Inhibitorii histonei deacetilazei facilitează formarea preferinței partenerului în preleiul femeilor prele (2013)

Nat Neurosci. Manuscris de autor; disponibil în PMC Jan 1, 2014.

Publicat în formularul final modificat ca:

Nat Neurosci. Jul 2013; 16 (7): 10.1038 / nn.3420.

Publicat online Jun 2, 2013. doi: 10.1038 / nn.3420

PMCID: PMC3703824

NIHMSID: NIHMS477621

Hui Wang,^*,^1,^2,³ Florian Duclot,^*,^1,² Yan Liu,^2,³ Zuoxin Wang,^2,³ și Mohamed Kabbaj^1,²

Informații de autor ► Informații despre licență și licență

Versiunea editată finală a acestui articol este disponibilă la Nat Neurosci

Vezi alte articole din PMC că citează articolul publicat.

Abstract

În preierul social monogamic (Microtus ochrogaster), împerecherea induce legături perechi durabile inițiate de formarea preferinței partenerului și reglate de o varietate de neurotransmițători, incluzând oxitocina, vasopresina și dopamina. Aici am examinat potențialele mecanisme epigenetice care intermediază reglementarea legăturilor perechi. Arătăm că inhibitorii deacetilazei histonei butirat de sodiu și TrichoStatin A (TSA) facilitează formarea preferințelor partenerului la preleuri de sex feminin în absența împerecherii. Aceasta a fost asociată cu o reglare specifică a receptorilor de oxitocină (OTR) și vasopresin V1a (V1aR) în nucleul accumbens, printr-o creștere a acetilației histonei la promotorul respectiv. Mai mult, preferința partenerului facilitat de TSA a fost împiedicată de blocarea OTR sau V1aR în nucleul accumbens. Foarte important, preferința partenerului indus de împerechere a declanșat aceeași reglare epigenetică a promotorilor genelor OTR și V1aR ca TSA. Aceste observații indică astfel că TSA și împerecherea facilitează preferința partenerului prin evenimente epigenetice, furnizând primele dovezi directe pentru o reglementare epigenetică a legării perechilor.

Introducere

Afilierea socială este o caracteristică esențială a comportamentelor sociale umane și a deficitelor cognitive sociale sunt trăsături comune într-o multitudine de tulburări neuropsihiatrice incluzând tulburări de spectru schizofrenic și de spectru autism, precum și dependență și depresie¹. Preieria socială monogame prerie (Microtus ochrogaster) au apărut ca un model foarte interesant pentru investigarea bazelor neurobiologice ale atașamentului social, atât indivizii de laborator, cât și cei care trăiesc liber stabilesc legături de perechi pe termen lung^2-4, care sunt inițiate inițial de formarea comportamentelor de afiliere selectivă față de partener, numită preferință de partener⁵. Această formare a preferințelor partenerului implică o varietate de neurotransmițători și sisteme hormonale, incluzând neuropeptide oxitocină și vasopresină (AVP) și dopamină mezolimbică⁵.

In general, formarea preferinței partenerului este mediată prin neurotransmisia AVP în pallidum ventral și septul lateral (LS) la bărbați și neurotransmisia oxitocinei în nucleul accumbens (NAcc) și cortexul prelimbic la prerile de sex feminin voles^6-8.

În mod obișnuit, implicat în recompense naturale, cum ar fi împerecherea, dopamina acționează de asemenea ca un mediator critic al preferinței partenerului în prerile volare. Activarea receptorilor de tip D2 de tip dopamină (D2R) în NAcc facilitează, în timp ce activarea receptorilor de tip D1 de tip dopamină (D1R) inhibă formarea preferinței partenerului atât la voire la bărbați cât și la femei^9-11.

Foarte important, variațiile expresiei genice a receptorilor oxitocinei și AVP V1a, respectiv OTR și V1aR pot afecta dramatic în mod dramatic preferința partenerului. La femeile prerie de voile, de exemplu, supraexpresia OTR în NAcc facilitează preferința partenerului în absența împerecherii^12-14.

Dincolo de reglementarea legării perechilor, oxitocina și AVP sunt, de asemenea, implicate într-o gamă largă de comportamente sociale, inclusiv recunoașterea socială, agresivitatea și îngrijirea maternă^{15, 16}. În mod deosebit, întreruperile comportamentului din urmă la rozătoare dau naștere unor neuroadaptări de lungă durată prin mecanisme epigenetice, incluzând metilarea ADN a receptorilor de estrogen alfa¹⁷ și genele AVP¹⁸, precum și acetilarea histonică a promotorului receptorului glucocorticoid¹⁹. Mai mult, inhibitorii histone deacetilazei (HDAC), amplificând expresia genei prin creșterea acetilării histonei în creierul rozătoarelor²⁰, pot inversa aceste modificări¹⁹, și influențează direct comportamentele sociale, cum ar fi receptivitatea sexuală²¹. Foarte important, într-o linie celulară de cancer pulmonar, inhibitorul HDAC trichostatin A (TSA) sporește direct transcripția OTR prin promovarea locală a acetilației histonei²².

Prin urmare, se poate sugera o bază epigenetică în formarea preferințelor partenerului în prerie. Pentru a testa această ipoteză, am evaluat mai întâi efectele a doi inhibitori HDAC, butirat de sodiu (NaB) și TSA, asupra formării preferinței partenerului la adulți preleiți de sex feminin. Ulterior, am investigat mecanismele moleculare care mediază efectele TSA în inducerea preferinței partenerului în preleiul femeilor prerie. În cele din urmă, am încercat să determinăm dacă modificările epigenetice induse de TSA în timpul coabitării au fost declanșate și prin împerechere.

REZULTATE

Tratamentul TSA facilitează preferința partenerului

Sexul naiv de sex feminin prairie voles au fost injectați intracerebroventricular (ICV.) cu CSF sau CSF care conțin 0.08, 0.4 sau 4 ng TSA imediat înainte de conviețuirea 6-oră cu un bărbat fără împerechere, iar preferința partenerului a fost apoi testată. Șase ore de conviețuire cu un bărbat fără împerechere nu determină formarea preferințelor partenerului în preleiul femeilor prele⁴ și, astfel, această paradigmă comportamentală a fost utilizată pe scară largă pentru a evalua efectele diferitelor medicamente asupra facilitării formării preferințelor partenerilor⁵.

Femelele tratate cu CSF au prezentat un contact neselectiv unul lângă altul cu partenerul sau cu un străin după orele de coabitare 6 fără împerechere (t₁₅= 0.76, P = 0.46; Fig. 1a). Cu toate acestea, animalele tratate cu TSA la toate dozele testate au cheltuit preferențial mai mult timp cu partenerul decât cu cel străin (t₈= 4.35, P = 0.002 pentru TSA 0.08 ngrupa g; t₁₅= 3.63, P = 0.002 pentru TSA 0.4 ngrupa g; și t₈= 2.58, P = 0.03 pentru TSA 4 ng). Foarte important, nu s-au constatat diferențe de grup în activitatea locomotorie (F_3,46 = 1.25, P= 0.30, Fig. 1b) și nu a fost observat nici un comportament agresiv al testului feminin față de străin sau partener, demonstrând că efectele TSA erau specifice unei preferințe sociale și nu erau secundare unei alterarea locomoției sau a aversiunii sociale față de străin.

