A sensibilidade inicial do Receptor de Dopamina D2 Prevê Sensibilidade e Recompensa de Cocaína em Ratos (2015)

Kathryn E. Merritt,

Afiliação: Departamento de Psicologia e Neurociência, Universidade do Colorado, Boulder, Colorado, Estados Unidos da América

Ryan K. Bachtell

[email protected]

Afiliações: Departamento de Psicologia e Neurociência, Universidade do Colorado, Boulder, Colorado, Estados Unidos da América,
Centro de Neurociência, Universidade do Colorado, Boulder, Colorado, Estados Unidos da América,
Instituto de Genética Comportamental, Universidade do Colorado, Boulder, Colorado, Estados Unidos da América

PLOS
  • Publicado em: novembro 4, 2013
  • DOI: 10.1371 / journal.pone.0078258

Sumário

Sabe-se que a ativação de receptores de dopamina no sistema dopaminérgico mesolímbico está envolvida na iniciação e manutenção do uso de cocaína. Expressão do D2 O subtipo de receptor de dopamina tem sido implicado como fator predisponente e conseqüência do uso crônico de cocaína. Não está claro se existe uma relação preditiva entre D2 função do receptor de dopamina e sensibilidade à cocaína que permitiriam o abuso de cocaína. Portanto, nós exploramos diferenças individuais em respostas comportamentais para D2 estimulação do receptor de dopamina para testar sua relação com comportamentos mediados por cocaína. Ratos Sprague-Dawley, machos, foram inicialmente caracterizados pela sua resposta locomotora ao D2 agonista do receptor de dopamina, quinpirol, em um regime de dose-resposta ascendente dentro da sessão (0, 0.1, 0.3 e 1.0 mg / kg, sc). Os ratos foram classificados como respondedores de quinpirol alto ou baixo (HD2 e LD2, respectivamente) por uma divisão mediana de sua atividade locomotora induzida por quinpirol. Os ratos foram subsequentemente testados quanto a diferenças nos efeitos psicoestimulantes da cocaína, medindo as alterações na actividade locomotora induzida pela cocaína (5 e 15 mg / kg, ip). Os ratos também foram testados quanto a diferenças no desenvolvimento de preferência de lugar condicionado a uma dose baixa de cocaína (7.5 mg / kg, ip) que não produza com confiança uma preferência de local condicionado pela cocaína. Finalmente, os ratos foram testados para aquisição de autoadministração de cocaína e manutenção respondendo na proporção fixa 1 e 5 de reforços, respectivamente. Os resultados demonstram que HD2 os ratos aumentaram a sensibilidade às propriedades estimuladoras da cocaína, apresentaram maior preferência de lugar condicionado pela cocaína e auto-administraram mais cocaína em comparação com LD2 animais. Esses achados sugerem que diferenças individuais em D2 A sensibilidade do receptor de dopamina pode ser preditiva da sensibilidade e recompensa da cocaína.

figuras

Figura 7

Figura 1

Figura 2

Figura 3

Figura 4

Figura 5

Figura 6

Figura 7

Figura 1

Figura 2

Figura 3

   

Citação:Merritt KE, Bachtell RK (2013), inicial D2 Sensibilidade ao Receptor de Dopamina Prevê Sensibilidade à Cocaína e Recompensa em Ratos. PLoS ONE 8 (11): e78258. doi: 10.1371 / journal.pone.0078258

Editor: Abraham A. Palmer, Universidade de Chicago, Estados Unidos da América

Recebido: May 28, 2013; Aceitaram: Setembro 10, 2013; Publicado em: 4 de novembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Merritt, Bachtell. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença de Atribuição da Creative Commons, que permite uso, distribuição e reprodução irrestritos em qualquer meio, desde que o autor e a fonte originais sejam creditados.

Financiamento:Este trabalho foi suportado por R03 DA 029420; Subvenção de Semente Inovadora de CU. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta e análise de dados, decisão de publicar ou preparação do manuscrito.

Interesses competitivos: Os autores declararam que não existem interesses concorrentes.

Conheça

Entender por que alguns indivíduos desenvolvem abuso de substâncias ou padrões de uso compulsivo de drogas, enquanto outros não o fazem, é um dos aspectos mais mal compreendidos no desenvolvimento da dependência de drogas. Estudos epidemiológicos relatam que quase 17% de pessoas que usam cocaína se tornarão dependentes de cocaína dentro dos primeiros anos de uso de cocaína. . Isso sugere que alguns indivíduos são vulneráveis, enquanto outros são resistentes ao desenvolvimento de dependência de drogas, apesar de terem um histórico de uso de drogas. Embora existam muitos fatores que podem contribuir para a dependência de drogas (por exemplo, disponibilidade de medicamentos, pressões sociais, etc.), a discrepância entre indivíduos vulneráveis ​​e resistentes também pode ser explicada através de diferenças individuais no funcionamento dos sistemas neurobiológicos subjacentes à responsividade a drogas. Abuso . A compreensão dessas diferenças pode fornecer uma visão sobre uma das questões mais procuradas no desenvolvimento da dependência de substâncias.

O sistema de dopamina mesolímbica (DA) consiste de células dopaminérgicas na área tegmentar ventral que se projetam para neurônios espinhosos médios no núcleo accumbens entre outras regiões límbicas. . A cocaína eleva rapidamente DA extracelular nas regiões terminais da via mesolímbica, bloqueando o transportador DA, o que contribui para o reforço da cocaína . A ativação da via mesolímbica é amplamente conhecida por estar envolvida na iniciação e manutenção do uso de cocaína e uso de outras drogas de abuso. . Alterações no circuito DA mesolímbico têm sido demonstradas tanto como conseqüência do uso repetido do psicoestimulante como como um fator predisponente. Por exemplo, o uso crônico de cocaína está associado à diminuição de D2 Níveis de receptores DA no estriado ventral de usuários de cocaína , sugerindo que a diminuição de D2 A expressão do receptor DA é uma conseqüência da administração crônica de cocaína. Tem havido um debate de longa data sobre se a diminuição em D2 A expressão do receptor DA observada em usuários de cocaína é um resultado do uso crônico de cocaína ou se esta alteração representa um condicionamento pré-existente que pode predispor um indivíduo a desenvolver dependência de cocaína.

