La metanfetamina actúa en subpoblaciones de neuronas que regulan el comportamiento sexual en ratas macho (2010)

Neurociencia. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Ene 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, RA sabio, Lehman MN, Coolen LM.

Source

Departamento de Anatomía y Biología Celular, Escuela Schulich de Medicina y Odontología, Universidad de Western Ontario, Londres, ON, Canadá, N6A 5C1.

Resumen

La metanfetamina (Meth) es un estimulante altamente adictivo. El abuso de metanfetamina se asocia comúnmente con la práctica de conductas de riesgo sexual y el aumento de la prevalencia de virus de inmunodeficiencia humana y los usuarios de Meth informan un aumento en el deseo sexual, la excitación y el placer sexual. La base biológica de este nexo fármaco-sexual es desconocida. El estudio actual demuestra que la administración de Meth en ratas macho activa las neuronas en las regiones cerebrales del sistema mesolímbico que están involucradas en la regulación del comportamiento sexual. Específicamente, Meth y el apareamiento co-activan las células en el núcleo y la capa del núcleo accumbens, la amígdala basolateral y la corteza cingulada anterior. Estos hallazgos ilustran que, en contraste con la creencia actual, las drogas de abuso pueden activar las mismas células que un reforzador natural, es decir, el comportamiento sexual y, a su vez, pueden influir en la búsqueda compulsiva de esta recompensa natural.

Palabras clave: núcleo accumbens, amígdala basolateral, corteza prefrontal, abuso de sustancias, reproducción, adicción

La motivación y la recompensa están reguladas por el sistema mesolímbico, una red interconectada de las áreas cerebrales comprendidas por el núcleo accumbens (NAc) del área ventral tegmental (ACV), la amígdala basolateral y la corteza prefrontal medial (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas y Volkow, 2005). Existe amplia evidencia de que el sistema mesolímbico se activa en respuesta a ambas sustancias de abuso (Di Chiara y Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) y comportamientos naturalmente gratificantes como el comportamiento sexual (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). El comportamiento sexual masculino, y en particular la eyaculación, es altamente gratificante y reforzado en modelos animales. (Pfaus et al., 2001). Los roedores machos desarrollan una preferencia de lugar condicionada (CPP) a la cópula (Agmo y Berenfeld, 1990, Martínez y Paredes, 2001, Tenk, 2008), y realizará tareas operantes para obtener acceso a una mujer sexualmente receptiva (Everitt et al., 1987, Everitt y Stacey, 1987). Las drogas de abuso también son gratificantes y de refuerzo, y los animales aprenderán a autoadministrarse sustancias de abuso, incluidos opiáceos, nicotina, alcohol y psicoestimulantes (Sabio, 1996, Pierce y Kumaresan, 2006, Feltenstein y See, 2008). Aunque se sabe que tanto las drogas de abuso como el comportamiento sexual activan las áreas mesolímbicas del cerebro, actualmente no está claro si las drogas de abuso influyen en las mismas neuronas que median el comportamiento sexual.

Los estudios electrofisiológicos han demostrado que tanto los alimentos como la cocaína activan las neuronas en el NAc. Sin embargo, los dos refuerzos no activan las mismas células dentro de la NAc. (Carelli et al., 2000, Carelli y Wondolowski, 2003). Además, la autoadministración de alimentos y sacarosa no causa alteraciones a largo plazo de las propiedades electrofisiológicas como las que induce la cocaína (Chen et al., 2008). En contraste, una colección de evidencia sugiere que la conducta sexual masculina y las drogas de abuso podrían actuar en las mismas neuronas mesolímbicas. Los psicoestimulantes y los opioides alteran la expresión del comportamiento sexual en ratas macho (Mitchell y Stewart, 1990, Fiorino y Phillips, 1999a, Fiorino y Phillips, 1999b). Los datos recientes de nuestro laboratorio mostraron que la experiencia sexual altera la capacidad de respuesta a los psicoestimulantes, como lo demuestra una respuesta locomotora sensibilizada y una percepción de recompensa sensibilizada a la d-anfetamina en animales con experiencia sexual (Lanzadores et al., 2009). Previamente se observó una respuesta similar con la exposición repetida a la anfetamina u otras drogas de abuso. (Lett, 1989, Shippenberg y Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren y Kalivas, 2000). Juntos, estos hallazgos sugieren que el comportamiento sexual y las respuestas a las drogas de abuso están mediadas por las mismas neuronas en el sistema mesolímbico. Por lo tanto, el primer objetivo del presente estudio es investigar la activación neural del sistema mesolímbico mediante el comportamiento sexual y la administración de drogas en el mismo animal. En particular, probamos la hipótesis de que el psicoestimulante, la metanfetamina (Meth), actúa directamente sobre las neuronas que normalmente median el comportamiento sexual.

Meth es una de las drogas ilícitas más consumidas en el mundo (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) ay se ha relacionado con frecuencia con el comportamiento sexual alterado. Curiosamente, los usuarios de Meth reportan un mayor deseo sexual y excitación, así como un mayor placer sexual (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Además, El abuso de metanfetamina se asocia comúnmente con el comportamiento sexual compulsivo (Rawson y otros, 2002). Los usuarios a menudo informan que tienen numerosas parejas sexuales y tienen menos probabilidades de usar protección que otros drogadictos (Somlai et al., 2003, Springer y otros, 2007). Desafortunadamente, los estudios que indican que el uso de Meth como predictor del comportamiento sexual de riesgo son limitados, ya que se basan en informes personales no confirmados (Elifson et al., 2006). Por lo tanto, se requiere una investigación sobre la base celular de los cambios inducidos por Meth en el comportamiento sexual en un modelo animal para comprender este complejo nexo entre la droga y el sexo.

En vista de la evidencia descrita anteriormente que sugiere que las drogas de abuso, y en particular la Meth, pueden actuar sobre las neuronas que normalmente participan en la mediación del comportamiento sexual, el objetivo del presente estudio fue investigar la activación neural por el comportamiento sexual y la administración del psicoestimulante Meth. Este estudio implementó una técnica neuroanatómica, que utiliza la visualización inmunohistoquímica de los genes tempranos inmediatos Fos y la Mapa Cinasa fosforilada (pERK) para detectar la activación neural concurrente por el comportamiento sexual y Meth, respectivamente. Fos solo se expresa dentro del núcleo de las células, con un nivel de expresión máximo de 30-90 minutos después de la activación de la neurona. Existe amplia evidencia de que la actividad sexual induce la expresión de Fos en el cerebro (Pfaus y Heeb, 1997, Veening y Coolen, 1998), incluido el sistema mesocorticolímbico (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). También hay evidencia de que las drogas de abuso inducen la expresión pERK en el sistema mesocorticolímbico (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). En contraste con la expresión de Fos, la fosforilación de ERK es un proceso altamente dinámico y solo ocurre 5 – 20 minutos después de la activación neuronal. Los distintos perfiles temporales de Fos y pERK los convierten en un conjunto ideal de marcadores para la activación neuronal posterior mediante dos estímulos diferentes.

PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES

Materias

Ratas macho adultas Sprague Dawley (210-225 g) obtenidas de Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canadá) se alojaron dos por jaula en jaulas de plexiglás estándar (jaulas de origen). La sala de animales se mantuvo en un ciclo de luz invertido 12 / 12 h (las luces se apagaron en 10.00 h). Comida y agua estaban disponibles. ad libitum. Todas las pruebas se realizaron durante la primera mitad de la fase oscura con iluminación roja tenue. Las hembras de estímulo utilizadas para el comportamiento sexual fueron ovariectomizadas bilateralmente bajo anestesia profunda (13 mg / kg de ketamina y 87 mg / kg de xilazina) y recibieron un implante subcutáneo que contenía 5% de benzoato de estradiol (EB) y 95% de colesterol. La receptividad sexual se indujo mediante la administración subcutánea (sc) de 500 μg de progesterona en 0.1 ml de aceite de sésamo 4 h antes de la prueba. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Cuidado de Animales en la Universidad de Western Ontario y se ajustan a las pautas delineadas por el Consejo Canadiense de Cuidado de Animales.

Diseños experimentales

Experimentos 1 y 2: A las ratas macho (n = 37) se les permitió aparearse con una hembra receptiva a una eyaculación (E) o para 30 min, lo que llegó primero en jaulas de prueba limpias (60 × 45 × 50 × XNUMX cm) durante cinco veces -Se realizan sesiones de apareamiento antes de la prueba, para obtener experiencia sexual. Durante las últimas dos sesiones, se registraron todos los parámetros estándar para el desempeño sexual, incluyendo: latencia de la montura (ML; tiempo desde la introducción de la hembra hasta la primera montura), latencia de intromisión (IL; tiempo desde la introducción de la hembra hasta la primera montura con penetración vaginal), latencia de la eyaculación (EL; tiempo desde la primera intromisión a la eyaculación), intervalo posterior a la eyaculación (PEI; tiempo desde la eyaculación hasta la primera intromisión subsiguiente), número de monturas (M) y número de intromisiones (IM) (Agmo, xnumx). Todos los machos recibieron 1 ml / kg de inyección diaria de 0.9% NaCl (solución salina; sc) 3 días consecutivos antes del día de la prueba, por habituación a la manipulación e inyecciones. Un día antes del día de la prueba, todos los machos fueron alojados solos. En varones experimentados, Fos puede ser inducido por señales contextuales condicionadas asociadas con la experiencia sexual previa (Balfour et al, 2004). Por lo tanto, todas las manipulaciones de apareamiento y control durante las pruebas finales se realizaron en la jaula de la casa (evitar las señales condicionadas predictivas) para evitar la activación inducida por la señal condicionada en los machos de control sin apareamiento. Los machos se distribuyeron en ocho grupos experimentales que no difirieron en ninguna medida del rendimiento sexual durante las dos últimas sesiones de apareamiento (datos no mostrados). Durante la prueba final, a los hombres se les permitió aparearse en la jaula de su casa hasta que mostraron una eyaculación (sexo) o no recibieron pareja femenina (no sexo). Todos los machos apareados se perfundieron 60 minutos después del inicio del apareamiento para permitir el análisis de la expresión de Fos inducida por el apareamiento. Los varones recibieron una inyección de 4 mg / kg Meth o 1 ml / kg de solución salina (sc) (n = 4 cada uno), ya sea 10 (experimento 1) o 15 (experimento 2) min antes de la perfusión, para el análisis de la fosforilación inducida por fármacos de MAP quinasa. La dosis y el tiempo antes de la perfusión se basaron en informes anteriores (Choe et al., 2002, Choe y Wang, 2002, Chen y Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Los grupos de control incluyeron machos que no se aparearon, pero recibieron Meth 10 (n = 7) o 15 (n = 5) min antes del sacrificio, o inyecciones de solución salina 10 (n = 5) o 15 (n = 4) min antes del sacrificio . Después del sacrificio, los cerebros fueron procesados ​​para inmunohistoquímica.

Experimento 3: dado que se utilizó una dosis alta de Meth en los experimentos 1 y 2, se realizó un experimento neuroanatómico adicional para investigar si el comportamiento sexual y una dosis más baja de Meth inducen patrones dependientes de la dosis de activación neuronal superpuesta. Este estudio se llevó a cabo de manera idéntica a los experimentos 1 y 2. Sin embargo, en la prueba final, los grupos apareados y no apareados (n = 6 cada uno) recibieron 1 mg / kg Meth (sc) 15 min antes del sacrificio.

Experimento 4: para probar si la activación neural causada por el sexo y Meth es específica para Meth, este experimento investigó si se podrían observar patrones similares de activación neural superpuesta con la psicoestimulante d-anfetamina (Amph). Este experimento se llevó a cabo de manera idéntica a los experimentos 1 y 2. Sin embargo, en la prueba final, a los hombres se les administró Amph (5 mg / kg) o solución salina (1 mg / kg) (sc) 15 min antes del sacrificio (n = 5 cada uno). Los machos sin apareamiento de control recibieron solución salina o Amph 15 minutos antes del sacrificio. Se proporciona una descripción general de los grupos experimentales utilizados en los experimentos 1 – 4 en Tabla 1.

Tabla 1      

Visión general de los grupos experimentales incluidos en los experimentos 1 – 4.

Preparación del tejido

Los animales se anestesiaron con pentobarbital (270 mg / kg; ip) y se perfundieron transcardialmente con 5 ml de solución salina, seguido de 500 ml de paraformaldehído 4 en tampón fosfato 0.1 M (PB). Los cerebros se retiraron y se fijaron posteriormente para 1 h a temperatura ambiente en el mismo fijador, luego se sumergieron en 20% de sacarosa y 0.01% de sodio azida en 0.1 M PB y se almacenaron a 4 ° C. Se cortaron secciones coronales (35 μm) en un microtomo de congelación (H400R, Micron, Alemania), se recogieron en cuatro series paralelas en solución crioprotectora (30% de sacarosa y 30% de etilenglicol en 0.1 M PB) y se almacenaron a 20 ° C hasta más tratamiento.

Inmunohistoquímica

Todas las incubaciones se realizaron a temperatura ambiente con agitación suave. Las secciones de flotación libre se lavaron extensivamente con solución salina tamponada con fosfato 0.1 M (PBS) entre las incubaciones. Las secciones se incubaron en 1% H2O2 para 10 min, luego bloqueado en solución de incubación (PBS que contiene 0.1% de albúmina de suero bovino y 0.4% de Triton X-100) para 1 h.

PERK / FOS

El tejido se incubó durante la noche con un anticuerpo policlonal de conejo contra p42 y p44 map kinasas ERK1 y ERK2 (pERK; 1: 400 experimento 1, por ejemplo), por ejemplo: NNUMX y 19; Incubaciones de 1 h con IgG anti-conejo biotinilada (4.000: 2; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) y complejo de peroxidasa de rábano picante (ABC Elite; 3: 21; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Luego, el tejido se incubó durante 9101 min con tiramida biotinilada (BT; 1: 1 en PBS + 500% H2O2; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) y para 30 min con estrepavidina conjugada con Alexa 488 (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). A continuación, el tejido se incubó durante la noche con un anticuerpo policlonal de conejo contra c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), seguido de una incubación de 30 min con cabra anti-conejo Alexa 555 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Después de la tinción, las secciones se lavaron a fondo en 0.1 M PB, se montaron en portaobjetos de vidrio con 0.3% de gelatina en ddH20 y cubierto con un medio de montaje acuoso (Gelvatol) que contiene agente anti-desvanecimiento 1,4-diazabiciclo (2,2) octano (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Los controles inmunohistoquímicos incluyeron la omisión de uno o ambos anticuerpos primarios, lo que resultó en la ausencia de marcaje en la longitud de onda apropiada.

Análisis de Datos

Comportamiento sexual

Para los cuatro experimentos, los parámetros estándar para el rendimiento sexual se registraron como se describió anteriormente y se analizaron mediante el análisis de varianza (ANOVA). El análisis de los datos del comportamiento sexual durante el último día de la prueba no reveló diferencias significativas entre los grupos en ninguno de los parámetros de rendimiento sexual.

