Membránové androgénne receptory môžu sprostredkovať posilňovanie androgénu. (2010)

Psychoneuroendocrinology. 2010 Aug; 35 (7): 1063-73. Epub 2010 Feb 6.

Sato SM, Johansen JA, Jordánsko CL, Drevo RI.

zdroj

Ústav bunky a neurobiológie, Keckova lekárska fakulta, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.

abstraktné

Zneužívanie anabolických androgénnych steroidov (AAS) je rozšírené. Okrem toho sa AAS spevňujú, čo dokazuje samo podávanie u hlodavcov. Receptory, ktoré prenášajú zosilňujúce účinky AAS, sú však nejasné. AAS sa môže viazať na klasické nukleárne androgénové receptory (AR) alebo membránové receptory. Použili sme dva prístupy na skúmanie úlohy jadrových AR v samospráve AAS. Najprv sme testovali androgénne podávanie u potkanov s testikulárnou feminizačnou mutáciou (Tfm), ktorá interferuje s androgénnou väzbou. Ak sú jadrové AR nevyhnutné pre samoobsluhu AAS, samci Tfm by nemali podávať androgény samostatne. Tfm samci a diváci divokého typu (WT) sami podávali ne-aromatizovateľný androgén dihydrotestosterón (DHT) alebo vehikulárne intracerebroventrikulárne (ICV) v plánoch fixného pomeru (FR) až do FR5. Potkany Tfm aj WT získali preferenciu pre aktívny nos-poke počas samopodania DHT (66.4 +/- 9.6 odpovede / 4 h pre Tfm a 79.2 +/- 11.5 pre odpovede WT / 4 h) a výkyvy nosa sa zvýšili ako Požiadavka FR sa zvýšila. Preferenčné skóre bolo signifikantne nižšie u samo-podávajúceho vehikula potkanov (42.3 +/- 5.3 odpovede / 4 h pre odpovede Tfm a 19.1 +/- 4.0 / 4 h pre WT). Tiež sme testovali samopodávanie DHT konjugovaného s hovädzím sérovým albumínom (BSA) na C3 a C17, ktorý je obmedzený na pôsobenie na bunkovom povrchu. Škrečkom sa umožnilo podávanie DHT, BSA a DHT-BSA konjugátov počas 15 dní pri FR1. Škrečkovia vykazovali významnú preferenciu pre DHT (18.0 +/- 4.1 odpovede / 4 h) alebo DHT-BSA konjugáty (10.0 +/- 3.7 odpovede / 4 h a 21.0 +/- 7.2 odpovede / 4 h), ale nie pre BSA (2.5 + / -2.4 odpovede / 4 h). Súhrnne povedané, tieto údaje ukazujú, že jadrové AR nie sú potrebné pre androgénnu samosprávu. Samotné podávanie androgénu môže byť tiež sprostredkované receptormi plazmatickej membrány.

Copyright 2010 Elsevier Ltd. Všetky práva vyhradené.

Kľúčové slová: Anabolické androgénne steroidy, samopodávanie, membránový androgénový receptor, jadrový androgénový receptor, mutácia testikulárnej feminizácie

Anabolicko-androgénne steroidy (AAS) sú drogy, ktoré sa zneužívajú. Tieto deriváty testosterónu (T) sa používajú na atletické a estetické účely ( Yesalis a kol., 1993 ). Vedľajšie účinky siahajú od hypogonadizmu a gynekomastie až po srdcovú a hepatálnu dysfunkciu ( Leshner, 2000 ). Okrem toho sa hromadia dôkazy o tom, že zneužívanie AAS spôsobuje zmeny nálady ( Pope a Katz, 1994 ), agresiu ( Choi a Pope, 1994 , Kouri a kol., 1995 ) a môže viesť k závislosti ( Brower a kol., 1991 , Brower, 2002 ). Napriek rastúcim obavám nie sú základné mechanizmy zneužívania AAS dobre pochopené.

U ľudí sa tvrdí, že začatie užívania AAS je do značnej miery motivované anabolickými účinkami, ale niektorí zneužívatelia si nakoniec vyvinú závislosť ( Brower, 2002 ). Dôkazy z výskumu na zvieratách túto hypotézu podporujú. AAS indukujú podmienenú preferenciu miesta (CPP) u myší ( Arnedo a kol., 2000 ) a potkanov ( Packard a kol., 1997 , Packard a kol., 1998 , Frye a kol., 2002 ). Okrem toho, škrečky dobrovoľne konzumujú AAS orálnym ( Wood, 2002 ), intravenóznym ( Wood a kol., 2004 ) a intracerebroventrikulárnym (ICV) podaním ( DiMeo a Wood, 2004 , Triemstra a Wood, 2004 , Wood a kol., 2004 , DiMeo a Wood, 2006b ).

Zatiaľ čo samopodávanie ICV naznačuje centrálne miesta účinku, špecifické hormóny a receptory sprostredkujúce posilnenie AAS nie sú jasné. Súčasné dôkazy naznačujú, že posilňujúce účinky T sú sprostredkované androgénmi, a nie estrogénmi po aromatizácii. Samce škrečkov si sami podávajú dihydrotestosterón (DHT; DiMeo a Wood, 2006b ) a ďalšie nearomatizovateľné androgény ( Ballard a Wood, 2005 ). Okrem toho je samopodávanie T blokované antiandrogénom flutamidom ( Peters a Wood, 2004 ). Otázkou teraz je: ako sa androgénny signál prenáša v mozgu?

Androgénny receptor (AR) je klasický nukleárny steroidný receptor, ktorý funguje ako transkripčný faktor. AR sú riedke v štruktúrach spojených so zneužívaním drog, ako je nucleus accumbens (Acb) a ventrálna tegmentálna oblasť (VTA; Simerly a kol., 1990 , Wood a Newman, 1999 ). Existujú tiež dôkazy o pôsobení gonádových steroidov prostredníctvom receptorov na bunkovom povrchu ( Mermelstein a kol., 1996 , Zhu a kol., 2003 , Thomas a kol., 2006 , Vasudevan a Pfaff, 2007 ).

V súčasnej štúdii sme použili dva prístupy na určenie úlohy klasického nukleárneho AR v posilňovaní androgénov. Aby sme minimalizovali možnú aktiváciu estrogénových receptorov (ER), testovali sme samopodávanie DHT. V prvom experimente boli potkany s mutáciou testikulárnej feminizácie (Tfm) testované na samopodávanie DHT pomocou ICV. Tfm je jednobázová substitúcia, ktorá vedie k defektným AR s obmedzenou väzbou ligandu ( Yarbrough a kol., 1990 ). Samce potkanov Tfm vykazujú externý samičí fenotyp v dôsledku nedostatočnej androgénnej stimulácie počas vývoja ( Zuloaga a kol., 2008b ). Ak sú na posilnenie AAS potrebné funkčné nukleárne AR, potkany Tfm by si nemali DHT samopodávať. Namiesto toho si potkany Tfm dokázali osvojiť samopodávanie DHT. V druhom experimente sme testovali samopodávanie membránovo nepriepustných foriem DHT u škrečkov pomocou ICV. Keď je DHT konjugovaný s hovädzím sérovým albumínom (BSA), jeho účinky sú obmedzené na receptory na povrchu buniek. Ak sú na posilnenie androgénov potrebné jadrové AR, škrečky by si nemali samy podávať DHT konjugovaný s BSA. Naopak, škrečky preukázali jasnú preferenciu pre DHT konjugovaný s BSA. Tieto štúdie spoločne ukazujú, že jadrové AR nie sú na samopodávanie androgénov potrebné. Namiesto toho môže byť posilnenie androgénov sprostredkované membránovými AR.

