血管内食品報酬（2010）

PLoS One。 2011。 6(9)：e24992。

2011 9月27をオンラインで公開。 土井：  10.1371 / journal.pone.0024992
PMCID： PMC3181252

アルビノ・J・オリベイラ・マイア,1,*¤a¤b クレイグ・D・ロバーツ,1 Q.デイビッドウォーカー,2 ブルック・ルオ,1 シンシア・クーン,2 シドニー・A・サイモン,1,3,5 の三脚と ミゲル・AL・ニコレリス1,3,4,5,6

荘小曦（シャオシー・ジュアン）編集者
この記事はされている によって引用 PMCの他の記事。

抽象

カロリー含有糖類の摂取は、甘味伝達機構がない場合でも、食欲行動反応と腹側線条体におけるドーパミン放出を引き起こす。しかし、このような報酬関連の食欲後効果が吸収前イベントを反映しているのか、吸収後イベントを反映しているのかは不明である。吸収後グルコース検出の重要性を裏付けるものとして、ラットの行動試験において、頸静脈に投与した高濃度グルコース溶液が側方偏向を条件付けるのに十分であることがわかった。さらに、低濃度グルコース溶液を肝門脈に投与した場合は頑健な行動反応を条件付けたが、頸静脈では条件付けしなかった。さらに、行動条件付けを引き起こすのに十分な濃度のグルコースを腸管投与すると、頸静脈ではなく肝門脈に低濃度グルコース溶液を投与した後に観察されたものと同様の血糖プロファイルが得られた。最後に、高速スキャンサイクリックボルタンメトリーを用いて、行動学的知見と一致して、低濃度ブドウ糖溶液を肝門脈に投与した場合、側坐核殻における自発的ドーパミン放出イベントの増加が引き起こされるが、頸静脈に投与した場合は増加が見られないことを明らかにした。これらの知見は、ブドウ糖の吸収後作用が、糖摂取に起因する摂食後行動およびドーパミン報酬関連反応に十分であることを示すものである。さらに、この作用には全身血糖値よりも肝門脈静脈系の血糖値の方が大きく寄与しており、腹腔内臓器のブドウ糖センサーが関与していることを示唆している。

イントロダクション

食物摂取による肯定的な後摂食的結果は摂食行動の重要な決定要因である 【1]実際、私たちは最近、2瓶行動パラダイムにおいて、機能的な甘味伝達経路が欠如している動物であっても、スクロース（カロリー含有糖類）の経口摂取は、スクラロース（カロリーのない人工甘味料）ではなく、強固な側嗜好の条件付けに十分であることを発見しました。 【2]さらに、これらの動物がショ糖を摂取すると、側坐核（NAcc）におけるドーパミン放出の増加と神経活動の増加が観察された。摂取後依存性のドーパミン系刺激は、ヒトの機能イメージング研究でも示唆されており、味覚強度に応じた濃度でスクラロースとショ糖を呈示したところ、後者のみがドーパミン作動性中脳領域を活性化した。 【3]ドーパミン作動性活性化と行動後依存学習との関連性は、ラットを用いた実験で確認されており、NAccにおけるドーパミン受容体拮抗作用は、非カロリー風味と十二指腸に直接注入されたブドウ糖との関連の発達を阻害した。 【4].

ショ糖などの糖による摂食後刺激が行動報酬関連効果をもたらすメカニズムに関しては、利用可能なデータが完全に一貫しているわけではない。ある研究では、腸粘膜への直接刺激が必要であることが示唆されている。 【5]一方、静脈内に栄養剤を注入することで吸収後効果の重要性を実証した研究もある。 【6], 【7]さらに最近では、味覚とは独立して、線条体におけるドーパミン放出を引き起こすには、組織のグルコース利用がグルコース消費に必要であることが示唆されている。 【8]いずれにせよ、行動条件付けとドーパミン放出につながる行動後シグナル伝達経路については依然として議論の余地がある。

本研究では、カロリー含有糖の報酬関連効果における吸収前および吸収後のメカニズムの関与を、味とは無関係に明らかにすることに興味がありました。この目的で、ラットを用いて、頸静脈（JV）および肝門脈（HPV）への静脈内ブドウ糖投与に対する行動およびドーパミン作動性反応を試験しました。最初に、JVに投与したいくつかの異なる濃度のブドウ糖（5％、22.5％、および50％）が、5瓶嗜好試験で側方バイアスを条件付けるのに十分かどうかを試験しました。この実験では、血管内味覚刺激の可能性に対する対照としてサッカリンを使用しました。別の実験では、JVに投与されたさまざまなブドウ糖刺激の血糖値への影響を考慮して、同じ行動パラダイムでHPVに投与された5％ブドウ糖の影響を試験しました。その実験では、マンニトールを浸透圧影響の対照として使用しました。次に、これらの実験で使用した様々なグルコース刺激の血糖上昇効果を尾部およびHPV血中において同時に測定し、それぞれの部位における変化が、以前に観察された行動効果とどのように関連しているかを評価しました。最後に、サイクリックボルタンメトリーを用いて、NAccにおけるドーパミン過渡応答頻度を測定し、HPVおよびJVへのXNUMX%グルコース溶液の注入効果を検証しました。

結果

ラットにおける味覚非依存条件付けにおける粘膜（腸）メカニズムと吸収後メカニズムの関与を明らかにするために、2つのボトル行動パラダイムにおける側バイアスの反転をテストする実験を行った。 【2]簡単に説明すると、動物は、水と軽度の食事制限下で、4本のボトルを用いた水 vs. 水テストで側方バイアスを検査された。側方バイアスの逆転を条件付けるために、動物は、行動箱の交互に水を毎日自由に摂取できる2日間の条件付けプロトコルにさらされた。動物が元のバイアスと反対の側にさらされた3日間は、3 mLのブドウ糖溶液が飲水と同時に、舐める行動を条件として投与された（最初の1000回の水の舐めは2 µL/舐め）。動物が元のバイアスの側にさらされた残りのXNUMX日間は、同じ条件下で溶媒が与えられた。以前に血管カテーテルが埋め込まれた動物の中には、条件付け刺激（ブドウ糖または溶媒）が静脈内に注入された動物もいたが、他の動物には、水投与に使用したシッパーチューブ内の独立したカニューレを通して経口的に投与された（方法を参照）。最終試験日には、XNUMX本のボトルの水と水を使った試験（方法と手順を参照）で、すべての動物に対して側方バイアス反転試験が行われた。 テーブル1 詳細については）。

テーブル1  

摂取後効果に対する条件付けの方法。

5つのグループの動物は、XNUMX％（n = 6）または15％（n = 5) 経口投与されたブドウ糖溶液。全体的に、これらのグループの動物は、ブドウ糖投与時よりも溶媒投与時の摂取量が高かった。これは、ブドウ糖投与による満腹感、あるいは高レベルの水分制限（図S1A）側方バイアス反転は、各動物の元のバイアスとは反対側への嗜好を、条件付け前と条件付け後の5瓶セッションで比較することにより試験した。条件付け刺激（15% vs. XNUMX%、F = 9.3、p = 0.014）およびテストセッション（事前条件付けと事後条件付け、F = 7.9、p = 0.021）、そしてXNUMXつの因子間の相互作用はほぼ有意であった（F = 4.2、p = 0.071; 反復測定二元配置分散分析）。しかし、グルコース投与側に対する条件付け前後の嗜好の有意な増加は、15%グルコースで条件付けされた動物でのみ認められた（0.11±0.06 vs. 0.8±0.2、t = 3.3、p<0.05）であったが、5％グルコースで調整したものではそうではなかった（0.07±0.04 vs. 0.18±0.15、t = 0.6、p>0.05、事後Bonferroni t検定、 図1A).

図1  

頸静脈へのブドウ糖の投与は、側方バイアスの反転を条件付けるのに十分である。

同じ行動プロトコルを使用して、低濃度（5％、n = 10）、中程度（22.5％、n = 7）および高（50％、n = 11) ブドウ糖溶液。サッカリンナトリウム（NaSacc; 3.16%、甘味の血管内刺激に最適な濃度であることが以前に示された） 【9]）は、血管内味覚刺激の可能性のある対照として使用された（n = 5) 経口摂取で条件付けされた動物で発見されたのと同様に、これらのラットは全体的に、グルコースまたはサッカリンセッション中よりも、溶媒条件付けセッション中により高い消費レベルを示した（図S1B）。側方バイアス反転に関しては、条件刺激（低血糖 vs. 中血糖 vs. 高血糖 vs. NaSacc、F = 7.8、p<0.001）、テストセッション（プレコンディショニングとポストコンディショニング、F = 45.3、p<0.001）とこれらの因子間の相互作用（F = 15.8、p<0.001; 反復測定二元配置分散分析）。JV注入を22.5%で条件付けした動物では、側バイアスの逆転が認められた（0.18±0.05 vs. 0.63±0.10、t = 4.7、p<0.001）および50％グルコース（0.13±0.05 vs. 0.82±0.07、t = 9.1、p<0.001）であったが、5％グルコースで調整したものではそうではなかった（0.14±0.05 vs. 0.12±0.05、t = 0.3、p>0.05）またはNaSacc（0.19±0.09 vs. 0.3±0.19、t = 1、p>0.05、事後Bonferroni t検定、 図1B要約すると、2 つの高濃度ブドウ糖溶液によって側方バイアスの逆転が生じた一方で、NaSacc には影響が見られなかったため、血管内味覚がこれらの行動変化のきっかけとなる可能性は排除されました。

