Dinâmica espaço-temporal de espinhas dendríticas no cérebro vivo (2014)

As espinhas dendríticas são locais pós-sinápticos ubíquos da maioria das sinapses excitatórias no cérebro dos mamíferos e, portanto, podem servir como indicadores estruturais das sinapses funcionais. Trabalhos recentes sugeriram que a codificação neuronal de memórias pode estar associada a rápidas alterações na formação e eliminação da coluna. Os avanços tecnológicos permitiram aos pesquisadores estudar a dinâmica da coluna in vivo durante o desenvolvimento, bem como sob várias condições fisiológicas e patológicas. Acreditamos que uma melhor compreensão dos padrões espaço-temporais da dinâmica da coluna ajudará a elucidar os princípios da modificação do circuito dependente da experiência e do processamento da informação no cérebro vivo.

INTRODUÇÃO

Espinhas dendríticas têm fascinado gerações de neurocientistas desde a sua descrição inicial por Santiago Ramón y Cajal há mais de um século (Ramon y Cajal, 1888) Essas delicadas saliências emanam da haste dendrítica e se assemelham a “espinhos com cerdas ou espinhos curtos”, conforme descrito vividamente por Cajal. Eles são os locais pós-sinápticos da grande maioria (> 90%) das sinapses glutamatérgicas excitatórias no cérebro dos mamíferos e contêm componentes moleculares essenciais para a sinalização pós-sináptica e a plasticidade. Portanto, os espinhos e sua dinâmica estrutural podem servir como indicadores para conectividade sináptica e modificações dos mesmos (Segal, 2005; Tada e Sheng, 2006; Harms e Dunaevsky, 2007).

A maioria dos estudos iniciais sobre a coluna dendrítica examinou o tecido neural fixo com microscopia de luz ou eletrônica (Lund et al., 1977; Woolley et al., 1990; Harris e Kater, 1994; Hering e Sheng, 2001; Lippman e Dunaevsky, 2005). Embora eles fornecessem informações fundamentais sobre a morfologia e distribuição da coluna, esses exames fixos de tecido capturavam apenas “instantâneos” estáticos das espinhas. A introdução de técnicas de marcação fluorescente e microscopia multi-fóton revolucionou o campo. Na 2002, o trabalho pioneiro de dois laboratórios (Grutzendler et al., 2002; Trachtenberg et al., 2002) demonstrou a possibilidade de rastrear a mesma espinha no cérebro vivo durante um longo período (ou seja, semanas) de tempo. Em princípio, a dinâmica da coluna representa a dinâmica das sinapses. Embora os espinhos estáveis ​​representem principalmente os contatos sinápticos, apenas uma pequena fração dos espinhos transitórios representa contatos sinápticos de curta duração, e o restante deles representa a sinaptogênese falida (Trachtenberg et al., 2002; Knott et al., 2006; Cane et al., 2014). A partir desses estudos de imageamento com lapso de tempo, surgiu um quadro dinâmico de espinhos: as espinhas se formam, aumentam, encolhem e se retraem durante toda a vida do animal. Além disso, sua morfologia e dinâmica variam entre os tipos neuronais, nos estágios de desenvolvimento e em resposta a experiências como estimulação sensorial e privação, enriquecimento ambiental e vários paradigmas de aprendizagem (Holtmaat e Svoboda, 2009; Fu e Zuo, 2011).

Esta revisão enfoca os resultados de in vivo estudos de imagem. Ao caracterizar a dinâmica da coluna, os pesquisadores consideraram principalmente dois aspectos: mudanças gerais na densidade da coluna e a localização específica ao longo do dendrito, onde a formação e a eliminação da coluna ocorrem. Enquanto a densidade da espinha fornece uma estimativa aproximada do número total de sinapses excitatórias no neurônio pós-sináptico, a localização de uma espinha influencia a contribuição de seus sinais elétricos e químicos transmitidos sinapticamente para a resposta integrada no soma (Nevian et al., 2007; Spruston, 2008). Compreender como a dinâmica da coluna se correlaciona com características anatômicas e fisiológicas de circuitos neurais específicos em diferentes contextos comportamentais é crucial para a elucidação dos mecanismos de processamento e armazenamento de informações no cérebro.

