Källa
Institutionen för cell- och neurobiologi, Keck School of Medicine, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.
Abstrakt
Anabola-androgena steroider (AAS) missbruk är utbrett. Dessutom förstärker AAS, vilket visas av självadministrering av gnagare. Receptorerna som transducerar förstärkningseffekterna av AAS är emellertid oklara. AAS kan binda till klassiska nukleära androgenreceptorer (AR) eller membranreceptorer. Vi använde två tillvägagångssätt för att undersöka rollen för kärnkrafts-AR i AAS-självadministration. Först testade vi androgen självadministrering hos råttor med testikel-feminiseringsmutationen (Tfm), vilket stör störningen av androgen. Om kärnkärnämnen är väsentliga för AAS-självadministration, bör Tfm-män inte självadministrera androgener. Tfm-män och vildtyp (WT) kullkamrater administrerade själv det icke-aromatiserbara androgena dihydrotestosteronet (DHT) eller fordonet intracerebroventrikulärt (ICV) vid schema med fast förhållande (FR) upp till FR5. Både Tfm- och WT-råttor erhöll en preferens för det aktiva näspotet under DHT-självadministrering (66.4 +/- 9.6-svar / 4 h för Tfm och 79.2 +/- 11.5 för WT-svar / 4 h), och nässpetsarna ökade i takt med FR-kravet ökade. Prioritetsresultat var signifikant lägre i råttor som själv administrerande fordon (42.3 +/- 5.3 svar / 4 h för Tfm och 19.1 +/- 4.0 svar / 4 h för WT). Vi testade också självadministrering av DHT konjugerat till bovint serumalbumin (BSA) vid C3 och C17, vilket är begränsat till åtgärder vid cellytan. Hamstrarna fick självadministrera DHT-, BSA- och DHT-BSA-konjugat under 15 dagar vid FR1. Hamstrarna visade en signifikant preferens för DHT (18.0 +/- 4.1-svar / 4 h) eller DHT-BSA-konjugat (10.0 +/- 3.7-svar / 4 h och 21.0 +/- 7.2-svar / 4 h), men inte för BSA (2.5 + / -2.4 svar / 4 h). Sammantaget visar dessa data att nukleära AR inte krävs för androgen självadministrering. Vidare kan androgen självadministrering förmedlas av plasmamembranreceptorer.
Copyright 2010 Elsevier Ltd. Alla rättigheter förbehållna.
Anabola androgena steroider (AAS) är missbruk av droger. Dessa testosteron (T) -derivat används för atletiska och estetiska ändamål (Yesalis et al., 1993). Biverkningarna sträcker sig från hypogonadism och gynekomasti till hjärt- och leverdysfunktion (Leshner, 2000). Dessutom samlas bevis för att AAS-missbruk orsakar humörförändringar (Påven och Katz, 1994), aggression (Choi och påven, 1994, Kouri et al., 1995), och kan ge beroende (Brower et al., 1991, Mäklare, 2002). Trots växande oro har de underliggande mekanismerna för AAS-missbruk inte förståts väl.
Hos människor hävdas att initieringen av AAS-användning till stor del är motiverad av anabola effekter, men vissa missbrukare utvecklar så småningom beroende (Mäklare, 2002). Bevis från djurforskning stöder denna hypotes. AAS inducerar konditionerad platspreferens (CPP) hos möss (Arnedo et al., 2000) och råttor (Packard et al., 1997, Packard et al., 1998, Frye et al., 2002). Dessutom konsumerar hamstrar frivilligt AAS genom muntliga (Trä, 2002), intravenöst (Wood et al., 2004) och intracerebroventrikulär (ICV) självadministrering (DiMeo och trä, 2004, Triemstra och trä, 2004, Wood et al., 2004, DiMeo och trä, 2006b).
Medan ICV-självadministrering antyder centrala verkningsställen, är de specifika hormonerna och receptorerna som medierar AAS-förstärkning oklara. Nuvarande bevis tyder på att de förstärkande effekterna av T förmedlas av androgener snarare än genom östrogener efter aromatisering. Manliga hamstrar administrerar själv dihydrotestosteron (DHT; DiMeo och trä, 2006b) och andra icke-aromatiserbara androgener (Ballard och trä, 2005). Dessutom blockeras självadministrering av T av anti-androgen flutamid (Peters och Wood, 2004). Frågan blir nu: hur överförs den androgena signalen i hjärnan?
Androgenreceptorn (AR) är en klassisk kärnsteroidreceptor som fungerar som en transkriptionsfaktor. AR: er är glesa i strukturer förknippade med drogmissbruk, såsom nucleus accumbens (Acb) och det ventrale tegmentalområdet (VTA; Simerly et al., 1990, Wood och Newman, 1999). Det finns också bevis för gonadala steroider som verkar via cellyteceptorer (Mermelstein et al., 1996, Zhu et al., 2003, Thomas et al., 2006, Vasudevan och Pfaff, 2007).
I den aktuella studien använde vi två metoder för att bestämma rollen för klassisk kärnkrafts AR i androgenförstärkning. För att minimera möjlig aktivering av östrogenreceptorer (ER) testade vi DHT självadministrering. I det första experimentet testades råttor med testikel-feminiseringsmutationen (Tfm) för ICV-självadministrering av DHT. Tfm är en enda bassubstitution som resulterar i defekta ARs med begränsad ligandbindning (Yarbrough et al., 1990). Manliga Tfm-råttor uppvisar en extern kvinnlig fenotyp på grund av otillräcklig androgen stimulering under utvecklingen (Zuloaga et al., 2008b). Om funktionella nukleära AR är nödvändiga för AAS-förstärkning, bör Tfm-råttor inte själv administrera DHT. Istället kunde Tfm-råttor få DHT-självadministration. I det andra experimentet testade vi ICV självadministrering av membranomträngliga former av DHT i hamstrar. När DHT är konjugerat till bovint serumalbumin (BSA), är dess åtgärder begränsade till cellyteceptorer. Om kärnkraftsarmer krävs för androgenförstärkning, bör hamstrar inte själv administrera DHT konjugerat till BSA. Tvärtom, hamstrarna visade en tydlig preferens för DHT konjugerat till BSA. Tillsammans visar dessa studier att nukleära AR inte krävs för androgen självadministrering. Istället kan androgenförstärkning medieras av membran-AR.
