Úloha mechanizmov receptora Orexin-1 na kompulzívnej konzumácii potravy v modeli záchvatu pri samici potkanov (2012)

Neuropsychofarmakologie. 2012 august; 37 (9): 1999 - 2011.

PMCID: PMC3398727

Tento článok bol citované iné články v PMC.

Prejsť na:

abstraktné

Orexíny (OX) a ich receptory (OXR) modulujú kŕmenie, vzrušenie, stres a zneužívanie drog. Nervové systémy, ktoré motivujú a posilňujú zneužívanie drog, môžu tiež byť základom nutkavého hľadania potravy a príjmu. Účinky GSK1059865 (5-bróm-N- [(2S,5S) -1- (3-fluór-2-metoxybenzoyl) -5-metylpiperidín-2-yl] metylpyridín-2-amín), selektívny OX1R antagonista, JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromfenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimetyl-4-fenyl-l, 1,3-dioxán-5-yl] močovina), selektívny OX2R antagonista a SB-649868 (N- [((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide), a dual OX1/VÔL2Antagonista R sa hodnotil na modeli konzumácie nárazu (BE) u samíc potkanov. BE vysoko chutného jedla (HPF) bolo vyvolané tromi cyklami potravinového obmedzenia nasledovaného stresom, ktoré vyvolalo vystavenie krýs HPF, ale bránilo im v prístupe k nemu po dobu 15 minút. Farmakokinetické hodnotenie všetkých zlúčenín sa získalo za rovnakých experimentálnych podmienok, aké sa použili pre behaviorálne experimenty. Topiramát sa použil ako referenčná zlúčenina, pretože selektívne blokuje BE u potkanov a ľudí. Hranice súvisiace s dávkou pre spánkové účinky antagonistov OXR sa merali s použitím polysomnografie v paralelných experimentoch. SB-649868 a GSK1059865, ale nie JNJ-10397049, selektívne znižovali BE pre HPF bez ovplyvnenia štandardného príjmu potravinových peliet v dávkach, ktoré nevyvolávali spánok. Tieto výsledky naznačujú po prvýkrát hlavnú úlohu OX1R mechanizmy v BE, čo naznačuje, že selektívny antagonizmus na OX1R môže predstavovať novú farmakologickú liečbu BE a pravdepodobne ďalších porúch príjmu potravy s kompulzívnou zložkou.

Kľúčové slová: antagonista receptora orexínu-1, antagonista receptora orexínu-2, nadmerné stravovanie, samice potkanov, nutkavá konzumácia potravy

ÚVOD

Epizódy nadmerného stravovania (BE) u ľudí sa vyznačujú nutkavou, nehomeostatickou konzumáciou nezvyčajne veľkého množstva vysoko chutného jedla (HPF) v krátkom časovom období. Aj keď nemajú hlad, subjekty jedia rýchlejšie ako obvykle, až kým sa necítia nepohodlne plné. Ako je opísané v DMS-IV-TR (Americká psychiatrická asociácia, 2000), tieto epizódy sú sprevádzané subjektívnym pocitom straty kontroly nad jedlom a sú spojené s pocitom úzkosti, znechutenia, depresie, viny za prejedanie sa a jedenia samotného kvôli nepríjemnostiam.

BE predstavuje ústredný rys nervovej bulimie, pri ktorej po epizódach BE nasleduje správanie zamerané na zamedzenie prírastku hmotnosti, ako je napríklad samonavodené zvracanie. Intenzívne a pretrvávajúce epizódy BE predstavujú typické javy, ktoré sa vyskytujú aj u jedincov trpiacich poruchou príjmu potravy (BED) (Walsh a Devlin, 1998). BED je charakterizovaný opakovanými epizódami BE v neprítomnosti kompenzačného správania, aby sa zabránilo nárastu hmotnosti. Diagnostické kritériá pre BED v DSM-IV-TR naznačujú, že epizódy BE by sa mali vyskytovať najmenej 2 dni v týždni počas 6 mesiacov. BED je spojená s významnou lekárskou a psychiatrickou komorbiditou (Javaras et al, 2008; Grucza et al, 2007; Popol et al, 2003). Odhaduje sa, že spoločnosť BE postihuje približne 5% dospelej populácie USA v určitom čase počas ich života (Fould Mathes et al, 2009) a prispieva k zhoršeniu obezity a súvisiacich patológií (Hudson et al, 2007; Heath, 1998; Devlin et al, 2000; Yanovski, 2003).

Aktuálne lieky, napríklad topiramát (McElroy et al, 2007; McElroy et al, 2009) alebo sibutramín (Appolinario et al, 2000; Wilfley et al, 2008), bolo hlásené, že znižujú BE v klinických štúdiách. Ich podávanie je však spojené s rôznymi nepriaznivými vedľajšími účinkami, ktoré pri chronickej liečbe predstavujú vážne problémy (McElroy et al, 2009; Povozníkov et al, 2003; Yager, 2008). Najmä sibutramín bol nedávno stiahnutý z európskeho trhu, zatiaľ čo topiramát je známy svojimi kognitívnymi poruchami. Vyžaduje sa inovatívne ošetrenie bulímie nervózy a BED bez závažných vedľajších účinkov.

V roku 1998 dve skupiny nezávisle identifikovali novú triedu neuropeptidov pochádzajúcich z jadier hypotalamu (sakurai et al, 1998; de Lecea et al, 1998). Tieto peptidy, nazývané orexín-A (OXA) a orexín-B (OXB) (tiež označované ako hypocretín 1 a hypocretín 2), sa vyrábajú proteolytickým spracovaním pre-pro-OX peptidu a viažu sa na dva GPCR, a to OX- 1 a OX-2 receptory (OX1R a OX2R) (tiež označované ako HcrtR1 a HcrtR2). VÔL1R je spojený s Gq / 11, zatiaľ čo štúdie využívajúce neurónové bunky naznačujú, že OX2R je naviazaný na proteíny Gq, Gs a Gi. V centrálnom nervovom systéme, OX1R a OX2R vykazujú čiastočne sa prekrývajúce, ale do značnej miery odlišné a vzájomne sa doplňujúce distribučné vzorce (Sakurai, 2007). Oblasti mozgu, ako je infralimbický kortex, hippocampus a locus coeruleus, vykazujú vysokú expresiu OX1R, zatiaľ čo OX2R je jediný receptor exprimovaný v oblúkovom jadre, tuberomamilárnom jadre a v dorzomediálnom a laterálnom hypotalame (LH). Oba receptory sú prítomné v prefrontálnom kortexe, amygdale, lôžkovom jadre stria terminis, paraventrikulárnom talamovom jadre, dorzálnom raphe, ventrálnej tegmentálnej oblasti (VTA) a laterodorsálnom tegmentálnom jadre - peduncolo pontínovom jadre (Lu et al, 2000; Marcus et al, 2001; Trivedi et al, 1998). Tieto zistenia naznačujú, že OX a ich receptory pravdepodobne hrajú širokú regulačnú úlohu v centrálnom nervovom systéme.

Fyziológia stavu bdelosti / spánku je jednou z oblastí, v ktorých sa úloha OXs najširšie študovala. V skutočnosti prerušenie signalizácie OX u knockoutovaných myší s prepro-OX viedlo k fenotypu s charakteristikami podobnými charakteristikám u pacientov trpiacich narkolepsiou, chronickou poruchou charakterizovanou nadmernou ospalosťou, ktorá môže byť spojená s veľmi vážnou paralýzou spánku, hypnagogickými halucináciami a kataplexiou. (Chemelli et al, 1999). Zdá sa, že nadmerná ospalosť je prejavom neschopnosti udržať si predĺžené bdění.

Navyše, súčasný antagonizmus oboch OX1R a OX2R alebo selektívna inhibícia OX2R má za následok vyvolanie silného hypnotického účinku (Brisbare-Roch et al, 2007; Dugovič et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

Údaje v literatúre tiež podporujú úlohu systému OX pri správaní sa pri kŕmení, pri kontrole príjmu potravy na základe homeostatiky a odmeňovania. Okrem toho, že vykazujú narkolepsický fenotyp, OX knockout myši sú tiež hypofagické v porovnaní s vrhmi kamarátov s hmotnosťou a vekom, čo naznačuje úlohu OX pri modulácii výživy a metabolizmu energie (Willie et al, 2001). Injekcia OXA do laterálnej komory potkanov počas skorej fázy svetla vyvolala zvýšenie príjmu potravy u potkanov v závislosti od dávky (sakurai et al, 1998), ktorý bol blokovaný predbežnou úpravou pomocou OX1R antagonista SB-334867 (Haynes et al, 2000; Rodgers et al, 2001). Úloha OX pri príjme potravy založenej na odmeňovaní bola zdokumentovaná nedávnou novinkou Perello et al (2010), čo ukazuje, že zvýšenie odmeňovacej hodnoty vysokotučnej stravy indukovanej ghrelínom je OX-závislé; okrem toho sa uvádza, že SB-334867 inhibuje samoaplikáciu potravín s vysokým obsahom tukov (Nair et al, 2008). Aktivácia OX1R je nevyhnutnou súčasťou reagovania na potravu, motivácie alebo oboch (Sharf et al, 2010). Okrem toho sú neuróny LH OX aktivované narážkami spojenými s konzumačnými odmenami, ako je jedlo (Harris et al, 2005), čo naznačuje potenciálnu úlohu systému OX v reakcii na vonkajšie podnety životného prostredia spojené s kognitívnymi aspektmi kŕmenia.