Trabalhos recentes em humanos e animais sugerem que D reduzido2 A expressão do receptor DA pode, de fato, ser um fator de vulnerabilidade. Assim, indivíduos não dependentes com menores níveis de D2 Relatora do receptor DA relatou “gostar” de drogas para o psicoestimulante metilfenidato . Camundongos mutantes sem o D2 O receptor DA auto-administra mais cocaína em comparação com animais do tipo selvagem , enquanto sobre-expressando D2 Receptores DA no estriado ventral diminuem a autoadministração de cocaína . Juntos, esses estudos sugerem que alterações pré-existentes em D2 A expressão do receptor DA pode prever os efeitos de reforço da cocaína, embora ainda haja incertezas com relação ao papel específico de D2 Receptores DA como um fator de vulnerabilidade.

Há interesse emergente na dissociação entre D2 Expressão do receptor DA e D2 Função do receptor DA e sensibilidade. Enquanto a administração de cocaína em ratos recapitula D decréscimo2 A expressão do receptor DA, como observado em usuários humanos de cocaína, há um aumento paradoxal da ativação da proteína G em resposta a D2 Estimulação do receptor DA . Da mesma forma, a auto-administração de cocaína aumenta a expressão de alta afinidade D2 Receptores DA , . Essas mudanças sugerem que, enquanto a expressão de D2 Receptores DA podem diminuir, a sensibilidade de D2 Os receptores DA podem aumentar após cocaína repetida. Essa noção é refletida em vários paradigmas comportamentais em que a cocaína crônica produz sensibilização cruzada aos efeitos psicoestimulantes de D2 Agonistas do receptor DA , , , e estimulação de D2 Receptores DA produzem reintegração robusta à procura de cocaína em modelos de auto-administração de roedores , , , , , . Não se sabe se as diferenças pré-existentes na sensibilidade de D2 Os receptores DA referem-se aos efeitos comportamentais da cocaína.

Nos estudos atuais, utilizamos um modelo de roedores para identificar diferenças individuais na sensibilidade comportamental de D2 Os receptores DA referem-se a comportamentos induzidos por cocaína. Administração do D2 O agonista do receptor DA, quinpirole, produz um alto grau de variabilidade nas respostas locomotoras em animais sem uso de drogas. Assim, exploramos essas diferenças individuais na resposta locomotora inicial do rato ao quinpirol como modelo para testar D2 Sensibilidade do receptor DA como um fator de vulnerabilidade para comportamentos subseqüentes mediados por cocaína. Aqueles animais exibindo aumentos robustos na atividade induzida pelo quinpirole foram caracterizados como tendo alta D2 Sensibilidade do receptor DA (HD2), enquanto aqueles ratos com ativação mais modesta foram caracterizados como tendo baixo2 Sensibilidade do receptor DA (LD2). Após essa caracterização inicial, os ratos de cada grupo foram comparados em locomoção induzida por cocaína, preferência de lugar induzida por cocaína e autoadministração de cocaína.

Materiais e Métodos

Animais

Ratos machos Sprague-Dawley (Charles River, Portage, MI) pesando 275-325 g foram alojados individualmente à chegada. Ratos receberam ad libitum comida e água, exceto onde indicado. Todas as experiências foram conduzidas durante o período de luz de um ciclo claro / escuro (12: 12).

Declaração de ética

Estes estudos foram realizados de acordo com as diretrizes estabelecidas pelo Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório dos Institutos Nacionais de Saúde e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade do Colorado em Boulder.

Habituação a um ambiente novo

A atividade locomotora foi registrada em câmaras de plexiglass (San Diego Instruments, San Diego, CA, EUA) medindo 16 × 16 × 15 em pares 16 de fotovolumes espaçados 1 em separado em ambos os planos horizontais. Todos os testes locomotores foram realizados em câmaras de atividade apagadas durante a fase de luz do ciclo claro / escuro (12: 12). Os animais foram inicialmente habituados às novas câmaras de teste locomotor para 2 horas antes do teste locomotor induzido por quinpirol (ver abaixo).

Caracterização do Comportamento Locomotor Induzido por Quinpirol

A resposta locomotora inicial ao D2 Um agonista do receptor DA, o quinpirole, foi usado para classificar os animais em grupos antes de qualquer outro teste comportamental. Os testes começaram pelo menos 7 dias depois dos animais terem chegado do vendedor e foram conduzidos em câmaras de locomoção escuras durante o período de luz de um ciclo de luz / escuridão (12: 12). Todos os animais foram manuseados por aproximadamente 5 min por dia durante 4 dias antes de iniciar estes procedimentos para eliminar qualquer interferência potencial. Todos os animais foram primeiro habituados ao aparelho de teste locomotor durante o 2 hrs no dia anterior ao teste do quinpirole (ver acima). A locomoção induzida por quinolol foi avaliada num protocolo de dose-resposta 5-hr dentro da sessão como se segue: habituação 1-h seguida por doses ascendentes horárias do agonista (0, 0.1, 0.3 e 1.0 mg / kg, sc). Uma divisão mediana da atividade locomotora total induzida pelo quinpirole (calculada como Area Under the Curve, ver abaixo) foi usada para classificar esses ratos como D2 respondedores (HD2) ou baixo D2 respondedores (LD2). Estes procedimentos foram conduzidos de forma idêntica em várias coortes de animais (grupos de ratos que chegam do mesmo vendedor com idade e pesos idênticos) para cada uma das medidas comportamentais descritas (isto é, locomoção da cocaína, condicionamento do local e autoadministração). Em cada uma das coortes, o animal com a pontuação mediana foi testado, mas eliminado de outras análises de dados. A distribuição dos escores dentro de cada coorte foi qualitativamente bastante semelhante, mas observamos diferenças nos escores de variação e mediana para a atividade locomotora induzida pelo quinpirol entre coortes de animais. Portanto, HD2 e LD2 as classificações foram feitas dentro de cada coorte individual.

Comportamento Locomotor Induzido por Cocaína

Em uma coorte de animais (N = 39), as respostas locomotoras foram medidas usando um protocolo de dose-resposta de cocaína dentro da sessão 3-hr. Estas avaliações foram realizadas em câmaras locomotoras escuras durante o período de luz de um ciclo claro / escuro (12: 12). Os animais foram testados 5 7 dias após a caracterização inicial de sua sensibilidade ao quinpirol nas mesmas câmaras de atividade. No dia do teste, os animais foram habituados à câmara locomotora para 1 h e foram então administradas doses ascendentes de cocaína de hora em hora (5 e 15 mg / kg, ip).

