DeltaFosB no Núcleo Accumbens é fundamental para reforçar os efeitos da recompensa sexual. (2010)

COMENTÁRIOS: Delta FosB é um marcador para todos os vícios, tanto comportamentais quanto químicos. À medida que essa molécula aumenta no circuito de recompensa, também aumentam os comportamentos de dependência. É uma das moléculas envolvidas nas alterações neuroplásticas. Esta experiência mostra que aumenta com a experiência sexual, da mesma forma que acontece com o vício em drogas. No experimento, eles empregaram engenharia genética para aumentar seus níveis além do “normal”. Isso resultou em maior facilitação da atividade sexual. Achamos que isso acontece com o vício em pornografia.

ESTUDO COMPLETO

Jarros KK, Frohmader KS, Vialou V, E Mouzon, EJ Nestler, Lehman MN, Coolen LM.

Genes Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Departamento de Anatomia e Biologia Celular, Escola Schulich de Medicina e Odontologia, Universidade de Western Ontario, Londres, Ontário, Canadá.

RESUMO

O comportamento sexual em ratos machos é recompensador e reforçador. No entanto, pouco se sabe sobre os mecanismos celulares e moleculares específicos que medeiam a recompensa sexual ou os efeitos reforçadores da recompensa na expressão subseqüente do comportamento sexual. Este estudo testa a hipótese de que ΔFosB, a forma truncada expressa de forma estável de FosB, desempenha um papel crítico no reforço do comportamento sexual e facilitação induzida pela experiência de motivação e desempenho sexual.

Foi demonstrado que a experiência sexual causa o acúmulo de ΔFosB em várias regiões do cérebro límbico, incluindo o nucleus accumbens (NAc), córtex pré-frontal medial, área tegmentar ventral e putâmen caudado, mas não o núcleo pré-óptico medial.

Em seguida, a indução de c-Fos, um alvo a jusante (reprimido) de ΔFosB, foi medida em animais sexualmente experientes e ingênuos. O nero de culas imunorreactivas c-Fos induzidas por acasalamento foi significativamente diminuo em animais sexualmente experientes em comparao com controlos sexualmente naives.

Finalmente, os níveis de ΔFosB e sua atividade no NAc foram manipulados usando transferência gênica mediada por vírus para estudar seu papel potencial na mediação da experiência sexual e da facilitação induzida pela experiência do desempenho sexual. Animais com superexpressão ΔFosB apresentaram maior facilitação do desempenho sexual com experiência sexual em relação aos controles. Em contraste, a expressão de ΔJunD, um parceiro de ligação negativa dominante de ΔFosB, atenuou a facilitação induzida pela experiência sexual do desempenho sexual e retardou a manutenção a longo prazo da facilitação em comparação com a proteína de fluorescência verde e os grupos de superexpressão ΔFosB.

Juntas, essas descobertas apóiam um papel crítico para a expressão de ΔFosB no NAc para os efeitos reforçadores do comportamento sexual e facilitação induzida pela experiência sexual do desempenho sexual.

INTRODUÇÃO

O comportamento sexual é altamente recompensador e reforçador para os roedores machos (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Além disso, a experiência sexual altera o comportamento sexual e a recompensa subsequentes (Tenk et al. 2009). Com repetidas experiências de acasalamento, o comportamento sexual é facilitado ou “reforçado”, evidenciado pela diminuição das latências para iniciar o acasalamento e facilitar o desempenho sexual (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). No entanto, os mecanismos celulares e moleculares subjacentes à recompensa e ao reforço sexual são pouco compreendidos. O comportamento sexual e as pistas condicionadas que predizem o acasalamento demonstraram transitoriamente induzir a expressão do gene c-fos imediato no sistema mesolímbico de ratos machos (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Além disso, foi recentemente demonstrado que a experiência sexual induz a neuroplasticidade de longa duração no sistema mesolímbico de ratos machos (Frohmader et al. 2009; Jarros et al. 2010). Além disso, em ratos machos, a experiência sexual mostrou induzir ΔFosB, a Membro da família Fos, no nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, uma variante de splice truncada de FosB, é um membro único da família Fos devido a sua maior estabilidade (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) e desempenha um papel na melhoria da motivação e recompensa por drogas de abuso e da plasticidade neural a longo prazo que medeia a dependência (Nestler et al. 2001). ΔFosB forma um complexo de fator de transcrição heteromérico (proteína ativadora-1 (AP-1)) com proteínas Jun, preferencialmente JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Através da sobre-expressão induzível de ΔFosB, principalmente restrita ao estriado usando camundongos bi-transgênicos, um fenótipo comportamental semelhante a um viciado em drogas é produzido apesar da ausência de exposição prévia ao medicamento (McClung et al. 2004). Este fenótipo comportamental inclui uma resposta locomotora sensibilizada à cocaína (Kelz et al. 1999), aumento da preferência pela cocaína (Kelz et al. 1999) e morfina (Zachariou et al. 2006) e aumento da auto-administração de cocaína (Colby et al. 2003).

Semelhante à recompensa do medicamento, ΔFosB é regulado por comportamentos naturais de recompensa e medeia a expressão desses comportamentos. A superexpressão de ΔFosB no NAc usando modelos de roedores aumenta o funcionamento voluntário da roda (Werme et al. 2002), instrumental respondendo por comida (Olausson et al. 2006), ingestão de sacarose (Wallace et al. 2008), e facilita o homem (Wallace et al. 2008) e feminino (Bradley et al. 2005) comportamento sexual. Assim, ΔFosB pode estar envolvido na mediação dos efeitos das experiências de recompensa natural.O presente estudo expande estudos prévios investigando especificamente o papel de ΔFosB no NAc nos resultados a longo prazo da experiência sexual no comportamento de acasalamento subsequente e ativação neural no sistema mesolímbico.

Primeiro, foi estabelecido quais regiões do cérebro implicadas no circuito de recompensa e comportamento sexual expressam ΔFosB induzido pela experiência sexual.
Em seguida, o efeito da ΔFosB induzida pela experiência sexual na expressão de c-Fos induzida pelo acasalamento, um alvo a jusante reprimido por ΔFosB (Renthal et al. 2008), foi investigado.
Finalmente, o efeito da manipulação da atividade de ΔFosB no NAc (sobre-expressão gênica e expressão de um parceiro dominante de ligação negativa) no comportamento sexual e facilitação induzida pela experiência de motivação sexual e desempenho foi determinado usando tecnologia de entrega de vetor viral.