異なるグルコース刺激の血糖値への影響をよりよく理解するために、別々の動物グループに10分間の行動セッションで水を自由に摂取させ、条件付けに使用したグルコース溶液の3mLを、飲水と同時に、また舐めることを条件に投与した（最初の3回の水舐めは1000µL/舐め、5%経口、n = 3; 15%経口、n = 4; 5% JV、n = 6; 22.5% JV、n = 4; 50% JV、n = 6) 血糖値は、ブドウ糖投与前（ベースライン）および投与後数時点（0分～40分）の尾血から測定された。経口5%ブドウ糖投与を除き、全ての刺激は末梢血糖値の有意な上昇を引き起こした（図2Aを参照してください テーブルS1 データ用）。この効果は、側方バイアスの逆転を条件付けなかったJV 5%グルコースでも検証され、末梢血糖値の上昇だけでは側方バイアスの変化を誘発するには不十分であることが示された。各刺激の血糖プロファイルをさらに明確にするために、血糖値の絶対値（mg/dL）と相対値（%ベースライン）の両方を、平均血糖値とピーク血糖値の観点から分析した。グルコースを経口投与した動物では、5%および15%グルコース曝露後のピーク相対血糖値（%ベースライン）に差は見られなかった（それぞれ117±8 vs. 131±9、t = 1.1、p = 0.33、非対称t検定; 図2B）。条件付け側バイアス反転に効果的であった15％経口ブドウ糖投与後の血糖値を、ブドウ糖のJV投与の結果と比較したところ、有意な主効果が認められた（F = 37.7、p<0.0001、一元配置分散分析）。対比較では、JV 22.5%（428±34、t = 5.8、p<0.001）および50％グルコース（536±48、t = 8.6、p<0.001）であったが、5％グルコース（170±10、t = 0.8、p>0.05、事後Bonferroni t検定、 図2C）。最高血糖値と平均絶対血糖値についても同様の結果が得られました（図S2A、B、D、E）および平均相対血糖値（図S3AおよびB).

図2  

サイドバイアスの逆転を条件付けるブドウ糖刺激物の頸静脈注入も、極度の尾血高血糖を引き起こします。

我々の研究結果は、静脈内ブドウ糖投与は2本ボトルの水vs.水試験における側方バイアス反転を条件付けるのに十分であったものの、これは経口ブドウ糖投与よりもはるかに高い血糖値を誘導した場合にのみ可能であったことを示唆している。したがって、静脈内ブドウ糖投与による全身性高血糖は、消化管ブドウ糖投与後に活性化する末梢センサーを駆動するために必要であったという仮説を立てた。 THPVシステムは、消化器系から栄養豊富な血液を最も多く運び、それが全身循環に放出される前に、そのようなセンサーを配置するのに最適な場所である。この仮説を検証するために、HPVカテーテルを通して投与された5％グルコースを用いて同じコンディショニングプロトコルを実施した（n = 10）を経口または経皮投与するよりも、浸透圧制御として、別の（甘味のある）単糖類（5％マンニトール 【10]）を別の動物群（n = 5 図S1Cこの実験では、溶媒とグルコースまたはマンニトールの条件付けセッション中に消費量に差は見られませんでした。むしろ、グルコースで条件付けされた動物は、マンニトールで条件付けされた動物よりも全体的に消費量が高かったのです（図S1C）。他の条件付けセッションにおける行動効果を考慮すると（図S1AとS1B）これは、これらの条件下では、マンニトールが文脈嫌悪効果を生み出し、それが車両セッションにも一般化することを示唆している。側バイアス反転に関しては、条件付け刺激（グルコース vs. マンニトール、F = 10.2、p = 0.007）、テストセッション（プレコンディショニングとポストコンディショニング、F = 5.2、p = 0.04）とこれらの因子間の相互作用（F = 9.5、p = 0.009; 反復測定二元配置分散分析）。さらに、我々の仮説を支持するように、グルコースに関連する側に対する条件付け前後の嗜好において有意な増加が見られた（0.17±0.05 vs. 0.69±0.12、t = 4.7、p<0.001）であったが、コンディショニング中のマンニトール注入では効果が見られなかった（0.14±0.04 vs. 0.06±0.06、t = 0.5、p>0.05; 事後Bonferroni t検定、 図3A）。したがって、5％グルコースはHPVに投与された場合、側方バイアス反転の調整に効果的であった（図3A）だが、JV（図1B）。5％ブドウ糖の行動への影響のこの変動は、投与部位による全身血糖値の差によるものではなく、HPV（171±13）およびJV投与後の尾部血糖値のピーク（％ベースライン）が（図1D）は有意差がなかった（t = 0.07、p = 0.9、非対称t検定; 図3B; 湖 表S1 データについては、最高血糖値と平均血糖値にも差は見られませんでした（図S2CおよびF）および平均相対血糖値（図S3D).

図3  

肝臓門脈へのブドウ糖投与は、頸静脈投与で必要とされる濃度よりも低い濃度でサイドバイアス反転を引き起こします。

全体として、これらの知見は、全身血糖値ではなくHPV血糖値の上昇が、味覚非依存性のサイドバイアス反転をもたらす重要な刺激であることを強く示唆している。この仮説をさらに検証するために、麻酔下の動物の別々のグループに、十二指腸に挿入したカテーテル（水、n）を介して、溶媒または条件付けに使用した異なるブドウ糖溶液を注入した。 = 5; 5%グルコース、n = 4; 15%グルコース、n = 6）、JV（生理食塩水、n = 5; 5%グルコース、n = 6; 22.5%グルコース、n = 4; 50%グルコース、n = 4）またはHPV（生理食塩水、n = 4; 5%グルコース、n = 7) 血糖値は、刺激灌流の開始時（ベースライン）と終了時（0分）、およびその後10分ごとに（10分～50分）尾部血糖値とHPV血糖値の両方から測定された。生データは、溶媒およびグルコース注入、および尾部血糖値とHPV血糖値について個別に解析された（図4を参照してください テーブルS2 覚醒動物の血糖値について説明したように、ピーク血糖値と平均血糖値を比較した（データ参照）。 テーブルS3 の三脚と S4）。ピーク相対血糖値（ベースラインの％）については、刺激（JV vs. HPV vs. 十二指腸5％グルコース vs. 十二指腸15％グルコース vs. JV 22.5％グルコース vs. JV 50％グルコース vs. 溶媒）と血液採取部位（尾 vs. HPV; F = 11.4、p<0.001）、尾部血糖とHPV血糖を別々に分析することが可能になった（ テーブルS4 詳細については、JV 5%グルコース投与後の血糖値は、側方バイアスの逆転を条件付けないコントロール刺激とみなされる（ 図1B）を、残りの刺激後に観察された値と比較した。Fまたは尾の血液測定では、JV 22.5％および50％グルコースと溶媒のみがJV 5％グルコースと有意に異なり、HPV 5％および十二指腸15％および5％グルコースはそうではなかった。 (図4C）。しかし、HPV血液測定では、側方バイアス反転を条件付けなかった唯一の他のグルコース刺激である十二指腸5%グルコース（ 図1A）は、JV 5％グルコース（図4D). このように、我々のこれまでの研究結果と一致して、麻酔ラットで測定されたHPVは、覚醒動物における条件付け後に観察される側方バイアスの反転を正確に反映するが、全身血糖値は反映しない。行動効果とHPVピーク血糖反応の類似性は、平均血糖値（テーブルS4）は、ブドウ糖投与の関連する行動効果は、持続的な血糖値の変化によるものではなく、一時的な高血糖レベルに起因することを示唆している。絶対血糖値（mg/dL）を比較した場合も同様の結果が得られた。 (テーブルS3).

図4  

肝門脈血糖値の上昇は、ブドウ糖刺激がサイドバイアス反転を条件付ける能力と平行しています。

これまでの研究では、味とは無関係に、糖の消化管からの摂取に反応して側坐核でドーパミンの放出が誘発されることが実証されている。 【2], 【4], 【11]. したがって、私たちは、この領域でのドーパミン放出が、5% ブドウ糖の JV 投与と HPV 投与によって異なる影響を受けるかどうかを理解することに興味がありました。 FASTスキャンサイクリックボルタンメトリーは、自発的なドーパミン放出イベントまたは「トランジェント」を特定するために使用されました。 【12], 【13], 【14], 【15] 麻酔ラットの側坐核殻（n = 12) (方法参照)。6～8分間のベースライン記録後、ラットの頸静脈に5%グルコースを、または頸静脈に5%グルコースもしくは溶媒を注入した。ベースラインの過渡的振動頻度（3.4±0.7回/分）、持続時間（520±68ミリ秒）、振幅（30±3nM）は、覚醒動物で報告されている値と同様であった。 【12], 【14], 【15] （参照してください 図3 5AとB 代表的な記録については、（15 mg/kg）を参照のこと。さらに、グルコース誘発性変化の測定後、すべての動物にコカイン（XNUMX mg/kg）を投与し、これらの条件下でのドーパミン再取り込み阻害効果を確認した。コカインは、振幅には影響を与えずに、過渡的頻度と持続時間を増加させることがわかった（図S5).

