Zvieracie modely závislosti od alkoholu a drog (2013)

Drogová závislosť má vážne zdravotné a sociálne dôsledky. V posledných 50 rokoch sa vyvinula široká škála techník na modelovanie špecifických aspektov správania užívajúcich drogy a významne prispela k pochopeniu neurobiologického základu zneužívania drog a závislosti. V posledných dvoch desaťročiach boli navrhnuté nové modely v snahe zachytiť skutočnejšie aspekty správania závislého od závislosti u laboratórnych zvierat. Cieľom tohto prehľadu je poskytnúť prehľad o predklinických postupoch používaných na štúdium zneužívania drog a závislosti a opísať nedávny pokrok, ktorý sa dosiahol v štúdiu špecifickejších aspektov návykového správania u zvierat.

úvod

Drogová závislosť je obrovská spoločenská výzva, a to nielen kvôli jej zdravotným dôsledkom, ale aj kvôli sociálno-ekonomickému a právnemu vplyvu na spoločnosť. Závislosť je ľudský fenomén, ktorý sa nedá reprodukovať v laboratórnom prostredí bez nevyhnutných obmedzení. Niektoré laboratórne charakteristiky tohto syndrómu však možno uspokojivo modelovať na laboratórnych zvieratách. Týmto spôsobom bola vyvinutá široká škála techník na modelovanie špecifických aspektov správania užívania drog. ^1,2 Možnosť študovať tieto správanie u zvierat prispela k pochopeniu neurobiologického základu užívania drog a systémov mozgu, ktoré sa podieľajú na odmeňovaní psychoaktívnych látok. Hlavným cieľom výskumu zneužívania drog je však odhaliť mechanizmy závislosti; v posledných dvoch desaťročiach boli preto navrhnuté nové modely v snahe zachytiť skutočnejšie aspekty správania závislého od závislosti u laboratórnych zvierat. ²

Cieľom tohto prehľadu je poskytnúť prehľad o predklinických postupoch používaných na štúdium zneužívania drog a závislosti a opísať nedávny pokrok, ktorý sa dosiahol v štúdiu špecifickejších aspektov návykového správania u zvierat.

Voľný model fľaše

Model fľaše s voľným výberom je neoperantná metóda samopodania, obmedzená na orálny spôsob podania a najčastejšie používaná pri výskume závislosti od alkoholu. Tento spôsob je neinvazívny, technicky jednoduchý a používa spôsob podávania, pri ktorom ľudia konzumujú etanol. Metódy autonómie perorálneho etanolu predstavujú tvár a konštruktovú validitu ako model konzumácie ľudského alkoholu, pretože subjekty si môžu vybrať, či piť alkohol, ako aj množstvo požité počas doby expozície. Tento model môže byť použitý na skúmanie krátkodobých alebo dlhodobých dôsledkov vystavenia sa etanolu, ako aj neurobiologických mechanizmov súvisiacich so zneužívaním alkoholu a závislosťou. ¹ Okrem toho, tieto spôsoby môžu byť tiež užitočné pri vyhľadávaní farmakologickej liečby na prevenciu nadmerného pitia alkoholu, čo poukazuje na ich prediktívnu platnosť. ³

Richter a Campbell, ⁴ in1940 ako prví uviedli, že laboratórne potkany dobrovoľne konzumujú etanol. Ukázali, že potkany rozdeľujú svoje pitie medzi fľašu s vodou a fľašu obsahujúcu zriedený etanolový roztok, ktorý pochádza z testu preferencií v dvoch fľašiach. Spotreba alkoholu u hlodavcov sa obyčajne hodnotí touto technikou, v ktorej sú vo svojich domácich klietkach dostupné roztoky alkoholu a vody, pričom potrava je k dispozícii ad libitum. Alternatívne môžu mať zvieratá súbežný prístup do vody a niekoľkých ďalších fliaš obsahujúcich rôzne koncentrácie etanolu. Metóda voľného výberu s použitím jednej alebo viacerých fliaš na ponúkanie etanolu je užitočná na odhad dobrovoľného a spontánneho príjmu, pretože zviera nie je nútené piť kvapalinu. ⁵ Vo všeobecnosti sa ukázalo, že spotreba alkoholu sa zvyšuje, keď sa prezentuje vyšší počet alternatívnych alkoholových roztokov. ⁶

Meranie príjmu etanolu sa zvyčajne vykonáva vážením fliaš s vodou a etanolom raz za 24 hodín. Prednosť alkoholu je definovaná v zmysle príjmu etanolu v g etanolu / kg telesnej hmotnosti / deň a percentuálneho podielu celkovej spotrebovanej tekutiny. ⁷ Účinky etanolu však závisia nielen od celkového množstva etanolu spotrebovaného potkanom alebo myšou v čase 24 hodín, ale aj od časového priebehu a priebehu pitia, meraného frekvenciou prístupov k etanolovému roztoku a množstvom. spotrebované na pitie. ⁸ Použitie oboch kritérií má za cieľ eliminovať zaujatosť zvierat so zdanlivo vysokou konzumáciou alkoholu z dôvodu malej telesnej hmotnosti alebo vysokého príjmu tekutín. ⁷

Hlodavce študované v podmienkach nepretržitého prístupu k roztokom vo všeobecnosti nepijú dosť na dosiahnutie koncentrácií etanolu v krvi nad 80 mg / dL (potkany) alebo 100 mg / dL (myši), čo možno považovať za nadmerné pitie u potkanov a myší, v danom poradí. , ^9,10 Ukázalo sa, že spotreba etanolu sa zvyšuje s občasným prístupom. Model prerušovaného prístupu (každý druhý periód 24-hodín) k etanolu u potkanov viedol k pitnej schéme vysokej spotreby etanolu (9 g / kg / deň). ¹¹ Mnohé dôkazy naznačujú, že umožnenie prístupu k etanolu na prerušovanom základe môže byť metodickým prostriedkom na zvýšenie príjmu. ¹²

