Membránové androgénne receptory môžu sprostredkovať posilňovanie androgénu. (2010)

Psychoneuroendocrinology. 2010 Aug; 35 (7): 1063-73. Epub 2010 Feb 6.

Sato SM, Johansen JA, Jordánsko CL, Drevo RI.

zdroj

Ústav bunky a neurobiológie, Keckova lekárska fakulta, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.

abstraktné

Zneužívanie anabolických androgénnych steroidov (AAS) je rozšírené. Okrem toho sa AAS spevňujú, čo dokazuje samo podávanie u hlodavcov. Receptory, ktoré prenášajú zosilňujúce účinky AAS, sú však nejasné. AAS sa môže viazať na klasické nukleárne androgénové receptory (AR) alebo membránové receptory. Použili sme dva prístupy na skúmanie úlohy jadrových AR v samospráve AAS. Najprv sme testovali androgénne podávanie u potkanov s testikulárnou feminizačnou mutáciou (Tfm), ktorá interferuje s androgénnou väzbou. Ak sú jadrové AR nevyhnutné pre samoobsluhu AAS, samci Tfm by nemali podávať androgény samostatne. Tfm samci a diváci divokého typu (WT) sami podávali ne-aromatizovateľný androgén dihydrotestosterón (DHT) alebo vehikulárne intracerebroventrikulárne (ICV) v plánoch fixného pomeru (FR) až do FR5. Potkany Tfm aj WT získali preferenciu pre aktívny nos-poke počas samopodania DHT (66.4 +/- 9.6 odpovede / 4 h pre Tfm a 79.2 +/- 11.5 pre odpovede WT / 4 h) a výkyvy nosa sa zvýšili ako Požiadavka FR sa zvýšila. Preferenčné skóre bolo signifikantne nižšie u samo-podávajúceho vehikula potkanov (42.3 +/- 5.3 odpovede / 4 h pre odpovede Tfm a 19.1 +/- 4.0 / 4 h pre WT). Tiež sme testovali samopodávanie DHT konjugovaného s hovädzím sérovým albumínom (BSA) na C3 a C17, ktorý je obmedzený na pôsobenie na bunkovom povrchu. Škrečkom sa umožnilo podávanie DHT, BSA a DHT-BSA konjugátov počas 15 dní pri FR1. Škrečkovia vykazovali významnú preferenciu pre DHT (18.0 +/- 4.1 odpovede / 4 h) alebo DHT-BSA konjugáty (10.0 +/- 3.7 odpovede / 4 h a 21.0 +/- 7.2 odpovede / 4 h), ale nie pre BSA (2.5 + / -2.4 odpovede / 4 h). Súhrnne povedané, tieto údaje ukazujú, že jadrové AR nie sú potrebné pre androgénnu samosprávu. Samotné podávanie androgénu môže byť tiež sprostredkované receptormi plazmatickej membrány.

Copyright 2010 Elsevier Ltd. Všetky práva vyhradené.

Kľúčové slová: Anabolické androgénne steroidy, samopodávanie, membránový androgénový receptor, jadrový androgénový receptor, mutácia testikulárnej feminizácie

Anabolické androgénne steroidy (AAS) sú drogy zneužívania. Tieto deriváty testosterónu (T) sa používajú na atletické a estetické účely (Yesalis a kol., 1993). Vedľajšie účinky siahajú od hypogonadizmu a gynekomastie k srdcovej a hepatálnej dysfunkcii (Leshner, 2000). Okrem toho sa zhromažďujú dôkazy, že zneužívanie AAS spôsobuje zmeny nálady (Pápež a Katz, 1994), agresia (Choi a pápež, 1994, Kouri a kol., 1995) a môže spôsobiť závislosť (Brower a kol., 1991, Brower, 2002). Napriek rastúcim obavám neboli základné mechanizmy zneužívania AAS dobre pochopené.

U ľudí sa tvrdí, že začatie užívania AAS je do značnej miery motivované anabolickými účinkami, ale niektorí zneužívatelia sa napokon vyvíjajú závislosťou (Brower, 2002). Dôkazy z výskumu na zvieratách podporujú túto hypotézu. AAS indukuje preferenciu podmieneného miesta (CPP) u myší (Arnedo a kol., 2000) a potkanov (Packard a kol., 1997, Packard a kol., 1998, Frye a kol., 2002). Okrem toho škrečky dobrovoľne konzumujú AAS \ tDrevo, 2002), intravenózne (Wood a kol., 2004) a intracerebroventrikulárne (ICV) samopodanie (DiMeo a Wood, 2004, Triemstra a Wood, 2004, Wood a kol., 2004, DiMeo a Wood, 2006b).

Zatiaľ čo ICV samopodávanie navrhuje centrálne miesta účinku, špecifické hormóny a receptory sprostredkujúce zosilnenie AAS sú nejasné. Súčasné dôkazy naznačujú, že zosilňujúce účinky T sú sprostredkované androgénmi, a nie prostredníctvom estrogénov po aromatizácii. Muži škrečkovia si sami podajú dihydrotestosterón (DHT); DiMeo a Wood, 2006b) a iných ne-aromatizovateľných androgénov (\ tBallard a Wood, 2005). Okrem toho, T-podávanie je blokované anti-androgénnym flutamidom (Peters a drevo, 2004). Otázkou teraz je: ako je androgénny signál transdukovaný v mozgu?

Androgénový receptor (AR) je klasický nukleárny steroidný receptor, ktorý funguje ako transkripčný faktor. AR sú zriedkavé v štruktúrach spojených so zneužívaním drog, ako sú napríklad nucleus accumbens (Acb) a ventrálna tegmentálna oblasť (VTA; Simerly a kol., 1990, Drevo a Newman, 1999). Existujú aj dôkazy o gonádových steroidoch pôsobiacich prostredníctvom receptorov na povrchu buniek (Mermelstein a kol., 1996, Zhu a kol., 2003, Thomas a kol., 2006, Vasudevan a Pfaff, 2007).

V súčasnej štúdii sme použili dva prístupy na určenie úlohy klasického jadrového AR pri posilňovaní androgénov. Na minimalizáciu možnej aktivácie estrogénových receptorov (ER) sme testovali samopodávanie DHT. V prvom experimente boli potkany s testikulárnou feminizačnou mutáciou (Tfm) testované na ICV samopodávanie DHT. Tfm je substitúcia jednej bázy, ktorá vedie k defektným ARs s obmedzenou väzbou ligandu (Yarbrough a kol., 1990). Samce potkanov Tfm vykazujú vonkajší fenotyp samičky v dôsledku nedostatočnej androgénnej stimulácie počas vývoja (Zuloaga a kol., 2008b). Ak sú na zosilnenie AAS potrebné funkčné jadrové AR, potkany Tfm by nemali podávať DHT samy. Namiesto toho boli Tfm potkany schopné získať DHT samopodávanie. V druhom experimente sme testovali ICV samopodávanie membránovo nepriepustných foriem DHT u škrečkov. Keď je DHT konjugovaný s albumínom hovädzieho séra (BSA), jeho účinky sú obmedzené na receptory na povrchu buniek. Ak sú na zosilnenie androgénu potrebné jadrové AR, škrečky by nemali podávať DHT konjugované s BSA. Naopak, škrečky vykazovali jasnú preferenciu DHT konjugovanú s BSA. Tieto štúdie spoločne ukazujú, že jadrové AR nie sú potrebné na androgénnu samosprávu. Namiesto toho môže byť vystuženie androgénu sprostredkované membránovými AR.