MÉTODOS

Animais

Ratos Sprague Dawley machos adultos (200-225 gramas) foram obtidos de Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Os animais foram alojados em gaiolas de Plexiglas com um tubo de túnel em pares do mesmo sexo durante experimentos. A sala da colônia foi regulada por temperatura e mantida em um ciclo 12 / 12 hr claro escuro com alimentos e água disponíveis ad libitum exceto durante o teste comportamental. Fêmeas de estímulo (210 – 220 gramas) para sessões de acasalamento receberam um implante subcutâneo contendo 5% de benzoato de estradiol e 95% de colesterol após ovariectomia bilateral sob anestesia profunda (0.35g ketamina / 0.052g Xylazine). A receptividade sexual foi induzida pela administração de 500µg progesterona em 0.1 mL de óleo de gergelim aproximadamente 4 horas antes do teste. Todos os procedimentos foram aprovados pelos Comitês de Uso e Cuidados Animais da Universidade de Western Ontario e seguiram as diretrizes do CCAC envolvendo animais vertebrados em pesquisa.

Comportamento Sexual

As sessões de acasalamento ocorreram durante a fase escura inicial (entre 2 – 6 horas após o início do período escuro) sob iluminação vermelha fraca. Antes do início da experiência, os animais foram divididos aleatoriamente em grupos. Durante as sessões de acasalamento os ratos machos foram autorizados a copular para ejaculação ou 1 hora, e parâmetros para comportamento sexual foram registrados incluindo: latência de montagem (ML; tempo desde a introdução da fêmea até a primeira montada), latência de intromissão (IL; tempo de introdução de a fêmea até a primeira montaria com penetração vaginal), latência da ejaculação (EL; tempo desde a primeira intromissão até a ejaculação), intervalo de ejaculação (PEI; tempo da ejaculação até a primeira intromissão subseqüente), número de montarias (M; penetração), número de intromissões (IM; montagem incluindo penetração vaginal) e eficiência de cópula (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Números de montarias e intromissões não foram incluídos na análise para animais que não exibiram ejaculação. As latências de montagem e intromissão são parâmetros indicativos da motivação sexual, enquanto a latência da ejaculação, o número de montagens e a eficiência da copulação refletem o desempenho sexual (Casco 2002).

Experiência 1: Expressão de ΔFosB

Ratos machos sexualmente ingênuos foram autorizados a acasalar em gaiolas de teste limpas (60 × 45 × 50 cm) para 5 sessões de acasalamento diárias consecutivas ou permaneceu sexualmente ingênuo. Tabela suplementar 1 delineia o paradigma comportamental para grupos experimentais: naive sem sexo (NNS; n = 5), sexo ingênuo (NS; n = 5), sem sexo (ENS; n = 5) e sexo experimentado (ES; n = 4). Os animais NS e ES foram sacrificados 1 hora após a ejaculação no último dia de acasalamento para investigar a expressão de c-Fos induzida pelo acasalamento. Os animais do NNS foram sacrificados concomitantemente com animais ENS 24 horas após a sessão final de acasalamento para examinar ΔFosB induzido pela experiência sexual. Grupos sexualmente experientes foram pareados por comportamento sexual antes de testes subseqüentes. Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos para quaisquer medidas comportamentais dentro da sessão de acasalamento apropriada e a facilitação do comportamento sexual induzida pela experiência sexual foi demonstrada por ambos os grupos experientes (Tabela suplementar 2). Os controles incluíam machos sexualmente ingênuos tratados simultaneamente com animais de acasalamento, garantindo a exposição a odores e vocalizações femininos sem contato direto com a fêmea.

Para sacrifício, os animais foram profundamente anestesiados com pentobarbital sódico (270mg / kg; ip) e perfundidos intracardialmente com 50 mL de solução salina 0.9%, seguido por 500 mL de paraNormaxdeído 4% em tampão fosfato 0.1 M (PB). Os cérebros foram removidos e pós-fixados para 1 h à temperatura ambiente no mesmo fixador, depois imersos em 20% de sacarose e 0.01% de azida de sódio em 0.1 M PB e armazenados a 4 ° C. Secções coronais (35 µm) foram cortadas com micrótomo de congelamento (H400R, Micron, Alemanha), coletadas em quatro séries paralelas em solução crioprotetora (30% sacarose e 30% etilenoglicol em 0.1 M PB) e armazenadas a −20 ° C. As secções de flutuação livre foram lavadas extensivamente com solução salina tamponada com fosfato 0.1 M (PBS; pH 7.3-7.4) entre incubações. As seções foram expostas a 1% H₂O₂ para 10 min à temperatura ambiente para destruir peroxidases endógenas, então bloqueado em PBS + solução de incubação, que é PBS contendo 0.1% albumina de soro bovino (item de catálogo 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) e 0.4% Triton X -100 (item de catálogo BP151-500; Sigma-Aldrich) para 1 h. As secções foram então incubadas durante a noite a 4 ° C num anticorpo policlonal de coelho pan-FosB (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotecnologia, Santa Cruz, CA, EUA). O anticorpo pan-FosB foi criado contra uma região interna compartilhada por FosB e ΔFosB. As células ΔFosB-IR foram especificamente ΔFosB-positivas porque, no tempo pós-estímulo (24 horas), todos os FosB induzidos por estímulo detectável são degradados (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Além disso, neste experimento, os animais que se acasalaram no dia final (NS, ES) foram sacrificados 1 h após o acasalamento, portanto, antes da expressão de FosB. A análise de Western blot confirmou a detecção de ΔFosB em aproximadamente 37 kD. Após a incubação do anticorpo primário, as secções foram incubadas para 1 h em IgG de cabra anti-coelho conjugada com biotina (1 em PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, EUA) e depois 500 h em peroxidase de avidina-biotina-hoseradish (ABC elite 1: 1K em PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, EUA). Após essa incubação, as seções foram processadas de uma das seguintes maneiras:

1. Rotulagem única peroxidase

As secções dos animais NNS e ENS foram utilizadas para uma análise cerebral da acumulação de ΔFosB induzida pela experiência sexual. Após a incubação ABC, o complexo de peroxidase foi visualizado após tratamento com 10 minutos a uma solução cromogénica contendo 0.02% 3,3'-tetracloridrato de diaminobenzidina (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) reforçada com 0.02% de sulfato de níquel em 0.1 M PB com peróxido de hidrogênio (0.015%). As secções foram lavadas completamente em 0.1 M PB para terminar a reacção e montadas em lâminas Superfrost codificadas mais lâminas de vidro (Fisher, Pittsburgh, PA, EUA) com 0.3% de gelatina em ddH₂0. Após a desidratação, todas as lâminas foram cobertas com DPX (ftalato de dibutil xileno).