Figura 1

O injectare acută de trichostatină A (TSA) facilitează formarea preferinței partenerului în preleiul de sex feminin, în absența împerecherii. (a) Femele tratate cu lichid cefalosporin (CSF) expuse unui mascul timp de ore 6 în absența împerecherii au prezentat neselective ...

Pentru a investiga dacă TSA sporește acetilarea histonei în structurile creierului implicate în formarea preferinței partenerului, un lot separat de femele a fost injectat cu doza medie de TSA (0.4 ng) și conviețuit cu un bărbat în absența împerecherii în timpul orelor 30 min, 2 sau 9. În mod particular, nu s-a putut detecta nici o variație semnificativă a nivelelor de acetilare a histonei globale H3 (Lys14) la orice moment în ambele NAcc și caudate putamen (P > 0.05 pentru toate grupurile, Fig. 1c și d). Acest lucru demonstrează că TSA facilitează formarea preferinței partenerului în absența împerecherii, în ciuda faptului că nu afectează acetilarea globală a histonei H3 în NAcc sau în caudate putamen.

Foarte important, butyratul de sodiu a facilitat, de asemenea, preferința partenerului la prerile de sex feminin, după conviețuirea cu un bărbat timp de ore 6 fără împerechere, asociată cu o creștere a acetylației globale H3 (Lys14) în NAcc (Figura suplimentară 1). Efectele TSA asupra formării preferințelor partenerului ar putea fi astfel reproduse cu un alt inhibitor HDAC, sugerând implicarea inhibării HDAC, mai degrabă decât un efect nespecific al TSA în facilitarea preferinței partenerului. Considerând că TSA este un inhibitor HDAC clasa I / II mai specifică și afine^{23, 24}, și că efectele comportamentale ale TSA au fost mai pronunțate decât NaB, am ales să folosim TSA peste NaB pentru investigarea corelațiilor moleculare specifice în următoarele părți ale studiului.

Corelații moleculare ale preferințelor partenerului facilitat de TSA

Deoarece variațiile nivelelor de expresie a genelor din NAcc au fost asociate cu diferite strategii de împerechere între voele monogame și non-monogame și cu modificarea formării preferințelor partenerului în prairie voles în special^{12, 13, 25, 26}, am evaluat dacă formarea de preferință a partenerului facilitat de TSA a fost asociată cu variații ale expresiei genice în NAcc.

Tratamentul cu TSA (0.4 ng, ICV.) a indus o creștere a nivelurilor de ARN mRNA în NAcc după 2 ore de coabitare în comparație cu martorii tratați cu CSF (t₁₀ = 2.38, P = 0.038, ^{Fig. 2a}), care au avut tendința de a fi susținute după orele 9 de coabitare (t₉ = 2.17, P = 0.058, Fig. 2b). Deși o creștere ușoară, dar nesemnificativă a ARNm V1aR poate fi observată în orele de NAcc 2 după injectarea TSA, nu s-au detectat alte diferențe de grup la niciun punct de timp pentru nici unul dintre celelalte mRNA măsurate, incluzând D1R sau D2RP > 0.05, Fig. 2a, b). Foarte important, nu s-au observat diferențe de grup în caudate putamen la orice moment și pentru orice ARNm măsurat (P > 0.05 pentru toate grupurile, Fig. 2c, d), sugerând că creșterea ARNm mRNA observată la animalele tratate cu TSA a fost specifică pentru NAcc. Mai mult, o astfel de reglare a fost prezentă numai după conviețuirea cu un bărbat, deoarece nivelurile de ARN de OTR și V1aR din NAcc au rămas neschimbate 2 ore după injectarea TSA fără coabitare (OTR: 100.0% ± 11.70 pentru grupul CSF, 86.7% ± 12.11 pentru TSA grup, t₁₂ = 0.79, P = 0.444; V1aR: 100.0% ± 26.24 pentru grupul CSF, 92.3% ± 13.75 pentru grupul TSA, t₉ = 0.27, P = 0.791).

Figura 2

Tratamentul cu TSA (0.4 ng) reglementează receptorii oxitocinei (OTR) și vasopresin (V1aR) la preleuri de sex feminin voles în timpul conviețuirii cu un bărbat în absența împerecherii. Nivelurile ARN mRNA (a, b) și proteine (e, f) au fost modificate în sus după orele 2 (a, e) și 9 ...

În concordanță cu nivelele mai mari ale ARNm, animalele tratate cu TSA au prezentat, de asemenea, niveluri mai ridicate de proteină OTR la ambele puncte de timp în NAcc (2 ore: t₁₀ = 2.34, P = 0.041; 9 ore: t₁₀ = 3.16, P = 0.01, Fig. 2e, f), dar nu caudate putamen (t₁₀ = 0.41, P = 0.69, Fig. 2g, h). Interesant este faptul că, deși nu s-a detectat nicio modificare semnificativă a nivelurilor de ARNm V1aR în NAcc la 2 sau 9 ore după injectarea TSA (Fig. 2a, b), nivelurile de proteine V1aR au crescut semnificativ la ore 9, comparativ cu animalele tratate cu CSF, în NAcc (t₉ = 3.46, P = 0.007, Fig. 2f) dar nu caudate putamen (t₁₀ = 0.98, P = 0.35, Fig. 2h). Cu toate că, cu unele variante, nivelurile de proteine D1R și D2R din NAcc și putamen putamen nu au fost semnificativ afectate de administrarea de TSA (P > 0.05, Fig. 2e-h).

TSA facilitează acetilarea histonei de oxtr și avpr1a

Creșterea atât a ARNm și a nivelurilor de proteină pentru OTR după coabitare după tratamentul cu TSA a sugerat că TSA a crescut probabil transcripția OXTR, codificarea genei pentru OTR, mai degrabă decât modificarea traducerii sau a rotirii proteinei. Mai mult, nivelurile de proteine V1aR au fost mai mari în NAcc, asociate cu o creștere ușoară, dar nu semnificativă, a nivelelor mRNA după tratamentul cu TSA (Fig. 2). Considerând că TSA este un inhibitor puternic HDAC clasa I și II^{23, 24, 27}, am emis ipoteza că TSA a crescut acetilarea histonei la OXTR și avpr1a promotori în NAcc, după care îmbunătățind transcripția lor. Un nou lot de animale primite ICV. injectarea de TSA (0.4 ng) și a coexedat imediat cu un bărbat fără împerechere pentru 30 minute înainte de a fi sacrificat. Fereastra de timp 30-min a fost aleasă pe baza lucrărilor anterioare care au raportat o creștere maximă a acetilării histone după injectarea locală de TSA la șobolani și șoareci^{28, 29}. H3K14 acetilarea la OXTR și avpr1a au fost apoi analizați prin imunoprecipitare cu cromatină.