Metódy a materiály

Predmety

Rats

Dospelé samce potkanov Tfm a ich súrodenci z vrhu divokého typu (WT) boli získaní z kolónie na Michiganskej štátnej univerzite. Ich genotyp bol overený PCR, podobne ako metódy opísané predtým ( Fernandez a kol., 2003 ). Stručne povedané, ušné klipsy boli štiepené cez noc pri 55 °C v lyzačnom pufri obsahujúcom proteinázu K, potom tepelne inaktivované pri 95 °C počas 30 minút. AR bol amplifikovaný pomocou priameho primeru 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3' a reverzného primeru 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3', čím vznikol produkt s veľkosťou 135 bp. Amplifikované vzorky boli potom štiepené reštrikčným enzýmom Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) cez noc pri 37 °C a analyzované na 3 % agarózovom géli. Týmto reštrikčným enzýmom je štiepený iba WT AR, pričom dva pásy pod 100 bp zostanú, zatiaľ čo Tfm AR zostáva neštiepený. Zvieratá Tfm boli overené aj podľa fenotypu, prítomnosti bradaviek, vzdialenosti medzi samičími anogenitálnymi orgánmi a abdominálnych semenníkov. Potkany Tfm boli predtým použité na preukázanie negenómových androgénnych účinkov v hipokampe ( MacLusky a kol., 2006 ). Na začiatku experimentu boli potkany WT vo veku 75 až 140 dní a potkany Tfm boli vo veku 75 až 138 dní.

škrečky

Dospelé samce sýrskych škrečkov (130 – 150 g) boli získané od spoločnosti Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Zvieratá boli chované jednotlivo v reverznom svetelnom cykle (14L:10D) s potravou a vodou dostupnou ad libitum . Všetky experimentálne postupy boli schválené inštitucionálnymi výbormi pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie v príslušných inštitúciách a vykonané v súlade s Guide for Care and Use of Laboratory Animals ( National Research Council, 1996 ).

chirurgia

Všetkým zvieratám boli implantované 22g vodiace kanyly z nehrdzavejúcej ocele (Plastic One, Roanoke, VA) do laterálnej komory [potkan: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 ( Paxinos a Watson, 1998 ); škrečok: AP: +1.0, ML, +1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 ( Morin a Wood, 2001 ), mm od bregmy] za anestézie Na ⁺ pentobarbitalom (potkan: 50 mg/kg, škrečok: 100 mg/kg), ako bolo opísané predtým ( Wood a kol., 2004 ). Všetky chirurgické zákroky boli vykonané za aseptických podmienok podľa Princípov starostlivosti o laboratórne zvieratá ( NIH, 1985 ). Zvieratá sa nechali zotaviť aspoň týždeň po operácii pred testovaním.

Drogy

DHT, DHT-karboxymetyloxím (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisukcinát (Hemis) a DHT-Hemis-BSA boli získané od spoločnosti Steraloids (Newport, RI). V DHT-CMO-BSA je DHT konjugovaný s BSA v polohe C3 s CMO ako linkerom. Podobne je DHT viazaný na BSA v polohe C17 prostredníctvom Hemis za vzniku DHT-Hemis-BSA. DHT-CMO-BSA ( Gatson a kol., 2006 ) aj DHT-Hemis-BSA ( Braun a Thomas, 2003 ) boli predtým použité na skúmanie možných účinkov androgénov na plazmatickú membránu. DHT bol rozpustený vo vodnom roztoku 13 % β-cyklodextrínu (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) v koncentrácii 1 μg/μl. Ako bolo zistené v našej predchádzajúcej štúdii na škrečkoch, táto dávka vyvoláva robustnú operandnú odpoveď počas samopodávania ICV ( DiMeo a Wood, 2006b ). Deriváty DHT boli rozpustené v rovnakom vehikule pri molárnej ekvivalentnej koncentrácii DHT (DHT-CMO: 1.25 μg/μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg/μl, DHT-Hemis: 1.34 μg/μl, DHT-Hemis-BSA: 8.83 μg/μl). BSA (Sigma-Aldrich) bol rozpustený v rovnakom vehikule pri 7.45 μg/μl, aby sa dosiahla molárna ekvivalentná koncentrácia BSA ako v DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA. Lieky obsahujúce BSA sa pripravovali denne bezprostredne pred použitím, aby sa zabránilo degradácii, a všetky roztoky sa filtrovali cez 0.22 μm filter. Predchádzajúce štúdie ukázali, že iba malá časť steroidov disociuje z BSA ( Stevis a kol., 1999 ) a toto množstvo nie je dostatočné na vyvolanie významných androgénnych účinkov ( Lieberherr a Grosse, 1994 , Gatson a kol., 2006 ). Podobne naša skoršia štúdia ukázala, že DHT sa podáva samostatne v dávke 1.0 μg/μl, ale nie v dávke 0.1 μg/μl ( DiMeo a Wood, 2006b ). Preto je nepravdepodobné, že by sa voľný DHT (> 10 %) disocioval z BSA v dostatočnom množstve na podporu samostatného podávania.

Zariadenie

Zvieratám sa umožnilo podávať roztok liečiva alebo vehikula 4 hodinu / deň, 5 dní / týždeň v operačnej komore (Med Associates, St. Albans, VT) uzavretej v komore tlmiacej zvuk s nútenou ventiláciou. Každá komora bola vybavená vnútorným svetlom, otvormi 2-nosa a počítačom riadeným striekačkovým čerpadlom pripojeným k tekutému otočnému ramenu. Roztoky zo sklenenej injekčnej striekačky 100 μl sa podali do zvieraťa cez hadičku Tygon pripojenú k otočnému čapu. Rúrka spájajúca otočný diel a kanylu ICV bola chránená kovovou pružinou. Roztok liečiva alebo vehikulum sa podávali cez vnútornú kanylu 28-ga vloženú do vodiacej kanyly bezprostredne pred testovaním. Každá infúzia dodala 1 μl roztoku pri 0.2 μl / s. Nose-poke otvory boli umiestnené 6 cm od podlahy pod domom svetla. Jeden z otvorov pre nosný nos bol označený ako aktívny otvor pre nos. Odozva na túto dieru sa zaznamenala ako aktívny nos-poke (R: aktívny zosilnený) a spočítala sa do požiadavky na odozvu (FR1 na 5) na spustenie infúzie. Po spustení infúzie sa domáce svetlo zhaslo a aktívna diera sa počas infúzie 5-u rozsvietila, aby sa uľahčila diskriminácia aktívneho otvoru nosa. V tomto časovom limite 5-s bol zaznamenaný, ale nebol zaznamenaný do ďalšieho zosilnenia (NR: aktívny-nezosilnený). Odozva na druhom výbežku nosa sa zaznamenala ako neaktívny nos-poke (I), ale nespôsobila žiadnu infúziu. Umiestnenie aktívneho otvoru nosa na prednú alebo zadnú časť komory bolo vyvážené na ovládanie bočných preferencií. Údaje boli zaznamenané pomocou softvéru WMPC (Med Associate) na počítači so systémom Windows.