DINÂMICA DA ESPINHA DURANTE O DESENVOLVIMENTO

A densidade da coluna varia significativamente entre diferentes populações de neurônios, provavelmente refletindo a diversidade da morfologia e função neuronal (Nimchinsky e outros, 2002; Ballesteros-Yanez e outros, 2006). O equilíbrio entre a formação da coluna e a eliminação determina a mudança na densidade da coluna: um excedente de formação da coluna sobre a eliminação ao longo de um segmento dendrítico aumenta a densidade da coluna, e vice-versa. No córtex cerebral, enquanto os ramos dendríticos são quase sempre estáveis ​​ao longo do tempo (Trachtenberg et al., 2002; Mizrahi e Katz, 2003; Chow et al., 2009; Mostany e Portera-Cailliau, 2011; Schubert et al., 2013), as espinhas são constantemente formadas e eliminadas. As taxas de formação e eliminação da coluna mudam com o tempo, resultando em alterações não monótonas na densidade da coluna (Figura Figura 11). Por exemplo, espinhos nos dendritos apicais dos neurônios piramidais da camada 2 / 3 no córtex do tambor de roedores exibem uma motilidade gradualmente decrescente (alongamento e encurtamento das espinhas) e taxa de turnover (definida como a quantidade total de ganhos e perdas de espinhas) entre o dia pós-natal 7 e 24 (P7-24; Lendvai e outros, 2000; Cruz-Martin e outros, 2010). No entanto, a densidade da coluna aumenta continuamente durante esse período de tempo (Cruz-Martin e outros, 2010). Após essa fase inicial do ganho líquido da coluna, a eliminação da coluna começa a ultrapassar a formação, levando a uma redução geral da densidade da coluna (Holtmaat et al., 2005; Zuo e outros, 2005b; Yang et al., 2009). Entre P28 e P42, 17% dos espinhos são eliminados ao longo dos dendritos apicais dos neurónios piramidais da camada 5 no córtex do barril do rato, enquanto apenas 5% de novas espinhas são formadas durante o mesmo período de tempo (Zuo e outros, 2005a, b). É importante ressaltar que nem todos os espinhos são igualmente suscetíveis à eliminação: aqueles com cabeças grandes são mais estáveis ​​do que os finos. Como o tamanho da cabeça da coluna se correlaciona com a força sináptica, esse fenômeno sugere que as sinapses mais fortes são mais estáveis ​​(Holtmaat et al., 2005). Além disso, espinhos recém-formados são mais propensos a serem eliminados do que espinhos preexistentes (Xu et al., 2009), e a maioria dos espinhos estáveis ​​formados antes da adolescência permanece incorporada no circuito neuronal adulto (Zuo e outros, 2005a; Yang et al., 2009; Yu et al., 2013). Finalmente, em animais adultos, a formação e eliminação da espinha atingem o equilíbrio; densidade da coluna permanece aproximadamente constante até o início do envelhecimento (Zuo e outros, 2005a; Mostany et al., 2013).

 

FIGURA 1

Remodelação da coluna em diferentes fases da vida de um animal. Espinogênese rápida no pós-natal precoce é seguida por uma poda gradual da coluna na adolescência. Na idade adulta, a formação e a eliminação da coluna alcançam o equilíbrio, com uma pequena fração de espinhos ...

DINÂMICA DA ESPINHA EM RESPOSTA À EXPERIÊNCIA SENSORIAL

O córtex cerebral tem a incrível capacidade de reorganizar seus circuitos em resposta a experiências. Portanto, como as experiências sensoriais (ou a falta delas) impactam a dinâmica da coluna é de grande interesse para os neurocientistas. Ambas as manipulações sensoriais agudas e crônicas têm mostrado impacto profundo na dinâmica da coluna, mas o efeito exato depende do paradigma de manipulação e duração, bem como do estágio de desenvolvimento do animal. Durante o período pós-natal, os insumos sensoriais desempenham papéis instrutivos na estabilização e maturação das espinhas. No córtex visual do rato, a privação do estímulo visual desde o nascimento impediu a diminuição da motilidade da coluna e a maturação da morfologia da coluna (Majewska e Sur, 2003; Tropea et al., 2010). A deleção genética do receptor PirB imitou o efeito da privação monocular na motilidade da coluna (Djurisic e outros, 2013). Em camundongos que haviam sido submetidos à privação visual previamente, a maturação da coluna induzida pela luz poderia ser parcialmente mimetizada pela ativação farmacológica do sistema GABAérgico, sugerindo um papel importante dos circuitos inibitórios na maturação das sinapses excitatórias (Tropea et al., 2010). Mais tarde, a experiência sensorial impulsiona a poda da coluna (definida como perda líquida de espinhos). O corte unilateral de todos os bigodes em camundongos 1 com um mês de idade para os dias 4 ou 14 reduziu drasticamente a eliminação da coluna no córtex do barril, mas deixou a formação da coluna em grande parte não perturbada (Zuo e outros, 2005b; Yu et al., 2013). O bloqueio farmacológico dos receptores NMDA mimetizou o efeito do “whisking trimming”, indicando o envolvimento da via do receptor NMDA em tal eliminação dependente da atividade (Zuo e outros, 2005b).

