Disfunção dos Gânglios da Base Contribui para a Inatividade Física na Obesidade (2016)

Disponível on-line 29 dezembro 2016

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http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2016.12.001

Destaques

• Obesidade está associada à inatividade física

• Camundongos obesos têm menos ligação ao D2R estriatal, o que pode explicar sua inatividade

• Restaurando G_i sinalização em iMSNs resgata níveis de atividade física de ratos obesos

• A inatividade física é mais uma consequência do que uma causa de ganho de peso

Sumário

A obesidade está associada à inatividade física, o que exacerba as conseqüências para a saúde do ganho de peso. No entanto, os mecanismos que mediam essa associação são desconhecidos. Nós hipotetizamos que os déficits na sinalização da dopamina contribuem para a inatividade física na obesidade. Para investigar isso, quantificamos múltiplos aspectos da sinalização da dopamina em camundongos magros e obesos. Descobrimos que a ligação do receptor do tipo D2 (D2R) no estriado, mas não os níveis de ligação ao receptor do tipo D1 ou dopamina, foi reduzida em ratos obesos. A remoção genética de D2Rs de neurônios espinhosos do meio estriado foi suficiente para reduzir a atividade motora em camundongos magros, enquanto_i sinalização nestes neurônios aumentou a atividade em ratos obesos. Surpreendentemente, embora os camundongos com baixos D2Rs fossem menos ativos, eles não eram mais vulneráveis ao ganho de peso induzido pela dieta do que os ratos controle. Concluímos que os déficits na sinalização do D2R do estriado contribuem para a inatividade física na obesidade, mas a inatividade é mais uma consequência do que uma causa da obesidade.

Resumo gráfico

Opções de figura

Palavras-chave

obesidade;
dopamina;
atividade física;
exercício;
D2;
striatum;
obeso;
perda de peso

Introdução

A obesidade está associada à inatividade física (Brownson et al., 2005 e Ekkekakis et al., 2016), que compõe os efeitos negativos para a saúde da diabetes tipo II e das doenças cardiovasculares (de Rezende et al., 2014 e Sharma et al., 2015). Os mecanismos subjacentes a essa associação não são conhecidos, fato que se reflete na falta de intervenções eficazes para alterar os níveis de atividade física em populações com obesidade (Ekkekakis et al., 2016). Curiosamente, a obesidade tem sido associada a alterações na sinalização da dopamina (DA) do estriado, o que levou a hipóteses de disfunção da recompensa na obesidade (Blum et al., 2011, Kenny, 2011 e Volkow e Wise, 2005). Embora o DA do estriado esteja fortemente ligado à produção motora, poucos estudos investigaram como as alterações dopaminérgicas induzidas por dieta podem contribuir para a inatividade física. Nossa hipótese é que a sinalização do corpo estriado está comprometida na obesidade e isso contribui para a inatividade física. A compreensão das causas biológicas da inatividade física pode levar a intervenções eficazes para aumentar a atividade e, assim, melhorar a saúde em indivíduos com obesidade.

O estriatal DA está criticamente envolvido no controle motor. Isso é evidente em distúrbios motores, como a doença de Parkinson, que é caracterizada pela morte de neurônios dopaminérgicos no mesencéfalo e consequente perda de DA do estriatal (Hornykiewicz, 2010). As duas populações de neurônios de projeção estriada moduladas por DA são conhecidas como os neurônios espinhosos médios da via direta e indireta (dMSNs e iMSNs) (Alexander e Crutcher, 1990, DeLong, 1990 e Gerfen et al., 1990). dMSNs expressam o G_sreceptor D1-acoplado (D1R) e projetar para a substância negra e segmento interno do globo pálido, enquanto iMSNs expressar o G_iD2R acoplado e projectado para o segmento externo do globo pálido (GPe) (Gerfen et al., 1990, Le Moine e Bloch, 1995 e Levey et al., 1993). A eliminação genética de D2Rs de iMSNs, ou estimulação optogenética de iMSNs, é suficiente para reduzir o movimento (Kravitz et al., 2010 e Lemos et al., 2016). Com base nas ligações entre a disfunção do D2R e a obesidade, levantamos a hipótese de que os animais obesos alteraram a produção de iMSN, resultando em inatividade física.