Koncentrácia alkoholu je ďalším kritickým problémom v týchto postupoch, pretože nízke koncentrácie by sa mohli spotrebovať kvôli ich mierne sladkej chuti a vysokým koncentráciám, ktoré sa odmietli kvôli ich averzívnej chuti. Zvyčajne sa preto usudzuje, že koncentrácie etanolu pod 4% (v / v) nevytvoria dostatočne vysoké koncentrácie v krvi, aby spôsobili relevantné farmakologické účinky, a že koncentrácia v rozsahu 8-12% je vhodným štandardom pre konzumáciu hlodavcov. , Keďže väčšina kmeňov hlodavcov zvyčajne nepije z vysoko koncentrovaných roztokov etanolu, bolo vyvinutých niekoľko postupov na trénovanie hlodavcov na perorálne podávanie farmakologicky relevantných množstiev alkoholu, vrátane prezentácie vzostupných koncentrácií etanolu a obmedzenia časovej periódy núteného užívania alkoholu. vystavenia etanolu. ^1,6

Ďalší spôsob zvýšenia spotreby etanolu zahŕňa manipuláciu s motivačnou hodnotou roztoku zvýšením jeho chutnosti; toto sa môže dosiahnuť pridaním sladkého aromatizačného činidla, ako je sacharóza alebo sacharín, do etanolového roztoku. Koncentrácia sladidla sa môže udržiavať konštantná alebo postupne klesať počas doby expozície. ¹²

Je dôležité poznamenať, že keďže neskoré 1940s, kmene hlodavcov boli vytvorené selektívnym šľachtením na preferenciu s vysokým obsahom etanolu. Odvtedy bolo niekoľko kmeňov potkanov a myší vybraných na preferenciu s vysokým alebo nízkym obsahom etanolu a používa sa v stovkách publikácií v oblasti závislosti od alkoholu. ¹³

Tekutá strava

V klasickej štúdii Lieber & DeCarli ¹⁴ etanol bol pridaný vo vysokých koncentráciách do kvapalnej diéty, ktorá bola jediným zdrojom výživy, nútila potkany alebo myši, aby užívali etanol obsiahnutý v potrave. Diéta bola zostavená takým spôsobom, že jej nutričná hodnota prekonala averzívne chuťové vlastnosti alkoholu a spôsobila príjem alkoholu až 14-16 g / kg / deň.

V nedávnej štúdii, ktorú vykonal Gilpin a kol. ¹⁵ potkanom bol umožnený ad libitum prístup k 9.2% (obj./obj.) etanolovo-kvapalnej strave, v ktorej 41% diétnych kalórií bolo odvodených z etanolu. Autori ukázali, že priemerný denný príjem diéty 9.2% (obj./obj.) Alkohol-kvapalina bol 79.04 ± 3.64 ml počas všetkých dní experimentu, čo bolo ekvivalentné príjmu etanolu 9.52 ± 0.27 g / kg / deň. Priemerné výsledné koncentrácie alkoholu v krvi boli 352 mg / dl, merané dve hodiny po začiatku cyklu tmy a v blízkosti 80 mg / dL 8 hodín po začiatku svetelného cyklu. Teda, hoci spotreba tekutej stravy je nižšia počas svetlej fázy, potkany sa dostatočne spotrebovali na udržanie farmakologicky relevantných koncentrácií alkoholu v krvi. Príjem etanolu počas vystavenia kvapalnej strave bol tiež schopný zvýšiť operatívny alkohol reagujúci, keď boli potkany testované počas vysadenia z kvapalnej stravy.

Okrem schopnosti produkovať špecifickú konšteláciu somatických abstinenčných symptómov u inak zdravých zvierat, ^16,17 a umožnenie štúdia posilňujúcich a motivačných vlastností etanolu, \ t ¹⁵ technika kŕmenia alkoholom ako časti tekutej stravy vedie k hladinám alkoholu v krvi, ktoré napodobňujú klinické stavy a umožňuje experimentálne duplikácie mnohých patologických komplikácií spôsobených alkoholom, ako je alkoholické mastné ochorenie pečene, rôzne metabolické poruchy vyvolané alkoholom a interakcia s liekom. etanol s priemyselnými rozpúšťadlami, mnohými bežne používanými liekmi a živinami. ¹⁸

Pary alkoholu

Model inhalácie výparov alkoholu bol vyvinutý v snahe vyvolať stav závislosti od alkoholu. ^19,20 Tento protokol využíva systémy na inhaláciu vodnej pary, ktoré sú komerčne dostupné na vystavenie potkanov alebo myší etanolovým parám. Inhalácia parou alkoholu je neinvazívny postup, ktorý umožňuje kontrolu dávky, trvania a spôsobu expozície, ako je stanovené experimentátorom, a nie je obmedzený predispozíciou zvieraťa na dobrovoľné konzumovanie alkoholu. Po zastavení vystavenia pôsobeniu alkoholu sa u zvierat prejavujú príznaky tolerancie a fyzickej závislosti a môžu sa testovať na množstvo motivačných, akútnych abstinenčných a abstinenčných správania. ²¹

Gilpin a kol. ¹⁵ vystavili potkany alkoholovým výparom počas 4 hodín a merali koncentráciu alkoholu v dialyzátoch mozgu a krvných vzorkách odobratých z chvostovej žily v intervaloch 30 minút počas expozície 4-hodín, ako aj 8 hodín po ukončení vystavenia pôsobeniu alkoholu. Zistili, že maximálne hladiny alkoholu dosiahnuté v krvi a mozgu počas expozície pary boli 208 ± 15 mg / dL a 215 ± 25 mg / dL. Osem hodín po ukončení vystavenia alkoholovým parám sa hladiny krvi a alkoholu v mozgu a alkohole vrátili na základnú líniu pred výparmi, približne 0%.

Gilpin a kol. ¹⁵ tiež vystavili potkany chronickým intermitentným alkoholovým výparom na modelovanie ľudského stavu, v ktorom dochádza k vystaveniu alkoholu v sérii predĺžených dávok, po ktorých nasledujú obdobia vysadenia. Vapor bol dodaný na prerušovanom pláne (na 6: 00 pm, vypnutý na 8: 00 am) po dobu 4 týždňov. Chronické vystavenie prerušovaným výparom vyvoláva vyššie podávanie alkoholu ako nepretržité vystavenie pare. ²² Hladiny alkoholu v krvi sa hodnotili pomocou odberu chvostovej žily a hodnoty odpareného etanolu (ml / h) do parnej komory sa upravili podľa potreby na udržanie hladín alkoholu v krvi v rozsahu 125-250 mg / dL. Autori použili operatívne postupy na testovanie motivačných aspektov závislosti od alkoholu. Expozícia parám zvýšila operatívne reakcie pre 10% w / v perorálny alkohol, keď boli potkany testované v 6-8 hodinách odobratia počas reprezentatívnych testovacích dní po výparoch. Predchádzajúce štúdie používajúce model chronickej intermitentnej alkoholovej pary ukázali, že motivačné príznaky závislosti sú prítomné u potkanov v akútnych časových intervaloch, čo dokazuje zvýšené správanie podobné úzkosti, zvýšené pitie alkoholu a zvýšená ochota pracovať pre alkohol skoro počas akútneho vysadenia, aj keď zvieratá stále majú vo svojej krvi alkohol pred vystavením pôsobeniu pár. ^21-25 Všetky zvieracie modely závislosti na alkohole sú v skutočnosti modely zložiek závislosti od alkoholu.