Posledné správy podporujú úlohu signalizácie OX v neurobehaviorálnych a motivačných účinkoch drog zneužívania (Harris et al, 2005; Borgland et al, 2006; Áno et al, 2011; pre kontrolu pozri Bonci a Borgland, 2009; Martin-Fardon et al, 2010). Blokáda OX1R znižuje etanol (Lawrence et al, 2006) a samoinjikovanie nikotínu (Holanďan et al, 2008), inhibuje opätovné uvedenie etanolu (Lawrence et al, 2006), kokaín- (Kováč et al, 2010) a vyhľadávanie morfínu (Harris et al, 2005), a zmierňuje stresom vyvolané obnovenie kokaínu (Bourel et al, 2005) a vyhľadávanie etanolu (Richards et al, 2008). Navyše, najnovšie dôkazy tiež spájali spoločnosť OX2R-selektívne mechanizmy na odmeňovanie alkoholu a hľadanie správania (Shoblock et al, 2011).

Zhromažďujú sa dôkazy o tom, že nadmerný príjem určitých potravín za určitých podmienok vyvoláva správanie a zmeny v mozgu, ktoré pripomínajú stav podobný závislosti (zlato et al, 2003; Kenny, 2011; Pelchat et al, 2004; ovos et al, 2008; Ifland et al, 2009; Gearhardt et al, 2011a). Navrhli sa aj nervové systémy, ktoré motivujú a posilňujú zneužívanie drog, aby podporili správanie spojené s nutkavým vyhľadávaním a prijímaním potravín (Johnson a Kenny, 2010; Hoebel, 1985; Volkow a Wise, 2005; Corwin et al, 2011; Gearhardt et al, 2011b; Wang et al, 2011). Tieto zistenia vyvolávajú otázku, či systém OX môže tiež zohrávať úlohu pri poruchách príjmu potravy charakterizovaných kompulzívnymi epizódami nárazového typu, ako je bulímia nervosa a BED.

Preto bola táto štúdia zameraná na skúmanie účinku duálneho OX1/VÔL2R antagonista SB-649868 (N-[((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide) (Di Fabio et al, 2011), selektívne OX1R antagonista GSK1059865 (5-bróm-N- [(2S,5S)-1-(3-fluoro-2-methoxybenzoyl)-5-methylpiperidin-2-yl]methyl-pyridin-2-amine) (Gozza et al, 2011) a selektívne OX2R antagonista JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromfenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimetyl-4-fenyl-1,3-dioxán-5-yl] močovina) (McAtee et al, 2004; Dugovič et al, 2009) v modeli BE, ktorý opísal Cifani et al (2009), v ktorých sa epizódy BE pre HPF vyvolávajú u samíc potkanov cyklami obmedzenia potravy / opätovného kŕmenia a akútneho stresu. Najprv boli vyhodnotení traja antagonisti in vitro v potkanom rekombinantnom OX1R a OX2R na stanovenie ich účinnosti a na potvrdenie ich selektivity pre dva podtypy receptorov. Potom sa vyhodnotila ich farmakokinetika (PK) a dávky schopné vyvolať hypnotické účinky sa stanovili na modeli potkana na spanie. Nakoniec boli zlúčeniny testované v definovaných dávkach v modeli BE.

MATERIÁLY A METÓDY

zver

Celý výskum zahŕňajúci zvieratá sa uskutočňoval v súlade s európskou smernicou 86/609 / EHS upravujúcou dobré životné podmienky a ochranu zvierat, ktorú uznáva taliansky legislatívny dekrét č. 116, 27. januára 1992 a podľa interného preskúmania vykonaného Výborom pre výskum a etiku zvierat GlaxoSmithKline (CARE) a podľa politiky spoločnosti v starostlivosti a používaní laboratórnych zvierat.

Drogy

SB-649868 (Di Fabio et al, 2011), GSK1059865 (Gozza et al, 2011) a JNJ-10397049 (McAtee et al, 2004) boli syntetizované v laboratóriách GSK. OXA bol dodaný firmou California Peptides Research (kat. Č. 471-99, CA). Myo [1,2-3H(N)] inozitol (NET-906, špecifická aktivita: 51 Ci / mol) a guľôčky viažuce silikát yttrium RNA (RPNQ0013) boli zakúpené od Perkin-Elmer (Taliansko). Topiramát (Topamax; Janssen-Cilag) bol zakúpený od Janssen-Cilag. Bola k dispozícii v tabletách, ktoré boli pred podaním redukované na prášok.

Pokus 1: Antagonizmus SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 v Rat OX1R a krysa OX2R

Bunková kultúra

Bunky leukémie potkanov potkanov stabilne transfekované potkanom OX1R (rOX1R) alebo krysy OX2R (rOX2R) sa kultivovali v a-MEM (Invitrogen / GIBCO) doplnenom 10% fetálnym hovädzím sérom (FBS, PAA), 100 U / ml penicilínu G, 100 U / ml streptomycínu (Pen / Strep; Invitrogen / GIBCO) a 400 μg / ml geneticínu (Invitrogen / GIBCO) pri 37 ° C s 5% CO2 vo zvlhčenej atmosfére.

Akumulácia [3H] inozitolfosfáty (IP)

Akumulácia [3H] inozitolfosfáty (IP) boli merané tak, ako bolo opísané skôr (mávať et al, 2003) s nasledujúcimi úpravami. Bunkové línie stabilne exprimujú rOX1R alebo ROX2R boli vysiate na 96-jamkové platne pre tkanivové kultúry pri 3 x 104 buniek na jamku a 1.5 x 104 bunky na jamku, v a-MEM doplnenom 10% FBS a Pen / Strep bez genetínu. Po 24 hodinách sa kultivačné médium odsalo a k bunkám sa pridalo 100 ul čerstvého média doplneného 10 μCi / ml NET-906 (Perkin-Elmer); tak sa na jamku použil 1 μCi rádioaktívne značeného inozitolu. Po 16 hodinách inkubácie boli bunky dvakrát premyté testovacím tlmivým roztokom (1 x HBSS, 20 mM HEPES (pH 7.4) plus 0.1% hovädzieho sérového albumínu a 10 mM LiCl), a to pred pridaním agonistov alebo antagonistov. Antagonisty boli inkubované počas 30 minút pri 37 ° C pred stimuláciou agonistom. Boli uskutočnené krivky závislosti koncentrácie a odozvy (CRC) OXA v rozmedzí od 0.0001 do 10 μM. Po 1 hodine inkubácie pri 37 ° C sa skúšobný tlmivý roztok odsal, pridalo sa 80 ul na jamku 0.1 M ľadovo chladnej kyseliny mravčej a bunky sa nechali inkubovať 30 minút pri teplote miestnosti. Miera 20 μl bunkového extraktu sa pridala k 80 μl perličiek kremičitanu ytria (YSi SPA; Perkin-Elmer; 12.5 mg / ml), trepala sa počas 1 hodiny pri laboratórnej teplote a nechala sa pri 4 ° C počas 2 hodín pred počítanie na scintilačnom počítači na mikrodoštičkách Packard Top-Count NXT.

Dáta boli vyjadrené ako% maximálnej agonistickej reakcie vypočítanej nasledovne:% maximálnej agonistickej reakcie = ((cpmantagonista-cpmzákladné) / CPMmaximálna odpoveď-cpmzákladné) × 100.

In vitro analýza dát

CRC boli vybavené sigmoidálnou nelineárnou regresnou analýzou s použitím softvéru GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, San Diego, CA), aby sa získal agonista EC50 (koncentrácia agonistu potrebná na získanie 50% maximálnej odpovede).

Potencia (KB= konštanta disociácie antagonistu) neprekonateľných antagonistov sa stanovila s použitím rovnice operačného modelu pre nekompetitívny antagonizmus (Kenakin et al, 2006). KB hodnota pre prekonateľných antagonistov bola vypočítaná Schildovou analýzou (Arunlakshana a Schild, 1959). Pre SB-649868 iba antagonista IC50 bola vypočítaná. Reakciu vyvolanú 1 uM OXA sme vyniesli do grafu v neprítomnosti a v prítomnosti štyroch rôznych koncentrácií antagonistu. IC50 "Antagonista" je definovaný ako koncentrácia antagonistu potrebná na 50% inhibíciu odozvy vyvolanej agonistom. Výsledky sú vyjadrené ako pEC50 (-log10 EC50), sKB (-log10 KB) alebo pIC50 (-log10 IC50) a sú uvádzané ako priemer ± SEM alebo ako priemer s 95% hranicami spoľahlivosti (95% CL) najmenej troch nezávislých experimentov. Všetky testované liečivá sa rozpustili v dimetylsulfoxide (DMSO) a ďalej sa riedili v testovacom tlmivom roztoku, aby konečná koncentrácia DMSO nepresiahla 0.5%.

Pokus 2: Stanovenie PK u samcov a samíc potkanov

Na vyhodnotenie expozície PK krvi v spánku a štúdiách BE sa analyzovali profily PK zlúčenín u samcov a samíc potkanov za rovnakých experimentálnych podmienok ako experimenty so spánkom a BE. Profily PK sa skúmali po podaní sondou 3 mg / kg SB-649868 samiciam a samcom potkanov, intraperitoneálnemu podaniu 10 mg / kg samiciam a 5 mg / kg samcom potkanov JNJ-10397049 a po podaní žalúdočnou sondou samice potkanov a intraperitoneálne podanie samcom potkana 10 mg / kg GSK1059865. Vzorky krvi sa odoberali femorálnou žilou v intervaloch do 4 hodín po podaní. Vzorky mozgu boli odobraté na konci experimentu. Koncentrácia SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 vo vzorkách krvi a mozgu sa stanovila použitím metódy založenej na zrážaní proteínov s následnou analýzou HPLC-MS / MS. Nekompartmentové PK parametre sa získali z profilov časovej koncentrácie krvi pomocou softvérového balíka WinNonlin v.4.0 (Pharsight, Mountain View, CA). PK parametre sú vyjadrené ako priemer ± SD (Prečítajte si a Braggio, 2010).

