi recente sugerează un rol al factorului de eliberare a corticotropinei (CRF) în reglarea legării perechilor în prerile voles. Am arătat anterior că speciile de specii monogame și non-monogame au distribuții dramatic diferite ale receptorului CRF tip 1 (CRF1) și receptorul CRF tip 2 (CRF2) în creier, și că CRF1 și CRF2 densitățile receptorilor din nucleul accumbens (NAcc) sunt corelate cu organizarea socială. Prairie monogamă și păstăi de pin au niveluri semnificativ mai mici ale receptorului CRF tip 1 (CRF1) și niveluri semnificativ mai mari de tip 2 (CRF2), în NAcc decât lunca non-monogamă și volei montani. Aici, raportăm că microinjecțiile CRF direct în NAcc accelerează formarea preferinței partenerului la preleuri de sex masculin. Controlul injecțiilor de CSF în NAcc și CRF în caudate-putamen nu a facilitat preferința partenerului. De asemenea, injecțiile cu CRF în NAcc ale volesului neonogamic nu au facilitat, de asemenea, preferința partenerului. La prairie voles, acest efect de facilitare a CRF a fost blocat prin co-injectarea fie a CRF1 sau CRF2 receptori în NAcc. Colorație imunocitochimică pentru CRF și Urocortin-1 (Ucn-1), doi liganzi endogeni pentru CRF1 sau CRF2 receptori din creier, a arătat că în NAcc au fost prezente fibre imunoreactive CRF, dar nu Ucn-1. Aceasta susține ipoteza că eliberarea CRF locală în NAcc ar putea activa CRF1 sau CRF2 receptori din regiune. Luate impreuna, rezultatele noastre releva un rol nou pentru sistemele CRC accumbal in comportamentul social.

Cuvinte cheie: nucleul accumbens, atașamentul, CRF1, CRF2, factorul de eliberare a corticotropinei, hormonul eliberator de corticotrofină, vaccinul, receptorii neuropeptidici, legătura perechilor, comportamentul social, monogamia, diferențele de specii

Sistemul de factor de eliberare a corticotropinei (CRF) este implicat în neurobiologia care stă la baza stresului și a anxietății, dar este mult mai puțin cunoscut despre rolul său în comportamentul social. Microorganismele rozătoare prezintă diferite organizații sociale și oferă astfel o abordare comparativă excelentă în studiul neurobiologiei comportamentului social (Young și Wang, 2004). Prairie (Microtus ochrogaster) și pinii voles (Microtus pinetorum) sunt monogame; cuplurile adulte formează legături perene selective de lungă durată în câmp și în laborator (Getz, Carter și Gavish, 1981; Salo, Shapiro și Dewsbury, 1993). În schimb, lunca strâns legată (Microtus pennsylvanicus) și voles montane (Microtus montanus) sunt promiscuite și solitare (Gruder-Adams și Getz, 1985; Shapiro și Dewsbury, 1990). Studiile anterioare au arătat că distribuția cerebrală a receptorilor neuropeptidici pentru oxitocină și vasopresină pare a fi responsabilă de diferențele dintre specii în organizarea socială (Insel și Shapiro, 1992; Insel, Wang și Ferris, 1994; Lim, Wang, Olazabal, Ren, Terwilliger și Young, 2004b). Cu toate acestea, dovezi mai recente sugerează că un alt sistem de neuropeptide, CRF, pare, de asemenea, să moduleze legarea perechilor în prairie voles (DeVries, Guptaa, Cardillo, Cho și Carter, 2002).

Există relativ puține studii care examinează rolul hormonilor de stres în comportamentul social. Un studiu a constatat că administrarea corticosteronei exogene la prerile de sex masculin prerie a facilitat formarea legăturilor de perechi cu o femeie nouă (DeVries, DeVries, Taymans și Carter, 1996). Un studiu ulterior a constatat că CRF a preferat partenerul preferat de intracerebroventricular (icv) în prerile de sex masculin, chiar și la doze extrem de scăzute care nu păreau să afecteze activitatea locomotorie sau comportamentul asemănător cu anxietatea (DeVries și colab., 2002). Mai mult, preferința partenerului a fost blocată prin administrarea ICV a CRF alfa-helical care blochează neselectiv receptorii CRF din creier (DeVries și colab., 2002). Aceste date sugerează că CRF poate juca un rol în formarea legăturilor perechi prin mecanisme independente de anxietate prin implicarea receptorilor creierului care acționează central. Cu toate acestea, CRF infuzat icv ar putea acționa potențial asupra oricărui număr de regiuni ale creierului pentru a facilita preferința partenerului și în prezent nu se cunoaște care sunt regiunile creierului implicate în mod specific.

Deoarece sistemul CRF a fost implicat în reglarea formării legăturilor perechi, am prezis că circuitele neuronale pentru acest sistem ar fi diferite între speciile monogame și non-monogame. Am demonstrat anterior că, deși distribuțiile CRN mRNA și peptide apar foarte conservate în rândul speciilor de specii, distribuțiile tipurilor de receptor CRF 1 și 2 (CRF1 și CRF2) diferă dramatic între creier în patru specii de specii care prezintă diferite organizații sociale (Lim, Nair și Young, 2005; Lim, Tsivkovskaia, Bai, Young și Ryabinin, 2006). Legarea receptorului pare să se coreleze cu structura socială monogamă în mai multe regiuni ale creierului; totuși, numai nucleul accumbens (NAcc) segregat în mod constant atât cu specii monogame de vlăcine, cât și cu specii de volei non-monogame. Prairie monogamă și păstăi de pin au niveluri semnificativ mai mici ale receptorului CRF tip 1 (CRF 1) și niveluri semnificativ mai mari de tip 2 (CRF2), în NAcc decât lunca non-monogamă și voele montane (Lim și colab., 2005).

Bazat pe studiile noastre neuroanatomice care demonstrează diferențele de specii în CRF1 și CRF2 densități în NAcc, am presupus că acțiunea CRF în cadrul NAcc, în special, a fost critică pentru comportamentul social monogamic în prerile voles. În primul rând, am determinat dacă CRF injectat direct în NAcc poate facilita formarea preferințelor partenerului după un timp de coabitare abreviat cu partenerul. Apoi, am efectuat experimentul identic în voile non-monogame de luncă. Apoi, am manipulat CRF1 și CRF2 în NAcc utilizând antagoniști farmacologici pentru a determina contribuția lor relativă la formarea preferată a partenerului CRF. În cele din urmă, prezentăm dovezi pentru colorarea imunoreactivă a doi liganzi endogeni pentru CRF1 și CRF2 receptorii din creier, CRF- și Urocortin-1 (Ucn-1), în NAcc în prairie voles. Rezultatele acestor studii demonstrează pentru prima dată că CRF, care acționează în cadrul NAcc, poate promova atașamentul social și, în plus, că CRF1 și CRF2 receptorii sunt implicați în acest proces.

