Histon deacetylase-remmers bevorderen vorming van partnervoorkeuren in vrouwelijke volken (2013)

Nat Neurosci. Auteur manuscript; beschikbaar in PMC Jan 1, 2014.

Gepubliceerd in definitief bewerkte vorm als:

PMCID: PMC3703824

NIHMSID: NIHMS477621

De definitieve bewerkte versie van dit artikel is beschikbaar op Nat Neurosci

Zie andere artikelen in PMC dat citeren het gepubliceerde artikel.

Ga naar:

Abstract

In de sociaal monogame prairiewolf (Microtus ochrogaster), paring induceert blijvende paar-bindingen geïnitieerd door partnervoorkeuren en gereguleerd door een verscheidenheid aan neurotransmitters waaronder oxytocine, vasopressine en dopamine. Hier hebben we gekeken naar potentiële epigenetische mechanismen die de regeling van de paarbindingen mediëren. We laten zien dat de histone deacetylase-remmers natriumbutyraat en TrichoStatin A (TSA) de vorming van partnervoorkeuren in vrouwelijke weidewolftjes vergemakkelijken bij afwezigheid van paring. Dit ging gepaard met een specifieke opwaartse regulatie van oxytocine (OTR) en vasopressine V1a-receptoren (V1aR) in de nucleus accumbens, door een verhoging van histonacetylering bij hun respectievelijke promotor. Verder werd TSA-gefaciliteerde partnervoorkeur voorkomen door OTR- of V1aR-blokkade in de nucleus accumbens. Belangrijk is dat paring-geïnduceerde partnervoorkeur dezelfde epigenetische regulatie van OTR- en V1aR-genpromoters als TSA activeerde. Deze waarnemingen geven dus aan dat TSA en paring de partnervoorkeur vergemakkelijken door epigenetische gebeurtenissen en het eerste directe bewijs leveren voor een epigenetische regulatie van paarbinding.

Introductie

Sociale aansluiting is een essentieel kenmerk van menselijk sociaal gedrag en sociaal-cognitieve achterstanden zijn algemene kenmerken van een veelheid van neuropsychiatrische stoornissen waaronder schizofrenie en autismespectrumstoornissen, evenals verslaving en depressie1. De sociaal monogamous prairie voles (Microtus ochrogaster) zijn naar voren gekomen als een zeer interessant model voor het onderzoeken van de neurobiologische basis van sociale hechting, aangezien zowel laboratorium- als vrijlevende personen lange-termijnparenbanden vaststellen2-4, die voor het eerst worden geïnitieerd door de vorming van selectief samenwerkingsgedrag ten opzichte van de partner, partnervoorkeur genoemd5. Deze vorming van partnervoorkeur omvat een verscheidenheid aan neurotransmitters en hormonale systemen, waaronder de neuropeptiden oxytocine en vasopressine (AVP) en mesolimbische dopamine5.

In algemeen, partnervoorkeur vorming wordt gemedieerd door AVP neurotransmissie in de ventrale pallidum en laterale septum (LS) bij mannen, en oxytocine neurotransmissie in de nucleus accumbens (NAcc) en prelimbische cortex in vrouwelijke prairie woelmuizen6-8.

Typisch betrokken bij natuurlijke beloningen zoals paren, fungeert dopamine ook als een cruciale bemiddelaar van partnervoorkeur in veldmuizen. Activering van de dopamine D2-type receptoren (D2R) in de NAcc vergemakkelijkt dat activering van de dopamine D1-type receptoren (D1R) partnerpreferentievorming in zowel mannelijke als vrouwelijke prairiewolken remt9-11.

Belangrijk is dat variaties in genexpressie van oxytocine en AVP V1a-receptoren respectievelijk OTR en V1aR zelf de voorkeur van de partner dramatisch kunnen beïnvloeden. In vrouwelijke volken, bijvoorbeeld, maakt de overexpressie van OTR in de NAcc de voorkeur van de partner mogelijk in afwezigheid van paring12-14.

Naast de regulatie van paarbinding, zijn oxytocine en AVP ook betrokken bij een breed scala aan sociaal gedrag, waaronder sociale herkenning, agressie en moederzorg.15, 16. Opmerkelijk is dat verstoringen van het laatste gedrag bij knaagdieren langdurige neuroadaptaties veroorzaken door epigenetische mechanismen, waaronder DNA-methylatie van oestrogeenreceptor alfa17 en AVP-genen18, evenals histonacetylatie van de glucocorticoïdreceptorpromotor19. Bovendien histone deacetylase (HDAC) -remmers, die genexpressie versterken door verhoogde histonacetylering in de knaagdierhersenen20, kan deze wijzigingen ongedaan maken19en direct invloed hebben op sociaal gedrag zoals seksuele ontvankelijkheid21. Belangrijk is dat in een longkankercellijn de HDAC-remmer trichostatine A (TSA) direct de OTR-transcriptie versterkt door lokaal histonacetylering te bevorderen22.

Daarom kan een epigenetische basis in partnerpreferentievorming bij prairiewolven worden gesuggereerd. Om deze hypothese te testen, hebben we eerst de effecten geëvalueerd van twee HDAC-remmers, natriumbutyraat (NaB) en TSA, op partnerpreferentievorming bij volwassen vrouwelijke prairiewolven. Daarna hebben we de moleculaire mechanismen onderzocht die de effecten van TSA bemiddelen bij het induceren van partnervoorkeur in vrouwelijke weideweesters. Ten slotte hebben we geprobeerd vast te stellen of de door TSA teweeggebrachte epigenetische veranderingen tijdens samenleven ook werden veroorzaakt door paring.

Resultaten

TSA-behandeling vergemakkelijkt partnervoorkeur

Seksueel naïeve vrouwelijke veldmuizen werden intracerebroventriculair geïnjecteerd (icv.) met CSF of CSF met 0.08, 0.4 of 4 ng TSA vlak voor het samenwonen met 6-uren met een man zonder paring, en hun partnervoorkeur werd vervolgens getest. Zes uur samenwonen met een man zonder paring leidt niet tot vorming van partnervoorkeur bij vrouwelijke weidevliegen4 en dus is dit gedragsparadigma uitgebreid gebruikt om de effecten van verschillende medicijnen op het faciliteren van partnervoorkeuren te beoordelen5.

Met CSF behandelde dieren vertoonden niet-selectief zij-aan-zij contact met de partner of de vreemdeling na 6-uren samenwonen zonder paring (t15= 0.76, P = 0.46; Fig. 1a). Echter, dieren behandeld met TSA in alle geteste doses besteedden bij voorkeur meer tijd aan de partner dan aan de vreemdeling (t8= 4.35, P = 0.002 voor de TSA 0.08 ng-groep; t15= 3.63, P = 0.002 voor de TSA 0.4 ng-groep; en t8= 2.58, P = 0.03 voor de TSA 4 ng-groep). Belangrijk is dat er geen groepsverschillen werden gevonden in de locomotorische activiteit (F3,46 = 1.25, P= 0.30, Fig. 1b) en geen agressief gedrag van de testvrouw tegenover de vreemdeling of de partner werd waargenomen, wat aantoont dat de effecten van TSA specifiek waren voor een sociale voorkeur, in plaats van secundair te zijn aan een verandering van voortbeweging of sociale afkeer voor de vreemdeling.