Metódy a materiály

Predmety

Rats

Dospelé samce potkanov Tfm a súrodenci (WT) boli získané z kolónie na Michigan State University. Ich genotyp bol overený pomocou PCR, podobnej metódam opísaným vyššie (Fernandez a kol., 2003). Stručne, ušné svorky sa strávili cez noc pri 55 ° C v lyzačnom pufri obsahujúcom proteinázu K, potom sa tepelne inaktivovali pri 95 ° 30 minút. AR sa amplifikoval použitím forwardového priméru 5-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 a reverzného priméru 5-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3, čím sa získal produkt 135bp. Amplifikované vzorky sa potom štiepili restrikčným enzýmom Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) cez noc pri 37 ° C a nechali sa bežať na 3% agarózovom géli. Týmto reštrikčným enzýmom sa rozštiepi iba WT AR, pričom zostávajú dva pásy pod 100bp, zatiaľ čo Tfm AR zostáva nezostrihaný. Tfm zvieratá boli tiež overené fenotypom, prítomnosťou bradaviek, ženskou vzdialenosťou medzi pohlaviami a abdominálnymi semenníkmi. Tfm potkany sa predtým používali na demonštráciu negenomických androgénnych účinkov v hipokampuse (MacLusky a kol., 2006). Na začiatku experimentu boli WT potkany medzi 75 a 140 deň staré a Tfm potkany boli medzi 75 a 138 deň starými.

škrečky

Dospelé samce sýrskych škrečkov (130 - 150 g) sa získali od Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Zvieratá boli chované jednotlivo v obrátenom svetelnom cykle (14L: 10D) s dostupnou potravou a vodou. podľa chuti, Všetky experimentálne postupy boli schválené komisiami pre starostlivosť o zvieratá a ich použitie v príslušných inštitúciách a vykonávané v súlade s Príručka pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat (Národná výskumná rada, 1996).

chirurgia

Všetkým zvieratám bola implantovaná vodiaca kanyla z nehrdzavejúcej ocele 22g (Plastic One, Roanoke, VA) do laterálnej komory [potkanie: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0® -5.0 (Paxinos a Watson, 1998); škrečok: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 (Morin a Wood, 2001), mm od bregma], pod Na⁺ pentobarbital anestézia (potkan: 50 mg / kg, škrečok: 100mg / kg), ako bolo opísané vyššie (Wood a kol., 2004). Všetky chirurgické zákroky boli uskutočňované za aseptických podmienok podľa Princípy laboratórnej starostlivosti o zvieratá (NIH, 1985). Zvieratá sa nechali zotaviť aspoň týždeň po operácii pred testovaním.

Drogy

DHT, DHT-karboxymetyl-oxím (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisukcinát (Hemis) a DHT-Hemis-BSA sa získali zo Steraloidov (Newport, RI). V DHT-CMO-BSA je DHT konjugovaný s BSA v polohe C3 s CMO ako linkerom. Podobne je DHT spojený s BSA v polohe C17 cez Hemis za vzniku DHT-Hemis-BSA. DHT-CMO-BSA (Gatson a kol., 2006) a DHT-Hemis-BSA (Braun a Thomas, 2003) sa predtým použili na výskum možných účinkov androgénov na plazmatickú membránu. DHT sa rozpustil vo vodnom roztoku 13% P-cyklodextrínu (pCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) pri 1μg / ul. Ako sa zistilo z našej predchádzajúcej štúdie na škrečkoch, táto dávka produkuje silnú operatívnu reakciu počas samovoľného podávania ICV (DiMeo a Wood, 2006b). DHT deriváty boli rozpustené v rovnakom vehikule pri molárnej ekvivalentnej koncentrácii DHT (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-Hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA). : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) sa rozpustila v rovnakom vehikule pri 7.45 μg / ul, aby sa dosiahla molárna ekvivalentná koncentrácia BSA ako v DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA. Liečivá obsahujúce BSA boli pripravené denne bezprostredne pred použitím, aby sa zabránilo degradácii, a všetky roztoky boli filtrované cez filter 0.22 μm. Predchádzajúce štúdie ukázali, že len malý podiel steroidov sa disociuje z BSA (Stevis a kol., 1999), a toto množstvo nie je dostatočné na vyvolanie významných androgénnych účinkov (\ tLieberherr a Grosse, 1994, Gatson a kol., 2006). Podobne, naša skoršia štúdia ukázala, že DHT sa podáva samostatne pri 1.0 μg / μl, ale nie pri 0.1 μg / μl (DiMeo a Wood, 2006b). Preto je nepravdepodobné, že by sa voľný DHT (> 10%) disocioval od BSA v dostatočnom množstve na podporu samopodania.

Zariadenie

Zvieratám sa umožnilo podávať roztok liečiva alebo vehikula 4 hodinu / deň, 5 dní / týždeň v operačnej komore (Med Associates, St. Albans, VT) uzavretej v komore tlmiacej zvuk s nútenou ventiláciou. Každá komora bola vybavená vnútorným svetlom, otvormi 2-nosa a počítačom riadeným striekačkovým čerpadlom pripojeným k tekutému otočnému ramenu. Roztoky zo sklenenej injekčnej striekačky 100 μl sa podali do zvieraťa cez hadičku Tygon pripojenú k otočnému čapu. Rúrka spájajúca otočný diel a kanylu ICV bola chránená kovovou pružinou. Roztok liečiva alebo vehikulum sa podávali cez vnútornú kanylu 28-ga vloženú do vodiacej kanyly bezprostredne pred testovaním. Každá infúzia dodala 1 μl roztoku pri 0.2 μl / s. Nose-poke otvory boli umiestnené 6 cm od podlahy pod domom svetla. Jeden z otvorov pre nosný nos bol označený ako aktívny otvor pre nos. Odozva na túto dieru sa zaznamenala ako aktívny nos-poke (R: aktívny zosilnený) a spočítala sa do požiadavky na odozvu (FR1 na 5) na spustenie infúzie. Po spustení infúzie sa domáce svetlo zhaslo a aktívna diera sa počas infúzie 5-u rozsvietila, aby sa uľahčila diskriminácia aktívneho otvoru nosa. V tomto časovom limite 5-s bol zaznamenaný, ale nebol zaznamenaný do ďalšieho zosilnenia (NR: aktívny-nezosilnený). Odozva na druhom výbežku nosa sa zaznamenala ako neaktívny nos-poke (I), ale nespôsobila žiadnu infúziu. Umiestnenie aktívneho otvoru nosa na prednú alebo zadnú časť komory bolo vyvážené na ovládanie bočných preferencií. Údaje boli zaznamenané pomocou softvéru WMPC (Med Associate) na počítači so systémom Windows.