PERK / Fos Cell Counts

Se contaron células marcadas únicas y duales para Fos y pERK en los niveles caudales de subregiones de núcleo y concha NAc, amígdala basolateral (BLA), amígdala medial posterodorsal (MEApd), amígdala central (CeA), núcleo preóptico medial (MPN), posteromedial y Núcleo posterolateral del lecho de la estría terminal (BNSTpm y BNSTpl), y las subregiones del área cingulada anterior (ACA), prelímbica (PL) e infralímbica (IL) de la mPFC. Las imágenes se capturaron utilizando una cámara CCD enfriada (Microfire, Optronics) conectada a un microscopio Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Alemania) y el software Neurolucida (MicroBrightfield Inc) con ajustes de cámara fijos para todas las sujetos (utilizando los objetivos 10x). Usando el software neurolucida, las áreas de análisis se definieron en base a puntos de referencia (Swanson, 1998) Único para cada región del cerebro (ver Figura 1). Las áreas estándar de análisis se utilizaron en todas las áreas excepto el núcleo y la carcasa de NAc. En las últimas áreas, la expresión pERK y Fos no era homogénea y aparecía en patrones similares a parches. Por lo tanto, todo el núcleo y la envoltura se delinearon en base a puntos de referencia (ventrículo lateral, zona anterior, e islas de Calleja). Las áreas de análisis no difirieron entre los grupos experimentales, y fueron 1.3 mm2 en el núcleo y la concha de NAc. Las áreas estándar de análisis para las áreas restantes fueron: 1.6 mm2 En el BLA, 2.5 y 2.25 mm.2 en MEApd y CeA respectivamente, 1.0 mm2 en la MPN, 1.25 mm2 en las subregiones BNST y mPFC, y 3.15 mm2 en la vta. Se contaron bilateralmente dos secciones para cada región del cerebro por animal, y se calcularon el número de células marcadas simples y duales para pERK y Fos, así como los porcentajes de células pERK que expresaron el marcador Fos. Para los experimentos 1, 2 y 4, se compararon los promedios de los grupos utilizando ANOVA de dos vías (factores: apareamiento y fármaco) y LSD de Fisher para post hoc Comparaciones a un nivel de significancia de 0.05. Para el experimento 3, los promedios de los grupos se compararon utilizando pruebas t no pareadas en un nivel significativo de 0.05.

Figura 1      

Dibujos esquemáticos e imágenes que ilustran áreas del cerebro del análisis. Las áreas de análisis indicadas se basaron en puntos de referencia únicos para cada región del cerebro, no difirieron entre los grupos experimentales y fueron 1.25 mm2 en las subregiones mPFC (a), 1.3 mm2 en la ...

Imágenes

Imagenes digitales para Figura 3 fueron capturados usando una cámara CCD (DFC 340FX, Leica) conectada a un microscopio Leica (DM500B) y fueron importados al software Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Las imágenes no se alteraron de ninguna manera, excepto por el ajuste del brillo.

Figura 3      

Imágenes representativas de las secciones de NAc inmunoteñidas para Fos (rojo; a, d, g, j) y pERK (verde; b, e, h, k) de animales de cada grupo experimental: No Sex + Sal (a, b, c) , Sexo + Sal (d, e, f), No Sexo + Meth (g, h, i) y Sexo + Meth (j, k, l). Los paneles de la derecha son ...

RESULTADOS

Activación neural del sistema límbico por el comportamiento sexual y la administración de metanfetamina

Experimento 1: el análisis de células marcadas simples y duales para el FER inducido por el apareamiento y el pERK inducido por Meth en los machos que recibieron Meth 10 minutos antes del sacrificio reveló el Fos inducido por el apareamiento en el MPN, BNSTpm, núcleo y envoltura de NAc, BLA, VTA, y todas las subregiones de mPFC, de acuerdo con estudios previos que demuestran la expresión de Fos inducida por apareamiento en estas áreas (Baum y Everitt, 1992, Pfaus y Heeb, 1997, Veening y Coolen, 1998, Hull et al., 1999). La administración de metanfetamina 10 minutos antes del sacrificio pERK inducido en el núcleo y la cubierta de NAc, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl y regiones de mPFC, compatibles con los patrones de activación inducidos por otros psicoestimulantes (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Además, se observaron tres patrones de coexpresión de la activación neural por el comportamiento sexual y la metanfetamina: en primer lugar, se identificaron las áreas del cerebro donde el sexo y las drogas activaban poblaciones neurales no superpuestasTabla 2). Específicamente, en CeA, MEApd, BNSTpl y mPFC, aumentos significativos tanto en la pERK inducida por fármacos (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) como en la Fos inducida por el sexo (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16). Sin embargo, en estas regiones no hubo aumentos significativos en las neuronas de doble marcación en los machos apareados tratados con Meth. La única excepción fue el MEApd, donde se encontró un efecto del apareamiento en el número de células marcadas duales (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Sin embargo, no hubo un efecto general del tratamiento farmacológico y el etiquetado dual en los grupos tratados con Meth no fue significativamente mayor que en los grupos tratados con solución salina, por lo que no fue causado por el fármaco (Tabla 2). En segundo lugar, se identificaron áreas del cerebro donde la activación neural solo se indujo por el apareamiento (Tabla 3). Específicamente, la MPN, BNSTpm y VTA se activaron solo mediante el apareamiento, y contenían aumentos significativos en el Fos inducido por el apareamiento (F (1,16) = 14.99 – 248.99; p ≤ 0.001), pero no el pERK inducido por Meth.

Tabla 2      

Visión general de la expresión de pERK inducida por Fos y Meth inducida por el apareamiento en áreas del cerebro donde el sexo y las drogas activan poblaciones neurales no superpuestas.
Tabla 3      

Visión general de la expresión pERK inducida por Fos y Meth inducida por el apareamiento en áreas del cerebro donde la activación neural fue inducida solo por el apareamiento.

Finalmente, se encontraron áreas del cerebro donde el sexo y las drogas activaron poblaciones superpuestas de neuronas (Figura 2 y Y3) .3). En el núcleo y la cáscara de NAc, BLA y ACA, hubo efectos generales de apareamiento (F (1,16) = 7.87–48.43; p = 0.013- <0.001) y tratamiento con medicamentos (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), así como una interacción entre estos dos factores (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; sin interacción significativa en ACA) en el número de células que expresan ambos Fos inducido por apareamiento y pERK inducido por Meth. El análisis post hoc reveló que el número de neuronas marcadas duales fue significativamente mayor en los machos acoplados inyectados con Meth en comparación con los machos sin aparear tratados con Meth (p = 0.027- <0.001) o tratados con solución salina (p = 0.001- <0.001) apareados (Figura 2 y Y3) .3). Cuando los datos se expresaron como porcentajes de neuronas activadas por fármacos, 39.2 ± 5.3% en el núcleo de NAc, 39.2 ± 5.8% en la capa de NAc, 40.9 ± 6.3% en el BLA, y 50.0 ± 5.3% de neuronas ACA se activaron mediante tanto el apareamiento como la meth.

Figura 2      

Expresión de pERK inducida por Fos y Meth inducida por el sexo en las neuronas NAc, BLA y ACA 10 min después de la administración de 4 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) y células dobles (c, f, i, l) en el núcleo de NAc (a, ...