Metoder och material
Ämnen
råttor
Vuxna manliga Tfm-råttor och kullkamrater av vildtyp (WT) erhölls från en koloni vid Michigan State University. Deras genotyp verifierades med PCR, liknande de metoder som beskrivits tidigare (Fernandez et al., 2003). I korthet digererades öronklipp över natten vid 55 ° C i lysbuffert innehållande proteinas K, varefter värme inaktiverades vid 95 ° under 30 minuter. AR amplifierades med användning av fram-primer 5N-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 ′ och omvänd primer 5′-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3 yield, vilket gav en 135bp-produkt. Amplifierade prover digererades sedan med Sau96I-restriktionsenzym (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) över natt vid 37 ° C och kördes på en 3% agarosgel. Endast WT AR skärs med detta restriktionsenzym, vilket lämnar två band under 100bp, medan Tfm AR förblir oklippt. Tfm-djur verifierades också genom fenotyp, med närvaron av bröstvårtor, feminint ano-genitalavstånd och bukprov. Tfm-råttor har tidigare använts för att demonstrera icke-genomiska androgeneffekter i hippocampus (MacLusky et al., 2006). I början av experimentet var WT-råttor mellan 75 till 140 dag gamla, och Tfm-råttor var mellan 75 till 138 dag gamla.
hamstrar
Vuxna syriska hamstrar av hankön (130 - 150 g) erhölls från Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Djur hölls enskilt i en omvänd ljuscykel (14L: 10D) med tillgängligt mat och vatten AD libitum. Alla experimentella förfaranden godkändes av institutionella djurvårdskommittéer för respektive institutioner och genomfördes i enlighet med Guide för vård och användning av laboratoriedjur (NationalResearchCouncil, 1996).
Kirurgi
Alla djur implanterades med en 22g ledkanyl av rostfritt stål (Plastic One, Roanoke, VA) in i den laterala ventrikeln [råtta: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 (Paxinos och Watson, 1998); hamster: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 (Morin och trä, 2001), mm från bregma], under Na+ pentobarbitalbedövning (råtta: 50 mg / kg, hamster: 100mg / kg) såsom beskrivits tidigare (Wood et al., 2004). Alla kirurgiska ingrepp utfördes under aseptiska förhållanden enligt Principer för laboratoriedjuromsorg (NIH, 1985). Djur fick återhämta sig i minst en vecka efter operationen innan de testades.
Läkemedel
DHT, DHT-karboximetyloxim (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisuccinat (Hemis) och DHT-Hemis-BSA erhölls från Steraloids (Newport, RI). I DHT-CMO-BSA konjugeras DHT till BSA i C3-läget med CMO som länk. På liknande sätt är DHT kopplat till BSA i C17-läget via Hemis för att bilda DHT-Hemis-BSA. Båda DHT-CMO-BSA (Gatson et al., 2006) och DHT-Hemis-BSA (Braun och Thomas, 2003) har tidigare använts för att undersöka möjliga effekter av androgener vid plasmamembranet. DHT löstes i en vattenlösning av 13% p-cyklodextrin (PCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) vid 1μg / mL. Som bestämts från vår tidigare studie på hamstrar, ger denna dos robust operant som svarar under ICV-självadministrering (DiMeo och trä, 2006b). DHT-derivat upplöstes i samma vehikel vid den molekvivalenta koncentrationen av DHT (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-Hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) löstes i samma vehikel vid 7.45 μg / μl för att uppnå den molekvivalenta koncentrationen av BSA som i DHT-CMO-BSA och DHT-Hemis-BSA. BSA-innehållande läkemedel framställdes dagligen omedelbart före användning för att undvika nedbrytning, och alla lösningar filtrerades genom ett 0.22 μm-filter. Tidigare studier har visat att endast en liten andel steroid dissocierar från BSA (Stevis et al., 1999), och denna mängd är otillräcklig för att inducera betydande androgena effekter (Lieberherr och Grosse, 1994, Gatson et al., 2006). På samma sätt har vår tidigare studie visat att DHT administreras själv vid 1.0 μg / μl, men inte vid 0.1 μg / μl (DiMeo och trä, 2006b). Det är därför osannolikt att gratis DHT (> 10%) dissocieras från BSA i tillräcklig mängd för att stödja självadministrering.
Apparater
Djur fick självadministrera läkemedels- eller vehikellösning 4 timmar / dag, 5 dagar / vecka i en operantkammare (Med Associates, St. Albans, VT) inneslutna i en ljuddämpande kammare med tvungen ventilation. Varje kammare var utrustad med ett husljus, 2 näsa-hål och en datorstyrd sprutpump ansluten till en vätskesvivel på en balansarm. Lösningar från en 100 ul glisspruta levererades till djuret genom Tygon-slang ansluten till sviveln. Röret som ansluter sviveln och ICV-kanylen skyddades av en metallfjäder. Läkemedelslösning eller fordon levererades via en 28-ga intern kanyl insatt i ledningskanylen omedelbart före testning. Varje infusion gav 1 μl lösning vid 0.2 μl / s. Noshällshål placerades 6 cm från golvet under husets ljus. Ett av näsa-hålen betecknades som det aktiva näsa-hålet. Ett svar på detta hål registrerades som ett aktivt näspot (R: aktivt förstärkt) och räknades mot svarskravet (FR1 till 5) för att utlösa en infusion. När en infusion utlöste släcktes husbelysningen och det aktiva hålet tändes under 5-infusionen för att hjälpa till att diskriminera det aktiva näsa-hålet. Noshörning i det aktiva hålet under denna 5-tidsgräns registrerades men räknade inte för ytterligare förstärkning (NR: aktiv-icke-förstärkt). Ett svar på det andra näsa-hålet registrerades som ett inaktivt nässtopp (I) men resulterade inte i någon infusion. Platsen för det aktiva näsa-hålet på framsidan eller baksidan av kammaren var balanserad för att kontrollera för sidopreferenser. Data registrerades av WMPC-programvara (Med Associate) på en Windows-PC.