Condicionamento de cocaína

Noutra coorte de animais (N = 37), o condicionamento do local foi medido num aparelho de câmara 3 não-viesado, utilizando um procedimento de fase 3 não-tendenciosa. Os testes começaram a 7 dias após a caracterização inicial da sensibilidade ao quinpirol. As duas câmaras de condicionamento (15 cm × 25 cm × 35 cm) foram distintas nos padrões de parede (cinza versus branco vertical e listras pretas) e texturas de piso (grade versus buraco). O compartimento central (15 cm × 10 cm) tinha paredes brancas e um piso de acrílico. As câmaras são equipadas com fotocélulas infravermelhas para detectar a posição e o movimento dos animais no aparelho. De 1000-1500 horas no dia anterior ao condicionamento (pré-condicionamento), os ratos tiveram acesso a todos os três compartimentos para 20 min para testar o viés inicial. Um animal foi excluído do experimento porque exibiu um viés inicial de 92% de tempo em um compartimento. Os ratos receberam três sessões de condicionamento salino 30-min e três sessões de condicionamento com 30-min cocaína (7.5 mg / kg, ip). O condicionamento salino ocorreu entre 0800-1100 horas, enquanto o condicionamento de cocaína ocorreu entre 1500-1700 horas. A dose de 7.5 mg / kg de cocaína foi escolhida porque estudos preliminares em nosso laboratório demonstraram que ela não produz uma preferência de lugar confiável em todos os ratos. Portanto, essa dose de cocaína foi ideal para identificar diferenças potenciais no desenvolvimento de uma preferência de lugar entre os dois grupos. A sessão de teste final (pós-condicionamento) foi conduzida entre 1000 horas e 1500 horas e os ratos receberam novamente acesso livre aos três compartimentos e a preferência foi determinada como tempo gasto no compartimento do fármaco menos o tempo gasto no compartimento salino. Pontuação (CPP)).

Autoadministração de sacarose e cocaína

Uma outra coorte de animais (N = 29) foi testada para resposta operante para peletes de sacarose após a caracterização inicial da sensibilidade ao quinpirol. Procedimentos de autoadministração foram realizados em câmaras de condicionamento operante (Med-Associates, St Albans, VT) equipadas com duas alavancas de resposta. Sete dias após o teste quinpirol inicial, estes ratos foram restringidos ao alimento para evitar ganho de peso, e treinados para pressionar para obter pelotas de sacarose em um regime de reforço de razão fixa 1 (FR1) até que os critérios de aquisição fossem alcançados (50 sacarose). A latência para atingir esse critério foi utilizada como variável dependente nesses experimentos. Todos os ratos atingiram o critério após aproximadamente 8 dias de treinamento e foram alimentados ad libitum depois disso.

Após a auto-administração da sacarose e pelo menos um dia de ad libitum alimentação, os animais foram implantados com cateteres jugulares sob anestesia com halotano (1-2.5%), como descrito . Após 5-7 dias de recuperação da cirurgia, os animais auto-administraram cocaína (0.5 mg / kg / 100 µl, iv) ao abrigo de um programa de reforço 1 de intervalo de tempo limite durante as sessões 20 diárias 6-h. Os animais foram então transferidos para um FR2, timeout de reforço 5 para mais sessões 20 diárias 5-h. As infusões de cocaína foram entregues sobre 2 simultaneamente com a terminação da luz da casa e a iluminação de uma luz indicadora acima da alavanca emparelhada com a droga.

Drogas

O cloridrato de quinpirole [(-) - quinopolet] e cloridrato de cocaa foram adquiridos a Sigma (St. Louis, MO). Todas as drogas foram dissolvidas em soro fisiológico filtrado estéril (0.9%).

Análise de Dados

Os dados locomotores induzidos pela cocaína (quebras do feixe) foram analisados ​​pelo ANOVA de design misto do fator 2 com o grupo quinpirole (HD2 e LD2) e dose de cocaína (5 e 15 mg / kg) como fatores. Regressões lineares também foram realizadas nos dados locomotores para identificar o poder explicativo da sensibilidade ao quinpirol na locomoção da cocaína. Os dados de condicionamento do local (pontuação CPP = par de drogas menos salina pareada) foram analisados ​​usando uma ANOVA de desenho misto de 2 fatores com grupo quinpirol (HD2 e LD2) e condicionamento (pré-condicionamento e pós-condicionamento) como fatores. Dados de autoadministração de cocaína (infusões de cocaína) foram analisados ​​por ANOVA de design misto com fator 2 com grupo quinpirole (HD2 e LD2) e dias como fatores, ou um teste t independente entre os grupos quinpirole (HD2 e LD2) quando as infusões de cocaína foram colapsadas ao longo dos dias. Em todos os casos, efeitos principais e interativos significativos foram seguidos por análises de efeitos simples e testes post hoc (teste de significância de Bonferroni). A significância estatística foi predefinida em p

Resultados

Caracterização de Grupos de Sensibilidade de Quinpirol Alto e Baixo

Existe um alto grau de variação na resposta em cada dose de quinpirol durante o teste de atividade locomotora em resposta a dose em sessão (Figura S1). Geralmente, a menor dose de quinpirol (0.1 mg / kg, sc) suprime a locomoção em comparação com a resposta do veículo, enquanto as doses mais altas (0.3 e 1.0 mg / kg, sc) ativam a locomoção. Esta é uma resposta dose-protótipo do quinpirol, em que doses baixas de quinpirol estimulam presumivelmente D2 autoreceptores em terminais de dopamina e doses mais elevadas de quinpirol saturam D2 autoreceptores e estimular pós-sináptico D2 receptores , , . Em uma tentativa de capturar a complexidade comportamental de D pré e pós-sináptico2 estimulação do receptor, calculamos a área sob a curva (AUC) para cada animal em todas as doses de quinpirol (Figura S1). O escore da quinpirole da AUC foi então usado para segregar cada coorte em alta sensibilidade ao quinpirol (HD2) e baixa sensibilidade ao quinpirole (LD2) grupos baseados em uma divisão mediana de toda a coorte. Figura 1A e 1B ilustram a distribuição dos escores da AUC quinpirole e as médias do grupo após a divisão mediana em HD2 e LD2 grupos. Figura 1C e 1D mostra as distribuições e médias de grupo de locomoção em cada dose de quinpirol. No desenvolvimento dos grupos, o rato correspondente ao escore mediano foi eliminado de análises posteriores, mas é mostrado no gráfico para representar tanto o indivíduo quanto o intervalo médio a partir do escore mediano.

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Figura 1. Distribuições e médias da atividade locomotora induzida pelo quinpirole para LD2 e HD2 grupos.