Samospráva ICV

Rats

Samodávkovanie DHT u potkanov Tfm a WT nasledovalo vzostupný plán fixného pomeru (FR) od FR1 do FR5. Potkany sa spočiatku vyškolili na FR1, kde sa zosilnila každá reakcia na aktívnom nosnom strave. Potom sa počet reakcií potrebných na získanie infúzie zvýšil o jeden 5 dní. Pri FR5 bolo na infúziu potrebných päť odpovedí na aktívnu dierku. Celkovo boli potkany testované na FR1 počas 10 dní a FR2 na FR5 (každý 5 dní), celkovo 30 dní. Potkany z každého genotypu boli náhodne rozdelené do skupín DHT alebo vehikula (vehikulum) a nechali sa podávať sami DHT alebo pCD vehikulum. Tridsať šesť potkanov (n_WT = 19, n_TFM = 17) boli použité v tomto experimente.

škrečky

Škrečky boli testované v rámci FR1 plánu na 15 dní. V predchádzajúcich štúdiách postačuje 15 dní ICV T samopodania na získanie preferencie pre aktívny nos. Škrečky boli náhodne priradené k DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8 ) alebo skupiny BSA (n = 9).

Analýza dát

Rats

Denné preferenčné skóre pre aktívny nos-poke boli stanovené odčítaním neaktívnych nosných výhonkov od súčtu aktívnych vystužených a aktívnych nevystužených nosných výčnelkov (R + NR-I). Priemerné skóre preferencií sa vypočítalo pre každé zviera z posledných 5 dní FR1 a počas FR2 do FR5. Okrem toho sa porovnával priemerný počet zosilnení na reláciu pre každé zviera v každom FR.

Dáta boli analyzované pomocou 3-way ANOVA s genotypom (WT alebo Tfm), liečivom (DHT alebo vehikulom) a FR plánom (1® 5) ako medzi subjektmi. FR plán bol považovaný za faktor medzi, pretože niektoré zvieratá nedokázali dokončiť celý 30 dní testovania v dôsledku upchatia ICV vodiacej kanyly. V týchto prípadoch boli do analýz zahrnuté iba údaje z vyplnených harmonogramov. Počet zvierat zahrnutých v každom stave je uvedený v Tabuľka 1, Po trojcestnej ANOVA nasledovali vhodné ANOVA s nižším poradím pre jednoduché účinky. V prípade potreby sa použil Newman-Keulsov test pre post-hoc párové porovnania.

Tabuľka 1

Telesná hmotnosť (priemer ± SEM vg) a počet potkanov použitých (n) na začiatku každého FR a na konci FR5. * Výrazne odlišné od FR1 (p <0.05). # Výrazne sa líši od WT (p <0.05).

škrečky

Na analýzu dát boli použité jednotlivé prostriedky R, NR a I. Prednostné skóre pre každé zviera sa určilo odčítaním stredného neaktívneho nosného poke (I) od stredného aktívneho nosného poke (R + NR-I). Priemerné skóre preferencií sa analyzovalo pomocou jednej vzorky t-test proti 0 (tj žiadne preferencie) pre každú skupinu. Okrem toho bol počet prijatých posilnení spriemerovaný pre každé zviera. Priemerné zosilnenie získané pre každú skupinu liečiva sa porovnalo so strednou hodnotou zosilnenia BSA kontrol s nezávislými vzorkami 2 t-test. Zvieratá, ktoré nedokázali dokončiť minimálne 5 relácie, boli vylúčené z analýzy (1 každý z DHT-Hemis a DHT-Hemis-BSA skupín).

Všetky štatistické analýzy sa uskutočnili použitím SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Pre všetky analýzy, p <0.05 sa považovalo za štatisticky významné. Údaje sú uvedené ako priemer ± SEM za 4 h relácie.

výsledky

Krysy WT a Tfm si sami podávajú DHT

Operátor reaguje

Obr. 1 ilustruje strednú preferenciu aktívneho bodnutia nosom (R + RN - I) v každej FR pre skupiny DHT a Veh. Potkany, ktoré si DHT podávali samy, preukázali väčšiu preferenciu aktívneho bodania nosom (73.1 ± 7.6 resp. 4 h) v porovnaní s kontrolami s vehikulom (29.8 ± 3.5 resp. 4 h; F_1,145 = 31.77, p <0.001). Došlo tiež k hlavnému účinku harmonogramu FR (F_4,145 = 4.25, p <0.01), interakcia genotyp-liek (F_1,145 = 5.27, p = 0.02) a interakcia liek-FR (F_4,145 = 2.60, p = 0.02). Neexistoval žiadny hlavný účinok genotypu a iné interakcie neboli významné.

Obrázok 1

Priemerná preferencia (aktívny - neaktívny nos-pokes) pre potkany, ktorí si sami podávali DHT (top) a vehikulum (dole). Zobrazia sa priemery ± SEM pre každý FR spolu s celkovým priemerom ± SEM (vpravo). * Výrazne odlišné od FR1 (p < (viac ...)

Post-hoc testy ukázali, že samovoľné podávanie DHT u potkanov vykazovalo významne väčšiu preferenciu ako FR schéma (F_4,73 = 4.18, p <0.01), čím sa zvyšuje preferencia z FR1 (33.4 ± 4.4 resp. 4 h) na FR4 (110.8 ± 26.7 resp. 4 h) a FR5 (106.4 ± 18.9 resp. 4 h). V tejto skupine nebol pozorovaný žiadny účinok genotypu (schéma genotypu-FR: F_4,73 = 0.13, ns; genotyp: F_1,73 = 0.86, ns).

Na rozdiel od toho samoobslužné vehikulum potkanov nevykazovalo žiadnu zmenu v porovnaní s plánom FR (F_4,72 = 0.31, ns) a žiadna interakcia genotyp-FR (F_4,72 = 0.12, ns). Na rozdiel od DHT, Tfm potkany vykazovali v tejto skupine väčšie preferencie ako WT (42.3 ± 5.3 a 19.1 ± 4.0 resps / 4h;_4,72 = 11.81, p <0.01).

infúzie

Priemerný počet infúzií DHT a Veh prijatých v každom FR je znázornený na obr Obr. 2, Celkovo sa potkanom podalo viac infúzií, keď sa im umožnilo podávať DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) vs. vehikulum (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F)._1,145 = 14.70, p <0.001). Došlo tiež k hlavnému účinku harmonogramu FR (F_1,145 = 3.32, p = 0.01) a interakcie genotyp-liek (F_1,145 = 6.41, p = 0.01). Všetky ostatné interakcie a hlavné účinky neboli významné.

Obrázok 2

Priemerné infúzie, ktoré dostávali potkany, ktoré si sami podávali DHT (hore) a vehikulum (dno). Zobrazia sa priemery ± SEM pre každý FR spolu s celkovým priemerom ± SEM (vpravo). * Výrazne odlišné od DHT FR1 (p <0.05). # Výrazne (viac ...)

Priemerný denný príjem DHT vo všetkých FR schémach bol podobný u potkanov Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) a WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h). V obidvoch skupinách zostal príjem liečiva konštantný, keď sa zvýšila FR schéma (F_4,73 = 0.54, ns). Počas FR1, Tfm a WT samci podávali DHT v 24.5 ± 2.3 μg / 4h a 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Pod rozpisom FR5 bol priemerný režim DHT na podanie XHTML ± 18.3 μg / 4.5h pre Tfm a 4 ± 23.9 μg / 5.9h pre potkany WT. Táto skupina nevykazovala žiadne genotypové alebo genotypové-FR rozvrhy založené na pláne (F_1,73 = 1.17, ns; F_4,73 = 0.34, ns).