ICV självadministration
råttor
Självadministrering av DHT i Tfm- och WT-råttor följde ett stigande schema för fast förhållande (FR) från FR1 till FR5. Råttorna tränades inledningsvis på FR1, där varje svar på den aktiva näspotten förstärktes. Därefter ökades antalet svar som krävdes för att erhålla en infusion med en var 5 dag. Vid FR5 krävdes fem svar på det aktiva näsa-hålet för en infusion. Totalt testades råttor på FR1 under 10 dagar och FR2 till FR5 (5 dagar vardera), totalt 30 dagar. Råttor från varje genotyp tilldelades slumpmässigt till antingen DHT- eller vehikelgrupper (Vehicle) och tilläts att själva administrera DHT respektive ßCD-vehikeln. Trettiosex råttor (nWT = 19, nTFM = 17) användes i detta experiment.
hamstrar
Hamstrar testades enligt ett FR1-schema under 15 dagar. I tidigare studier är 15 dagar med självadministrering av ICV T tillräckligt för att få en preferens för den aktiva näspotten. Hamstrar tilldelades slumpmässigt DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8) ) eller BSA (n = 9) -grupper.
Dataanalys
råttor
De dagliga preferensvärdena för de aktiva nässtockarna bestämdes genom att subtrahera inaktiva nässpetsar från summan av aktivt förstärkt och aktivt icke-förstärkt nässtopp (R + NR-I) Medelpreferensvärde beräknades för varje djur från de senaste 5 dagarna av FR1 och under FR2 till FR5. Dessutom jämfördes det genomsnittliga antalet förstärkningar per session för varje djur vid varje FR.
Data analyserades med 3-vägs ANOVA med genotyp (WT eller Tfm), läkemedel (DHT eller vehikel) och FR-schema (1 ∼ 5) som faktorer mellan ämnen. FR-schemat behandlades som en mellanfaktor, eftersom vissa djur inte lyckades fullföra hela 30 testningsdagarna på grund av igensättning av ICV-ledningskanyl. I dessa fall inkluderades endast data från de färdiga schemanna i analyserna. Antalet djur som ingår i varje tillstånd visas i Tabell 1. En trevägs ANOVA följdes upp av lämpliga lägre ordning ANOVA för enkla effekter. Newman-Keuls-testet för post-hoc-parvisa jämförelser användes vid behov.
Tabell 1
hamstrar
De individuella medlen för R, NR och jag användes för dataanalys. Föredragets poäng för varje djur bestämdes genom att subtrahera det genomsnittliga inaktiva näspotet (I) från det genomsnittliga aktiva näspotet (R + NR-I). Medelpreferensvärden analyserades med ett prov t-test mot 0 (dvs ingen preferens) för varje grupp. Dessutom var antalet mottagna förstärkningar i genomsnitt för varje djur. Den genomsnittliga förstärkningen som erhölls för varje läkemedelsgrupp jämfördes med den för BSA-kontroller med ett 2 oberoende prover t-testa. Djur som inte fullbordade ett minimum av 5-sessioner utesluts från analys (1 vardera från DHT-Hemis och DHT-Hemis-BSA-grupper).
Alla statistiska analyser utfördes med användning av SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). För all analys, p <0.05 ansågs statistiskt signifikant. Uppgifterna presenteras som medelvärde ± SEM per 4 timmars session.
Resultat
WT- och Tfm-råttor administrerar själv DHT
Operant svarar
Fig. 1 illustrerar den genomsnittliga preferensen för aktiv näspoke (R + RN - I) vid varje FR för DHT- och Veh-grupper. Självadministrerande råttor för DHT visade en större preferens för aktiv näspoke (73.1 ± 7.6 resp / 4h), jämfört med fordonskontroller (29.8 ± 3.5 resp / 4h; F1,145 = 31.77, p <0.001). Det var också en huvudeffekt av FR-schemat (F4,145 = 4.25, p <0.01), genotyp-läkemedelsinteraktion (F1,145 = 5.27, p = 0.02) och en läkemedels-FR schemainteraktion (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Det fanns ingen huvudeffekt av genotyp, och andra interaktioner var inte signifikanta.
Post-hoc-test avslöjade att råttorna som själv administrerade DHT visade en betydligt större preferens jämfört med FR-schemat (F4,73 = 4.18, p <0.01), vilket ökar preferensen från FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4h) till FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4h) och FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4h). Ingen effekt av genotyp observerades i denna grupp (schema för genotyp-FR: F4,73 = 0.13, ns; genotyp: F1,73 = 0.86, ns).
Däremot visade de råttor som själv administrerade fordonet ingen förändring i preferens framför FR-schemat (F4,72 = 0.31, ns), och ingen genotype-FR schemainteraktion (F4,72 = 0.12, ns). Till skillnad från för DHT visade Tfm-råttor större preferens än WT i denna grupp (42.3 ± 5.3 respektive 19.1 ± 4.0 resp / 4h; F4,72 = 11.81, p <0.01).
Infusioner
Det genomsnittliga antalet DHT- och fordonsinfusioner som erhållits vid varje FR visas i Fig 2. Sammantaget fick råttor fler infusioner när de tillåtits att själv administrera DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) kontra fordon (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Det var också en huvudeffekt av FR-schemat (F1,145 = 3.32, p = 0.01), och genotyp-läkemedelsinteraktion (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Alla andra interaktioner och huvudeffekter var inte signifikanta.
Det genomsnittliga dagliga intaget av DHT över alla FR-scheman var liknande hos råttor Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) och WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h). I båda grupperna förblev läkemedelsintaget konstant när FR-schemat ökade (F4,73 = 0.54, ns). Under FR1, Tfm och WT-män, självadministrerade DHT vid 24.5 ± 2.3 μg / 4h respektive 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Enligt ett FR5-schema var DHT självadministration i genomsnitt 18.3 ± 4.5 μg / 4h för Tfm och 23.9 ± 5.9 μg / 4h för WT-råttor. Denna grupp uppvisade inga genotyp- eller genotyp-FR-schema-baserade skillnader (F1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, respektive).