Figuur 1  

Een acute injectie van trichostatine A (TSA) vergemakkelijkt vorming van partnervoorkeur bij vrouwelijke weidevliegen bij afwezigheid van paring. (a) Vrouwen behandeld met cerebrospinale vloeistof (CSF), blootgesteld aan een man gedurende 6 uur in afwezigheid van paring, vertoonden niet-selectieve ...

Om te onderzoeken of TSA histonacetylering in hersenstructuren versterkt die betrokken zijn bij de vorming van partnervoorkeur, werd een afzonderlijke partij vrouwtjes geïnjecteerd met de mediumdosis TSA (0.4 ng) en samenwoonde met een man in afwezigheid van paring tijdens 30 min., 2 of 9 uren. Er kon met name geen significante variatie in de globale histon H3-acetylatie (Lys14) -niveaus worden gedetecteerd op elk tijdstip in zowel het NAcc als het caudate putamen (P > 0.05 voor alle groepen, Afb. 1c & d). Dit toont aan dat TSA de vorming van partnervoorkeuren vergemakkelijkt in afwezigheid van paring, ondanks het niet beïnvloeden van globale histon H3-acetylatie in de NAcc of het caudate putamen.

Belangrijk is dat natriumbutyraat ook de voorkeur van de partner in vrouwelijke weidevliegen na samenwonen met een man voor 6-uren zonder paring mogelijk maakte, in verband met een verhoging van globale histon H3-acetylering (Lys14) in de NAcc (Aanvullend figuur 1). De effecten van TSA op de vorming van partnervoorkeuren konden dus worden gereproduceerd met een andere HDAC-remmer, wat duidt op de betrokkenheid van HDAC-remming, in plaats van een niet-specifiek effect van TSA op het faciliteren van partnervoorkeur. Overwegend dat TSA een meer specifieke en affiene klasse I / II HDAC-remmer is23, 24en dat de gedragseffecten van TSA meer uitgesproken waren dan bij NaB, kozen we ervoor om TSA te gebruiken boven NaB voor het onderzoeken van de specifieke moleculaire correlaten in de volgende delen van het onderzoek.

Moleculaire correlaten van door TSA gefaciliteerde partnervoorkeur

Aangezien variaties in genexpressieniveaus in het Veld NAcc in verband zijn gebracht met verschillende paringsstrategieën tussen monogame en niet-monogame veldmuizen en met wijziging van partnerpreferentievorming in met name wilde veldmuizen12, 13, 25, 26, evalueerden we of door TSA gefaciliteerde partnervoorkeurvorming was geassocieerd met variaties van genexpressie in de NAcc.

TSA-behandeling (0.4 ng, icv.) induceerde een toename in OTR-mRNA-niveaus in de NAcc na 2-uren samenleven in vergelijking met CSF-behandelde controles (t10 = 2.38, P = 0.038, Fig. 2a), die na 9-uren van samenwonen meestal opgelopen was (t9 = 2.17, P = 0.058, Fig. 2b). Hoewel er in de NAcc 1 uren na de TSA-injectie een lichte maar niet significante toename in V2aR-mRNA kon worden waargenomen, werden geen andere groepsverschillen op elk tijdstip gedetecteerd voor een van de andere gemeten mRNA's, waaronder D1R of D2R (P > 0.05 XNUMX, Fig. 2a, b). Belangrijk is dat er geen groepsverschillen werden waargenomen in het caudate putamen op enig moment en voor elk gemeten mRNA (P > 0.05 voor alle groepen, Fig. 2c, d), wat suggereert dat de toename in OTR-mRNA waargenomen bij met TSA behandelde dieren specifiek was voor de NAcc. Bovendien was een dergelijke opwaartse regulatie alleen aanwezig na samenwonende met een man, aangezien de mRNA-niveaus OTR en V1aR in de NAcc onveranderd waren 2 uur na TSA-injectie zonder samenwoning (OTR: 100.0% ± 11.70 voor CSF-groep, 86.7% ± 12.11 voor TSA groep, t12 = 0.79, P = 0.444; V1aR: 100.0% ± 26.24 voor CSF-groep, 92.3% ± 13.75 voor TSA-groep, t9 = 0.27, P = 0.791).

Figuur 2  

TSA-behandeling (0.4 ng) up-regulates oxytocine (OTR) en vasopressine (V1aR) receptoren in vrouwelijke prairie woelmuizen tijdens samenwonen met een man in de afwezigheid van paring. OTR mRNA (a, b) en eiwit (e, f) niveaus werden opwaarts gereguleerd na 2 (a, e) en 9 uur ...

In overeenstemming met hogere OTR-mRNA-niveaus vertoonden met TSA behandelde dieren ook hogere OTR-eiwitniveaus op beide tijdstippen in de NAcc (2-uren: t10 = 2.34, P = 0.041; 9 uren: t10 = 3.16, P = 0.01, Fig. 2e, f), maar niet caudate putamen (t10 = 0.41, P = 0.69, Fig. 2g, h). Interessant is dat hoewel er geen significante verandering van V1aR mRNA-niveaus kon worden gedetecteerd in de NAcc op 2 of 9 uren na de TSA-injectie (Fig. 2a, b), waren de V1aR-eiwitniveaus significant verhoogd na 9 uur, in vergelijking met CSF-behandelde dieren, in de NAcc (t9 = 3.46, P = 0.007, Fig. 2f) maar geen caudate putamen (t10 = 0.98, P = 0.35, Fig. 2h). Hoewel met enkele variaties de D1R- en D2R-eiwitniveaus in de NAcc en caudate putamen niet significant werden beïnvloed door TSA-toediening (P > 0.05 XNUMX, Fig. 2e-h).

TSA vergemakkelijkt de histonacetylering van oxtr en avpr1a

De toename in zowel het mRNA- als het eiwitniveau voor OTR na samenlevingen na TSA-behandeling suggereerde dat TSA waarschijnlijk de transcriptie van OXTR, het gen dat codeert voor OTR, in plaats van het veranderen van de translatie of omzet van het eiwit. Bovendien waren de V1aR-eiwitniveaus hoger in de NAcc, geassocieerd met een lichte maar niet significante toename in mRNA-niveaus na TSA-behandeling (Fig 2). Overwegend dat TSA een krachtige klasse I en II HDAC-remmer is23, 24, 27, hypothetiseerden we dat TSA histon acetylatie verhoogde bij de OXTR en avpr1a promoters in het NAcc, daarna hun transcriptie verbeteren. Een nieuwe partij dieren ontvangen icv. injectie van TSA (0.4 ng) en woonde onmiddellijk samen met een man zonder te paren gedurende 30 minuten voordat hij werd opgeofferd. Het 30-min tijdvenster werd gekozen op basis van eerdere werkrapportage van een maximale toename van histonacetylering na lokale TSA-injectie bij ratten en muizen28, 29. H3K14 acetylatie op de OXTR en avpr1a promotors werd vervolgens geanalyseerd door chromatine immunoprecipitatie.

In overeenstemming met de eerder waargenomen toename in OTR mRNA en eiwitniveaus vertoonden TSA-behandelde dieren een zeer hoge toename (+ 460%) in histon H3-acetylering bij de OXTR genpromoter, in vergelijking met CSF-behandelde controles, in de NAcc (t10 = 5.88, P = 0.0002), maar geen caudate putamen (t9= 0.31, P = 0.76, Fig. 3a). Bovendien, histon H3 acetylering op de avpr1a promotor was significant verhoogd met 30 min na TSA-toediening (+ 196%) in de NAcc (t10 = 3.12, P = 0.01) maar geen caudate putamen (t9= 0.38, P = 0.71), in vergelijking met met CSF behandelde controles (Fig. 3b). Daarom verhoogde TSA al na 30 minuten na het begin van het samenwonen met een man de histon-acetylatieplaats specifiek in de NAcc.