Samospráva ICV

Rats

Samopodávanie DHT u potkanov Tfm a WT nasledovalo podľa vzostupného schémy s fixným pomerom (FR) od FR1 do FR5. Potkany boli spočiatku trénované na FR1, kde bola každá reakcia na aktívny otvor v nose posilňovaná. Následne sa počet reakcií potrebných na získanie infúzie zvyšoval o jednu každých 5 dní. Pri FR5 bolo na infúziu potrebných päť reakcií na aktívny otvor v nose. Celkovo boli potkany testované na FR1 počas 10 dní a FR2 až FR5 (každá 5 dní), celkovo 30 dní. Potkany z každého genotypu boli náhodne rozdelené do skupiny s DHT alebo vehikulom (Veh) a bolo im umožnené samopodávať DHT alebo vehikulum βCD. V tomto experimente bolo použitých tridsaťšesť potkanov (n _WT = 19, n _Tfm = 17).

škrečky

Škrečky boli testované v rámci FR1 plánu na 15 dní. V predchádzajúcich štúdiách postačuje 15 dní ICV T samopodania na získanie preferencie pre aktívny nos. Škrečky boli náhodne priradené k DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8 ) alebo skupiny BSA (n = 9).

Analýza dát

Rats

Denné preferenčné skóre pre aktívny nos-poke boli stanovené odčítaním neaktívnych nosných výhonkov od súčtu aktívnych vystužených a aktívnych nevystužených nosných výčnelkov (R + NR-I). Priemerné skóre preferencií sa vypočítalo pre každé zviera z posledných 5 dní FR1 a počas FR2 do FR5. Okrem toho sa porovnával priemerný počet zosilnení na reláciu pre každé zviera v každom FR.

Dáta boli analyzované pomocou 3-faktorovej ANOVA, pričom genotyp (WT alebo Tfm), liečivo (DHT alebo vehikulum) a FR schéma (1 ~ 5) boli použité ako medzisubjektové faktory. FR schéma bola považovaná za medzifaktor, pretože niektoré zvieratá nedokončili celých 30 dní testovania kvôli upchatiu vodiacej kanyly ICV. V týchto prípadoch boli do analýz zahrnuté iba údaje z dokončených schém. Počet zvierat zahrnutých v každej podmienke je uvedený v tabuľke 1. Trojfaktorová ANOVA bola doplnená vhodnými ANOVA nižšieho rádu pre jednoduché efekty. V prípade potreby bol použitý Newmanov-Keulsov test pre post-hoc párové porovnania.

Tabuľka 1

Telesná hmotnosť (priemer ± SEM vg) a počet potkanov použitých (n) na začiatku každého FR a na konci FR5. * Výrazne odlišné od FR1 (p <0.05). # Výrazne sa líši od WT (p <0.05).

škrečky

Na analýzu údajov boli použité individuálne priemery R, NR a I. Skóre preferencie pre každé zviera bolo určené odčítaním priemerného neaktívneho pichnutia do nosa (I) od priemerného aktívneho pichnutia do nosa (R+NR-I). Priemerné skóre preferencie bolo analyzované pomocou t- testu s jednou vzorkou oproti 0 (t. j. žiadna preferencia) pre každú skupinu. Okrem toho bol počet prijatých posilnení spriemerovaný pre každé zviera. Priemerné posilnenie prijaté pre každú skupinu s liekmi bolo porovnané s kontrolnou skupinou BSA pomocou t- testu s 2 nezávislými vzorkami. Zvieratá, ktoré neabsolvovali minimálne 5 sedení, boli z analýzy vylúčené (1 zo skupiny DHT-Hemis a DHT-Hemis-BSA).

Všetky štatistické analýzy boli vykonané pomocou programu SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Pre všetky analýzy sa hodnota p < 0.05 považovala za štatisticky významnú. Údaje sú prezentované ako priemer ± SEM za 4-hodinovú reláciu.

výsledky

Krysy WT a Tfm si sami podávajú DHT

Operátor reaguje

Obr. 1 znázorňuje priemernú preferenciu aktívneho pichania do nosa (R + RN – I) pri každej FR pre skupiny s DHT a Veh. Potkany, ktoré si samy podávali DHT, vykazovali väčšiu preferenciu aktívneho pichania do nosa (73.1 ± 7.6 resp/4h) v porovnaní s kontrolnou skupinou s vehikulom (29.8 ± 3.5 resp/4h; F _1,145 = 31.77, p < 0.001). Bol tiež pozorovaný hlavný vplyv FR schémy (F _4,145 = 4.25, p < 0.01), interakcie genotyp-liečivo (F _1,145 = 5.27, p = 0.02) a interakcie liek-FR schémy (F _4,145 = 2.60, p = 0.02). Nebol pozorovaný žiadny hlavný vplyv genotypu a iné interakcie neboli významné.

Obrázok 1

Priemerná preferencia (aktívny - neaktívny nos-pokes) pre potkany, ktorí si sami podávali DHT (top) a vehikulum (dole). Zobrazia sa priemery ± SEM pre každý FR spolu s celkovým priemerom ± SEM (vpravo). * Výrazne odlišné od FR1 (p < (viac ...)

Post-hoc testy ukázali, že potkany, ktoré si samy podávali DHT, vykazovali významne väčšiu preferenciu oproti FR schéme (F _4,73 = 4.18, p < 0.01), pričom preferencia sa zvyšovala z FR1 (33.4 ± 4.4 resp/4h) na FR4 (110.8 ± 26.7 resp/4h) a FR5 (106.4 ± 18.9 resp/4h). V tejto skupine sa nepozoroval žiadny vplyv genotypu (schéma genotyp-FR: F _4,73 = 0.13, ns; genotyp: F _1,73 = 0.86, ns).

Naproti tomu potkany, ktoré si samy podávali Veh, nepreukázali žiadnu zmenu v preferencii oproti FR schéme (F _4,72 = 0.31, ns) a žiadnu interakciu medzi genotypom a FR schémou (F _4,72 = 0.12, ns). Na rozdiel od DHT, potkany Tfm vykazovali v tejto skupine väčšiu preferenciu ako WT (42.3 ± 5.3 a 19.1 ± 4.0 opakovaní/4 h; F _4,72 = 11.81, p < 0.01).

infúzie

Priemerný počet infúzií DHT a vehikula podaných pri každej FR je znázornený na obr. 2. Celkovo potkany dostali viac infúzií, keď si mohli samy podať DHT (26.9 ± 2.2 μg/4h) v porovnaní s vehikulom (15.4 ± 1.9 μl/4h, F1,145 ₌ 14.70, p < 0.001). Hlavný účinok mal aj režim FR (F1,145 ₌ 3.32, p = 0.01) a interakcia genotyp-liečivo (F1,145 ₌ 6.41, p = 0.01). Všetky ostatné interakcie a hlavné účinky neboli významné.

Obrázok 2

Priemerné infúzie, ktoré dostávali potkany, ktoré si sami podávali DHT (hore) a vehikulum (dno). Zobrazia sa priemery ± SEM pre každý FR spolu s celkovým priemerom ± SEM (vpravo). * Výrazne odlišné od DHT FR1 (p <0.05). # Výrazne (viac ...)