図5  

肝門脈にブドウ糖を注入すると、側坐核ドーパミンの一過性頻度が増加します。

ブドウ糖投与後の過渡的頻度の変化に関しては、反復測定二元配置分散分析により、時間（ベースライン vs. 1～5分 vs. 6～10分 vs. 11～15分 vs. 16～20分）の有意な主効果が明らかになった。 = 2.7、p = 0.044）であったが、治療群（JVグルコース対HPVグルコース対HPV生理食塩水；F = 1.6、p = 0.26）、因子間の有意な相互作用（F = 2.4、p = 0.036、 図5C因子間の有意な相互作用を考慮し、各治療群について時間の影響についてさらに比較を行った。HPV生理食塩水群およびJVグルコース群では、時間の影響は有意ではなかった（F = 0.5、p = 0.75とF = 0.61、p = それぞれ0.66）であり、各時点におけるそれぞれのベースラインとの比較も有意ではなかった（それぞれt<1.1およびt<1.5、すべてp>0.05）。しかし、HPVグルコース群では、時間の有意な効果が認められた（F = 3.9、p = 0.031; 反復測定一元配置分散分析) であり、ベースラインと比較すると、注入開始後の最初の5分間の過渡的頻度は高かった (t = 3、p<0.05）が、残りの期間ではそうではなかった（すべてt<1.7、p>0.05、事後Bonferroni t検定、参照 テーブルS5 詳細については、こちらをご覧ください。時間、治療群、またはそれらの相互作用による過渡的持続時間または振幅への影響は認められませんでした（図S4これらの動物では、JVまたはHPVの注入開始前と20分後に尾の血糖値も測定され、予想通り、グルコース注入後の一過性頻度の観察された差は、全身血糖値の差によるものではないことが示された（図5D). したがって、提示された行動および血糖データによれば、低濃度（5％）では、ブドウ糖をHPVに注入するとドーパミンの一過性頻度が大幅に増加しましたが、JVには増加しませんでした。

議論

本研究では、ブドウ糖の味覚的快楽側面とは独立して、吸収後メカニズムがブドウ糖の行動およびドーパミン報酬関連効果に関与していることを実証する。ラットにおいて、高濃度ブドウ糖溶液を静脈に投与すると、側方バイアス（図1Bしかし、これは、経口摂取したブドウ糖よりもはるかに高い血糖値をもたらすブドウ糖濃度でのみ可能であり、また、サイドバイアスを条件付けるのに十分な濃度でのみ可能であった（図2この矛盾を明らかにするために、腸管吸収後にブドウ糖が最初に蓄積される部位であるJVとHPVに投与されたブドウ糖の効果を比較するさらなる実験が行われた。 【16]この点に関して、低濃度のブドウ糖溶液ではHPVに投与すると頑健なサイドバイアスが生じるが、JVには生じないことがわかった（図3Aこの発見を裏付けるように、行動条件付けを誘発するのに十分な濃度のグルコースを腸管投与すると（図1A）は、HPVでは低濃度ブドウ糖溶液を投与した後に観察されたものと同様の血糖プロファイルをもたらしたが、JVではそうではなかった（図4最後に、低濃度ブドウ糖溶液をHPVに投与すると、JVには投与されなかったものの、高速スキャンサイクリックボルタンメトリーで測定したところ、側坐核殻におけるドーパミントランジェントの頻度が増加した（図5全体的に、これらの研究結果は、ブドウ糖の吸収後効果が砂糖摂取に起因する摂食後行動およびドーパミン報酬関連反応に十分であること、またHPVシステムの血糖値が全身血糖値よりもこの効果に大きく寄与していることを裏付けています。

摂食行動の制御における口腔因子と摂食後因子の異なる関与はよく特徴付けられている。 【1]食物摂取の摂食後制御は主に抑制的影響（すなわち満腹感）として認識されていたが、食物摂取の摂食後効果の肯定的な影響に関する研究は少なかった。 【17]初期の研究者たちは、栄養素の胃内注射が適切な行動強化剤として機能できることを実証したが、 【18], 【19]この発見は議論を呼んでおり、胃カニューレシステムの漏れに起因すると考えられていました。 【1], 【20]実際、ほとんどの著者は、胃に直接注入された栄養素が関連する味への好みを条件付けることを示す研究を展開した。 【20], 【21], 【22], 【23], 【24], 【25]そして最近になって、味覚受容体細胞に機能的な甘味伝達を持たないマウスでは、経口摂取は、いかなる経口刺激にも依存せず、強固な側嗜好を条件付けるのに十分であることがわかった。 【2]ここでは、マウスで以前に開発された行動手順 【2] ラットでの使用に適応させ、腸管からのブドウ糖摂取による行動条件付けを測定できることを実証した（図1A).

食物摂取の積極的な摂食後制御に関する文献は、現在ほぼ60年前のものであるが、これらの効果の根底にある末梢シグナル、特にグルコースのシグナルについては、依然として議論の余地がある。 【5]ラットやウサギにブドウ糖溶液を非経口投与し、それが肯定的な行動後条件付けのシグナルとしての効果を試験する実験では、肯定的な結果と否定的な結果の両方が得られた。 【7], 【26], 【27], 【28], 【29] そして否定的な結果 【30], 【31], 【32]ここでは、JV（図1Bこれらの結果は、より高い濃度のブドウ糖（30％）で陽性結果が得られていたため、JVブドウ糖投与との以前の矛盾を合理的に説明するものである。 【7] 否定的な結果が出た実験で使用されたもの（10％）よりも 【31], 【32].

ラットでは、HPVは以前、食欲後条件付けをサポートする吸収後シグナルの検出に重要な部位であると提案されていました。 【6]その後、絶食ラットで行われた研究では、HPVグルコース注射は味覚嗜好を条件付けしないことが判明し、行動を条件付けるには栄養素による腸刺激がHPV注入に必要であるという提案につながった。 【5]ここでは、食物を摂取できないラットでも、HPVグルコース注入はサイドバイアスを条件付けるのに十分であったことがわかった（図3A）。上記の否定的な実験と比較すると 【5]これらの結果は、より高いグルコース濃度（ここでは5%、彼らは10%を使用）の使用では説明できず、注入速度の違い（ここでは0.3 mL/分以上、彼らは0.083 mL/分）の結果である可能性があります。さらに、以前の研究結果と一致しています。 【6]同じ濃度のブドウ糖を静脈に注入しても、そのような効果は見られなかった（図1Bしたがって、私たちのデータは、食欲後摂食条件付けにおける腸管栄養刺激の重要性を排除することはできないが、それが必須ではなく、HPV システムの末梢で作用する吸収後因子がそのような行動効果に十分であることを明確に示している。

腸内に存在するブドウ糖やその他の栄養素が吸収され、全身循環よりもHPVの血液中の栄養素レベルが大きく上昇することに注意することが重要です。 【16]この効果はHPVへの栄養注入の効果に加算されるものと考えられ、腸内の栄養素の存在とHPV注入による行動調整能力との関連性について、これまで指摘されてきた合理的な説明となる。 【5], 【6]したがって、腸溶性、JV、および/またはHPV栄養注入の行動効果を比較する場合、これらの注入による血中栄養素濃度を直接測定することが重要です。しかし、静脈内ブドウ糖投与のポジティブコンディショニング効果を調査した研究のうち、全身血糖測定を含めた研究はごくわずかであり、結果はまちまちです。 【27], 【31], 【33]、HPV血糖値を含む研究はなかった。本研究では、覚醒ラットと麻酔ラットの両方において、尾血糖値測定では腸溶性グルコース、JVグルコース、HPVグルコース注入の行動への影響の差異を完全に説明できないことを示す（図3 2, ​,3B,3B, 4A、4C, S2 の三脚と S3; テーブルS1, S2, S3 の三脚と S4しかし、麻酔動物のHPV血液で測定を行ったところ、ピーク血糖値はグルコース溶液がサイドバイアスを調整する能力とよく相関していることがわかりました（図4Bと4D; テーブルS2, S3 の三脚と S4）。これは平均血糖値には当てはまらず、静脈内ブドウ糖注射が完全に生理的な血糖プロファイルをもたらさなかったという事実を反映している。また、ブドウ糖投与の行動への影響は、持続的な血糖上昇よりも、最高血糖値に依存していたことを示唆している。いずれにせよ、これらの知見は、食欲刺激後の行動調整において、吸収後のHPVへのブドウ糖負荷が重要であることをさらに裏付けており、重要な点として、栄養素が腸管に投与された場合であっても、JVやHPVに直接投与された場合であっても、このことが当てはまることを示している。

HPVに注入された栄養素の負の効果（すなわち、満腹感）を調べるための実験も、いくつかの種で行われてきました。正の条件付けの場合と同様に、一貫性のない結果が報告されています（参照： 【6], 【34] これらの違いの理由は、動物の栄養状態、HPV注入のプロトコル、異なる検査パラダイムに起因するとされている。 【34]実際、これらの要因のほとんどはHPV内の栄養レベルに影響を与えると思われ、この要因が、ここでポジティブ行動条件付けについて説明されているように、静脈内栄養注入の満腹感を与える効果の根底にある可能性があることを示唆しています。

JVまたはHPVへのブドウ糖注入による行動実験では、ブドウ糖の栄養学的特性による影響と、味覚刺激や浸透圧の変化による影響を区別するために、対照溶液も使用されました。JV注入実験では、甘味の血管内刺激に最適であることが以前に示された濃度のサッカリンナトリウム溶液が使用されました。 【9]HPV注入には、グルコースと同等の濃度で、血漿浸透圧に同様の変化を引き起こすものの、代謝への影響は最小限であるマンニトールが使用された。 【10]グルコースとは対照的に、サッカリンとマンニトールは、それぞれJVまたはHPVに注入後にサイドバイアスの変化を条件付けず、味覚と血漿浸透圧がこれらの行動効果の根底にあるメカニズムを排除した（図。 1B の三脚と ​そして3A）。3Aこれらの重要な制御は、マウスにおけるショ糖を用いた味覚非依存性行動条件付けに関する我々のこれまでの研究結果を裏付けた。 【2]また、口腔感覚や嗅覚の手がかりがない場合でも、栄養素の胃内および静脈内投与によってもたらされる道具的条件付けと場所嗜好条件付けの初期の報告もある。 【18], 【19], 【26], 【27].