În concordanță cu creșterea nivelurilor de ARN și a nivelului proteic OTR observate anterior, animalele tratate cu TSA au prezentat o creștere foarte mare (+ 460%) în acetilarea histonei H3 la OXTR gena, comparativ cu martorii tratați cu CSF, în NAcc (t₁₀ = 5.88, P = 0.0002), dar nu caudate putamen (t₉= 0.31, P = 0.76, ^{Fig. 3a}). Mai mult decât atât, acetilarea histonei H3 la avpr1a promotorul a fost semnificativ crescut cu 30 min după administrarea TSA (+ 196%) în NAcc (t₁₀ = 3.12, P = 0.01) dar nu caudate putamen (t₉= 0.38, P = 0.71), comparativ cu martorii tratați cu CSF (Fig. 3b). Prin urmare, TSA a crescut situsul de acetilare a histonei în mod specific în NAcc încă din minutul 30 după începerea conviețuirii cu un bărbat.

Tratamentul cu TSA sporește acetilarea histonei OXTR și avpr1a promotori în timpul conviețuirii cu un bărbat în absența împerecherii. Histon H3 acetilarea (Lys14) la OXTR (a) și avpr1a (b) promotorii au fost crescuți în nucleul accumbens (NAcc), dar nu ...

TSA facilitează preferința partenerului prin OTR și V1aR

Din setul anterior de experimente, apare un model molecular de acțiune, unde în timpul coabitației, TSA potențează acetilarea histonei la OXTR și avpr1a promotori, după care îmbunătățind transcripția lor și ducând la niveluri mai ridicate ale proteinei OTR și V1aR până la 9 ore după începutul perioadei de coabitare. Este important faptul că acest efect TSA este specific site-ului, deoarece putamenul putamen rămâne neafectat. Aici am testat dacă această creștere indusă de TSA în OTR și V1aR este legată de facilitarea formării preferințelor partenerilor. Femeile de prerie primite au primit o injecție intra-NAcc de TSA (0.04ng pe fiecare parte) cu sau fără injecție prealabilă (30 minute înainte de injectarea TSA, 0.5ng pe fiecare parte) de CSF sau CSF care conține unul dintre doi antagoniști OTR diferiți, OTA (B) și OTA (T), sau un antagonist V1aR (V1aRA). Imediat după injectarea TSA, femelele au fost conviețuite cu un bărbat timp de ore 6 fără împerechere, urmate de un test de preferință pentru partener.

Femeile tratate cu CSF nu au prezentat preferința partenerului (t₅ = 0.17, P = 0.87, Fig. 4a). Cu toate acestea, animalele tratate cu TSA cheltuiau mult mai mult timp în contactele side-by-side cu "partenerul" decât cu "străinul", sugerând că o singură injecție TSA direct în NAcc este suficientă pentru a facilita formarea preferințelor partenerului fără împerecheret₅ = 7.04, P = 0.0009). Interesant, blocarea fie a OTR sau V1aR prin pre-tratament cu OTA (B), OTA (T), sau V1aRA a împiedicat efectele TSA (P > 0.05 pentru toate grupurile). Deoarece nu s-au găsit diferențe de grup în activitatea locomotorie (F_4,32 = 1.89, P = 0.14, Fig. 4b), aceste date sugerează că TSA în NAcc facilitează formarea preferinței partenerului prin intermediul mecanismelor mediate de OTR și V1aR într-o manieră specifică comportamentului.

Figura 4

Preferința partenerului facilitat de TSA necesită neurotransmisia mediată de receptorii oxitocin (OTR) și vasopresina (V1aR) în nucleul nucleu accumbens. (a) TSA facilitează preferința partenerului atunci când este infuzată în nucleul accumbens (0.04 ng pe fiecare parte), ...

Împerecherea induce neuroadaptări similare ca TSA

În urma observațiilor noastre anterioare, am stabilit că potențarea epigenetică a neurotransmisiei oxitocinei și vasopresinei la NAcc feminin a fost suficientă pentru a facilita formarea preferinței partenerului în absența împerecherii. Pentru a investiga dacă aceste neuroadaptări au loc, de asemenea, în timpul formării naturale a preferințelor partenerului, prerile de sex feminin voles au fost conviețuite cu un bărbat în timpul orelor 24 în prezența împerecherii, ceea ce determină preferința partenerului⁴, și sacrificat. Am observat o creștere a nivelului de ARN și a nivelului de proteină al OTR și V1aR la NAcc, comparativ cu femelele naivă sexuală (OTR: + 38%, t₁₀ = 2.68, P = 0.02 pentru mRNA și + 58%, t₈ = 3.05, P = 0.01 pentru proteine; V1aR: + 89%, t₁₄= 2.53, P = 0.02 pentru mRNA și + 26%, t₂₀ = 2.23, P = 0.037 pentru proteine, Fig. 5a, b).

Figura 5

Coabitarea cu împerecherea determină o reglare în sus a receptorilor oxitocinei (OTR) și vasopresinei (V1aR) în nucleul accumbens (NAcc) al preleurilor de sex feminin voles. 24h Coabitare cu un bărbat cu împerechere sus-reglează OTR (a) și V1aR (b) mARN și proteină ...

Având în vedere că ambele niveluri de ARNm și proteine pentru OTR și V1aR au fost crescute prin coabitare cu împerechere, am investigat în continuare dacă această reglare în sus a fost asociată cu o amplificare epigenetică a OXTR și avpr1a transcrierea genelor. Un lot nou de femele a fost astfel asociat cu un bărbat pentru 6 ore cu împerechere și acetilarea H3K14 la OXTR și avpr1a promotori măsurați prin imunoprecipitarea cromatinei. În concordanță cu nivelurile de ARNm și proteinele OTR și V1aR, prerile de sex feminin prele arată mai mare acetilare H3K14 la OXTR și avpr1a promotori în NAcc, în comparație cu femelele naivă sexuală (OXTR: t₉ = 2.64, P = 0.02; avpr1a: t₉ = 2.91, P = 0.017 Fig. 5c, d). Aceste date sugerează că paradigmele de conviețuire care induc în mod fiabil preferința partenerului în prerile de sex feminin prelevă declanșează o reglare în sus a expresiei OTR și V1aR în NAcc prin mecanisme epigenetice, așa cum s-a observat după tratamentul cu TSA.