2. Imunofluorescência dupla

Seções de todos os quatro grupos experimentais contendo NAc e mPFC foram utilizados para análise de ΔFosB e c-Fos. Após incubação ABC, secções foram incubadas para 10 min com tiramida biotinilada (BT; 1: 250 em PBS + 0.003% H₂O₂ Kit de amplificao de sinal Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) e para 30 min com estreptavidina conjugada com Alexa 488 (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). As secções foram então incubadas durante a noite com um anticorpo policlonal de coelho reconhecendo especificamente c-Fos (1: 150; sc-52; Biotecnologia Santa Cruz, Santa Cruz, CA), seguido por uma incubação 30 min com anticorpo secundário conjugado Cy3 de cabra anti-coelho (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, EUA). Após a coloração, as secções foram lavadas cuidadosamente em 0.1 M PB, montadas em lâminas de vidro codificadas com 0.3% de gelatina em ddH₂0 e cobriu-se com um meio de montagem aquoso (Gelvatol) contendo o agente anti-desbotamento 1,4-diazabiciclo (2,2) octano (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Os controlos imuno-histoquicos incluam a omiss de um ou ambos os anticorpos primios, resultando na auscia de marcao no comprimento de onda apropriado.

Análise de Dados

Análise cerebral de ΔFosB

Dois pesquisadores cegos para o tratamento realizaram a varredura do cérebro em slides codificados. As cï¿½ulas? FosB-imunorreactivas (-IR) em todo o cï¿½ebro foram analisadas semi-quantitativamente utilizando uma escala para representar o nï¿½ero de cï¿½ulas positivas para? tabela 1. Além disso, com base em achados semiquantitativos, os números de células ΔFosB-IR foram contados usando áreas padrão de análise em áreas cerebrais implicadas em recompensa e comportamento sexual usando um tubo de desenho de câmara fotográfica ligado a um microscópio Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Alemanha): NAc (núcleo (C) e concha (S); 400 × 600µm) analisados em três níveis rostral-caudais (Balfour et al. 2004); área tegmentar ventral (VTA; 1000 × 800µm) analisada em três níveis rostral-caudais (Balfour et al. 2004) e cauda VTA (Perrotti et al. 2005); córtex pré-frontal (área de cingulado anterior (ACA); córtex pré-límbico (PL); córtex infralímbico (IL); 600 × 800µm cada); putâmen caudado (CP; 800 × 800µm); e núcleo pré-óptico medial (NMP; 400 × 600 µm) (Figuras Suplementares 1 – 3). Duas seções foram contadas por sub-região, e média por animal para cálculo da média do grupo. As médias de grupos sexualmente ingênuos e experientes de células ΔFosB-IR foram comparadas para cada sub-região usando testes t não pareados.

Resumo da expressão de ΔFosB em animais sexualmente ingênuos e experientes

Análise de ΔFosB e c-Fos

As imagens foram capturadas usando uma câmera CCD refrigerada (Microfire, Optronics) acoplada a um microscópio Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Alemanha) e software Neurolucida (MicroBrightfield Inc) com configurações de câmera fixas para todos os indivíduos (usando objetivas 10x). Número de células que expressam c-Fos-IR ou ΔFosB-IR em áreas padrão de análise no núcleo e no invólucro de NAc (400 × 600µm cada; Figura suplementar 1) e ACA do mPFC (600 × 800µm; Figura suplementar 3) foram contados manualmente por um observador cego para os grupos experimentais, em secções 2 por animal utilizando o software Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) e média por animal. As médias do grupo de células c-Fos ou ΔFosB foram comparadas usando ANOVA two-way (Fatores: experiência sexual e atividade sexual) e LSD Fisher para comparações post hoc a um nível de significância de 0.05.

Experimento 2: Manipulação da expressão ΔFosB

Transferência Genética Vetorial Mediada Viral

Ratos Sprague Dawley machos sexualmente ingênuos foram aleatoriamente divididos em grupos antes da cirurgia estereotáxica. Todos os animais receberam microinjeções bilaterais de vetores recombinantes adeno-associados (rAAV) codificando GFP (controle; n = 12), ΔFosB do tipo selvagem (n = 11) ou um parceiro de ligação dominante negativo de ΔFosB denominado JJunD (n = 9) no NAc. ΔJunD diminui a transcrição mediada por ΔFosB por heterodimerização competitiva com ΔFosB antes de se ligar à região AP-1 nos promotores do gene (Winstanley et al. 2007). O título de vírus foi determinado por qPCR e avaliado in vivo antes do início do estudo. O título foi 1 – 2 × 10¹¹ partículas infecciosas por mL. Os vetores rAAV foram injetados em um volume de 1.5 µl / lado sobre 7 minutos (coordenadas: AP + 1.5, ML +/− 1.2 de Bregma; DV-7.6 da superfície do crânio de acordo com Paxinos e Watson, 1998) usando uma seringa Hamilton (5µL ; Harvard Apparatus, Holliston, MA, EUA). Os vetores não produzem toxicidade maior do que as infusões de controle isoladamente (Winstanley et al, 2007; para detalhes da preparação do AAV, ver Hommel et al., 2003). Experimentos comportamentais iniciaram 3 semanas após injeções vetoriais, permitindo uma infecção viral ótima e estável (Wallace et al. 2008). A expressão do transgene em espécies murinas atinge um pico em 10 dias e permanece elevada por pelo menos 6 meses (Winstanley et al. 2007). No final da expericia, os animais foram perfundidos transcardialmente e as seces NAc foram imunoprocessadas para GFP (1: 20K; anticorpo anti-GFP de coelho; Molecular Probes) utilizando uma reaco ABC-peroxidase-DAB (como descrito acima) para histologicamente verificar os locais de injeção utilizando GFP como marcador (Figura suplementar 4). Os vetores ΔFosB e ΔJunD também contêm um segmento expressando GFP separado por um local de entrada ribossômico interno, permitindo a verificação do local da injeção pela visualização da GFP em todos os animais. Apenas animais com locais de injeção e disseminação de vírus restritos ao NAc foram incluídos nas análises estatísticas. A propagação do vírus foi geralmente limitada a uma porção do NAc e não se espalhou rostral-caudalmente por todo o núcleo. Além disso, a propagação do vírus apareceu principalmente restrita a casca ou núcleo. No entanto, a variação dos locais de injeção e disseminação dentro do NAc não influenciou os efeitos sobre o comportamento. Finalmente, as injeções de GFP não afetaram o comportamento sexual ou a facilitação induzida pela experiência de comportamento sexual, em comparação com animais não cirúrgicos de estudos anteriores (Balfour et al. 2004).