Model vystavenia parám má slabú tvárovú platnosť, pretože zvieratá sú nútené konzumovať etanol. Najzaujímavejším aspektom tohto modelu je jeho prediktívna platnosť (ako dobre zvierací model predpovedá mechanizmy a potenciálne liečby ľudského stavu). Napríklad akamprosát, liek, ktorý blokuje pitie alkoholu v ľudských alkoholikoch prostredníctvom potláčania túžby, účinne potláča pitie alkoholu potkanmi, ktoré sú závislé od alkoholu vdychovaním pár, ale nie v nezávislých kontrolách, ktoré neboli vystavené alkoholu. ²⁶

Operatívna samospráva

Najpriamejšou procedúrou na vyhodnotenie výstužných vlastností látky je testovanie, či zvieratá budú látku získavať (všeobecne to znamená stlačiť páku). Používanie modelov samopodávania liekov na štúdium závislosti je založené na predpoklade, že drogy pôsobia ako posilňovače; to znamená, že zvyšujú pravdepodobnosť správania, ktoré vedie k ich dodaniu. Na samopodanie lieku sa teda pozerá ako na účinnú reakciu posilnenú účinkami lieku a je bežným postupom študovať dobrovoľný príjem lieku u laboratórnych zvierat. V rámci tohto postupu zviera vykoná reakciu, napríklad stlačenie páky, ktorá dodá dávku liečiva. Predpokladá sa, že lieky majú funkčné podobnosti s inými látkami posilňujúcimi látky - napríklad s potravinami -, ktoré Skinner v 1930. rokoch XNUMX. storočia tradične skúmal v oblasti operatívnej úpravy. ²⁷

Operatívne kondicionovanie sa používa ako zvierací model drogovej závislosti od čias 1960. týždne ²⁸ 1962, technika na intravenózne podávanie morfínu u potkanov. Odvtedy sa preukázalo, že operatívne samopodanie sa zistilo u heroínu, \ t ^29,30 kokaín, ^31-33 amfetamín, ³⁴ nikotín, ^35-37 etanol, ^38-40 a delta-9-THC. ⁴¹

Intravenózne samo-podávanie sa považuje za najspoľahlivejší a prediktívny experimentálny model na vyhodnotenie účinkov lieku na posilnenie liečiv u zvierat. ²⁷ Táto metóda vykazuje vysokú tvárovú a prediktívnu platnosť pre hodnotenie zosilňujúcich vlastností liečiv. Vyhodnotenie prediktívnej platnosti modelov samoaplikácie na zisťovanie potenciálnych terapeutických účinkov látok pri liečbe drogovej závislosti je však obmedzené skutočnosťou, že na tento účel je k dispozícii veľmi málo liekov av súčasnosti sú takmer úplne dostupné. obmedzené na fajčenie alkoholom alebo cigaretami. ^1,27

Prístroj používaný pri uskutočňovaní postupu samopodania operatívneho liečiva pozostáva z komerčne dostupných komôr známych ako operant boxy alebo Skinner boxy. Komora má panel vybavený pákami, ktoré zviera stlačí a prenáša reakciu, ktorá aktivuje infúznu pumpu a dodá dávku liečiva. Môžu sa použiť aj iné systémy založené na iných reakciách, ako napríklad pokúšanie nosa u myši alebo klovanie disku pre holuby. Podávanie liečiva sa môže naprogramovať tak, aby sa zhodovalo s výskytom iných udalostí, ako sú svetlá alebo tóny, ako diskriminačné stimuly a / alebo sekundárne zosilňovače. Liečivo sa bežne dodáva intravenóznym katétrom, aj keď sa môžu použiť aj iné cesty, ako je orálna cesta pre etanol alebo inhalácia pre nikotín. ^27,36

Intravenózne podávanie si vyžaduje chirurgickú implantáciu katétra do krčnej žily. Katéter sa vedie subkutánne do chrbta potkana, kde vystupuje cez malý rez, a pripevní sa k plastovému podstavcu, ktorý je možné namontovať do systému postroja. Po chirurgickom zákroku sa zvieratá nechajú niekoľko dní zotaviť vo svojich domácich klietkach s voľným prístupom k potrave a vode pred začiatkom procedúry úpravy. Otvor v strope operačnej komory umožňuje priechod a voľný pohyb priviazaného katétra, ktorý je spojený s vyvažovacím otočným členom a infúznou pumpou. ^27,36

Prvou fázou tohto modelu je získanie operatívneho správania. Za týmto účelom sa zvieratá trénujú v nepretržitom posilňovaní, pri ktorom je každá odpoveď (stlačenie páky) zosilnená podaním infúzie liečiva (intravenózne podanie) alebo kvapky roztoku (perorálne podanie). Získanie samopodania lieku je citlivé na environmentálne a farmakologické manipulácie. Napríklad Covington & Miczek ⁴² uviedli, že signifikantne vyšší podiel potkanov predtým vystavených kokaínu (15.0 mg / kg intraperitoneálne, jedenkrát denne počas 10 dní) získal kokaín samoaplikáciu ako kontrolné zvieratá, ktoré dostali predbežnú liečbu soľným roztokom.

V paradigme samosprávy sa na hodnotenie motivácie získať drogu používajú plány progresívneho pomeru (PR). Plán PR zosilnenia sa implementuje zvýšením počtu reakcií potrebných na získanie podania infúzie liečiva. Napríklad Richardson & Roberts ⁴³ navrhol algoritmus pre každú nasledujúcu infúziu kokaínu s cieľom vytvoriť sériu zvyšujúcich sa požiadaviek na odpoveď, ktorá by začala pomerom jedna a stupňovala by sa dostatočne rýchlo, aby potkan nesplnil kritérium postupnej odpovede do 60 minút, počas 5 hodín zasadanie. Postupnosť pomeru bola 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95, 118, 145, 178 ... Posledný dokončený pomer, ktorého výsledkom je finále infúzia, je definovaný ako bod zlomu. V protokole o samostatnom podaní odráža bod zlomu podľa harmonogramu PR motiváciu zvieraťa k samostatnému podaniu lieku.