Discuție

În prezentul studiu, raportăm pentru prima dată o reglementare epigenetică a formării preferințelor partenerilor. În primul rând, am demonstrat că creșterea acetilării histonei în NAcc prin administrarea unui inhibitor HDAC facilitează formarea de preferință a partenerului la adulți de sex feminin, în absența împerecherii. Then, am dezvăluit dovezi directe că formarea preferințelor partenerului la femei este condusă epigenetic, deoarece conviețuirea și împerecherea cu un bărbat a crescut OXTR și avpr1a exprimarea genelor prin acetilarea histonei îmbunătățită în NAcc. Administrarea TSA în preferința partenerului indus NAcc și a condus la nivele mai ridicate de ARNm mRNA și proteine în NAcc. Mai mult, deși acetilarea globală a histonei H3 nu a fost afectată la femele tratate cu TSA, o îmbogățire marcată a acetilării histonei la OXTR promotorul în NAcc a fost observat încă de la 30 minute după administrarea de TSA. În cele din urmă, blocarea OTR în NAcc a fost suficientă pentru a preveni preferința partenerului facilitat de TSA. Deoarece au fost detectate modificări epigenetice similare, după coabitare cu împerechere, în cadrul procedurilor cunoscute pentru a induce preferința partenerului, datele noastre au prezentat un model pentru o reglementare epigenetică a comportamentului social. Dcoabitarea cu un bărbat, TSA sau împerecherea, induce rapid o anumită acetilare histonă H3 la OXTR promotor în NAcc care sporește transcripția sa, rezultând în niveluri mai mari ale ARNm și ale proteinei OTR, care ulterior facilitează formarea preferinței partenerului.

La prerile de sex feminin, 6 de coabitare cu un bărbat fără împerechere nu determină formarea preferințelor partenerului⁴, iar această paradigmă comportamentală a fost utilizată pentru a examina efectele manipulărilor farmacologice asupra inducției preferințelor partenerului⁵. În studiul nostru, în timp ce controlul tratat cu ser fiziologic sau CSF nu a dezvoltat preferința partenerului, femeile prerie au fost tratate cu NaB sau TSA. Deoarece nici NaB, nici TSA nu au afectat locomoția globală, efectele lor asupra preferinței partenerului par a fi mai degrabă efecte specifice comportamentului decât secundare asupra locomoției. Acest efect specific al TSA a fost confirmat și de observațiile noastre moleculare. Într-adevăr, deși este administrat ICV., am reușit să detectăm o modificare specifică a expresiei genei în NAcc, dar nu într-o structură adiacentă, putamenul putamen. În plus, chiar și în cadrul nivelurilor NAcc, D1R și D2R mRNA și proteine au rămas neafectate. O astfel de specificitate pare a fi surprinzătoare pentru un inhibitor amplu HDAC, cum ar fi TSA, care afectează atât HDAC de clasa I, cât și II. Totuși, s-a raportat că TSA afectează exprimarea doar a unui mic subset de gene în genomul de mamifere^30-32, inclusiv la șoareci²⁰.

Am demonstrat aici că acetilarea histonei H3 pe Lys14 la OXTR promotor, o modificare asociată cu transcripția genetică îmbunătățită, inclusiv în timpul plasticității cerebrale^{33, 34}, subliniază nivelurile mai mari ale ARNm și ale proteinei OTR. Ca răspuns la TSA, acetilarea histonei la OXTR promotorul crește și facilitează activarea transcrierii sale în linia celulară umană²², susținând constatarea noastră OXTR poate fi reglat epigenetic. Deoarece o blocadă locală a OTR în NAcc a fost suficientă pentru a preveni efectele comportamentale ale TSA, datele noastre sugerează că expresia indusă de TSA în NAcc în timpul coabitare a mediat facilitarea formării preferințelor partenerului. Mai mult decât atât, orele de coabitare 24 cu împerechere, o procedură cunoscută a induce în mod fiabil preferința partenerului în prerile de sex feminin, a determinat o creștere similară a expresiei OTR la NAcc feminin. Acest lucru este în deplină concordanță cu implicarea cunoscută a oxitocinei și a receptorului său în neurobiologia formării preferințelor partenerului la voile feminine. Împerecherea induce o creștere a nivelurilor de oxitocină extracelulare în NAcc²⁵, iar infuzia locală de oxitocină în NAcc facilitează formarea preferinței partenerului în absența împerecherii⁸. Mai mult, antagoniștii OTR blochează formarea preferinței partenerilor indusă prin administrarea sau împerecherea oxitocinei^{8, 35}. Este important faptul că supraexpresia mediată de virusul OTR la NAcc feminin este suficientă pentru a facilita formarea preferinței partenerului^{12, 13}.

În plus față de consolidarea rolului OTR, rezultatele noastre furnizează, de asemenea, dovezi pentru o activare a expresiei genelor OTR prin mecanisme epigenetice în timpul conviețuirii cu un bărbat în absența împerecherii. Într-adevăr, deși insuficient pentru a induce preferința partenerului, o astfel de conviețuire fără împerechere pentru perioade scurte de timp activează procesele neurobiologice care stau la baza formării preferințelor partenerilor. De exemplu, două ore de expunere liberă la un bărbat determină creșteri ușoare dar nesemnificative ale eliberării de oxitocină în NAcc feminin²⁵. Prin urmare, se poate propune ca TSA sau NaB să potențeze neuroadaptările induse de coabitare cu un bărbat, facilitând dezvoltarea preferinței partenerului. Interesant, o astfel de potențare a fost deja raportată la rozătoare în care inhibitorii HDAC de clasa I și II, incluzând NaB și TSA, facilitează consolidarea unui eveniment de învățare care nu are ca rezultat formarea memoriei pe termen lung la animalele de control^{36, 37}. În sprijinul acestei noțiuni, perioadele mai lungi de coabitare (de exemplu,., 48hours) pot induce preferința partenerului chiar și în absența împerecherii⁴. De asemenea, este important de remarcat faptul că conviețuirea cu împerecherea declanșată în NAcc feminin o reglare în sus a expresiei OTR și V1aR prin aceleași mecanisme epigenetice ca cele observate după coabitare cu tratament TSA, care demonstrează că TSA și împerecherea afectează aceleași căi de a promova formarea preferințelor partenerilor. Este important faptul că TSA nu induce o reglare superioară a OTR și V1aR la NAcc feminin în absența coabitării cu un bărbat. În total, acest lucru susține ipoteza că TSA facilitează formarea preferinței partenerului prin potențarea neuroadaptărilor endogene declanșate în mod natural de conviețuirea cu un bărbat, în loc să acționeze singure aceste neuroadaptări sau diferite.