Comportamento Sexual

Três semanas após a entrega do vetor viral, os animais acasalaram com uma ejaculação (ou 1 hora) para sessões de acasalamento diárias consecutivas 4 para ganhar experiência sexual (sessões de experiência) e foram subsequentemente testados para expressão de experiência prolongada de facilitação induzida por experiência sexual 1 e 2 semanas (sessões de teste 1 e 2) após a sessão de experiência final. Parâmetros de comportamento sexual foram registrados durante todas as sessões de acasalamento, conforme descrito acima. As diferenças estatísticas para todos os parâmetros durante cada sessão de acasalamento foram comparadas dentro e entre grupos usando ANOVAs de medidas repetidas (Fatores: tratamento e acasalamento) ou ANOVA unidirecional (latência da ejaculação, número de montagens e intromissões; Fator: tratamento ou acasalamento sessão) seguidos pelos testes de Fisher LSD ou Newman-Keuls para comparações post hoc a um nível de significância de 0.05. Especificamente, os efeitos facilitadores da experiência sexual nos parâmetros de acasalamento foram comparados entre a sessão de experiência 1 (ingênua) e sessões de experiência 2, 3 ou 4 cada, bem como entre grupos experimentais dentro de cada sessão de experiência. Além disso, para analisar os efeitos do tratamento (vetor) na facilitação de longo prazo do comportamento sexual, os parâmetros de acasalamento foram comparados entre a sessão de experiência 4 e a sessão de teste 1 e 2 dentro de cada grupo de tratamento e comparados entre grupos experimentais dentro de cada sessão de teste.

PREÇO/ RESULTADOS

Experiência sexual provoca a acumulação de ΔFosB

Inicialmente, uma investigação semi-quantitativa da acumulação de ΔFosB em todo o cérebro em machos sexualmente experientes em comparação com controles sexualmente ingênuos foi conduzida. Um resumo dos achados gerais é fornecido em tabela 1. A análise de ΔFosB-IR foi promovida determinando o número de células ΔFosB-IR em várias regiões cerebrais associadas a um limbo usando áreas padrão de análise. Figura 1 demonstra imagens representativas de DAB-Ni colorindo o NAc de animais sexualmente ingênuos e experientes. Uma significativa regulação positiva de ΔFosB foi encontrada nas sub-regiões mPFC (Figura 2A) Núcleo e concha de NAc (2B), putâmen de caudado (2B) e VTA (2C). No NAc, existiam diferenças significativas em todos os níveis rostral-caudais no núcleo e na casca do NAc, e os dados Figura 2 é a média de todos os níveis rostro-caudais. Em contraste, não houve aumento significativo em ΔFosB-IR no núcleo pré-óptico medial hipotalâmico (NNS: 1.8 Médio +/− 0.26; ENS: 6.0 Médio +/− 1.86).

Imagens representativas mostrando células ΔFosB-IR (negras) no NAc de indivíduos sem sexo (A) e sem experiência de sexo (B). aco: comissura anterior A barra de escala indica 100 µm.

Número de células ΔFosB-IR em: A. sub-regiões de córtex pré-límbico (IL), pré-límbico (PL) e córtex cingulado anterior (ACA) do córtex pré-frontal medial; B. Núcleo accumbens núcleo e concha e caudado putamen (CP); C. Rostral, médio, caudal e cauda ...

A experiência sexual atenua os c-Fos induzidos pelo acasalamento

O efeito da experiência sexual nos níveis de ΔFosB no NAc foi confirmado usando técnicas de coloração por fluorescência. Além disso, os efeitos da experiência sexual na expressão de c-Fos foram analisados. Figura 3 demonstra imagens representativas das células ΔFosB- (verde) e c-Fos (vermelha) -IR em todos os grupos experimentais (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). A experiência sexual aumentou significativamente a expressão de ΔFosB no núcleo de NAc (Figura 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) e shell (Figura 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). Em contraste, o acasalamento da hora 1 antes da perfusão, não teve efeito sobre a expressão de ΔFosB (Figura 4A, C) e não foi detectada interação entre a experiência sexual e o acasalamento imediatamente anterior à perfusão. Houve um efeito global de acasalamento antes da perfusão na expressão de c-Fos em ambos os núcleos NAc (Figura 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) e casca (Figura 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Além disso, um efeito geral da experiência sexual foi detectado no núcleo NAc (Figura 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) e shell (Figura 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) e uma interacção entre a experiência sexual e o acasalamento antes da perfusão foi detectada no núcleo NAc (F_1,15 = 6.5; p = 0.022), com uma tendência no shell (F_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). Análises post hoc demonstraram a expressão de c-Fos induzida pelo acasalamento no núcleo e na concha de machos sexualmente ingênuos (Figura 4B, D). No entanto, em machos sexualmente experientes, o c-Fos não foi significativamente aumentado no núcleo de NAc (Figura 4B) e significativamente atenuado na casca (Figura 4D). Assim, a experiência sexual causou uma redução da expressão de c-Fos induzida pelo acasalamento. Valores de P para comparações específicas por pares estão nas legendas das figuras.

Imagens representativas mostrando ΔFosB (verde) e c-Fos (vermelho) em NAc para cada grupo experimental. A barra de escala indica 100 µm.

FosB induzido por experiência sexual e c-Fos induzido por acasalamento. Números de células imunorreativas a ΔFosB (Núcleo, A; Concha, C; ACA, E) ou c-Fos (Núcleo, B; Casca, D; ACA, F) para cada grupo: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) ou ES (n = 4). Os dados são expressos ...