Figuur 3  

TSA-behandeling verbetert histonacetylering van OXTR en avpr1a promoters tijdens samenwonen met een man in afwezigheid van paring. Histon H3-acetylering (Lys14) op OXTR (a) en avpr1a (b) promoters waren verhoogd in de nucleus accumbens (NAcc) maar niet ...

TSA faciliteert partnervoorkeuren via OTR en V1aR

Uit de vorige reeks experimenten komt een moleculair werkingsmodel naar voren, waarin TSA tijdens de samenlevingsperiode histonacetylatie op de OXTR en avpr1a promoters, daarna hun transcriptie verbeterend en resulterend in hogere OTR- en V1aR-eiwitniveaus tot 9 uur na het begin van de samenlevingsperiode. Belangrijk is dat dit TSA-effect plaatsspecifiek is, aangezien de caudate putamen onaangetast blijft. Hier hebben we getest of deze TSA-geïnduceerde toename in OTR en V1aR gerelateerd is aan het faciliteren van partnervoorkeuren. Vrouwelijke prairiewolven ontvingen een intra-NAcc-injectie van TSA (0.04ng per zijde) met of zonder voorafgaande injectie (30minuten vóór TSA-injectie, 0.5ng per zijde) van CSF of CSF bevattende één van de twee verschillende OTR-antagonisten, OTA (B) en OTA (T), of een V1aR-antagonist (V1aRA). Direct na de TSA-injectie werden de vrouwtjes gedurende 6-uren zonder paring met een man samengewoond, gevolgd door een partnervoorkeurtest.

Met CSF behandelde dieren vertoonden geen partnervoorkeur (t5 = 0.17, P = 0.87, Fig. 4a). Echter, met TSA behandelde dieren brachten significant meer tijd door in zij-aan-zij contacten met de "partner" dan met de "vreemdeling", wat suggereert dat een enkele TSA-injectie direct in de NAcc voldoende is om partnervoorkeurvorming zonder paring te vergemakkelijken (t5 = 7.04, P = 0.0009). Interessant is dat blokkade van OTR of V1aR door voorbehandeling met OTA (B), OTA (T) of V1aRA de effecten van TSA verhinderde (P > 0.05 voor alle groepen). Omdat er geen groepsverschillen werden gevonden in locomotorische activiteit (F4,32 = 1.89, P = 0.14, Fig. 4b), suggereren deze gegevens dat TSA in het NAcc de vorming van partnervoorkeuren via OTR- en V1aR-gemedieerde mechanismen op een gedragsspecifieke manier faciliteert.

Figuur 4  

TSA-gefaciliteerde partnervoorkeur vereist de oxytocine- (OTR) en vasopressine (V1aR) receptoren-gemedieerde neurotransmissie in de vrouwelijke nucleus accumbens. (a) TSA vergemakkelijkt partnervoorkeur bij infusie in de nucleus accumbens (0.04 ng per zijde), ...

Paring induceert vergelijkbare neuroadaptaties als TSA

Naar aanleiding van onze eerdere waarnemingen, hebben we vastgesteld dat de epigenetische potentiatie van oxytocine en vasopressine neurotransmissie in het vrouwelijke NAcc voldoende was om de vorming van partnervoorkeuren te vergemakkelijken in de afwezigheid van paring. Om te onderzoeken of deze neuroadaptaties ook optreden tijdens de natuurlijke vorming van partnervoorkeur, werden vrouwelijke prairiewolven tijdens 24 uur samengewoond met een man in de aanwezigheid van paring, wat partnervoorkeur veroorzaakt4en opgeofferd. We hebben een toename van zowel het OTR- als het V1aR-mRNA en het eiwitniveau in het NAcc waargenomen in vergelijking met seksueel naïeve vrouwen (OTR: + 38%, t10 = 2.68, P = 0.02 voor mRNA en + 58%, t8 = 3.05, P = 0.01 voor eiwit; V1aR: + 89%, t14= 2.53, P = 0.02 voor mRNA en + 26%, t20 = 2.23, P = 0.037 voor eiwit, Fig. 5a, b).

Figuur 5  

Samenwonen met paring induceert een opregulatie van de oxytocine (OTR) en vasopressine (V1aR) -receptoren in de nucleus accumbens (NAcc) van vrouwelijke weidewolfmuizen. 24h Samenwonen met een man met paring omhoog reguleert OTR (a) en V1aR (b) mRNA en eiwit ...

Omdat zowel mRNA- als eiwitniveaus voor OTR en V1aR werden verhoogd door samenwonen met paring, onderzochten we vervolgens of deze opwaartse regulatie geassocieerd was met een epigenetische verbetering van OXTR en avpr1a genen transcriptie. Een nieuwe groep vrouwen woonde dus samen met een man voor 6-uren met paring en H3K14-acetylering aan de OXTR en avpr1a promoters gemeten door chromatine immunoprecipitatie. In overeenstemming met OTR- en V1aR-mRNA- en eiwitniveaus vertonen vrouwelijke prairiewolven hogere H3K14-acetylatie bij de OXTR en avpr1a promoters in de NAcc, in vergelijking met seksueel naïeve vrouwen (OXTR: t9 = 2.64, P = 0.02; avpr1a: t9 = 2.91, P = 0.017 Fig. 5c, d). Deze gegevens suggereren dat samenlevingsparadigma's die op betrouwbare wijze partnerpreferenties in de vrouwelijke prairiewolven induceren, een opwaartse regulatie van OTR- en V1aR-expressie in het NAcc teweegbrengen via epigenetische mechanismen, zoals waargenomen na TSA-behandeling.

Discussie

In de huidige studie rapporteren we voor de eerste keer een epigenetische regulatie van vorming van partnervoorkeuren. Ten eerste hebben we aangetoond dat toenemende histonacetylering in de NAcc door toediening van een HDAC-remmer de vorming van partnervoorkeuren in volwassen vrouwelijke prairiewolven in de afwezigheid van paring vergemakkelijkt. Tlieten we direct bewijs zien dat vorming van partnervoorkeuren bij vrouwen epigenetisch wordt gedreven, aangezien samenwonen en paren met een man is toegenomen OXTR en avpr1a genenexpressie door verbeterde histonacetylering in de NAcc. TSA-toediening in de NAcc-geïnduceerde partnervoorkeur leidde tot hogere niveaus van OTR-mRNA en eiwitten in de NAcc. Bovendien, hoewel de globale histon H3-acetylering niet werd beïnvloed door TSA-behandelde vrouwen, was een duidelijke verrijking van histonacetylering bij de OXTR promoter in de NAcc werd al in 30 minuten na TSA-toediening waargenomen. Ten slotte was het blokkeren van OTR in de NAcc voldoende om de TSA-gefaciliteerde partnervoorkeur te voorkomen. Omdat soortgelijke epigenetisch aangestuurde modificaties werden gedetecteerd na samenwonen met paring, onder procedures waarvan bekend is dat ze partnervoorkeur induceren, hebben onze gegevens een model voor een epigenetische regulatie van sociaal gedrag naar voren gebracht. Dsamenlevend met een man, TSA of paring, induceert snel een specifieke histon H3-acetylering bij de OXTR promotor in de NAcc die de transcriptie ervan verbetert, resulterend in hogere OTR mRNA- en eiwitniveaus, die daarna de vorming van partnervoorkeuren vergemakkelijken.