Naproti tomu u potkanov Tfm a WT sa počet infúzií vehikula výrazne znížil, keď sa zvýšila požiadavka FR (F_4,72 = 4.73, p <0.01). Trochu prekvapivo si potkany Tfm samy podali približne dvakrát toľko vehikula (20.7 ± 2.4 μl / 4 h) ako potkany WT (10.7 ± 1.4 μl / 4 h, F_1,72 = 7.77, p <0.01). U potkanov Tfm pri FR1 počet infúzií vehikulom (39.9 ± 13.2 μl / 4 h) presiahol počet infúzií DHT (24.5 ± 2.3 μl / 4 h). Na konci experimentu však samopodanie vehikula pokleslo na 10.3 ± 2.4 μl / 4 h. Podobne si krysy WT samy podávali 18.6 ± 4.1 μl / 4 h vehikula pri FR1, ktoré kleslo na 6.6 ± 1.8 μl / 4 h pri FR5.

Priemerná telesná hmotnosť na začiatku každého FR plánu a počet zvierat v každom stave je ukázaný v Tabuľka 1, Potkany WT boli významne ťažšie ako potkany Tfm (F_1,174 = 144.62, p <0.001) a všetky skupiny časom pribrali (F_5,174 = 5.59, p <0.001). Nezistil sa žiadny vplyv stavu liečiva (DHT vs Veh) na telesnú hmotnosť (F._{1, 174} = 0.31, ns) alebo akákoľvek interakcia. Príjem DHT upravený na telesnú hmotnosť bol podobný u oboch genotypov u oboch pacientov, FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg) a FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).

Sýrski škrečkovia sami podávali DHT konjugované s BSA

Operátor reaguje

Škrečky samy podávali DHT a DHT konjugované s BSA, ale nie s BSA samotným. Obrázok 3a ukazuje strednú preferenciu (aktívny - neaktívny výbežok do nosa) pre DHT, BSA, DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. V súlade s našimi predchádzajúcimi štúdiami si škrečky počas vlastného podávania DHT vytvorili preferenciu aktívneho bodania nosom (t₇ = 4.34, p <0.01), ale nepreukázali žiadnu preferenciu pri samostatnom podávaní BSA (t₈ = 1.03, ns). Podobne, škrečkovia uprednostňovali aktívny nosový poke s DHT-CMO-BSA (t₉ = 2.71, p = 0.02) a DHT-Hemis-BSA (t₇ = 2.92, p = 0.02). S DHT pripojeným k samotným linkerom podávali škrečky samo-podávanú DHT-CMO (t₈ = 3.91, p <0.01), ale nepreukázali významnú preferenciu pri samostatnom podávaní DHT-Hemis (t₁₀ = 1.87, p = 0.09). Pri DHT-Hemis boli reakcie na aktívny nos-poke (40.5 ± 10.3 resp. 4h) podobné ako u DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp. 4h), ale títo muži tiež vykazovali zvýšené reakcie na inaktívny nos. -poke (28.7 ± 6.6 resp. 4h) v porovnaní s hodnotami pre DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp. 4h).

Obrázok 3

3a: Priemerná preferencia (aktívne - neaktívne nosové výhonky) pre škrečkov, ktorí si sami podávali BSA (n = 9), DHT (n = 8), DHT-CMO-BSA (DCB, n = 10) a DHT-Hemis-BSA ( DHB, n = 8), DHT-CMO (DC, n = 8) a DHT-hemis (DH, n = 11). * Výrazne odlišné od (viac ...)

infúzie

Počet infúzií prijatých pre každú skupinu je uvedený v Obr. 3b, Škrečky dostávali významne viac infúzií DHT ako BSA (t₁₅ = 3.04, p = 0.01). Podobne, škrečkovia dostali viac infúzií, keď sa im umožnilo podávať si DHT-Hemis-BSA (t₁₅ = 2.72, p = 0.02) alebo DHT-CMO (t₁₆ = 2.70, p = 0.02) v porovnaní s BSA. Počet infúzií prijatých pre skupiny DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) a DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) boli podobné tým, ktoré podávali DHT, DHT-Hemis-BSA a DHT- CMO. Avšak škrečky nedostávali významne viac DHT-CMO-BSA (t₁₇ = 1.96, p = 0.07) alebo DHT-Hemis (t₁₈ = 1.91, p = 0.07) v porovnaní s BSA.

Predávkovať

Pred ukončením všetkých testovacích relácií 55 zomrelo 11 škrečkov 15. Úmrtia spôsobené predávkovaním androgénom počas samo-podávania testosterónu boli už skôr opísané (Peters a drevo, 2005). V tejto štúdii uhynul 2 u samcov 8 (25%) počas samodávok DHT, podobne ako u 24% hlásených pri predávkovaní testosterónom (Peters a drevo, 2005). Samopodávanie DHT-CMO a DHT-Hemis bolo spojené s najvyššími stratami (každý 3 8 na skupinu, 38%), zatiaľ čo u samcov, ktorým sa podávala BSA (1% 9, 11%) alebo DHT, bolo zaznamenaných len málo úmrtí. -Hemis-BSA (0 8). Rovnako ako pri predávkovaní testosterónom, ani jeden z škrečkov v tejto štúdii zomrel počas samopodania. Namiesto toho uhynuli škrečky o niekoľko hodín neskôr vo svojich domácich klietkach so silnou lokomotorickou a respiračnou depresiou.

Predávkovanie testosterónom úzko súvisí s príjmom testosterónu, najmä maximálnym príjmom na sedenie (Peters a drevo, 2005). Obr. 4 porovnáva skóre preferencií, počet prijatých posilnení a maximálny príjem pre škrečkov, ktorí dokončili všetky testovacie relácie 15, a tých, ktorí to neurobili. Obe skupiny vykazovali významnú preferenciu pre aktívny nos-poke (p <0.05). Avšak preferencia bola významne vyššia u škrečkov, ktoré uhynuli počas samopodania (25.7 ± 5.2 resp. 4 h), v porovnaní s tými, ktoré prežili (9.5 ± 2.0 resp. 4 h, t₅₃ = 3.42, p <0.01). Škrečky, ktoré nedokázali absolvovať 15 sedení, dostali viac ako dvakrát toľko infúzií na jedno sedenie (31.2 ± 5.0 inf / 4 h) ako tí, ktorí absolvovali všetky seansy (14.8 ± 1.1 inf / 4 h, t₅₃ = 5.05, p <0.001). Navyše u škrečkov, ktoré uhynuli počas štúdie, bol maximálny príjem na sedenie signifikantne vyšší (77.0 ± 9.8 inf / 4 h) ako u samcov, ktorí prežili (36.1 ± 2.9 inf / 4 h, t₅₃ = 5.41, p <0.001).

Obrázok 4

Priemerné skóre preferencie (vľavo), prijaté infúzie (v strede) a maximálny príjem na sedenie (vpravo) pre škrečky, ktoré absolvovali všetkých 15 sedení (C15, n = 44), a tých, ktoré nie (<15, n = 11). Skupinové priemery ± SEM sú zobrazené ako nitkový kríž. (viac ...)