Una observación inesperada fue que el comportamiento sexual afectó el pERK inducido por Meth. Aunque Meth indujo significativamente los niveles de pERK en los grupos de Meth inyectados apareados y no apareados, en el NAc, BLA y ACA, el etiquetado de pERK fue significativamente menor en los machos inyectados con Meth en comparación con los machos inyectados con Meth no apareados (Figura 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Este hallazgo puede apoyar aún más la hipótesis de que el sexo y las drogas actúan sobre las mismas neuronas, pero también puede ser un indicio de alteraciones inducidas por el apareamiento en la captación de drogas o el metabolismo que a su vez causan respuestas neuronales alteradas a Meth. Para investigar si el comportamiento sexual causa un patrón temporal diferente de activación inducida por el fármaco, se tiñeron secciones de NAc, BLA y ACA para los machos sacrificados en un momento posterior (15 min) después de la administración del fármaco (experimento 2).

Experimento 2: El análisis de células marcadas simples y duales confirmó los hallazgos descritos anteriormente de que el comportamiento sexual y la posterior exposición a Meth 15 minutos antes del sacrificio dieron como resultado aumentos significativos de la inmunomarcación de Fos y pERK en el núcleo y la cubierta de NAc, BLA y ACA. Además, una coexpresión significativa de Fos inducida por el apareamiento y pERK inducida por Meth se encontraron de nuevo en estas áreas (Figura 4; efecto de apareamiento: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; efecto de la droga: F (1,12) = 14.11–54.41; p = 0.003- <0.001). El número de neuronas marcadas de forma dual en los machos acoplados inyectados con Meth fue significativamente mayor en comparación con los machos sin aparear tratados con Meth (p <0.001) o tratados con solución salina (p <0.001) sin aparear. Cuando los datos se expresaron como porcentajes de neuronas activadas por fármacos, 47.2 ± 5.4% (núcleo NAc), 42.7 ± 7.6% (capa NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) y 59.5 ± 5.1% (ACA) de neuronas activadas por apareamiento también fueron activados por Meth. Además, la pERK inducida por fármacos no difirió entre los animales apareados y no apareados (Figura 4b, e, h, k), en todas las áreas excepto en el ACA (p <0.001). Estos datos indican que el comportamiento sexual de hecho causa una alteración del patrón temporal de inducción de pERK por Meth.

Figura 4      

Expresión de pERK inducida por Fos y Meth inducida por el sexo en las neuronas NAc, BLA y ACA 15 min después de la administración de 4 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) y células dobles (c, f, i, l) en el núcleo de NAc (a, ...

Activación neural después del comportamiento sexual y 1 mg / kg Meth

Hasta ahora, los resultados revelaron que el comportamiento sexual y 4 mg / kg Meth activaban poblaciones superpuestas de neuronas en el núcleo y la cubierta de NAc, BLA y ACA. To investigue la influencia de la dosificación del fármaco en este solapamiento en la activación, los patrones de activación neural también se estudiaron utilizando una dosis más baja de Meth. El núcleo y la carcasa de NAc, BLA y ACA se analizaron para determinar la activación inducida por el sexo y Meth. De hecho, el comportamiento sexual y la posterior exposición a Meth resultaron en aumentos significativos del inmolabeling de Fos y pERK en las subregiones de núcleo y concha de NAc, el BLA, así como en las neuronas en la región ACA del mPFC (Figura 5). Curiosamente, la dosis más baja de Meth dio lugar a números similares de neuronas marcadas con pERK como las inducidas por 4 mg / kg de Meth en las cuatro regiones del cerebro analizadas. Más importante aún, el núcleo y la carcasa de NAc, BLA y ACA mostraron aumentos significativos en el número de celdas etiquetadas dobles (Figura 5c, f, i, l) en comparación con los machos sin pareja inyectados con Meth (p = 0.003- <0.001). Cuando los datos se expresaron como porcentajes de neuronas activadas por fármacos, 21.1 ± 0.9% y 20.4 ± 1.8% en el núcleo y capa de NAc respectivamente, 41.9 ± 3.9% en el BLA y 49.8 ± 0.8% de las neuronas ACA se activaron por sexo y Meth.

Figura 5      

Expresión de pERK inducida por Fos y Meth inducida por el sexo en las neuronas NAc, BLA y ACA 15 min después de la administración de 1 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) y células dobles (c, f, i, l) en el núcleo de NAc (a, ...

Activación neural después del comportamiento sexual y la administración de d-anfetamina

Para probar si los resultados anteriores fueron específicos para Meth, se realizó un experimento adicional para estudiar la activación neuronal inducida por apareamiento y Amph. El análisis de células marcadas simples y duales para pERK y Fos mostró que el comportamiento sexual y la posterior exposición a Amph dieron como resultado aumentos significativos de la inmunomarcación de Fos y pERK en el núcleo y la cáscara de NAc y BLA (Figura 6; efecto de apareamiento: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; efecto de la droga: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047- <0.001). Además, el número de neuronas marcadas duales fue significativamente mayor en los machos apareados tratados con Amph en comparación con los machos tratados con Amph no apareados (p = 0.009- <0.001) o tratados con solución salina (p = 0.015- <0.001) apareados (Figura 6c, f, i). Cuando los datos se expresaron como porcentajes de neuronas activadas por fármacos, 25.7 ± 2.8% y 18.0 ± 3.2% en el núcleo y la capa de NAc respectivamente, y 31.4 ± 2.0% de las neuronas BLA se activaron por acoplamiento y Amph. La región ACA del mPFC mostró niveles significativos de Fos inducidos por el apareamiento (Figura 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Sin embargo, a diferencia de Meth, Amph no produjo aumentos significativos en los niveles de pERK inducidos por fármacos en ACA (Figura 6k) o números de neuronas marcadas duales en la ACA (Figura 6l) en comparación con los machos inyectados con solución salina apareados y no apareados.

Figura 6      

Expresión de pERK inducida por Fos y Amph inducida por el sexo en las neuronas NAc, BLA y ACA 15 min después de la administración de 5 mg / kg Amph. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) y células dobles (c, f, i, l) en el núcleo de NAc (a, ...

DISCUSIÓN

El estudio actual demuestra a nivel celular una superposición entre la activación neural por el comportamiento sexual del reforzador natural y la Meth psicoestimulante. Por lo tanto, estos datos muestran que las drogas no solo actúan en las mismas regiones del cerebro que regulan la recompensa natural, sino que, de hecho, las drogas activan las mismas células involucradas en la regulación de la recompensa natural. Específicamente, se demostró aquí que el comportamiento sexual y Meth co-activaron una población de neuronas en el núcleo y la capa de NAc, BLA y ACA de la mPFC, identificando sitios potenciales donde Meth puede influir en el comportamiento sexual.

El hallazgo actual de que el comportamiento sexual y la administración de Meth activan poblaciones de neuronas superpuestas en NAc, BLA y ACA contrasta con los hallazgos de otros estudios que muestran que diferentes poblaciones de neuronas NAc codifican el fármaco y la recompensa natural.

Específicamente, los estudios electrofisiológicos que compararon la activación neural durante la autoadministración de recompensas naturales (alimentos y agua) y la cocaína intravenosa han indicado que la autoadministración de cocaína activó una población diferencial y no superpuesta de neuronas que generalmente no respondía durante la respuesta operante del agua. y refuerzo de alimentos (92%). Solo el 8% de las neuronas accumbales mostró activación por cocaína y recompensa natural (Carelli et al., 2000).

En contraste, una mayoría (65%) de células en la NAc mostraron activación por diferentes recompensas naturales (comida y agua), incluso si un reforzador era más apetecible (sacarosa) (Roop et al., 2002).