Aqui, nós examinamos múltiplos aspectos da sinalização DA em camundongos obesos e com obesidade induzida por dieta. A ligação de D2R foi reduzida em ratos obesos, enquanto os níveis de ligação de D1R e DA extracelular permaneceram inalterados. Os ratos obesos também exibiram interrupções no disparo do estriado e reduziram o movimento. Eliminar geneticamente os D2Rs da iMSNs reduziu a atividade em ratos magros, enquanto que a restauração de G_i sinalização em atividade aumentada de iMSNs em ratos obesos. Esses resultados estabelecem que a sinalização D2R em iMSNs pode modular a atividade física bidirecionalmente. Em seguida, perguntamos se os camundongos com baixa sinalização D2R eram mais vulneráveis ao ganho de peso em uma dieta rica em gordura, devido à sua baixa atividade. Para fazer isso, nós examinamos o ganho de peso em relação à variação natural na ligação D2R entre camundongos, bem como em camundongos com eliminação genética de D2Rs do estriado. Embora os camundongos com baixos níveis de D2Rs tivessem baixos níveis de atividade física, eles ganharam peso na mesma proporção que os ratos com D2Rs intactos. Isso argumenta contra uma forte relação causal entre atividade física e ganho de peso. Nós concluímos que deficiências na sinalização D2R contribuem para a inatividade física na obesidade, mas que a inatividade não leva necessariamente ao ganho de peso.

Resultados

Obesidade Induzida por Dieta foi Associada à Inatividade Física

Camundongos machos C57BL6 / J (3-4 meses) foram alimentados com ração padrão (magro, n = 8) ou dieta rica em gordura (obeso, n = 8) por 18 semanas (Figura S1UMA). Começando na semana 2 e persistindo até a semana 18, os ratos obesos tinham peso corporal e massa gorda significativamente maiores do que os ratos magros (p <0.0001; Figuras 1A e S1B). Massa magra não foi significativamente alterada (Figura S1C). Medimos os níveis de atividade em um campo aberto a cada 2 semanas durante 18 semanas (Etovisão; Tecnologias de Informação Noldus). Os ratos obesos tiveram menor atividade do que os ratos magros começando na semana 4 e persistindo até a semana 18 (p <0.0001; Figuras 1B e 1C). Na semana 18, ratos obesos passaram menos tempo se movendo (p = 0.005), tiveram menos movimentos (p = 0.0003) e tiveram velocidades mais lentas ao se mover (p = 0.0002; figura 1D) em relação aos ratos magros. A criação e a preparação não foram significativamente alteradas (figura 1D). Os ratos obesos também correram menos do que os magros quando tiveram acesso às rodas de corrida da gaiola (p = 0.0005; figura 1E) Nós testamos se os déficits de movimento se correlacionaram com o ganho de peso no grupo obeso. Embora o ganho de peso tenha sido correlacionado com a ingestão calórica de dieta rica em gordura (figura 1F), não foi correlacionado com os níveis de movimento em campo aberto ou com energia gasta durante o período de dieta rica em gordura (Figuras 1G e 1H). Curiosamente, essas mesmas correlações ocorreram quando examinamos a ingestão de alimentos na primeira semana do experimento (Figuras 1I – 1K), indicando que os níveis iniciais de ingestão de dieta rica em gordura (mas não o gasto de energia ou movimento) foram preditivos de ganho de peso posterior.

Figura 1.

Dieta rica em gordura crônica levou à inatividade física

(A) Camundongos alimentados com uma dieta rica em gordura pesaram mais do que os ratos alimentados com ração padrão, começando na semana 2 e continuando até a semana 18 (F_(18,252) = 62.43, p <0.0001).

(B e C) (B) Exemplo de parcelas de atividade de campo aberto mostrando que (C) ratos obesos têm atividade física reduzida em comparação com camundongos magros começando na semana 4 e continuando até a semana 18 (F_(10,140) = 4.83, p <0.0001).

(D) Após 18 semanas com dieta rica em gordura, os ratos obesos diminuíram o tempo gasto em movimento (t₍₁₄₎ = 3.32, p = 0.005), diminuição da frequência de movimento (t₍₁₄₎ = 4.74, p = 0.0003), e velocidade reduzida durante o movimento (t₍₁₄₎ = 4.69, p = 0.0002) em relação aos controles magros. Camundongos obesos também mostraram uma tendência de redução na criação (p = 0.07).

(E) Quando dado acesso a uma roda de corrida na gaiola em casa, os ratos obesos tinham menos voltas nas rodas em relação aos ratos magros (t₍₁₄₎ = 4.55, p = 0.0005).

(F – H) O ganho de peso total formou uma correlação significativa com (F) ingestão de energia ao longo do experimento (r = 0.74, p = 0.04), mas não (G) gasto de energia (r = 0.52, p = 0.19) nem (H) velocidade de campo aberto (r = 0.19, p = 0.65).