In vrouwelijke weidewolfbuizen zorgen 6-uren van samenwonen met een man zonder paring niet voor vorming van partnervoorkeur4en dit gedragsparadigma is gebruikt om de effecten van farmacologische manipulaties op de inductie van partnervoorkeur te onderzoeken5. In onze studie ontwikkelden de met zoutoplossing of CSF behandelde controles geen partnervoorkeur, vrouwelijke prairiewolven die werden behandeld met NaB of TSA wel. Omdat noch NaB noch TSA de algehele motoriek beïnvloedde, leken hun effecten op de partnervoorkeur eerder gedragsspecifieke dan secundaire effecten op de motoriek te zijn. Dit specifieke effect van TSA werd verder bevestigd door onze moleculaire waarnemingen. Inderdaad, hoewel toegediend icv., waren we in staat om een ​​specifieke verandering van genexpressie in de NAcc te detecteren, maar niet in een aangrenzende structuur, het caudate putamen. Bovendien bleven zelfs binnen het NAcc-, D1R- en D2R-mRNA- en eiwitniveau ongewijzigd. Een dergelijke specificiteit lijkt verrassend voor een brede HDAC-remmer zoals TSA die zowel klasse I als II HDAC's beïnvloedt. Desondanks is gemeld dat TSA de expressie van slechts een kleine subset van genen in het zoogdiergenoom beïnvloedt30-32, ook bij muizen20.

We hebben hier aangetoond dat acetylatie van histon H3 op Lys14 op de OXTR promoter, een modificatie die is geassocieerd met versterkte gentranscriptie, inclusief tijdens cerebrale plasticiteit33, 34, onderstreept hogere OTR-mRNA- en eiwitniveaus. Als reactie op TSA, histonacetylering bij de OXTR promoter verhoogt en vergemakkelijkt activering van de transcriptie ervan in humane cellijn22, ter ondersteuning van onze bevindingen OXTR kan epigenetisch worden gereguleerd. Omdat een lokale blokkade van OTR in de NAcc voldoende was om de gedragseffecten van TSA te voorkomen, suggereren onze gegevens dat de TSA-geïnduceerde expressie van OTR in de NAcc tijdens samenwonen het faciliteren van partnervoorkeuren vormde. Bovendien leidden 24-uren van samenwonen met paring, een procedure waarvan bekend is dat deze betrouwbaar de partnervoorkeur induceert in vrouwelijke volken, een vergelijkbare toename in OTR-expressie in het vrouwelijke NAcc. Dit is volledig in overeenstemming met de bekende betrokkenheid van oxytocine en zijn receptor in de neurobiologie van partnerpreferentievorming bij vrouwelijke woelmuizen. Paring induceert een toename van extracellulaire oxytocine niveaus in de NAcc25en lokale infusie van oxytocine in de NAcc vergemakkelijkt vorming van partnervoorkeur bij afwezigheid van paring8. Bovendien blokkeren OTR-antagonisten de vorming van partnervoorkeuren, geïnduceerd door oxytocinetoediening of paring8, 35. Belangrijk is dat de virale gemedieerde overexpressie van OTR in het vrouwelijke NAcc voldoende is om de vorming van partnervoorkeuren te vergemakkelijken12, 13.

Naast het versterken van de rol van OTR, leveren onze resultaten ook bewijs voor een activatie van OTR-genexpressie door middel van epigenetische mechanismen tijdens samenwonen met een man in afwezigheid van paring. Inderdaad, hoewel onvoldoende om partnervoorkeur te induceren, activeert zo'n samenlevingsverband zonder paring voor korte perioden de neurobiologische processen die ten grondslag liggen aan de vorming van partnervoorkeuren. Twee uur vrije blootstelling aan een man induceert bijvoorbeeld lichte maar niet-significante verhogingen van de oxytocine-afgifte in het vrouwelijke NAcc.25. Het kan daarom worden voorgesteld dat TSA of NaB de neuroadaptaties die worden veroorzaakt door samenwonen met een man, versterken, waardoor de ontwikkeling van partnervoorkeur wordt vergemakkelijkt. Interessant genoeg is dergelijke potentiëring al gemeld bij knaagdieren waar klasse I en II HDAC-remmers, waaronder NaB en TSA, consolidatie van een leergebeurtenis vergemakkelijken die niet resulteert in langetermijngeheugenvorming bij controledieren36, 37. Ter ondersteuning van dit idee, langere perioden van samenwonen (bv., 48hours) kan partnervoorkeur induceren, zelfs in de afwezigheid van paring4. Het is ook belangrijk op te merken dat samenwonende met paring in het vrouwelijke NAcc een opwaartse regulatie van OTR- en V1aR-expressie teweegbrengt via dezelfde epigenetische mechanismen als die waargenomen na samenwonen met TSA-behandeling, die aantonen dat TSA en paring dezelfde wegen beïnvloeden om te bevorderen vorming van partnervoorkeuren. Belangrijk is dat TSA geen opwaartse regulering van OTR en V1aR in de vrouwelijke NAcc induceert in afwezigheid van samenwonend met een man. Alles bij elkaar ondersteunt dit de hypothese dat TSA de vorming van partnervoorkeuren vergemakkelijkt door de potentiëring van endogene neuroadaptaties die op natuurlijke wijze worden veroorzaakt door het samenwonen met een man, in plaats van deze zelf of deze verschillende neuroadaptaties te activeren.

ODe studie benadrukt ook een kritische rol van de NAcc V1aR in de partnerpreferentievorming van vrouwen, omdat met TSA behandelde dieren hogere V1aR-niveaus vertonen, waarvan de blokkade TSA-gefaciliteerde partnervoorkeurvorming belette. Bovendien waren deze effecten geassocieerd met hogere histonacetylering in de avpr1a promotor, ondanks geen significante verhoging van V1aR-mRNA waarschijnlijk als gevolg van een niet-optimaal tijdstip. Hoewel we een regulatie van eiwitstabiliteit door TSA niet kunnen uitsluiten door acetylering van niet-histoneiwitten38, deze bevinding suggereert dat, vergelijkbaar met de OXTR promotor, TSA zou kunnen bevorderen avpr1a transcriptie door lokale histonacetylering. Hoewel de bijdrage van AVP aan de binding van mannetjesparen is beschreven5, zijn rol in het gedrag van de vrouw is nog steeds controversieel. Aan de ene kant, een icv. AVP-injectie vergemakkelijkt vorming van partnervoorkeur bij zowel mannelijke als vrouwelijke woelmuizen, wat wordt voorkomen door blokkering van V1aR of OTR39. Aan de andere kant, een icv. injectie van de V1aR-antagonist blokkeert de partnervoorkeur in mannelijke, maar niet in vrouwelijke weidevluchten40. Al deze onderzoeken zijn echter gebruikt icv. injecties, waardoor verder inzicht in de betrokken structuren wordt voorkomen. Hier bieden we het eerste bewijs dat AVP-neurotransmissie in de NAcc kan worden betrokken bij de vorming van partnervoorkeuren in de vrouwelijke woelmuizen, terwijl de meeste literatuur zijn betrokkenheid op verschillende gebieden beschrijft, zoals het ventrale pallidum, laterale septum, de bedkern van de vrouw stria terminalis en amygdala bij mannen5. Het wordt daarom interessant om op te merken dat de blokkade van OTR of V1aR in de NAcc van de vrouw volstond om vorming van partnervoorkeuren na TSA-behandeling te voorkomen, wat suggereert dat partnervoorkeuringsvorming de activering van zowel V1aR als OTR vereist. Tzijn bevinding komt overeen met, en ondersteunt, een eerdere waarneming in mannelijke prairiewolken dat een gelijktijdige toegang tot zowel OTR als V1aR in de LS essentieel is voor door AVP geïnduceerde partnervoorkeur6. Bovendien ondersteunt de waarneming van een specifieke toename in zowel OTR- als V1aR-niveaus in met TSA behandelde dieren verder de eis van een gelijktijdige activering van de AVP en oxytocine neurotransmissies voor paarbinding.