ドーパミンが食物の食欲特性を媒介する役割は、これまで十分に確立されてきた。 【35]ショ糖などのカロリー含有糖の摂取により、側坐核（NAcc）におけるドーパミンレベルの上昇が起こる。 【36], 【37]甘味と食欲不振後の刺激の両方がこの効果に十分であることが示されている。 【2], 【38], 【39]しかし、糖類摂取後にNAccにおけるドーパミン放出につながる摂食後刺激のメカニズムは未だ解明されていない。吸収前刺激の重要性を主張するものとして、腸管由来ホルモンであるグレリンが中側坐核におけるドーパミン放出を刺激することが示されている。 【40]線条体ドーパミン放出の吸収後制御の証拠も提示されているが、報告された結果はやや曖昧である。 【8], 【41], 【42]重要なのは、血糖値が線条体のドーパミン恒常性に及ぼす影響は、脳内のグルコース感知ニューロンに起因することである。 【41]特に、ブドウ糖を黒質に直接注入すると、背側線条体のドーパミン濃度が上昇することが分かっている。 【43]ここでは、サイクリックボルタンメトリーを用いて、HPVに注入された5%のグルコースがJVではなくドーパミン一過性イベントの増加をもたらすことを発見しました（図5A～C）、両方のケースで同様の生理学的に関連する末梢血糖の上昇を引き起こします（図。 3B, 4A、4C の三脚と ​そして5D）。5Dこの発見は、吸収後のグルコースシグナルがNAccにおけるドーパミン放出を誘発するのに十分であることを確認するものであり、また、我々の知る限り初めて、これらの吸収後効果は脳内での直接的な検出や血管内味覚などの代替メカニズムではなく、HPVにおける血糖値の上昇に依存していることを実証した。JVとHPVに投与された5%グルコースのドーパミン作用の差異は、これらの処置が行動に及ぼす差異効果と並行していることから、特に重要である（図。 1B の三脚と ​そして3A)3A）およびHPV血糖（図4Bと4Dこのことは、後者がブドウ糖投与の行動および神経化学的効果の両方の根本的な説明因子である可能性があることを示唆している。

覚醒ラットでは自発的なドーパミンのトランジェントが報告されているが 【44], 【45]我々の知る限り、これは麻酔ラットにおける最初の報告である（図5Aと5B) にもかかわらず、過渡現象を説明するために使用される3つの特性（周波数、持続時間、振幅）は、覚醒したラットで報告されたものと非常に類似していることがわかった。 【14], 【15], 【44], 【46], 【47]さらに、麻酔下のラットでも、一過性の周波数はHPVへのグルコース注入（図5C）およびコカインの腹腔内投与（図S5Aサイクリックボルタンメトリーを用いた以前の実験では、経口摂取したショ糖に対するNAccドーパミン作動性反応が報告されていた。 【47] またはサッカリン 【39] これまでのボルタンメトリー研究と比較すると、経口刺激提示後に数秒間にわたって起こる反応ではなく、静脈内ブドウ糖注入後には数分にわたって過渡周波数の持続的な増加が報告されている。 【46], 【48]ノミフェンシンについてこれまで述べたことと同様に 【15] そしてコカイン 【45] 投与後、15 mg/kgのコカインを注射すると、NAccドーパミンの過渡的頻度（図S5A）と期間（図S5B）。しかし、過渡振幅（図S5Cこのように、精神刺激薬の効果は覚醒ラットと麻酔ラットで同様である。麻酔げっ歯類における一過性行動への影響を調べることは、環境や条件付けが望ましくない交絡因子となる状況において最も適切であると考えられる。

ドーパミンのトランジェントを測定したNAccは、均質な構造ではありません。NAccコアとNAccシェルという2つの主要な区分があり、報酬処理とドーパミン放出動態における機能的な違いが報告されています。 【49], 【50]ここで報告したボルタンメトリーデータは、殻小領域に埋め込まれた電極を用いて測定された。実際、コカイン注入後に観察された効果（図S5A）は以前の研究結果と一致しており、コカインはこのサブ領域の過渡的頻度を増加させるが、NAccコアでは増加させないことを示している。 【51]NAccシェル内のドーパミン伝達は、精神刺激薬と覚醒剤の両方に対する一次報酬処理に関与することが提案されている。 【49], 【51] 経口摂取刺激 【39]一方、NAccコアにおけるドーパミンの放出は、学習された連想の文脈における報酬予測の手がかりに対する反応においてより具体的な役割を果たすと考えられている。 【39], 【49]我々は、HPVグルコース注入がNAccシェルにおけるドーパミン一過性頻度の増加を引き起こすことを示した。これは、同じ領域におけるドーパミン受容体拮抗作用の効果から示唆されるように、炭水化物の経口摂取後の作用によって誘発される風味嗜好学習に関連する可能性がある。 【4]いずれにせよ、糖に対する吸収後反応におけるNAccコアの関与を​​探るにはさらなる研究が必要である。

これまでの研究では、舌の味覚細胞に見られる甘味の検出と伝達のメカニズムが腸にも存在し、糖の食欲の重要な後味調節因子であることが示唆されていた。 【52]しかし、私たちと他の研究者は、栄養価のない甘味料もこれらのメカニズムを活性化させることを示した。 【52]、条件側をしない 【2] または風味 【53] さらに、味覚様の検出と伝達機構に欠陥があっても、Trpm5 KO 【2] そしてT1R3 KO 【53] マウスは栄養糖によって条件付けされた嗜好性を獲得する。ここで示した結果は、糖の摂取によって生じる行動への肯定的な影響とNAccドーパミン作動性効果に、全身的ではなくHPVの血糖値変化に依存する吸収後因子が寄与していることを示唆している。これらの結果は、吸収前メカニズムの関与が主要な役割を担っていることを否定するものの、そのようなメカニズムを排除することはできず、実際、粘膜因子と吸収後因子が摂食後条件付けにおいて協力し合う可能性を示す証拠がある。 【5]いずれにせよ、グルコース依存性HPV吸収後因子の性質は未だ解明されていない。一つの可能​​性としてインスリンの関与が挙げられ、特にこのホルモンは高血糖に対するドーパミン作動性反応に関与していることが示されている。 【41]もう一つの候補となる介入メカニズムは、インスリンレベルに依存する肝臓の純ブドウ糖吸収である。 【54] 末梢注入と比較して、HPVでブドウ糖を投与すると、 【55]肝細胞ATP濃度で測定された肝臓のエネルギー状態と食物摂取量との関係も示されている。 【56]最終的に、これらの要因は、ブドウ糖の利用が行動条件付けとブドウ糖消費のドーパミン作動性効果に必要であることを示す最近の研究結果も説明する可能性がある。 【8]肝臓から脳への信号伝達のメカニズムも不明です。一つの仮説は、グルコース感受性迷走神経求心性ニューロンを介した神経伝達であると考えられます。 【57]しかし、腹部の迷走神経および非迷走神経求心性神経を損傷しても、グルコースポリマーの経腸投与によって条件付けされた風味嗜好を阻害することは示されていない。 【58], 【59], 【60]あまり研究されていないもう一つの選択肢 【61]肝臓や膵臓で産生される可能性のある体液性因子が血流中に放出され、脳内で直接作用して食物摂取を調節するというものである。 【62].

要約すると、これらの知見は、ブドウ糖の吸収後効果は砂糖摂取に対する食欲行動反応を誘発するのに十分であり、HPVシステムの血糖値は全身血糖値よりもこの効果に大きく寄与しているという主張を裏付けています。さらに、これらの効果は味覚、摂取後粘膜刺激、血漿浸透圧とは独立して発現します。さらに、これはHPVブドウ糖投与が線条体ドーパミントランジェントを誘発するのに十分であり、この効果がこの治療法の肯定的な行動効果の根底にある可能性があることを初めて実証したものです。減量のための胃腸バイパス手術が劇的な行動効果をもたらすことを考えると、 【63], 【64]HPVの栄養レベルに影響を及ぼす可能性があることから、ここで説明したメカニズムは人間の肥満の原因と治療に役割を果たす可能性があり、動物モデルと人間モデルの両方でさらに広範な研究を行う価値があると考えています。

材料と方法

倫理声明

すべての手順は、デューク大学動物管理使用委員会によって承認されたプロトコル (プロトコル番号 A329-07-12) に厳密に従って実行されました。

科目

チャールズ・リバーズ・ラボラトリーズ（ノースカロライナ州ローリー）から、雄のロングエヴァンスラット12匹と雄のスプレーグドーリーラット12匹を入手し、プレキシガラスケージに個別に飼育した。すべての動物は3時間の明暗周期で飼育され、実験は明期に行われた。各実験時、動物は6～XNUMXヶ月齢で、使用した刺激に対して未反応であった。予備実験では、静脈注射による実験を行うために必要な条件下では、経口摂取を行動セッションに限定した場合にのみ、安定した舐め行動率が得られることが示された。したがって、ピュリナのげっ歯類用飼料と水は、 アドリブでただし、行動試験中は、動物は一晩絶食となり、行動課題中のみ水分摂取が可能であった。麻酔動物を用いた実験では、実験開始約24時間前から摂食・水分制限が行われた。体重がベースラインの85%を下回った動物については、摂食・水分制限を中止し、実験から除外した。

刺激

すべての輸液（d-グルコース – 5%、15%、22.5%、50%、d-マンニトール – 5%、サッカリンナトリウム – 3.16%）は、毎日脱イオン水または0.9% NaClで調製し、室温で保管しました。脱イオン水と0.9% NaCl溶液も使用され、「溶媒」として指定されています。脱イオン水は経口投与も行われ、別の一連の実験では、脱イオン水で調製した5%および15%のグルコース溶液も同様に経口投与されました。本論文では、d-グルコース、d-マンニトール、サッカリンナトリウム、脱イオン水、NaClをそれぞれグルコース、マンニトール、サッカリン、水、生理食塩水と呼んでいます。すべての化学物質はSigma-Aldrich（ミズーリ州セントルイス）から入手した試薬グレードのものでした。