METODE

Subiecții

Animalele au fost adulți, naivi sexuali, bărbați și femei prerie (70-100 zile de vârstă) dintr-o colonie de reproducere a laboratorului de la Universitatea de Stat din Florida, care au fost inițial derivate din câmpuri capturați voles din Illinois, SUA. Adulți voștri din pădurea naivă sexuală au fost din colonia de reproducere a laboratorului de la Universitatea Emory. După înțărcare la vârstele de 21, subiecții au fost adăpați în perechi de frate de același sex sau trio și apă și la iepurele de iepure Purina furnizate ad libitum. Toate coliviile au fost menținute pe un ciclu 14: 10 lumină: întuneric cu temperatura la 20 ° C. Datele din prelevările prelevate de sex masculin 87 au fost incluse în experimentele de farmacologie CRF, împreună cu un număr egal de stimulent preleurie de sex feminin pentru testul de legare a perechilor. De asemenea, s-au folosit date de la voile de pui masculi 10, împreună cu un număr egal de stimulente femele de lună. Au fost utilizate opt preleuri volare în studiile de imunocitochimie CRF (n = 4 pentru fiecare sex).

CRF facilitarea preferinței partenerilor

Vârlile de prerie masculi adulți (n = 31) au fost canalizați bilateral în NAcc utilizând metode stereotaxice așa cum s-a descris anterior (Aragona, Liu, Curtis, Stephan și Wang, 2003a; Liu și Wang, 2003). Subiecții au fost anesteziați cu pentobarbital de sodiu (2.5 mg pe greutatea corporală 40 gm) și canulele ghidate bilaterale 26 (Plastics One, Roanoke, VA) destinate NAcc au fost implantate stereotaxic (Anterior 1.7 mm, Bilateral ± 1 mm, Ventral -4.0 mm la bregma). Injecțiile de control (n = 6) au fost destinate caudate-putamen (Anterior 1.7 mm, Bilateral ± 1 mm, Ventral -2.5 mm până la bregma). După recuperarea de zile 3-5, subiecții au primit microinjecții (200 nl pe fiecare parte) fie din CSF artificial, fie din medicament dizolvat în CSF. Au fost efectuate injecții cu un ac 33 care a extins 1 mm sub canula de ghidare în zona țintă. Acul a fost conectat la o seringă Hamilton (Hamilton, Reno, NV) prin tubulatura din polietilenă-20, prin care soluția a fost infuzată lent de o pompă (unitatea standard MasterFlex L / S, Model 7016-21) / min, pe fiecare parte. CRF uman / șobolan a fost obținut de la Sigma (St. Louis, MO).

Animalele au fost împărțite în una din următoarele patru grupuri: control CSF (n = 7), 0.01 pg CRF în NAcc (n = 9), 0.1 pg CRF în NAcc (n = 15) și 0.1 pg CRF în caudate-putamen 6). Caudate-putamen (CP) este o regiune a creierului doar dorsală la NAcc și conține, de asemenea, CRF2 receptori, servind astfel ca o regiune de control anatomic pentru efectele CRF. Fiecare animal a primit injecții bilaterale cu volumul 200 nl înainte de o coabitare cu durată scurtă 6 cu o femeie romană. Concentrația 0.01 pg CRF în 200 nL este 10 nM, în timp ce concentrația de 0.1 pg CRF în 200 nL este 100 nM. Calculul Ki pentru CRF1 este 11 nM, în timp ce Ki calculat pentru CRF2 este 25 nM față de 125I-sauvagină (Primus, Yevich, Baltazar și Gallager, 1997). Coabitare pentru orele 6 fără împerechere în mod consecvent nu determină preferința partenerului, așa cum sa demonstrat în studiile anterioare (Aragona și colab., 2003a; Aragona, Liu, Yu, Curtis, Detwiler, Insel și Wang, 2006). Imediat după conviețuire, subiecții au fost testați pentru preferința partenerului.

Testarea preferințelor partenerului a constat în plasarea bărbatului într-un aparat cu cameră 3 în care partenerul feminin a fost legat într-o cușcă și o femeie romană ("străin") de aceeași vârstă și experiență socio-sexuală a fost legată într-o a doua cușcă, descris (Carter, DeVries și Getz, 1995). Fiecare femeie de stimulare a fost utilizată în două teste separate de preferință partener, o dată ca partener și din nou ca un străin al unui alt subiect și, prin urmare, fiecare femeie a avut o expunere socială și sexuală echivalentă în timpul coabitarei 20. Subiecților li sa permis să se deplaseze liber în întreg aparatul, iar timpul petrecut în contact cu partenerul și străinul a fost cuantificat pe parcursul testului orar 3.

Activitatea locomotorie a fost măsurată în timpul testului de preferință pentru partener pentru a determina dacă dozele selectate de tratament cu CRF au afectat activitatea locomotorie generală sau comportamentul asemănător cu anxietatea, așa cum a fost descris anterior (Hotta, Shibasaki, Arai și Demura, 1999). Numărul de puncte de trecere a coliviei prin ambele tuneluri ale aparatului de preferință partener a fost evaluat prin utilizarea detectorilor infraroșii. Există patru fascicule cu infraroșu în cele trei cuști ale aparatului de preferință partener, cu două fascicule care flanchează fiecare tunel care leagă două cuști. Numărul total de rupturi ale fasciculului fotografic a fost estimat pentru fiecare animal în perioada de trei ore. După testarea comportamentală, subiecții au fost sacrificați și locurile de injectare au fost verificate histologic.

Adulți bărbați de luncă voles (n = 10) au fost, de asemenea, testate pentru CRF-facilitarea preferinței partenerului. Animalele au fost canalizate bilateral în NAcc așa cum s-a descris mai sus și repartizate aleatoriu într-una din cele două grupuri: CSF de control (n = 4) sau CRF 0.1 pg (n = 6). Testele de coabitare și de preferință de partener au fost efectuate exact așa cum s-a descris mai sus pentru primii voievozi. Adulți de lună de sex masculin voles din colonia noastră, de obicei, nu formează preferințe partener atunci când cohabitated cu o femeie (Lim și colab., 2004b).