In combinatie met oxytocine en AVP, moduleert de dopamine neurotransmissie in de NAccc in partnerpreferentievorming in de vrouwelijke woelmuizen9. Hoewel paring dopamine-afgifte induceert in de NAcc9, variaties in receptorniveaus worden alleen waargenomen na een langere periode - langer dan 24h - van samenwonen met paring, belangrijk voor het onderhouden van pair bonding10. In overeenstemming met deze waarnemingen vertoonden vrouwelijke weidevluchtmuizen behandeld met TSA een partnervoorkeur zonder significante variatie in de dopamine D1R- en D2R-receptoren. Daarom biedt deze afwezigheid van dopaminereceptorregulatie een ander bewijs voor de specificiteit van TSA.

Onze gegevens rapporteren voor de eerste keer een epigenetische component in de neurobiologie van parenbinding en suggereren dat TSA een "tolerante toestand" in vrouwelijke weidewolfmuizen induceert, de natuurlijke moleculaire respons op het samenleven versterkt, en de vorming van sterkere sociale interacties bevordert. leidend tot partnervoorkeur. Het is daarom verleidelijk om te veronderstellen dat een door de TSA gefaciliteerde partnervoorkeur verder zou kunnen worden versterkt en zou kunnen leiden tot een aanhoudende band. Hoewel de specifieke betrokken HDAC's nog moeten worden geïdentificeerd, zou het dus interessant zijn om de effecten van TSA op andere gedragingen die verband houden met de monogame levensstrategie in prairiewolms, zoals selectieve agressie en bi-ouderlijke zorg, verder te onderzoeken. Gezien de relevantie van de prairiemuizen bij het modelleren van de neurobiologische mechanismen van parenbinding bij mensen5en de veelbelovende HDAC-remmers die al in klinische onderzoeken zijn24, 41, 42, onze gegevens banen de weg voor nieuwe farmacologische mogelijkheden om sociaal gedrag te beïnvloeden.

Methoden

vakken

Seksueel naïeve vrouwelijke veldmuizen (Microtus ochrogaster) uit een kweekkolonie in een laboratorium werden gespeend op 21-dagen en gehuisvest in broers en zussen van hetzelfde geslacht in plastic kooien (12 × 28 × 16 cm) met water en voedsel ad libitum. Alle kooien werden onderhouden onder een 14: 10 h licht-donker cyclus en de temperatuur was ongeveer 20 ° C. Alle dieren werden willekeurig toegewezen aan experimentele groepen toen ze de leeftijd van 70-90 bereikten. Het aantal gebruikte dieren was gebaseerd op eerdere studies in het veld door onze groep en anderen, gecombineerd met een vermogensanalyse. Experimentele procedures werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee aan de Florida State University.

Drugs

Natriumbutyraat (NaB), opgelost in zoutoplossing, en Trichostatine A (TSA), opgelost in artificiële cerebrospinale vloeistofdrager (CSF, BioFluids, Rockville, MD) werden beide gekocht bij Sigma-Aldrich (St Louis, MO). NaB werd intraperitoneaal geïnjecteerd (ik p) in een dosis van 600 mg / kg, waarvan bekend is dat het histonacetylering in verschillende hersenstructuren bij muizen induceert43, 44. Evenzo was het dosisbereik dat voor TSA werd gebruikt gebaseerd op eerder werk dat de doeltreffendheid ervan bij het induceren van plaatselijke histonacetyleringsgebeurtenissen en variaties in genexpressie bij knaagdieren heeft bepaald.19, 20. De selectieve V1aR-receptorantagonist V1aRA, d(CH2)5[Tyr (Me)] AVP en de OTR-antagonist OTA (B), [d(CH2)5, Tyr (Me)2, Thr4Tyr-NH29] -OVT), werden verkregen van Bachem (Torrance, CA). Een tweede, meer selectieve OTR-antagonist, OTA (T), dGly-NH2-d(CH2)5 [Tyr (Me)2, Thr4] OVT45, werd vriendelijk verstrekt door Dr. Maurice Manning (Universiteit van Toledo, OH). Deze antagonisten en gebruikte doses zijn gekozen op basis van eerdere onderzoeken die hun selectiviteit voor respectievelijk V1aR of OTR aantonen.35, 39, 46-49.

Stereotaxische canulatie en micro-injectie

Vrouwtjes werden geanesthetiseerd met natriumpentobarbital (1mg / 10g lichaamsgewicht) en 26 gauge roestvrijstalen geleidecanules (Plastics One, Roanoke, VA) werden stereotaxisch geïmplanteerd, gericht op de laterale ventrikel (eenzijdig; neusstang bij -2.5 mm, 0.6 mm rostraal, 1.0 mm lateraal en 2.6 mm ventraal naar bregma) of site-specifiek voor de NAcc (bilateraal; neusstaaf bij -2.5 mm, 1.7 mm rostraal, ± 1.0 mm bilateraal en 4.5 mm ventraal naar bregma). Na 3 hersteltijd ontvingen patiënten micro-injecties van CSF of CSF met verschillende TSA-concentraties. Wanneer selectieve antagonisten voor OTR of V1aR werden gebruikt, werden ze 30 minuten voorafgaand aan TSA geïnjecteerd. Injecties werden uitgevoerd met een 33-naald die 1 mm onder de geleidecanule uitstrekte tot in het doelgebied, in een injectievolume van 500 nL in het laterale ventrikel (icv.) of 200 nL per zijde in de NAcc. De naald was verbonden met een Hamilton-spuit (Hamilton, Reno, NV) via polyethyleen-20-buis en plunjerdepletie werd langzaam uitgevoerd, waarbij 1-minuten per injectie vereist was. Aan het einde van het experiment werden alle proefpersonen opgeofferd door middel van snelle onthoofding en werden de hersenen geëxtraheerd om de plaatsing van de canules te controleren door een waarnemer die blind was voor de experimentele omstandigheden. Onderwerpen met misplaatste canules werden uitgesloten van gegevensanalyse.

Samenwonen en partnervoorkeur testen

Onmiddellijk daarna ik p., icv., of intra-NAcc-injecties met geneesmiddelen, werden de vrouwen gedurende 6-uren zonder paring met een man samengewoond. De afwezigheid van paring werd geverifieerd door het op video opgenomen gedrag te onderzoeken. Voor het onderzoek naar de neuroadaptaties veroorzaakt door samenwonen met paring, oestrogeen-geprimede vrouwen (2μg per dag, ik p., voor 3-dagen) werden tijdens 6- of 24-uren met een man samengehuisd en de aanwezigheid van paring werd geverifieerd a posteriori op videoband (variërend van 6 tot 11 aanvallen tijdens de eerste 6 uren samenwonen).