Däremot, i både Tfm- och WT-råttor, minskade antalet fordonsinfusioner betydligt när FR-kravet ökade (F4,72 = 4.73, p <0.01). Något överraskande administrerade Tfm-råttor självt ungefär dubbelt så mycket vehikel (20.7 ± 2.4 pl / 4 timmar) som WT-råttor (10.7 ± 1.4 pl / 4 timmar, F1,72 = 7.77, p <0.01). I Tfm-råttor vid FR1 översteg antalet fordonsinfusioner (39.9 ± 13.2 pl / 4 timmar) antalet DHT-infusioner (24.5 ± 2.3 pl / 4 timmar). Vid slutet av experimentet hade dock självadministrering av fordon minskat till 10.3 ± 2.4 | il / 4h. På samma sätt administrerade WT-råttor 18.6 ± 4.1 | il / 4 timmars fordon vid FR1, som minskade till 6.6 ± 1.8 | il / 4 tim vid FR5.
Medelkroppsvikt i början av varje FR-schema och antalet djur i varje tillstånd visas i Tabell 1. WT-råttorna var betydligt tyngre än Tfm-råttor (F1,174 = 144.62, p <0.001) och alla grupper fick vikt över tiden (F5,174 = 5.59, p <0.001). Det fanns ingen effekt av läkemedlets tillstånd (DHT vs Veh) på kroppsvikt (F1, 174 = 0.31, ns) eller någon interaktion. DHT-intag justerat för kroppsvikt var liknande i båda genotyperna vid både FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg) och FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).
Syriska hamstrar själv administrerar DHT konjugerat till BSA
Operant svarar
Hamstrar självadministrerade DHT och DHT konjugerade till BSA, men inte BSA ensamma. Fig. 3a visar medelpreferensen (aktiv - inaktiv näspoke) för DHT, BSA, DHT-CMO-BSA och DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. I överensstämmelse med våra tidigare studier utvecklade hamstrar en preferens för aktiv näspoke under DHT-självadministrering (t7 = 4.34, p <0.01) men visade ingen preferens vid självadministrering av BSA (t8 = 1.03, ns). På samma sätt visade hamstrar företräde för den aktiva näspotten med både DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) och DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Med DHT ansluten till länkarna ensam hamstrar självadministrerad DHT-CMOt8 = 3.91, p <0.01), men visade inte någon signifikant preferens vid självadministrering av DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). Med DHT-Hemis var svar på den aktiva nässpaken (40.5 ± 10.3 resp / 4h) liknande de för DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), men dessa män uppvisade också ökade svar för den inaktiva näsan -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) jämfört med dem för DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
Infusioner
Antalet mottagna infusioner för varje grupp visas i Fig. 3b. Hamstrar fick betydligt mer DHT- än BSA-infusioner (t15 = 3.04, p = 0.01). På samma sätt fick hamstrar fler infusioner när de tillåtits att själv administrera DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) eller DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) jämfört med BSA. Antalet infusioner som erhölls för DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) och DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) grupper var liknande de som självadministrerande DHT, DHT-Hemis-BSA och DHT- CMO. Trots detta fick hamstrarna inte signifikant mer DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) eller DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) jämfört med BSA.
Överdosering
Elva av 55-hamstrar dog innan alla 15-tester avslutades. Dödsfall på grund av överdos av androgen under självadministrering av testosteron har tidigare beskrivits (Peters och Wood, 2005). I den aktuella studien dog 2 av 8-män (25%) under DHT-självadministrering, liknande 24% som rapporterades för överdosering av testosteron (Peters och Wood, 2005). Självadministrering av DHT-CMO och DHT-Hemis var associerade med de högsta förlusterna (varje 3 av 8 per grupp, 38%), medan det fanns få dödsfall bland hamstrar som själv administrerade BSA (1 av 9, 11%) eller DHT -Hemis-BSA (0 of 8). Liksom vid överdosering av testosteron dog ingen av hamstrarna i den aktuella studien under självadministrering. Istället dog hamstrar flera timmar senare i sina hemburar, med svår rörelse och andningsdepression.
Testosteron overdosering är nära korrelerad med testosteronintag, särskilt maximalt intag per session (Peters och Wood, 2005). Fig 4 jämnar preferensresultat, antalet förstärkningar som erhölls och toppintag för hamstrar som slutförde alla 15-testsessioner och de som inte gjorde det. Båda grupperna visade en signifikant preferens för den aktiva näspotten (p <0.05). Emellertid var preferensen signifikant större hos hamstrar som dog under självadministrering (25.7 ± 5.2 resp / 4h) jämfört med de som överlevde (9.5 ± 2.0 resp / 4h, t53 = 3.42, p <0.01). Hamstrar som inte lyckades genomföra 15 sessioner fick mer än dubbelt så många infusioner per session (31.2 ± 5.0 inf / 4h) som de som slutförde alla sessioner (14.8 ± 1.1 inf / 4h, t53 = 5.05, p <0.001). För hamstrar som dog under studien var dessutom det maximala intaget per session signifikant högre (77.0 ± 9.8 inf / 4h) än för män som överlevde (36.1 ± 2.9 inf / 4h, t53 = 5.41, p <0.001).
Diskussion
Androgen självadministrering kan medieras av membranassocierade, men inte av kärnkrafts-androgenreceptorer
Den aktuella studien visar att klassiska kärnkärnämnen inte är nödvändiga för androgen självadministrering. Både Tfm- och WT-råttor utvecklade en preferens för den aktiva näspotten under DHT-självadministrering. De kunde dessutom svara på det stigande FR-schemat genom att öka aktiva nässpetsar och därmed upprätthålla en stadig läkemedelsintag oavsett FR-schema. Däremot har råttor som fick fordon inte svarat på förändringarna i FR-schemat. Deras aktiva nässpetsar ökade inte signifikant som svar på förändringar i FR-schemat, och de fick färre infusioner när responskravet ökade. Eftersom ligandbindning till den "klassiska" kärnkraft-androgenreceptorn äventyras i Tfm-mutanter, stöder detta vår hypotes att androgenförstärkning medieras via alternativa vägar.