CRF1- și CRF2- farmacologie selectivă și preferința partenerului

Adulți prairie voles au fost canulați bilateral în NAcc așa cum s-a descris mai sus și s-au împărțit în una din cele trei grupuri: 0.1 pg CRF (n = 10), 0.1 pg CRF plus 10 pg CRF1 antagonist (CP-154,526) (n = 25) și 0.1 pg CRF plus 10 pg CRF2 antagonist (anti-sauvagină-30) (n = 15). Anti-savagină-30 a fost obținută de la Sigma (St. Louis, MO) și CP-154,526 de la Michael Owens, Ph.D. (Universitatea Emory, Atlanta, GA). Concentrația de 10 pg CRF1 antagonist (CP-154,526) în soluția 200 nL este 100 nM, în timp ce concentrația de 10 pg CRF2 antagonist (anti-sauvagină-30) în soluția 200 nL este 10 nM. Fiecare animal a primit injecții bilaterale de volum 200 nl direct în NAcc înainte de o coabitare cu abreviată 6 oră cu o femeie romană. Imediat după conviețuire, subiecții au fost testați pentru preferința partenerului așa cum este descris mai sus. După testarea comportamentală, subiecții au fost sacrificați și locurile de injectare au fost verificate histologic. Animalele ale căror situri de canulizare au fost plasate în afara NAcc au fost excluse din analiza datelor și nu s-au reflectat în numărul total de animale utilizate.

Analiza datelor

Datele din testul de preferință pentru fiecare experiment au fost analizate utilizând un mod ANOVA 2 în care stimulul (partener sau străin) și tratamentul au fost factori. În plus, testele t Student au fost folosite pentru a compara timpul în contact cu partenerul și străinul din cadrul fiecărui grup de tratament. Au fost făcute corecții Bonferroni pentru nivelul de semnificație pentru fiecare experiment, pentru a reduce riscul de risc de eroare de tip I datorită comparațiilor multiple. Bărbații au fost clasificați ca având o preferință de partener dacă au petrecut mai mult de două ori mai mult timp în contact cu partenerul decât cel străin.

Datele colectate pentru activitatea locomotorie au fost totalizate pe măsură ce numărul de fascicule infraroșii se rupe pentru fiecare animal și a fost calculat în medie în cadrul fiecărui grup de tratament. Rezultatele au fost analizate utilizând un ANOVA cu o singură cale, cu tratamentul ca factor independent.

Imunohistochimia CRF și Urocortin-1

Adulți prairie voles au fost profund anesteziați între orele 10: 00 și 14: 00 cu izofluran și perfuzate cu soluție salină urmată de paraformaldehidă 2% în soluție salină tamponată cu fosfat 10 mM (pH 7.4) (PBS). Creierii disecați au fost postfixați peste noapte în soluția 2% paraformaldehidă / PBS și au fost crioprotecați în 30% zaharoză / PBS. Secțiuni coronale plutitoare cu grosimea de treizeci de milimetri s-au tăiat pe un criostat și s-au procesat pentru imunohistochimie conform protocoalelor standardRyabinin, Criado, Henriksen, Bloom și Wilson, 1997; Weitemier, Tsivkovskaia și Ryabinin, 2005) cu ajustări pentru țesutul de vultur efectuat în experimente anterioare (Lim și colab., 2006). Pe scurt, activitatea peroxidazei endogene a fost stinsă prin incubarea cu 15-minute cu 0.3% peroxid de hidrogen. Pentru anticorpul Urocortin-1-specific, blocarea a fost efectuată printr-o incubare de cinci ore cu Albumin de ser albumin 2%, 0.1% heparină, 0.01% Triton X-100 în PBS. Pentru anticorpul specific pentru CRF, blocarea a fost efectuată printr-o incubare de cinci ore cu 4.5% ser de capră, 0.3% Triton X-100 în PBS. Anticorpii primari de iepure care recunosc Urocortin-1 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) au fost utilizați în diluția 1: 5,000. Anticorpii primari care au recunoscut CRF (Peninsula Laboratories, San Carlos, CA) au fost utilizați în diluția 1: 15,000. S-au folosit anticorpi secundari anti-iepure biotinilați (Vector Laboratory Inc., Burlingame, CA) pentru a detecta anticorpii primari. Detectarea anticorpilor secundari a fost făcută folosind kitul Vectastain ABC (Vector), iar dezvoltarea enzimatică s-a făcut cu kitul DAB Enhanced Metal (Pierce, Rockford, IL, SUA). Specificitatea imunostimulării a fost evaluată printr-o lipsă totală de imunoreactivitate în zone care nu cunosc expresia CRF sau Urocortin-1. Mai mult, s-au efectuat experimente de preabsorbție de control pentru acești anticorpi (Bachtell, Weitemier, Galvan-Rosas, Tsivkovskaia, Risinger, Phillips, Grahame și Ryabinin, 2003).

Analiza calitativă a imaginii a fost efectuată utilizând un sistem format dintr-un microscop Olympus BX40 și o videocameră digitală de înaltă rezoluție (Olympus Qcolor3) interfațată cu un computer personal Macintosh care rulează OS-X. Imaginile dintr-o singură secțiune, potrivite cel mai bine între animale pentru fiecare regiune a creierului, au fost colectate digital la aceeași intensitate a luminii. Deoarece nu s-a observat nici o colorare imunopozitivă în corpurile celulare din NAcc, numărul neuronilor imunoreactivi nu a fost numărat cantitativ.

REZULTATE

Manipularea farmacologică a receptorilor CRF în NAcc

Sa demonstrat anterior că perfuzia cu CRF icv facilitează preferința partenerului în prairie voles (DeVries și colab., 2002). Pe baza datelor noastre neuroanatomice care demonstrează diferențele dintre speciile de CRF1 și CRF2 în NAcc, am emis ipoteza că NAcc a fost locul de acțiune pentru facilitarea CRF a preferinței partenerului. Studiul anterior a arătat că administrarea icv dependentă de doză a CRF ar putea facilita preferințele partenerului la preleuri de sex masculin după o coabitare de abreviată cu o femeie (DeVries și colab., 2002). Pe baza acestui studiu, am conceput doze de CRF pentru injecții specifice locului în NAcc. Dozele pe care le-am utilizat, 0.1 pg și 0.01 pg CRF dizolvate în soluția izotonică 200 nL (sau 100 nM și, respectiv, 10 nM) au fost cu mult sub dozele minime eficiente icv de 0.1 ng și 1 ng CRF dizolvate în 1 μL 210 nM și, respectiv, 2.1 μM) (DeVries și colab., 2002). Deși sa demonstrat că CRF se leagă preferențial la CRF1, se leagă de CRF2 cu afinitate substanțială (Ki egale cu 11 și respectiv 25) (Primus și colab., 1997).