Diskusia

Samotné podávanie androgénu môže byť sprostredkované membránovými, ale nie jadrovými receptormi androgénov

Súčasná štúdia ukazuje, že klasické jadrové AR nie sú nevyhnutné pre androgénnu samosprávu. U potkanov Tfm aj WT sa vyvinula preferencia aktívneho nosného poke počas samopodania DHT. Okrem toho boli schopní reagovať na vzostupný FR plán zvýšením aktívnych nosov, čím sa udržala stabilná úroveň príjmu liečiva bez ohľadu na harmonogram FR. Na rozdiel od toho, potkany, ktoré dostávali vehikulum, neodpovedali na zmeny v FR pláne. Ich aktívny výtok z nosa sa významne nezvýšil v reakcii na zmeny v pláne FR a dostali menej infúzií, keďže sa zvýšila požiadavka na odpoveď. Pretože viazanie ligandu na „klasický“ nukleárny receptor androgénu je v mutantoch Tfm ohrozené, toto podporuje našu hypotézu, že zosilnenie androgénu je sprostredkované prostredníctvom alternatívnych ciest.

Je nepravdepodobné, že by neočakávane vysoká odpoveď na vehikulum Tfm potkanmi bola spôsobená samotným vehikulom. Podobné javy sme pozorovali v oddelenej skupine potkanov Tfm, ktorí nedostávali žiadne infúzie (údaje nie sú uvedené). Namiesto toho môže súvisieť s feminizovanými vlastnosťami správania u samcov Tfm. Zvýšené krvácanie z nosa Tfm potkanov môže byť analogické k vyšším experimentálnym poklesom hlavy pozorovaným u samíc potkanov (Brown a Nemes, 2008). Alternatívne je známe, že Tfm potkany a myši vykazujú zvýšené správanie podobné úzkosti (Zuloaga a kol., 2006, Zuloaga a kol., 2008a). Možno, že sedatívne / anxiolytické účinky DHT (Agren a kol., 1999, Arnedo a kol., 2000, Frye a Seliga, 2001, Berbos a kol., 2002, Peters a drevo, 2005) otupili chovanie podobné úzkosti, keď Tfm potkany, ktorým sa podával DHT.

Samostatné podávanie konjugátov DHT-BSA u samcov škrečkov navyše poskytuje dôkaz, že androgény môžu pôsobiť na membránu neurónovej plazmy, aby zosilnili účinok. Škrečky vykazovali významnú preferenciu obidvoch DHT-BSA konjugátov. Dávky, ktoré si sami podávajú, sú v súlade s našimi predchádzajúcimi štúdiami T, DHT a bežne zneužívaných steroidov (Ballard a Wood, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). Na rozdiel od toho škrečky nepreukázali žiadnu preferenciu iba pre BSA. Údaje o úmrtnosti a príjme liekov ukazujú, že DHT a jeho deriváty môžu byť smrtiace, čím sa rozširujú naše predchádzajúce údaje o predávkovaní T (Peters a drevo, 2005).

Súčasná štúdia odhaľuje druhovo špecifický model reagovania operátora. Škrečky uprednostňovali aktívne nosné vrecko pri samopravujúcom vehikule, ako sa už preukázalo (Johnson a Wood, 2001, Drevo, 2002, DiMeo a Wood, 2004, Triemstra a Wood, 2004, Wood a kol., 2004, Ballard a Wood, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). U potkanov sa však jasne uprednostňovalo aktívne nosné pletenie bez ohľadu na prijaté liečivo. Podobný trend sme pozorovali v našej predchádzajúcej štúdii IV intravenózneho podávania T u potkanov, hoci to nebolo štatisticky významné (Wood a kol., 2004). Na základe takýchto druhovo špecifických behaviorálnych rozdielov pri samoaplikácii sa musí pri porovnávaní údajov o správaní od potkanov a škrečkov postupovať opatrne.

Pri interpretácii súčasnej štúdie je potrebné vziať do úvahy niekoľko výhrad. Po prvé, jadrové AR s významne zníženou väzbou ligandu sú stále prítomné u potkanov Tfm (Yarbrough a kol., 1990), na rozdiel od myší Tfm (He a kol., 1991). Je možné, že tieto zmutované nukleárne AR sú dostatočné na sprostredkovanie účinkov androgénov pri suprafyziologických dávkach. Po druhé, konjugáty DHT-BSA sa môžu degradovať in vivo, čo vedie k bezplatnému DHT. Nezdalo sa však, že by to bol významný problém in vitro (Lieberherr a Grosse, 1994, Gatson a kol., 2006), stupeň a časový priebeh degradácie DHT-BSA in vivo v mozgu je v súčasnosti neznámy. Konečne DHT-BSA konjugáty nemusia významne prenikať do mozgového tkaniva. DHT-BSA je významne väčší ako DHT, takže účinky DHT-BSA pozorované v súčasnej štúdii budú pravdepodobne sprostredkované na miestach v blízkosti komôr.

Napriek týmto výzvam, tieto dva rôzne prístupy priniesli konzistentné výsledky, ktoré argumentujú silne proti potrebe jadrovej AR pri posilňovaní androgénov. Okrem toho samo-podávanie BSA konjugátov naznačuje, že androgény môžu pôsobiť na plazmatickú membránu pri zosilňovaní androgénov. Pokiaľ je nám známe, táto štúdia poskytuje prvú in vivo dôkaz behaviorálnych účinkov androgénov na plazmatickú membránu.

Androgény majú na odmenu rýchle jadrové účinky nezávislé od AR

Niekoľko ďalších štúdií týkajúcich sa odmeňovania androgénov ukázalo výsledky konzistentné s negenomickými účinkami alebo účinkami na plazmovú membránu. CPP sa vyvíja v priebehu 30 min po systémovej injekcii T (Alexander et al., 1994), časový priebeh konzistentný s akútnymi negenómovými účinkami T. CPP sa môže tiež indukovať infúziami T alebo jeho metabolitu v rámci Acb (Packard a kol., 1997, Frye a kol., 2002), hoci Acb má málo genomických AR. Ďalej VTA exprimuje Fos v reakcii na T-infúziu ICV (Dimeo a Wood, 2006a), napriek tomu, že v nej chýba výrazný klasický výraz AR. Súčasná štúdia neposkytuje informácie týkajúce sa miesta pôsobenia v mozgu. To však naznačuje, že samotný relatívny nedostatok jadrovej AR nie je dostatočný dôvod na vylúčenie štruktúr, ako sú Acb a VTA, z potenciálnych miest, ktoré môžu sprostredkovať androgénne účinky.