O efeito da experiência sexual nos níveis de c-Fos induzidos pelo acasalamento não se restringiu ao NAc. Uma atenuação semelhante da expressão de c-Fos foi observada na ACA em animais sexualmente experientes em comparação com controles sexualmente ingênuos. A experiência sexual teve um efeito significativo na expressão de ΔFosB no ACA (Figura 4E: F_1,15 = 154.2; p <0.001). O acasalamento antes da perfusão não teve um efeito na expressão de ΔFosB (Figura 4C) mas aumentou significativamente c-Fos (Figura 4F: F_1,15 = 203.4; p <0.001) no ACA. Além disso, a expressão de c-Fos induzida por acasalamento no ACA foi significativamente diminuída pela experiência sexual (Figura 4F: F_1,15 = 15.8; p = 0.001). Uma interação bidirecional entre a experiência sexual e o acasalamento antes da perfusão foi detectada para a expressão de c-Fos (Figura 4F: F_1,15 = 15.1; p <0.001). Os valores de P para comparações de pares específicos estão nas legendas das figuras. Finalmente, não houve redução significativa na expressão de c-Fos induzida por acasalamento no núcleo pré-óptico medial (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), uma área onde a experiência de acasalamento não causou um aumento na expressão de ΔFosB, indicando que a expressão de c-Fos induzida por acasalamento não foi afetada em todas as áreas do cérebro.

FFosB no NAc media o reforço do comportamento sexual

Para explorar um mecanismo molecular potencial para o reforço do comportamento sexual, como demonstrado pela facilitação induzida pela experiência do comportamento sexual, foram determinados os efeitos da manipulação local dos níveis de ΔFosB e sua atividade transcricional. A experiência sexual durante as quatro sessões de experiência consecutivas teve um efeito significativo na latência de montagem (Figura 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), latência de intromissão (Figura 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) e latência de ejaculação (Figura 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). Os animais de controlo GFP exibiram a facilitação do comportamento sexual induzida pela experiência esperada e apresentaram latências significativamente mais baixas para a primeira montagem, primeira intromissão e ejaculação durante a sessão de experiência 4 em comparação com a sessão de experiência 1 (Figura 5A – C; veja a legenda da figura para valores p). Esta facilitação induzida pela experiência do comportamento sexual também foi observada no grupo ΔFosB para latências de montagem e intromissão, mas não houve diferença significativa detectada na latência da ejaculação (Figura 5A – C). Em contraste, os animais ΔJunD exibiram uma facilitação atrofiada; embora as latências para montagens, intromissões e ejaculações tenham diminuído com repetidas sessões de acasalamento, nenhum desses parâmetros alcançou significância estatística quando comparado entre as sessões de experiência 1 e 4 (Figura 5A – C). Entre as comparações entre os grupos para cada sessão de experiência, verificou-se que ΔJunD tinha latências significativamente maiores para montar, introduzir e ejacular durante as sessões de experiência em comparação com ΔFosB e GFP (Figura 5A – C). Além disso, tanto a experiência sexual quanto o tratamento tiveram efeitos significativos na eficiência da copulação (Figura 5F: experiência sexual, F_1,12 = 22.5; p <0.001; tratamento, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). Os machos ΔFosB aumentaram a eficiência da cópula durante a sessão de experiência 4 em comparação com a sessão de experiência 1 (Figura 5F). Além disso, os animais ΔFosB tiveram significativamente menos montes antes da ejaculação durante o dia da sessão de experiência 4, em comparação com a sessão de experiência 1 (Figura 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004), e que os machos ΔJunD tinham significativamente mais montes antes da ejaculação, reduzindo assim significativamente a eficiência da copulação, do que qualquer um dos outros dois grupos (Figura 5D e F). Assim, os animais GFP e ΔFosB exibiram facilitação induzida pela experiência de início do comportamento sexual e desempenho sexual, enquanto os animais ΔJunD não o fizeram.

Comportamento sexual de animais GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) e ΔJunD (n = 9): latência de montagem (A), latência de intromissão (B), latência de ejaculação (C), número de montagens (D) número de intromissões (E) e eficiência de copulação (F). Os dados são expressos ...

Para testar a hipótese de que a expressão de ΔFosB é crítica para a expressão a longo prazo da facilitação do comportamento sexual induzida pela experiência, os animais foram testados na semana 1 (sessão de teste 1) e 2 semanas (sessão de teste 2) após a sessão de experiência final. De fato, o comportamento sexual facilitado foi mantido nos grupos GFP e ΔFosB, já que nenhum dos parâmetros comportamentais diferiu entre as sessões de teste 1 ou 2 e a sessão de experiência final 4, dentro dos grupos GFP e ΔFosB (Figura 5A – C; exceto para a latência da ejaculação e eficiência de copulação na sessão de teste 1 para animais ΔFosB). Diferenças significativas entre os animais ΔJunD e os grupos GFP ou ΔFosB foram detectadas em ambas as sessões de teste para todos os parâmetros de comportamento sexual (Figura 5A – F). Não houve diferenças detectadas entre ou dentro dos grupos quando se compara o número de intromissões, PEI, ou percentagens de animais que ejacularam (100% de machos em todos os grupos ejaculados durante as últimas quatro sessões de acasalamento).

DISCUSSÃO

O presente estudo demonstrou que a experiência sexual provoca uma acumulação de ΔFosB em várias regiões cerebrais associadas ao sistema límbico, incluindo o núcleo e concha de NAc, mPFC, VTA e putamen caudado. Além disso, a experiência sexual atenuou a expressão de c-Fos induzida pelo acasalamento no NAc e ACA. Finalmente, ΔFosB no NAc mostrou-se crítico na mediação da facilitação do acasalamento durante a aquisição da experiência sexual e a expressão a longo prazo da facilitação induzida pela experiência do comportamento sexual. Especificamente, a redução da transcrição mediada por ΔFosB atenuou a facilitação induzida pela experiência de motivação sexual e desempenho, enquanto a superexpressão de ΔFosB em o NAc causou uma maior facilitação do comportamento sexual, em termos de aumento do desempenho sexual com menos experiência. Juntos, os resultados atuais apóiam a hipótese de que ΔFosB é um mediador molecular crítico para a plasticidade neural e comportamental de longo prazo induzida pela experiência sexual.

Os achados atuais estendem estudos prévios mostrando a ΔFosB induzida pela experiência sexual no NAc em ratos machos (Wallace et al. 2008) e hamsters femininos (Hedges et al. 2009). Wallace et al. (2008) mostrou que o rAAV-A superexpressão de ΔFosB no NAc aumentou o comportamento sexual em animais sexualmente ingênuos durante a primeira sessão de acasalamento, como evidenciado por menos intervenções na ejaculação e intervalos pós-ejaculatórios mais curtos, mas não teve efeito em machos sexualmente experientes (Wallace et al. 2008).