(I – K) O ganho de peso total formou uma correlação significativa com (I) ingestão média de energia durante a primeira semana (r = 0.88, p = 0.004), mas não (J) gasto de energia (r = −0.19, p = 0.66) , nem (K) velocidade em campo aberto (r = 0.36, p = 0.38).

Análise estatística. (A e C) ANOVA de duas vias para medidas repetidas, seguida de teste post hoc t com taxa de descoberta falsa de Benjamini-Hochberg; (D e E) teste t de Student não pareado; (F – H) regressão linear; ^*p <0.05, ^∗∗p <0.01, ^∗∗∗p <0.0001 versus magro. (I – K) regressão linear; ^∗∗∗p <0.001 versus camundongos magros.

Opções de figura

Obesidade foi associada com reduções na ligação de dopamina D2R

Para identificar os mecanismos subjacentes à inatividade física, quantificamos múltiplos aspectos da sinalização DA em camundongos magros e obesos. Consistente com relatórios anteriores em roedores, ligação ao receptor tipo D2R (através de autorradiografia com ³A H-espiperona, doravante denominada ligação D2R) foi menor em camundongos obesos em relação a camundongos magros (p <0.0001; Figuras 2A e 2B), um achado que foi significativo em todas as três subdivisões do estriado (dorsomedial: p = 0.004; dorsolateral: p <0.0001; ventral: p <0.001; Figuras S2A e S2B). No entanto, a ligação D2R não foi correlacionada com a gordura corporal no grupo magro ou obeso (p> 0.55 para ambos; figura 2C), sugerindo que, embora a ligação de D2R e o armazenamento de gordura sejam ambos alterados pela dieta crónica rica em gordura, estas variáveis podem não estar relacionadas causalmente umas com as outras.

Figura 2.

Ligaduras prejudicadas com alto teor de gordura e dopamina D2R do estriado

(A) Imagens da ligação do D2R do estriado, medida por ³Autorradiografia com H-espiperona.

(B) A ligação do D2R no estriado foi diminuída nos obesos em relação aos camundongos magros (t₍₂₅₎ = 5.02, p <0.0001).

(C) A ligação D2R estriatal não foi correlacionada com a porcentagem de gordura corporal em ratos magros (p = 0.95) ou obesos (p = 0.56).

(D – F) (D) Ligação D1R do estriado (t₍₂₄₎ = 1.31, p = 0.20), (E) teor total de dopamina (DA; t₍₁₃₎ = 0.85, p = 0.41), e densidade (F) tirosina hidroxilase (TH) (t₍₁₄₎ = 0.48, p = 0.64) não foram diferentes entre os grupos de dieta.

Análise estatística. Média com ratos individuais; n = 8-19 camundongos / grupo; Teste t de Student (B e D – F) ou regressão linear (C); ^*p <0.01.

Opções de figura

Nós tentamos identificar o mecanismo subjacente à redução mediada pela obesidade na ligação do D2R. Para fazer isso, nós procuramos por diferenças Drd2 mRNA (via hibridização in situ) e encontrou-o inalterado em todas as três subdivisões do estriado (dorsomedial: p = 0.92; dorsolateral: p = 0.90; ventral: p = 0.34; Figura S2C). Realizamos western blots para quantificar os níveis totais de proteína D2R e não observamos nenhuma mudança nas bandas de 50 ou 70 kDa, que representam diferentes estados de glicosilação do D2R (ambos p> 0.95, Figuras S2D e S2E) (Johnson e Kenny, 2010). Finalmente, avaliamos marcadores de disfunção metabólica em camundongos magros e obesos para ver se eles poderiam estar relacionados à diminuição em D2Rs como relatado anteriormente (Dunn et al., 2012) Camundongos obesos apresentaram maior colesterol em jejum (p <0.0001), leptina (p <0.0001), glicose (p = 0.0002), insulina (p = 0.001) e avaliação do modelo homeostático baseado em resistência (HOMA-IR) (p <0.001) , mas não triglicerídeos ou ácidos graxos livres (Figuras S1D – S1J). No entanto, nenhum desses fatores se correlacionou com a ligação do D2R em ratos obesos (dados não mostrados).