Rýchle účinky steroidov na plazmovú membránu pri dorzálnom a ventrálnom striatu nie sú obmedzené na androgény. Je známe, že progestíny indukujú CPP, pravdepodobne prostredníctvom receptorov kyseliny gama-aminomaslovej (GABA) v Acb (Frye, 2007). Estrogény tiež vykazujú rýchle účinky sprostredkované membránovými receptormi na dorzálne striatum (Mermelstein a kol., 1996, Becker a Rudick, 1999). Receptor spojený s membránou bol už izolovaný pre progestíny (Zhu a kol., 2003) a hromadia sa dôkazy pre estrogény na bunkových povrchových receptoroch (prehľad v Vasudevan a Pfaff, 2007) a androgény (prehodnotené v Thomas a kol., 2006). Kým estrogény tiež posilňujú (DiMeo a Wood, 2006b), zosilňujúce účinky T sa zdajú byť prevažne androgénne. Škrečky si samy spravujú nearomatizovateľné androgény, ako je drostanolón a DHT (Ballard a Wood, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). Okrem toho môže anti-androgénny flutamid blokovať T-podávanie (Peters a drevo, 2004). Aj keď sa to môže zdať v rozpore s úlohou membránového AR uvádzanou v tejto štúdii, bolo hlásené, že aj flutamid blokuje aktiváciu membránového AR (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004).

Vlastnosti membránových androgénnych receptorov

Historicky sa účinky steroidov vrátane androgénov považovali za transdukované procesmi sprostredkovanými jadrovými receptormi. Avšak správy o rýchlych androgénnych účinkoch, pravdepodobne sprostredkovaných membránovými receptormi, sú dostupné už niekoľko desaťročí. Napríklad v strednej predoptickej oblasti môžu androgény počas niekoľkých sekúnd zmeniť vypaľovanie neurónov (Yamada, 1979) na minúty (Pfaff a Pfaffmann, 1969). Ďalej Orsini a kolegovia (Orsini, 1985, Orsini a kol., 1985) ukázali rýchlu modifikáciu frekvencie vypaľovania neurónov pomocou androgénov v laterálnom hypotalame (LHA). Tento účinok androgénov v LHA môže mať pre túto štúdiu osobitný význam, pretože je známe, že LHA sa podieľa na obvodoch odmeňovania (Olds a Milner, 1954) a LHA orexín / hypokretín je regulovaný gonadálnymi steroidmi (Muschamp a kol., 2007).

Typy buniek s možnými membránovými AR zahŕňajú gliálne (Gatson a kol., 2006), gonadal (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004) a imunitné bunky (Benten a kol., 1999, Guo a spol., 2002), myocyty (Estrada a kol., 2003) a osteoblastov (Lieberherr a Grosse, 1994). Napriek tomu, že molekulová identita ešte nebola stanovená, medzi kandidátov na membránovú AR patria membránové receptory so známymi väzbovými miestami pre steroidy, ako je napríklad GABA-A (uvedené v publikácii Lambert a kol., 2003) a NR2 podjednotky receptorov kyseliny N-metyl-D-asparágovej (Malayev a kol., 2002). Alternatívne Thomas a kolegovia (2004) uviedli dôkazy o novom receptore spojenom s G-proteínom ako membránovej AR. Okrem toho účinky androgénov, ktoré nesúvisia so špecifickým receptorom, nemôžu byť v súčasnej štúdii vylúčené.

nedávny in vitro štúdie naznačujú, že existuje viacero membránových AR alebo viac ako jedno väzbové miesto na jednom receptore, ako sa navrhuje pre membránový progesterónový receptor (Ramirez a kol., 1996). V mnohých typoch buniek sa zdá, že membránový AR je membránový receptor spojený s Gq / o (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Guo a spol., 2002, Estrada a kol., 2003). Avšak charakteristiky viazania steroidov a citlivosť predpokladanej membrány AR na anti-androgény sa značne líšia v závislosti od typu bunky. Napríklad antiandrogény môžu blokovať účinky DHT na ovariálne bunky croakerov (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004), zatiaľ čo nie sú účinné v iných typoch buniek (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 2004, Gatson a kol., 2006), alebo dokonca môžu vykazovať účinky podobné agonistom v hipokampálnych bunkách (Pike, 2001, Nguyen a kol., 2007) a niekoľko rakovinových bunkových línií (Peterziel a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Evangelou a kol., 2000, Papakonstanti a kol., 2003). Okrem toho boli hlásené rôzne T-väzbové charakteristiky pre rôzne orgány u rýb (\ tBraun a Thomas, 2004).

Naše skúsenosti s bežne zneužívaným AAS naznačujú, že hlavná modifikácia (modifikácie) na A-kruhu (pri C2 a / alebo C3) a pri C17 majú tendenciu interferovať so samopodaním (Ballard a Wood, 2005). Napríklad stanozolol, ktorý má významnú modifikáciu v C2 a C3, ako aj metylovú skupinu naviazanú na C17, nie je podávaný samostatne. V tejto štúdii si škrečkovia sami podávali ako BSA konjugované na C3 (DHT-CMO-BSA), tak na C17 (DHT-Hemis-BSA). Na objasnenie vlastností androgénov podávaných samostatne sa vyžaduje ďalší výskum.

Klinický význam

AAS, najmä T, sú zďaleka najbežnejšími činidlami na zvýšenie výkonnosti, ktoré používajú atléti, čo predstavuje takmer polovicu pozitívnych dopingových testov (Svetová antidopingová agentúra, 2006). Vzhľadom na takéto rozsiahle využívanie má zneužívanie AAS rozsiahle zdravotné následky. Vedľajšie účinky AAS na srdcové a pečeňové účinky sú dobre známe (Leshner, 2000). Predpokladá sa, že tieto a anabolické účinky AAS sú sprostredkované jadrovou AR. Možné účinky androgénov nezávislé od jadra však naznačujú, že vplyv AAS môže presahovať rámec štruktúr s jadrovou AR expresiou.

Pokiaľ ide o podobnosť s inými drogami zneužívania, AAS vyvolávajú rôzne účinky a majú rôzne mechanizmy účinku od stimulancií. Na rozdiel od stimulancií (Graybiel a kol., 1990), AAS indukuje aktiváciu c-Fos iba vo VTA a nie v Acb (Dimeo a Wood, 2006a). Okrem toho AAS zmierňuje uvoľňovanie Acb DA vyvolané stimulantom (Birgner a kol., 2006a akútne inhibujú uvoľňovanie DA (Triemstra a kol., 2008). Behaviorálne AAS nespôsobujú lokomotorickú aktivačnú charakteristiku stimulancií (Peters a drevo, 2005).

Namiesto toho sa behaviorálne reakcie na akútne AAS podobajú reakciám opioidov alebo benzodiazepínov, ktoré môžu prípadne vyvolať aditívne účinky, keď sa užívajú spoločne. Akútna expozícia AAS znižuje autonómne funkcie, vrátane respirácie a telesnej teploty (Peters a drevo, 2005). Autonómna depresia indukovaná AAS pripomína príznaky predávkovania opioidmi a je blokovaná opioidným antagonistom naltrexonom (Peters a drevo, 2005). Okrem toho nandrolon, bežne používaný AAS, potencuje hypotermické účinky morfínu a exacerbuje symptómy abstinenčného syndrómu vyzrážaného naloxónom (Celerier a kol., 2003). Okrem toho je dobre známe, že akútne AAS sú sedatívne / anxiolytické (Agren a kol., 1999, Arnedo a kol., 2000, Frye a Seliga, 2001, Berbos a kol., 2002, Peters a drevo, 2005), pravdepodobne sprostredkované ich priamymi účinkami na receptory GABA-A (\ tMasonis a McCarthy, 1995, Masonis a McCarthy, 1996). Zvýšená spotreba etanolu u potkanov chronicky liečených AAS môže byť tiež odrazom zmenenej GABAergnej funkcie (Johansson a kol., 2000).