Det oväntat höga svaret för fordon av Tfm-råttor beror sannolikt inte på själva fordonet. Vi observerade liknande fenomen i en separat grupp av Tfm-råttor som inte fick några infusioner (data visas inte). Istället kan det vara relaterat till feminiserade beteendemässiga egenskaper hos Tfm-män. De ökade nässpetsarna från Tfm-råttor kan vara analoga med högre undersökande huvuddoppar som observerats hos honråttor (Brown and Nemes, 2008). Alternativt är Tfm-råttorna och mössen kända för att uppvisa ökat ångestliknande beteende (Zuloaga et al., 2006, Zuloaga et al., 2008a). Kanske de lugnande / ångestdämpande effekterna av DHT (Agren et al., 1999, Arnedo et al., 2000, Frye och Seliga, 2001, Berbos et al., 2002, Peters och Wood, 2005) trubbade det ångestliknande beteendet när Tfm-råttor själv administrerade DHT.
Dessutom ger självadministrering av DHT-BSA-konjugat i hanhamstrar bevis på att androgener kan verka vid det neuronala plasmamembranet för att ha förstärkande verkan. Hamstrar uppvisade en betydande preferens för båda DHT-BSA-konjugaten. Doserna som själv administreras överensstämmer med våra tidigare studier på T, DHT och vanligt misshandlade steroider (Ballard och trä, 2005, DiMeo och trä, 2006b). Däremot visade hamstrar ingen preferens för BSA ensam. Uppgifterna om dödlighet och läkemedelsintag visar DHT och dess derivat kan vara dödliga, vilket utvidgar våra tidigare data om T-överdos (Peters och Wood, 2005).
Den aktuella studien avslöjar ett artsspecifikt mönster av operant som svarar. Hamstrar föredrog inte den aktiva nässpaken medan de själv administrerade fordonet, som tidigare visats (Johnson och Wood, 2001, Trä, 2002, DiMeo och trä, 2004, Triemstra och trä, 2004, Wood et al., 2004, Ballard och trä, 2005, DiMeo och trä, 2006b). Hos råttor fanns emellertid en tydlig preferens för aktiv näsa-poke oavsett vilket läkemedel som mottogs. Vi observerade en liknande trend i vår tidigare studie om IV-självadministrering av T hos råttor, även om den inte var statistiskt signifikant (Wood et al., 2004). Baserat på sådan artsspecifik beteendeskillnad i självadministrering måste en försiktighet vidtas vid jämförelse av beteendata från råttor och hamstrar.
Det finns flera varningar som måste beaktas vid tolkningen av den aktuella studien. För det första är kärnkrafts-AR med signifikant nedsatt ligandbindning fortfarande närvarande i Tfm-råttor (Yarbrough et al., 1990) till skillnad från i Tfm-möss (He et al., 1991). Det är möjligt att dessa muterade nukleära AR är tillräckliga för att förmedla effekter av androgener vid suprafysiologiska doser. För det andra kan DHT-BSA-konjugaten brytas ned in vivo-, vilket resulterar i gratis DHT. Även om detta inte tycks vara en viktig fråga vitro (Lieberherr och Grosse, 1994, Gatson et al., 2006), graden och tidsförloppet för DHT-BSA-nedbrytning in vivo- i hjärnan är för närvarande okänd. Slutligen kanske DHT-BSA-konjugat inte signifikant tränger in i hjärnvävnaden. DHT-BSA är signifikant större än DHT, varför effekterna av DHT-BSA som observerats i den aktuella studien sannolikt medieras på platser nära ventriklarna.
Trots dessa varningar gav dessa två olika tillvägagångssätt konsekventa resultat som argumenterar starkt mot nödvändigheten av kärnämne-AR i androgenförstärkning. Dessutom antyder självadministrering av BSA-konjugat att androgener kan verka vid plasmamembranet i androgenförstärkning. Såvitt vi vet är den nuvarande studien den första in vivo- bevis för beteendemässigt relevanta effekter av androgener vid plasmamembranet.
Androgener utövar snabba kärnkrafts-oberoende effekter på belöningen
Flera andra studier på androgenbelöning har visat resultat som överensstämmer med icke-genomiska eller plasmamembraneffekter. CPP utvecklas inom 30 min efter systemisk T-injektion (Alexander et al., 1994), en tidsförlopp som överensstämmer med akuta icke-genomiska effekter av T. CPP kan också induceras med intra-Acb-infusioner av T eller dess metabolit (Packard et al., 1997, Frye et al., 2002) även om Acb har få genomiska AR. Vidare uttrycker VTA Fos som svar på ICV T-infusion (Dimeo och trä, 2006a) trots bristen på betydande klassiskt AR-uttryck där. Den aktuella studien ger inte information om handlingsplatsen i hjärnan. Icke desto mindre indikerar det att den relativa bristen på kärnämne-AR endast är en tillräcklig anledning att utesluta strukturer som Acb och VTA från de potentiella platserna som kan förmedla androgena effekter.
Snabba plasmamembraneffekter av steroider i dorsalt och ventralt striatum är inte begränsade till androgener. Progestiner är kända för att inducera CPP, eventuellt via gamma-aminobutyric receptor (GABA) receptorer i Acb (Frye, 2007). Östrogener utövar också snabba, membranreceptormedierade effekter i dorsalt striatum (Mermelstein et al., 1996, Becker och Rudick, 1999). En membranassocierad receptor har redan isolerats för progestins (Zhu et al., 2003) och bevis ackumuleras för cellyteceptorer för östrogener (granskade i Vasudevan och Pfaff, 2007) och androgener (granskad i Thomas et al., 2006). Medan östrogener också förstärker (DiMeo och trä, 2006b), verkar de förstärkande effekterna av T vara övervägande androgena. Hamstrar administrerar själv icke-aromatiserbara androgener, såsom drostanolon och DHT (Ballard och trä, 2005, DiMeo och trä, 2006b). Dessutom kan anti-androgen flutamid blockera självadministrering av T (Peters och Wood, 2004). Även om detta tycks motsäga rollen hos membran AR som rapporterats i denna studie, har flutamid också rapporterats blockera membran AR-aktivering (Braun och Thomas, 2003, Braun och Thomas, 2004).