Analiza setului de date globale utilizând un ANOVA cu 2 căi a relevat un efect principal semnificativ al stimulului animal (F (1,66) = 6.77, p <0.05), dar nu au fost detectate alte efecte principale sau interacțiuni. Pentru a determina ce grupuri au petrecut preferențial timp în contact cu partenerii în locul celor necunoscuți, testele t Student au fost efectuate cu corecții Bonferroni ale valorii p. Măsurile de control ale preriilor cu injecții bilaterale de LCR artificial în polul septal NAcc sau 0.1 pg CRF în caudat-putamen nu au petrecut mult mai mult timp în contact cu partenerul decât animalul străin de stimulare (p> 0.3, testul t Student , Nivelul Bonferroni stabilit la p <0.01) (Figura 1A). Volei de prerie injectați cu doza mai mică de CRF, 0.01 pg, au avut tendința de a petrece mai mult timp în contact cu partenerul decât străinul (p> 0.08, testul t Student, nivelul Bonferroni stabilit la p <0.01). Spre deosebire de ele, primele care primesc injecții bilaterale cu doza de CRF de 10 ori mai mare, 0.1 pg în polul septal NAcc, au petrecut mult mai mult timp în contact cu partenerul decât străinul (p <0.01, testul t Student, set de nivel Bonferroni la p <0.01) (Figura 1A). În plus, în timp ce numai 6 de la animalele de control 13 a afișat o preferință de partener, definită ca petrecând de două ori mai mult timp în contact cu partenerul comparativ cu cel străin, 12 animalelor 15 care au primit 0.1 pg CRF a afișat preferința unui partenerFigura 1B). Animalele 3 care nu au avut o preferință de partener au avut preferințe străine puternice, ceea ce a contribuit probabil la lipsa unui efect principal al tratamentului sau la un efect de interacțiune în metoda ANOVA cu 2. Astfel, în timp ce perfuziile CRF în NAcc au crescut semnificativ timpul în contact cu partenerul față de străin, nu a dus la o creștere generală a timpului de contact cu partenerul.

Figura 1 

Microinjecțiile bilaterale ale CRF în NAcc facilitează preferința partenerului în preleiul de sex masculin. (A) Animalele de control care au primit CSF artificial în NAcc sau 0.1 pg CRF în caudate-putamen (CP), nu au preferat în mod semnificativ partenerul ...

Datorită diferențelor dramatice ale speciilor în CRF1 și CRF2 densități în NAcc, am emis ipoteza că acțiunea CRF în cadrul NAcc ar facilita formarea preferințelor partenerului doar în voleri de prerie și nu în volei de luncă non-monogame. Într-adevăr, mușchii de pajiște injectați cu LCR sau doza mare de 0.1 pg CRF nu au petrecut mult mai mult timp în contact cu partenerul decât străinul (p> 0.5, testul t Student) (Figura 2).

Figura 2 

Microinjecțiile bilaterale ale CRF în NAcc nu reușesc să faciliteze preferința partenerului în cazul voleslor de pădure masculi non-monogame. Adulți luncă voles injectat cu CSF artificial, sau 0.1 pg de CRF în NAcc, nu a petrecut mai mult timp în contact cu partenerul decât ...

Pe baza diferențelor dintre speciile de CRF1 și CRF2 distribuție în NAcc, am emis ipoteza că atât CRF1 și CRF2 ar modula comportamentul preferinței partenerului, poate în direcții opuse. Analiza setului de date globale utilizând un ANOVA cu 2 căi a relevat un efect principal semnificativ al stimulului animal (F (1,94) = 7.52, p <0.05), dar nu au fost detectate alte efecte principale sau interacțiuni. Vite de prerie injectate cu un cocktail de 0.1 pg CRF, plus 10 pg CRF selectiv2 antagonist anti-sauvagine-30, nu a petrecut mult mai mult timp cu partenerul sau cu străinul (p> 0.3, testul t Student, nivelul Bonferroni stabilit la p <0.016) (Figura 3A). Interesant este faptul că prairie voles injectată cu un cocktail de 0.1 pg de CRF plus 10 pg selectiv CRF1 antagonistul CP-154,526-1, a arătat, de asemenea, o blocare a preferinței partenerului (p> 0.5, testul t Student, nivelul Bonferroni stabilit la p <0.016) (Figura 3A). Volei de prerie de control injectate cu 0.1 pg CRF în NAcc au fost testate simultan și s-a constatat că replică rezultatele originale ale facilitării preferinței partenerului (p <0.01, test t Student, nivel Bonferroni stabilit la p <0.016) (Figura 3A). În plus, în timp ce 8 din câmpurile tratate cu 10 CRF a prezentat o preferință de partener, numai 11 din animalele 25 care primesc CRF1 antagonist și 6 din animale 15 care primesc CRF2 antagonist, a afișat preferința unui partener (Figura 3B). Rezultatele noastre sugerează că activarea atât a CRF1 și CRF2 receptorii în NAcc sunt necesari pentru facilitarea de către CRF a preferinței partenerului în prerile voles.

Figura 3 

Atât CRF1 și CRF2 receptorii din NAcc sunt necesari pentru formarea preferințelor partenerului facilitat de CRF în voleri de prerie. (A) Animalele injectate cu 0.1 pg CRF în NAcc au petrecut mai mult timp în contact cu partenerul decât străinul (p <0.01, Student's ...

Activitatea locomotorie nu a diferit semnificativ între grupurile de tratament (F (1,80) = 1.37, p> 0.05, ANOVA unidirecțională), deși activitatea locomotorie a avut tendința de a fi mai mică la animalele care au primit CRF în NAcc. Rezultatele sunt afișate în Tabelul 1. Se prezintă o secțiune histologică reprezentativă care prezintă situl de canal pentru NAcc Figura 4.

Figura 4 

Verificarea histologică a plasării canulei. (a) Autoradiograma receptorului din jumătatea stângă descrie locația CRF2 în prairie vole NAcc. (b) Fotomicrograf reprezentativ al secțiunii creierului colorat cu Nissl care descrie plasarea canulei terminând în interiorul ...
Tabelul 1 

Activitatea locomotorie reprezentată de numărul total de pauze ale fasciculului infraroșu sau de traversarea cuștii, calculată în medie în cadrul fiecărui grup de tratament. Nu există diferențe semnificative între grupurile de tratament (F = 1.37, p> 0.05, ANOVA unidirecțional).