(A) Distribuições de grupos das pontuações calculadas da área do quinpirole sob a curva (AUC) usadas para classificar os ratos no LD2 e HD2 grupos. A linha pontilhada representa a pontuação mediana (M = 15460). (B) Média do grupo (± sem) da pontuação da AUC quinpirole usada para gerar o LD2 e HD2 grupos. A linha pontilhada representa a pontuação mediana (M = 15460). (C) Distribuição dos escores de atividade locomotora (intervalos de feixe / h) durante o teste de resposta à dose de quinpirol dentro da sessão ascendente dentro do LD2 (círculos cinza) e HD2 (círculos vermelhos). (D) Médias de grupos (± sem) da curva de dose-resposta do quinpirole para LD2 e HD2 grupos.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g001

Dado que as atribuições do grupo são influenciadas principalmente pela ativação locomotora produzida pela ativação do quinpirole de D pós-sináptico2 Também queríamos identificar se os grupos diferiam em sua capacidade de resposta à baixa dose de quinpirol, a inibição locomotora (0.1 mg / kg). Para capturar completamente a magnitude dos efeitos supressores da dose baixa de quinpirol, calculamos os efeitos supressivos do quinpirol como uma porcentagem da linha de base (atividade induzida por solução salina; Figura S2). Não houve diferenças na supressão locomotora induzida pelo quinpirol produzida por 0.1 mg / kg quinpirole (t36 = 1.01, p = 0.3183), sugerindo que a sensibilidade diferencial ao quinpirole entre o HD2 e LD2 animais reflete em grande parte a sensibilidade do pós-sináptico D2 Receptores DA.

Alta Sensibilidade ao Quinpirole Prevê Aumento da Locomoção Induzida pela Cocaína

Utilizando as atribuições do grupo split mediano para a resposta ao quinpirole, testamos se a sensibilidade ao quinpirol estava relacionada às propriedades ativadoras da cocaína. Figura 2 ilustra que HD2 os animais tiveram maior actividade locomotora induzida pela cocaína após a dose de 15 mg / kg de cocaína, mas não após a dose de 5 mg / kg de cocaína. Uma análise ANOVA de dois tipos de dados revelou uma interação significativa entre a dose de cocaína e o grupo quinpirol (F1,36 = 7.17, p = 0.0111) e principais efeitos da cocaína (F1,36 = 88.43, p <0.0001) e grupo (F1,36 = 6.86, p = 0.0128). Figura 2 Também apresenta os resultados de regressões lineares realizadas em cada dose de cocaína em toda a população de animais. Houve uma relação significativa entre a sensibilidade ao quinpirol e a atividade locomotora induzida pela 15 mg / kg de cocaína (F1,36 = 8.62, p = 0.0058), mas não 5 mg / kg de actividade locomotora induzida pela cocaína (F1,36 = 1.91, p = 0.1761). Assim, a sensibilidade inicial ao quinpirol parece predizer a locomoção induzida pela cocaína a uma alta dose de cocaína ativadora da locomotora.

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Figura 2. HD2 animais exibem maior sensibilidade à atividade locomotora induzida pela cocaína.

(A) Os ratos foram testados através de duas doses de cocaína (5 e 15 mg / kg, ip) num procedimento dentro da sessão. HD2 os animais exibiram significativamente maior actividade locomotora induzida pela cocaína a 15 mg / kg de cocaína, mas não a 5 mg / kg de cocaína. * HD2 significativo de LD2, p <0.05 (B e C) As análises de toda a coorte foram conduzidas para determinar a relação entre as pontuações AUC do quinpirol e a locomoção induzida pela cocaína. Uma relação positiva não significativa foi identificada para a atividade induzida pela cocaína na dose baixa (B, 5 mg / kg de cocaína) e uma relação positiva significativa foi identificada para a atividade induzida pela cocaína na dose alta (C, 15 mg / kg de cocaína )

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g002

Trabalhos anteriores demonstram que a locomoção induzida por novidades é preditiva da resposta futura à cocaína , . Portanto, queríamos avaliar se havia diferenças entre LD2 e HD2 grupos na atividade locomotora induzida por novidade. Não houve diferença entre o HD2 e LD2 grupos em locomoção induzida por novidades em toda a sessão (Figura 3A: t36 = 0.44, p = 0.6601) ou dentro dos primeiros minutos 30 – 60 (Figura 3B), quando as diferenças na capacidade de resposta da novidade são tipicamente mais robustas. Identificar se a atividade locomotora induzida por novidade era preditora de D2 Sensibilidade do receptor DA, nós re-caracterizamos nossos ratos como tendo baixa ou alta atividade locomotora induzida por novidade. Assim, criamos ratos de resposta baixa (LR) e ratos de alta resposta (HR) com base em uma divisão mediana de sua resposta locomotora inicial ao aparelho de teste locomotor durante a fase de habituação do teste. Determinamos então se esses grupos diferiam na atividade locomotora induzida pelo quinpirol. Como mostrado em Figura 3, LR e HR não diferiram significativamente em nenhuma das doses de quinpirol (Grupo: F1,108<1, NS; Quinpirol: F3,108 = 69.61, p <0.0001; Interação: (F3,108<1, NS), embora os grupos tenham diferido significativamente na locomoção induzida por cocaína (Grupo: F1,36 = 10.49, p = 0.0026; Cocaína: F1,36 = 84.86, p <0.0001; Interação: (F1,36 = 5.02, p = 0.0313). Juntos, esses dados sugerem que, embora a locomoção induzida por novidade seja preditiva da responsividade à cocaína, os mecanismos associados a essa relação podem ser distintos daqueles associados a D2 Sensibilidade do receptor DA.

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Figura 3. A sensibilidade do quinoprol não está associada à atividade locomotora induzida por novidade.