Ligação semelhante a D1R (via autorradiografia com ³H-SCH23390, doravante denominado ligação D1R) não diferiu entre ratos obesos e magros (p = 0.20; figura 2D). Também não houve diferenças no conteúdo de DA estriatal, medido por meio de cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de punções de tecido estriatal (p = 0.41; figura 2E), ou imunomarcação de tirosina hidroxilase (p = 0.64; figura 2F). À luz de vários relatos de diferenças no DA basal em ratos obesos (Carlin et al., 2013, Davis et al., 2008, Vucetic et al., 2012 e Wang et al., 2014), exploramos ainda mais este ponto usando microdiálise de fluxo sem rede (novos ratos, n = 6 por grupo). Mais uma vez, não observamos diferenças na DA extracelular (p = 0.99) ou em qualquer um de seus dois metabólitos, ácido 3,4-dihidroxifenilacético (DOPAC) (p = 0.85) e ácido homovanílico (HVA) (p = 0.68, Figura S3), com este método, indicando que a obesidade não estava associada a reduções no TDA extracelular nesses experimentos.

Queimação estriativa relacionada ao movimento foi interrompida em ratos obesos

Realizamos eletrofisiologia in vivo para examinar como a redução da ligação D2R estriatal pode alterar a saída neuronal estriatal e, assim, contribuir para a redução do movimento. Registramos a partir do estriado dorsomedial de camundongos magros e obesos (n = 3 camundongos por grupo, histologia em figura 3F). Embora os ratos obesos tenham se movido menos no geral, a velocidade dos movimentos executados não diferiu entre esses grupos (p = 0.55; figura 3A), permitindo-nos comparar disparos relacionados ao movimento entre ratos magros e obesos. As taxas basais de aumento de unidades múltiplas não diferiram entre os camundongos magros e obesos (magros, 2.1 ± 0.4 Hz; obesos, 2.0 ± 0.7 Hz; p = 0.93). No entanto, a prevalência de unidades ativadas por movimento (figura 3B) foi marcadamente menor em ratos obesos (p <0.0001; figura 3C). Isso não dependeu de nossa definição estatística de unidades “ativadas por movimento”, pois também observamos uma redução no aumento dos movimentos na resposta média de todas as unidades registradas em ratos obesos versus magros (interação por ANOVA, p <0.0002; Figuras 3D e 3E). Concluímos que a taxa total de spiking no estriado não diferiu, mas a organização de picos em torno do movimento foi interrompida em ratos obesos.

Figura 3.

Incêndio relacionado ao movimento no corpo estriado foi interrompido em ratos obesos

(A) Os eventos de movimento tiveram velocidade semelhante em camundongos magros e obesos.

(B) Exemplos de disparo ativado por movimento e não responsivo em neurônios do estriado.

(C) A prevalência de neurônios ativados por movimento foi menor em ratos obesos (p = 0.002).

(D) queima média relacionada ao movimento de todos os neurônios registrados.

(E) A queima relacionada ao movimento foi significativamente menor após a exposição à dieta (interação dieta × movimento, F_(1,171) = 14.77, p <0.0002).

(F) esquemático (adaptado de Franklin e Paxinos, 1997) ilustrando a colocação da matriz de eletrodos em ratos de registro magros e obesos (n = 3 cada).

Análise estatística. (C) teste exato de Fisher. (D e E) ANOVA de medidas repetidas de duas vias.

Opções de figura

Inibição dos Níveis de Atividade Restaurada da Saída iMSN em Ratos Obesos

Para testar se a redução da produção de iMSNs poderia aumentar o movimento em camundongos obesos, foi utilizada uma estratégia dependente de Cre-recombinase (Cre) para expressar um G inibitório._ireceptor de receptor do receptor opióide kapa modificado acoplado exclusivamente ativado por drogas projetadas (KOR-DREADD) em iMSNs de camundongos obesos (figura 4UMA). Embora o mouse com receptor de adenosina 2A Cre (A2A-Cre) tenha sido previamente validado com imunomarcação para demonstrar que a expressão de Cre é específica para iMSNs do estriado (Cui et al., 2013 e Lemos et al., 2016), realizamos uma validação adicional desta linha com hibridização in situ dupla fluorescente. Quase todos os neurônios (98.7% ± 0.6% de 1,301 neurônios contados) expressaram ambos Cre e Drd2 mRNA, enquanto muito poucos (1.3% ± 0.6%) expressaram Cre or Drd2 mRNA, mas não ambos, confirmando que a linha A2A-Cre ataca fielmente iMSNs ( Figura S4).

Figura 4.

Inibição mediada por DREADD da atividade física restaurada de iMSNs em ratos obesos

(A) Fotografia da expressão KOR-DREADD e esquemática (adaptada de Franklin e Paxinos, 1997) ilustrando os sï¿½ios de injecï¿½o viral de todos os KOR-DREADD em ratinhos A2A-Cre; opacidade indica o número de camundongos que expressam vírus em um determinado local.