Nedávno sme pomocou plánu PR vyhodnotili možné zvýšenia v bode zlomu na zabezpečenie intravenózneho nikotínu u zvierat vystavených variabilnému stresu. Po fáze akvizície a údržby sa hodnotilo samopodanie podľa PR plánu posilnenia liečiva. Vývoj požiadaviek na odpoveď sledoval algoritmus 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26 ... Potkany mali na úspešné splnenie každej požiadavky na pomer 60 minút. Konečná dodaná infúzia bola definovaná ako bod zlomu. ^36,37 V našej štúdii PR rozvrhy odhalili významné zvýšenie bodov zlomu u potkanov vystavených stresu v porovnaní s kontrolami, čo naznačuje, že vystavenie stresu môže zvýšiť motiváciu pre nikotínové podávanie. Tieto údaje sú v súlade s ostatnými zisteniami, ktoré ukazujú, že vystavenie porážke stresu štyrom epizódam zvyšuje bod zlomu kokaínu počas PR programu. ⁴² Podobne sa preukázalo, že potkany vystavené stresu v šoku z chodidiel mali zvýšené zlomové body PR pre heroín v porovnaní s ich kontrolami. ⁴⁴

Protokol samopodania sa môže tiež použiť na meranie zosilňujúcich účinkov liečiv v podmienkach predĺženého prístupu (obvykle 24 hodín) v nepretržitom zosilňovacom rozvrhu, ktorý je známy ako záchvat. Výsledky z nášho laboratória ukázali, že predbežné ošetrenie kokaínom zvýšilo príjem nikotínu v 24-hodinovom binge relácii intravenózneho nikotínu. ³⁷

Hlavnou nevýhodou postupov samosprávy je to, že sú v porovnaní s inými metódami časovo náročné a relatívne drahé. Okrem toho sú dlhodobé štúdie, ktoré používajú hlodavce intravenóznou cestou, obmedzené trvaním implantovaných katétrov. ²⁷

Miesto klimatizácia

V podmienenom preferenčnom postupe sú účinky lieku, o ktorých sa predpokladá, že pôsobia hlavne ako nepodmienený stimul (US), opakovane spárované s predtým neutrálnym stimulom. V tomto procese, ktorý je svojou povahou Pavlovián, neutrálny stimul získava schopnosť pôsobiť ako podmienený stimul (CS). Potom bude táto CS schopná vyvolať správanie pri priblížení, keď má liek chutné vlastnosti. Najbežnejšie metódy používané na štúdium podmienenej preferencie používajú environmentálny stimul ako CS a označujú sa ako preferencia podmieneného miesta (CPP). Testovacie zariadenie pre paradigmu CPP sa zvyčajne skladá z krabíc s dvoma oddelenými oddeleniami oddelenými gilotínovými dverami, ktoré sa líšia rozmermi stimulu. Napríklad oddelenia sa môžu líšiť podlahou, farbou steny, vzorom alebo čuchovými narážkami. ⁴⁵ V prístroji je tiež bežne prítomná tretia (neutrálna) komora, ktorá nebude spárovaná s liekom. ⁴⁶

Typický protokol CPP pozostáva z troch fáz: predkondicionovanie, kondicionovanie a postkondicionovanie (test). Vo fáze pred kondicionovaním sa každé zviera (potkan alebo myš) umiestni do neutrálneho oddelenia s odstránenými gilotínovými dverami, aby sa umožnil prístup k celému prístroju na 15 minúty počas 3 dní. V deň 3 sa zviera umiestni do prístroja a zaznamená sa čas strávený v každej komore. Vo fáze kondicionovania sú kompartmenty izolované gilotínovými dverami a to isté zviera dostáva alternatívne injekcie liečiva a jeho vehikula. Injekcia liečiva je spárovaná so špecifickým oddelením a injekcia vehikula s alternatívnym. Bezprostredne po každej injekcii sa zviera v zodpovedajúcej komore uzavrie na dobu 30-40 minút. Pri skúške kondicionovania sa zviera umiestni do neutrálneho oddelenia s odstránenými gilotínovými dverami, aby sa umožnil prístup k celému prístroju. Čas strávený v každej komore sa zaznamenáva počas 15 minút, ako je opísané pre fázu predkondicionovania; test sa vykonáva v stave bez liečiva. ⁴⁶ Predĺženie času stráveného v kompartmente spárovaného s účinkom liečiva naznačuje vývoj CPP, a teda aj chuťový účinok liečiva.

CPP bol hlásený pri všetkých liekoch, ktoré spôsobujú závislosť na ľuďoch; Výsledky sú však robustnejšie pre opiáty a psychostimulanty. ⁴⁵

Štúdie návykových návykov na zvieratách

Použitie vyššie opísaných modelov významne zvýšilo naše chápanie neurobiologického základu užívania drog. Hlavným cieľom výskumu zneužívania drog je však zamerať sa na mechanizmy závislosti. Závislosť nie je len užívanie drog, ale aj udržiavanie nutkavého užívania drog napriek nepriaznivým následkom. Strata kontroly vedie k vyššej spotrebe drog, nutkavému vyhľadávaniu drog a neschopnosti zdržať sa jej užívania. V posledných rokoch sa teda vynaložilo veľké úsilie na použitie metódy samoaplikácie na modelovanie špecifickejších prvkov návykového správania, na rozdiel od iba skúmania posilnenia liekov. Konkrétne sa zameralo úsilie na identifikáciu toho, či je možné u zvierat modelovať kritériá DSM-IV na diagnostiku závislosti na drogách. ²

Dominantná štúdia Deroche-Gamonet et al. ⁴⁷ je príkladom tejto novej stratégie vyšetrovania drogových závislostí. Autori použili intravenózne podávanie kokaínu na skúmanie toho, či sa u hlodavcov dá pozorovať návykové správanie. Ukázali, že správanie, ktoré sa podobá trom základným diagnostickým kritériám pre závislosť (ťažkosti so zastavením alebo obmedzením príjmu drog; extrémne vysoká motivácia brať drogu, s aktivitami zameranými na jej obstarávanie a spotrebu a pokračujúce užívanie látok napriek jej nepriaznivým následkom) môže byť modelované na potkanoch trénovaných na samopodávanie kokaínu.