Pokus 3: Účinok SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 na model spánku potkana

zver

Samce potkanov Sprague – Dawley (275 - 300 g; Charles River, Calco, Como, Taliansko) boli umiestnené jeden týždeň pred 12-hodinovým cyklom svetlo-tma (svetlo o 0300 h) 1 týždeň pred operáciou. Prístup k potrave a vode bol povolený podľa chuti, Aby sa zhromaždili biopotenciálne signály, bol zvieratám implantovaný miniatúrny viackanálový telemetrický vysielač (TL10M3-F40-EET; Data Sciences Int.). Dve elektródy boli trvalo pripevnené zubným cementom k lebke, aby sa zaznamenal kortikálny elektroencefalogram (EEG). Boli priamo v kontakte s USA tvrdá mater cez dve vyvŕtané diery v oblasti fronto-parietálnej oblasti. Na kostrové svaly krku boli pripevnené ďalšie dve elektródy na zaznamenávanie elektromyogramu (EMG) alebo v periorbitálnej oblasti oka na zaznamenávanie elektrooklogramu (EOG).

záznam

Po zotavení z chirurgického zákroku sa zvieratá držali vo svojej domácej klietke v prostredí s kontrolovanou teplotou (21 ± 1 ° C) s prístupom k potrave a vode. podľa chuti, Implantované zvieratá vykazovali normálny behaviorálny repertoár ihneď po zotavení z chirurgického zákroku. Aby však bolo možné obnoviť normálne vzorce spánku, zvieratá sa použili po 3 týždňoch. Vyššie opísané podmienky prostredia sa udržiavali počas štúdií spánku. Po celú dobu trvania testu zostali voľne sa pohybujúce zvieratá vo svojich domácich klietkach na individuálnych prijímačoch. Signály EEG a EMG alebo EOG boli zaznamenávané nepretržite pomocou DSI Dataquest ART. Stopa EEG, rozdelená do 10-s epoch, bola digitálne transformovaná (FFT transformácia), aby sa získali výkonové spektrá δ, θ, αa β pásy na rozlíšenie troch rôznych vzorcov aktivity u potkanov (bdelý, NREM spánok a REM spánok). Značky pridelené automatizovaným bodovacím systémom (Sleep stage, DSI) boli prenesené do digitálneho signálu EEG a následne potvrdené vizuálnym preskúmaním stôp EEG a EMG / EOG vyškolenými operátormi, ktoré boli slepé voči liečbe drogami. Analýza parametrov spánku zahŕňala: latencia do spánku NREM (časový interval do prvých šiestich po sebe idúcich epoch spánku NREM po injekcii), latencia do spánku REM (časový interval do prvej epizódy REM spánku po injekcii), spánok NREM, REM spánok a celková čas na spanie.

Liečba drogami

Liečba liečivami sa uskutočňovala podľa randomizovaného párového krížového usporiadania, kde v samostatných experimentálnych reláciách dostalo každé zviera ošetrenie vehikulom alebo liečivom. Potkany boli ošetrené experimentálnou zlúčeninou alebo jej príslušným vehikulom v objeme 2 ml / kg, 6 hodín po vypnutí svetla (cirkadiánny čas (CT) 18). Záznamy sa robili pre nasledujúce 3-hodinové testovacie obdobie. SB-649868 sa rozpustil v 0.5% HPMC (hydroxypropyl-metylcelulóza) (hm./obj.) V destilovanej vode a podával sa žalúdočnou sondou v dávkach 3 a 10 mg / kg. JNJ-10397049 bol rozpustený v mygliole 812N a bol podávaný intraperitoneálne v dávkach 5 a 25 mg / kg. GSK1059865 sa rozpustil v 0.5% HPMC (hm./obj.) V destilovanej vode a podával sa intraperitoneálne v dávkach 5 a 25 mg / kg.

Analýza dát

Všetky údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM. Výsledky sa analyzovali pomocou jednosmernej analýzy rozptylu (ANOVA). Post-hoc porovnania sa uskutočňovali pomocou Dunnettovho testu. Štatistická významnosť bola stanovená na P

Pokus č. 4: Stravovanie s odleskom

zver

Boli použité samice krýs Sprague-Dawley (Charles River). Ich telesná hmotnosť bola na začiatku experimentov 225 - 250 g. Potkany sa aklimatizovali do jednotlivých klietok v 12-hodinovom cykle svetlo / tma (svetlo o 0800 h) s podľa chuti 2 týždne pred pokusmi potrite krmivom a vodou. Boli udržiavané v miestnosti s konštantnou teplotou (20 - 22 ° C) a vlhkosťou (45 - 55%). Potkany boli chované v jednotlivých klietkach s kovovými stenami; podlaha a predná stena boli vyrobené z kovovej mriežky. Rozmery dna klietky boli 30 cm x 30 cm; klietka bola vysoká 30 cm. V prednej stene klietky boli prítomné predné dvere (30 cm x 20 cm) zložené z kovovej mriežky, aby sa umožnil prístup do vnútra klietky. Zvyšná časť prednej steny bola vybavená nápojovou byretou.

diéta

Zvieratám sa ponúkli štandardné potravinové pelety pre potkany, 4RF18 (Mucedola; Settimo Milanese, Milano, Taliansko; 2.6 kcal / g). HPF bola pasta pripravená zmiešaním čokoládového krému Nutella (Ferrero, Alba, Torino, Taliansko) (5.33 kcal / g; 56%, 31% a 7% z uhľohydrátov, tukov a bielkovín), mletých potravinových peliet ( 4RF18; Mucedola; Settimo Milanese) a vodu v nasledujúcom hmotnostnom percentuálnom pomere: 52% Nutella, 33% potravinárskych peliet a 15% vody. Dieta HPF mala kalorický obsah 3.63 kcal / g. Vo vnútri nádoby z kovovej mriežky, ktorá bola zavesená na prednej stene klietky, boli ponúkané štandardné pelety; bol odstránený z klietky, aby sa zmerala jeho hmotnosť, aby sa stanovil príjem potravinových peliet. HPF bol ponúkaný v šálke kávy; rukoväť pohára bola vložená do kovovej mriežky prednej steny klietky a pripevnená k stene.

Stresový postup

Po dobu 15 minút sa čínsky kávový šálka obsahujúci HPF umiestnil do nádoby z kovovej mriežky, ktorá sa zavesila na prednú stenu klietky. Za týchto podmienok zviera mohlo vidieť pohár, v ktorom dostalo HPF v dňoch 5, 6, 13 a 14 prvých dvoch cyklov, bolo schopné vidieť samotný HPF a tiež cítiť jeho zápach. V tomto 15-minútovom období sa krysa zapojila do opakovaných pohybov predných labiek, hlavy a trupu, ktorých cieľom bolo získanie HPF, ale nedokázala ho dosiahnuť.

To spôsobilo mierne stresujúci stav, ktorý spôsobil významné zvýšenie hladiny kortikosterónu v sére (Cifani et al, 2009). Po 15 minútach sa pohárik umiestnil do klietky potkanov stresových skupín, takže pre nich bol prístupný HPF.

Liečba drogami

V deň 25 boli zlúčeniny alebo príslušné vehikulum podané pred prístupom k HPF. SB-649868 sa rozpustil v 0.5% HPMC (hm./obj.) V destilovanej vode a podával sa žalúdočnou sondou v dávkach 1 a 3 mg / kg. Topiramát sa rozpustil v 0.5% HPMC (hm./obj.) V destilovanej vode a podával sa žalúdočnou sondou v dávke 60 mg / kg. JNJ-10397049 bol rozpustený v 0.5% HPMC (hm./obj.) V destilovanej vode a bol podávaný intraperitoneálne v dávkach 1 a 3 mg / kg. GSK1059865 sa rozpustil v 0.5% HPMC (hm./obj.) V destilovanej vode a podával sa žalúdočnou sondou v dávkach 10 a 30 mg / kg. Všetky lieky alebo ich vehikulum boli podané 1 hodinu pred prístupom k HPF.

Pokus 4A: Účinok SB-649868 a topiramátu

Na vyhodnotenie úlohy antagonistov OXR v BE sa v našom modeli BE testoval neselektívny antagonista OXR, SB-649868.

Zvieratá boli rozdelené do štyroch skupín po 27 zvieratách, ktoré sa porovnávali podľa telesnej hmotnosti a denného príjmu potravy: (1) skupina bez obmedzenia a bez vystavenia stresu (NR + NS); (2) skupina bez obmedzenia a bez vystavenia stresu (R + NS); (3) skupina bez obmedzenia a vystavená stresu (NR + S); a (4) obmedzená skupina a skupina vystavená stresu (R + S). Keď boli potkany zaradené do jednej z týchto skupín, zostali v tejto skupine počas štúdie. Potkany vystavené stresu boli aklimatizované v miestnosti odlišnej od miestností, ktoré neboli vystavené stresu. Potkany boli vystavené trom po sebe nasledujúcim 8-dňovým cyklom, po ktorých nasledoval záverečný test v deň 25 (Tabuľka 1):

Tabuľka 1 

Program prijatý na evokovanie nadmerného stravovania
  1. skupina NR + NS mala čau podľa chuti počas 4 dní, v dňoch 5 a 6 dostávali chow + HPF na 2 hodiny; v dňoch 7 a 8 mali čau podľa chuti; a 25. deň neboli vystavení stresu;
  2. druhá skupina mala chow a HPF ako NR + NS, ale v deň testu (deň 25) boli vystavené stresu (NR + S);
  3. tretia skupina (R + NS) mala stravu obmedzenú na 66% normálneho príjmu po dobu 4 dní, bola im ponúknutá strava a HPF (2 hodiny) v dňoch 5 a 6 a iba strava v dňoch 7 a 8; 25. deň neboli vystavení stresu.
  4. skupina R + S mala strava obmedzenú na 66% normálneho príjmu po dobu 4 dní, bola im ponúknutá strava a HPF (2 hodiny) v dňoch 5 a 6 a iba strava v dňoch 7 a 8; a 25. deň boli vystavení stresu.