Priemerný denný príjem DHT vo všetkých FR režimoch bol podobný u potkanov Tfm (24.3 ± 2.9 μg/4 hod.) a WT (29.4 ± 3.4 μg/4 hod.). V oboch skupinách zostal príjem liečiva konštantný so zvyšujúcim sa FR režimom (F _4,73 = 0.54, ns). Počas FR1 si samci Tfm a WT sami podávali DHT v dávke 24.5 ± 2.3 μg/4 hod. a 37.3 ± 6.7 μg/4 hod. Pri režime FR5 dosiahlo samopodávanie DHT v priemere 18.3 ± 4.5 μg/4 hod. pre potkany Tfm a 23.9 ± 5.9 μg/4 hod. Táto skupina nevykazovala žiadne rozdiely na základe genotypu alebo genotypu a FR režimu (F _1,73 = 1.17, ns; F _4,73 = 0.34, ns).

Naopak, u potkanov Tfm aj WT počet infúzií vehikula významne klesal so zvyšujúcou sa požiadavkou na FR (F _4,72 = 4.73, p < 0.01). Trochu prekvapivo, potkany Tfm si samy podali približne dvakrát toľko vehikula (20.7 ± 2.4 μl/4h) ako potkany WT (10.7 ± 1.4 μl/4h, F _1,72 = 7.77, p < 0.01). U potkanov Tfm pri FR1 počet infúzií vehikula (39.9 ± 13.2 μl/4h) prekročil počet infúzií DHT (24.5 ± 2.3 μl/4h). Avšak do konca experimentu sa samopodávanie vehikula znížilo na 10.3 ± 2.4 μl/4h. Podobne si potkany WT samy podávali vehikulum v dávke 18.6 ± 4.1 μl/4h pri FR1, čo sa pri FR5 znížilo na 6.6 ± 1.8 μl/4h.

Priemerná telesná hmotnosť na začiatku každého režimu FR a počet zvierat v každom stave sú uvedené v tabuľke 1. Potkany WT boli výrazne ťažšie ako potkany Tfm (F _1,174 = 144.62, p < 0.001) a všetky skupiny časom priberali na váhe (F _5,174 = 5.59, p < 0.001). Nebol zistený žiadny vplyv liečebného stavu (DHT vs. Veh) na telesnú hmotnosť (F _1,174 = 0.31, ns) ani žiadna interakcia. Príjem DHT upravený podľa telesnej hmotnosti bol podobný v oboch genotypoch, a to ako v FR1 (WT: 77.9 μg/kg, Tfm: 65.4 μg/kg), tak aj v FR5 (WT: 46.5 μg/kg, Tfm: 42.6 μg/kg).

Sýrski škrečkovia sami podávali DHT konjugované s BSA

Operátor reaguje

Škrečky samy podávali DHT a DHT konjugované s BSA, ale nie s BSA samotným. Obrázok 3a ukazuje strednú preferenciu (aktívny - neaktívny výbežok do nosa) pre DHT, BSA, DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. V súlade s našimi predchádzajúcimi štúdiami si škrečky počas vlastného podávania DHT vytvorili preferenciu aktívneho bodania nosom (t₇ = 4.34, p <0.01), ale nepreukázali žiadnu preferenciu pri samostatnom podávaní BSA (t₈ = 1.03, ns). Podobne, škrečkovia uprednostňovali aktívny nosový poke s DHT-CMO-BSA (t₉ = 2.71, p = 0.02) a DHT-Hemis-BSA (t₇ = 2.92, p = 0.02). S DHT pripojeným k samotným linkerom podávali škrečky samo-podávanú DHT-CMO (t₈ = 3.91, p <0.01), ale nepreukázali významnú preferenciu pri samostatnom podávaní DHT-Hemis (t₁₀ = 1.87, p = 0.09). Pri DHT-Hemis boli reakcie na aktívny nos-poke (40.5 ± 10.3 resp. 4h) podobné ako u DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp. 4h), ale títo muži tiež vykazovali zvýšené reakcie na inaktívny nos. -poke (28.7 ± 6.6 resp. 4h) v porovnaní s hodnotami pre DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp. 4h).

Obrázok 3

3a: Priemerná preferencia (aktívne - neaktívne nosové výhonky) pre škrečkov, ktorí si sami podávali BSA (n = 9), DHT (n = 8), DHT-CMO-BSA (DCB, n = 10) a DHT-Hemis-BSA ( DHB, n = 8), DHT-CMO (DC, n = 8) a DHT-hemis (DH, n = 11). * Výrazne odlišné od (viac ...)

infúzie

Počet infúzií prijatých pre každú skupinu je uvedený v Obr. 3b, Škrečky dostávali významne viac infúzií DHT ako BSA (t₁₅ = 3.04, p = 0.01). Podobne, škrečkovia dostali viac infúzií, keď sa im umožnilo podávať si DHT-Hemis-BSA (t₁₅ = 2.72, p = 0.02) alebo DHT-CMO (t₁₆ = 2.70, p = 0.02) v porovnaní s BSA. Počet infúzií prijatých pre skupiny DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) a DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) boli podobné tým, ktoré podávali DHT, DHT-Hemis-BSA a DHT- CMO. Avšak škrečky nedostávali významne viac DHT-CMO-BSA (t₁₇ = 1.96, p = 0.07) alebo DHT-Hemis (t₁₈ = 1.91, p = 0.07) v porovnaní s BSA.

Predávkovať

Jedenásť z 55 škrečkov uhynulo pred dokončením všetkých 15 testovacích sedení. Úmrtia v dôsledku predávkovania androgénmi počas samopodávania testosterónu boli už predtým opísané ( Peters a Wood, 2005 ). V tejto štúdii uhynuli 2 z 8 samcov (25 %) počas samopodávania DHT, čo je podobné 24 % hláseným pri predávkovaní testosterónom ( Peters a Wood, 2005 ). Samopodávanie DHT-CMO a DHT-Hemis bolo spojené s najvyššími stratami (3 z 8 na skupinu, 38 %), zatiaľ čo u škrečkov, ktorí si sami podávali BSA (1 z 9, 11 %) alebo DHT-Hemis-BSA (0 z 8), bolo málo úmrtí. Rovnako ako pri predávkovaní testosterónom, ani jeden zo škrečkov v tejto štúdii neuhynul počas samopodávania. Namiesto toho škrečky uhynuli o niekoľko hodín neskôr vo svojich domácich klietkach s ťažkou lokomotorickou a respiračnou depresiou.

Predávkovanie testosterónom úzko koreluje s príjmom testosterónu, najmä s maximálnym príjmom na sedenie ( Peters a Wood, 2005 ). Obr. 4 porovnáva skóre preferencií, počet prijatých posilňovacích podnetov a maximálny príjem u škrečkov, ktorí absolvovali všetkých 15 testovacích sedení, a u tých, ktorí ich absolvovali nie. Obe skupiny preukázali významnú preferenciu aktívneho pichania do nosa ( p < 0.05). Preferencia však bola významne vyššia u škrečkov, ktoré uhynuli počas samopodávania (25.7 ± 5.2 resp/4h) v porovnaní s tými, ktoré prežili (9.5 ± 2.0 resp/4h, t ₅₃ = 3.42, p < 0.01). Škrečky, ktoré nedokončili 15 sedení, dostali viac ako dvakrát toľko infúzií na sedenie (31.2 ± 5.0 inf/4h) ako tí, ktorí absolvovali všetky sedenia (14.8 ± 1.1 inf/4h, t ₅₃ = 5.05, p < 0.001). Okrem toho, u škrečkov, ktoré uhynuli počas štúdie, bol maximálny príjem na sedenie významne vyšší (77.0 ± 9.8 inf/4h) ako u samcov, ktorí prežili (36.1 ± 2.9 inf/4h, t ₅₃ = 5.41, p < 0.001).