Eskalácia užívania drog je charakteristická pre prechod od príležitostného užívania drog k závislosti. Na demonštráciu eskalácie príjmu liečiva, najmä kokaínu a etanolu, sa často používal dlhodobý prístup (flámovanie, pozri vyššie). Potkany s predĺženým prístupom k samopodaniu liečiva postupne zvyšujú svoj príjem v priebehu dní spôsobom, ktorý priamo nesúvisí s toleranciou. Napríklad potkany s predĺženým prístupom (6 hodiny / deň) k samopodaniu kokaínu postupne zvyšovali svoj príjem kokaínu v priebehu dní, zatiaľ čo u potkanov s obmedzeným prístupom k liekom (1 hodina / deň) sa udržali pozoruhodne stabilné miery samopodania lieku, dokonca aj po niekoľko mesiacov testovania. ^48,49 Vo viacerých správach bolo hlásené zvýšenie príjmu kokaínu s predĺženým prístupom k samostatne podávanému lieku. ^50-52 Potkany, ktoré vykazovali eskaláciu samého podávania kokaínu, tiež preukázali zvýšenú motiváciu pre túto drogu, čoho dôkazom je zvýšený počet bodov v PR plánoch, ⁵³ ktorý modeluje ďalšiu charakteristiku správania návykového správania.

V predklinických štúdiách bolo modelované aj kompulzívne užívanie drog napriek nepriaznivým následkom. V týchto štúdiách bolo správanie pri hľadaní alebo užívaní drog spárované s negatívnym stimulom. Napríklad Vanderschuren a kol. ⁵⁴ ukázali, že párovanie averzívneho CS (šok do nohy) so samoinjekciou kokaínu potlačilo správanie pri hľadaní drog u potkanov s obmedzenými skúsenosťami so samoinjekciou kokaínu, ale nie u potkanov, ktoré mali predchádzajúci dlhodobý prístup k užívaniu kokaínu.

V štúdiách používajúcich perorálne požitie liekov, najmä etanolu, sa ako averzívny stimul bežne používa roztok obsahujúci chinín s horkou chuťou. ⁵⁵ Pridanie chinínu do etanolového roztoku, ktorý bol potkanom k ​​dispozícii už 3-4 mesiacov, neznížilo príjem etanolu napriek horkej chinine. ⁵⁶ Podobne Lesscher a kol. ⁵⁷ uviedli, že myši sa stali ľahostajnými voči chinínu po predĺženom prístupe (8 týždne) k etanolu, pretože pili rovnaké množstvá etanolu z fliaš s chinínom a bez chinínu v averzívnej koncentrácii.

Problémy s abstinenciou od užívania drog sú tiež charakteristické pre drogovú závislosť; to sa môže študovať na laboratórnych zvieratách vyhodnotením hľadania lieku v modeli samoaplikácie, keď sa liek už nedodáva v reakcii na pákový tlak zvieraťa. Táto rezistencia na vyhynutie operatívneho správania sa pozorovala u potkanov s anamnézou rozšíreného prístupu k heroínu alebo kokaínu. ^47,58

Závislosť má vlastnosti chronickej recidivujúcej poruchy. Značný počet závislých jedincov skutočne relapsuje k užívaniu drog aj po dlhšom období odvykania; predklinický model relapsu je preto dôležitý aj pri štúdiu mechanizmov závislosti. V tomto zmysle de Wit & Stewart ⁵⁹ uviedli, že nepodmienené primingové injekcie kokaínu alebo opätovné vystavenie narážok spárovaných s kokaínom obnovili správanie po stlačení páky po zániku operatívnej reakcie. Na základe týchto výsledkov navrhli, aby sa ich model znovuzískania mohol použiť na štúdium faktorov zapojených do relapsu užívania drog.

Dva zvieracie modely sa ukázali ako zvlášť užitočné pri štúdiu recidívy. ⁶⁰ Jedným z nich je obnovenie samosprávy. ^61,62 Druhým experimentálnym modelom na štúdium relapsu u zvierat je obnovenie CPP. ^46,63,64 V týchto modeloch sú zvieratá najskôr trénované na získanie podmienenej reakcie a potom podstúpia proces zániku tohto správania. Akonáhle je toto správanie ukončené, zavádzajú sa experimentálne manipulácie (tj prípadné vystavenie drogovým alebo nedrogovým stimulom), ktoré vedú k obnoveniu predtým zosilneného správania sa. Zjavná podobnosť tohto výsledku a recidívy viedla k použitiu tohto postupu ako modelu recidívy a ako hodnotenie túžby. ⁶⁰

Relevantným aspektom modelu znovunastolenia je zistenie, že o faktoroch, ktoré vyvolávajú relaps a túžbu u ľudí, sa tiež uvádza, že obnovujú vyhľadávanie liekov u laboratórnych zvierat. Tieto faktory zahŕňajú opätovnú expozíciu lieku alebo narážkam spojeným s liekom a expozíciu stresorom. ^65,66

Vystavenie stresovým udalostiam sa považuje za hlavný faktor zodpovedný za relaps liekov. ^67,68 Predklinické štúdie ukázali, že stres môže obnoviť samoinjikovanie nikotínu, kokaínu, heroínu a etanolu. ^69-71 Podobne niekoľko štúdií preukázalo, že vystavenie stresu vyvoláva obnovenie CPP indukovaného opioidmi, amfetamínmi, kokaínom a nikotínom. ^64,71-74

Existujú primerané dôkazy na podporu osobnej platnosti modelu obnovenia, ale jeho prediktívna platnosť ani jeho funkčná rovnocennosť neboli úplne stanovené. ⁶⁰

Záverečné poznámky

Tento prehľad zhrnul niektoré postupy bežne používané na hodnotenie zneužívania a zodpovednosti za závislosť. Tieto zvieracie modely sa široko používajú na štúdium neurobiologických a molekulárnych mechanizmov užívania drog. Okrem toho nedávny pokrok v modelovaní symptómov závislosti v štúdiách na zvieratách na základe kritérií DSM-IV predstavuje vynikajúcu príležitosť na štúdium nervového a genetického pozadia závislosti na drogách. Tieto nové prístupy sú tiež vynikajúcimi nástrojmi na výskum terapeutických látok na zlepšenie stratégií zvládania závislosti u závislých pacientov.