Embora o corte completo do bigode remova a entrada sensorial globalmente, aparar todos os outros bigodes (“aparar o tabuleiro de xadrez”), presumivelmente, amplifica qualquer diferença nos níveis de atividade e padrões dos barris vizinhos, introduzindo uma nova experiência sensorial. Tal paradigma demonstrou promover a renovação da coluna e estabilizar seletivamente as espinhas recém-formadas em uma subclasse de neurônios corticais (Trachtenberg et al., 2002; Holtmaat et al., 2006). Novos espinhos foram preferencialmente adicionados aos neurônios piramidais da camada 5 com tufos apicais complexos, em vez daqueles com simples tufos (Holtmaat et al., 2006). Em camundongos defeituosos αCaMKII-T286A, o aparo do tabuleiro de xadrez não aumentou a estabilização de novos espinhos persistentes na fronteira entre barris poupados e destituídos (Wilbrecht et al., 2010). Recentemente, um estudo elegante que combina estimulação optogenética e in vivo imagem mostrou que é o padrão de atividade neural, ao invés da magnitude, que determina a estabilidade das espinhas dendríticas (Wyatt et al., 2012).

Semelhante ao corte do tabuleiro de xadrez, a privação monocular breve (MD) aumenta a disparidade entre as entradas de dois olhos. Assim, semelhante ao recorte do tabuleiro de xadrez, verificou-se que a DM aumenta a formação da coluna ao longo dos tufos dendríticos apicais dos neurónios piramidais da camada 5 na zona binocular do córtex visual do ratinho. No entanto, este efeito não foi observado nos neurónios da camada 2 / 3, nem na zona monocular (Hofer e outros, 2009), indicando novamente uma remodelação de sinapse específica do tipo celular. Curiosamente, um segundo MD não conseguiu aumentar ainda mais a formação da coluna, mas ampliou seletivamente os espinhos formados durante o DM inicial, sugerindo que os novos espinhos formados durante o DM inicial tinham sinapses funcionais que foram reativadas durante o segundo DM (Hofer e outros, 2009).