OStudiul ur evidențiază, de asemenea, rolul critic al NAcc V1aR în formarea partenerului de preferință al partenerului feminin, deoarece animalele tratate cu TSA prezintă niveluri mai ridicate de V1aR, a căror blocare a împiedicat formarea preferințelor partenerului TSA. Mai mult, aceste efecte au fost asociate cu o mai mare acetilare a histonei la avpr1a promotor, în ciuda unei creșteri semnificative a ARNm V1aR, probabil datorită unui punct de timp ne-optim. Deși nu putem exclude o reglementare a stabilității proteinei prin TSA prin acetilarea proteinelor non-histone³⁸, această constatare sugerează că, similar cu OXTR promotor, TSA ar putea promova avpr1a transcripție prin acetilarea histonei locale. În timp ce a fost descrisă contribuția AVP la legarea perechilor de bărbați⁵, rolul său în comportamentul femeii este încă controversat. Pe de o parte, o ICV. Injectarea AVP facilitează formarea preferinței partenerului atât la vocile masculine cât și la cele feminine, care este împiedicată de blocarea fie a V1aR fie a OTR³⁹. Pe de altă parte, o ICV. injectarea antagonistului V1aR blochează preferința partenerului indus de împerechere la bărbați, dar nu la femei⁴⁰. Cu toate acestea, toate aceste studii au fost utilizate ICV. injecții, împiedicând o mai bună înțelegere a structurilor implicate. Aici, oferim prima dovadă că neurotransmisia AVP în cadrul NAcc poate fi implicată în formarea preferinței partenerului în voele feminine, în timp ce cea mai mare parte a literaturii descrie implicarea sa în diferite domenii cum ar fi ventralul pallidum, septul lateral, nucleul patului stria terminalis și amigdala la bărbați⁵. Prin urmare, devine interesant faptul că blocarea fie a OTR, fie a V1aR la NAcc de sex feminin a fost suficientă pentru a preveni formarea preferinței partenerului după tratamentul cu TSA, sugerând că formarea preferințelor partenerului necesită activarea atât V1aR cât și OTR. Tconstatarea sa este în conformitate cu și susține o observație anterioară în prerie masculă voles că accesul simultan la OTR și V1aR în LS este esențial pentru preferința partenerului AVP indusă⁶. Mai mult, observarea unei creșteri specifice în ambele niveluri de OTR și V1aR la animalele tratate cu TSA susține în continuare necesitatea unei activări simultane a neurotransmisiilor AVP și oxitocinei pentru legarea perechilor.

În combinație cu oxitocină și AVP, neurotransmisia dopaminei în NAcc modulează formarea preferinței partenerului la vocile feminine⁹. Deși împerecherea induce eliberarea de dopamină în NAcc⁹, variațiile nivelurilor de receptori sunt observate numai după o perioadă extinsă - mai lungă decât 24h - a conviețuirii cu împerechere, importantă pentru menținerea legăturilor de perechi¹⁰. În concordanță cu aceste observații, prerile de sex feminin tratate cu TSA au prezentat preferința partenerului fără variații semnificative în receptorii dopaminici D1R și D2R. Prin urmare, această absență a reglementării receptorilor dopaminici oferă o altă dovadă a specificității TSA.

Raportul nostru de date prezintă pentru prima dată o componentă epigenetică în neurobiologia legăturilor de perechi și sugerează că TSA induce o "stare permisivă" la prerile de sex feminin, potențând răspunsul molecular natural la conviețuire și promovând formarea unor interacțiuni sociale mai puternice ceea ce duce la preferința partenerului. Prin urmare, este tentant să presupunem că o preferință a partenerului facilitat de TSA ar putea fi consolidată și să ducă la o legătură persistentă. Deși HDAC-urile specifice implicate rămân să fie identificate, ar fi interesant să se investigheze în continuare efectele TSA asupra altor comportamente asociate cu strategia de viață monogamă în prerie voles, cum ar fi agresiunea selectivă și îngrijirea bi-părintească. Având în vedere relevanța prairie voles în modelarea mecanismelor neurobiologice de legare a perechilor la om⁵, și inhibitorii promițători HDAC care se află deja în studiile clinice^{24, 41, 42}, datele noastre deschid calea pentru noi posibilități farmacologice de a influența comportamentele sociale.

Metode

Subiecții

Sexual naiv femeie prerie voles (Microtus ochrogaster) dintr-o colonie de reproducere de laborator au fost înțărcați la vârsta de 21 și au fost găzduiți în perechi de femele de același sex în cuști de plastic (12 × 28 × 16 cm) cu apă și alimente furnizate ad libitum. Toate coliviile au fost menținute sub un ciclu 14: 10 h lumină-întuneric, iar temperatura a fost de aproximativ 20 ° C. Toate animalele au fost repartizate aleatoriu în grupuri experimentale când au ajuns la vârsta de 70-90. Numărul de animale utilizate a fost bazat pe studii anterioare din domeniu efectuate de grupul nostru și de alții, combinate cu o analiză a puterii. Procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor instituționale la Universitatea de Stat din Florida.

Droguri

S-au cumpărat de la Sigma-Aldrich (St Louis, MO) butirat de sodiu (NaB) dizolvat în soluție salină și Trichostatin A (TSA) dizolvat în purtător de lichid cerebrospinal artificial (CSF, BioFluids, Rockville, MD). NaB a fost injectat intraperitoneal (ip) la o doză de 600 mg / kg, despre care se știe că induce acetilarea histonei în mai multe structuri ale creierului la șoareci^{43, 44}. În mod similar, intervalul de doză utilizat pentru TSA sa bazat pe activitatea anterioară determinând eficacitatea sa în inducerea evenimentelor locale de acetilare a histonului și a variațiilor expresiei genei la rozătoare^{19, 20}. Antagonistul selectiv al receptorului V1aR V1aRA, d(CH₂)₅[Tyr (Me)] AVP și antagonistul OTR (B), [d(CH₂)₅, Tyr (Me)², Thr⁴, Tyr-NH₂⁹] -OVT), au fost obținute de la Bachem (Torrance, CA). Un al doilea antagonist OTR mai selectiv, OTA (T), dGly-NH₂-d(CH₂)₅ [Tyr (Me)^{2, Thr4}] OVT⁴⁵, a fost oferită de dr. Maurice Manning (Universitatea din Toledo, OH). Acești antagoniști și doze utilizate au fost alese pe baza studiilor anterioare care demonstrează selectivitatea fie pentru V1aR, fie pentru OTR^{35, 39, 46-49}.

Canulație stereotaxică și microinjecție

Femelele au fost anesteziate cu pentobarbital de sodiu (greutatea corporală 1mg / 10g), iar canulele de ghidare din oțel inoxidabil cu gabarit 26 (Plastics One, Roanoke, VA) au fost implantate stereotaxic, orientate spre ventriculul lateral (unilateral, bara nas la -2.5 mm, 0.6 mm (1.0 mm lateral și 2.6 mm ventral până la bregma) sau localizate în mod specific la NAcc (bilateral, bara nasului la -2.5 mm, 1.7 mm rostral, ± 1.0 mm bilateral și 4.5 mm ventral la bregma). După zilele 3 de recuperare, subiecții au primit microinjecții de CSF sau CSF conținând concentrații diferite de TSA. Când au fost utilizați antagoniști selectivi pentru OTR sau V1aR, au fost injectați 30 minute înainte de TSA. Au fost efectuate injecții cu un ac gabarit 33 care a extins 1 mm sub canula de ghidare în zona țintă, într-un volum de injecție de 500 nL în ventriculul lateral (ICV.) sau 200 nL pe fiecare parte în NAcc. Acul a fost conectat la o seringă Hamilton (Hamilton, Reno, NV) prin tubulatura din polietilenă-20 și depresiunea pistonului a fost efectuată încet, necesitând un minut 1 per injecție. La sfârșitul experimentului, toți subiecții au fost sacrificați prin decapitare rapidă și creierul extras pentru a verifica amplasarea canulelor de către un observator orb în condiții experimentale. Subiecții cu canulee rătăcite au fost excluse din analiza datelor.