Naše zistenia o predávkovaní vyvolávajú ďalšie zdravotné obavy. V súčasnosti je klasifikácia AAS ako kontrolných látok založená na ich anabolických vlastnostiach (Zákon o kontrolovaných látkach, 1991). Súčasná štúdia však ukazuje, že anabolická účinnosť AAS nemusí nevyhnutne zodpovedať ich posilňujúcim vlastnostiam a rizikám predávkovania. Okrem DHT-BSA konjugátov, DHT-CMO použitá v tejto štúdii nie je kontrolovanou látkou, aj keď jej posilňujúce vlastnosti a mortalita z predávkovania sa javia byť dosť podobné DHT a T (Peters a drevo, 2005). Vzorec predávkovania sa tiež podobal vzoru hlásenému pre T (Peters a drevo, 2005), kde vysoký príjem má za následok mortalitu 24 až 48 hod. Vo svetle týchto zistení môžu kritériá používané na plánovanie steroidov ako kontrolovanej látky vyžadovať okrem svojich anabolických účinkov aj revízie, aby sa zohľadnila ich zodpovednosť za zneužívanie a toxicita.

Výsledky súčasnej štúdie naznačujú, že jadrová AR, jediná AR, ktorá je doteraz izolovaná, nie je nevyhnutná pre posilnenie androgénu. Namiesto toho výsledky naznačujú, že na plazmatickej membráne je transdukovaná androgénová výstuž. Preto je potrebné ďalšie skúmanie identity predpokladanej membránovej AR, ich funkčných charakteristík a anatomickej distribúcie, aby sa objasnil základný mechanizmus zneužívania AAS a jeho klinické dôsledky.

poznámky pod čiarou

Zrieknutie sa zodpovednosti vydavateľa: Toto je súbor PDF s neupraveným rukopisom, ktorý bol prijatý na uverejnenie. Ako službu pre našich zákazníkov poskytujeme túto skoršiu verziu rukopisu. Rukopis sa podrobí kopírovaniu, sádzaniu a preskúmaniu výsledného dôkazu skôr, ako sa uverejní vo svojej konečnej podobe. Upozorňujeme, že počas výrobného procesu môžu byť zistené chyby, ktoré by mohli mať vplyv na obsah, a všetky právne zrieknutia sa zodpovednosti, ktoré sa vzťahujú na časopis.