Em contraste, o estudo atual não demonstrou nenhum efeito da sobreexpressão de ΔFosB em homens sexualmente ingênuos durante o primeiro teste, mas sim durante e após a aquisição da experiência sexual. OverFosB sobre-expressores demonstraram aumento do desempenho sexual (aumento da eficiência de copulação) em comparação aos animais GFP.

Além disso, o presente estudo testou o papel de ΔFosB bloqueando a transcrição mediada por ΔFosB usando um vetor viral que expressa JunD. A prevenção do aumento induzido pela experiência na expressão de ΔFosB inibiu a facilitação induzida pela experiência da motivação sexual (aumento das latências de montagem e intromissão) bem como o desempenho sexual (aumento da latência da ejaculação e número de montarias) e subsequente expressão de comportamento sexual facilitado.

Assim, esses dados são os primeiros a indicar um papel obrigatório para ΔFosB na aquisição da facilitação induzida pela experiência do comportamento sexual. Além disso, esses dados mostram que ΔFosB também está criticamente envolvido na expressão de longo prazo do comportamento facilitado induzido pela experiência. Propomos que esta expressão de longo prazo do comportamento facilitado representa uma forma de memória para a recompensa natural, portanto, ΔFosB no NAc é um mediador da memória de recompensa. A experiência sexual também aumentou os níveis de ΔFosB na VTA e no mPFC, áreas implicadas na recompensa e na memória (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Futuros estudos são necessários para elucidar uma significância potencial da regulação positiva de ΔFosB nessas áreas para memória de recompensa.

A expressão de ΔFosB é altamente estável, portanto, tem grande potencial como mediador molecular de adaptações persistentes do cérebro após perturbações crônicas (Nestler et al. 2001). Demonstrou-se que a ΔFosB aumenta gradualmente o NAc em várias injeções de cocaína e persiste por várias semanas (Esperança et al. 1992; Esperança et al. 1994). Estas alterações na expressão de NAc ΔFosB estão associadas à sensibilização e dependência à recompensa de medicamentos (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). Em contraste, o papel de ΔFosB na mediação da recompensa natural foi pouco estudado. Evidências recentes surgiram sugerindo que a indução de ΔFosB no NAc está envolvida na recompensa natural. Os níveis de ΔFosB são similarmente aumentados no NAc após ingestão de sacarose e. A superexpressão de ΔFosB no estriado usando camundongos bitransgênicos ou vetores virais em ratos provoca um aumento na ingestão de sacarose, motivação aumentada para comida e aumentou corrida de roda espontânea (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Os dados atuais acrescentam substancialmente a esses relatórios e sustentam ainda mais a noção de que ΔFosB é um mediador crítico para o reforço de recompensas e para a memória de recompensas naturais.

ΔFosB pode mediar o reforço do comportamento sexual induzido pela experiência através da indução de plasticidade no sistema mesolímbico. De fato, a experiência sexual provoca uma série de mudanças duradouras no sistema mesolímbico (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; Jarros et al. 2010). UMAo nível comportamental, uma resposta locomotora sensibilizada à anfetamina e uma recompensa aumentada de anfetaminas foram demonstradas em ratos machos sexualmente experientes (Jarros et al. 2010); uma resposta locomotora alterada à anfetamina também foi observada em hamsters fêmeas (Bradley & Meisel 2001). Além disso, foram encontrados aumentos no número de espinhos dendríticos e complexidade dos mandris dendríticos após um período de abstinência da experiência sexual em ratos machos (Jarros et al. 2010). O presente estudo sugere que ΔFosB pode ser um mediador molecular específico dos resultados a longo prazo da experiência sexual. De acordo, recentemente demonstrou-se que ΔFosB é importante para induzir mudanças na coluna dendrítica em resposta à administração crônica de cocaína (Dietz et al. 2009; Maze et al. 2010).

Não está claro qual neurotransmissor (es) a montante é responsável por induzir ΔFosB no NAc, mas o DA foi proposto como candidato (Nye et al. 1995). Praticamente todas as drogas de abuso, incluindo cocaína, anfetaminas, opiáceos, canabinóides e etanol, bem como recompensas naturais, aumentam ΔFosB no NAc. (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Ambas as drogas de abuso e recompensas naturais aumentam a concentração sináptica de AD no NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). A indução de ΔFosB por drogas de abuso foi demonstrada em células contendo o receptor DA e a ΔFosB induzida por cocaína é bloqueada por um antagonista do receptor D1 DAt (Nye et al. 1995). Assim, supõe-se que a liberação de DA estimule a expressão de ΔFosB e, desse modo, medie a neuroplasticidade relacionada à recompensa.. Apoiando ainda mais a ideia de que os níveis de ΔFosB são dependentes de DA é a descoberta de que as áreas do cérebro onde a experiência sexual alterou os níveis de ΔFosB recebem forte input dopaminérgico da VTA, incluindo o córtex pré-frontal medial e a amígdala basolateral.

No entanto, em contraste, ΔFosB não é aumentado na área pré-óptica medial, embora essa área receba estímulo dopaminérgico, embora a partir de fontes hipotalâmicas (Miller & Lonstein 2009). Estudos futuros são necessários para testar se a expressão de ΔFosB induzida pelo acasalamento e os efeitos da experiência sexual na motivação sexual e no desempenho são dependentes da ação da DA. O papel da DA na recompensa sexual em ratos machos atualmente não é completamente claro (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Há ampla evidência de que o DA é liberado no NAc durante a exposição a uma fêmea ou acasalamento (Damsma et al. 1992) e neurônios DA são ativados durante o comportamento sexual (Balfour et al. 2004). No entanto, as injeções sistêmicas do antagonista do receptor DA não impedem a preferência pelo local condicionado induzido por recompensa sexual (Agmo & Berenfeld 1990) e a hipótese de que DA é crítico para o reforço induzido por experiência não é testada.