A avaliação da locomoção induzida por novidade durante a fase de habituação do teste não revelou diferenças significativas entre o LD2 e HD2 grupos. (A) Distribuição das pontuações da actividade locomotora induzida por novidade ao longo do período de teste 2-hr. (B) Curso no tempo descrevendo a atividade locomotora induzida por novidade entre o LD2 e HD2 grupos. Os animais desta coorte foram reclassificados em um grupo de baixa resposta (LR) e grupo de alta resposta (HR) com base em sua atividade locomotora induzida por novidade. (C) Ratos LR e HR não previram diferenças na atividade locomotora em todo o teste de resposta à dose de quinpirol. (D) Os ratos HR exibiram atividade locomotora induzida por cocaína significativamente maior em ambas as doses de cocaína. * HR significativo de LR, p <0.05.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g003

Como as diferenças individuais na resposta locomotora inicial à cocaína também mostraram corresponder a alterações no desenvolvimento da sensibilização à cocaína, recompensa da cocaína e autoadministração da cocaína, nós re-caracterizamos nossos ratos como tendo baixa ou alta atividade locomotora induzida pela cocaína. , , , . Esta reclassificação baseou-se no cálculo da AUC para a locomoção induzida pela cocaína em ambas as doses de cocaína durante o teste de resposta à dose de cocaína em sessão interna. Ratos com valores de AUC abaixo da mediana foram colocados no grupo de resposta baixa de cocaína (LCR) enquanto aqueles com valores de AUC acima da mediana foram colocados no grupo de resposta elevada a cocaína (HCR). Determinamos então se a locomoção inicial induzida por cocaína era preditiva da atividade induzida pelo quinpirol. Ratos HCR tiveram maior atividade induzida pelo quinpirol em comparação com ratos LCR usando o escore da AUC quinpirole (t36 = 3.585, p <0.0010, dados não mostrados). A análise da atividade em todo o teste de resposta à dose de quinpirol sugere que essas diferenças foram observadas principalmente nas doses de quinpirol de ativação locomotora (Figura 4). Assim, a análise da resposta à dose de quinpirol entre os grupos revelou um efeito principal significativo do grupo (F1,108 = 14.05, p = 0.0006), dose de quinpirole (F3,108 = 85.93, p <0.0001) e a interação (F3,108 = 7.64, p = 0.0001). Também avaliamos a relação entre a sensibilidade geral à cocaína e a sensibilidade ao quinpirol usando os escores da AUC para cada droga, onde houve uma correlação significativa entre os dois escores de atividade (Figura 4). Juntos, esses achados sugerem que há uma sobreposição significativa entre a sensibilidade inicial à cocaína e a sensibilidade inicial ao quinpirol.

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Figura 4. A sensibilidade inicial à cocaína corresponde às diferenças em D2 Sensibilidade do receptor DA.

A área sob a curva (AUC) foi calculada para a atividade locomotora induzida por cocaína de cada rato nas doses de 5 e 15 mg / kg. Usando esta pontuação calculada para a atividade locomotora induzida pela cocaína inicial, os ratos foram reclassificados em um grupo de baixa resposta à cocaína (LCR) e um grupo de alta resposta à cocaína (HCR). (A) Ratos HCR exibiram atividade locomotora induzida por quinpirol significativamente maior nas doses de 0.3 e 1.0 mg / kg. * HCR significativo de LCR, p <0.05. (B) Uma análise de toda a coorte foi conduzida para determinar a relação entre as pontuações AUC do quinpirol e as pontuações AUC da cocaína. Uma relação positiva significativa foi identificada entre a sensibilidade inicial ao quinpirol e a sensibilidade inicial à cocaína.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g004

Sensibilidade alta de quinopolol prediz aumento da recompensa de cocaína

Numa coorte separada de animais, foram criadas as atribuições medianas do grupo split para a resposta ao quinpirole (dados não mostrados) e o condicionamento local para a cocaína (7.5 mg / kg). Esta dose foi usada neste teste porque não produz de forma confiável condicionamento de lugar robusto em todos os animais. Figura 5 ilustra a locomoção induzida por salina e cocaína durante as sessões de condicionamento mínimo 30. Não houve diferença significativa entre os grupos na locomoção induzida por salina (F1,66 = 0.51, p = 0.4784). Houve uma diminuição significativa na locomoção induzida por salina em cada sessão de condicionamento (F2,66 = 10.91, p <0.0001) embora não tenha havido interação significativa entre grupos e sessões (F2,66 = 0.59, p = 0.5567). HD2 ratos tiveram significativamente maior locomoção induzida por cocaína durante as sessões de condicionamento em comparação com LD2 ratos (F1,66 = 4.29, p = 0.0462). Não houve efeito principal da sessão (F2,66 = 0.77, p = 0.4595) e sem efeitos interativos significativos (F2,66 = 0.60, p = 0.5535), embora qualitativamente pareça haver aumento da locomoção induzida por cocaína durante as duas primeiras sessões de condicionamento (Figura 5). Locomoção aumentada induzida por cocaína em HD2 animais durante as sessões de condicionamento recapitula nossas descobertas anteriores (Figura 2) e indica que o HD2 os animais são mais sensíveis às propriedades estimuladoras da cocaína e podem ser preditivos da recompensa da cocaína. Quando a coorte inteira foi analisada para o desenvolvimento de uma preferência de lugar condicionada por cocaína, houve um aumento significativo no tempo gasto no pós-condicionamento do compartimento emparelhado com cocaína (t36 = 2.27, p = 0.0295). Quando o grupo foi incluído na análise, houve um efeito principal significativo do condicionamento (F1,34 = 6.31, p = 0.0169), sugerindo novamente que, em geral, os animais desenvolveram uma preferência pelo compartimento emparelhado com cocaína. Não houve efeito de grupo (F1,34 = 3.27, p = 0.0793), mas houve uma interação significativa entre condicionamento e grupo (F2,34 = 4.36, p = 0.0443). Análises subseqüentes revelaram que HD2 os animais exibiram maior preferência de local condicionado para 7.5 mg / kg de cocaína em comparação com LD2 animais no teste de pós-condicionamento (t34 = 2.33, p = 0.0258), mas não diferiram no teste de pré-condicionamento (t34 = 0.31, p = 0.7619). Esses achados sugerem que a sensibilidade inicial ao quinpirol está associada à recompensa elevada da cocaína.

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Figura 5. HD2 os animais exibem maior sensibilidade aos efeitos recompensadores da cocaína.