頸静脈および肝門脈（HPV）カテーテル挿入

ポリウレタンカテーテル（Strategic Applications, Inc.、イリノイ州リバティビル）を、75匹のラットの右頸静脈と35匹のラットの肝門脈に植え込んだ。一部の動物には施設外（Charles Rivers Laboratories、マサチューセッツ州ウィルミントン）でカテーテルを留置し、その他の動物には同じ手順で院内でカテーテルを留置した。簡単に説明すると、動物は5%ハロタンで麻酔し、続いてキシラジン（5～20 mg/kg）とケタミン（75～100 mg/kg）を腹腔内または筋肉内に注射した。必要に応じて追加投与した。頸静脈カテーテル挿入のため、右頸静脈を露出させるために小切開を行った。静脈の頭側端を結紮し、尾側に緩い結紮糸を置いて血管の5 mm部分を隔離した。門脈カテーテル挿入では、腹部正中切開を行い、盲腸を引き出して腸間膜静脈を同定しました。同様に、静脈の遠位端を結紮し、血管の一部を隔離するために近位に緩い結紮糸を配置しました。どちらの場合も、カテーテルは結紮糸の間に作った切開部に挿入され、カテーテルを挿入した血管の周りで緩い結紮糸を結ぶことで所定の位置に固定されました。次に、肩甲骨領域に小さな切開を入れ、カテーテルを皮下トンネルに通してこの切開部から体外に出しました。開存性をテストし、カテーテルに「ロッキング溶液」（500% グルコース中の 50 IU/mL ヘパリン）を満たしてプラグで密封しました。頭側に皮下皮膚ポケットを作成し、カテーテルの余長部分をポケットに挿入しました。最後に、血管切開部位と肩甲骨領域の皮膚切開部を創傷クリップで閉じました。動物は術後3～5日間の回復期間を経た後、更なる実験手順を開始しました。これらの手順の前に、カテーテルロック液は50% NaCl溶液中の0.9 IU/mLヘパリンに交換されました。この溶液は、数日間にわたって実施された行動実験において開存性を維持するためにも使用されました。

行動設定

すべての行動テストは、メドアソシエイツ（メドアソシエイツ社、バーモント州セントオールバンズ）の行動ボックスで実施され、それぞれは前述のように換気と音響減衰のチャンバーで囲まれていた。 【65]簡単に説明すると、チャンバーの壁の 20 つにシッパー チューブ用のスロットが 50 つ設けられていました。シッパー チューブへのアクセスは、コンピュータ制御のドアでブロックすることができ、シッパー スロットには、舐め検出に使用するビーム リコメーター (Med Associates Inc.、バーモント州セントオールバンズ) が設けられていました。各シッパー チューブには、刺激溶液が入っている 10 ml クロマトグラフィー カラム (Kontes Flex-Columns、Fisher Scientific、ニューハンプシャー州ハンプトン) に接続された 3 ゲージのステンレス鋼製カニューレが 10 つありました。刺激溶液の入った溶液容器は、音響減衰チャンバーの外側に設置され、重力による液体の流れを促進するために高い位置に保たれていました。コンピュータ制御のソレノイド (Parker Hannifin Corporation、ニュージャージー州フェアフィールド) によって流体の流れが制御され、舐めが検出されてから 3 ms 以内にバルブの 7 つが開き、約 XNUMX µL の流体が送り出されました。行動課題中に溶液を血管内に注入するために、シリンジポンプ（Med Associates Inc.、バーモント州セントオールバンズ）を使用した。ポンプは舐め動作が検知されてからXNUMXms後に作動し、ポンプに接続されたシリンジ内の溶液が約XNUMXµL注入された。これにより、注入速度は舐め動作の速度（約XNUMXHz）と一致し、摂取された液体の量は注入量とほぼ等しかった。

摂食後効果への条件付け

一般議定書

ラットが72瓶のパラダイムでブドウ糖によって条件付けされた側バイアスを発達させるかどうかをテストするために、XNUMX匹の動物を、以前にマウスで使用したのと同様の条件付けプロトコルにさらした。 【2]各動物について、サイドバイアスは 10分間 行動箱の両側に水を供給する試験（4本ボトル水vs.水試験）を実施しました。明確な片側バイアスが確認された後、動物はXNUMX日間、 30分間 箱の両側に毎日交互に水が提示され、自由に水にアクセスできるセッション（ワンボトル強制選択訓練セッション）が行われた。3日目と1000日目には、最初の片側バイアスとは反対側に水が提示され、最初の1000回の舐め（すなわち、3×XNUMX µL）では、XNUMX mLの条件刺激が同時に水に与えられた。 = 3mL）。3日目と1000日目には、最初の1000回の舐めにおいて、水が最初の側方偏向時に提示され、同時に8mLの溶媒（生理食塩水または水、詳細は下記参照）が水とともに提示された。通常、最初のXNUMX回の舐めは最大XNUMX分で行われた。訓練後、側方偏向の反転が試験された。 10分間 8本のボトルの水と水の試験。これらの実験では、5匹の動物が病気または過度の体重減少のためにコンディショニングプロトコルを完了できず、他の13匹ではコンディショニングプロトコルに誤りがありました。これらXNUMX匹の動物のデータは分析から除外されました。

条件付け刺激

11匹の動物では、水を求めて舐めている間に、溶媒（水）とブドウ糖溶液（6%のラット5匹と5%のラット15匹）を経口投与して条件付けを行った。33匹の動物では、溶媒（水または生理食塩水 - 溶媒の種類による差は見られず、データは示していない）とサッカリン（5匹）またはブドウ糖溶液（10%のラット5匹、7%のラット22.5匹、11%のラット50匹）を点滴で投与して条件付けを行った。 頸静脈 15匹の動物で、5%マンニトール（5匹）または5%グルコース（10匹）をカテーテルを通して注入してコンディショニングを行った。 門脈 静脈カテーテルを用いてコンディショニングを行った動物では、試験およびコンディショニングセッションの前に、5%イソフルランを用いて動物を麻酔し、カテーテルを輸液ポンプに装着したシリンジに接続しました。

血糖値測定

目覚めた動物たち

ラットはまず、毎日10分間、自由に水を摂取できるように訓練されました。安定した飲水量が得られた後、試験セッションを実施し、最初の1000回の水舐めにおいて、舐めると同時に特定の刺激（約3 mL）を経口投与または点滴投与しました。7匹のラットにはグルコース溶液（3%グルコース溶液5匹、4%グルコース溶液15匹）が経口投与されました。20匹のラットには、グルコース溶液が頸静脈カテーテル（6%グルコース溶液5匹、4%グルコース溶液22.5匹、6%グルコース溶液50匹）または門脈カテーテル（4%グルコース溶液5匹）を介して投与されました。試験当日、試験室への曝露前と曝露直後（それぞれベースラインおよび0分）、そして動物をホームケージに戻してから10分間隔（10分、20分、30分、40分）で尾血を採取し、血糖値を測定した。血糖値は携帯型血糖測定器（Precision Xtra、アボットラボラトリーズ社、アボットパーク、イリノイ州、米国；最大検出濃度500 mg/dL）を用いて測定した。

麻酔動物

未処置のラットを5%ハロタンで麻酔し、続いて50mg/kgのペントバルビタールを筋肉内注射した。これは血糖値への影響が小さい麻酔戦略の一つであることが示されている。 【66]必要に応じて追加投与した。腹部正中切開を行った。以前に手術を受けていない15匹のラットの胃壁を穿刺し、ポリエチレンカテーテルをその先端が十二指腸の幽門から約2cmの位置にくるように挿入した。残りの30匹のラットには、以前に頸静脈カテーテルまたは門脈カテーテルが埋め込まれていた。尾の血糖値は5～10分間隔で測定した。尾の血糖値が安定したら、尾と門脈の血糖値のベースライン（0′）を記録した。門脈の血糖値を採取するために、肝門脈を肝門部の近くで特定し、31ゲージの針を使用して0.05～0.1 mLの血液を採取した。その後、シリンジポンプ（Med Associates Inc.、バーモント州セントオールバンズ）を用いて、特定の刺激物質3mLを8分間連続注入し、行動訓練セッションの状況を再現した。十二指腸カテーテルを留置したラットのうち、5匹には溶媒（水）、4匹には5%グルコース、6匹には15%グルコースを注入した。門脈カテーテルを留置した11匹のラットには、溶媒（生理食塩水、n= = 4)または5%のブドウ糖が投与された（n = 7) 残りの19匹のラットには頸静脈カテーテルが挿入され、生理食塩水またはn = 5）またはブドウ糖溶液（5％、n = 6; 22.5%、n = 4; 50%、n = 4) 尾血および門脈血は、点滴開始10分後から1分間隔で最大10時間採取した（10分、20分、30分、40分、50分、60分）。尾血および門脈血中の血糖値は、前述のように測定した。

高速走査サイクリックボルタンメトリー

電極

炭素繊維マイクロ電極は、前述のように直径7μmのT-300炭素繊維（Amoco、サウスカロライナ州グリーンビル）から作製された。 【67]必要に応じて、ガラス/繊維界面にエポキシ樹脂を塗布し、密閉性を向上させました。ガラス/炭素シールからは、約50～100µmの繊維が露出していました。すべての電極は、使用前に活性炭Norit-Aを含む2-プロパノールに少なくとも10分間浸漬しました。側坐核の開始深度まで下げた後、電極は三角波（15V/秒でAg/AgClに対して-60V～0.4V）で1.3Hz、400分間サイクル印加し、その後、データ収集に使用した周波数15Hzでさらに10分間サイクル印加することでコンディショニングを行いました。 【68]塩化銀線を参照電極として使用し、すべての電位は Ag/AgCl に対して報告されました。