Coabitare și test de preferință pentru parteneri

Urmează imediat ip., ICV. sau injectări intra-NAcc de medicamente, femelele au fost conviețuite cu un bărbat timp de ore 6 fără împerechere. Absența de împerechere a fost verificată prin examinarea comportamentului înregistrat video. Pentru investigarea neuroadaptărilor declanșate prin conviețuire cu femele împerecheate, cu estrogen (2μg pe zi, ip., pentru zilele 3) au fost co-habitat cu un bărbat în timpul orelor 6 sau 24 și a fost verificată prezența împerecherii a posteriori pe bandă video (variind de la 6 la 11 în timpul primelor 6 ore de conviețuire).

Testul de preferință a partenerului a fost efectuat imediat după conviețuirea 6-oră, așa cum a fost descris anterior¹¹. Pe scurt, aparatul de testare cu trei camere a constat dintr-o cușcă neutră conectată la două cuști identice paralele, fiecare adăpostind un animal de stimulare - un „străin” masculin necunoscut sau un „partener” masculin familiar folosit în perioada de coabitare. Subiecții de sex feminin au fost liberi să se deplaseze în tot aparatul în timpul testării de 3 ore, iar bărbații de stimul au fost legați în cuști, fără a permite contactul direct unul cu celălalt. Întreaga sesiune a fost înregistrată video și durata contactului subiect alături de partener sau de străin a fost cuantificată ulterior de un experimentator instruit, care nu știa grupurile biologice. O preferință de partener a fost definită ca subiecții care petrec mult mai mult timp în contactul corporal cu partenerul față de străin, așa cum este determinat de t-Test. În plus, aparatul cu trei camere a fost echipat cu senzori de fotobeam, permițând determinarea activității locomotorii indicată de numărul de intrări ale femeii în camerele de stimulare. Acest scor locomotor ne permite astfel să controlam efectele secundare ale medicamentelor asupra comportamentului femelelor, cum ar fi activitatea generală, anxietatea sau explorarea modificată a unui mediu nou, așa cum este frecvent utilizat de grupul nostru și de alții¹².

ARN și extracția proteinelor

Femelele au fost sacrificate prin decapitare rapidă, iar creierul a fost imediat extras și înghețat pe gheață uscată. Secțiunile coronale (200 μm) au fost tăiate pe un criostat și îngheț montate pe diapozitive cu microscop. Au fost luate pumnii de țesut biliară cu un diametru 1 mm din întregul NAcc și caudate putamen, acesta din urmă fiind o zonă de control și depozitat la -80 ° C până la procesare. ARN-ul total și proteinele au fost extrase utilizând protocolul TRI-reactiv conform instrucțiunilor producătorului (Molecular Research Center, Cincinnati, OH).

Analiza expresiei proteinei prin Western blot

După separarea pe un gel de poliacrilamidă 10% (15% pentru histone), proteinele au fost transferate pe o membrană de nitroceluloză și incubate cu următorii anticorpi primari: anti-OTR (sc-8102, 1: 1000), V1aR (sc- 18096: 1), -D500R (sc-1, 33660: 1), -D1000R (sc-2, 9113: 1, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), actin (A1000, 2066: 1, Sigma Aldrich. St Louis, MO) sau anti-acetil histon H1000 (Lys3, # 14-06, 911: 1) și total H1000 (# 3-05, 928: 1, Millipore, Temecula, CA). Toți anticorpii sunt valabili pentru utilizarea lor la oameni, șobolani și șoareci, cu care prairie voles împărtășesc procentaje ridicate de omologie (variind de la 1000 la 81%). După hibridizarea cu un anticorp secundar conjugat cu HRP, membranele au fost descoperite cu ECL (substrat ECL SuperSignal West Dura, Pierce Biotechnologies, Rockford, IL) și expuse pe filmul Fuji XAR (Fuji Film, Tokyo, Japonia). Cuantificarea a fost efectuată utilizând software-ul AIS 96 Image (Imaging Research, St. Catharines, Ontario, Canada) și toate semnalele au fost normalizate în aceeași membrană cu actina, cu excepția semnalului acetil-H6.0 care a fost normalizat la semnalul histonei H3 total. Datele normalizate sunt apoi exprimate ca procent din animalele tratate cu CSF.

Reacția în lanț polimerazică în timp real semi-cantitativă (RT-PCR)

Au fost procesate 0.5 pg de ARN total pentru sinteza ADN complementară și apoi analizate așa cum s-a descris mai înainte⁵⁰ cu normalizare la gena din nicotinamidadinin dinucleotiddehidrogenază (NADH). Toate reacțiile au fost efectuate în triplicate și specificitatea lor a fost verificată prin analiza curbei de topire și separarea pe un gel de agaroză 2%. Secvențele de primeri utilizate au fost după cum urmează: 5'-TCCAAGGCCAAAATCCGCACGG-3 '(Fwd) și 5'-GGCAGAAGCTTCCTTGGGCGC-3' (Rev) pentru OTR, 5'-GAGGTGAACAATGGCACTAAAACC-3 '(For) și 5'-CCAGATGTGGTAGCAGATGAAGC- 3' (Rev) pentru AVP1aR, 5'- TTAACAACAATGGGGCTGTG-3 '(For) și 5'-GGCATGAGGGATCAGGTAAA-3' (Ap) pentru D1R, 5'-GTGAAGGCGCTGTAGAGGAC-3 '(For) și 5'-CGGTGTGTTCATCATCTGCT-3' (Rev ) pentru D2R și 5'-CTATTAATCCCCGCCTGACC-3 '(For) și 5'-GGAGCTCGATTTGTTTCTGC-3' (Rev) pentru NADH. Datele normalizate sunt exprimate ca procent din animalele tratate cu CSF.

Immunoprecipitarea cromatinei

Histon H3 acetilarea (Lys14) în panglici de țesut NACc și caudate putamen a fost analizată utilizând Magna Chip Protein G Tissue Kit (Millipore, Temecula, CA) urmând instrucțiunile producătorului. Pe scurt, după reticularea cu 1% formaldehidă, cromatina a fost forfecată folosind un Misonix XL-2000 la fragmente de 200-600 bp. Imunoprecipitarea histonei acetilate H3 (Lys14) a fost apoi realizată cu 10pg de anticorp anti-acetil-H3 (Lys14) (Millipore) peste noapte la 4 ° C. După spălări, eluarea din granule și inversarea legăturii reticulare, ADN imunoprecipitat a fost purificat și analizat triplicat prin RT-PCR pe o platformă iCycler (vezi mai sus) cu o curbă standard internă realizată din probe INPUT colectate. Primerii au fost proiectați pentru a amplifica o regiune lungă 236 bp localizată 128 bp în amonte de primul cod de exon pentru precursorul de precursor OTR (OXTR, Aderarea Genbank #AF079980) sau 192 regiune lungă bp localizată 141 bp în amonte de primul cod de exon pentru preiul V1aR (avpr1a, Aderarea Genbank #AF069304). Secvențele au fost după cum urmează: 5'-CTCCGGAGCCGGGGCTAAGT-3 '(Fwd) și 5'-ACCGCTTCCCCGAGAGTAGGG-3' (Rev) pentru OXTR, și 5'-GGTGGACCAGCCAGACCCCA-3 '(Fwd) și 5'-TGCAGAGCCAGGCGCTTTCC-3' (Rev) pentru avpr1a. Fiecare probă a fost normalizată prin valoarea INPUT corespunzătoare, iar datele sunt apoi exprimate ca procent din animalele tratate cu CSF.