Osemdňový cyklus sa opakoval trikrát, ale v treťom cykle zvieratá nemali prístup k potravinám HPF.

V deň 25 bola každá skupina 27 potkanov rozdelená do troch podskupín a ošetrené vehikulom SB-649868, 1 alebo 3 mg / kg, podaním žalúdočnou sondou 1 h pred prístupom k HPF.

Príjem HPF bol vyjadrený ako priemerný kcal / kg požitia ± SEM; Príjem HPF sa meral 15, 30, 60 a 120 minút po začiatku prístupu. Príjem potravných peliet sa meral iba po 120 minútach, pretože sa zistili predchádzajúce štúdie, ktoré ukazujú, že príjem potravných peliet bol veľmi malý, a aby sa zabránilo narušeniu zvierat počas testu.

Topiramát, používaný ako referenčná zlúčenina pre túto experimentálnu paradigmu (Cifani et al, 2009), bola testovaná na rovnakých potkanoch 10 dní po ukončení experimentu SB-649868. Z týchto 108 zvierat bolo 72 rozdelených do rovnakých štyroch skupín (18 zvierat pre každú skupinu) opísaných vyššie. Po jednom dni voľna na konci prvého testu dostali tieto skupiny potkanov ďalší osemdňový cyklus: Skupiny NR + NS a NR + S mali 8 dní chow podľa chuti, zatiaľ čo skupiny R + NS a R + S mali 4-dňové krmivo obmedzené na 66% normálneho príjmu, po ktorom nasledovali 4-dňové krmivo. podľa chuti, V tomto dodatočnom cykle nemali všetky skupiny prístup k HPF. Nasledujúci deň boli skupiny NR + S a R + S vystavené stresu, zatiaľ čo skupiny NR + NS a R + NS neboli vystavené stresu. V tento deň sa topiramát (60 mg / kg) alebo jeho vehikulum podali žalúdočnou sondou 1 hodinu pred prístupom k HPF.

Pokus 4B: Účinok JNJ-10397049 a GSK1059865

Na vyšetrenie OXR zapojeného do znižovania epizód BE je selektívny OX2R antagonista, JNJ-10397049 a selektívny OX1Antagonista R, GSK1059865, bol testovaný v našom modeli BE.

Ďalších 54 samíc potkanov, rozdelených do dvoch skupín (NR + NS a R + S) 27 potkanov, sa podrobilo rovnakému experimentálnemu postupu ako v experimente 4A. V tomto experimente boli použité iba dve skupiny potkanov, pretože obidve potkany NR + S a R + NS nevykazujú BE. V deň testu (deň 25), 1 hodinu pred prístupom k HPF, boli potkany intraperitoneálne ošetrené JNJ-10397049 (1 a 3 mg / kg) alebo jeho vehikulom.

Po jednom dni voľna na konci testu JNJ-10397049 bola rovnaká skupina potkanov podrobená ďalšiemu 8 dňovému cyklu nasledovanému v deň 10 (ako je opísané v predchádzajúcom experimente) ošetrením GSK1059865. GSK1059865 (10 a 30 mg / kg) alebo jeho vehikulum boli podávané žalúdočnou sondou 1 hodinu pred prístupom k HPF.

Analýza dát

Všetky údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM a každá hodnota odráža priemerný počet zvierat na skupinu opísaný v legendách. Dáta boli analyzované dvojsmernou ANOVA s porovnaním medzi subjektami pre experimentálne skupiny alebo liečenia liečivami a porovnaním medzi pacientmi pre čas pozorovania. Post-hoc porovnania sa uskutočnili pomocou Bonferroniho testu. Štatistický význam bol stanovený na P

VÝSLEDKY

Pokus 1: Antagonizmus SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 pri ROX1R a ROX2R

OXA (0.1 nM - 10 μM) zvýšila [3H] akumulácia IP v závislosti na koncentrácii s pEC50 hodnota 7.79 ± 0.04 (n= 16) a 7.68 ± 0.04 (n= 16) pri ROX1R a ROX2R, resp. Na ROX1R, JNJ-10397049 (1 uM - 33 μM; Obrázok 1a) a GSK1059865 (0.3 nM - 10 nM; Obrázok 2a) vyvolali neprekonateľný antagonizmus s pravostranným posunom OXA EC v závislosti od dávky50 a sprievodné zníženie maximálnej odpovede agonistu. Vypočítaná strKB hodnoty boli 5.73 ± 0.16 (n= 3) a 8.77 ± 0.12 (n= 3) pre JNJ-10397049 a GSK1059865, v danom poradí. SB-649868 (0.1, 0.3, 0.6 a 1 nM) (Obrázok 3a) viedli k významnému zníženiu maximálnej odpovede OXA bez posunu agonistu EC50, Odhadované pIC50 hodnota bola 9.46 ± 0.02 (n= 3). Na ROX2R JNJ-10397049 (10 nM – 0.3 μM) (Obrázok 1b) a GSK1059865 (0.1–3.3 μM) (Obrázok 2b) vytvoril klasický preťahovateľný profil s paralelným posunom OXA EC doprava50 bez potlačenia maximálnej odpovede agonistu. Svahy získané Schildovou regresnou analýzou boli 1.17 (95% CL 0.92–1.42) a 0.86 (95% CL 0.71–1.00) pre JNJ-10397049 a GSK1059865, v danom poradí, a neboli štatisticky odlišné od jednej (P> 0.05). Obmedzením svahov k jednej, strKB hodnoty boli 8.49 (95% CL 8.34 - 8.63; n= 3) a 6.90 (95% CL 6.80 - 6.99; n= 3) pre JNJ-10397049 a GSK1059865, v danom poradí. SB-649868 (0.1–3.3 nM) (Obrázok 3b) spôsobili posun OXA EC doprava závislý od dávky50, sprevádzané znížením maximálnej odpovede agonistu. Použitím operačného modelu pre nekompetitívnu analýzu antagonizmu, ako je opísané v materiáloch a metódach, apKB hodnota 9.35 ± 0.15 (n= 3).

Obrázok 1 

[3H] akumulácia inozitolfosfátov (IP) vyvolaná krivkami závislosti koncentrácie a odozvy (CRC) orexínu-A (OXA) (•) v bunkách potkanej bazofilnej leukémie (RBL) exprimujúcich: potkaní OX1R (rOX1R) (a) v prítomnosti 1 (A), 3.3 (▾), 10 ...
Obrázok 2 

[3H] akumulácia inozitolfosfátov (IP) vyvolaná krivkami závislosti koncentrácie a odozvy (CRC) orexínu-A (OXA) (•) v bunkách potkanej bazofilnej leukémie (RBL) exprimujúcich: rOX1R (a) v prítomnosti 0.3 (▴), 1 (▾), 3.3 (♦) ...
Obrázok 3 

[3H] akumulácia inozitolfosfátov (IP) vyvolaná krivkami závislosti koncentrácie a odozvy (CRC) orexínu-A (OXA) (•) v bunkách potkanej bazofilnej leukémie (RBL) exprimujúcich: potkaniu rOX1R (rOX1R) (a) v prítomnosti 0.1 (□), 0.3 (A), ...

Pokus 2: Stanovenie PK u samcov a samíc potkanov

Stanovenia PK u samcov potkanov sa skúmali za rovnakých experimentálnych podmienok ako v experimente 3 a sú znázornené v Tabuľka 2.

Tabuľka 2 

Farmakokinetické parametre SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 u samcov potkanov Sprague – Dawley.

Cmax SB-649868 pri 3 mg / kg bol 333 ± 52 ng / ml a AUC 1260 ± 262 ng*h / ml.

Cmax JNJ-10397049 pri 5 mg / kg bol 14.2 ± 1.0 ng / ml a AUC 64 ± 4.3 ng*h / ml.

Cmax GSK1059865 pri 10 mg / kg bol 366 ± 70 ng / ml a AUC 1290 ± 320 ng*h / ml.

Stanovenia PK u samíc potkanov sa skúmali za rovnakých experimentálnych podmienok ako v experimente 4 a sú znázornené v Tabuľka 3.

Tabuľka 3 

Farmakokinetické parametre SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 u samíc potkanov Sprague – Dawley

Cmax SB-649868 pri 3 mg / kg bol 572 ± 115 ng / ml a AUC 1708 ± 331 ng*h / ml.

Cmax JNJ-10397049 pri 10 mg / kg bol 369 ± 97 ng / ml a AUC 457 ± 224 ng*h / ml.

Cmax GSK1059865 pri 10 mg / kg bol 268 ± 29 ng / ml a AUC 768 ± 46 ng*h / ml.