(A) Não houve diferenças entre os grupos na atividade locomotora induzida por solução salina durante os ensaios de condicionamento. (B) Houve uma diferença significativa entre os grupos na atividade induzida pela cocaína durante os testes de condicionamento em que a DH2 os animais exibiram significativamente maior actividade locomotora induzida por cocaína em todas as sessões. * HD2 significativo de LD2, p <0.05. (C) As análises de todos os animais na coorte demonstraram uma preferência de lugar significativa e modesta induzida por cocaína após o condicionamento. † Pós-condicionamento significativo do pré-condicionamento, t36 = 2.27, p = 0.0295. (D) Análises de grupo demonstraram que apenas animais no HD2 O grupo desenvolveu uma preferência significativa pelo compartimento emparelhado com cocaína em comparação com os animais do grupo LD.2 grupo que não desenvolveu condicionamento significativo para o compartimento pareado com cocaína. * HD2 significativo de LD2, p <0.05.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g005

Sensibilidade alta de quinopolol prediz maior auto-administração de cocaína

Em uma coorte separada de animais, foram criadas as atribuições do grupo split mediano para a resposta ao quinpirole e testou-se a auto-administração de sacarose ou cocaína. Figura 6 ilustra que não houve diferença de grupo na aquisição da autoadministração de sacarose (F1,176 = 0.39, p = 0.5406) e ambos os grupos adquiridos de forma equivalente (Sessões: F8,176 = 18.00, p <0.0001; Grupo × Interação da sessão: F8,176 = 1.81, p = 0.0775), sugerindo que estes grupos não diferem na aprendizagem reforçada de uma resposta operante. Estes mesmos animais foram então implantados com um cateter de demora crónico e autorizados a auto-administrar cocaína. Os animais inicialmente adquiriram autoadministração de cocaína em um horário FR 1. Houve uma tendência para o HD2 auto-administrar mais cocaína que LD2 animais em um programa FR 1 analisados ​​em todas as sessões (F1,95 = 3.31, p = 0.0846). Quando as sessões foram calculadas em todas as sessões FR 1, HD2 animais se auto-administraram significativamente mais cocaína que LD2 animais (t19 = 2.63, p = 0.0164, dados não mostrados). Quando o cronograma foi adiantado para um cronograma de reforçamento HD FR 52 os animais se auto-administraram mais cocaína entre as sessões, como revelado por uma interação significativa (F4,76 = 3.465, p = 0.0118), embora esse efeito não tenha sido observado quando a média de todas as sessões FR 5 (t19 = 1.51, p = 0.1484, dados não mostrados). Assim, a sensibilidade inicial aumentada do quinpirol está associada ao aumento da ingestão de cocaína.

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Figura 6. HD2 os animais auto-administram mais cocaína do que LD2 animais.

(A) Não houve diferenças de grupo na aquisição de uma resposta operante para adquirir pelotas de sacarose. (B) Houve diferenças significativas entre os grupos quanto ao número de infusões de cocaína administradas tanto na relação fixa 1 quanto na relação fixa 5 de reforço. #tendência significativa entre HD2 e LD2 grupos, p = 0.08, * HD2 significativo de LD2, p <0.05.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g006

Cocaína aumenta sensibilidade de quinoxole em ambos os HD2 e LD2 Animais

Está bem estabelecido que os tratamentos crônicos de cocaína aumentam a sensibilidade de D2 Receptores DA , , , . Portanto, testamos a sensibilidade quinpirol em todos os animais após o procedimento de auto-administração de cocaína para identificar se as diferenças pré-existentes em D2 A sensibilidade do receptor DA persistiu após a administração crônica de cocaína. Isto foi realizado em todos os animais que não o 3 que foram perdidos devido a falha do cateter. Figura 7 ilustra que a auto-administração de cocaína aumenta a locomoção induzida pelo quinpirol em comparação com a resposta nos mesmos animais antes da autoadministração de cocaína. Uma ANOVA mista de duas vias revela que houve um efeito principal da exposição à cocaína (F1,104 = 17.46, p <0.0001) e dose de quinpirol (F2,104 = 66.73, p <0.0001). Houve também uma interação significativa (F2,104 = 10.61, p <0.0001). Resultados semelhantes foram obtidos usando os escores de AUC do quinpirol gerados antes e após a exposição à cocaína (t24 = 5.56, p <0.0001). Também analisamos as diferenças entre HD2 e LD2 grupos na sensibilidade quinpirol antes e depois da auto-administração de cocaína (Figura 7). Curiosamente, as diferenças de grupo pré-existentes permaneceram apesar das melhorias induzidas pela cocaína em D2 sensibilidade do receptor em ambos os grupos. Assim, as análises revelam um efeito principal do grupo (F3,98 = 24.21, p <0.0001), dose de quinpirol (F2,98 = 117.50, p <0.0001) e a interação (F6,98 = 16.03, p <0.0001). Da mesma forma, os resultados também foram obtidos usando as pontuações AUC do quinpirol geradas antes e depois da exposição à cocaína. As análises revelam um efeito principal do grupo (F1,23 = 46.05, p <0.0001) e exposição à cocaína (F1,23 = 36.26, p <0.0001), mas não a interação (F1,23 = 3.45, p = 0.0760). Esses achados sugerem que, embora a sensibilidade ao quinpirol antes da autoadministração de cocaína preveja uma futura resposta à cocaína, ambas as populações desenvolvem sensibilização cruzada com quinpirol após a autoadministração de cocaína.

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Figura 7. Auto-administração de cocaína aumenta D2 Sensibilidade do receptor DA em ambos os LD2 e HD2 ratos.

(A) As pontuações de AUC do quinpirol foram aumentadas em toda a coorte de animais testados após a auto-administração de cocaína. * Depois da cocaína significativa de Antes da cocaína, p <0.05 (B) Da mesma forma, esse aumento foi observado em todas as doses de quinpirol. * Depois da cocaína significativa de Antes da cocaína, p <0.05. (C e D) Aumentos induzidos pela cocaína em D2 A sensibilidade do receptor DA era aparente em ambos os LD2 e HD2 grupos usando tanto os escores de AUC do quinpirol quanto os escores brutos do locomotor ao longo da curva de resposta à dose do quinpirol. * Depois da cocaína significativa de Antes da cocaína, p <0.05. Curiosamente, as diferenças entre os grupos persistiram mesmo após a exposição à cocaína. † HD2 significativo de LD2, p <0.05.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.g007