Cleopatra S. Planeta je výskumným pracovníkom Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).

Referencie

1. Sanchis-Segura C, Spanagel R. Hodnotenie správania sa pri posilňovaní drog a návykových vlastnostiach u hlodavcov: prehľad. Addict Biol. 2006, 11: 2-38. [ odkazy ]

2. Vanderschuren LJ, Ahmed SH. Štúdie návykových návykov na zvieratách. Perspektíva studenej jari Harb Med. 2013, 3: a011932. [ odkazy ]

3. Spanagel R, Zieglgansberger W. Anti-craving zlúčeniny pre etanol: nové farmakologické nástroje na štúdium návykových procesov. Trends Pharmacol Sci. 1997, 18: 54-9. [ odkazy ]

4. Richter CP, Campbell KH. Prahové hodnoty alkoholovej chuti a koncentrácie roztoku sú u potkanov preferované. Science. 1940, 9: 507-8. [ odkazy ]

5. Tordoff MG, Bachmanov AA. Vplyv počtu fliaš na alkohol a vodu na príjem myšieho alkoholu. Alcohol Clin Exp Res. 2003, 27: 600-6. [ odkazy ]

6. Boyle AE, Smith BR, Spivak K, Amit Z. Dobrovoľná spotreba etanolu u potkanov: dôležitosť expozičnej paradigmy pri určovaní konečného výsledku príjmu. Behav Pharmacol. 1994, 5: 502-12. [ odkazy ]

7. McBride WJ, Li TK. Zvieracie modely alkoholizmu: neurobiológia správania sa pri konzumácii alkoholu u hlodavcov. Kritérium Rev Neurobiol. 1998, 12: 339-69. [ odkazy ]

8. Leeman RF, Heilig M, Cunningham CL, Stephens DN, Duka T, O'Malley SS. Spotreba etanolu: ako by sme ju mali merať? Dosiahnutie konzistencie medzi ľudskými a zvieracími fenotypmi. Addict Biol. 2010; 15: 109-24. [ odkazy ]

9. Bell RL, Rodd ZA, Lumeng L, Murphy JM, McBride WJ. Alkohol, ktorý uprednostňuje P a zvieracie modely nadmerného pitia alkoholu. Addict Biol. 2006, 11: 270-88. [ odkazy ]

10. Crabbe JC, Metten P, Rhodes JS, Yu CH, Brown LL, Phillips TJ, a kol. Rad myší vybraných pre vysoké koncentrácie etanolu v krvi ukazuje pitie v tme až intoxikácii. Biol Psychiatry. 2009, 65: 662-70. [ odkazy ]

11. Wise RA. Dobrovoľný príjem etanolu u potkanov po vystavení etanolu v rôznych režimoch. Psychopharmacologia. 1973, 29: 203-10. [ odkazy ]

12. Crabbe JC, Harris RA, Koob GF. Predklinické štúdie o alkohole závislej od alkoholu. Ann NY Acad Sci. 2011, 1216: 24-40. [ odkazy ]

13. Crabbe JC, Phillips TJ, Belknap JK. Zložitosť pitia alkoholu: štúdie na genetických modeloch hlodavcov. Behav Genet. 2010, 40: 737-50. [ odkazy ]

14. Lieber CS, De Carli LM. Závislosť a tolerancia od etanolu: nutrične riadený experimentálny model u potkanov. Res Commun Chem Pathol Pharmacol. 1973, 6: 983-91. [ odkazy ]

15. Gilpin NW, Smith AD, Cole M, Weiss F, Koob GF, Richardson HN. Správanie operátora a hladiny alkoholu v krvi a mozgu potkanov závislých od alkoholu. Alcohol Clin Exp Res. 2009, 33: 2113-23. [ odkazy ]

16. Frye GD, Chapin RE, Vogel RA, Mailman RB, Kilts CD, Mueller RA, a kol. Účinky akútnej a chronickej liečby 1,3-butándiolom na funkciu centrálneho nervového systému: porovnanie s etanolom. J Pharmacol Exp Ther. 1981, 216: 306-14. [ odkazy ]

17. Majchrowicz E. Indukcia fyzickej závislosti na etanole a súvisiace zmeny správania u potkanov. Psychopharmacologia. 1975, 43: 245-54. [ odkazy ]

18. Lieber CS, DeCarli LM. Odporúčané množstvo živín nezmierňuje toxické účinky dávky alkoholu, ktorá udržuje významné hladiny etanolu v krvi. J Nutr. 1989, 119: 2038-40. [ odkazy ]

19. Goldstein DB, Pal N. Závislosť od alkoholu vyvolaná u myší inhaláciou etanolu: klasifikácia abstinenčnej reakcie. Science. 1971, 172: 288-90. [ odkazy ]

20. Rogers J, Wiener SG, Bloom FE. Metódy dlhodobého podávania etanolu potkanom: výhody inhalácie oproti intubácii alebo tekutej strave. Behav Neural Biol. 1979, 27: 466-86. [ odkazy ]

21. Gilpin NW, Richardson HN, Cole M, Koob GF. Inhalácia alkoholu u potkanov parou. Curr Protoc Neurosci. 2008; Kapitola 9: Jednotka 9.29. [ odkazy ]

22. O'Dell LE, Roberts AJ, Smith RT, Koob GF. Vylepšené samopodávanie alkoholu po prerušovanom versus kontinuálnom vystavení parám alkoholu. Alcohol Clin Exp Res. 2004; 28: 1676-82. [ odkazy ]

23. Funk CK, Zorrilla EP, Lee MJ, Rice KC, Koob GF. Antagonisty faktora 1 uvoľňujúceho kortikotropín selektívne znižujú samopodávanie etanolu u potkanov závislých od etanolu. Biol Psychiatry. 2007, 61: 78-86. [ odkazy ]

24. Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Intra-amygdala muscimol u operatívnych potkanov znižuje operatívne podávanie etanolu. Alcohol Clin Exp Res. 1996, 20: 1289-98. [ odkazy ]