Também não está claro quais são os mediadores a jusante dos efeitos de ΔFosB no comportamento sexual. Demonstrou-se que ΔFosB age tanto como um ativador transcricional quanto como um repressor através de um mecanismo dependente de AP-1 (McClung & Nestler 2003; Homem de Pico et al. 2003). Numerosos genes-alvo foram identificados, incluindo o gene precoce imediato c-fos (Esperança et al. 1992; Esperança et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dinorfina (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), Subunidades NFκB (Ang et al. 2001) Dond a subunidade GluR2 do receptor de glutamato AMPA (Kelz et al. 1999). Os resultados atuais demonstram que os níveis de c-Fos induzidos por acasalamento foram reduzidos pela experiência sexual em áreas do cérebro com aumento de ΔFosB (NAc e ACA). A supressão de c-Fos parece dependente do período desde o último acasalamento e repetidas sessões de acasalamento, como em estudos anteriores, tal diminuição em c-Fos não foi detectada em ratos machos testados 1 semana após a sessão final de acasalamento (Balfour et al. 2004) ou após experiência sexual, consistindo apenas numa única sessão de acasalamento (Lopez & Ettenberg 2002). Além disso, a descoberta atual é consistente com a evidência de que ΔFosB reprime o gene c-fos após exposição crônica à anfetamina (Renthal et al. 2008). De acordo com esses achados, a indução de vários mRNAs iniciais imediatos (c-fos, fosB, c-jun, junB e zif268) foi reduzida após injeções repetidas de cocaína em comparação com injeções de drogas agudas (Esperança et al. 1992; Esperança et al. 1994), e o c-fos induzido por anfetaminas foi suprimido após a retirada da administração crónica de anfetaminas (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). A relevância funcional da regulação negativa da expressão de c-Fos após o tratamento crônico com drogas ou a experiência sexual permanece obscura, e tem sido sugerido como um importante mecanismo homeostático para regular a sensibilidade de um animal à exposição repetida à recompensa (Renthal et al. 2008).

Em conclusão, o presente estudo demonstra que ΔFosB no NAc desempenha um papel integral na memória de recompensa sexual, apoiando a possibilidade de que ΔFosB é importante para reforço de recompensa geral e memória. As descobertas do estudo atual elucidam ainda mais nossa compreensão dos mecanismos celulares e moleculares que medeiam a recompensa e motivação sexual, e adicionam um corpo de literatura mostrando que ΔFosB é um ator importante no desenvolvimento do vício, demonstrando um papel para ΔFosB na recompensa natural reforço.

Material suplementar

Supp Fig S1-S4 e Tabela S1-S2

Clique aqui para ver.^{(167K, pdf)}

Agradecimentos

Esta pesquisa foi apoiada por doações dos Institutos Canadenses de Pesquisa em Saúde para LMC, Instituto Nacional de Saúde Mental para EJN, e Conselho de Pesquisa em Ciências Naturais e Engenharia do Canadá para KKP e LMC.