Obrázok 4

Priemerné skóre preferencie (vľavo), prijaté infúzie (v strede) a maximálny príjem na sedenie (vpravo) pre škrečky, ktoré absolvovali všetkých 15 sedení (C15, n = 44), a tých, ktoré nie (<15, n = 11). Skupinové priemery ± SEM sú zobrazené ako nitkový kríž. (viac ...)

Diskusia

Samotné podávanie androgénu môže byť sprostredkované membránovými, ale nie jadrovými receptormi androgénov

Súčasná štúdia ukazuje, že klasické jadrové AR nie sú nevyhnutné pre androgénnu samosprávu. U potkanov Tfm aj WT sa vyvinula preferencia aktívneho nosného poke počas samopodania DHT. Okrem toho boli schopní reagovať na vzostupný FR plán zvýšením aktívnych nosov, čím sa udržala stabilná úroveň príjmu liečiva bez ohľadu na harmonogram FR. Na rozdiel od toho, potkany, ktoré dostávali vehikulum, neodpovedali na zmeny v FR pláne. Ich aktívny výtok z nosa sa významne nezvýšil v reakcii na zmeny v pláne FR a dostali menej infúzií, keďže sa zvýšila požiadavka na odpoveď. Pretože viazanie ligandu na „klasický“ nukleárny receptor androgénu je v mutantoch Tfm ohrozené, toto podporuje našu hypotézu, že zosilnenie androgénu je sprostredkované prostredníctvom alternatívnych ciest.

Neočakávane vysoká reakcia potkanov kmeňa Tfm na vehikulum pravdepodobne nie je spôsobená samotným vehikulom. Podobné javy sme pozorovali v samostatnej skupine potkanov kmeňa Tfm, ktoré nedostávali žiadne infúzie (údaje nie sú uvedené). Namiesto toho to môže súvisieť s feminizovanými behaviorálnymi znakmi u samcov kmeňa Tfm. Zvýšené pichanie nosom u potkanov kmeňa Tfm môže byť analogické s vyšším prieskumným sklonom hlavy pozorovaným u samíc potkanov ( Brown a Nemes, 2008 ). Alternatívne je známe, že potkany a myši kmeňa Tfm vykazujú zvýšené správanie podobné úzkosti ( Zuloaga a kol., 2006 , Zuloaga a kol., 2008a ). Možno sedatívne/anxiolytické účinky DHT ( Agren a kol., 1999 , Arnedo a kol., 2000 , Frye a Seliga, 2001 , Berbos a kol., 2002 , Peters a Wood, 2005 ) utlmili úzkostné správanie, keď si potkany Tfm samy podávali DHT.

Okrem toho, samopodávanie konjugátov DHT-BSA samcom škrečkov poskytuje dôkaz, že androgény môžu pôsobiť na neuronálnu plazmatickú membránu a mať tak posilňujúci účinok. Škrečky preukázali významnú preferenciu pre oba konjugáty DHT-BSA. Dávky, ktoré si samci podávali, sú v súlade s našimi predchádzajúcimi štúdiami o T, DHT a bežne zneužívaných steroidoch ( Ballard a Wood, 2005 , DiMeo a Wood, 2006b ). Naproti tomu škrečky nepreukázali žiadnu preferenciu pre samotný BSA. Údaje o úmrtnosti a príjme liekov ukazujú, že DHT a jeho deriváty môžu byť smrteľné, čo potvrdzuje naše predchádzajúce údaje o predávkovaní T ( Peters a Wood, 2005 ).

Súčasná štúdia odhaľuje druhovo špecifický vzorec operandnej reakcie. Škrečky neuprednostňovali aktívne pichanie do nosa pri samopodávaní vehikula, ako už bolo preukázané ( Johnson a Wood, 2001 , Wood, 2002 , DiMeo a Wood, 2004 , Triemstra a Wood, 2004 , Wood a kol., 2004 , Ballard a Wood, 2005 , DiMeo a Wood, 2006b ). U potkanov však existovala jasná preferencia aktívneho pichania do nosa bez ohľadu na prijaté liečivo. Podobný trend sme pozorovali aj v našej predchádzajúcej štúdii o intravenóznom samopodávaní testosteronu u potkanov, hoci nebol štatisticky významný ( Wood a kol., 2004 ). Na základe tohto druhovo špecifického rozdielu v správaní pri samopodávaní je potrebná opatrnosť pri porovnávaní údajov o správaní potkanov a škrečkov.

Pri interpretácii súčasnej štúdie je potrebné zvážiť niekoľko výhrad. Po prvé, jadrové AR s výrazne zhoršenou väzbou ligandu sú stále prítomné u potkanov Tfm ( Yarbrough a kol., 1990 ), na rozdiel od myší Tfm ( He a kol., 1991 ). Je možné, že tieto mutované jadrové AR sú dostatočné na sprostredkovanie účinkov androgénov v suprafyziologických dávkach. Po druhé, konjugáty DHT-BSA sa môžu degradovať in vivo , čo vedie k voľnému DHT. Hoci sa to in vitro nejaví ako významný problém ( Lieberherr a Grosse, 1994 , Gatson a kol., 2006 ), stupeň a časový priebeh degradácie DHT-BSA in vivo v mozgu nie sú v súčasnosti známe. Nakoniec, konjugáty DHT-BSA nemusia významne prenikať do mozgového tkaniva. DHT-BSA je výrazne väčší ako DHT, preto sú účinky DHT-BSA pozorované v súčasnej štúdii pravdepodobne sprostredkované v miestach blízko komôr.

Napriek týmto výhradám tieto dva odlišné prístupy priniesli konzistentné výsledky, ktoré silne argumentujú proti nutnosti jadrového AR pri posilňovaní androgénov. Okrem toho samopodávanie konjugátov BSA naznačuje, že androgény môžu pôsobiť na plazmatickú membránu pri posilňovaní androgénov. Podľa našich vedomostí súčasná štúdia poskytuje prvý in vivo dôkaz o behaviorálne relevantných účinkoch androgénov na plazmatickú membránu.

Androgény majú na odmenu rýchle jadrové účinky nezávislé od AR

Niekoľko ďalších štúdií o androgénnej odmene preukázalo výsledky zodpovedajúce negenomickým alebo plazmatickým membránovým účinkom. CPP sa vyvíja do 30 minút od systémovej injekcie T ( Alexander a kol., 1994 ), čo je časový priebeh zodpovedajúci akútnym negenomickým účinkom T. CPP sa môže vyvolať aj intra-Acb infúziami T alebo jeho metabolitu ( Packard a kol., 1997 , Frye a kol., 2002 ), hoci Acb má málo genomických AR. Okrem toho VTA exprimuje Fos v reakcii na ICV T-infúziu ( Dimeo a Wood, 2006a ), napriek nedostatku významnej klasickej AR expresie v tomto mieste. Súčasná štúdia neposkytuje informácie týkajúce sa miesta účinku v mozgu. Napriek tomu naznačuje, že relatívny nedostatok jadrového AR sám o sebe nie je dostatočným dôvodom na vylúčenie štruktúr, ako sú Acb a VTA, z potenciálnych miest, ktoré môžu sprostredkovať androgénne účinky.