Analiza statistică și prelucrarea datelor

Pentru analizele de preferință ale partenerilor, animalele care au prezentat comportamente de împerechere în timpul perioadei de coabitare sau cu canulee necorespunzătoare au fost excluse. Pentru toate celelalte analize moleculare, un maxim de un punct de date per grup biologic a fost exclus atunci când a fost identificat ca depășire. Majoritatea experimentelor au fost reproduse, cu excepția cazului în care rezultatele au fost foarte clare. Timpul petrecut în contactul lateral cu oricare dintre animalele de stimulare în timpul testului de preferință a partenerului a fost analizat cu un pereche dublu t-Test. Scorurile de locomoție au fost analizate utilizând un dispozitiv cu două coți t-test (pentru două grupe) sau un ANOVA cu o singură cale (pentru mai mult de două grupuri) și, după caz, PLSD al lui Fischer post-hoc au fost efectuate teste cu un prag de semnificație de P <0.05. După verificarea normalității, toate celelalte date au fost analizate cu două cozi t- presupunând variante egale sau inegale testate în prealabil. Toate analizele statistice au fost efectuate utilizând software-ul StatView (Institutul SAS). Atunci când datele sunt standardizate la controalele lor (% din CSF, salină sau grupuri de împerechere), analizele statistice au fost efectuate pe baza datelor brute.

Material suplimentar

1

Faceți clic aici pentru a vizualiza.^{(979K, pdf)}

recunoasteri

Această lucrare a fost susținută de către Institutul Național de Sănătate Mintală (NIMH) acordă MHR21-083128 la MK și ZW și MHR01-058616 la ZW Îi mulțumim, de asemenea, dr. Maurice Manning pentru darul generos al OTA antagonist OTA (T).

Note de subsol

Conflictul de interes: Autorii nu declară nici un conflict de interese.

Contribuția autorului

HW, FD și YL au efectuat experimentele. HW și FD au analizat datele. HW, FD, ZW și MK au proiectat studiul. FD, ZW și MK au scris hârtia. Toți autorii au discutat rezultatele și au comentat manuscrisul.

Referinte

1. Bora E, Yucel M, Allen NB. Neurobiologia comportamentului uman afilitiv: implicații pentru tulburările psihiatrice. Opinia curentă în psihiatrie. 2009; 22: 320-325. [PubMed]

2. Thomas JA, Birney EC. Sistemul de îngrijire parentală și de împerechere a preierului (Microtus ochrogaster) Ecologie comportamentală și sociobiologie. 1979; 5: 171-186.

3. Getz LL, Hofmann JE. Organizarea socială în voie, care trăiește liber, (Microtus ochrogaster) Ecologie comportamentală și sociobiologie. 1986; 18: 275-282.

4. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Dezvoltarea preferințelor partenerului la prerile de sex feminin (Microtus ochrogaster): Rolul experienței sociale și sexuale. Hormoni și comportament. 1992; 26: 339-349. [PubMed]

5. Young KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. Neurobiologia lipirii perechilor: Perspective de la un rozătoare social-monogamă. Frontiere în neuroendocrinologie. 2011; 32: 53-69. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

6. Liu Y, Curtis JT, Wang Z. Vasopresina în septul lateral reglează formarea legăturii perechilor la preleuri de sex masculin (Microtus ochrogaster) Neuroscience comportamentale. 2001; 115: 910-919. [PubMed]

7. Lim MM, Young LJ. Circuitele neuronale dependente de vasopresină care stau la baza formării legăturilor pereche în preul monogam. Neuroscience. 2004; 125: 35-45. [PubMed]

8. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oxitocina și dopamina interacționează pentru a regla formarea legăturilor perechilor în preleiul de sex feminin. Neuroscience. 2003; 121: 537-544. [PubMed]

9. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Receptorii dopaminici D2 în nucleul accumbens sunt importanți pentru atașarea socială în preleiul femeilor volare (Microtus ochrogaster) Neuroștiințe comportamentale. 2000; 114: 173-183. [PubMed]

10. Aragona BJ, și colab. Nucleus accumbens dopamine mediază diferențiat formarea și menținerea legăturilor de perechi monogame. Nat Neurosci. 2006; 9: 133-139. [PubMed]

11. Liu Y și colab. Nucleus accumbens dopamine mediază deteriorarea indusă de amfetamină a legăturilor sociale într-o specie monogamă de rozătoare. Procesele Academiei Naționale de Științe. 2010; 107: 1217-1222. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

12. Keebaugh AC, Young LJ. Creșterea expresiei receptorului de oxitocină în nucleul accumbens al preliverilor pre-pubertali prelee de sex feminin îmbunătățește capacitatea de reacție aloparentală și formarea preferințelor partenerului ca adulți. Hormoni și comportament. 2011; 60: 498-504. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

13. Ross HE, și colab. Variația densității receptorilor de oxitocină în nucleul acumbens are efecte diferențiate asupra comportamentelor afiliative ale voleselor monogame și poligamice. Jurnalul de Neuroștiințe. 2009; 29: 1312-1318. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

14. Pitkow LJ, și colab. Facilitarea afilierii și formarea de legături perechi prin transferul genei receptorilor de vasopresină în fruntea ventrală a unui volei monogame. Jurnalul de Neuroștiințe. 2001; 21: 7392-7396. [PubMed]

15. Veenema AH. Către înțelegerea modului în care experiențele sociale de la începutul vieții alterează comportamentele sociale reglementate de oxitocină și vasopressin. Hormoni și comportament. 2012; 61: 304-312. [PubMed]

16. Francis DD, Young LJ, Meaney MJ, Insel TR. Diferențele naturale care apar în îngrijirea maternă sunt asociate cu expresia receptorilor de oxitocină și vasopresină (V1a): diferențe de gen. Jurnalul de Neuroendocrinologie. 2002; 14: 349-353. [PubMed]

17. Champagne FA, și colab. Asistența maternă asociată cu metilarea promotorului receptorului estrogen-a1b și a expresiei receptorului estrogen-a în zona preoptică mediană a descendenților de sex feminin. Endocrinologie. 2006; 147: 2909-2915. [PubMed]

18. Murgatroyd C, și colab. Programele de metilare dinamice ADN persistă efecte adverse ale stresului timpuriu. Nat Neurosci. 2009; 12: 1559-1566. [PubMed]

19. Weaver ICG, și colab. Programarea epigenetică prin comportamentul matern. Nat Neurosci. 2004; 7: 847-854. [PubMed]

20. Weaver ICG, Meaney MJ, Szyf M. Efectele maternității asupra transcripțiului hipocampal și a comportamentelor mediate de anxietate la descendenții care sunt reversibile la vârsta adultă. Proceedings of the National Academy of Sciences din Statele Unite ale Americii. 2006; 103: 3480-3485. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