Discussão

As descobertas relatadas aqui demonstram que as diferenças individuais na responsividade locomotora ao quinpirol são preditivas da regulação comportamental induzida pela cocaína. Esta é a primeira demonstração de que diferenças na sensibilidade de D2 Receptores DA predizem locomoção induzida por cocaina diferencial, preferência local e autoadministração. Os ratos categorizados como HD2, ter alta ativação locomotora em resposta a tratamentos com quinpirol, demonstrar aumento da atividade locomotora induzida por cocaína, aumento da recompensa de cocaína e auto-administração de cocaína em maior quantidade em comparação com ratos categorizados como LD2 que diminuíram a ativação locomotora em resposta ao quinpirol. Importante, categorizações de HD2 e LD2 não se assemelhou às diferenças na exploração de um novo ambiente, que se mostrou preditivo da resposta à cocaína. Categorizar ratos com base em sua sensibilidade inicial à cocaína (HCR e LCR) correspondeu às diferenças na sensibilidade quinpirol sugerindo que pode haver mecanismos comuns subjacentes às diferenças individuais entre essas duas características comportamentais. Foi determinado que a categorização da HD2 e LD2 não correspondia à supressão da locomoção induzida pelo quinpirole que é presumivelmente mediada pela D pré-sináptica.2 Estimulação do receptor DA , , . Portanto, suspeitamos que o HD2 e LD2 A caracterização do grupo na locomoção do quinpirol provavelmente reflete diferenças na sensibilidade do pós-sináptico D2 Receptores DA. No entanto, quinpirole também é conhecido por interagir com alguma seletividade em D3 Receptores DA . De fato, tem sido postulado que baixas doses de quinpirol induzem comportamento oral e comportamento de bocejar aumentados em ratos machos através de sua interação com D3 Receptores DA , . Assim, enquanto nós especulamos que a locomoção induzida por quinpirol é reflexo do pós-sináptico D2 Estimulação do receptor DA, é possível que D3 Os receptores DA podem desempenhar um papel na resposta comportamental ao quinpirol.

Alterações no circuito DA mesocorticolímbico têm sido implicadas há muito tempo como fator predisponente ao uso do psicoestimulante e conseqüência do uso repetido de psicoestimulantes. O D2 O receptor DA recebeu uma quantidade extraordinária de atenção devido a observações de que a administração crónica de muitas drogas de abuso reduz D2 Ligação do receptor DA no estriado, sugerindo que o uso de drogas produz essas mudanças . No entanto, outras linhas de evidência sugerem que D2 A expressão do receptor DA também pode corresponder a um fator de vulnerabilidade. Assim, os indivíduos não dependentes que relataram maiores escores de "gosto" de drogas para o metilfenidato também tinham níveis mais baixos de D2 Receptores DA dentro do corpo estriado . Utilizando um modelo animal, observou-se que a superexpressão do D2 O receptor DA no estriado ventral diminui a autoadministração de cocaína . Esses achados sugerem que a expressão de D2 Os receptores DA podem prever o uso futuro de cocaína, embora nenhum estudo tenha abordado como a sensibilidade do gene D2 O receptor DA pode corresponder à responsividade aos psicoestimulantes.

Existem várias linhas de evidência sugerindo que os níveis de expressão dos receptores metabotrópicos podem ser dissociados da sensibilidade do receptor para iniciar a sinalização intracelular e influenciar a atividade celular. Por exemplo, a dissociação foi observada em ratos após uma administração de cocaína do tipo binge. Assim, diminui em D2 Receptor DAmax foram observados sugerindo uma diminuição em D2 A expressão do receptor DA após administração de compulsão por cocaína, enquanto aumentos concomitantes na ativação da proteína G foram observados em resposta a D2 Estimulação do receptor DA nesses mesmos animais . Isto corresponde à noção de que a auto-administração de cocaína aumenta a expressão de alta afinidade D2 Receptores DA sem necessariamente influenciarem a expressão global de D2 Receptores DA . Nossos estudos sugerem que diferenças individuais na sensibilidade comportamental a D2 A estimulação do receptor DA prediz a capacidade de resposta à locomoção induzida pela cocaína, recompensa e reforço. Especificamente, animais com maior D2 Sensibilidade comportamental do receptor DA, seja por causa da maior expressão de alta afinidade D2 Receptores DA, ativação aumentada da proteína G ou outro mecanismo celular, predispõem os animais a uma maior sensibilidade, recompensa e reforço da cocaína. Permanece indeterminado se HD2 e LD2 ratos diferem na expressão de D2 Receptores DA e / ou ativação da proteína G.

Investigar diferenças individuais como um preditor de sensibilidade a drogas, recompensa e desenvolvimento de mudanças comportamentais tipo dependência tem sido uma abordagem de longa data para determinar os fatores de vulnerabilidade. Um dos modelos de animais mais estabelecidos utiliza a resposta de habituação a um novo ambiente para classificar os animais como respondedores baixos ou altos (LR ou HR, respectivamente; ). Neste modelo, ratos HR exibem uma maior resposta locomotora à cocaína aguda e mais facilmente se auto-administram com baixas doses de psicoestimulantes em comparação com ratos LR. , , , . Curiosamente, os ratos HR e LR também apresentam diferenças em D2 Expressão do receptor DA onde ratos HR diminuíram Bmax of 3Ligação de H-raclopride e em D2 ARNm do receptor DA no nucleus accumbens . Essas diferenças não se refletem na sensibilidade comportamental para D2 Estimulação do receptor DA, uma vez que não observamos diferenças entre ratos HR e LR na locomoção induzida por quinpirol, confirmando resultados anteriores . Em contraste, um estudo análogo em que os ratos foram seletivamente criados para diferenças na capacidade de resposta à novidade, os respondedores de alta novidade apresentaram uma proporção maior de D de alta afinidade.2 receptores , . Ratos criados para alta capacidade de resposta de novidade também apresentaram maior sensibilidade ao quinpirol, maior responsividade a estímulos relacionados à cocaína e melhor desinibição comportamental, achados que são semelhantes a algumas de nossas observações. Não está claro se as diferenças entre os ratos HR e LR em D2 A expressão do receptor DA reflete as alterações ou alterações pré-sinápticas ou pós-sinápticas em ambas as populações de D2 Receptores DA. Um estudo relata que ratos HR possuem subsensitividade de D2 autoreceptores na área tegmentar ventral, no entanto, não se sabe se a sensibilidade da D pós-sináptica2 Os receptores DA nas regiões terminais do estriado são diferentes entre os ratos HR e LR . Tendo em conta algumas das inconsistências nas nossas observações e observações anteriores, suspeitamos que o nosso D2 A caracterização do grupo receptor DA provavelmente corresponde a mecanismos distintos das respostas locomotoras generalizadas a comportamentos inovadores e exploratórios.