Pokus 3: Účinok SB-649868, JNJ-10397049 a GSK1059865 na model spánku potkana

Hypnotický profil antagonistov OXR sa vyhodnotil v 3-hodinovom období v aktívnej fáze potkana, pričom sa zaznamenávacia fáza začala pri CT 18 (zhasnuté svetlo pri CT 12) cyklu svetlo-tma potkana. CT 18 bol špecificky vybraný tak, aby umožnil maximálnemu oknu vyhodnotiť hypnotické účinky zlúčenín.

V týchto experimentálnych podmienkach je duálny OX1/VÔL2R antagonista SB-649868 (3 a 10 mg / kg, pomocou sondy) vyvolal silné zníženie bdelosti (F (2, 21) = 22.9; P<0.01) a pokles latencie spánku (F (2, 21) = 9.11; P<0.01) v porovnaní s kontrolnou skupinou. Dunnettov test po ANOVA ukázal štatisticky významný účinok pri 3 a 10 mg / kg (P<0.01) v obidvoch parametroch spánku. Analýza spánkových vzorcov naznačuje zvýšenie spánku NREM aj REM pri obidvoch dávkach (Tabuľka 4a).

Tabuľka 4a 

Účinok SB-649868 (podľa Gavage) na parametre spánku u potkanov

Selektívny OX2R antagonista JNJ-10397049 (5 a 25 mg / kg, intraperitoneálne) vykazoval hypnotický účinok, ako bolo zistené znížením bdelosti (F (2, 14) = 18.8; P<0.01) a latencia spánku (F (2, 14) = 4.8; P<0.05). Dunnettov test po ANOVA ukázal, že pokles bol štatisticky významný pri 5 aj 25 mg / kg (P<0.01 pre bdelosť a P<0.05 pre latenciu spánku). Pri obidvoch dávkach sa pozorovalo zvýšenie spánku NREM (P<0.01), ale nebol pozorovaný žiadny účinok na REM spánok (Tabuľka 4b).

Tabuľka 4b 

Účinok JNJ-10397049 (ip) na parametre spánku u potkanov

Selektívny OX1R antagonista GSK1059865 (5 a 25 mg / kg, intraperitoneálne) vyvolal trend znižovania bdelosti (F (2, 14) = 3.27; P<0.05) a latencia spánku (F (2, 20) = 1.73; P> 0.05). Analýza spánkových vzorcov ukázala zvýšenie iba v spánku NREM, štatisticky významné pri najvyššej testovanej dávke (P<0.05 Dunnettov test po ANOVA); v REM spánku nebol pozorovaný žiadny účinok (Tabuľka 4c).

Tabuľka 4c 

Účinok GSK1059865 (ip) na parametre spánku u potkanov

Pokus 4A. BE: Účinok SB-649868 a topiramátu

ANOVA odhalila veľmi významný rozdiel v 2-h príjme HPF u štyroch skupín potkanov po podaní vehikula (F (3, 32) = 13.81; P<0.01). Ako je uvedené v Obrázok 4po podaní vehikula bol príjem HPF v skupine R + S výrazne vyšší ako v kontrolnej skupine (NR + NS). Príjem HPF R + S potkanov bol veľmi výrazný v prvých 15 minútach prístupu k nim; Príjem HPF skupiny NR + S sa významne nelíšil od príjmu kontrol (NR + NS), čo naznačuje, že stres nebol dostatočný na vyvolanie BE. Navyše, príjem HPF v skupine R + NS sa významne nelíšil od príjmu kontrol (NR + NS), čo naznačuje, že cykly potravinového obmedzenia nie sú dostatočné na vyvolanie BE. Preto môže byť BE spôsobená jedinečnou interakciou medzi diétou a stresom.

Obrázok 4 

Účinok SB-649868 (1 a 3 mg / kg, sondou) alebo jeho vehikula na príjem veľmi príjemného jedla (HPF). Hodnoty sú vyjadrené ako priemer ± SEM deviatich potkanov. **P<0.01, rozdiel od potkanov ošetrených vehikulom; ak nie je uvedené, ...

Príjem štandardných potravinových peliet bol veľmi malý (asi 3–4% z celkového príjmu kalórií v 2-hodinovom teste) a nebol ovplyvnený obmedzením potravy, stresom ani kombináciou oboch.

Ako je zobrazené v Obrázok 4SB-649868 významne znížil príjem HPF v skupine R + S (F (2, 24) = 18.63; P<0.01), ale nie v iných skupinách: NR + NS (F (2, 24) = 0.91; P> 0.05); R + NS (F (2, 24) = 0.16; P> 0.05); NR + S (F (2, 24) = 1.1; P> 0.05). Post-hoc porovnania odhalili, že účinok SB-649868 v skupine R + S bol štatisticky významný vo všetkých časových bodoch v reakcii na najvyššiu dávku 3 mg / kg. Dávka 1 mg / kg v skupine R + S vykazovala tendenciu k znižovaniu, ktorá nebola štatisticky významná.

Topiramátový test odhalil veľmi významný rozdiel v 2-hodinovom príjme HPF (F (3, 32) = 3.93; P<0.01) rôznych skupín po podaní vehikula. Topiramát podávaný pri 60 mg / kg selektivity znížil príjem HPF (F (1, 16) = 6.57; P<0.01) v skupine R + S (Obrázok 5), ale nie v skupinách NR + NS, NR + S a R + NS. Údaje skupín NR + S a R + NS nie sú uvedené.

Obrázok 5 

Účinok topiramátu (60 mg / kg, sondou) alebo jeho vehikula na príjem veľmi príjemnej potravy (HPF). Hodnoty sú vyjadrené ako priemer ± SEM deviatich potkanov. *P<0.05, rozdiel od potkanov liečených vehikulom; ak nie je uvedené, rozdiel ...

Pokus 4B. BE: Účinok JNJ-10397049 a GSK1059865

Rovnako ako v predchádzajúcom experimente ANOVA potvrdila, že skupina R + S vykazovala významné zvýšenie príjmu HPF (F (1, 16) = 16.17; P<0.01). JNJ-10397049 neovplyvnil kŕmenie ani v skupine NR + NS (F (2, 26) = 0.23; P> 0.05) alebo v skupine R + S (F (2, 24) = 0.49; P> 0.05) (Obrázok 6a).

Obrázok 6 

Účinok JNJ-10397049 (1 a 3 mg / kg, intraperitoneálne) (a) alebo GSK1059865 (10 a 30 mg / kg, pomocou sondy) (b) na príjem vysoko chutnej potravy (HPF). Hodnoty sú vyjadrené ako priemer ± SEM deviatich potkanov. *P<0.05, rozdiel ...

Získané výsledky ukazujú, že OX2Antagonizmus R neovplyvnil stravovacie správanie. Preto bol predtým pozorovaný účinok pri SB-649868 pravdepodobne sprostredkovaný prostredníctvom OX1R mechanizmy. Na potvrdenie tohto nálezu, selektívny OX1Testoval sa R ​​antagonista GSK1059865 (10 a 30 mg / kg). ANOVA vykazovala významný rozdiel medzi skupinami v reakcii na ošetrenie vehikulom (F (1, 16) = 17.1; P<0.01), čo potvrdzuje účinok BE v skupine R + S. GSK1059865 (v dávkach 10 a 30 mg / kg) neovplyvnil kŕmenie v skupine s NR + NS (F (2, 24) = 0.10; P> 0.05). V skupine R + S vykazovala ANOVA významný účinok (F (2, 23) = 4.20, P<0.05) (Obrázok 6b). Post-hoc porovnania odhalili, že účinok GSK1059865 v skupine R + S v dávkach 10 a 30 mg / kg bol štatisticky významný 15, 30 a 60 minút po voľnom prístupe k HPF.

DISKUSIA

Veľký počet dôkazov naznačuje, že diéta, stres a negatívne afektívne stavy predstavujú možné spúšťače BE u pacientov trpiacich BED alebo bulímiou nervózou (Wardle et al, 2000; Freeman a Gil, 2004). Obdobie diéty je v histórii jedlých ľudí často bežné, hoci sa zdá, že samotný hlad nie je dostatočný na to, aby vyvolal BE v neprítomnosti stresu a negatívneho afektívneho stavu (polievať et al, 1994; Vody et al, 2001). Značný dôkaz naznačuje, že BE môže byť spôsobená jedinečnou interakciou medzi diétou a stresom; preto môže byť za jeho zrážanie a udržiavanie zodpovedný environmentálny stres a história cyklických potravinových obmedzení (STIC et al, 2001; crowther et al, 2001; wolff et al, 2000). Podľa toho sú opakujúce sa obmedzenia potravín neustále najsilnejším prediktorom prejedania sa v reakcii na stres (Wardle et al, 2000).

Kombinácia diéty a stresu tiež hrá dôležitú úlohu vo vývoji BE v našom predklinickom modeli. V modeli vyvinutom spoločnosťou Cifani et al (2009), BE je vyvolané yo – yo stravovaním a stresovým vystavením HPF. V tomto modeli sú samice potkanov vystavené opakovaným cyklom reštrikcie a stresujúcemu postupu charakterizovanému vystavením zvierat HPF bez možnosti prístupu k nim.

Ako sa uvádza v úvode, mechanizmy OX sa podieľajú na kontrole homeostatického a odmeňovania založeného na stravovaní, ako aj na motivácii k zneužívaniu drog (Bonci a Borgland, 2009). V súlade s myšlienkou, že nervové systémy, ktoré motivujú a posilňujú zneužívanie drog, môžu tiež ovplyvňovať správanie spojené s vyhľadávaním a prijímaním potravín (Gearhardt et al, 2011b), táto štúdia skúmala schopnosť antagonistu OXR blokovať epizódy BE a vyhodnotiť účasť OX1 a OX2 mechanizmy na kontrolu epizód BE.