Imunoreactivitatea CRF- și Ucn-1 în NAcc

Pentru a arăta microfotografii ale căror liganzi receptori CRF endogeni sunt prezenți în NAcc, am efectuat imunoreactivitatea CRF și Urocortin-1 (Ucn-1) în preleiul adulților. Secțiunile creierului reprezentative procesate pentru imunocitochimia CRF sunt prezentate în secțiunea Figura 5. CRF-fibrele imunoreactive au fost observate la NAcc la ambele sexe fără diferențe evidente în distribuție sau densitate a fibrelor (Figura 5b). Fibrele Ucn-1 nu au fost detectate în NAcc fie la prerile de sex masculin, fie la femei (Figura 5c). Astfel, este posibil ca CRF să fie unul dintre liganzii endogeni care ar putea lega fiziologic CRF1 și CRF2 receptorii din NAcc pentru a facilita preferința partenerului. De remarcat, CRF sa dovedit a se lega de ambele CRF1 și CRF2, cu afinitate de afinitate de aproximativ două până la zece ori mai mare pentru CRF1 (Primus și colab., 1997). Cu toate acestea, nu putem exclude posibilitatea ca alți liganzi endogeni, cum ar fi Urocortin-2 sau Urocortin-3, să contribuie, de asemenea, la controlul neural al formării legăturilor perechi.

Figura 5 

Imunoreactivitatea CRF și Ucn-1 în prairie voles. (a) Schema atlasului șobolan care arată zona de mărire 10x a NAcc (a se vedea dreptunghiul) (Paxinos și Watson, 1998). (b) Secțiunea de prairie care prezintă fibrele imunoreactive CRF în NAcc (vezi săgețile). (c) Prairie ...

DISCUŢIE

În studiile anterioare, am identificat diferențele de specii în CRF acumbal1- și CRF2 expresie care se corelează cu organizarea socială în cadrul a patru specii de specii de vaci. Prairie monogame și păstăi de pin au avut nivele mai ridicate de CRF2 în NAcc și niveluri mai scăzute ale CRF1 în NAcc, comparativ cu speciile de pajiști ne-monogame și de vânt montan (Lim și colab., 2005). Pe baza acestor date, am presupus că acțiunea CRF în cadrul NAcc a fost critică pentru comportamentul social monogamic în prerile voles. În studiul de față, demonstrăm pentru prima dată că microinjecțiile de CRF direct în NAcc fac, de fapt, facilitarea preferinței partenerului în preleiul de sex masculin. Analiza ANOVA în două direcții a detectat un efect principal al animalului stimulat, adică un timp mai lung a fost petrecut în contact cu partenerul decât cel străin, dar nu a fost detectat niciun efect principal al tratamentului sau al interacțiunii. Preferințele străine puternice la animalele 3 din grupul 0.1 pg CRF NAcc au umflat varianța, prevenind detectarea efectului de interacțiune. Cu toate acestea, comparații separate ale timpului petrecut cu versuri străine străine au evidențiat preferințe semnificative pentru partenerul din grupul 0.1 pg CRF NAcc. Acest efect a fost repetat în studiul antagonist, care atestă robustețea efectului. Această schimbare în preferințele partenerilor nu a fost asociată cu o creștere semnificativă statistic a timpului petrecut cu partenerul sau cu o scădere a timpului petrecut cu un străin, ci mai degrabă a fost rezultatul unei preferințe generale sporite pentru partener față de străin. În schimb, CRF nu are niciun efect asupra preferinței partenerului în voile non-monogame de luncă. În plus, demonstrăm că acest efect de facilitare este modulat prin acțiunea CRF la ambele CRF1 și CRF2 receptori. În cele din urmă, prezentăm dovezi cu privire la microfotografia că fibrele imunoreactive CRF sunt prezente în NAVc, indicând faptul că CRF ar putea fi unul dintre liganzii endogeni care acționează asupra CRF1 și CRF2 receptorilor în NAcc în timpul formării preferințelor partenerului. Luate împreună, aceste date demonstrează un rol nou pentru sistemele CRF care acționează în cadrul NAcc în comportamentul social.

Datele noastre care arată că CRF în NAcc facilitează preferința partenerului susține ipoteza noastră inițială conform căreia sistemele accumbal CRF sunt implicate în formarea legăturilor pereche în prairie voles. Am avut în continuare ipoteza că CRF2 receptorii, în special, au fost critici având în vedere abundența CRF2 receptorilor din cele două specii de vlăgoză monogamă, dar nu și cele două specii de vultur nemonogam (Lim și colab., 2005). Rezultatele experimentului "lunca vole" susțin această ipoteză, deoarece perfuzia cu CRF nu are niciun efect asupra preferinței partenerului într-o specie care nu are în mod eficient CRF2 receptori în NAcc. În plus, am constatat că administrarea concomitentă a CRF2- antagonistul selectiv blochează preferința partenerului în prairie voles. Aceste date indică un rol potențial critic pentru CRF2 receptorilor în formarea legăturilor de perechi.

Cu toate acestea, am constatat, de asemenea, că administrarea concomitentă a CRF1- antagonistul selectiv a blocat preferința partenerului în prerile voles. Acest rezultat a fost mai surprinzător, având în vedere faptul că CRF1 receptorii sunt exprimați în NAcc atât în ​​speciile non-monogame, cât și în cele monogame. Luate împreună, aceste date subliniază importanța atât receptor pentru exprimarea preferinței partenerului și indică posibilitatea ca specificitatea receptorului să fie o problemă complexă care ar putea beneficia de explorări ulterioare. Este posibil să existe o interacțiune dinamică între cele două subtipuri ale receptorului în NAcc în timpul comportamentului de legare a perechilor și ar putea fi interesant să explorăm în continuare fenotipurile celulare ale CRF1- și CRF2-exprimarea neuronilor sau pentru a vedea dacă CRF1 și CRF2 receptorii ar putea chiar să se colocalizeze la aceiași neuroni. De asemenea, este posibil ca alți agenți, cum ar fi proteina de legare a CRF, care poate acționa ca un rezervor pentru CRF endogen, să poată fi implicați (Jahn, Eckart, Brauns, Tezval și Spiess, 2002).