Varios factores pueden haber contribuido a la discrepancia con los resultados actuales. Primero, se utilizaron diferentes enfoques técnicos para investigar la actividad neuronal. El estudio actual utilizó un método neuroanatómico para la detección de la activación neural concurrente mediante dos estímulos diferentes mediante el uso de la inmunocitoquímica dual fluorescente para Fos y pERK, lo que permite la investigación de la activación de una sola célula en grandes extensiones de áreas cerebrales. En contraste, los estudios realizados por Carelli y sus colaboradores utilizaron registros electrofisiológicos restringidos a la NAc de los animales que se comportan para determinar si la autoadministración de drogas de abuso activa los mismos circuitos neuronales utilizados por las recompensas naturales.

En segundo lugar, el estudio actual investigó una recompensa natural diferente, es decir, el comportamiento sexual en comparación con estudios anteriores, que utilizaban alimentos y agua en ratas restringidas (Carelli, 2000). La comida y el agua pueden tener un valor menos gratificante que el apareamiento. El comportamiento sexual es altamente gratificante y las ratas forman fácilmente CPP para la cópula (Agmo y Berenfeld, 1990, Martínez y Paredes, 2001, Tenk, 2008). Aunque, las ratas de dieta restringida sí forman CPP para el agua. (Agmo et al., 1993, Perks y Clifton, 1997) y comida (Perks y Clifton, 1997), dLas ratas no restringidas de IET preferiblemente consumen y forman CPP para alimentos más sabrosos (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

En tercer lugar, nuestros estudios incluyeron diferentes drogas de abuso en comparación con estudios anteriores, utilizando metanfetamina y anfetamina en lugar de cocaína.. Los presentes resultados demuestran que específicamente Meth, y en menor medida la anfetamina, dio como resultado la activación de neuronas también activadas por el comportamiento sexual. La experiencia con los medicamentos también puede haber sido un factor en nuestros hallazgos. Los estudios actuales utilizaron animales con experiencia sexual, pero ingenuos con las drogas. En contraste, los estudios electrofisiológicos de Carelli y sus colaboradores utilizaron animales "bien entrenados" que recibieron exposiciones repetidas a la cocaína.

Por lo tanto, es posible que la activación inducida por Meth de las neuronas activadas por el comportamiento sexual se altere en ratas experimentadas con fármacos. Sin embargo, los estudios preliminares de nuestro laboratorio sugieren que es poco probable que la experiencia con medicamentos sea un factor importante como el comportamiento sexual y el tratamiento con Meth en hombres tratados crónicamente con Meth. Co-activó porcentajes similares de neuronas activadas por medicamentos como se informó en el estudio actual. (20.3 ± 2.5% en NAc core y 27.8 ± 1.3% en NAc shell; Frohmader y Coolen, observaciones no publicadas).

Finalmente, el estudio actual investigó la acción "directa" de los medicamentos que utilizan la administración pasiva. Por lo tanto, el análisis actual no revela información con respecto a los circuitos neuronales involucrados en la búsqueda de fármacos o señales asociadas a la recompensa del fármaco, sino que revela la actividad neuronal causada por la acción farmacológica del fármaco.. En los estudios electrofisiológicos anteriores, la actividad neuronal NAc que se produce a los pocos segundos de las respuestas reforzadas no es el resultado de la acción farmacológica de la cocaína, sino que depende en gran medida de factores asociativos dentro del paradigma de autoadministración (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Específicamente, la actividad neural de NAc está influenciada por presentaciones independientes de la respuesta de estímulos asociados con el suministro de cocaína por vía intravenosa, así como por contingencias instrumentales (es decir, presionar la palanca) inherentes a este paradigma de comportamiento (Carelli, 2000, Carelli y Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli y Wightman, 2004). En resumen, nuestros hallazgos de coactivación por recompensa natural y de medicamentos pueden ser específicos para la activación por comportamiento sexual y Meth y Amph administrados pasivamente.

Meth y sexo activaron poblaciones superpuestas de neuronas en el núcleo y la cubierta de NAc de una manera dependiente de la dosis. Las neuronas coactivadas en la NAc pueden mediar los efectos potenciales de Meth en la motivación y las propiedades gratificantes de la conducta sexual, ya que las lesiones de la NAc alteran la conducta sexual (Liu et al., 1998, Kippin y otros, 2004). Además, estas neuronas son potencialmente un lugar para los efectos farmacológicos dependientes de la dosis en el apareamiento, ya que la dosis más baja de Meth (1 mg / kg) redujo la cantidad de células marcadas duales en un 50% en comparación con la dosis más alta de Meth (4 mg / kg). Aunque este estudio no identifica el fenotipo químico de las neuronas coactivadas, estudios previos han demostrado que la expresión de pERK y Fos inducida por fármacos en la NAc depende tanto de los receptores de dopamina (DA) como de los de glutamato (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Aunque no está claro si la activación neural inducida por el apareamiento en la NAc depende de estos receptores, esto se ha demostrado en otras regiones del cerebro, particularmente en el área preóptica medial (Lumley y Casco, 1999, Domínguez et al., 2007). TAdemás, Meth puede actuar sobre las neuronas que también se activan durante el comportamiento sexual a través de la activación de los receptores de dopamina y glutamato. El rol del glutamato NAc en el comportamiento sexual actualmente no está claro, pero está bien establecido que el DA desempeña un papel crítico en la motivación del comportamiento sexual. (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Los estudios de microdiálisis informaron aumentos en el flujo de salida de NAc DA durante las fases apetitivas y consumatorias de la conducta sexual masculina (Fiorino y Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) y el flujo de salida mesolímbico de la DA se ha correlacionado con la facilitación del inicio y el mantenimiento del comportamiento sexual de las ratas (Pfaus y Everitt, 1995). Además, los estudios de manipulación de DA muestran que los antagonistas de DA en la NAc inhiben el comportamiento sexual, mientras que los agonistas facilitan el inicio del comportamiento sexual.rEveritt et al., 1989, Pfaus y Phillips, 1989). Por lo tanto, Meth puede afectar la motivación para el comportamiento sexual a través de la activación de los receptores DA.

En contraste con la NAc, el número de células marcadas duales en BLA y ACA se mantuvo relativamente sin cambios, independientemente de la dosis de Meth. El BLA es crítico para el aprendizaje asociativo discreto y está fuertemente involucrado en el refuerzo condicionado y la evaluación de recompensas durante la respuesta instrumental (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Ver, 2002). Las ratas lesionadas con BLA muestran una presión de palanca disminuida para los estímulos condicionados combinados con alimentos (Everitt et al., 1989) o refuerzo sexual (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). En contraste, esta manipulación no afecta la fase consumatoria de la alimentación y el comportamiento sexual (Cardinal et al., 2002). El BLA también desempeña un papel clave en la memoria de estímulos condicionados asociados con estímulos de drogas. (Gracia y Rosenkranz, 2002, Laviolette y Grace, 2006). Las lesiones o inactivaciones farmacológicas del BLA bloquean la adquisición (Whitelaw et al., 1996) y la expresión (Grimm y See, 2000) reincorporación a la cocaína de forma condicionada, sin afectar el proceso de administración de drogas. Además, La infusión de Amph directamente en el BLA da como resultado un restablecimiento del fármaco potenciado en presencia de las señales condicionadas (Ver et al., 2003). Por lo tanto, es posible que la transmisión de DA mejorada por el psicoestimulante en el BLA dé como resultado una potenciación y búsqueda emocional potenciadas. (Ledford et al., 2003) de recompensa sexual, contribuyendo así al impulso sexual aumentado y el deseo informado por los abusadores de Meth (Semple et al., 2002, Verde y Halkitis, 2006).