電気化学

高速スキャンサイクリックボルタンメトリー（FSCV）には、UEI電気化学装置（ノースカロライナ大学化学電子工学部、ノースカロライナ州チャペルヒル）を使用しました。波形生成、データ収集、デジタルフィルタリング、ドーパミン過渡現象の検出と解析には、ナショナルインスツルメンツ社製のボード（PCI-6052およびPCI-6711E）とTH-1ソフトウェア（ESA社、マサチューセッツ州チェルムズフォード）を使用しました。細胞外ドーパミンを検出するために、三角波形（Ag/AgClに対して0.4 V/秒で-1.3 V～400 V）を炭素繊維微小電極に10 Hzで印加しました。細胞外ドーパミンの変化は、ドーパミンのピーク酸化電位（約100 V）における0.65 mVのウィンドウにわたって電流をモニタリングすることで測定しました。ドーパミン電流 インビボの フローインジェクションシステムで126種類のドーパミン標準溶液を用いて実験的に電極を校正することにより、ドーパミン濃度に変換した。校正に使用した緩衝液の組成は（mM）：2.5 NaCl、2.4 KCl、XNUMX CaClであった。21.2 MgCl2、2.0 Na2SO4、1.2 NaH2PO4、15トリス塩酸、pH = 7.4.

生体内法

3匹のラットは、カテーテル留置から少なくとも1.5日間回復した後、一晩絶食・絶水とした。絶食の翌朝、ラットはウレタン（腹腔内37 g/kg）で麻酔され、定位固定装置（David Kopf Instruments、カリフォルニア州タジュンガ）に設置された。体温はDeltaphase Isothermal Pad（Braintree Scientific、マサチューセッツ州ブレインツリー）を用いて5.2℃に維持された。頭皮とその下の筋膜を切除し、作業電極、刺激電極、および参照電極用の穴を開けた。定位固定座標は、ブレグマから前後方向（AP）および内外側方向（ML）、硬膜から背腹方向（DV）をmm単位で示した。双極性刺激電極（Plastics One Inc.、バージニア州ロアノーク）を腹側被蓋野（VTA）に配置した：-1.0 AP、+7.5 ML、-9.0～-1.7 DV。炭素繊維微小電極を同側側坐核殻に配置した（+0.8 AP、6.4 ML、-7.4～-24 DV）。Ag/AgCl参照ワイヤを対側皮質に配置した。VTAの60パルス2 Hz刺激列（二相性、各位相130 ms、30 µA）から得られた細胞外ドーパミン濃度を記録した。刺激電極と作用電極の位置は、電気刺激によるドーパミン放出と自発的なドーパミントランジェントをサポートする部位を見つけるために最適化された。刺激放出から得られたサイクリックボルタモグラムから、その後のトランジェント識別用のドーパミンテンプレートを作成した。一過性解析のために選択されたすべての部位は、信号対雑音比 6 以上の刺激によるドパミン放出をサポートしました。尾部の血糖値は上記のように測定され、ベースライン データはそれ以上刺激せずに 10 ～ 5 分間記録されました。最終的なベースライン データ収集の直後に、注入ポンプがオンになりました。グルコース (生理食塩水で 3%) を肝門脈または頸静脈に注入しました (5 mL/20 分)。コントロール グループについては、門脈に生理食塩水を注入しました。2 分間のファイルを 15 分間連続して記録し、その後尾部の血糖値を再度測定し、刺激による放出が維持されていることを確認しました。25 匹の動物では、血糖値測定器の故障のため、血糖測定を実行できませんでした。記録されたドパミン放出部位がドパミン取り込み阻害に反応するかどうかを決定するために、注入の 4 時間後に XNUMX mg/kg のコカインを腹腔内注射しました。コカイン投与後XNUMX分間データを記録し、刺激放出を再確認した。XNUMX匹の動物では、コカイン投与時に一過性周波数が低下していたか、不安定であった。

データ解析

データ解析の結果は平均値±標準誤差として表し、「n」はラットの数です。解析はGraphPad Prism（GraphPad Software, Inc.、カリフォルニア州サンディエゴ）またはNCSS 2000ソフトウェア（NCSS、ユタ州ケイズビル）を用いて実施し、二元配置分散分析または一元配置分散分析（Bonferroni事後検定を含む）および二標本t検定または一標本t検定を実施しました。多重比較に対する逐次Bonferroni補正は、Holm法を用いて実施しました。 【69] 同じデータセットで複数の独立した t 検定が使用される場合。

行動選好尺度

2瓶嗜好テストは嗜好比を計算することによって分析された。

方程式画像

ここで、n(.)は、セッション中に特定のシッパーで検出された舐め回数の合計を表します。有意差検定は、どちらのシッパーに対しても無関心を意味する基準値0.5に対するXNUMX標本t検定に基づいて行われました。

血糖値の測定

ベースライン血糖値は、各動物の採血部位ごとに、刺激物質の摂取または投与開始直前に1回測定することで定義しました。血糖値は絶対値（mg/dL）またはベースラインからの％変化として分析しました。刺激物質の摂取または投与後の平均血糖値を算出し、この期間における最高血糖値（ピーク血糖値）も特定しました。

ドーパミントランジェント

自発的なドーパミントランジェントは、ドーパミンピークと既知のテンプレートボルタモグラムの対応を決定する公開された手順を使用して特定されました。 【70]電気刺激によるドーパミン放出から得られたドーパミンサイクリックボルタモグラムをテンプレートとして使用した。TH-1ソフトウェアのアルゴリズムを用いて、各ポイントのサイクリックボルタモグラムからベースラインサイクリックボルタモグラムを減算した。各データファイルについて、この分析には、試験データポイントの0.5秒、1.5秒、0.5秒、または1.0秒前に開始する1.5～2.5秒のベースライン持続時間を用いた0.1回のパスが含まれていた。ドーパミントランジェントを確認するための基準は、公開されている方法を採用し、テンプレートと高い相関性（r≥0.86）を示す連続したXNUMXつのポイント（XNUMX秒分解能）とした。 【14], 【15], 【70], 【71]特別に設計されたMATLABプログラムにより、すべてのパスの結果を統合し、トランジェントの数とその持続時間（0.1秒単位のポイント数）、および振幅を表にまとめた。トランジェントは、少なくともXNUMXつの連続したドーパミンポイントから生じた。振幅は、トランジェントのピークドーパミン電流からトランジェントピークの開始付近のベースラインを差し引いた値として決定され、その後のドーパミン濃度に変換された。 ビトロ 校正後 【14]連続した過渡点の数（0.1秒）を過渡持続時間として使用した。 【14].

サポート情報

図S1

コンディショニングセッション中の水の摂取。 コンディショニングセッション中の全体的な水消費量は、反復測定二元配置分散分析を使用して比較されました。 A. 経口刺激で条件付けされた動物は、グルコース投与時よりも溶媒投与時に舐める回数が多かった（F = 8.3、p = 0.02）であったが、条件刺激（5％対15％グルコース、F = 0.2、p = 0.65）またはこれらの因子間の相互作用（F = 0.05、p = 0.82）。グルコース利用可能時の舐め行動減少の影響は、グルコースとビヒクルの摂取量を比較した際に、5%（4933±117 vs. 5460±141、t）とXNUMX%（XNUMX±XNUMX vs. XNUMX±XNUMX）の両方で条件付けされた動物で差が見られなかったことから、小さいものであった。 = 2.3、p>0.05）および15％グルコース（5136±259 vs. 5585±502、t = 1.8、p>0.05、事後Bonferroni t検定）。 B. 口腔条件付け試験の所見と同様に、JVに刺激を与えて条件付けされた動物は、グルコースまたはサッカリン投与時よりも溶媒投与時に舐める回数が多かった（F = 4.5、p = 0.04）であったが、条件刺激（5％グルコース対22.5％グルコース対50％グルコース対3.16％サッカリン、F = 1.5、p = 0.23）またはこれらの因子間の相互作用（F = 1.4、p = 0.27）。また、5%グルコースで条件付けされた動物のグルコースまたはサッカリンとビヒクルセッションでの摂取量の比較では、差異は見られませんでした（6614±356 vs. 6466±334、t = 0.3、p>0.05）、22.5％グルコース（5092±650 vs. 6157±245、t = 1.7、p>0.05）、50％グルコース（4824±592 vs. 6062±763、t = 2.5、p>0.05）および3.16％サッカリン（4826±802 vs. 5250±512、t = 0.6、p>0.05、事後Bonferroni t検定）。 C. 肝門脈（HPV）カテーテルを装着した動物では、グルコースを投与した動物の方がマンニトールを投与した動物よりも全体的に舐める行動が多かった（F = 259、p<0.0001）であったが、溶媒投与とグルコースまたはマンニトール投与では効果は見られなかった（F = 0.7、p = 0.41）またはこれらの因子間の相互作用（F = 0.1、p = 0.73）。さらに、5%グルコース（7314±148 vs. 7758±139、t = XNUMX）と条件付けされた動物のグルコースセッションとビヒクルセッションでの消費量を比較したところ、差は見られませんでした。 = 0.4、p>0.05）および5％マンニトール（3887±183 vs. 4244±574、t = 0.8、p>0.05、事後Bonferroni t検定）。