25. Valdez GR, Roberts AJ, Chan K, Davis H., Brennan M., Zorrilla EP, a kol. Zvýšené samopodávanie etanolu a správanie podobné úzkosti počas akútneho odňatia etanolu a dlhotrvajúca abstinencia: regulácia faktorom uvoľňujúcim kortikotropín. Alcohol Clin Exp Res. 2002, 26: 1494-501. [ odkazy ]

26. Le Magnen J, Tran G, Durlach J, Martin C. Dávka-dependentné potlačenie vysokého príjmu alkoholu chronicky intoxikovaných krýs pomocou Ca-acetyl homotaurinátu. Alkohol. 1987, 4: 97-102. [ odkazy ]

27. Panlilio LV, Goldberg SR. Samostatné podávanie liekov zvieratám a ľuďom ako model a vyšetrovací nástroj. Addiction. 2007, 102: 1863-70. [ odkazy ]

28. Týždne JR. Experimentálna závislosť od morfínu: metóda automatických intravenóznych injekcií u potkanov bez obmedzenia. Science. 1962, 138: 143-4. [ odkazy ]

29. Bonese KF, Wainer BH, Fitch FW, Rothberg RM, Schuster CR. Zmeny v samoinjikovaní heroínu opicami rézus po morfínovej imunizácii. Nature. 1974, 252: 708-10. [ odkazy ]

30. Pattison LP, McIntosh S, Budygin EA, Hemby SE. Diferenčná regulácia prenosu dopamínu v mozgu u potkanov po samoinjekcii kokaínu, heroínu a speedballu. J Neurochem. 2012, 122: 138-46. [ odkazy ]

31. Hill SY, Powell BJ. Podávanie kokaínu a morfínu: účinky diferenciálneho chovu. Pharmacol Biochem Behav. 1976, 5: 701-4. [ odkazy ]

32. Miczek KA, Mutschler NH. Aktivačné účinky sociálneho stresu na samokontrolu IV kokaínu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1996, 128: 256-64. [ odkazy ]

33. Cruz FC, Quadros IM, Hogenelst K, Planeta CS, Miczek KA. Sociálny porážkový stres u potkanov: eskalácia kokaínu a „speedball“ závisia od samoadministrácie, ale nie heroínu. Psychofarmakológia (Berl). 2011, 215: 165-75. [ odkazy ]

34. Pickens R, Harris WC. Samostatné podávanie d-amfetamínu potkanom. Psychopharmacologia. 1968, 12: 158-63. [ odkazy ]

35. Goldberg SR, Spealman RD, Goldberg DM. Perzistentné správanie pri vysokých rýchlostiach udržiavané intravenóznym samodávaním nikotínu. Science. 1981, 214: 573-5. [ odkazy ]

36. Leao RM, Cruz FC, Marin MT, Planeta Cda S. Stres indukuje behaviorálnu senzibilizáciu, zvyšuje správanie pri hľadaní nikotínu a vedie k zníženiu CREB v nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 2012, 101: 434-42. [ odkazy ]

37. Leao RM, Cruz FC, Carneiro-de-Oliveira PE, Rossetto DB, Valentini SR, Zanelli CF, a kol. Zlepšené správanie pri hľadaní nikotínu po predbežnej expozícii opakovanému kokaínu je sprevádzané zmenami v BDNF v jadre accumbens potkanov. Pharmacol Biochem Behav. 2013, 104: 169-76. [ odkazy ]

38. Smith SG, Davis WM. Intravenózne podávanie alkoholu u potkanov. Pharmacol Res. Commun. 1974, 6: 379-402. [ odkazy ]

39. Grant KA, Samson HH. Perorálne podávanie etanolu u potkanov bez kŕmenia. Alkohol. 1985, 2: 317-21. [ odkazy ]

40. Roberts AJ, Heyser CJ, Koob GF. Samostatné podávanie sladeného versus nesladeného etanolu: účinky na hladinu alkoholu v krvi. Alcohol Clin Exp Res. 1999, 23: 1151-7. [ odkazy ]

41. Justinova Z, Tanda G, Redhi GH, Goldberg SR. Samostatné podávanie delta9-tetrahydrokanabinolu (THC) opicami veveričiek liečivými. Psychofarmakológia (Berl). 2003, 169: 135-40. [ odkazy ]

42. Covington 3rd HE, Miczek KA. Opakovaný stres v sociálnej porážke, kokaín alebo morfín. Účinky na behaviorálnu senzibilizáciu a intravenózne podávanie kokaínu „binges“. Psychofarmakológia (Berl). 2001, 158: 388-98. [ odkazy ]

43. Richardson NR, Roberts DC. Schémy progresívneho pomeru v štúdiách samoaplikácie liečiva u potkanov: metóda na hodnotenie posilňujúcej účinnosti. J. Neurosciho metódy. 1996, 66: 1-11. [ odkazy ]

44. Shaham Y, Stewart J. Vystavenie miernemu stresu zvyšuje zosilňujúcu účinnosť intravenózneho samoinjikovania heroínu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1994, 114: 523-7. [ odkazy ]

45. Bardo MT, Bevins RA. Uprednostňovanie podmienených miest: čo to prispieva k nášmu predklinickému chápaniu odmeny za lieky? Psychofarmakológia (Berl). 2000, 153: 31-43. [ odkazy ]

46. Cruz FC, Leao RM, Marin MT, Planeta CS. Stresom indukovaná obnova amfetamín-podmieneného preferencie miesta a zmeny tyrozínhydroxylázy v jadre accumbens u dospievajúcich potkanov. Pharmacol Biochem Behav. 2010, 96: 160-5. [ odkazy ]

47. Deroche-Gamonet V, Belin D, Piazza PV. Dôkaz správania závislého od potkanov. Science. 2004, 305: 1014-7. [ odkazy ]

48. Ahmed SH, Koob GF. Prechod z mierneho na nadmerný príjem liekov: zmena hedonickej nastavenej hodnoty. Science. 1998, 282: 298-300. [ odkazy ]

49. Ahmed SH, Koob GF. Dlhodobé zvýšenie hodnoty samoaplikácie kokaínu po eskalácii u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1999, 146: 303-12. [ odkazy ]

50. Ben-Shahar O, Posthumus EJ, Waldroup SA, Ettenberg A. Zvýšená motivácia pri hľadaní drog po rozšírení denného prístupu k kokaínu, ktorý si podáva sám. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 2008, 32: 863-9. [ odkazy ]