DINÂMICA DA ESPINHA DURANTE A APRENDIZAGEM

A natureza altamente dinâmica das espinhas dendríticas provoca a idéia predominante de que espinhas podem servir como substrato estrutural para a aprendizagem e a memória. Tem sido sugerido que espinhos recém-emergidos (tipicamente com cabeças pequenas) são a base da aquisição de memória, enquanto espinhos estáveis ​​(tipicamente com cabeças grandes) servem como locais de armazenamento de memória (Bourne e Harris, 2007). De fato, in vivo estudos de imagem mostraram que no córtex cerebral, a dinâmica da coluna se correlaciona diretamente com a aprendizagem. No córtex motor do camundongo, a formação da coluna começa imediatamente quando o animal aprende uma nova tarefa. Após esta rápida espinogênese, a densidade da coluna reverte para o nível basal através da eliminação elevada da coluna (Xu et al., 2009; Yu e Zuo, 2011). Nas aves canoras, uma taxa de rotatividade da espinha na linha de base mais alta antes do aprendizado da música foi correlacionada com uma maior capacidade de imitação de música subseqüente (Roberts e outros, 2010). Em camundongos, a quantidade de espinhos adquirida durante o aprendizado inicial correlaciona-se estreitamente com o desempenho motor da aquisição de aprendizagem (Xu et al., 2009); ea sobrevivência de novos espinhos correlaciona-se com a retenção da habilidade motora (Yang et al., 2009). Além disso, diferentes habilidades motoras são provavelmente codificadas por diferentes subpopulações de sinapses no córtex motor, já que aprender uma nova tarefa motora em camundongos pré-treinados continua a induzir um turnover robusto no córtex motor adulto (Xu et al., 2009). Recentemente, também foi descoberto que o nível de glicocorticóides afeta a dinâmica da coluna induzida pela aprendizagem motora. Treinar camundongos nos picos de glicocorticóides resultou em maior taxa de formação de coluna, enquanto que as doses de glicocorticóides após o treinamento foram necessárias para a estabilização das espinhas formadas durante o treinamento e retenção de memória de longo prazo (Liston e outros, 2013). Dependência, que tem sido considerada como aprendizagem patológica (Hyman, 2005), provoca mudanças temporais similares na dinâmica da coluna, assim como a aprendizagem motora. Usando um paradigma de preferência de lugar condicionado à cocaína, um recente estudo mostrou que a exposição inicial à cocaína promoveu a formação da coluna no córtex frontal, e que a quantidade de novas espinhas persistentes se correlacionou com a preferência pelo contexto de cocaína-pareada (Munoz-Cuevas e outros, 2013). Mais interessante, a dinâmica da coluna em diferentes regiões corticais pode variar durante a mesma tarefa. Por exemplo, um paradigma de condicionamento do medo que associa sinais auditivos a choques nos pés demonstrou efeitos opostos no córtex auditivo e frontal. No córtex auditivo, verificou-se que o aumento da formação da coluna estava correlacionado com o condicionamento de medo emparelhado, enquanto o condicionamento não pareado estava associado com o aumento da eliminação das espinhas (Moczulska et al., 2013). No córtex de associação frontal, descobriu-se que o aumento da eliminação da coluna estava associado à aprendizagem, enquanto a formação da coluna estava associada à extinção do medo e ao recondicionamento das espinhas eliminadas formadas durante a extinção (Lai et al., 2012). Em conjunto, esses estudos revelam a diversidade de regras temporais subjacentes à dinâmica da coluna induzida pela aprendizagem. Se as espinhas são formadas ou removidas durante a aprendizagem depende do paradigma comportamental, bem como do circuito neuronal específico e tipos de células que participam no processo de aprendizagem.

Vale a pena notar que todos os exemplos discutidos acima referem-se à memória não declarativa, que não envolve a lembrança consciente de tempo específico, localização e experiência episódica (isto é, memória declarativa). Exploração de in vivo A dinâmica da coluna associada à memória declarativa revela-se muito mais desafiadora. Por um lado, o hipocampo, a estrutura crucial para a formação da memória declarativa, está enterrado sob o córtex e além do alcance da microscopia padrão de dois fótons. Por outro lado, acredita-se que a memória declarativa seja difusamente armazenada nas grandes redes neocorticais, dificultando a obtenção de imagens direcionadas. Portanto, o avanço das técnicas de imagem cerebral profunda (por exemplo, microendoscopia, óptica adaptativa), juntamente com uma melhor compreensão da alocação de memória no córtex, é a chave para futuras investigações da dinâmica da coluna subjacente à memória declarativa.

DINÂMICA DA ESPINHA NAS DOENÇAS

Alterações na densidade da coluna dendrítica foram observadas em várias doenças neurológicas e neuropsiquiátricas. Cada distúrbio apresenta suas próprias marcas distintivas na dinâmica da coluna, o que corrobora ainda mais a ideia de que as espinhas são alicerces estruturais para o bom funcionamento cognitivo. Existe um consenso crescente de que a anormalidade da coluna está associada à deficiência comportamental e ao declínio das funções cognitivas (para detalhes ver Fiala et al., 2002; Penzes et al., 2011).

Em modelos de acidente vascular cerebral, é mostrado que a isquemia severa leva à perda rápida da coluna, que é reversível após a reperfusão se o resgate é realizado dentro de um curto período de tempo (20-60 min; Zhang et al., 2005). Após o acidente vascular cerebral, a formação da coluna e subseqüente eliminação aumentar na região peri-infarto, mas não em territórios corticais distantes do infarto ou no hemisfério contralateral (Brown et al., 2009; Johnston et al., 2013). Esta plasticidade induzida por lesões atinge o seu pico na semana 1 pós AVC; A partir daí, a taxa de formação e eliminação da coluna diminui constantemente. Esse fenômeno sugere a existência de um período crítico durante o qual os tecidos corticais peri-infarto sobreviventes são mais suscetíveis a intervenções terapêuticas (Brown et al., 2007, 2009). Num modelo de ratinho para dor crónica, a ligação parcial do nervo ciático aumenta a formação e eliminação da espinha. Semelhante ao modelo de braçada, a elevação da taxa de formação da coluna precede a da eliminação, levando a um aumento inicial na densidade da coluna, seguido por sua redução. Tais efeitos poderiam ser abolidos pelo bloqueio da tetrodotoxina, indicando que o remodelamento da coluna pós-lesão é dependente da atividade (Kim e Nabekura, 2011).