Outro modelo animal, mais recentemente desenvolvido, de diferenças individuais utiliza a resposta locomotora inicial à cocaína para determinar ratos HCR e LCR . Este modelo estabeleceu que ratos LCR exibem maior desenvolvimento de sensibilização de cocaína Melhoria do local condicionado condicionado à cocaína e têm maiores pontos de quebra na relação progressiva do que os ratos HCR . Esses achados sugerem que animais com baixa resposta inicial à cocaína podem ser mais vulneráveis ​​à dependência de cocaína. Observamos que HD2 os ratos têm uma resposta inicial maior à cocaína, desenvolvem mais prontamente a preferência condicionada pela cocaína e auto-administram mais cocaína em horários fixos em comparação com a LD2 ratos. Na tentativa de relacionar nossos achados com aqueles que utilizam a caracterização de HCR / LCR, nós re-caracterizamos nossos animais com base na resposta locomotora inicial da cocaína. Usando este método, observamos que os ratos HCR tiveram D significativamente maior2 Sensibilidade do receptor DA em comparação com ratos LCR. Embora essas descobertas sejam um pouco contraditórias, uma vez que descobrimos que D2 A sensibilidade do receptor DA corresponde a comportamentos mais reminiscentes de ratos LCR em estudos anteriores (por exemplo, maior locomoção de cocaína, CPP de cocaína, aumento da autoadministração de cocaína), eles são consistentes com achados de linhas de ratos de alta evitação romana onde ratos apresentam maior responsividade locomotora aguda auto-administrar mais cocaína , .

Pode haver bases neurobiológicas indeterminadas que correspondam a essa discrepância ou podem ser um reflexo de várias diferenças experimentais. Primeiro, não replicamos precisamente os procedimentos publicados para caracterização de HCR / LCR. Usamos uma caracterização mais ampla da resposta inicial à cocaína. Assim, entramos em colapso nas doses de 2 (5 e 15 mg / kg) e o teste foi realizado ao longo de duas horas. Isto é substancialmente diferente da avaliação 30 minutos após 10 mg / kg de cocaína que foi usada em estudos anteriores de HCR / LCR. Segundo, o teste locomotor da cocaína foi realizado após a avaliação inicial da sensibilidade ao quinpirol nas mesmas câmaras de atividade locomotora. Não está claro como essa experiência pode ter confundido o teste locomotor subsequente da cocaína. Finalmente, usamos diferentes procedimentos para avaliar a preferência de lugar condicionado (injeções ip x iv de cocaína) e nossos estudos de autoadministração foram realizados após a autoadministração substancial de sacarose. De fato, outro estudo recente utilizando treinamento alimentar prévio à auto-administração de cocaína observou efeitos mais reminiscentes de nossos achados, sugerindo que esta pode ser uma importante consideração processual. . No total, essas diferenças processuais podem prejudicar nossa capacidade de comparar diretamente nossos estudos com aqueles que usam a caracterização HCR / LCR.

Independentemente disso, a sensibilidade inicial melhorada para D2 A estimulação do receptor DA pode refletir um fator de vulnerabilidade que contribui para o aumento do uso do psicoestimulante. Nossas observações exploram as diferenças em D2 Sensibilidades do receptor DA em uma população sem ratos e sem drogas. É possível que fatores genéticos ou ambientais possam influenciar D2 A sensibilidade do receptor DA torna alguns indivíduos vulneráveis ​​ou resistentes aos efeitos comportamentais dos psicoestimulantes. Por exemplo, as condições de criação e as hierarquias sociais mostraram influenciar a expressão de D2 Receptores DA. A caixa de isolamento está associada à diminuição de D2 Expressão do receptor DA , embora outros não relatem nenhuma mudança na expressão do receptor e nenhuma mudança na sensibilidade comportamental de D2 Receptores DA . Em animais socialmente alojados, a dominância social pode influenciar a expressão de D2 Receptores DA onde animais dominantes exibem D aumentado2 A expressão do receptor DA é resistente à auto-administração de cocaína , . Dado que nossos animais foram alojados individualmente, as hierarquias sociais provavelmente não foram um fator contribuinte, embora experiências sociais e / ou estressantes no início da vida possam ter impactado D2 Sensibilidades do receptor DA , , , , , , .

Em resumo, demonstramos que ratos com alta sensibilidade inicial aos efeitos locomotores de D2 Estimulação do receptor DA, HD2 ratos, correspondem com maior sensibilidade à sensibilidade locomotora da cocaína, recompensa de cocaína e cocaína em comparação com LD2 ratos com baixa sensibilidade inicial aos efeitos locomotores produzidos por D2 Estimulação do receptor DA. Esta é a primeira demonstração de que D2 A sensibilidade do receptor DA é um fenótipo que representa maior suscetibilidade ao uso de cocaína, dada a exacerbação dos efeitos comportamentais da cocaína. Estudos futuros terão como objetivo identificar se D2 A sensibilidade do receptor DA está associada a um maior desenvolvimento de fenótipos de sensibilização comportamental e dependência de cocaína, bem como a alterações associadas dentro da neurobiologia do sistema DA mesocorticolímbico.

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Distribuição da locomoção induzida pelo quinpirol em uma coorte de animais. (A) Distribuição dos escores de atividade locomotora (quebra de feixe / h) durante o teste de resposta à dose de quinpirol ascendente dentro da sessão. Linhas horizontais cinza-escuro dentro dos agrupamentos de dados representam a pontuação mediana em cada dose. (B) Distribuição da pontuação da área sob a curva (AUC) calculada para cada animal entre as três doses de quinpirol. O ponto de dados preenchido com cinza escuro e a linha pontilhada representam a pontuação média (M = 15460).

Figura S1.

Distribuição da locomoção induzida pelo quinpirol em uma coorte de animais. (A) Distribuição dos escores de atividade locomotora (quebra de feixe / h) durante o teste de resposta à dose de quinpirol ascendente dentro da sessão. Linhas horizontais cinza-escuro dentro dos agrupamentos de dados representam a pontuação mediana em cada dose. (B) Distribuição da pontuação da área sob a curva (AUC) calculada para cada animal entre as três doses de quinpirol. O ponto de dados preenchido com cinza escuro e a linha pontilhada representam a pontuação média (M = 15460).

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.s001

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Figura S2.

LD2 e HD2 grupos não diferiram em seus D2 sensibilidade do autoreceptor de dopamina. (A) Distribuição das pontuações calculadas (% de base) para 0.1 mg / kg quinpirole no LD2 e HD2 grupos. A actividade de linha de base corresponde à actividade locomotora induzida por solução salina na hora anterior à administração de 0.1 mg / kg quinpirol no procedimento de teste de resposta à dose dentro da sessão. (B) Médias do grupo (± sem) para o D2 escores de sensibilidade do autorreceptor não revelaram diferenças significativas entre os grupos.

doi: 10.1371 / journal.pone.0078258.s002

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Contribuições do autor

Concebeu e desenhou as experiências: RKB KEM. Realizou os experimentos: KEM. Analisou os dados: RKB. Reagentes / materiais / ferramentas de análise: RKB KEM. Escreveu o papel: RKB.

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