21. Bonthuis PJ, Patteson JK, Rissman EF. Achiziționarea receptivității sexuale: roluri de acetilare a cromatinei, receptorul estrogen-α și hormonii ovarieni. Endocrinologie. 2011; 152: 3172-3181. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

22. Zhong S, Fields CR, Su N, Pan YX, Robertson KD. Inhibarea farmacologică a modificărilor epigenetice, cuplată cu profilarea expresiei genetice, dezvăluie obiective noi de metilare a ADN aberant și deacetilare a histonei în cancerul pulmonar. Oncogene. 2007; 26: 2621-2634. [PubMed]

23. Yoshida M, Horinouchi S, Beppu T. Trichostatina A și trapoxină: noi probe chimice pentru rolul de acetilare a histonei în structura și funcția cromatinei. BioEssais. 1995; 17: 423-430. [PubMed]

24. Monneret C. inhibitori ai deacetilazei histonei. Jurnalul European de Medicină Chimie. 2005; 40: 1-13. [PubMed]

25. Ross HE, și colab. Caracterizarea sistemului de oxitocină care reglează comportamentul afiliativ la femeile prerie de sex feminin. Neuroscience. 2009; 162: 892-903. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

26. Young LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Diferențe de specie în exprimarea genei receptorului de oxitocină centrală: Analiza comparativă a secvențelor de promotor. Jurnalul de Neuroendocrinologie. 1996; 8: 777-783. [PubMed]

27. Witt O, Deubzer HE, Milde T și Oehme I. Familia HDAC: Care sunt țintele relevante pentru cancer? Scrisori de Rac. 2009; 277: 8-21. [PubMed]

28. Vecsey CG, și colab. Histone inhibitorii deacetilazei Îmbunătățește memoria și plasticitatea sinaptică prin CREB: activarea transcripțională dependentă de CBP. Jurnalul de Neuroștiințe. 2007; 27: 6128-6140. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

29. Monsey MS, Ota KT, Akingbade IF, Hong ES, Schafe GE. Modificările epigenetice sunt critice pentru consolidarea memoriei de frică și plasticitatea sinaptică în amigdala laterală. Plus unu. 2011; 6: e19958. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

30. Van Lint C, Emiliani S, Verdin E. Expresia unei mici fracțiuni de gene celulare se modifică ca răspuns la hiperacetilarea histonei. Expresia genelor. 1996; 5: 245-253. [PubMed]

31. Mariadason JM, Corner GA, Augenlicht LH. Reprogramarea genetică în căile de maturare a celulelor colonice induse de acizii grași cu lanț scurt: comparație cu trichostatina A, Sulindac și curcumina și implicațiile pentru chemoprevenirea cancerului de colon. Cancer Research. 2000; 60: 4561-4572. [PubMed]

32. Halsall J, Gupta V, O'Neill LP, Turner BM, Nightingale KP. Genele sunt adesea protejate de hiperacetilarea globală a histonei indusă de inhibitorii HDAC. Plus unu. 2012; 7: e33453. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

33. Ito K, Adcock I. Acetilarea histonei și deacetilarea histonei. Biotehnologie moleculară. 2002; 20: 99-106. [PubMed]

34. Molfese DL. Dezvoltarea neuroștiinței prin epigenetică: mecanisme moleculare ale învățării și memoriei. Dezvoltarea neuropsihologie. 2011; 36: 810-827. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

35. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Mecanismele celulare ale atașamentului social. Hormoni și comportament. 2001; 40: 133-138. [PubMed]

36. Hawk JD, Florian C, Abel T. Inhibarea intrahipocampală post-antrenament a histonei deacetilaze de clasă I îmbunătățește memoria pe termen lung a localizării obiectelor. Învățare și memorie. 2011; 18: 367-370. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

37. Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modularea memoriei pe termen lung pentru recunoașterea obiectului prin inhibarea HDAC. Procesele Academiei Naționale de Științe. 2009; 106: 9447-9452. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

38. Yang XJ, Seto E. Acetilarea lizinei: Crosstalk codificat cu alte modificări posttranslaționale. Molecular Cell. 2008; 31: 449-461. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

39. Cho MM, DeVries AC, Williams JR, Carter CS. Efectele oxitocinei și vasopresinei asupra preferințelor partenerului la prerile de sex masculin și feminin (Microtus ochrogaster) Neuroștiințe comportamentale. 1999; 113: 1071-1079. [PubMed]

40. Insel TR, Hulihan TJ. Un mecanism specific genului pentru legarea perechilor: Oxytocina și formarea preferinței partenerului în voile monogame. Neuroștiințe comportamentale. 1995; 109: 782-789. [PubMed]

41. Stimson L, La Thangue NB. Biomarkeri pentru estimarea răspunsurilor clinice la inhibitorii HDAC. Cancer Letters. 2009; 280: 177-183. [PubMed]

42. Iannitti T, Palmieri B. Aplicații clinice și experimentale ale fenilbutiratului de sodiu. Droguri în cercetare și dezvoltare. 2011; 11: 227-249. [Articol gratuit PMC] [PubMed]

43. Kumar A, și colab. Remodelarea cromatinei este un mecanism cheie care stă la baza plasticității induse de cocaină în Striatum. Neuron. 2005; 48: 303-314. [PubMed]

44. Schroeder FA, Lin CL, Crusio WE, Akbarian S. Efecte asemănătoare antidepresive ale inhibitorului histone deacetilazelor, butirat de sodiu, la șoarece. Biologie psihiatrie. 2007; 62: 55-64. [PubMed]

45. Manning M, și colab. Antagoniști și antagoniști peptidici și nepeptidici pentru receptorii vasopresin și oxitocină V1a, V1b, V2 și OT: instrumente de cercetare și potențiali agenți terapeutici. În: Inga DN, Rainer L, editori. Progresele în cercetarea creierului. Elsevier; 2008. pp. 473-512. [PubMed]

46. Witt DM, Insel TR. Un antagonist selectiv de oxitocină atenuează facilitarea progesteronului a comportamentului sexual feminin. Endocrinologie. 1991; 128: 3269-3276. [PubMed]

47. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Un rol pentru vasopresina centrală în legarea perechilor în preleuri monogame prele. Natură. 1993; 365: 545-548. [PubMed]

48. Insel T. Oxitocina - o neuropeptidă pentru afiliere: dovezi din studii comportamentale, autoradiografice ale receptorilor și studii comparative. Psihoneuroendocrinologie. 1992; 17: 3–35. [PubMed]

49. Insel T, Wang Z, Ferris C. Modele de distribuție a receptorilor vasopresinei cerebrale asociate cu organizarea socială a rozătoarelor microintești. Jurnalul de Neuroștiințe. 1994; 14: 5381-5392. [PubMed]

50. Hollis F, Duclot F, Gunjan A, Kabbaj M. Diferențe individuale în efectul înfrângerii sociale asupra anhedoniei și acetilarea histonei la hipocampul de șobolan. Hormoni și comportament. 2011; 59: 331-337. [Articol gratuit PMC] [PubMed]