A alteração da dinâmica da coluna também foi relatada em modelos animais de doenças degenerativas. Por exemplo, a perda de coluna é acelerada na vizinhança das placas β-amilóides no córtex cerebral (Tsai e outros, 2004; Spiers et al., 2005). Em um modelo animal de doença de Huntington, a taxa de formação da espinha aumenta, mas espinhos recém-formados não persistem para serem incorporados ao circuito local, o que resulta em uma redução líquida na densidade da espinha (Murmu et al., 2013). Embora as doenças neurodegenerativas sejam geralmente associadas à perda líquida da coluna, os distúrbios do neurodesenvolvimento apresentam diversos fenótipos da coluna. Em um modelo de rato da síndrome do X Frágil, as espinhas são mais numerosas, e uma porcentagem mais alta delas parece imatura após exame de tecidos fixados em adultos (Comery et al., 1997; Irwin et al., 2000). Na Vivo estudos mostraram ainda que, em tais animais, o turnover da coluna aumentou em várias áreas corticais (Cruz-Martin e outros, 2010; Pan et al., 2010; Padmashri et al., 2013), e nem o corte do bigode nem o aprendizado motor poderiam alterar ainda mais a dinâmica da coluna (Pan et al., 2010; Padmashri et al., 2013). Em camundongos superexpressando MECP2, um gene relacionado com a Síndrome de Rett, verificou-se que os ganhos e perdas da coluna são elevados. No entanto, os novos espinhos são mais vulneráveis ​​à eliminação do que nos ratos selvagens, resultando em uma perda líquida de espinhos (Jiang et al., 2013).

CONTRIBUIÇÃO GLIAL À DINÂMICA DA ESPINHA

O sistema nervoso compreende duas classes de células: neurônios e glia. O papel mais intrigante das células gliais é sua participação no funcionamento e dinâmica sináptica. Recentemente, alguns estudos interessantes exploraram o papel da sinalização glial na maturação e plasticidade da coluna. Por exemplo, o bloqueio da captação de glutamato astrocítico mostrou acelerar a eliminação espinhal dependente da experiência durante o desenvolvimento do adolescente (Yu et al., 2013). Outro tipo de células gliais, microglia, também foi encontrado em contato próximo com espinhas dendríticas. A motilidade dos processos microgliais e o contato da coluna são ativamente regulados pela experiência sensorial e estão envolvidos na eliminação da coluna vertebral (Tremblay et al., 2010). Além disso, a depleção de microglia resultou em redução significativa da formação da coluna vertebral induzida pela aprendizagem motora, e a remoção seletiva do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) na microglia recapitulou os efeitos da depleção da microglia (Parkhurst et al., 2013).

MANIFESTAÇÃO ESPACIAL DA DINÂMICA DA ESPINHA

A imagem estrutural das espinhas sugeriu que o surgimento e o desaparecimento das espinhas não são uniformes nem aleatórios ao longo dos dendritos, mas ocorrem em "pontos quentes" espacialmente seletivos. No córtex motor do camundongo, novos espinhos que se formam durante o treinamento repetido com a mesma tarefa motora tendem a se agrupar. Além disso, a adição da segunda nova espinha no aglomerado é frequentemente associada ao aumento da primeira nova coluna. Em contraste, os espinhos formados durante a execução em tandem de diferentes tarefas motoras ou durante o enriquecimento motor não se agrupam (Fu et al., 2012). Em conjunto, essas observações sugerem que a re-ativação repetida da primeira nova espinha é necessária para a emergência agrupada da segunda nova espinha. Seletividade espacial similar da dinâmica da coluna tem sido observada no paradigma do condicionamento do medo: uma coluna vertebral eliminada durante o condicionamento do medo é geralmente substituída por uma coluna em sua vizinhança (dentro de 2) durante a extinção do medo (Lai et al., 2012). Curiosamente, a dinâmica da coluna também é influenciada pela dinâmica das sinapses inibitórias. A privação monocular aumenta significativamente a dinâmica coordenada das espinhas e as sinapses inibitórias próximas na camada dos neurônios piramidais 2 / 3 (Chen et al., 2012). Estas descobertas suportam o modelo de plasticidade agrupada, que postula que as sinapses agrupadas têm maior probabilidade de participar na codificação da mesma informação do que as sinapses dispersas ao longo do mandril dendrítico (Govindarajan et al., 2006).