Referencie

Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Behaviorálne anxiolytické účinky liečby nízkymi dávkami anabolického androgénneho steroidu u potkanov. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosterón odmeňuje afektívne vlastnosti u samcov potkanov: dôsledky pre biologický základ sexuálnej motivácie. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, González-Bono E. Odmeňujúce vlastnosti testosterónu u intaktných samcov myší: pilotná štúdia. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikulárne self-podávanie bežne zneužívaných anabolických androgénnych steroidov u mužských škrečkov (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolone, oxymetholone a stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
Becker JB, Rudick CN. Rýchle účinky estrogénu alebo progesterónu na zvýšenie striatálneho dopamínu vyvolaného amfetamínom sú zosilnené estrogénovým primingom: štúdiou mikrodialýzy. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Rýchle účinky androgénov v makrofágoch. Steroidy. 2004;69: 585-590. [PubMed]
Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Signalizácia testosterónu cez internalizovateľné povrchové receptory v makrofágoch bez androgénneho receptora. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [Článok bez PMC] [PubMed]
Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akútne behaviorálne účinky anabolických steroidov: úzkosť, stereotypy a pohybová aktivita. Horm Behav. 2002;41: 457.
Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Zmenené extracelulárne hladiny DOPAC a HVA v krysom jadre accumbens v reakcii na sub-chronické nandrolonové podanie a následnú stimuláciu amfetamínom. Neurosci Lett 2006
Braun AM, Thomas P. Androgens inhibujú syntézu estradiol-17beta vo vaječníkoch atlantických chvostovníkov (Micropogonias undulatus) nongenomickým mechanizmom iniciovaným na povrchu bunky. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
Braun AM, Thomas P. Biochemická charakterizácia membránového androgénneho receptora vo vaječníku atlantického croakera (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
Brower KJ. Anabolické steroidy a závislosť. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symptómy a korelácia anabolicko-androgénnej závislosti od steroidov. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
Brown GR, Nemes C. Prieskumné správanie sa potkanov v prístroji s dierou: je namáčaním platnou mierou neofílie? Behav procesy. 2008;78: 442-448. [Článok bez PMC] [PubMed]
Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Účinky nandrolonu na akútne morfínové reakcie, toleranciu a závislosť u myší. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
Choi PY, pápež HG., Jr Násilie voči ženám a nezákonné užívanie androgénnych anabolických steroidov. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
Hlava 21, kapitola 13 - Prevencia a kontrola zneužívania drog Zákona o kontrolovaných látkach. 1991
DiMeo AN, Wood RI. Cirkulujúce androgény zvyšujú citlivosť na samopodávanie testosterónu u samcov škrečkov. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
Dimeo AN, drevo RI. ICV testosterón indukuje Fos v mozgu mužského sýrskeho škrečka. Psychoneuroendocrinology. 2006;31: 237-249. [PubMed]
DiMeo AN, Wood RI. Samostatné podávanie estrogénu a dihydrotestosterónu u samcov škrečkov. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosterón stimuluje intracelulárne uvoľňovanie vápnika a mitogénom aktivované proteínkinázy prostredníctvom receptora spojeného s G proteínom v bunkách kostrového svalstva. Endocrinology. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Down-regulácia transformácie beta receptorov rastového faktora androgénmi v bunkách rakoviny vaječníkov. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekulárna metóda na klasifikáciu genotypov získaných v chovnej kolónii z testikulárnych feminizovaných potkanov (Tfm). Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
Frye CA. Progestíny ovplyvňujú motiváciu, odmenu, kondicionovanie, stres a / alebo reakciu na drogy zneužívania. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Jadro accumbens ako miesto účinku na odmeňovanie vlastností testosterónu a jeho metabolitov so zníženým obsahom 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
Frye CA, Seliga AM. Testosterón zvyšuje analgéziu, anxiolýzu a kognitívnu výkonnosť samcov potkanov. Kognitívna, afektívna a behaviorálna neuroveda. 2001;1: 371-381.
Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosterón diferencovane moduluje mitogénom aktivovanú proteínkinázu a cesty fosfoinozitidu 3-kinázy / Akt cez jadrový a nový membránový receptor androgénu v bunkách C6. Endocrinology. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamín a kokaín indukujú špecifickú aktiváciu c-fos génu v striosom-matricových kompartmentoch a limbické delenie striata. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [Článok bez PMC] [PubMed]
Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomická testosterónová vápniková signalizácia. Genotropné účinky v makrofágoch bez androgénneho receptora. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
On WW, Kumar MV, Tindall DJ. Mutácia posunu rámca v géne receptora androgénu spôsobuje úplnú necitlivosť androgénu u testikulárne-feminizovanej myši. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [Článok bez PMC] [PubMed]
Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabolické androgénne steroidy ovplyvňujú príjem alkoholu, obranné správanie a mozgové opioidné peptidy u potkanov. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
Johnson LR, Wood RI. Perorálne samo-podávanie testosterónu u samcov škrečka. Neuroendokrinologie. 2001;73: 285-292. [PubMed]
Kouri EM, Lukas SE, pápež HG, Jr, Oliva PS. Zvýšená agresívna odpoveď u mužských dobrovoľníkov po podaní postupne sa zvyšujúcich dávok testosterónu cypionátu. Drogový alkohol závisí. 1995;40: 73-79. [PubMed]
Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidná modulácia receptorov GABAA. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Zneužívanie anabolických steroidov. 2000: 1-8.
Lieberherr M, Grosse B. Androgény zvyšujú intracelulárnu koncentráciu vápnika a tvorbu inozitolu 1,4,5-trisfosfátu a diacylglycerolu prostredníctvom G-proteínu citlivého na pertusový toxín. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Účinky androgénov na hipokampálne počty chrbtice synapse CA1 sú zachované u samcov potkanov Tfm s defektnými androgénnymi receptormi. Endocrinology. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibícia NMDA reakcie pregnenolón sulfátom odhaľuje subtyp selektívnu moduláciu NMDA receptorov sulfátovými steroidmi. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [Článok bez PMC] [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Priame účinky anabolických / androgénnych steroidov, stanozololu a 17 alfa-metyltestosterónu na väzbu benzodiazepínu na. receptor a) kyseliny gama-aminomaslovej. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Účinky androgénneho / anabolického steroidného stanozololu na funkciu receptora GABAA: GABA-stimulovaný 36Cl-influx a väzba [35S] TBPS. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol znižuje vápnikové prúdy u neostriálnych neurónov potkanov cez membránový receptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
Morin LP, Wood RI. Stereotaxický atlas mozgu zlatého škrečka. Akademická tlač; San Diego: 2001.
Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Úloha hypokretínu (orexínu) pri mužskom sexuálnom správaní. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
Rada NR, editor. NationalResearchCouncil. Príručka pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat. Národná rada pre výskum; Washington, DC: 1996.
Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid a cyproterón acetát vykazujú agonistické účinky: indukcia neuroprotekcie závislej od androgénneho receptora. Endocrinology. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
NIH. Princíp starostlivosti o laboratórne zvieratá. Národný zdravotný ústav; Bethesda, Maryland: 1985.
Olds J, Milner PM. Pozitívne zosilnenie produkované elektrickou stimuláciou septálnej oblasti a iných oblastí mozgu potkana. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
Orsini JC. Priame účinky androgénov na laterálnu hypotalamickú neuronálnu aktivitu u samcov potkanov: II. Štúdia ejekčného tlaku. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Priame účinky androgénov na laterálnu hypotalamickú neuronálnu aktivitu u samcov potkanov: I. Mikrooforetická štúdia. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Odmeňovanie afektívnych vlastností intra-nucleus accumbens injekcií testosterónu. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Expresia preferencie miesta s testosterónom je blokovaná periférnou injekciou alfa-flupentixolu alebo intra-akumulovanými injekciami. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Rýchla, nenomenomická signálna dráha reguluje reorganizáciu aktínu indukovanú aktiváciou receptorov membránového testosterónu. Mol Endokrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
Paxinos G., Watson C. Mozog potkana: v sterilných súradniciach. 4th. Akademická tlač; New York: 1998.
Peters KD, Wood RI. Anabolicko-androgénna závislosť od steroidov zahŕňa androgénové a opioidné receptory. Zborník 34th Výročného stretnutia Spoločnosti pre neurovedy; San Diego, CA. 2004.
Peters KD, Wood RI. Androgénna závislosť u škrečkov: predávkovanie, tolerancia a potenciálne opioidergické mechanizmy. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Rýchla signalizácia receptorom androgénu v bunkách rakoviny prostaty. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
Pfaff DW, Pfaffmann C. Čuchové a hormonálne vplyvy na bazálny predný mozog samca potkana. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
Pike CJ. Testosterón zmierňuje toxicitu beta-amyloidu v kultivovaných hipokampálnych neurónoch. Brain Research. 2001;919: 160-165. [PubMed]
Pápež HG, Jr, Katz DL. Psychické a medicínske účinky užívania anabolických a androgénnych steroidov. Kontrolovaná štúdia športovcov 160. Arch. Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membránové receptory pre estrogén, progesterón a testosterón v mozgu potkana: fantázia alebo realita. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
Simerly RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribúcia buniek obsahujúcich androgén a estrogén mRNA v mozgu potkana: In situ hybridizačná štúdia. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Diferenciálne účinky konjugátov estradiol a estradiol-BSA. Endocrinology. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, receptory viazané na estrogén a androgén G-proteín v gonadách rýb. Steroidy. 2006;71: 310-316. [PubMed]
Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosterón a nucleus accumbens dopamín u mužského syrského škrečka. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [Článok bez PMC] [PubMed]
Triemstra JL, Wood RI. Samotné podávanie testosterónu u samíc škrečkov. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
Vasudevan N, Pfaff DW. Činnosti estrogénov vyvolané membránami v neuroendokrinológii: objavujúce sa princípy. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
Drevo RI. Orálne podávanie testosterónu u samcov škrečkov: odozva na dávku, dobrovoľné cvičenie a individuálne rozdiely. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
Drevo RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Testosterónová výstuž: intravenózne a intracerebroventrikulárne samo-podávanie samcov potkanov a škrečkov. Psychofarmakológia (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
Drevo RI, Newman SW. Imunoreaktivita receptora androgénu v mozgu samca a samice sýrskeho škrečka. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
WorldAnti-DopingAgency. Nežiaduce analytické zistenia hlásené akreditovanými laboratóriami. Svetová antidopingová agentúra; Montreal, Kanada: 2006.
Yamada Y. Účinky testosterónu na jednotkovú aktivitu u hypotalamu potkana a septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, francúzsky FS, Wilson EM. Mutácia jedinej bázy v géne receptora androgénu spôsobuje necitlivosť androgénu u testikulárneho feminizovaného potkana. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Použitie anabolických androgénnych steroidov v Spojených štátoch. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgén stimuluje mitogénom aktivovanú proteínkinázu v ľudských bunkách rakoviny prsníka. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
Zhu Y, ryžové CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Klonovanie, expresia a charakterizácia membránového progestínového receptora a dôkaz, že je sprostredkovateľom meiotického dozrievania rybích oocytov. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [Článok bez PMC] [PubMed]
Zuloaga DG, Morris JA, Jordánsko CL, Breedlove SM. Myši s mutáciou testikulárnej feminizácie demonštrujú úlohu androgénových receptorov pri regulácii správania súvisiaceho s úzkosťou a osi hypotalamus-hypofýza-nadobličky. Horm Behav. 2008;54: 758-766. [PubMed]
Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Úloha androgénnych receptorov v maskulinizácii mozgu a správania: čo sme sa dozvedeli z mutácie feminizácie semenníkov. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [Článok bez PMC] [PubMed]
Zuloaga DZ, Jordánsko CL, Breedlove SM. Potkany s testikulárnou feminizačnou mutáciou (TFM) vykazujú zvýšené indexy úzkosti. Zborník 36th Výročného stretnutia Spoločnosti pre neurovedy; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.