En el ACA, la activación neural de las neuronas activadas por el sexo fue independiente de la dosis y específica para Meth, ya que no se observó con Amph. Aunque Meth y Amph tienen propiedades estructurales y farmacológicas similares, Meth es un psicoestimulante más potente que Amph con efectos de mayor duración (NIDA, 2006). Los estudios de Goodwin et al. mostró que Meth genera un mayor flujo de salida de DA e inhibe el aclaramiento de la DA localmente aplicada de manera más efectiva en la NAc de rata que en Amph. Estas características podrían contribuir a las propiedades adictivas de Meth en comparación con Amph (Goodwin et al., 2009) y tal vez las diferencias de activación neural observadas entre los dos fármacos. Sin embargo, no está claro si los diferentes patrones de resultados se deben a diferencias de eficacia entre los medicamentos o problemas de potencia relacionados con las dosis empleadas y se requiere investigación adicional.

La coactivación por Meth y el sexo no se observó en otras subregiones de la mPFC (IL y PL). En la rata, la ACA se ha estudiado ampliamente utilizando tareas apetitivas, apoyando un papel en las asociaciones de estímulo-refuerzo (Everitt et al., 1999, Ver, 2002, Cardinal et al., 2003). Existe amplia evidencia de que el mPFC está involucrado en el deseo por las drogas y la recaída en la búsqueda de drogas y en el comportamiento de consumo de drogas tanto en humanos como en ratas. (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin y See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas y Volkow, 2005). yoEn línea con esto, se ha propuesto que la disfunción de mPFC causada por la exposición repetida a drogas de abuso podría ser responsable de la reducción del control de los impulsos y el aumento del comportamiento dirigido a las drogas como se observa en muchos adictos. (Jentsch y Taylor, 1999). Datos recientes de nuestro laboratorio demostraron que las lesiones de mPFC dan como resultado una búsqueda continua de comportamiento sexual cuando esto se asoció con un estímulo aversivo (Davis et al., 2003). A pesar de que este estudio no investigó el ACA, apoya la hipótesis de que el mPFC (y el ACA específicamente) media los efectos de Meth en una pérdida de control inhibitorio sobre el comportamiento sexual según lo informado por los abusadores de Meth (Salo et al., 2007).

En conclusión, estos estudios juntos forman un primer paso crítico hacia una mejor comprensión de cómo las drogas de abuso actúan en las vías neuronales que normalmente median las recompensas naturales. Además, estos hallazgos ilustran que, en contraste con la creencia actual de que las drogas de abuso no activan las mismas células en el sistema mesolímbico como recompensa natural, Meth y, en menor medida, Amph, activan las mismas células como comportamiento sexual. A su vez, estas poblaciones neurales coactivadas pueden influir en la búsqueda de recompensa natural después de la exposición al fármaco. Finalmente, los resultados de este estudio pueden contribuir significativamente a nuestra comprensión de la base de la adicción en general. Las comparaciones de las similitudes y diferencias, así como las alteraciones en la activación neural del sistema mesolímbico provocadas por el comportamiento sexual frente a las drogas de abuso, pueden conducir a una mejor comprensión del abuso de sustancias y las alteraciones asociadas en la recompensa natural.

AGRADECIMIENTOS

Esta investigación fue apoyada por becas de los Institutos Nacionales de Salud R01 DA014591 y los Institutos Canadienses de Investigación en Salud RN 014705 a LMC.

ABREVIATURAS

  • abecedario
  • Complejo avidina-biotina-peroxidasa de rábano picante
  • ACA
  • área cingulada anterior
  • Amph
  • d-anfetamina
  • BLA
  • amígdala basolateral
  • BNSTpl
  • núcleo posterolateral de la estría terminal
  • BNSTpm
  • núcleo posteromedial de la estría terminal
  • BT
  • tiramida biotinilada
  • CeA
  • amígdala cental
  • CPP
  • preferencia de lugar condicionado
  • E
  • eyaculación
  • EL
  • latencia de eyaculación
  • IF
  • area infralimbica
  • IL
  • latencia de intromisión
  • IM
  • intromisión
  • M
  • montar
  • MAP quinasa
  • proteína cinasa activada por mitógenos
  • MEApd
  • amígdala medial posterodorsal
  • Meth
  • metanfetamina
  • ML
  • latencia de montaje
  • mPFC
  • corteza prefrontal medial
  • NMP
  • núcleo preóptico medial
  • NAc
  • núcleo accumbens
  • PB
  • tampón de fosfato
  • PBS
  • solución salina tamponada con fosfato
  • PEI
  • intervalo post-eyaculatorio
  • gaje
  • MAP quinasa fosforilada
  • PL
  • area prelimbica
  • VTA
  • área tegmental ventral

Notas a pie de página

Descargo de responsabilidad del editor: Este es un archivo PDF de un manuscrito sin editar que ha sido aceptado para publicación. Como servicio a nuestros clientes, proporcionamos esta primera versión del manuscrito. El manuscrito se someterá a revisión, composición y revisión de la prueba resultante antes de que se publique en su forma final. Tenga en cuenta que durante el proceso de producción se pueden descubrir errores que podrían afectar el contenido, y todas las exenciones de responsabilidad legales que se aplican a la revista pertenecen.