Z tohto dôvodu majú tri zlúčeniny uvedené v literatúre odlišnú selektivitu vs OX1 a OX2 testovali sa ľudské receptory: duálny OX1/VÔL2R antagonista (SB-649868), selektívny OX2R antagonista (JNJ-10397049) a selektívny OX1R antagonista (GSK1059865). Aby sa použili farmakologicky relevantné dávky, najprv boli vyhodnotení traja OXR antagonisti in vitro v potkanom rekombinantnom OX1R a OX2R na stanovenie účinnosti a potvrdenie ich selektivity v tomto živočíšnom druhu. Rôzne OX1/VÔL2Selektivita R bola potvrdená u potkanov pomocou [3H] inozitolový test.

Na vyhodnotenie expozície PK krvi na podporu spánku a BE sa analyzovali profily PK zlúčenín u samcov a samíc potkanov, pretože to bolo pohlavie použité v pokusoch so spánkom a BE.

Dávky schopné vyvolať hypnotické účinky sa potom stanovili na modeli potkana na spanie. Nakoniec boli zlúčeniny testované v definovaných dávkach v modeli BE.

OX1R a OX2V literatúre sa uvádza, že antagonisty R sa podieľajú na kontrole spánku, najmä na vyvolanie hypnotických účinkov (Di Fabio et al, 2011; Gozza et al, 2011; Dugovič et al, 2009). V predklinickom modeli hypnotického spánku u samcov potkanov získané výsledky ukázali, že duálny OX1/VÔL2Antagonista R, SB-649868, vyvolal silný hypnotický účinok, tak na schopnosť vyvolať, ako aj na udržanie spánku, a dosiahol štatisticky významný účinok pri 3 mg / kg. Podobne ako v prípade SB-649868, OX2Antagonista R JNJ-10397049 preukázal dobrý hypnotický účinok so signifikantným skrátením času prebudeného pri 5 mg / kg. Naopak, OX1R antagonista GSK1059865 vykazoval veľmi zlú hypnotickú schopnosť indukovať a udržiavať spánok. Tieto zistenia sú v súlade s ostatnými správami naznačujúcimi, že OX2R môže byť dôležitejšie ako OX1R pri sprostredkovaní účinku OX na spánok (Sakurai, 2007; Brisbare-Roch et al, 2007; Malherbe et al, 2009; Dugovič et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

SB-649868, testovaný v štyroch rôznych podmienkach stresu a potravinového obmedzenia (NR + NS, R + NS, NR + S, R + S), bol schopný znížiť príjem HPF iba v skupine R + S. Pri dávke 3 mg / kg mal SB-649868 podobný účinok, aký sa pozoroval pri topiramáte. Rovnako ako v prípade topiramátu SB-649868 nemodifikoval príjem HPF za iných podmienok obmedzenia potravy a stresu.

OX2Antagonista R, JNJ-10397049, testovaný za rovnakých podmienok, nevykazoval žiadny účinok na príjem HPF vo všetkých štyroch testovaných podmienkach.

Tieto výsledky jasne naznačujú, že OX1R sa podieľa na kontrole epizód BE a navrhuje potenciálnu úlohu OX1R antagonisty na zvrátenie epizód BE vyvolaných stresom a obmedzenou stravou. Ak chcete overiť túto hypotézu, selektívny OX1R antagonista GSK1059865 sa hodnotil u obmedzených a stresovaných zvierat. Získané výsledky potvrdili, že OX1R antagonisti inhibovali zvýšenie príjmu HPF u potkanov R + S, bez ovplyvnenia konzumácie potravy u kontrol (NR + NS).

Neexistencia účinku JNJ-10397049 sa nedá pripísať nedostatočnej expozícii zlúčeninám u zvierat podrobených modelu BE. Hodnotenie PK JNJ-10397049 ukázalo PK rozdiel medzi pohlaviami, keď boli samice viac exponované ako samce potkanov pri rovnakej dávke JNJ-10397049 (10 mg / kg). Odhadované hodnoty AUC boli 64 ng*h / ml u samcov potkanov vs 457 ng*h / ml u samíc potkanov (približne sedemkrát vyššia). Preto sa dospelo k záveru, že expozícia na zvieratách v modeli BE pri 1 a 3 mg / kg JNJ-10397049 bola výrazne vyššia ako expozícia dosiahnutá v štúdii spánku pri 5 a 25 mg / kg. Na druhej strane sa nepozorovali žiadne pohlavné rozdiely v PK oboch SB-649868 a GSK1059865 a expozície týmto dvom zlúčeninám sa prekrývali u samcov a samíc potkanov.

Ako sa uvádza v úvode, stres je kľúčovým determinantom BE. V poslednom desaťročí bolo vytvorených niekoľko súborov údajov, ktoré podporujú úlohu OX peptidov vo vysoko vzrušujúcich stavoch, vrátane stresu, pričom tieto sú spojené s podstatne vyššou mierou prenosu OXergických neurotransmisií. OX neuróny v perifornicko-dorzomediálnom hypotalame boli navrhnuté na sprostredkovanie aktivácie stresu (Harris a Aston-Jones, 2006, pre prehľad pozri Koob, 2008). OXA z tejto hypotalamickej oblasti pravdepodobne aktivuje neuróny exprimujúce CRF v paraventrikulárnom jadre hypotalamu a v centrálnom jadre amygdaly (sakamoto et al, 2004). V súlade s tým OX1R antagonisty inhibujú opätovné získanie etanolu a sacharózy vyvolané farmakologickým stresorom yohimbínom (Richards et al, 2008) a OXA obnovuje správanie pri vyhľadávaní kokaínu (Bourel et al, 2005). V poslednej dobe, Kuwaki (2011) zistili, že systém OX je jedným z podstatných modulátorov nervových obvodov, ktoré riadia autonómne funkcie a emočné správanie. Skoršie zistenia podľa Johnson et al (2010) ukázali, že selektívny OX1R antagonista SB334867 zoslabil anxiózne správanie a blokoval zvýšenie lokomócie, srdcovej frekvencie a reakcií krvného tlaku vyvolané provokáciou laktátom sodného u potkana.

Niekoľko štúdií naznačuje, že u pacientov s bulímiou nervózou a BED môže existovať zmenená regulácia striatálneho dopamínu (DA) (Bello a Hajnal, 2010; Broft et al, 2011; Wang et al, 2011). Štúdie Hoebela a spolupracovníkov (prehľad pozri v časti Avena a Bocarsly, 2011) odhalili zmeny v striatálnom uvoľňovaní DA a väzbe na receptor, podobné tým, ktoré sa pozorovali v reakcii na zneužívané lieky. Neuropeptidy, ktoré sa tvoria v LH, môžu modulovať aktivitu VTA-DA a striatálnych neurónov. Neóny obsahujúce OX vyčnievajú z LH do VTA, kde OX1R hrá kľúčovú úlohu pri regulácii mesolimbického DA prenosu a odmeňovania rôznych drog zneužívania a potravín (Cason et al, 2010; Uramura et al, 2001; Zheng et al, 2007). Epizódy BE môžu byť navyše ovládané špecifickým vplyvom na procesy odmeňovania a posilňovania HPF. V tejto súvislosti je zaujímavé poznamenať, že OX neuróny v LH boli navrhnuté na sprostredkovanie aktivácie odmeňovania (prehľad pozri v článku Koob, 2008). Preto sa predpokladá, že OX neuróny v LH sú aktivované narážkami spojenými s odmenami, ako sú potraviny alebo lieky, a stimulácia neurónov OX v LH obnovuje hľadanie liekov u potkanov (Harris et al, 2005).

Naša skupina nedávno preukázala prostredníctvom predklinického prístupu MRI, že OX1R skôr ako OX2R selektívne moduluje mezolimbickú oblasť mozgu a kortikálnu časť ostrovčeka, oblasti spojené s odmeňovaním spracovania (Gozza et al, 2011). Tieto údaje potvrdzujú a rozširujú predchádzajúce zistenia, ktoré OX1R hrá úlohu pri spracovaní odmien a zrážaní správania pri hľadaní drog (Bourel et al, 2005; Vavrinca et al, 2006; Holanďan et al, 2008; Kováč et al, 2010). Bude teda potrebné ďalej pracovať na vyhodnotení, či OX vyvoláva potlačujúci účinok na BE1R antagonisty súvisia s ich vplyvom na stresové alebo odmeňovacie mechanizmy alebo na obidva.

Na záver, výsledky získané v tejto štúdii s použitím troch antagonistov OXR s odlišnou selektivitou pre OX1R vs OX2R jasne demonštroval rozdielnu úlohu OXR pri kontrole BE epizód a pri modulácii spánku. Naše údaje potvrdili hlavnú úlohu spoločnosti OX2R mechanizmy pri ovládaní spánku. Okrem toho prvýkrát ukazujú, že OX1R mechanizmy hrajú hlavnú úlohu pri kontrole epizód BE. Tieto zistenia naznačujú, že zacielenie na OX1R môže predstavovať zaujímavý nový farmakologický prístup k liečbe porúch súvisiacich s BE.

Poďakovanie

Ďakujeme Dr. Charlesovi Pickensovi za štylistickú opravu rukopisu.

Poznámky

EM-P je zamestnancom GSK na plný úväzok.