De partnervoorkeurtest werd onmiddellijk na het samenwonen met 6-uur uitgevoerd, zoals eerder beschreven11. In het kort, het testapparaat met drie kamers bestond uit een neutrale kooi die was verbonden met twee parallelle identieke kooien, die elk een stimulusdier huisvesten - een onbekende mannelijke “vreemdeling” of een bekende mannelijke “partner” die tijdens de samenlevingsperiode werd gebruikt. Vrouwelijke proefpersonen waren vrij om door het apparaat te bewegen tijdens de test van 3 uur, en de stimulusmannetjes waren vastgebonden in hun kooien, waardoor er geen direct contact met elkaar was. De hele sessie werd op video opgenomen en de duur van het zij-aan-zij contact van de proefpersoon met de partner of de vreemdeling werd later gekwantificeerd door een getrainde experimentator die zich niet bewust was van de biologische groepen. Een partnervoorkeur werd gedefinieerd als proefpersonen die significant meer tijd doorbrachten in lichaamscontact met de partner versus vreemdeling, zoals bepaald door een gepaarde, tweezijdige t-test. Bovendien was het apparaat met drie kamers uitgerust met fotobundelsensoren, waardoor de locomotorische activiteit kan worden bepaald aan de hand van het aantal ingangen van het vrouwtje in de stimuluskamers. Deze voortbewegingsscore stelt ons dus in staat controle uit te oefenen op vermoedelijke secundaire effecten van de medicijnen op het gedrag van de vrouwtjes, zoals algemene activiteit, angst of veranderde verkenning van een nieuwe omgeving, zoals deze gewoonlijk door onze groep en anderen wordt gebruikt12.

RNA en eiwitten extractie

Vrouwtjes werden opgeofferd door snelle onthoofding, en hersenen werden onmiddellijk geëxtraheerd en bevroren op droogijs. Coronale secties (200 μm) werden op een cryostaat gesneden en op ijsroosters op microscoopglaasjes bevriest. Bilaterale tissueponsen met een 1 mm diameter werden genomen uit het gehele NAcc en caudate putamen, waarbij de laatste een controlegebied was, en opgeslagen bij -80 ° C tot het werd verwerkt. Totaal RNA en eiwitten werden geëxtraheerd met behulp van het TRI-reagensprotocol volgens de instructies van de fabrikant (Molecular Research Center, Cincinnati, OH).

Eiwitexpressie-analyse met Western-blot

Na scheiding op een 10% polyacrylamidegel (15% voor histonen) werden eiwitten overgebracht naar een nitrocellulosemembranen en geïncubeerd met de volgende primaire antilichamen: anti-OTR (sc-8102, 1: 1000), -V1aR (sc-18096, 1: 500), -D1R (sc-33660, 1: 1000), -D2R (sc-9113, 1: 1000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), -actin (A2066, 1: 1000, Sigma Aldrich. St Louis, MO), of anti-acetylhiston H3 (Lys14, # 06-911, 1: 1000) en totaal H3 (# 05-928, 1: 1000, Millipore, Temecula, CA). Alle antilichamen zijn gevalideerd voor hun gebruik bij mensen, ratten en muizen, waarmee prairiewildmuizen hoge percentages homologie delen (gaande van 81 tot 96%). Na hybridisatie met een aan HRP geconjugeerd secundair antilichaam werden membranen onthuld met ECL (ECL SuperSignal West Dura-substraat, Pierce Biotechnologies, Rockford, IL) en blootgesteld aan Fuji XAR-film (Fuji Film, Tokio, Japan). Kwantificering werd uitgevoerd met behulp van AIS 6.0 Image software (Imaging Research, St. Catharines, Ontario, Canada) en alle signalen werden binnen hetzelfde membraan genormaliseerd tot actine, behalve voor het acetyl-H3-signaal dat was genormaliseerd op het totale histon H3-signaal. Genormaliseerde gegevens worden vervolgens uitgedrukt als percentage van met CSF behandelde dieren.

Semi-kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie (RT-PCR)

0.5 μg totaal RNA werd verwerkt voor complementaire DNA-synthese en vervolgens geanalyseerd zoals eerder beschreven50 met normalisatie van het nicotinamide-adenine-dinucleotide dehydrogenase (NADH) -gen. Alle reacties werden in triplo uitgevoerd en hun specificiteit werd geverifieerd door smeltcurveanalyse en scheiding op een 2% Agarose-gel. De gebruikte primersequenties waren als volgt: 5'-TCCAAGGCCAAAATCCGCACGG-3 '(Fwd) en 5'-GGCAGAAGCTTCCTTGGGCGC-3' (Rev) voor OTR, 5'-GAGGTGAACAATGGCACTAAAACC-3 '(For) en 5'-CCAGATGTGGTAGCAGATGAAGC-3' (Rev) voor AVP1aR, 5'- TTAACAACAATGGGGCTGTG-3 '(For) en 5'-GGCATGAGGGATCAGGTAAA-3' (Rev) voor D1R, 5'-GTGAAGGCGCTGTAGAGGAC-3 '(For) en 5'-CGGTGTGTTCATCATCTGCT-3' (Rev ) voor D2R en 5'-CTATTAATCCCCGCCTGACC-3 '(For) en 5'-GGAGCTCGATTTGTTTCTGC-3' (Rev) voor NADH. De genormaliseerde gegevens worden uitgedrukt als een percentage van met CSF behandelde dieren.

Chromatin Immunoprecipitation

Histon H3-acetylering (Lys14) in NAcc en caudate putamen-weefselstempels werden geanalyseerd met behulp van de Magna ChIP-proteïne G-tissuekit (Millipore, Temecula, CA) volgens de instructies van de fabrikant. In het kort, na verknoping met 1% formaldehyde, werd chromatine aan afschuifkrachten onderworpen met behulp van een Misonix XL-2000 aan fragmenten van 200-600 bp. Immunoprecipitatie van geacetyleerd histon H3 (Lys14) werd vervolgens gerealiseerd met 10μg van anti-acetyl-H3 (Lys14) antilichaam (Millipore) gedurende de nacht bij 4 ° C. Na wasbehandelingen werd elutie van kralen en omkering van verknoopt, geïmmunoprecipiteerd DNA gezuiverd en in triplo geanalyseerd door middel van RT-PCR op een iCycler-platform (zie hierboven) met een interne standaardkromme gemaakt van gepoolde INPUT-monsters. De primers werden ontworpen om een ​​236 bp-lang gebied te amplificeren gelokaliseerd 128 bp stroomopwaarts van het eerste exon dat codeert voor de prairie vole OTR (OXTR, Genbank toetreding #AF079980), of 192 bp-lange regio gelokaliseerd 141 bp stroomopwaarts van de eerste exon die codeert voor de prairiewond V1aR (avpr1a, Genbank toetreding #AF069304). De sequenties waren als volgt: 5'-CTCCGGAGCCGGGGCTAAGT-3 '(Fwd) en 5'-ACCGCTTCCCCGAGAGTAGGG-3' (Rev) voor OXTR, en 5'-GGTGGACCAGCCAGACCCCA-3 '(Fwd) en 5'-TGCAGAGCCAGGCGCTTTCC-3' (Rev) voor avpr1a. Elk monster werd genormaliseerd door de respectieve INPUT-waarde en de gegevens werden vervolgens uitgedrukt als een percentage van met CSF behandelde dieren.