Egenskaperna hos membran-androgenreceptorer
Historiskt ansågs effekterna av steroider, inklusive androgener, transduceras genom kärnreceptormedierade processer. Rapporter om snabba androgeneffekter, antagligen medierade av membranassocierade receptorer, har emellertid varit tillgängliga i flera decennier. I det mediala preoptiska området kan till exempel androgener förändra neuronal avfyrning inom några sekunder (Yamada, 1979) till minuter (Pfaff och Pfaffmann, 1969). Dessutom Orsini och kollegor (Orsini, 1985, Orsini et al., 1985) har visat en snabb modifiering av neuronal avfyrningsfrekvens av androgener i den laterala hypotalamus (LHA). Denna effekt av androgener i LHA kan vara särskilt relevant för den aktuella studien, eftersom LHA är känt för att vara involverat i belöningskretsarna (Olds och Milner, 1954) och LHA orexin / hypocretin regleras av gonadala steroider (Muschamp et al., 2007).
Celltyperna med möjliga membran-AR inkluderar glial (Gatson et al., 2006), gonadal (Braun och Thomas, 2003, Braun och Thomas, 2004) och immunceller (Benten et al., 1999, Guo et al., 2002), myocyter (Estrada et al., 2003) och osteoblaster (Lieberherr och Grosse, 1994). Även om den molekylära identiteten ännu inte har fastställts, inkluderar kandidater för membran AR membranreceptorer med kända steroidbindningsställen, såsom GABA-A (granskad i Lambert et al., 2003) och NR2-subenheter av N-metyl-D-asparaginsyra-receptorer (Malayev et al., 2002). Alternativt har Thomas och kollegor (2004) rapporterat bevis för en ny G-proteinkopplad receptor som membran AR. Effekterna av androgener som inte är relaterade till en specifik receptor kan inte uteslutas i den aktuella studien.
Senaste vitro studier antyder att det finns flera membran-AR, eller mer än ett bindningsställe på en enda receptor, såsom föreslagits för membranprogesteronreceptorn (Ramirez et al., 1996). I många celltyper verkar membranet AR vara en membranreceptor kopplad till Gq / o (Lieberherr och Grosse, 1994, Benten et al., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Estrada et al., 2003). Steroidbindningsegenskaperna och känsligheten för anti-androgener i det förmodade membranet AR varierar emellertid mycket beroende på celltypen. Exempelvis kan anti-androgener blockera effekterna av DHT på ovarieceller från croaker (Braun och Thomas, 2003, Braun och Thomas, 2004), medan de inte är effektiva i andra celltyper (Lieberherr och Grosse, 1994, Benten et al., 2004, Gatson et al., 2006), eller till och med utöva agonistliknande effekter i hippocampalceller (Gädda, 2001, Nguyen et al., 2007) och flera cancercellinjer (Peterziel et al., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou et al., 2000, Papakonstanti et al., 2003). Dessutom har olika T-bindande egenskaper rapporterats för olika organ hos fisk (Braun och Thomas, 2004).
Vår erfarenhet av ofta missbrukade AAS indikerar att större modifiering (er) vid A-ringen (vid C2 och / eller C3) och vid C17 tenderar att störa självadministrationen (Ballard och trä, 2005). Till exempel administreras inte stanozolol, som har en större modifiering vid C2 och C3 såväl som en metylgrupp bunden till C17. I den aktuella studien hamstrar självadministrerade både BSA konjugerade vid C3 (DHT-CMO-BSA) och C17 (DHT-Hemis-BSA). Ytterligare forskning krävs för att belysa egenskaperna hos androgener som administreras själv.
Klinisk signifikans
AAS, särskilt T, är överlägset de vanligaste prestationsförbättrande medlen som används av idrottare och står för nästan hälften av de positiva dopningstesterna (World Anti-Doping Agency, 2006). Med tanke på en sådan omfattande användning har AAS-missbruk omfattande hälsoeffekter. Hjärt- och leverbiverkningar av AAS-missbruk är väletablerade (Leshner, 2000). Dessa och de anabola effekterna av AAS har trott vara medierade genom kärnkrafts AR. Emellertid antyder de möjliga kärnkrafts-AR-oberoende effekterna av androgener att påverkan av AAS kan sträcka sig långt bortom strukturer med kärnkraft AR-uttryck.
När det gäller likhet med andra missbruksläkemedel ger AAS olika effekter och har olika verkningsmekanismer från stimulanter. Till skillnad från stimulanser (Graybiel et al., 1990), AAS inducerar c-Fos-aktivering endast i VTA och inte i Acb (Dimeo och trä, 2006a). Dessutom dämpar AAS stimulerande inducerad Acb DA-frisättning (Birgner et al., 2006), och hämmar DA-frisättning akut (Triemstra et al., 2008). Beteende inducerar AAS inte lokomotorisk aktivering som är karakteristisk för stimulanter (Peters och Wood, 2005).
Istället liknar beteendemässiga svar på akut AAS de hos opioider eller bensodiazepiner, vilket eventuellt får tillsatseffekter när de tas tillsammans. Akut exponering för AAS minskar autonoma funktioner, inklusive andning och kroppstemperatur (Peters och Wood, 2005). AAS-inducerad autonom depression påminner om symptomen på opioid-överdos och blockeras av opioidantagonisten naltrexon (Peters och Wood, 2005). Dessutom förstärker nandrolon, ett vanligt använt AAS, hypotermiska effekter av morfin och förvärrar naloxonutfällt morfinabstinenssymtom (Celerier et al., 2003). Dessutom är det väl etablerat att akuta AAS är lugnande / ångestdämpande (Agren et al., 1999, Arnedo et al., 2000, Frye och Seliga, 2001, Berbos et al., 2002, Peters och Wood, 2005), eventuellt medierade av deras direkta effekter på GABA-A-receptorer (Masonis och McCarthy, 1995, Masonis och McCarthy, 1996). Ökad etanolförbrukning hos råttor som kroniskt behandlats med AAS kan också vara en återspegling av förändrad GABAergisk funktion (Johansson et al., 2000).