Referencias

  1. Agmo A. Comportamiento sexual de rata macho. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203 – 209. ElPubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Propiedades de refuerzo de la eyaculación en la rata macho: papel de los opioides y la dopamina. Behav Neurosci. 1990; 104: 177 – 182. ElPubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velázquez G. Recompensa y refuerzo producido por el agua potable: papel de los opioides y los subtipos de receptores de dopamina. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. El comportamiento sexual y las señales ambientales asociadas con el sexo activan el sistema mesolímbico en ratas macho. Neuropsicofarmacología. 2004; 29: 718 – 730. ElPubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Aumento de la expresión de c-fos en el área preóptica medial después del apareamiento en ratas macho: papel de las entradas aferentes de la amígdala medial y del campo tegmental central del cerebro medio. Neurociencia 1992; 50: 627 – 646. ElPubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Una función de la corteza prefrontal en el restablecimiento de la búsqueda de cocaína inducida por el estrés y la cocaína en ratas. Psicofarmacología (Berl) 2003; 168: 66 – 74. ElPubMed]
  7. Cardenal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emoción y motivación: el papel de la amígdala, el estriado ventral y la corteza prefrontal. Reseñas de neurociencia y bioconducta. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Cardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Papel de la corteza cingulada anterior en el control sobre el comportamiento de los estímulos condicionados pavlovianos en ratas. Neurociencia del comportamiento. 2003; 117: 566 – 587. ElPubMed]
  9. Carelli RM. Activación de la activación de células accumbens por estímulos asociados con el suministro de cocaína durante la autoadministración. Sinapsis 2000; 35: 238 – 242. ElPubMed]
  10. Carelli RM. Disparo de células del núcleo accumbens durante conductas dirigidas a objetivos para la cocaína frente al refuerzo "natural". Fisiología y comportamiento. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Activación selectiva de neuronas accumbens por estímulos asociados con la cocaína durante un programa múltiple de agua / cocaína. Investigación del cerebro. 2001; 907: 156 – 161. ElPubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, desmoronándose AJ. La evidencia de que los circuitos neuronales separados en el núcleo accumbens codifican la recompensa de cocaína versus “natural” (agua y comida). J Neurosci. 2000; 20: 4255 – 4266. ElPubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuitos funcionales en la adicción a las drogas subyacente: información sobre la señalización en tiempo real durante el comportamiento. Opinión actual en neurobiología. 2004; 14: 763 – 768. ElPubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. La codificación selectiva de cocaína versus recompensas naturales por parte de las neuronas del núcleo accumbens no está relacionada con la exposición crónica a medicamentos. J Neurosci. 2003; 23: 11214 – 11223. ElPubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Respuestas neuronales en la corteza prefrontal y el núcleo accumbens durante la autoadministración de heroína en ratas que se mueven libremente. Brain Res. 1997; 754: 12 – 20. ElPubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaína, pero no natural La autoadministración de recompensas ni la infusión pasiva de cocaína produce LTP persistente en el VTA. Neurona. 2008; 59: 288 – 297. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Actividad mejorada de Cdk5 y translocación p35 en el estriado ventral de ratas agudas y crónicas tratadas con metanfetamina. Neuropsicofarmacología. 2004; 30: 538 – 549. ElPubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Activación límbica durante el deseo de cocaína inducido por señales. Soy J Psychiatry. 1999; 156: 11 – 18. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. La anfetamina aumenta la fosforilación de la quinasa regulada por señal extracelular y los factores de transcripción en el cuerpo estriado de la rata a través de los receptores metabotrópicos de glutamato del grupo I. Neuropsicofarmacología. 2002; 27: 565 – 575. ElPubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII regula la fosforilación de ERK1 / 2 inducida por la anfetamina en las neuronas del cuerpo estriado. Neuroreport. 2002; 13: 1013 – 1016. ElPubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Sociedad para la neuroendocrinología del comportamiento. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormonas y Comportamiento; 2003. Las lesiones de la corteza prefrontal medial no interrumpen el comportamiento sexual en ratas macho; pag. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Las drogas que abusan de los seres humanos aumentan preferentemente las concentraciones sinápticas de dopamina en el sistema mesolímbico de ratas que se mueven libremente. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274 – 5278. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. El apareamiento activa los receptores de NMDA en el área preóptica medial de ratas macho. Neurociencia del comportamiento. 2007; 121: 1023 – 1031. ElPubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Predictores de riesgo sexual entre los nuevos usuarios de drogas. Revista de investigación del sexo. 2006; 43: 318 – 327. ElPubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacoterapia de la adicción a la metanfetamina: una actualización. Abuso de sustancias. 2008; 29: 31 – 49. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivación sexual: un análisis neuronal y conductual de los mecanismos subyacentes a las respuestas de apetito y copulación de ratas macho. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217 – 232. ElPubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interacciones entre la amígdala y el estriado ventral en las asociaciones de estímulo-recompensa: estudios que utilizan un programa de refuerzo sexual de segundo orden. Neurociencia 1989; 30: 63 – 75. ElPubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Estudios de comportamiento instrumental con refuerzo sexual en ratas macho (Rattus norvegicus): I. Control por medio de estímulos visuales breves combinados con una hembra receptiva. J Comp Psychol. 1987; 101: 395 – 406. ElPubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Procesos asociativos en la adicción y recompensa El papel de los subsistemas estriatales de amígdala-ventral. Anales de la Academia de Ciencias de Nueva York. 1999; 877: 412 – 438. ElPubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Estudios de comportamiento instrumental con refuerzo sexual en ratas macho (Rattus norvegicus): II. Efectos de las lesiones del área preóptica, castración y testosterona. J Comp Psychol. 1987; 101: 407 – 419. ElPubMed]
  31. Feltenstein MW, ver RE. El neurocircuito de la adicción: una visión general. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261 – 274. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Expresión del ARNm de c-fos evocado en anfetamina en el caudato-putamen: los efectos de los antagonistas de los receptores DA y NMDA varían en función del fenotipo neuronal y del contexto ambiental. Revista de Neuroquímica. 2003; 86: 33 – 44. ElPubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Cambios dinámicos en el flujo de dopamina del núcleo accumbens durante el efecto Coolidge en ratas macho. J Neurosci. 1997; 17: 4849 – 4855. ElPubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitación del comportamiento sexual y aumento del flujo de salida de dopamina en el núcleo Accumbens de ratas masculinas después de la sensibilización conductual inducida por D-anfetamina. J Neurosci. 1999a; 19: 456 – 463. ElPubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitación del comportamiento sexual en ratas macho después de la sensibilización conductual inducida por d-anfetamina. Psicofarmacología. 1999b; 142: 200 – 208. ElPubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. La anfetamina y la metanfetamina afectan de manera diferencial a los transportadores de dopamina in vitro y in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978 – 2989. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulación de las respuestas condicionadas de las neuronas de la amígdala basolateral. Fisiología y comportamiento. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activación de circuitos de memoria durante el anhelo de la cocaína provocada por la señal. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040 – 12045. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  39. AI verde, Halkitis PN. Metanfetamina cristalina y socialidad sexual en una subcultura gay urbana: una afinidad electiva. Cultura, salud y sexualidad. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, ver RE. Disociación de núcleos límbicos primarios y secundarios relevantes para la recompensa en un modelo animal de recaída. Neuropsicofarmacología. 2000; 22: 473 – 479. ElPubMed]
  41. Casco EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interacciones hormona-neurotransmisor en el control de la conducta sexual. Investigación del comportamiento del cerebro. 1999; 105: 105 – 116. ElPubMed]
  42. Casco EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamiento sexual masculino. En: Pfaff DW, et al., Editores. Cerebro de hormonas y comportamiento. San Diego, CA: Elsevier Science (EE. UU.); 2002. pp. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamina y serotonina: influencias en el comportamiento sexual masculino. Fisiología y comportamiento. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efectos de la administración única y repetida de metanfetamina o morfina sobre la expresión del gen C de neuroglicano en el cerebro de rata. La revista internacional de neuropsicofarmacología. 2006; 9: 407 – 415. ElPubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Preferencias de lugar condicionado (CPP, por sus siglas en inglés) a "bocadillos" con alto contenido calórico en cepas de ratas con tendencia genética frente a obesidad inducida por la dieta: resistencia al bloqueo de naltrexona. Farmacología Bioquímica y Comportamiento. 2007; 86: 699 – 704. ElPubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Efecto del antagonismo opioide en las preferencias de lugar condicionadas a los aperitivos. Farmacología Bioquímica y Comportamiento. 2006; 83: 257 – 264. ElPubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsividad resultante de la disfunción frontostriatal en el abuso de drogas: implicaciones para el control del comportamiento mediante estímulos relacionados con la recompensa. Psicofarmacología (Berl) 1999; 146: 373 – 390. ElPubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Las bases neuronales de la adicción: una patología de la motivación y la elección. Soy J Psychiatry. 2005; 162: 1403 – 1413. ElPubMed]