Rýchle účinky steroidov na plazmatickú membránu v dorzálnom a ventrálnom striate nie sú obmedzené len na androgény. Je známe, že progestíny indukujú CPP, pravdepodobne prostredníctvom receptorov kyseliny gama-aminomaslovej (GABA) v Acb ( Frye, 2007 ). Estrogény tiež vykazujú rýchle účinky sprostredkované membránovými receptormi v dorzálnom striate ( Mermelstein a kol., 1996 , Becker a Rudick, 1999 ). Membránový receptor už bol izolovaný pre progestín ( Zhu a kol., 2003 ) a hromadia sa dôkazy o receptoroch na povrchu buniek pre estrogény (prehľad u Vasudevan a Pfaff, 2007 ) a androgény (prehľad u Thomas a kol., 2006 ). Zatiaľ čo estrogény tiež posilňujú ( DiMeo a Wood, 2006b ), posilňujúce účinky testosterónu sa zdajú byť prevažne androgénne. Škrečky si samy podávajú nearomatizovateľné androgény, ako je drostanolón a DHT ( Ballard a Wood, 2005 , DiMeo a Wood, 2006b ). Okrem toho, antiandrogén flutamid môže blokovať samopodávanie testosterónu ( Peters a Wood, 2004 ). Hoci sa to môže zdať v rozpore s úlohou membránového AR uvádzanou v tejto štúdii, bolo hlásené, že flutamid tiež blokuje aktiváciu membránového AR ( Braun a Thomas, 2003 , Braun a Thomas, 2004 ).

Vlastnosti membránových androgénnych receptorov

Historicky sa účinky steroidov vrátane androgénov považovali za transdukované procesmi sprostredkovanými jadrovými receptormi. Správy o rýchlych androgénnych účinkoch, pravdepodobne sprostredkovaných membránovo asociovanými receptormi, sú však dostupné už niekoľko desaťročí. Napríklad v mediálnej preoptickej oblasti môžu androgény zmeniť neuronálne vzplanutie v priebehu niekoľkých sekúnd ( Yamada, 1979 ) až minút ( Pfaff a Pfaffmann, 1969 ). Okrem toho Orsini a kolegovia ( Orsini, 1985 , Orsini a kol., 1985 ) preukázali rýchlu modifikáciu frekvencie neuronálnych vzplanutí androgénmi v laterálnom hypotalame (LHA). Tento účinok androgénov v LHA môže byť obzvlášť dôležitý pre túto štúdiu, pretože je známe, že LHA sa podieľa na systéme odmeňovania ( Olds a Milner, 1954 ) a orexín/hypokretín LHA je regulovaný gonádovými steroidmi ( Muschamp a kol., 2007 ).

Medzi typy buniek s možnými membránovými AR patria gliové ( Gatson a kol., 2006 ), gonádové ( Braun a Thomas, 2003 , Braun a Thomas, 2004 ) a imunitné bunky ( Benten a kol., 1999 , Guo a kol., 2002 ), myocyty ( Estrada a kol., 2003 ) a osteoblasty ( Lieberherr a Grosse, 1994 ). Hoci molekulárna identita ešte nebola určená, medzi kandidátov na membránové AR patria membránové receptory so známymi väzbovými miestami pre steroidy, ako napríklad GABA-A (prehľad v Lambert a kol., 2003 ) a podjednotky NR2 receptorov kyseliny N-metyl-D-asparágovej ( Malayev a kol., 2002 ). Alternatívne, Thomas a kolegovia (2004) uviedli dôkazy o novom receptore spojenom s G-proteínom ako membránovom AR. Okrem toho v tejto štúdii nemožno vylúčiť účinky androgénov, ktoré nesúvisia so špecifickým receptorom.

nedávny in vitro štúdie naznačujú, že existuje viacero membránových AR alebo viac ako jedno väzbové miesto na jednom receptore, ako sa navrhuje pre membránový progesterónový receptor (Ramirez a kol., 1996). V mnohých typoch buniek sa zdá, že membránový AR je membránový receptor spojený s Gq / o (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Guo a spol., 2002, Estrada a kol., 2003). Avšak charakteristiky viazania steroidov a citlivosť predpokladanej membrány AR na anti-androgény sa značne líšia v závislosti od typu bunky. Napríklad antiandrogény môžu blokovať účinky DHT na ovariálne bunky croakerov (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004), zatiaľ čo nie sú účinné v iných typoch buniek (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 2004, Gatson a kol., 2006), alebo dokonca môžu vykazovať účinky podobné agonistom v hipokampálnych bunkách (Pike, 2001, Nguyen a kol., 2007) a niekoľko rakovinových bunkových línií (Peterziel a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Evangelou a kol., 2000, Papakonstanti a kol., 2003). Okrem toho boli hlásené rôzne T-väzbové charakteristiky pre rôzne orgány u rýb (\ tBraun a Thomas, 2004).

Naše skúsenosti s bežne zneužívanými AAS naznačujú, že významné modifikácie na A-kruhu (na C2 a/alebo C3) a na C17 majú tendenciu interferovať so samopodávaním ( Ballard a Wood, 2005 ). Napríklad stanozolol, ktorý má významné modifikácie na C2 a C3, ako aj metylovú skupinu pripojenú k C17, sa samopodávaním nepodáva. V súčasnej štúdii si škrečky samopodávali BSA konjugovaný na C3 (DHT-CMO-BSA) aj C17 (DHT-Hemis-BSA). Na objasnenie charakteristík samopodávaných androgénov je potrebný ďalší výskum.

Klinický význam

AAS, najmä T, sú zďaleka najbežnejšie látky zvyšujúce výkon používané športovcami a predstavujú takmer polovicu pozitívnych dopingových testov ( Svetová antidopingová agentúra, 2006 ). Vzhľadom na takéto široké používanie má zneužívanie AAS rozsiahle zdravotné následky. Vedľajšie účinky zneužívania AAS na srdce a pečeň sú dobre známe ( Leshner, 2000 ). Predpokladá sa, že tieto a anabolické účinky AAS sú sprostredkované jadrovým AR. Možné účinky androgénov nezávislé od jadrového AR však naznačujú, že vplyv AAS sa môže rozširovať ďaleko za štruktúry s expresiou jadrového AR.

Pokiaľ ide o podobnosť s inými drogami, AAS majú odlišné účinky a mechanizmy účinku od stimulantov. Na rozdiel od stimulantov ( Graybiel a kol., 1990 ), AAS indukujú aktiváciu c-Fos iba vo VTA a nie v Acb ( Dimeo a Wood, 2006a ). Okrem toho AAS zmierňujú stimulantmi indukované uvoľňovanie Acb DA ( Birginer a kol., 2006 ) a akútne inhibujú uvoľňovanie DA ( Triemstra a kol., 2008 ). Z behaviorálneho hľadiska AAS neindukujú lokomotorickú aktiváciu charakteristickú pre stimulanty ( Peters a Wood, 2005 ).

Namiesto toho sa behaviorálne reakcie na akútne AAS podobajú reakciám na opioidy alebo benzodiazepíny, pričom pri ich spoločnom užívaní môžu mať pravdepodobne aditívne účinky. Akútne vystavenie AAS potláča autonómne funkcie vrátane dýchania a telesnej teploty ( Peters a Wood, 2005 ). Autonómna depresia vyvolaná AAS pripomína príznaky predávkovania opioidmi a je blokovaná opioidným antagonistom naltrexónom ( Peters a Wood, 2005 ). Okrem toho nandrolón, bežne používaný AAS, zosilňuje hypotermické účinky morfínu a zhoršuje abstinenčné príznaky z vysadenia morfínu vyvolané naloxónom ( Celerier a kol., 2003 ). Okrem toho je dobre známe, že akútne AAS majú sedatívny/anxiolytický účinok ( Agren a kol., 1999 , Arnedo a kol., 2000 , Frye a Seliga, 2001 , Berbos a kol., 2002 , Peters a Wood, 2005 ), pravdepodobne sprostredkovaný ich priamymi účinkami na receptory GABA-A ( Masonis a McCarthy, 1995 , Masonis a McCarthy, 1996 ). Zvýšená spotreba etanolu u potkanov chronicky liečených AAS môže byť tiež odrazom zmenenej GABAergnej funkcie ( Johansson a kol., 2000 ).