Statistische analyses en gegevensverwerking

Voor analyses van partnervoorkeur werden dieren die paringsgedrag vertonen tijdens de samenlevingsperiode of met misplaatste canules uitgesloten. Voor alle andere moleculaire analyses werd een maximum van één gegevenspunt per biologische groep uitgesloten wanneer het werd geïdentificeerd als uitbijter. De meeste experimenten werden gerepliceerd, behalve als de resultaten heel duidelijk waren. De tijd doorgebracht in zij-aan-zij contact met beide stimulusdieren tijdens de partnervoorkeurstest werd geanalyseerd met een tweezijdige koppeling t-test. De voortbewegingsscores werden geanalyseerd met behulp van een tweezijdige t-test (voor twee groepen) of een one-way ANOVA (voor meer dan twee groepen), en indien van toepassing, Fischer's PLSD post-hoc tests werden uitgevoerd met een significantiedrempel van P <0.05. Na verificatie van normaliteit werden alle andere gegevens geanalyseerd met een tweezijdige t-test veronderstellen dat gelijke of ongelijke varianties vooraf zijn getest. Alle statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van de StatView-software (SAS Institute). Wanneer gegevens worden gestandaardiseerd naar hun respectieve controles (% van CSF, Saline of Paring groepen), werden de statistische analyses uitgevoerd op de onbewerkte gegevens.

Aanvullend materiaal

Dankwoord

Dit werk werd ondersteund door het National Institute of Mental Health (NIMH) verleent MHR21-083128 aan MK en ZW, en MHR01-058616 aan ZW. We bedanken ook Dr. Maurice Manning voor het genereuze geschenk van de OTR-antagonist OTA (T).

voetnoten

 

Belangenverstrengeling: De auteurs verklaren geen belangenconflict.

Bijdragen van de auteur

HW, FD en YL voerden de experimenten uit. HW en FD hebben de gegevens geanalyseerd. HW, FD, ZW en MK hebben het onderzoek ontworpen. FD, ZW en MK hebben het artikel geschreven. Alle auteurs bespraken de resultaten en becommentariëren het manuscript.