Combinando in vivo gravação de patch de célula inteira e imagem de cálcio de coluna única, um trabalho recente mostrou que espinhas sintonizadas para diferentes frequências de pico são intercaladas ao longo de dendritos de neurônios piramidais no córtex auditivo de camundongos (Chen et al., 2011). Esta descoberta levanta uma questão interessante: os novos espinhos agrupados correspondem a entradas com características semelhantes ou diferentes (por exemplo, padrões de atividade, propriedades de ajuste)? A fim de abordar essa questão, será necessário amostrar espinhos em uma área ampla do mandril dendrítico, identificar “focos” de remodelação da coluna e combinar imagens estruturais de espinhos com imagens funcionais em tempo real. Esses experimentos não apenas ajudarão a elucidar os mecanismos celulares de remodelação da coluna dependente de atividade, mas também fornecerão pistas para a representação e armazenamento de informação nos neurônios.

DIREÇÕES FUTURAS

Neste artigo, revisamos investigações recentes sobre a dinâmica de espinhas dendríticas no cérebro vivo. Embora esses estudos tenham avançado significativamente nossa compreensão de como a dinâmica da coluna se altera temporal e espacialmente, muitas questões permanecem em várias frentes. Por exemplo, existem marcadores moleculares que distinguem espinhos estáveis ​​de espinhos e espinhos recém-formados para serem eliminados? O número total de espinhos é mantido através de um mecanismo homeostático, de modo que o dendrito possa sustentar a demanda metabólica de transmissão sináptica? O agrupamento de novos espinhos reflete mudanças na força das conexões existentes com o mesmo axônio (mantendo a mesma topologia de rede), ou indica o estabelecimento de conexões adicionais com axônios anteriormente não conectados? Vale a pena notar que todos os trabalhos discutidos acima se concentraram no lado pós-sináptico, que é apenas metade da história. O outro determinante principal da distribuição e dinâmica da coluna encontra-se no lado pré-sináptico: a identidade e a geometria dos axônios pré-sinápticos e a disponibilidade de botões axonais. Conhecer essas informações pré-sinápticas é crucial para resolver muitas das questões decorrentes das observações da dinâmica da coluna. No entanto, a identificação do parceiro pré-sináptico de uma espinha dendrítica imaginada permanece um desafio técnico, uma vez que o axônio pré-sináptico pode se originar de uma infinidade de fontes e é usualmente misturado com muitos outros processos axonais. Além disso, ainda há muito a ser aprendido sobre a sequência do remodelamento estrutural que ocorre no local de contato entre o botão axonal e a coluna, e como essa seqüência se associa à formação e à eliminação de sinapses. Imagens simultâneas de brotos axonais e suas espinhas parceiras no contexto da manipulação comportamental fornecerão informações abundantes para abordar essa questão. Exames ultraestruturais retrospectivos, como microscopia eletrônica (Knott et al., 2009) e tomografia por matriz (Micheva e Smith, 2007; Micheva et al., 2010) também pode complementar in vivo imagens para validar a presença de sinapses e para revelar impressões digitais moleculares de estruturas fotografadas.

A sequência temporal e rearranjos espacialmente seletivos das conexões neuronais, e como essas mudanças contribuem coletivamente para alterações de comportamento como resultado de experiências, é uma das questões fundamentais na neurociência. Avanço em técnicas de imagem, juntamente com o desenvolvimento em eletrofisiologia, genética molecular e optogenética, ajudará a revelar o projeto de circuitos neuronais no nível microscópico, bem como os mecanismos de codificação, integração e armazenamento de informações no cérebro.

CONTRIBUIÇÕES DO AUTOR

Chia-Chien Chen fez a figura. Chia-Chien Chen, Ju Lu e Yi Zuo escreveram o manuscrito.

Declaração de conflito de interesse

Os autores declaram que a pesquisa foi realizada na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que possam ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.

Agradecimentos

REFERÊNCIAS