Doza efectivă de CRF pentru injecții specifice locului în NAcc care favorizează preferința partenerului nu a determinat un efect semnificativ al tratamentului medicamentos asupra activității locomotorii, care este în mod obișnuit interpretat ca un comportament asemănător cu anxietatea. DeVries și Carter (2002) au găsit doze eficiente de CRF icv pentru preferința partenerului la 0.1 și 1.0 ng (210 nM și, respectiv, 2.1 μM) și nu au detectat diferențe în activitatea locomotorie între grupurile de tratament (DeVries și colab., 2002). Dozele lor au fost de la 1000 la 10,000 ori mai mari și de cel puțin două ori până la douăzeci de ori mai mari decât dozele pe care le-am utilizat în mod specific în NAcc (10 nM și 100 nM). În studiul nostru, deși nu am detectat diferențe semnificative în activitatea locomotorie în cadrul grupurilor de tratament, a existat, totuși, o ușoară tendință spre mai puține încrucișări în cuști la animalele care au primit numai CRF în NAcc. Deși este posibil ca CRF să exercite efecte subtile asupra comportamentului anxietății și, prin urmare, locomoției, care ar putea afecta formarea preferințelor partenerului, credem că explicația mai plauzibilă este că scăderea încrucișărilor cuștilor în grupul singur cu CRF este un produs secundar crescut preferința partenerului, adică timpul petrecut numai în cutia partenerului. Aceasta susține ipoteza că CRF poate avea un rol distinct, diferit în reglarea comportamentului social, posibil independent de efectele axei HPA asupra anxietății.

De asemenea, prezentăm dovezi fotomicrografice ale imunoreactivității CRF în NAcc în aceeași regiune ca CRF2 receptori în preleuri monogame prele. Aceasta sugerează că CRF ar putea fi unul dintre liganzii endogeni care acționează asupra CRF1 și CRF2 receptori în NAcc. Deși sa demonstrat că CRF se leagă preferențial la CRF1, se leagă de CRF2 cu afinitate substanțială (Primus și colab., 1997). Ucn-1-fibrele imunoreactive nu au fost observate la NAcc, dar au fost observate în alte regiuni ale creierului, cum ar fi nucleul Edinger-Westphal (Lim și colab., 2006). Nu am reușit să cartografiem fibrele Urocortin-2 sau Urocortin-3 în creierul vole, din cauza lipsei imunostimulării specifice; totuși, ar fi interesant să se determine dacă acești liganzi potențiali, care leagă de asemenea CRF2 receptori cu afinitate mare, sunt de asemenea prezenți în NAcc împreună cu CRF2 receptori.

Predicția ventrală, în special NAcc, a fost identificată în mod repetat ca fiind regiunea critică a creierului pentru formarea legăturilor pereche în prerile voles. Având în vedere rolul NAcc în calea recompensării mezolimbice a dopaminei, sa presupus că mecanismele naturale de recompensare și de întărire stau la baza formării legăturilor perechi, astfel încât partenerul este selectiv asociat cu recompensă (Aragona și colab., 2003a; Lim, Murphy și Young, 2004a). Am demonstrat anterior, prin manipulări farmacologice și genetice, că receptorii VBNUMXa ai vasopresinei ventriculare anterioare sunt necesari pentru formarea legăturii de sex masculin, chiar și atunci când este supraexprimată în specii de specii de specii non-monogameLim și colab., 2004b; Lim și Young, 2004). Receptorii de oxitocină din NAcc sunt necesari pentru preferința partenerului la prerile de sex feminin (Young, Lim, Gingrich și Insel, 2001). Receptorii dopaminergici dopaminici D1 și receptorii D2 s-au dovedit, de asemenea, să moduleze formarea și menținerea preferințelor partenerului atât la bărbați, cât și la femei și, de fapt, dopamina interacționează cu oxitocina în timpul acestui proces comportamentalAragona și colab., 2003a; Aragona și colab., 2006; Aragona, Liu, Yu, Damron, Perlman și Wang, 2003b; Liu și Wang, 2003). Astfel, activarea receptorului CRF contribuie probabil la un circuit mai mare care converge în NAcc pentru a produce acest comportament social complex. În concordanță cu această ipoteză, există dovezi că receptorii CRF din NAcc pot modula eliberarea dopaminei în striatum (Lu, Liu, Huang și Zhang, 2003) și dovezi preliminare recente care sugerează că activarea receptorului NAcc CRF poate stimula presarea barei pentru armarea naturală (Berridge, Pecine și Schulkin, 2004). Un alt studiu a arătat că CRF2 receptorii din zona tegmentală ventrală, care transmite proiecții dopaminergice la NAcc, pot induce potențarea pe termen lung, corelarea fiziologică a învățării comportamentale și a asociației de recompensare (Ungless, Singh, Crowder, Yaka, Ron și Bonci, 2003). Deoarece preferința partenerului este postulată a fi o formă de învățare naturală a recompenselor, receptorii CRF din NAcc pot juca un rol similar în potențarea sinaptică subiacentă în timpul formării legăturilor pereche în prerile voles.

Formarea legăturilor pereche în natură este un proces cognitiv complex care necesită integrarea multor stimuli externi și a stărilor interne. Formarea legăturilor perechi rezultă din sinteza mai multor procese comportamentale, inclusiv recunoașterea socială, abordarea și motivația socială, și implică învățarea și memoria. Oxitocina și vasopresina sunt implicate integral în procesarea neurală a stimulilor sociali și formarea de amintiri sociale (Bielsky, Hu, Szegda, Westphal și Young, 2004; Ferguson, Young, Hearn, Matzuk, Insel și Winslow, 2000). Dopamina poate fi implicată în starea motivațională intensificată care determină interacțiunea socială cu partenerul său, iar întărirea necesară pentru a stabili o preferință a partenerului. CRF poate furniza un mecanism prin care starea internă de stres modulează preferința partenerului. Semnalarea CRF ar putea, de asemenea, să permită schimbările pe termen lung ale plasticității neuronale în timpul formării legăturilor pereche. Fiecare sistem neurotransmițător joacă un rol diferit, dar crucial, în comportamentul complex al legării perechilor, iar blocarea oricărui sistem ar perturba formarea unei legături de perechi.

Rolul CRF în reglarea comportamentului social a fost studiat în mod minim, în ciuda abundenței studiilor referitoare la CRF la comportamentele de stres și anxietate. Există dovezi solide despre CRF2 funcțiile de activare a receptorilor pentru scăderea comportamentelor de anxietate și de depresie la șoareci (Bale, Contarino, Smith, Chan, Aur, Sawchenko, Koob, Vale și Lee, 2000; Bale și Vale, 2003). Comportamentul social, stresul și anxietatea sunt strâns legate între ele, în special în comportamentele care implică sprijin social sau care se confruntă cu izolarea socială. Prairie voles care au format legături perechi prezintă niveluri crescute de corticosteron în timpul separării sociale de la partener și reuniunea cu partenerul revine la nivelul inițial (Carter, DeVries, Taymans, Roberts, Williams și Getz, 1997). Prerile de sex masculin care se află în curs de înot forțat, un stres psihologic, arată o facilitare a formării legăturilor de perechi după o coabitare de abreviat cu partenerul (DeVries și colab., 1996). În cele din urmă, bărbații legați la perechi care sunt separați de partenerii lor prezintă mai multe strategii pasive de coping în testul de înot forțat decât omologii lor separați de frate și astfel de schimbări comportamentale sunt însoțite de o creștere a ARNm CRF în NAccBosch, Nair, Neumann și Young, 2005).