51. Quadros IM, Miczek KA. Dva režimy intenzívneho fajčenia kokaínu: zvýšená perzistencia po strate v sociálnej porážke a zvýšená miera príjmu kvôli podmienkam rozšíreného prístupu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 2009, 206: 109-20. [ odkazy ]

52. Hao Y, Martin-Fardon R, Weiss F. Behaviorálne a funkčné dôkazy metabotropického glutamátového receptora 2 / 3 a metabotropického glutamátového receptora 5 dysregulácie u potkanov s eskaláciou kokaínu: faktor pri prechode na závislosť. Biol Psychiatry. 2010, 68: 240-8. [ odkazy ]

53. Liu Y, Roberts DC, Morgan D. Účinky samo-administrácie a deprivácie s predĺženým prístupom na hraničné hodnoty udržované kokaínom u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 2005, 179: 644-51. [ odkazy ]

54. Vanderschuren LJ, Everitt BJ. Vyhľadávanie liekov sa po dlhodobom podávaní kokaínu stáva nutkavým. Science. 2004, 305: 1017-9. [ odkazy ]

55. Wolffgramm J. Etofarmakologický prístup k vývoju drogovej závislosti. Neurosci Biobehav Rev. 1991; 15: 515-9. [ odkazy ]

56. Hopf FW, Chang SJ, Sparta DR, Bowers MS, Bonci A. Motivácia pre alkohol sa stáva rezistentnou voči falšovaniu chinínu po 3 až 4 mesiacoch prerušovaného podávania alkoholu. Alcohol Clin Exp Res. 2010, 34: 1565-73. [ odkazy ]

57. Lesscher HMB, Van Kerkhof LWM, Vanderschuren LJMJ. Nepružné a ľahostajné pitie alkoholu u samcov myší. Alcohol Clin Exp Res. 2010, 34: 1219-25. [ odkazy ]

58. Ahmed SH, Walker JR, Koob GF. Pretrvávajúce zvyšovanie motivácie užívať heroín u potkanov s anamnézou eskalácie drog. Neuropsychofarmakologie. 2000, 22: 413-21. [ odkazy ]

59. de Wit H, Stewart J. Obnovenie kokaínom zosilnenej reakcie u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1981, 75: 134-43. [ odkazy ]

60. Katz J, Higgins S. Platnosť modelu obnovenia túžby a návratu k užívaniu drog. Psychofarmakológia (Berl). 2003, 168: 21-30. [ odkazy ]

61. Shaham Y, Rajabi H, Stewart J. Relapse k vyhľadávaniu heroínu u potkanov, ktoré udržiavajú opioidy: účinky stresu, aktivácie heroínu a odňatia. J Neurosci. 1996, 16: 1957-63. [ odkazy ]

62. Shaham Y, Adamson LK, Grocki S, Corrigall WA. Obnovenie a spontánne obnovenie hľadania nikotínu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1997, 130: 396-403. [ odkazy ]

63. Mueller D, Stewart J. Kokaín vyvolané preferované miesto preferencie: obnovenie pomocou injekcie kokaínu po vyhynutí. Behav Brain Res. 2000, 115: 39-47. [ odkazy ]

64. Ribeiro Do Couto B, Aguilar MA, Manzanedo C, Rodriguez-Arias M, Armario A, Minarro J. Sociálny stres je rovnako účinný ako fyzický stres pri obnove morfínom indukovanej preferencie miesta u myší. Psychofarmakológia (Berl). 2006, 185: 459-70. [ odkazy ]

65. Chiamulera C, Borgo C, Falchetto S, Valerio E, Tessari M. Nikotínové opätovné zavedenie nikotínu po dlhodobom zániku. Psychofarmakológia (Berl). 1996, 127: 102-7. [ odkazy ]

66. Aguilar MA, Rodriguez-Arias M, Minarro J. Neurobiologické mechanizmy obnovenia preferencie miesta podmieneného liečivom. Brain Res Rev. 2009; 59: 253-77. [ odkazy ]

67. Sinha R. Ako stres zvyšuje riziko zneužívania drog a relapsu? Psychofarmakológia (Berl). 2001, 158: 343-59. [ odkazy ]

68. Sinha R, Garcia M, Paliwal P, Kreek MJ, Rounsaville BJ. Stresom vyvolaná chuť na kokaín a hypotalamo-hypofyzárne-nadobličkové reakcie predpovedajú výsledky relapsu kokaínu. Arch Gen Psychiatry. 2006, 63: 324-31. [ odkazy ]

69. Buczek Y, Le AD, Wang A, Stewart J, Shaham Y. Stres obnovuje hľadanie nikotínu, ale nie hľadanie sacharózy u potkanov. Psychofarmakológia (Berl). 1999, 144: 183-8. [ odkazy ]

70. Shaham Y, Erb S., Stewart J. Stresom vyvolaný relaps k heroínu a kokaínu pri potkanoch: prehľad. Brain Res Brain Res Rev. 2000; 33: 13-33. [ odkazy ]

71. Schank JR, Pickens CL, Rowe KE, Cheng K, Thorsell A, Rice KC a kol. Stresom vyvolané obnovenie hľadania alkoholu u potkanov je selektívne potlačené antagonistom neurokinínu 1 (NK1) L822429. Psychofarmakológia (Berl). 2011, 218: 111-9. [ odkazy ]

72. Cruz FC, Marin MT, Planeta CS. Obnovenie preferencie miesta vyvolaného amfetamínom je dlhotrvajúce a súvisí so zníženou expresiou receptorov AMPA v nucleus accumbens. Neuroscience. 2008, 151: 313-9. [ odkazy ]

73. Redila VA, Chavkin C. Stresom vyvolané obnovenie hľadania kokaínu je sprostredkované kapa opioidným systémom. Psychofarmakológia (Berl). 2008, 200: 59-70. [ odkazy ]

74. Leao RM, Cruz FC, Planeta CS. Vystavenie akútnemu obmedzujúcemu stresu obnovuje u potkanov preferenciu miesta vyvolanú nikotínom. Behav Pharmacol. 2009, 20: 109-13. [ odkazy ]

Korešpondencia: KleopatraS. Planeta, Rodovia Araraquara-Jaú, km 01, CEP 14801-902, Araraquara, SP, Brazília. E-mail: [chránené e-mailom]

prezradenia Autori neuvádzajú žiadne konflikty záujmov.