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図S2

覚醒した動物の尾部血糖値（mg/dL）の平均値と最大値。 A. 経口的に条件付けされた動物では、5％および15％のブドウ糖投与後の平均血糖値に差は見られなかった（それぞれ84±7.4対94±3、t = 1.4、p = 0.23、無対t検定）。 B. 条件付け側バイアス反転に有効であった経口15%ブドウ糖投与後の平均血糖値も、ブドウ糖の静脈内投与の結果と比較した。有意な全体的な効果が認められた（F = 27.6、p<0.0001、一元配置分散分析）および経口15％ブドウ糖に対する対比較では、JV 22.5％（220±19.2、t = 3.6、p<0.001）および50％グルコース（315±33.6、t = 7、p<0.001）であったが、5％グルコース（84±1.8、t = 0.3、p>0.05、事後Bonferroni t検定）。 C. HPV（93±5.9）およびJVの5％ブドウ糖投与後の平均血糖値は有意差がなかった（t = 1.7、p = 0.13、無対t検定）。 D～F。 平均血糖値ではなくピーク血糖値を比較した場合も同様の結果が得られた。5%血糖値と15%血糖値の間には差は見られなかった（それぞれ97±2.5 vs. 102±4.3、t = 0.87、p = 0.42、無対t検定; D）。経口15%ブドウ糖とブドウ糖の静脈内投与の比較では、有意な全体的効果が認められた（F = 34.4、p<0.0001、一元配置分散分析）と対比較では、JV 22.5％（319±26.3、t = 4.9、p<0.001）および50％グルコース（424±42.1、t = 8、p<0.001）であったが、5％グルコース（110±6.5、t = 0.2、p>0.05; 事後Bonferroni t検定; E)。最後に、HPV（93±5.9）とJVの5％ブドウ糖投与後の最高血糖値には有意差はなかった（t = 2、p = 0.08、無対t検定、F)。

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図S3

覚醒した動物の平均尾部血糖値（ベースラインに対する％）。 血糖値は上図の通り（図S2）もベースラインに正規化して分析されました（％ベースライン； 図2B、2C の三脚と ​and3B3B ピーク値の場合） A. 経口的に条件付けされた動物では、5％および15％のブドウ糖投与後の平均血糖値に差は見られなかった（100±4.2 vs. 121±7.3、t = 2.3、p = 0.07、無対t検定）。 B. 条件付け側バイアス反転に有効であった経口15%ブドウ糖投与後の平均血糖値も、ブドウ糖の静脈内投与の結果と比較した。有意な全体的な効果が認められた（F = 20.8、p<0.0001、一元配置分散分析）および経口15％ブドウ糖に対する対比較では、JV 22.5％（296±29.4、t = 3.6、p<0.01）および50％グルコース（402±46.2、t = 6.3、p<0.001）であったが、5％グルコース（130±6.4、t = 0.2、p>0.05、事後Bonferroni t検定）。 C. HPV（121±6.6）およびJVの5％ブドウ糖投与後の平均血糖値は有意差がなかった（t = 1、p = 0.33、無対t検定）。

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図S4

麻酔したラットの門脈または頸静脈にブドウ糖または溶媒を投与した後の側坐核におけるドーパミンの一過性の持続時間と振幅。 高速スキャンサイクリックボルタンメトリーを用いて、麻酔ラットの側坐核殻における自発的ドーパミン放出イベント（トランジェント）を同定した。測定はベースライン期間と、JV（n = 5）へのXNUMX%グルコース注入中および注入後に実施した。 = 4）またはHPV（n = 4）、または後者の車両（n = 4) 血管内皮細胞（HPV）へのグルコース注入は、血管内皮細胞（JV）へのグルコース注入とは異なり、HPVへの溶媒注入の効果と比較して、ドーパミン一過性頻度の増加を引き起こすことが示された（ 図5). A. ここでは、注入前（ベースライン）および注入開始後5分ごとの過渡的持続時間（ミリ秒）を、HPVビヒクル（ベースライン、464±204、5分、371±117、10分、316±29、15分、350±74、20分、402±82、青い四角）、HPVグルコース（ベースライン、548±79、5分、437±48、10分、416±34、15分、434±61、20分、474±61、赤い四角）、およびJVグルコース（ベースライン、534±120、5分、507±142、10分、464±41、15分、396±108、20分）について示しています。 493±97; 黒四角）。二元配置分散分析では、治療による有意な効果は見られなかった（F = 1.6、p = 0.21）、時間（F = 0.9、p = 0.49）とこれらの因子間の相互作用（F = 0.08、p = 1）。 B. 過渡振幅（nM）については、HPVビヒクル（ベースライン、35.9±7.4、5分、32.8±7.1、10分、29.7±7、15分、26.5±5.3、20分、24.4±3.3）、HPVグルコース（ベースライン、29.3±7.7、5分、26.6±4.4、10分、30.2±4.8、15分、26.5±3.7、20分、23.1±3.4）、JVグルコース（ベースライン、26.3±1.2、5分、21.7±1.8、10分、24.9±1.8、15分、25.9±1.2、20分、25.8±3.4）の値も比較した。二元配置分散分析では、治療による効果は見られませんでした（F = 1.4、p = 0.25）、時間（F = 0.7、p = 0.58）とこれらの因子間の相互作用（F = 0.4、p = 0.91）。

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図S5

全身コカイン投与後の麻酔ラットの側坐核におけるドーパミンの一過性の頻度、持続時間および振幅。 選択されたドーパミン放出部位がドーパミン取り込み阻害に反応するかどうかを判定するため、グルコース投与が側坐核ドーパミントランジェントに及ぼす影響を測定した後に、15 mg/kgのコカインを腹腔内投与した。4匹の動物では、トランジェントの頻度が低下したか、不安定であった。残りの8匹のラットのデータは、投与群に関わらずまとめて提示している。反復測定一元配置分散分析（ANOVA）を用いて、腹腔内投与後の5分間間隔におけるトランジェントの頻度、持続時間、および振幅の変化を、コカイン投与直前のベースラインと比較した。 A. コカインは、過渡周波数（F = 3.8、p = 0.007）となり、ベースライン（2.2±0.7トランジェント/分）と比較して20分（7±2.1、t = 3.3、p<0.05）では有意な変化は見られなかったが、残りの時点（5分、2.2±0.7、t = 0.004; 10分、4.5±1.3、t = 1.5; 15分、5.9±1.8、t = 2.5; 25分、5.9±1.6、t = 2.5; すべて p>0.05; 事後 Bonferroni t 検定)。 B. 一時的な持続時間に関しても、コカインは全体的に有意な効果を示した（F = 4、p = 0.006）、423分後（32±10、t = 3.4、p<0.01）、15分（736±126、t = 3.7、p<0.01）、20分（700±65、t = 3.3、p<0.05）、25分後では705±76、t = 3.4、p<0.01）であったが、5分後（600±84、t = 2.1; p>0.05; 事後Bonferroni t検定)。 C. コカインの過渡振幅への影響は、全体（F = 1.3、p = 0.31）であり、各時点をベースライン（21.2±2.4 nM; 5分、23.7±1.9、t = 1.1; 10分、25.5±3.8、t = 1.9; 15分、26.5±3.2、t = 2.3; 20分、23.9±1.8、t = 1.2; 25分、23.6±2、t = 1.1; すべて p>0.05; 事後 Bonferroni t 検定)。

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テーブルS1

覚醒した動物の尾の血糖値（mg/dL）の測定値。 ラットは、条件付けに使用したブドウ糖溶液（経口投与で5%または15%、JVでは5%、22.5%または50%、HPVでは5%）のいずれかを同時に投与しながら水を飲水した。0分間の行動セッションの開始時（ベースライン）と終了時（10′）、およびその後10分ごと（10′～40′）に尾の血液から血糖値を測定した。反復測定二元配置分散分析を用いて血糖値（mg/dL）を比較したところ、刺激（JV vs. HPV vs. 経口5%ブドウ糖 vs. 経口15%ブドウ糖 vs. JV 22.5%ブドウ糖 vs. JV 50%ブドウ糖、F = 25.4、p<0.0001）、時間（ベースライン対0′対10′対20′対30′対40′；F = 42.24、p<0.0001）とこれらの因子間の相互作用（F = 12.5、p<0.0001）。各時点で、JV 5%グルコース（側バイアス反転を条件付けないコントロール刺激とみなした）投与後の血糖値と、残りのグルコース刺激後の血糖値との比較が行われた（詳細はこの表を参照）。有意な交互作用が認められたため、各刺激について個別にデータを解析した結果、すべてのケースで時間の有意な影響が示された（JV 5%グルコース、F = 14.48、p<0.0001; JV 22.5%グルコース、F = 19.98、p<0.0001; JV 50%グルコース、F = 28.04、p<0.0001；経口15％ブドウ糖、F = 3.212、p = 0.036; HPV 5%グルコース、F = 26.7、p<0.0001）経口5％ブドウ糖（F = 2.68、p = 0.087、反復測定一元配置分散分析）。最後に、各時点の血糖値をそれぞれのベースライン値と比較しました（詳細はこの表を参照）。有意な比較は太字で強調表示しています。（ベースライン - ベースライン）。