Aceste date sugerează că comportamentele sociale și de stres au o relație reciprocă și, în plus, aceleași molecule implicate în stres și anxietate joacă, de asemenea, un rol important în comportamentul social. De fapt, există dovezi că neuropeptidele "sociali", vasopresina și oxitocina, pot modula stresul și comportamentul de anxietate (Bielsky și colab., 2004; Landgraf, Gerstberger, Montkowski, Probst, Wotjak, Holsboer și Engelmann, 1995; Liebsch, Wotjak, Landgraf și Engelmann, 1996; Mantella, Vollmer, Li și Amico, 2003; Ring, Malberg, Potesti, Ping, Boikess, Luo, Schechter, Rizzo, Rahman și Rosenzweig-Lipson, 2006; Windle, Shanks, Lightman și Ingram, 1997). Astfel, aceleași molecule care modulează starea internă de stres pot contribui la reglarea comportamentelor sociale cum ar fi formarea legăturilor de perechi și că moleculele și circuitele evoluate în scopul unui comportament pot, de fapt, să controleze dinamic celălalt.

recunoasteri

La Universitatea Emory, dorim să-i mulțumim doctorului Michael J. Owens pentru că ne-a oferit grațios compusul CP-154,526. Dorim, de asemenea, să le mulțumim Lorra Miller și Meera Modi pentru asistența acordată experimentului de luncă. În cele din urmă, dorim să mulțumim doctorilor. A. Courtney DeVries de la Universitatea de Stat din Ohio și C. Sue Carter de la Universitatea din Illinois, Chicago pentru activitatea lor de pionierat privind CRF în prerie voles și corespondența Dr. DeVries cu privire la experimentele farmacologice.

Grant support: Această cercetare a fost susținută de către NIH subvenții MH65050 la MML, AA13738 la AER, MH58616 la ZXW, MH64692 la LJY, și NSF STC IBN-9876754 și Yerkes Center Grant RR00165.

Note de subsol

Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus copierii, tipăririi și revizuirii probelor rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală. Rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul și toate denunțările legale care se referă la jurnal.