Referencie

  • Americká psychiatrická asociácia. Diagnostický a štatistický manuál duševných porúch, IV-TR. Americká psychiatrická asociácia: Washington, DC; 2000.
  • Appolinario JC, Godoy-Matos A, Fontenelle LF, Carraro L, Cabral M, Vieira A, a kol. Otvorená štúdia sibutramínu u obéznych pacientov s poruchou stravovania. J Clin Psychiatry. 2000; 63: 8-30. [PubMed]
  • Arunlakshana O, Schild HO. Niektoré kvantitatívne použitia antagonistov liečiv. Br J. Pharmacol Chemother. 1959; 14: 48-58. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME. 2011Dysregulácia systémov odmeňovania mozgu pri poruchách príjmu potravy: neurochemické informácie zo zvieracích modelov nadmerného stravovania, bulimia nervosa a anorexia nervosa Neuropharmacologye-pub pred tlačou 27. novembra 2011. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Dôkaz závislosti od cukru: behaviorálne a neurochemické účinky prerušovaného nadmerného príjmu cukru. Neurosci Biobehav Rev. 2008, 32: 20 – 39. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Bello NT, Hajnal A. Dopamínové a návykové správanie. Pharmacol Bioichem Behav. 2010; 97: 25-33. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Bonci A, Borgland S. Úloha orexínu / hypokretínu a CRF pri tvorbe synaptickej plasticity závislej na liekoch v mezolimbickom systéme. Neuropharmacology. 2009; 56: 107-111. [PubMed]
  • Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A vo VTA je kritický pre indukciu synaptickej plasticity a senzibilizácie správania na kokaín. Neurón. 2006; 49: 589-601. [PubMed]
  • Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF a kol. Úloha hypokretínu pri sprostredkovaní stresom vyvolaného obnovenia správania pri hľadaní kokaínu. Proc Natl Acad Sci USA. 2005; 102: 19168-19173. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Brandish PE, Hill LA, Zheng W, Scolnick EM. Scintilačná proximitná skúška inozitolfosfátov v bunkových extraktoch: vysoko výkonné meranie aktivácie receptora spojeného s G-proteínom. Anal Biochem. 2003; 313: 311-318. [PubMed]
  • Brisbare-Roch C, Dingemanse J, Koberstein R, Hoever P, Aissaoui H, Flores S, a kol. Podpora spánku zameraním na orexínový systém u potkanov, psov a ľudí. Nat Med. 2007; 13: 50-155. [PubMed]
  • Broft AI, Berner LA, Martinez D, Walsh BT. Bulímia nervosa a dôkazy pre striatálnu dysreguláciu dopamínu: koncepčný prehľad. Physiol Behav. 2011, 104: 122-127. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Carter WP, Hudson JI, Lalonde JK, Pindyck L, Mcelroy SL, pápež HG., Jr. Farmakologická liečba poruchy príjmu potravy zo záchvatov. Int J Eat Disord. 2003; 34 (Suppl: S74 – S88. [PubMed]
  • Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Úloha orexínu / hypokretínu pri hľadaní a závislosti: dôsledky pre obezitu. Physiol Behav. 2010; 100: 419-428. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, a kol. Narkolepsia u myší s knockoutom orexínu: molekulárna genetika regulácie spánku. Bunka. 1999; 98: 437-451. [PubMed]
  • Cifani C, Polidori C, Melotto S, CiccocioppoR, Massi MA. Predklinický model nadmerného stravovania, ktorý sa prejavuje stravou medzi ľuďmi a stresovým vystavením jedlu: účinok sibutramínu, fluoxetínu, topiramátu a midazolamu. Psychopharmacology. 2009; 204: 113-125. [PubMed]
  • Corwin R, Avena NM, Boggiano MM. Pocit a odmena: perspektíva troch modelov potkania pri potkanoch. Physiol Behav. 2011; 104: 87-97. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Crowther JH, Sanftner J, Bonifazi DZ, Shepherd KL. Úloha každodenných ťažkostí pri nadmernom stravovaní. Int J Eat Disord. 2001; 29: 449-454. [PubMed]
  • de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, a kol. Hypokretíny: peptidy špecifické pre hypotalamus s neuroexcitatívnou aktivitou. Proc Natl Acad Sci USA. 1998; 95: 322-327. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Devlin MJ, Yanovski SZ, Wilson GT. Obezita: to, čo odborníci v oblasti duševného zdravia potrebujú vedieť. Am J Psychiatry. 2000; 157: 854-866. [PubMed]
  • Di FabioR, Pellacani A, Faedo S, Roth A, Piccoli L, Gerrard P, a kol. Proces objavenia a farmakologická charakterizácia nového antagonistu duálneho orexínu 1 a orexínu 2, ktorý je užitočný pri liečení porúch spánku. Biorg Med Chem Lett. 2011; 21: 5562-5567. [PubMed]
  • Dugovic C, Shelton JE, Aluisio LE, Fraser IC, Jiang X, Sutton SW, a kol. Blokáda receptorov orexínu-1 oslabuje podporu spánku indukovanú antagonistom orexínu-2 u potkanov. J Pharmacol Exp Ther. 2009; 330: 142 až 151. [PubMed]
  • Fassino S, Leombruni P, Pierò A, Abbate-Daga G, Giacomo Rovera G. Mood, stravovacie návyky a hnev u obéznych žien s poruchou príjmu potravy a bez nej. J Psychosom Res. 2003; 54: 559-566. [PubMed]
  • Foulds Mathes W, Brownley KA, Mo X, Bulik CM. Biológia nadmerného prejedania. Chuti do jedla. 2009; 52: 545-553. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Freeman LM, Gil KM. Denné stres, zvládanie a diétne obmedzenia pri nadmernom stravovaní. Int J Eat Disord. 2004; 36: 204-212. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Corbin WR, Brownell KD. Závislosť od potravín: preskúmanie diagnostických kritérií závislosti. J Addict Med. 2011a; 3: 1-7. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Yokum S, Orr PT, Stice E, Corbin WR, Brownell KD. Neurálne koreláty závislosti od potravín. Arch Gen Psychiatry. 2011b; 68: 808-816. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Gold MS, Frost-Pineda K, Jacobs WS. Prejedanie, nadmerné stravovanie a poruchy príjmu potravy ako závislosť. Psychiatr Ann. 2003; 33: 112-116.
  • Gozzi A, Turrini G, Piccoli L, Massagrande M., Amantini D., Antolini M., a kol. Funkčné zobrazovanie pomocou magnetickej rezonancie odhaľuje rôzne nervové substráty pre účinky antagonistov receptora orexínu-1 a orexínu-2. PLoS One. 2011; 6: e16406. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Grucza RA, Przybeck TR, klonovanie CR. Prevalencia a korelácia poruchy návykového správania vo vzorke komunity. Compr Psychiatry. 2007; 48: 124 až 131. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Harris GC, Aston-Jones G. Vzrušenie a odmena: dichotómia vo funkcii orexínu. Trendy Neurosci. 2006, 29: 571-577. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Úloha bočných hypotalamických orexínových neurónov pri odmeňovaní. Nature. 2005, 437: 556-559. [PubMed]
  • Haynes AC, Jackson B, Chapman H, Tadayyon M, Johns A, Porter RA, a kol. Selektívny antagonista receptora orexínu-1 znižuje spotrebu potravy u samcov a samíc potkanov. Regul Pept. 2000; 96: 45-51. [PubMed]
  • Heath AC. Závislosť na návyku a bulímia: potenciálne poznatky o etiológii a patofyziológii prostredníctvom genetických epidemiologických štúdií. Biol Psychiatry. 1998; 44: 1208-1209. [PubMed]
  • Hoebel BG. Mozgové neurotransmitery v potravinách a liekoch. Am J Clin Nutr. 1985; 42 (Suppl: 1133 - 1150. [PubMed]
  • Hollander JA, Lu Q, Cameron MD, Kamenecka TM, Kenny PJ. Prenos ostrovného hypokretínu reguluje odškodnenie nikotínu. Proc Natl Acad Sci USA. 2008; 105: 19480 - 19485. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Hudson JI, Hiripi E, pápež HG, Jr, Kessler RC. Prevalencia a korelácie porúch príjmu potravy v replikácii národného prieskumu komorbidity. Biol Psychiatry. 2007; 61: 348-358. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Ifland JR, Preuss HG, Marcus MT, Rourke KM, Taylor WC, Burau K a kol. Rafinovaná závislosť na potravinách: klasická porucha užívania látok. Med Hypotheses. 2009, 72: 518-526. [PubMed]
  • Kenakin T, Jenkinson S, Watson C. Stanovenie účinnosti a molekulárneho mechanizmu účinku neprekonateľných antagonistov. J Pharmacol Exp Ther. 2006; 319: 710-723. [PubMed]
  • Kenny PJ. Bežné bunkové a molekulárne mechanizmy obezity a drogovej závislosti. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 638-651. [PubMed]
  • Koob GF. Úloha mozgového stresového systému v závislosti. Neurón. 2008; 59: 11-34. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Kuwaki T. Orexin spája emocionálny stres s autonómnymi funkciami. Auton Neurosci. 2011; 161: 20-27. [PubMed]
  • Javaras KN, pápež HG, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM, a kol. Spoločný výskyt poruchy návykovej hry s psychiatrickými a lekárskymi poruchami. J Clin Psychiatry. 2008; 269: 266-273. [PubMed]