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テーブルS2

麻酔動物における血糖値（mg/dL）の測定値。 ラットは麻酔され、十二指腸（水、n）を通して、溶媒またはコンディショニングに使用した様々なグルコース溶液を注入された。 = 5; 5%グルコース、n = 4; 15%グルコース、n = 6）、JV（生理食塩水、n = 5; 5%グルコース、n = 6; 22.5%グルコース、n = 4; 50%グルコース、n = 4）またはHPV（生理食塩水、n = 4; 5%グルコース、n = 7) カテーテル。刺激灌流開始時（ベースライン）と終了時（0分）、およびその後10分ごとに（10分～50分）、尾部血糖値とHPV血糖値を測定した。まず、溶媒およびグルコース注入時の血糖値と、尾部血糖値およびHPV血糖値のデータを別々に解析した。 A. 溶媒注入後の尾血糖測定では、時間（ベースライン vs. 0′ vs. 10′ vs. 20′ vs. 30′ vs. 40′ vs. 50′; F = 2.6、p = 0.02）だが、注射部位（頸静脈対十二指腸対HPV; F = 0.3、p = 0.78）またはこれらの因子間の相互作用（F = 1.1、p = 0.4、繰り返し測定二元配置分散分析）。各時点で、JV生理食塩水投与後の血糖値と十二指腸水またはHPV生理食塩水投与後に観察された血糖値とのさらなる比較が行われた（詳細はこの表を参照）。 B. 溶媒注射後のHPV血糖測定では、時間経過に伴う全体的な影響は認められなかった（F = 1、p = 0.41）、注射部位（F = 1.3、p = 0.31）もこれらの因子間の相互作用も見られなかった（F = 1.9、p = 0.05、繰り返し測定二元配置分散分析）。ここでも、各時点でJV生理食塩水投与後の血糖値と他の投与経路の溶媒投与後に観察された血糖値の比較が行われた（詳細はこの表を参照）。 C. ブドウ糖注射後の尾血糖測定と比較すると、時間に関して有意な全体的な効果が認められた（F = 129.3、p<0.0001）、刺激（JV vs. HPV vs. 経口5％グルコース vs. 経口15％グルコース vs. JV 22.5％グルコース vs. JV 50％グルコース；F = 45.5、p<0.0001）とこれらの因子間の相互作用（F = 30.7、p<0.0001、繰り返し測定二元配置分散分析）。各時点で、サイドバイアス反転を条件付けないコントロール刺激とみなされたJV 5％グルコース後の血糖値と、残りのグルコース刺激後に観察された血糖値との間でさらなる比較が行われました（この表の詳細を参照）。 D. ブドウ糖注射後のHPV血糖測定では、時間経過とともに有意な影響が見られました（F = 132、p<0.0001）、刺激（F = 15.5、p<0.0001）とこれらの因子間の相互作用（F = 27.5、p<0.0001、反復測定二元配置分散分析）。各時点で、JV 5%グルコース投与後の血糖値と残りのグルコース刺激後の血糖値との比較をさらに行った（詳細は本表を参照）。有意な比較は太字で強調されている。（basel. – ベースライン；dd. – 十二指腸；sal. – 生理食塩水；wat. – 水）。

（DOC）

テーブルS3

麻酔動物の平均および最高血糖値（mg/dL）。 麻酔ラットの尾部およびHPV血糖測定（ テーブルS2）についても、グルコースまたは溶媒投与後（0分～50分）の平均値とピーク値に基づいて解析した。前述の通り、溶媒投与経路の違いによる血糖値の全体的な差は認められなかったため、溶媒のデータは単一のカテゴリーとして含めた。これまで条件付け側バイアス反転に効果が示されていなかったグルコース刺激は、太字で強調して示している。 A. 平均血糖値は、繰り返し測定二元配置分散分析を使用して比較され、刺激（JV vs. HPV vs. 十二指腸5％グルコース vs. 十二指腸15％グルコース vs. JV 22.5％グルコース vs. JV 50％グルコース vs. 溶媒; F = 47.56、p<0.0001）、血液領域（尾部対HPV；F = 13.44、p = 0.0007）とこれらの因子間の相互作用（F = 25.2、p<0.0001）。尾部血糖値とHPV血糖値の間には、いくつかの個別の刺激においても有意差が認められた（詳細は表を参照）。因子間の有意な相互作用を考慮し、尾部血糖値とHPV血糖値は別々に解析したところ、いずれの場合も全体的に有意差が認められた（それぞれF = 66.26、p<0.0001; F = 31.84、p<0.0001、一元配置分散分析）。さらに、尾部血糖値とHPV血糖値について、JV 5%グルコース（側方バイアス反転を条件付けないコントロール刺激とみなした）後の血糖値と、残りのグルコース刺激後の血糖値とをそれぞれ一対比較した。尾部血糖値では、JV 22.5%および50%グルコースと溶媒で同様の差が認められたが、HPV血糖値では、十二指腸15%グルコースとJV 22.5%および50%グルコースで差が認められた（詳細は本表を参照）。 B. 同じ方法論を用いて最高血糖値を比較したところ、刺激（F = 160.1、p<0.0001）、血液領域（F = 32.22、p<0.0001）とこれらの因子間の相互作用（F = 10.46、p<0.0001、反復測定二元配置分散分析）、また、いくつかの刺激において、尾部血糖値とHPV血糖値の間にも有意差が認められた（表参照）。ここでも、尾部血糖値とHPV血糖値の両方において、全体的に有意差が認められた（それぞれ：F = 154.8、p<0.0001; F = 93.98、p<0.0001、一元配置分散分析）。尾部血液測定では、十二指腸5%グルコース、JV 22.5%および50%グルコース、および溶媒は、JV 5%グルコースと有意に差が認められた。一方、HPV血液測定では、溶媒、HPV 5%グルコース、十二指腸15%グルコース、JV 22.5%および50%グルコースで差が認められた。後者の場合、覚醒動物において側バイアス反転を条件付けなかった唯一のグルコース刺激である十二指腸5%グルコースは、試験した刺激の中でJV 5%グルコースと有意差が認められなかった唯一の刺激であった（詳細は本表を参照）。有意な比較は太字で強調されている。（dd. – 十二指腸）。

（DOC）

テーブルS4

麻酔動物における血糖値の平均および最高値（ベースラインの％）。 平均およびピークテールとHPV血糖値も、ベースライン測定値に正規化された値（ベースラインの％； テーブルS2 の三脚と S3）。ここでも、これまで側方バイアス反転の条件付けに効果があることが示されていなかったグルコース刺激は、太字で強調されています。 A. 平均相対血糖値については、刺激（F = 61.8、p<0.0001）、血液領域（F = 10.98、p = 0.002）とこれらの因子間の相互作用（F = 21.45、p<0.0001、反復測定二元配置分散分析）、そしていくつかの特定の刺激において、尾部血糖値とHPV血糖値の間に有意差が認められた（詳細はこの表を参照）。因子間の有意な相互作用を考慮し、尾部血糖値とHPV血糖値は別々に解析され、尾部血糖値とHPV血糖値の両方において全体的に有意な影響が認められた（F = 78.37、p<0.0001）およびHPV血液測定値（F = 39.95、p<0.0001、反復測定一元配置分散分析）。前回と同様に、JV 5%グルコース（側方バイアス反転を条件付けないコントロール刺激とみなした）後の血糖値と、残りのグルコース刺激後の血糖値との間で、さらに一対比較を行った。尾部血では、JV 22.5%グルコースと50%グルコースに有意差が認められたが、HPV血では、HPV 5%グルコース、十二指腸5%グルコースと15%グルコース、JV 22.5%グルコースと50%グルコースに差が認められた（表参照）。 B. ピーク相対血糖値については、刺激（F = 112.2、p<0.001）、血液領域（F = 29.6、p<0.001）とこれらの因子間の相互作用（F = 11.4、p<0.001、反復測定二元配置分散分析）、および尾部とHPV血糖値間のいくつかの特定の刺激についても同様の結果が得られました（詳細はこの表を参照）。因子間の有意な相互作用を考慮し、尾部とHPV血糖値は個別に解析したところ、いずれの場合も有意差が認められました（それぞれF = 85.92、p<0.001、F = 92.8、p<0.001、反復測定一元配置分散分析）。さらに、尾部血中濃度では、JV 22.5%グルコース、50%グルコース、および溶媒のみがJV 5%グルコースと有意に差があったのに対し、HPV血中濃度では、側方バイアスの逆転を招かなかった唯一のグルコース刺激である十二指腸5%グルコースを除く全ての刺激で差が認められた（詳細は本表を参照）。有意な比較は太字で強調されている。（dd. – 十二指腸）。

（DOC）

テーブルS5

麻酔したラットの門脈または頸静脈にブドウ糖または溶媒を投与した後の側坐核におけるドーパミンの一過性頻度。 高速スキャンサイクリックボルタンメトリーを用いて、麻酔ラットの側坐核殻における自発的ドーパミン放出イベント、すなわち「トランジェント」を同定した。測定は、ベースライン期間、およびJV（n = 5）へのXNUMX%グルコース注入中および注入後に行われた。 = 4）またはHPV（n = 4）、または後者の車両（n = 4) 血管内皮細胞（HPV）へのグルコース注入は、血管内皮細胞（JV）へのグルコース注入とは異なり、HPVへの溶媒注入の効果やそれぞれのベースライン値と比較して、ドーパミン一過性頻度の増加を引き起こすことが示された（ 図5）。重要な比較は太字で強調されています。（sal. – saline）。

（DOC）

謝辞

技術サポートをいただいた Teresa Maia、Jim Meloy、Gary Lehew、および原稿を査読いただいた Susan Halkiotis に感謝します。

脚注

 

競合する利益： 著者は、競合する利益が存在しないと宣言しました。

資金調達： 本研究は、国立聴覚・コミュニケーション障害研究所（NIDCD）のシドニー・サイモン氏への助成金（R01DC001065）の助成を受けています。助成機関は、研究デザイン、データ収集・分析、論文発表の決定、原稿の作成には一切関与していません。本研究の内容は著者の責任であり、必ずしもNIDCDまたは国立衛生研究所の公式見解を反映するものではありません。

参考情報

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