Referenties

1. Bora E, Yucel M, Allen NB. Neurobiologie van menselijk affiliatief gedrag: implicaties voor psychiatrische stoornissen. Huidige mening in de psychiatrie. 2009, 22: 320-325. [PubMed]
2. Thomas JA, Birney EC. Ouderlijke zorg en paarsysteem van de veldmuismuis, (Microtus ochrogaster) Gedragsecologie en sociobiologie. 1979, 5: 171-186.
3. Getz LL, Hofmann JE. Sociale organisatie in vrij levende weidewolfmuizen, (Microtus ochrogaster) Gedragsecologie en sociobiologie. 1986, 18: 275-282.
4. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Ontwikkeling van partnervoorkeuren in vrouwelijke weidewolftjes (Microtus ochrogaster): De rol van sociale en seksuele ervaring. Hormonen en gedrag. 1992, 26: 339-349. [PubMed]
5. Young KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. De neurobiologie van pair bonding: inzichten van een sociaal monogaam knaagdier. Grenzen in de neuroendocrinologie. 2011, 32: 53-69. [PMC gratis artikel] [PubMed]
6. Liu Y, Curtis JT, Wang Z. Vasopressine in het laterale septum reguleert de vorming van paarbindingen in mannelijke prairiewolmelaars (Microtus ochrogaster) Behavioral Neuroscience. 2001, 115: 910-919. [PubMed]
7. Lim MM, Young LJ. Vasopressine-afhankelijke neurale circuits die ten grondslag liggen aan de vorming van paarbindingen in de monogame prairiewolf. Neuroscience. 2004, 125: 35-45. [PubMed]
8. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oxytocine en dopamine werken samen om de vorming van paarlobbigen in vrouwelijke volken te reguleren. Neuroscience. 2003, 121: 537-544. [PubMed]
9. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamine D2-receptoren in de nucleus accumbens zijn belangrijk voor sociale hechting in vrouwelijke prairiewolmelaars (Microtus ochrogaster) Behavioral Neuroscience. 2000, 114: 173-183. [PubMed]
10. Aragona BJ, et al. Nucleus accumbens dopamine bemiddelt op differentiële wijze de vorming en instandhouding van monogame parenbindingen. Nat Neurosci. 2006, 9: 133-139. [PubMed]
11. Liu Y, et al. Nucleus accumbens dopamine bemiddelt door amfetamine geïnduceerde verslechtering van sociale binding in een monogame knaagdiersoort. Proceedings van de National Academy of Sciences. 2010, 107: 1217-1222. [PMC gratis artikel] [PubMed]
12. Keebaugh AC, Young LJ. Het verhogen van de oxytocinereceptor-expressie in de nucleus accumbens van pre-puberale vrouwelijke prairie-woelmuizen verbetert de algemene responsiviteit en vorming van partnervoorkeuren als volwassenen. Hormonen en gedrag. 2011, 60: 498-504. [PMC gratis artikel] [PubMed]
13. Ross HE, et al. Variatie in Oxytocine Receptordichtheid in de Nucleus Accumbens heeft verschillende effecten op Affiliatief gedrag in monogame en polygame voles. The Journal of Neuroscience. 2009, 29: 1312-1318. [PMC gratis artikel] [PubMed]
14. Pitkow LJ, et al. Facilitation of Affiliation en Pair-Bond Formation door Vasopressin Receptor Gen Transfer naar de ventrale voorhersenen van een monogame veldloper. The Journal of Neuroscience. 2001, 21: 7392-7396. [PubMed]
15. Veenema AH. Naar inzicht in hoe sociale ervaringen uit het vroege leven oxytocine- en vasopressine-gereguleerd sociaal gedrag veranderen. Hormonen en gedrag. 2012, 61: 304-312. [PubMed]
16. Francis DD, Young LJ, Meaney MJ, Insel TR. Natuurlijk voorkomende verschillen in maternale zorg zijn geassocieerd met de expressie van Oxytocine en Vasopressine (V1a) -receptoren: verschillen in geslacht. Journal of Neuroendocrinology. 2002, 14: 349-353. [PubMed]
17. Champagne FA, et al. Maternale zorg geassocieerd met methylatie van de oestrogeenreceptor-α1b-promoter en oestrogeenreceptor-α-expressie in het mediale pre-optisch gebied van vrouwelijk nageslacht. Endocrinology. 2006, 147: 2909-2915. [PubMed]
18. Murgatroyd C, et al. Dynamische DNA-methylatie programmeert aanhoudende nadelige effecten van stress in het vroege leven. Nat Neurosci. 2009, 12: 1559-1566. [PubMed]
19. Weaver ICG, et al. Epigenetische programmering door maternaal gedrag. Nat Neurosci. 2004, 7: 847-854. [PubMed]
20. Weaver ICG, Meaney MJ, Szyf M. Maternale zorg effecten op de hippocampus transcriptoom en angst-gemedieerde gedrag bij de nakomelingen die omkeerbaar zijn in de volwassenheid. Proceedings van de National Academy of Sciences in de Verenigde Staten van Amerika. 2006, 103: 3480-3485. [PMC gratis artikel] [PubMed]
21. Bonthuis PJ, Patteson JK, Rissman EF. Acquisitie van seksuele ontvankelijkheid: rollen van chromatine-acetylatie, oestrogeenreceptor-α en ovariële hormonen. Endocrinology. 2011, 152: 3172-3181. [PMC gratis artikel] [PubMed]
22. Zhong S, Fields CR, Su N, Pan YX, Robertson KD. Farmacologische remming van epigenetische modificaties, gekoppeld aan genexpressieprofilering, onthult nieuwe doelen van afwijkende DNA-methylatie en histondeacetylatie bij longkanker. Oncogene. 2007, 26: 2621-2634. [PubMed]
23. Yoshida M, Horinouchi S, Beppu T. Trichostatin A en trapoxin: nieuwe chemische probes voor de rol van histonacetylering in de structuur en functie van chromatine. Bioessays. 1995, 17: 423-430. [PubMed]
24. Monneret C. Histone deacetylase-remmers. European Journal of Medicinal Chemistry. 2005, 40: 1-13. [PubMed]
25. Ross HE, et al. Karakterisering van het oxytocinesysteem regulerend gedrag van vrouwelijke weidewormen. Neuroscience. 2009, 162: 892-903. [PMC gratis artikel] [PubMed]
26. Young LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Soort Verschillen in centrale Oxytocine Receptor Genexpressie: vergelijkende analyse van promotorsequenties. Journal of Neuroendocrinology. 1996, 8: 777-783. [PubMed]
27. Witt O, Deubzer HE, Milde T en Oehme I. HDAC-familie: wat zijn de relevante doelwitten voor kanker? Cancer Letters. 2009; 277: 8-21. [PubMed]
28. Vecsey CG, et al. Histon Deacetylase-remmers verbeteren het geheugen en de synaptische plasticiteit via CREB: CBP-afhankelijke transcriptionele activering. The Journal of Neuroscience. 2007, 27: 6128-6140. [PMC gratis artikel] [PubMed]
29. Monsey MS, Ota KT, Akingbade IF, Hong ES, Schafe GE. Epigenetische veranderingen zijn cruciaal voor angstconsolidatie en synaptische plasticiteit in de laterale Amygdala. PLoS ONE. 2011, 6: e19958. [PMC gratis artikel] [PubMed]
30. Van Lint C, Emiliani S, Verdin E. De expressie van een kleine fractie van cellulaire genen is veranderd als reactie op histone hyperacetylatie. Genexpressie. 1996, 5: 245-253. [PubMed]
31. Mariadason JM, Corner GA, Augenlicht LH. Genetische herprogrammering in pathways van colon celrijping geïnduceerd door korte keten vetzuren: vergelijking met trichostatine A, sulindac en curcumine en implicaties voor chemopreventie van darmkanker. Kanker onderzoek. 2000, 60: 4561-4572. [PubMed]
32. Halsall J, Gupta V, O'Neill LP, Turner BM, Nightingale KP. Genen worden vaak afgeschermd tegen de wereldwijde histonhyperacetylering veroorzaakt door HDAC-remmers. PLoS ONE. 2012; 7: e33453. [PMC gratis artikel] [PubMed]
33. Ito K, Adcock I. Histonacetylatie en histondeacetylatie. Moleculaire biotechnologie. 2002, 20: 99-106. [PubMed]
34. Molfese DL. Neurowetenschap bevorderen door middel van epigenetica: moleculaire mechanismen van leren en geheugen. Ontwikkelingsneuropsychologie. 2011, 36: 810-827. [PMC gratis artikel] [PubMed]
35. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Cellulaire mechanismen van sociale gehechtheid. Hormonen en gedrag. 2001, 40: 133-138. [PubMed]
36. Hawk JD, Florian C, Abel T. Intrahippocampale remming na de training van klasse I-histondeacetylasen verbetert het objectlocatiegeheugen op de lange termijn. Leren en geheugen. 2011; 18: 367-370. [PMC gratis artikel] [PubMed]
37. Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulatie van langetermijngeheugen voor objectherkenning via HDAC-remming. Proceedings van de National Academy of Sciences. 2009, 106: 9447-9452. [PMC gratis artikel] [PubMed]
38. Yang XJ, Seto E. Lysine Acetylatie: gecodificeerde Crosstalk met andere posttranslationele modificaties. Molecular Cell. 2008, 31: 449-461. [PMC gratis artikel] [PubMed]
39. Cho MM, DeVries AC, Williams JR, Carter CS. De effecten van oxytocine en vasopressine op partnervoorkeuren bij mannelijke en vrouwelijke prairie-woelmuizen (Microtus ochrogaster) Behavioral Neuroscience. 1999, 113: 1071-1079. [PubMed]
40. Insel TR, Hulihan TJ. Een genderspecifiek mechanisme voor pair bonding: vorming van oxytocine en partnervoorkeur in monogame woelmuizen. Gedrags-neurowetenschap. 1995, 109: 782-789. [PubMed]
41. Stimson L, La Thangue NB. Biomarkers voor het voorspellen van klinische reacties op HDAC-remmers. Kankerbrieven. 2009, 280: 177-183. [PubMed]
42. Iannitti T, Palmieri B. Klinische en experimentele toepassingen van natriumfenylbutyraat. Geneesmiddelen in R&D. 2011; 11: 227–249. [PMC gratis artikel] [PubMed]
43. Kumar A, et al. Chromatine hermodellering is een sleutelmechanisme onderliggende door cocaïne geïnduceerde plasticiteit in Striatum. Neuron. 2005, 48: 303-314. [PubMed]
44. Schroeder FA, Lin CL, Crusio WE, Akbarian S. Antidepressivum-achtige effecten van de Histone Deacetylase-remmer, natriumbutyraat, in de muis. Biologische psychiatrie. 2007, 62: 55-64. [PubMed]
45. Manning M, et al. Peptide- en niet-peptide-agonisten en -antagonisten voor de vasopressine- en oxytocine-V1a-, V1b-, V2- en OT-receptoren: onderzoekshulpmiddelen en potentiële therapeutische middelen. In: Inga DN, Rainer L, redacteuren. Vooruitgang in hersenonderzoek. Elsevier; 2008. pp. 473-512. [PubMed]
46. Witt DM, Insel TR. Een selectieve oxytocine-antagonist verzwakt progesteron ter vergemakkelijking van vrouwelijk seksueel gedrag. Endocrinology. 1991, 128: 3269-3276. [PubMed]
47. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Een rol voor centrale vasopressine bij pair bonding in monogame prairiewolmelen. Natuur. 1993, 365: 545-548. [PubMed]
48. Insel T. Oxytocine - een neuropeptide voor affiliatie: bewijs uit gedrags-, autoradiografische en vergelijkende studies van receptoren. Psychoneuro-endocrinologie. 1992; 17: 3-35. [PubMed]
49. Insel T, Wang Z, Ferris C. Patronen van distributie van hersenvasopressine-receptor geassocieerd met sociale organisatie in knaagdieren van de knaagdieren. The Journal of Neuroscience. 1994, 14: 5381-5392. [PubMed]
50. Hollis F, Duclot F, Gunjan A, Kabbaj M. Individuele verschillen in het effect van sociale nederlaag op anhedonie en histonacetylatie in de hippocampus van de rat. Hormonen en gedrag. 2011, 59: 331-337. [PMC gratis artikel] [PubMed]