Naše zistenia týkajúce sa predávkovania vyvolávajú ďalšie zdravotné obavy. V súčasnosti je klasifikácia AAS ako kontrolných látok založená na ich anabolických vlastnostiach ( Zákon o kontrolovaných látkach z roku 1991 ). Súčasná štúdia však ukazuje, že anabolická účinnosť AAS nemusí nevyhnutne zodpovedať ich posilňujúcim vlastnostiam a rizikám predávkovania. Okrem konjugátov DHT-BSA nie je DHT-CMO použitý v tejto štúdii kontrolovanou látkou, hoci jeho posilňujúce vlastnosti a úmrtnosť z predávkovania sa zdajú byť dosť podobné ako pri DHT a T ( Peters a Wood, 2005 ). Priebeh predávkovania sa tiež podobal predtým hlásenému modelu pre T ( Peters a Wood, 2005 ), kde vysoký príjem viedol k úmrtnosti o 24 až 48 hodín neskôr. Vzhľadom na tieto zistenia si kritériá používané na zaradenie steroidu medzi kontrolované látky môžu vyžadovať revíziu, aby sa zohľadnila jeho pravdepodobnosť zneužívania a toxicita, ako aj jeho anabolická účinnosť.

Výsledky súčasnej štúdie naznačujú, že jadrová AR, jediná AR, ktorá je doteraz izolovaná, nie je nevyhnutná pre posilnenie androgénu. Namiesto toho výsledky naznačujú, že na plazmatickej membráne je transdukovaná androgénová výstuž. Preto je potrebné ďalšie skúmanie identity predpokladanej membránovej AR, ich funkčných charakteristík a anatomickej distribúcie, aby sa objasnil základný mechanizmus zneužívania AAS a jeho klinické dôsledky.

poznámky pod čiarou

Vyhlásenie vydavateľa: Toto je súbor PDF s neupraveným rukopisom, ktorý bol prijatý na publikovanie. Ako službu našim zákazníkom poskytujeme túto skorú verziu rukopisu. Rukopis prejde korektúrou, sadzbou a kontrolou výslednej korektúry pred publikovaním v konečnej citovateľnej podobe. Upozorňujeme, že počas produkčného procesu sa môžu objaviť chyby, ktoré by mohli ovplyvniť obsah, a vzťahujú sa naň všetky právne upozornenia týkajúce sa časopisu.