REFERÊNCIAS

Agmo A. Comportamento sexual de ratos machos. Cérebro Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203 – 209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Reforço das propriedades da ejaculação no rato masculino: papel dos opióides e da dopamina. Behaviour Neurosci. 1990;104: 177 – 182. [PubMed]
Ang E, J Chen, Zagouras P, Magna H, Holanda J, Schaeffer E, Nestler EJ. Indução do fator nuclear-kappaB no núcleo accumbens pela administração crônica de cocaína. J Neurochem. 2001;79: 221 – 224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamento sexual e sinais ambientais associados ao sexo ativam o sistema mesolímbico em ratos machos. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718 – 730. [PubMed]
Bibb JA, J Chen, JR Taylor, Svenningsson P, Nishi A, GL Snyder, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Os efeitos da exposição crônica à cocaína são regulados pela proteína neuronal Cdk5. Natureza. 2001;410: 376 – 380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. As lesões de 6-Hydroxydopamine em hamsters fêmeas (Mesocricetus auratus) abolem os efeitos sensibilizados da experiência sexual em interações copulatórias com machos. Behaviour Neurosci. 2005;119: 224 – 232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. A indução do comportamento sexual de c-Fos no nucleus accumbens e a atividade locomotora estimulada por anfetaminas são sensibilizadas pela experiência sexual prévia em hamsters sírios femininos. J Neurosci. 2001;21: 2123 – 2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi, YN, Ohnishi, YH, Alibhai IN, MB Wilkinson, Kumar A, Nestler EJ. Mecanismos independentes e dependentes de proteassomas para a desestabilização de FosB: identificação de domínios degron de FosB e implicações para a estabilidade de DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009 – 3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Neurobiologia Molecular da Toxicodependência. Annu Rev Med. 2004;55: 113 – 132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, NakabeppuY, Hope BT, Nestler EJ. Regulação de proteínas delta FosB e FosB por convulsões eletroconvulsivas e cocaína. Farmacologia Molecular. 1995;48: 880 – 889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, C Steffen, Nestler EJ, Self DW. A superexpressão específica do tipo de célula estriatal de DeltaFosB aumenta o incentivo à cocaína. J Neurosci. 2003;23: 2488 – 2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J., Truitt WA, Mckenna KE. Regulação central da ejaculação. Physiol Behav. 2004;83: 203 – 215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. O comportamento sexual aumenta a transmissão de dopamina no núcleo accumbens e estriado de ratos machos: comparação com novidade e locomoção. Behaviour Neurosci. 1992;106: 181 – 191. [PubMed]
Dietz DM, Labirinto I, Mecânico M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Papel essencial da ΔFosB na regulação da cocaína de espinhas dendríticas de neurônios do núcleo accumbens. Sociedade de Neurociência Resumo. 2009
Frohmader KS, Jarros KK, Balfour ME, Coolen LM. Misturando prazeres: Revisão dos efeitos de drogas no comportamento sexual em humanos e modelos animais. Horm Behav. 2009 No prelo.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ e Meisel RL. A superexpressão do Delta FosB no núcleo accumbens aumenta a recompensa sexual em hamsters sírios. Genes Brain Behav. 2009;8: 442 – 449. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Estimulação alimentar e hipotalâmica aumentam o turnover de dopamina no acumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599 – 606. [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. A recompensa alimentar e a cocaína aumentam a dopamina extracelular no nucleus accumbens, conforme medido por microdiálise. Life Sci. 1988b;42: 1705 – 1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Papel essencial do gene fosB nas ações moleculares, celulares e comportamentais das crises eletroconvulsivas crônicas. J Neurosci. 1998;18: 6952 – 6962. [PubMed]
Hommel JD, RM Sears, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Colapso do gene local no cérebro usando interferência de RNA mediada por vírus. Nat Med. 2003;9: 1539 – 1544. [PubMed]
Esperança B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulação da expressão gênica precoce imediata e ligação AP-1 no núcleo do rato accumbens por cocaína crônica. Proc Natl Acad Sci EUA A. 1992;89: 5764 – 5768. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Espero BT, Nye HE, Kelz MB, auto DW, IJarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indução de um complexo AP-1 de longa duração composto de proteínas alteradas semelhantes a Fos no cérebro por cocaína crônica e outros tratamentos crônicos. Neurônio. 1994;13: 1235 – 1244. [PubMed]
Casco EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamento Sexual Masculino. Horm Behav. 2002;1: 1 – 139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Os tratamentos agudos e crônicos com anfetaminas regulam diferentemente os níveis de RNA mensageiro do neuropeptídeo e a imunorreatividade de Fos em neurônios estriados de ratos. Neurociência. 1995;65: 1041 – 1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Aumentos dinâmicos da dopamina durante a cópula estimulada no rato fêmea. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997 – 2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Próprio DW, Tkatch T, Baranauskas G, DJ Surmeier, Neve R, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Expressão do fator de transcrição deltaFosB no cérebro controla a sensibilidade à cocaína. Natureza. 1999;401: 272 – 276. [PubMed]
Lopez HH, Ettenberg A. A exposição a ratos fêmeas produz diferenças na indução de c-fos entre ratos machos sexualmente ingénuos e experientes. Cérebro Res. 2002;947: 57 – 66. [PubMed]
Labirinto I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mecânico M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Papel essencial da histona metiltransferase G9a na plasticidade induzida pela cocaína. Ciência. 2010;327: 213 – 216. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulação da expressão gênica e recompensa de cocaína pelo CREB e DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208 – 1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: um interruptor molecular para adaptação a longo prazo no cérebro. Res do cérebro Mol Res do cérebro. 2004;132: 146 – 154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Projeções dopaminérgicas para a área pré-óptica medial de ratos no pós-parto. Neurociência. 2009;159: 1384 – 1396. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Acoplamento de transcrição de estímulo em neurônios: papel de genes imediatos celulares. Tendências Neurosci. 1989;12: 459 – 462. [PubMed]
Nestler EJ. Mecanismos moleculares da dependência de drogas. Neurofarmacologia. 2004;47 Suplemento 1: 24 – 32. [PubMed]
Nestler EJ. A neurobiologia da dependência de cocaína. Sci Prat Perspect. 2005;3: 4 – 10. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Nestler EJ. Reveja. Mecanismos transcricionais de dependência: papel de DeltaFosB. Philos Trans R Sociedade Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245 – 3255. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M e Self DW. DeltaFosB: um interruptor molecular sustentado para dependência. Proc Natl Acad Sci EUA A. 2001;98: 11042 – 11046. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Nye HE, Esperança BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Estudos farmacológicos da regulação da indução de antígenos crônicos relacionados ao FOS por cocaína no estriado e no nucleus accumbens. J Pharmacol Ther Exp. 1995;275: 1671 – 1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N. Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB no núcleo accumbens regula o comportamento instrumental reforçado com alimentos e motivação. J Neurosci. 2006;26: 9196 – 9204. [PubMed]
MC Peakman, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Banco JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Auto DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Indutível, a expressão específica da região cerebral de um mutante dominante negativo de c-Jun em camundongos transgênicos diminui a sensibilidade à cocaína. Cérebro Res. 2003;970: 73 – 86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, PG Ulery, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB acumula-se em uma população de células GABAérgica na cauda posterior da área tegmentar ventral após o tratamento com psicoestimulantes. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817 – 2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, M Barrot, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indução de deltaFosB em estruturas cerebrais relacionadas à recompensa após estresse crônico. J Neurosci. 2004;24: 10594 – 10602. [PubMed]
Perrotti LI, Tecelão RR, Robison B, Renthal W, Labirinto I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Próprio DW, Nestler EJ. Padrões distintos de indução DeltaFosB no cérebro por drogas de abuso. Sinapse. 2008;62: 358 – 369. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Pfaus JG. Caminhos do desejo sexual. J Sex Med. 2009;6: 1506 – 1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condicionamento e comportamento sexual: uma revisão. Horm Behav. 2001;40: 291 – 321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Uma perspectiva de cima para baixo sobre a dopamina, motivação e memória. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236 – 249. [PubMed]
Jarros KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticidade no sistema mesolímbico induzida por recompensa natural e subseqüente abstinência de recompensa. Biol Psychiatry. 2010;67: 872 – 879. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Renthal W, Carle TL, Labirinto I, Covington HE, 3rd, HT Truong, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. O Delta FosB medeia a dessensibilização epigenética do gene c-fos após a exposição crônica à anfetamina. J Neurosci. 2008;28: 7344 – 7349. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Renthal W, Kumar A, G Xiao, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Labirinto I, Sikder D, Robison AJ, Q de LaPlant, DM de Dietz, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Pilha A, Kabbaj M, Nestler EJ. A análise genômica ampla da regulação da cromatina pela cocaína revela um papel para as sirtuínas. Neurônio. 2009;62: 335 – 348. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Jarros KK, Coolen LM. Recompensa sexual em ratos machos: efeitos da experiência sexual nas preferências do local condicionado associadas à ejaculação e às intromissões. Horm Behav. 2009;55: 93 – 97. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. A fosforilação de DeltaFosB medeia sua estabilidade in vivo. Neurociência. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulação da estabilidade de DeltaFosB por fosforilação. J Neurosci. 2006;26: 5131 – 5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, TL de Carle-Florença, Chakravarty S, Kumar A, T de Graham DL, verde, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, M de Barrot, DiLeone RJ, Nestler EJ, CA de Bolanos-Guzman. A influência do DeltaFosB no núcleo accumbens no comportamento natural relacionado à recompensa. J Neurosci. 2008;28: 10272 – 10277. [Artigo gratuito do PMC] [PubMed]
O Werme M, o Messer C, o Olson L, o Gilden L, o Thoren P, o Nestler EJ, o Brene S. O Delta FosB regula o funcionamento da roda. J Neurosci. 2002;22: 8133 – 8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, TA Verde, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Próprio DW, Nestler EJ. A indução DeltaFosB no córtex orbitofrontal medeia a tolerância à disfunção cognitiva induzida por cocaína. J Neurosci. 2007;27: 10497 – 10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Um papel essencial para DeltaFosB no nucleus accumbens na ação da morfina. Nat Neurosci. 2006;9: 205 – 211. [PubMed]
Zhang J, L Zhang, Jiao H, Zhang Q, D Zhang, Lou D, JZ Katz, Xu M. c-Fos facilita a aquisição e extinção de alterações persistentes induzidas pela cocaína. J Neurosci. 2006;26: 13287 – 13296. [PubMed]