Våra fynd på överdos ger ett ytterligare hälsoproblem. För närvarande är klassificeringen av AAS som kontrollämnen baserad på deras anabola egenskaper (Lagen om kontrollerade ämnen, 1991). Emellertid visar den aktuella studien att den anabola effekten av AAS inte nödvändigtvis motsvarar deras förstärkande egenskaper och överdosrisker. Förutom DHT-BSA-konjugat är DHT-CMO som används i denna studie inte ett kontrollerat ämne, även om dess förstärkningsegenskaper och dödlighet till följd av överdos verkar vara ganska lik DHT och T (Peters och Wood, 2005). Mönstret för överdos liknade också det som tidigare rapporterats för T (Peters och Wood, 2005), där högt intag resulterade i dödlighet 24 till 48 timmar senare. Mot bakgrund av dessa fynd kan kriterierna som används för att schemalägga en steroid som ett kontrollerat ämne kräva revideringar för att redogöra för dess missbruksansvar och toxicitet, utöver dess anabola styrka.
Resultaten från den aktuella studien antyder att kärnkrafts AR, den enda AR som hittills isolerats, inte är nödvändig för androgenförstärkningen. Istället antyder resultaten att androgenförstärkning transduceras vid plasmamembranet. Således krävs ytterligare undersökningar om identiteten hos det förmodade membranet AR, deras funktionella egenskaper och anatomiska fördelning för att belysa den underliggande mekanismen för AAS-missbruk och dess kliniska implikationer.
fotnoter
Ansvarsfriskrivning för förlag: Detta är en PDF-fil av ett oediterat manuskript som har godkänts för publicering. Som en tjänst till våra kunder tillhandahåller vi denna tidiga version av manuskriptet. Manuskriptet kommer att genomgå copyediting, uppsättning och granskning av det resulterande beviset innan det publiceras i sin slutliga formulär. Observera att under tillverkningsprocessen kan det upptäckas fel som kan påverka innehållet och alla juridiska ansvarsfrister som gäller för tidskriften avser.
Referensprojekt
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Beteende ångestdämpande effekter av låg dos anabola androgen steroidbehandling hos råttor. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteron har givande affektiva egenskaper hos hanråttor: konsekvenser för den biologiska grunden för sexuell motivation. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Belöningsegenskaper hos testosteron i intakta hanmöss: en pilotstudie. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikulär självadministrering av vanligt missbrukade anabola androgena steroider i manliga hamstrar (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolon, oxymetolon och stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Snabba effekter av östrogen eller progesteron på den amfetamininducerade ökningen av striatal dopamin förbättras genom östrogenprimning: en mikrodialysstudie. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Snabba effekter av androgener i makrofager. Steroider. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosteron signalering genom internaliserbara ytreceptorer i androgenreceptorfria makrofager. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akuta beteendeeffekter av anabola steroider: ångest, stereotypi och lokomotorisk aktivitet. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergström L. Förändrade extracellulära nivåer av DOPAC och HVA i råttkärnans accumbens skal som svar på subkronisk administrering av nandrolon och en efterföljande amfetaminutmaning. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgens hämmar östradiol-17beta-syntes i äggstockarna i atlantisk croaker (Micropogonias undulatus) genom en nongenomisk mekanism initierad vid cellytan. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. Biokemisk karaktärisering av en membran-androgenreceptor i äggstocken hos den atlantiska krokaren (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Mäklare KJ. Anabola steroider missbruk och beroende. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symtom och korrelationer av anabola androgena steroidberoende. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brun GR, Nemes C. Råttornas utforskande beteende i hålskivanordningen: är huvuddoppningen ett giltigt mått på neofili? Behav Processer. 2008;78: 442-448. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Effekter av nandrolon på akuta morfinsvar, tolerans och beroende hos möss. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, Pope HG., Jr Våld mot kvinnor och olaglig androgen-anabola steroider. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Avdelning 21, kapitel 13 - Förebyggande och kontroll av narkotikamissbruk Lag för kontrollerade ämnen. 1991
- DiMeo AN, Wood RI. Cirkulerande androgener ökar känsligheten för självadministrering av testosteron hos manliga hamstrar. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. ICV-testosteron inducerar Fos i manlig syrisk hamsterhjärna. Psychon. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Wood RI. Självadministrering av östrogen och dihydrotestosteron i manliga hamstrar. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteron stimulerar intracellulär kalciumfrisättning och mitogenaktiverade proteinkinaser via en G-proteinkopplad receptor i skelettmuskelceller. Endokrinologi. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Nedreglering av transformerande tillväxtfaktor beta-receptorer av androgen i äggstockscancerceller. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. En molekylär metod för att klassificera genotyperna erhållna i en uppfödningskoloni från testikelfeminiserade (Tfm) råttor. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Progestins påverkar motivation, belöning, konditionering, stress och / eller svar på missbruk av droger. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Kärnan uppstår som en handlingsplats för att belöna egenskaperna hos testosteron och dess 5alpha-reducerade metaboliter. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seliga AM. Testosteron ökar analgesi, ångestdys och kognitiv prestanda hos hanråttor. Kognitiv, affektiv och beteendevetenskaplig neurovetenskap. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosteron modulerar differentiellt det mitogenaktiverade proteinkinaset och fosfoinositiden 3-kinase / Akt-vägar genom det nukleära och nya membran-androgenreceptorn i C6-celler. Endokrinologi. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamin och kokain inducerar läkemedelsspecifik aktivering av c-fos-genen i striosom-matrisfack och limbiska underavdelningar i striatum. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomic testosteron-kalciumsignalering. Genotropiska åtgärder i androgenreceptorfria makrofager. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Han WW, Kumar MV, Tindall DJ. En ramskiftmutation i androgenreceptorgenen orsakar fullständig androgenkänslighet hos den testikel-feminiserade musen. Nukleinsyror Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabola androgena steroider påverkar alkoholintag, defensivt beteende och hjärnaopioidpeptider hos råtta. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Oral testosteron självadministrering i manliga hamstrar. Neuroendokrinologi. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, påven HG, Jr, Oliva PS. Ökad aggressiv respons hos manliga frivilliga efter administrering av gradvis ökande doser av testosteronscypionat. Drogalkohol Beroende. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidmodulering av GABAA-receptorer. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Anabola steroidmissbruk. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgener ökar den intracellulära kalciumkoncentrationen och inositol 1,4,5-trisfosfat och diacylglycerolbildning via ett kikhinne-känsligt G-protein. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgeneffekter på hippocampal CA1-rygg synapssiffror kvarstår i Tfm-hanråttor med defekta androgenreceptorer. Endokrinologi. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibering av NMDA-svaret med pregnenolonsulfat avslöjar subtyp selektiv modulering av NMDA-receptorer med sulfaterade steroider. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Direkta effekter av de anabola / androgena steroiderna, stanozolol och 17 alfa-metyltestosteron, på bensodiazepinbindning till. gamma-aminobutyric (a) receptor. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Effekter av den androgena / anabola steroidstanozololen på GABAA-receptorfunktion: GABA-stimulerad 36Cl-inflöde och [35S] TBPS-bindning. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol minskar kalciumströmmar i neostriatala neuroner hos råttor via en membranreceptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Morin LP, Wood RI. En stereotaxisk atlas av Golden Hamster Brain. Academic Press; San Diego: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. En roll för hypocretin (orexin) i manligt sexuellt beteende. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Council NR, redaktör. Nationella forskningsrådet. Guide för vård och användning av laboratoriedjur. Nationella forskningsrådet; Washington, DC: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid och cyproteronacetat utövar agonisteffekter: induktion av androgenreceptorberoende neurobeskyttelse. Endokrinologi. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Princip för djurvård i laboratoriet National Institute of Health; Bethesda, Maryland: 1985.
- Olds J, Milner PM. Positiv förstärkning producerad genom elektrisk stimulering av septal-området och andra områden av råtthjärnan. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Direkta effekter av androgener på lateral hypotalamisk neuronal aktivitet hos hanråttan: II. En tryckutkastningsstudie. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Direkta effekter av androgener på lateral hypotalamisk neuronal aktivitet hos hanråttan: I. En mikroiontoforetisk studie. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Belöna affektiva egenskaper hos intra-nucleus accumbens injektioner av testosteron. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Uttryck av testosteron-betingad platspreferens blockeras av perifer eller intra-ackumulerad injektion av alfa-flupenthixol. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. En snabb, ogenom signaliseringsväg reglerar aktinomorganisationen som induceras genom aktivering av membran-testosteronreceptorer. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Råtthjärnan: i sterotaxiska koordinater. 4th. Academic Press; New York: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Anabola-androgena steroidberoende involverar androgen- och opioidreceptorer. Fortsättningar av det 34te årsmötet i Society for Neuroscience; San Diego, CA. 2004.
- Peters KD, Wood RI. Androgenberoende hos hamstrar: överdosering, tolerans och potentiella opioidergiska mekanismer. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Snabb signalering med androgenreceptor i prostatacancerceller. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Luktaktiga och hormonella påverkningar på den manliga råtes basala förhjärna. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. Testosteron dämpar beta-amyloid toxicitet i odlade hippocampala neuroner. Brain Research. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Påven HG, Jr, Katz DL. Psykiatriska och medicinska effekter av anabola androgena steroider. En kontrollerad studie av 160-idrottare. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membranreceptorer för östrogen, progesteron och testosteron i råttahjärnan: fantasi eller verklighet. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Simily RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribution av androgen- och östrogen-mRNA-innehållande celler i råttahjärnan: En hybridiseringsstudie in situ. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Differentialeffekter av östradiol och östradiol-BSA-konjugat. Endokrinologi. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, östrogen och androgen G-protein-kopplade receptorer i fiskgonader. Steroider. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosteron och nucleus accumbens dopamin i den manliga syriska hamsteren. Psychon. 2008;33: 386-394. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Testosteron självadministrering i kvinnliga hamstrar. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Membraninitierade åtgärder av östrogener i neuroendokrinologi: nya principer. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Trä RI. Oral testosteron självadministrering i manliga hamstrar: dosrespons, frivillig träning och individuella skillnader. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Testosteronförstärkning: intravenös och intracerebroventrikulär självadministrering hos hanråttor och hamstrar. Psykofarmakologi (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Androgenreceptorimmunreaktivitet i den manliga och kvinnliga syriska hamsterhjärnan. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Negativa analysresultat rapporterade av ackrediterade laboratorier. World Anti-Doping Agency; Montreal, Kanada: 2006.
- Yamada Y. Effekterna av testosteron på enhetsaktivitet i råtthypothalamus och septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. En enda basmutation i androgenreceptorgenen orsakar androgenkänslighet hos den testikel feminiserade råtta. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabola androgena steroider i USA. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgen stimulerar mitogenaktiverat proteinkinas i mänskliga bröstcancerceller. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Kloning, uttryck och karaktärisering av en membranprogestinreceptor och bevis på att den är en mellanhand i meiotisk mognad av fiskosocyter. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Zuloaga DG, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Möss med testikel-feminiseringsmutationen visar en roll för androgenreceptorer i regleringen av ångestrelaterade beteenden och hypotalamisk-hypofysen-binjurens axel. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, sätter DA, Jordan CL, Breedlove SM. Androgenreceptorernas roll i maskuliniseringen av hjärnan och beteendet: vad vi har lärt oss av testikulär feminiseringsmutation. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC gratis artikel] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. Råttor med testikel-feminiseringsmutationen (TFM) visar ökade ångestindex. Fortsättningar av det 36te årsmötet i Society for Neuroscience; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.
;