Referinte

  1. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. Un rol esențial pentru nucleul accumbens dopamină în formarea partener-preferință în preleiul de sex masculin voles. J Neurosci. 2003a; 23 (8): 3483-90. [PubMed]
  2. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens dopamine mediază diferențiat formarea și menținerea obligațiunilor pereche monogame. Nat Neurosci. 2006; 9 (1): 133-9. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Damron A, Perlman G, Wang ZX. Modularea opusă a atașamentului social prin activarea D1- și D2-receptor de tip dopamină în nucleul accumbens shell. Hormonul Behav. 2003b; 44: 37.
  4. Bachtell RK, Weitemier AZ, Galvan-Rosas A, Tsivkovskaia NO, Risinger FO, Phillips TJ, Grahame NJ, Ryabinin AE. Calea de urocortină a septului Edinger-Westphal-lateral și relația sa cu consumul de alcool. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2477-87. [PubMed]
  5. Bale TL, Contarino A, Smith GW, Chan R, Gold LH, Sawchenko PE, Koob GF, Vale WW, Lee KF. Șoarecii cu deficit de receptor de hormon de eliberare a corticotropinei - 2 prezintă comportament asemănător cu anxietatea și sunt hipersensibili la stres. Nat Genet. 2000; 24 (4): 410-4. [PubMed]
  6. Bale TL, Vale WW. Creșterea comportamentelor asemănătoare depresiei la șoarecii cu factor de eliberare a factorului de corticotropină-2: răspunsuri dihotomice sexuale. J Neurosci. 2003; 23 (12): 5295-301. [PubMed]
  7. Berridge KK, Pecine S, Schulkin J. Efectul de apariție al CRF în cochilia accumbens pe abordarea condiționată pentru recompensa de zaharoză. Societatea pentru Neuroștiințe Planificator abstract / itinerar. 2004: 437.12.
  8. Bielsky IF, Hu SB, Szegda KL, Westphal H, Young LJ. Deficiență profundă în recunoașterea socială și reducerea comportamentului de tip anxietate la șoarecii knock-out ai receptorilor de vasopresină V1a. Neuropsychopharmacology. 2004; 29 (3): 483-93. [PubMed]
  9. Bosch OJ, Nair HP, Neumann ID, Young LJ. Comportamentul depresiv după izolarea de la un partener de sex feminin este asociat cu modificarea CRN a creierului CRF mRNA și a activității axei HPA în pre de sex masculin. Societatea pentru Neuroștiințe Planificator abstract / Itinerar Planificator; 2005. (Programul nr. 420.4)
  10. Carter CS, DeVries AC, Getz LL. Substraturi fiziologice ale monogamiei de mamifere: modelul de prairie vole. Neurosci Biobehav Rev. 1995; 19 (2): 303-14. [PubMed]
  11. Carter CS, DeVries AC, Taymans SE, Roberts RL, Williams JR, Getz LL. Peptide, steroizi și legături perechi. Ann NY Acad Sci. 1997; 807: 260-72. [PubMed]
  12. DeVries AC, DeVries MB, Taymans SE, Carter CS. Efectele stresului asupra preferințelor sociale sunt dimorfic din punct de vedere sexual în prelevanțele volare. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1996; 93 (21): 11980-4. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  13. DeVries AC, Guptaa T, Cardillo S, Cho M, Carter CS. Factorul de eliberare a corticotropinei induce preferințele sociale la preleiul de sex masculin. Psychoneuroendocrinology. 2002; 27 (6): 705-14. [PubMed]
  14. Ferguson JN, Young LJ, Hearn EF, Matzuk MM, Insel TR, Winslow JT. Amnezie socială la șoareci lipsiți de gena oxitocinei. Nat Genet. 2000; 25 (3): 284-8. [PubMed]
  15. Getz LL, Carter CS, Gavish L. Sistemul de împerechere al preierului Microtus ochragaster: Dovezi de teren și de laborator pentru legarea perechilor. Ecologie comportamentală și sociobiologie. 1981; 8: 189-194.
  16. Gruder-Adams S, Getz LL. Comparația dintre sistemul de împerechere și comportamentul paternal în Microtus ochragaster și M. pennsylvanicus. Jurnalul de Mammalogie. 1985; 66 (1): 165-167.
  17. Hotta M, Shibasaki T, Arai K, Demura H. Receptorul de factor de eliberare a corticotropinei 1 mediază inhibiția indusă de stresul emoțional al aportului alimentar și modificările comportamentale la șobolani. Brain Res. 1999; 823 (1-2): 221-5. [PubMed]
  18. Insel TR, Shapiro LE. Distribuția receptorilor de oxitocină reflectă organizarea socială a volesului monogamic și poligamic. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1992; 89 (13): 5981-5. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  19. Insula TR, Wang ZX, Ferris CF. Modele de distribuție a receptorilor vasopresinei cerebrale asociate cu organizarea socială a rozătoarelor microintești. J Neurosci. 1994; 14 (9): 5381-92. [PubMed]
  20. Jahn O, Eckart K, Braun O, Tezval H, Spiess J. Proteina de legare a factorului de eliberare a corticotropinei: site-ul de legare a ligandului și structura subunității. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2002; 99 (19): 12055-60. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  21. Landgraf R, Gerstberger R, Montkowski A, Probst JC, Wotjak CT, Holsboer F, Engelmann M. Oligodeoxinucleotida antisens a receptorului vasopresinei V1 în sept reduce dependența de vasopresină, capacitățile de discriminare socială și comportamentul asociat cu anxietatea la șobolani. J Neurosci. 1995; 15 (6): 4250-8. [PubMed]
  22. Liebsch G, Wotjak CT, Landgraf R, Engelmann M. Septal vasopresina modulează comportamentul asociat cu anxietatea la șobolani. Neurosci Lett. 1996; 217 (2-3): 101-4. [PubMed]
  23. Lim MM, Murphy AZ, Young LJ. Receptorii oxitocinei striatopalidice și receptorii vasopresin V1a ventriculari în varianta precursor monogamă (Microtus ochrogaster) J Comp Neurol. 2004a; 468 (4): 555-70. [PubMed]
  24. Lim MM, Nair HP, Young LJ. Specii și diferențe sexuale în distribuția creierului a subtipurilor receptorului factorului de eliberare a corticotropinei 1 și 2 în speciile de specii monogame și promiscuite. J. Comp. Neurol. 2005; 487 (1): 75-92. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  25. Lim MM, Țivkovskaia NO, Bai Y, Young LJ, Ryabinin AE. Distribuția factorului de eliberare a corticotropinei și a urocortinului 1 în creierul Vole. Brain Behav Evol. 2006; 68 (4): 229-240. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  26. Lim MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Îmbunătățirea preferinței partenerului într-o specie promiscuă prin manipularea expresiei unei singure gene. Natură. 2004b; 429 (6993): 754-7. [PubMed]
  27. Lim MM, Young LJ. Circuitele neuronale dependente de vasopresină care stau la baza formării legăturilor pereche în preul monogam. Neuroscience. 2004; 125 (1): 35-45. [PubMed]
  28. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oxitocina și dopamina interacționează pentru a regla formarea legăturilor perechilor în preleiul de sex feminin. Neuroscience. 2003; 121 (3): 537-44. [PubMed]
  29. Lu, Liu Z, Huang M, Zhang Z. Răspunsurile dependente de dopamină față de cocaină depind de subtipurile de receptori ai factorului de eliberare a corticotropinei. J Neurochem. 2003; 84 (6): 1378-86. [PubMed]
  30. Mantella RC, Vollmer RR, Li X, Amico JA. Șoarecele cu deficit de oxitocină afișează comportamente legate de anxietate. Endocrinologie. 2003; 144 (6): 2291-6. [PubMed]
  31. Paxinos G, Watson C. Creierul șobolanului în coordonate stereotaxice. 4. Academic Press; 1998.
  32. Primus RJ, Yevich E, Baltazar C, Gallager DW. Localizarea autoradiografică a situsurilor de legare CRF1 și CRF2 la creierul adult de șobolan. Neuropsychopharmacology. 1997; 17 (5): 308-16. [PubMed]
  33. Ring RH, Malberg JE, Potestio L, Ping J, Boikess S, Luo B, Schechter LE, Rizzo S, Rahman Z, Rosenzweig-Lipson S. Activitatea anxiolitice a oxitocinei la șoarecii masculi: dovezi comportamentale și autonome, implicații terapeutice. Psihofarmacologie (Berl) 2006: 1-8. [PubMed]
  34. Ryabinin AE, Criado JR, Henriksen SJ, Bloom FE, Wilson MC. Sensibilitatea diferențială a expresiei c-Fos în hipocampus și alte regiuni ale creierului până la doze moderate și scăzute de alcool. Mol psihiatrie. 1997; 2 (1): 32-43. [PubMed]
  35. Salo AL, Shapiro LE, Dewsbury DA. Comportament afilitiv la diferite specii de voile (Microtus) Psihol Rep. 1993; 72 (1): 316-8. [PubMed]
  36. Shapiro LE, Dewsbury DA. Diferențe în comportamentul afiliativ, legarea perechilor și citologia vaginală la două specii de vole (Microtus ochrogaster și M. montanus) J Comp Psychol. 1990; 104 (3): 268-74. [PubMed]
  37. Unguent MA, Singh V, Crowder TL, Yaka R, Ron D, Bonci A. Factorul de eliberare a corticotropinei necesită proteina de legare a CRF pentru a potența receptorii NMDA prin receptorul CRN 2 în neuronii dopaminergici. Neuron. 2003; 39 (3): 401-7. [PubMed]
  38. Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Distribuția de Urocortin 1 în creierul mouse-ului este dependentă de tulpini. Neuroscience. 2005; 132 (3): 729-40. [PubMed]
  39. Windle RJ, Shanks N, Lightman SL, Ingram CD. Administrarea centrală de oxitocină reduce eliberarea de corticosteron indusă de stres și comportamentul de anxietate la șobolani. Endocrinologie. 1997; 138 (7): 2829-34. [PubMed]
  40. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Mecanisme celulare de atașament social. Hormonul Behav. 2001; 40 (2): 133-8. [PubMed]
  41. Young LJ, Wang Z. Neurobiologia lipirii perechilor. Nat Neurosci. 2004; 7 (10): 1048-54. [PubMed]