  • Johnson PL, Truitt W, Fitz SD, Minick PE, Dietrich A, Sanghani S., a kol. Kľúčová úloha orexínu pri panickej úzkosti. Nat Med. 2010; 16: 111-115. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Johnson PM, Kenny PJ. Dopamínové receptory D2 v závislosti od závislosti a dyspulzívne stravovanie u obéznych potkanov. Nat Neurosci. 2010, 13: 635-641. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Jupp B, Krivdic B, Krstew E, Lawrence AJ. Antagonista receptora orexínu 1 SB-334867 disociuje motivačné vlastnosti alkoholu a sacharózy u potkanov. Brain Res. 2011; 1391: 54-59. [PubMed]
  • Lawrence AJ, Cowen MS, Yang HJ, Chen F, Oldfield B. Orexínový systém reguluje vyhľadávanie alkoholu u potkanov. Br J. Pharmacol. 2006; 148: 752-759. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Lu XY, Bagnol D, Burke S, Akil H, Watson SJ. Diferenciálna distribúcia a regulácia messengerovej RNA Orexinov a OX1 receptorov orexínu / hypocretínu v mozgu po pôste. Horm Behav. 2; 2000: 37-335. [PubMed]
  • Malherbe P, Borroni E, Pinard E, Wettstein JG, Knoflach F. Biochemická a elektrofyziologická charakterizácia almorexantu, duálneho antagonistu receptora orexínu 1 (OX1) / orexínu 2 (OX2): porovnanie so selektívnymi antagonistami OX1 a OX2. Mol Pharmacol. 2009; 76: 618-631. [PubMed]
  • Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M., a kol. Diferenciálna expresia orexínových receptorov 1 a 2 v mozgu potkana. J Comp Neurol. 2001; 435: 6-25. [PubMed]
  • Martin-Fardon R, Zorrilla EP, Ciccocioppo R, Weiss F. Úloha vrodenej a liekmi indukovanej dysregulácie mozgového stresu a vzrušenia v závislosti: zameranie sa na faktor uvoľňujúci kortikotropín, nociceptín / orphanín FQ a orexín / hypocretín. Brain Res. 2010; 1314: 145 až 161. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • McAtee LC, Sutton SW, Rudolph DA, Li X, Aluisio LE, Phuong VK, a kol. Nové substituované 4-fenyl- [1,3] dioxány: silné a selektívne antagonisty orexínového receptora 2 (OX2R). Bioorg Med Chem Lett. 2004; 14: 4225-4229. [PubMed]
  • McElroy SL, Guerdjikova AI, Martens B, Keck PE, Jr, pápež HG, Hudson JI. Úloha antiepileptík pri zvládaní porúch príjmu potravy. CNS Drugs. 2009; 23: 139-156. [PubMed]
  • McElroy SL, Hudson JI, Capece JA, Beyers K, Fisher AC, Rosenthal NR. Topiramát na liečbu porúch príjmu potravy spojených s obezitou: štúdia kontrolovaná placebom. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1039-1048. [PubMed]
  • Nair SG, Golden SA, Shaham Y. Diferenciálne účinky antagonistu hypokretínového 1 receptora SB 334867 na samoadministráciu s vysokým obsahom tukov a obnovenie hľadania potravy u potkanov. Br J. Pharmacol. 2008, 154: 406-416. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Pelchat ML, Johnson A, ChanR, Valdez J, Ragland JD. Obrázky túžby: aktivácia chuť po jedle počas fMRI. Neuroimage. 2004; 23: 1486-1493. [PubMed]
  • Perello M, Sakata I, Birnbaum S., Chuang JC, Osborne-Lawrence S., Rovinsky SA, a kol. Ghrelín zvyšuje prospešnú hodnotu diéty s vysokým obsahom tukov spôsobom závislým na orexíne. Biol Psych. 2010; 67: 880-886. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Polivy J, Zeitlin SB, Herman CP, Beal AL. Obmedzenie potravín a nadmerné stravovanie: štúdia bývalého vojnového zajatca. J Abnorm Psychol. 1994; 103: 409-411. [PubMed]
  • Prečítajte si KD, Braggio S. Hodnotenie frakcie bez mozgu v skorom objave liekov. Expert Opin Drug Metab Toxicol. 2010; 6: 337-344. [PubMed]
  • Richards JK, Simms JA, Steensland P, Taha SA, Borgland SL, Bonci A, a kol. Inhibícia receptorov orexínu-1 / hypokretínu-1 inhibuje yohimbínom indukované obnovenie získavania etanolu a sacharózy u krýs Long-Evans. Psychopharmacology. 2008; 199: 109-117. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Rodgers RJ, Halford JC, Nunes de Souza RL, Canto de Souza AL, Piper DC, Arch JR, a kol. SB-334867, selektívny antagonista receptora orexínu-1, zvyšuje saturáciu v správaní a blokuje hyperfagický účinok orexínu-A u potkanov. Eur J Neurosci. 2001; 13: 1444-1452. [PubMed]
  • Sakamoto F, Yamada S, Ueta Y. Centrálne podávaný orexín-A aktivuje neuróny uvoľňujúce kortikotropín v hypotalamovom paraventrikulárnom jadre a centrálnom amygdaloidnom jadre potkanov: možné zapojenie centrálnych orexínov do stresom aktivovaných centrálnych neurónov CRF. Reg Pept. 2004; 118: 183 až 191. [PubMed]
  • Sakurai T. Neurálny obvod orexínu (hypokretín): udržiavanie spánku a bdelosti. Nat Rev Neurosci. 2007, 8: 171-181. [PubMed]
  • Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​a kol. Orexíny a orexínové receptory: skupina hypotalamických neuropeptidov a receptorov spojených s G proteínmi, ktoré regulujú stravovacie návyky. Bunka. 1998; 92: 573-585. [PubMed]
  • Sharf R, Sarhan M, Brayton CE, Guarnieri DJ, Taylor JR, DiLeone RJ. Orexínová signalizácia prostredníctvom OX1R sprostredkuje operátora reagujúceho na zosilnenie potravy. Biol Psychiatry. 2010; 67: 753-760. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Shoblock JR, Welty N, Aluisio L, Fraser I, Motley ST, Morton K, a kol. Selektívna blokáda receptora orexínu-2 oslabuje samopodávanie etanolu, uprednostňuje miesto a obnovuje sa. Psychopharmacology. 2011; 215: 191-203. [PubMed]
  • Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Aston-Jones G. Orexín / hypocretín je nevyhnutný na hľadanie kokaínu na základe kontextu. Neuropharmacology. 2010; 58: 179-184. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Stice E, Agras WS, Telch FC, Halmi KA, Mitchell JE, Wilson T. Podtypujúce ženy s poruchou príjmu potravy po diéte a negatívne ovplyvňujúce rozmery. Int J Eat Disord. 2001; 30: 11-27. [PubMed]
  • Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Distribúcia mRNA orexínového receptora v mozgu potkana. FEBS Lett. 1998, 438: 71-75. [PubMed]
  • Uramura K, Funahashi H, Muroya S, Shioda S, Takigawa M, Yada T. Orexin-a aktivuje Ca sprostredkovanú fosfolipázou C a proteínkinázou C2+ signalizácia v dopamínových neurónoch ventrálnej tegmentálnej oblasti. NeuroReport. 2001; 12: 1885-1889. [PubMed]
  • Volkow ND, Wise RA. Ako nám môžu drogové závislosti pomôcť pochopiť obezitu. Nat Neurosci. 2005; 8: 555-560. [PubMed]
  • Yager J. Binge porucha príjmu potravy: hľadanie lepších spôsobov liečby. Am J Psychiatry. 2008; 165: 4-6. [PubMed]
  • Yanovski SZ. Porucha príjmu potravy a obezita v roku 2003: mohla by liečba poruchy stravovania mať pozitívny vplyv na epidémiu obezity. Int J Eat Disord. 2003; 34 (Suppl: S117 – S120. [PubMed]
  • Walsh BT, Devlin MJ. Poruchy stravovania: progres a problémy. Science. 1998; 280: 1387-1390. [PubMed]
  • Wang GJ, Geliebter A, Volkow ND, Telang FW, Logan J, Jayne MC, a kol. Zvýšené uvoľňovanie striatálneho dopamínu počas potravinovej stimulácie pri poruchách príjmu potravy. Obezita. 2011; 19: 1601-1608. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Wardle J, Steptoe A, Oliver G, Lipsey Z. Stres, diétne obmedzenia a príjem potravy. J Psychosom Res. 2000; 48: 195-202. [PubMed]
  • Vody A, Hill A, Waller G. Interné a externé predky záchvatov jesť v skupine žien s mentálnou bulímiou. Int J Eat Disord. 2001; 29: 17-22. [PubMed]
  • Wilfley DE, Crow SJ, Hudson JI, Mitchell JE, Berkowitz RI, Blakesley V, a kol. Výskumná skupina s poruchou príjmu potravy sibutramínom. Účinnosť sibutramínu pri liečení porúch príjmu potravy: randomizovaná multicentrická placebom kontrolovaná dvojito zaslepená štúdia. Am J Psychiatry. 2008; 165: 51-58. [PubMed]
  • Willie JT, Chemelli RM, Sinton CM, Yanagisawa M. Jesť alebo spať? Orexín pri regulácii kŕmenia a bdelosti. Annu Rev Neurosci. 2001; 24: 429-458. [PubMed]
  • Wolff GE, Crosby RD, Roberts JA, Wittrock DA. Rozdiely v dennom strese, nálade, zvládaní a stravovacom správaní pri nadmernom stravovaní a stravovaní vysokoškolákov. Addict Behav. 2000; 25: 205-216. [PubMed]
  • Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Orexínová signalizácia vo ventrálnej tegmentálnej oblasti je potrebná pre chuť k jedlu s vysokým obsahom tuku indukovanú opioidnou stimuláciou nucleus accumbens. J Neurosci. 2007; 27: 11075-11082. [PubMed]