Referencie

Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Behaviorálne anxiolytické účinky liečby nízkymi dávkami anabolického androgénneho steroidu u potkanov. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosterón odmeňuje afektívne vlastnosti u samcov potkanov: dôsledky pre biologický základ sexuálnej motivácie. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, González-Bono E. Odmeňujúce vlastnosti testosterónu u intaktných samcov myší: pilotná štúdia. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikulárne self-podávanie bežne zneužívaných anabolických androgénnych steroidov u mužských škrečkov (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolone, oxymetholone a stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
Becker JB, Rudick CN. Rýchle účinky estrogénu alebo progesterónu na zvýšenie striatálneho dopamínu vyvolaného amfetamínom sú zosilnené estrogénovým primingom: štúdiou mikrodialýzy. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Rýchle účinky androgénov v makrofágoch. Steroidy. 2004;69: 585-590. [PubMed]
Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Signalizácia testosterónu cez internalizovateľné povrchové receptory v makrofágoch bez androgénneho receptora. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [Článok bez PMC] [PubMed]
Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akútne behaviorálne účinky anabolických steroidov: úzkosť, stereotypy a pohybová aktivita. Horm Behav. 2002;41: 457.
Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Zmenené extracelulárne hladiny DOPAC a HVA v krysom jadre accumbens v reakcii na sub-chronické nandrolonové podanie a následnú stimuláciu amfetamínom. Neurosci Lett 2006
Braun AM, Thomas P. Androgens inhibujú syntézu estradiol-17beta vo vaječníkoch atlantických chvostovníkov (Micropogonias undulatus) nongenomickým mechanizmom iniciovaným na povrchu bunky. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
Braun AM, Thomas P. Biochemická charakterizácia membránového androgénneho receptora vo vaječníku atlantického croakera (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
Brower KJ. Anabolické steroidy a závislosť. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symptómy a korelácia anabolicko-androgénnej závislosti od steroidov. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
Brown GR, Nemes C. Prieskumné správanie sa potkanov v prístroji s dierou: je namáčaním platnou mierou neofílie? Behav procesy. 2008;78: 442-448. [Článok bez PMC] [PubMed]
Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Účinky nandrolonu na akútne morfínové reakcie, toleranciu a závislosť u myší. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
Choi PY, pápež HG., Jr Násilie voči ženám a nezákonné užívanie androgénnych anabolických steroidov. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
Hlava 21, kapitola 13 - Prevencia a kontrola zneužívania drog Zákona o kontrolovaných látkach. 1991
DiMeo AN, Wood RI. Cirkulujúce androgény zvyšujú citlivosť na samopodávanie testosterónu u samcov škrečkov. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
Dimeo AN, drevo RI. ICV testosterón indukuje Fos v mozgu mužského sýrskeho škrečka. Psychoneuroendocrinology. 2006;31: 237-249. [PubMed]
DiMeo AN, Wood RI. Samostatné podávanie estrogénu a dihydrotestosterónu u samcov škrečkov. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosterón stimuluje intracelulárne uvoľňovanie vápnika a mitogénom aktivované proteínkinázy prostredníctvom receptora spojeného s G proteínom v bunkách kostrového svalstva. Endocrinology. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Down-regulácia transformácie beta receptorov rastového faktora androgénmi v bunkách rakoviny vaječníkov. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekulárna metóda na klasifikáciu genotypov získaných v chovnej kolónii z testikulárnych feminizovaných potkanov (Tfm). Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
Frye CA. Progestíny ovplyvňujú motiváciu, odmenu, kondicionovanie, stres a / alebo reakciu na drogy zneužívania. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Jadro accumbens ako miesto účinku na odmeňovanie vlastností testosterónu a jeho metabolitov so zníženým obsahom 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
Frye CA, Seliga AM. Testosterón zvyšuje analgéziu, anxiolýzu a kognitívnu výkonnosť samcov potkanov. Kognitívna, afektívna a behaviorálna neuroveda. 2001;1: 371-381.
Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosterón diferencovane moduluje mitogénom aktivovanú proteínkinázu a cesty fosfoinozitidu 3-kinázy / Akt cez jadrový a nový membránový receptor androgénu v bunkách C6. Endocrinology. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamín a kokaín indukujú špecifickú aktiváciu c-fos génu v striosom-matricových kompartmentoch a limbické delenie striata. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [Článok bez PMC] [PubMed]
Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomická testosterónová vápniková signalizácia. Genotropné účinky v makrofágoch bez androgénneho receptora. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
On WW, Kumar MV, Tindall DJ. Mutácia posunu rámca v géne receptora androgénu spôsobuje úplnú necitlivosť androgénu u testikulárne-feminizovanej myši. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [Článok bez PMC] [PubMed]
Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabolické androgénne steroidy ovplyvňujú príjem alkoholu, obranné správanie a mozgové opioidné peptidy u potkanov. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
Johnson LR, Wood RI. Perorálne samo-podávanie testosterónu u samcov škrečka. Neuroendokrinologie. 2001;73: 285-292. [PubMed]
Kouri EM, Lukas SE, pápež HG, Jr, Oliva PS. Zvýšená agresívna odpoveď u mužských dobrovoľníkov po podaní postupne sa zvyšujúcich dávok testosterónu cypionátu. Drogový alkohol závisí. 1995;40: 73-79. [PubMed]
Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidná modulácia receptorov GABAA. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Zneužívanie anabolických steroidov. 2000: 1-8.
Lieberherr M, Grosse B. Androgény zvyšujú intracelulárnu koncentráciu vápnika a tvorbu inozitolu 1,4,5-trisfosfátu a diacylglycerolu prostredníctvom G-proteínu citlivého na pertusový toxín. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Účinky androgénov na hipokampálne počty chrbtice synapse CA1 sú zachované u samcov potkanov Tfm s defektnými androgénnymi receptormi. Endocrinology. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibícia NMDA reakcie pregnenolón sulfátom odhaľuje subtyp selektívnu moduláciu NMDA receptorov sulfátovými steroidmi. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [Článok bez PMC] [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Priame účinky anabolických / androgénnych steroidov, stanozololu a 17 alfa-metyltestosterónu na väzbu benzodiazepínu na. receptor a) kyseliny gama-aminomaslovej. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Účinky androgénneho / anabolického steroidného stanozololu na funkciu receptora GABAA: GABA-stimulovaný 36Cl-influx a väzba [35S] TBPS. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol znižuje vápnikové prúdy u neostriálnych neurónov potkanov cez membránový receptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
Morin LP, Wood RI. Stereotaxický atlas mozgu zlatého škrečka. Akademická tlač; San Diego: 2001.
Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Úloha hypokretínu (orexínu) pri mužskom sexuálnom správaní. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
Rada NR, editor. NationalResearchCouncil. Príručka pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat. Národná rada pre výskum; Washington, DC: 1996.
Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid a cyproterón acetát vykazujú agonistické účinky: indukcia neuroprotekcie závislej od androgénneho receptora. Endocrinology. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
NIH. Princíp starostlivosti o laboratórne zvieratá. Národný zdravotný ústav; Bethesda, Maryland: 1985.
Olds J, Milner PM. Pozitívne zosilnenie produkované elektrickou stimuláciou septálnej oblasti a iných oblastí mozgu potkana. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
Orsini JC. Priame účinky androgénov na laterálnu hypotalamickú neuronálnu aktivitu u samcov potkanov: II. Štúdia ejekčného tlaku. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Priame účinky androgénov na laterálnu hypotalamickú neuronálnu aktivitu u samcov potkanov: I. Mikrooforetická štúdia. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Odmeňovanie afektívnych vlastností intra-nucleus accumbens injekcií testosterónu. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Expresia preferencie miesta s testosterónom je blokovaná periférnou injekciou alfa-flupentixolu alebo intra-akumulovanými injekciami. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Rýchla, nenomenomická signálna dráha reguluje reorganizáciu aktínu indukovanú aktiváciou receptorov membránového testosterónu. Mol Endokrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
Paxinos G., Watson C. Mozog potkana: v sterilných súradniciach. 4th. Akademická tlač; New York: 1998.
Peters KD, Wood RI. Anabolicko-androgénna závislosť od steroidov zahŕňa androgénové a opioidné receptory. Zborník 34th Výročného stretnutia Spoločnosti pre neurovedy; San Diego, CA. 2004.
Peters KD, Wood RI. Androgénna závislosť u škrečkov: predávkovanie, tolerancia a potenciálne opioidergické mechanizmy. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Rýchla signalizácia receptorom androgénu v bunkách rakoviny prostaty. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
Pfaff DW, Pfaffmann C. Čuchové a hormonálne vplyvy na bazálny predný mozog samca potkana. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
Pike CJ. Testosterón zmierňuje toxicitu beta-amyloidu v kultivovaných hipokampálnych neurónoch. Brain Research. 2001;919: 160-165. [PubMed]
Pápež HG, Jr, Katz DL. Psychické a medicínske účinky užívania anabolických a androgénnych steroidov. Kontrolovaná štúdia športovcov 160. Arch. Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membránové receptory pre estrogén, progesterón a testosterón v mozgu potkana: fantázia alebo realita. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
Simerly RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribúcia buniek obsahujúcich androgén a estrogén mRNA v mozgu potkana: In situ hybridizačná štúdia. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Diferenciálne účinky konjugátov estradiol a estradiol-BSA. Endocrinology. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, receptory viazané na estrogén a androgén G-proteín v gonadách rýb. Steroidy. 2006;71: 310-316. [PubMed]
Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosterón a nucleus accumbens dopamín u mužského syrského škrečka. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [Článok bez PMC] [PubMed]
Triemstra JL, Wood RI. Samotné podávanie testosterónu u samíc škrečkov. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
Vasudevan N, Pfaff DW. Činnosti estrogénov vyvolané membránami v neuroendokrinológii: objavujúce sa princípy. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
Drevo RI. Orálne podávanie testosterónu u samcov škrečkov: odozva na dávku, dobrovoľné cvičenie a individuálne rozdiely. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
Drevo RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Testosterónová výstuž: intravenózne a intracerebroventrikulárne samo-podávanie samcov potkanov a škrečkov. Psychofarmakológia (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
Drevo RI, Newman SW. Imunoreaktivita receptora androgénu v mozgu samca a samice sýrskeho škrečka. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
WorldAnti-DopingAgency. Nežiaduce analytické zistenia hlásené akreditovanými laboratóriami. Svetová antidopingová agentúra; Montreal, Kanada: 2006.
Yamada Y. Účinky testosterónu na jednotkovú aktivitu u hypotalamu potkana a septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, francúzsky FS, Wilson EM. Mutácia jedinej bázy v géne receptora androgénu spôsobuje necitlivosť androgénu u testikulárneho feminizovaného potkana. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Použitie anabolických androgénnych steroidov v Spojených štátoch. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgén stimuluje mitogénom aktivovanú proteínkinázu v ľudských bunkách rakoviny prsníka. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
Zhu Y, ryžové CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Klonovanie, expresia a charakterizácia membránového progestínového receptora a dôkaz, že je sprostredkovateľom meiotického dozrievania rybích oocytov. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [Článok bez PMC] [PubMed]
Zuloaga DG, Morris JA, Jordánsko CL, Breedlove SM. Myši s mutáciou testikulárnej feminizácie demonštrujú úlohu androgénových receptorov pri regulácii správania súvisiaceho s úzkosťou a osi hypotalamus-hypofýza-nadobličky. Horm Behav. 2008;54: 758-766. [PubMed]
Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Úloha androgénnych receptorov v maskulinizácii mozgu a správania: čo sme sa dozvedeli z mutácie feminizácie semenníkov. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [Článok bez PMC] [PubMed]
Zuloaga DZ, Jordánsko CL, Breedlove SM. Potkany s testikulárnou feminizačnou mutáciou (TFM) vykazujú zvýšené indexy úzkosti. Zborník 36th Výročného stretnutia Spoločnosti pre neurovedy; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.