  49. Kelley AE. Memoria y adicción: circuitos neuronales compartidos y mecanismos moleculares. Neurona. 2004; 44: 161 – 179. ElPubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Roles opuestos del núcleo accumbens y del área hipotalámica lateral anterior en el control del comportamiento sexual en la rata macho. Revista Europea de Neurociencia. 2004; 19: 698 – 704. ElPubMed]
  51. Laviolette SR, Gracia AA. Los cannabinoides potencian la plasticidad del aprendizaje emocional en las neuronas de la corteza prefrontal medial a través de insumos basolaterales de amígdala. J Neurosci. 2006; 26: 6458 – 6468. ElPubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, ver RE. Potenciación del restablecimiento del comportamiento de búsqueda de cocaína después de la infusión de D-anfetamina en la amígdala basolateral. Neuropsicofarmacología. 2003; 28: 1721 – 1729. ElPubMed]
  53. Lett BT. Las exposiciones repetidas intensifican en lugar de disminuir los efectos gratificantes de la anfetamina, la morfina y la cocaína. Psicofarmacología (Berl) 1989; 98: 357 – 362. ElPubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Comportamiento sexual en ratas macho después de la radiofrecuencia o lesiones que agotan la dopamina en el núcleo accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585 – 592. ElPubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, casco EM. Serotonina Hipotalámica Lateral Inhibe Núcleo Accumbens Dopamina: Implicaciones Para La Saciedad Sexual. J Neurosci. 1999; 19: 7648 – 7652. ElPubMed]
  56. Lumley LA, Casco EM. Efectos de un antagonista de D1 y de la experiencia sexual en la inmunorreactividad de tipo Fos inducida por la copulación en el núcleo preóptico medial. Investigación del cerebro. 1999; 829: 55 – 68. ElPubMed]
  57. Martínez I, Paredes RG. Sólo el apareamiento a su propio ritmo es gratificante en ratas de ambos sexos. Horma Behav. 2001; 40: 510 – 517. ElPubMed]
  58. McLaughlin J, ver RE. La inactivación selectiva de la corteza prefrontal dorsomedial y la amígdala basolateral atenúa el restablecimiento condicionado de la conducta de búsqueda de cocaína extinguida en ratas. Psicofarmacología (Berl) 2003; 168: 57 – 65. ElPubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitación de conductas sexuales en ratas macho en presencia de estímulos previamente combinados con inyecciones sistémicas de morfina. Farmacología Bioquímica y Comportamiento. 1990; 35: 367 – 372. ElPubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regulaciones de la recompensa de metanfetamina por la señal de la quinasa regulada por señal extracelular 1 / 2 / ets-Like Gene-1 vía de señalización a través de la activación de Dopamine NIDA ( Serie de informes de investigación: abuso de metanfetamina y adicción. 2006 NIH Número de publicación 06-4210. [PubMed]
  61. Beneficios SM, Clifton PG. Revalorización reforzadora y preferencia de lugar condicionada. Fisiología y comportamiento. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Caminos del deseo sexual. Revista de medicina sexual. 2009; 6: 1506 – 1533. ElPubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. La psicofarmacología del comportamiento sexual. En: Bloom FE, Kupfer DJ, editores. Psicofarmacología: la cuarta generación del progreso. Nueva York: Raven; 1995. pp. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicaciones de la inducción génica inmediata-temprana en el cerebro después de la estimulación sexual de roedores femeninos y masculinos. Boletín de investigación del cerebro. 1997; 44: 397 – 407. ElPubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condicionamiento y comportamiento sexual: una revisión. Horma Behav. 2001; 40: 291 – 321. ElPubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efectos diferenciales de los antagonistas de los receptores de dopamina en el comportamiento sexual de ratas macho. Psicofarmacología. 1989; 98: 363 – 368. ElPubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. El sistema de dopamina mesolímbico: ¿La vía final común para el efecto reforzador de las drogas de abuso? Reseñas de neurociencia y bioconducta. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Lanzadores KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. La experiencia sexual induce plasticidad funcional y estructural en el sistema mesolímbico. Psiquiatría Biológica. 2009 En prensa.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Fluctuaciones de dopamina en el núcleo accumbens durante el mantenimiento, la extinción y el restablecimiento de la autoadministración intravenosa de D-anfetamina. J Neurosci. 1999; 19: 4102 – 4109. ElPubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Drogas y efectos sexuales: papel del tipo de droga y género. Diario de Tratamiento de Abuso de Sustancias. 2002; 22: 103 – 108. ElPubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. El comportamiento sexual aumenta la expresión de c-fos en el cerebro anterior de la rata macho. Brain Res. 1991; 564: 352 – 357. ElPubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Actividad de Accumbens durante un horario múltiple para el refuerzo de agua y sacarosa en ratas. Sinapsis 2002; 43: 223 – 226. ElPubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Control atencional y niveles de metabolismo cerebral en consumidores de metanfetamina. Psiquiatría Biológica. 2007; 61: 1272 – 1280. ElPubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. La metanfetamina cristalina y el éxtasis difieren en relación con las relaciones sexuales sin protección entre los jóvenes homosexuales. Revista canadiense de salud pública. 2005; 96: 340 – 343. ElPubMed]
  75. Ver RE. Sustratos neuronales de recaída condicionada a la conducta de búsqueda de drogas. Farmacología Bioquímica y Comportamiento. 2002; 71: 517 – 529. ElPubMed]
  76. Ver RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse, and the Amygdala. Anales de la Academia de Ciencias de Nueva York. 2003; 985: 294 – 307. ElPubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivaciones asociadas con el uso de metanfetamina entre hombres con VIH que tienen sexo con hombres. Diario de Tratamiento de Abuso de Sustancias. 2002; 22: 149 – 156. ElPubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. El modelo de reincorporación de la recaída de drogas: historia, metodología y hallazgos principales. Psicofarmacología (Berl) 2003; 168: 3 – 20. ElPubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilización a los efectos gratificantes condicionados de la cocaína: características farmacológicas y temporales. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808 – 815. ElPubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilización a los efectos gratificantes condicionados de la morfina: farmacología y características temporales. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33 – 39. ElPubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Predictores de las conductas de riesgo sexual del VIH en una muestra comunitaria de hombres y mujeres que usan drogas inyectables. SIDA y comportamiento. 2003; 7: 383 – 393. ElPubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Uso de metanfetamina y conductas sexuales de riesgo en estudiantes de escuelas secundarias de EE. UU.: Hallazgos de una encuesta nacional sobre conductas de riesgo. La ciencia de la prevención. 2007; 8: 103 – 113. ElPubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efectos de los receptores de dopamina y NMDA sobre la expresión de Fos inducida por cocaína en el estriado de ratas Fischer. Investigación del cerebro. 2008; 1243: 1 – 9. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, editor. Mapas cerebrales: estructura del cerebro de rata. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, lanzadores KK, Coolen LM. Recompensa sexual en ratas macho: efectos de la experiencia sexual en el lugar condicionado preferencia asociada a las eyaculaciones e intromisiones. Horma Behav. 2008 [Artículo gratuito de PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Páginas C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Participación de la cascada de quinasa regulada por señal extracelular para propiedades de recompensa de la cocaína. J Neurosci. 2000; 20: 8701 – 8709. ElPubMed]
  87. Valjent E, Páginas C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Las drogas adictivas y no adictivas inducen patrones distintos y específicos de activación de ERK en el cerebro de ratón. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826 – 1836. ElPubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, PJ Lombroso, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. La regulación de una proteína fosfatasa en cascada permite que las señales convergentes de dopamina y glutamato activen ERK en el cuerpo estriado. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491 – 496. ElArtículo gratuito de PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alteraciones en la transmisión dopaminérgica y glutamatérgica en la inducción y expresión de la sensibilización del comportamiento: una revisión crítica de los estudios preclínicos. Psicofarmacología (Berl) 2000; 151: 99 – 120. ElPubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Activación neural después del comportamiento sexual en el cerebro de rata macho y hembra. Investigación del comportamiento del cerebro. 1998; 92: 181 – 193. ElPubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Las lesiones excitotóxicas de la amígdala basolateral impiden la adquisición de conductas de búsqueda de cocaína bajo un programa de refuerzo de segundo orden. Psicofarmacología. 1996; 127: 213 – 224. ElPubMed]
  92. RA sabio. Neurobiología de la adicción. Opinión actual en neurobiología. 1996; 6: 243 – 251. ElPubMed]