(B) Camundongos obesos se moveram mais quando injetados com SalB em comparação ao DMSO (t₍₇₎ = 3.056, p = 0.02).

(C-G) Após a administração de SalB, camundongos obesos apresentaram alterações não significativas na freqüência de movimentos (C), (D) duração média do movimento e (E) velocidade de movimento, em relação a quando administrado DMSO. (F) A administração de Sal-B aumentou a freqüência de criação (t₍₇₎ = 3.116, p = 0.02), mas (G) não alterou significativamente a frequência de catação.

(H) camundongos Lean movidos mais quando injetado com SalB em comparação com DMSO (t₍₉₎ = 3.3, p = 0.01).

(I) SalB não afetou o movimento em camundongos do tipo selvagem que não expressaram o KOR-DREADD (p = 0.77).

Análise estatística. (B – I) Testes t de Student pareados; significa com ratos individuais; n = 6–10 ratos / grupo.

Opções de figura

As injeções do agonista KOR-DREADD salvinorina-B (SalB) aumentaram a distância percorrida por camundongos obesos que expressam o KOR-DREADD (p = 0.02; figura 4B). SalB também aumentou a frequência de criação (p = 0.02; figura 4F) e causou uma tendência a um aumento na frequência (t₍₇₎ = 1.64, p = 0.12), mas não duração ou velocidade do movimento (Figuras 4C – 4E). As injeções de SalB também aumentaram o movimento em camundongos magros (p = 0.01; figura 4H), mas não em camundongos do tipo selvagem que não expressaram o KOR-DREADD (p = 0.73; figura 4EU). Concluímos que reduzir a produção de iMSNs é suficiente para aumentar os níveis de movimento de animais magros e obesos.

Níveis baixos de D2R não predispõem animais a ganho de peso futuro

Finalmente, examinamos se as diferenças pré-existentes na sinalização D2R podem predispor os camundongos a obesidade induzida por dieta. Para abordar esta questão, realizamos tomografia de micro-pósitrons (micro-PET) com ¹⁸F-fallypride para determinar a disponibilidade inicial de D2R antes da exposição à dieta rica em gordura (figura 5UMA). Observamos um alto nível de variação no potencial de ligação de D2R entre camundongos, como outros demonstraram (Constantinescu et al., 2011) As diferenças individuais na disponibilidade de D2R foram positivamente correlacionadas com o movimento em campo aberto (p = 0.045; figura 5B), consistente com o papel dos D2Rs em movimento. Após a varredura de micro-PET, os animais foram mantidos em uma dieta rica em gordura por 18 semanas, para testar se os camundongos com baixo D2Rs seriam mais vulneráveis ao ganho de peso induzido pela dieta. Surpreendentemente, encontramos uma tendência de positivo relação entre a disponibilidade inicial de D2R e ganho de peso neste experimento (p = 0.10; figura 5C). Embora essa correlação não tenha sido significativa, ela argumenta contra a hipótese de que a baixa disponibilidade de D2R ou a baixa inatividade física tornam os animais mais vulneráveis ao ganho de peso. Isso também foi consistente com nossos achados de que nem a atividade de campo aberto basal, nem a atividade de campo aberto em todo o experimento, correlacionaram-se com o ganho de peso (Figuras 1F – 1K).

Figura 5.

A ligação basal D2R não previu ganho de peso futuro

(A) Exemplo de curvas de disponibilidade de micro-PET D2R no corpo estriado e cerebelo usando ¹⁸F-fallypride.

(B e C) (B) Potencial de ligação correlacionado com o movimento basal de campo aberto (r = 0.56, p = 0.045), e (C) tendeu a uma relação positiva com ganho de peso induzido por dieta rica em gordura (r = 0.50, p = 0.10, n = 12-14 ratos).

(D) Autoradiografia D2R representativa em ratinhos com D2Rs intactos (topo) e iMSN-Drd2-KO ratos (parte inferior).

(E e F) (E) iMSN-Drd2-KO ratos diminuíram a atividade física em campo aberto (t₍₈₎ = 2.99, p = 0.02) e (F) nas rodas giratórias da gaiola doméstica (p = 0.01, n = 5–19 ratos / grupo).

(G) iMSN-Drd2-KO ratos e Drd2controles de ninhada floxed ganharam quantidades similares de peso na dieta rica em gordura (F_(5,70) = 1.417, p = 0.23; n = 6–10 ratos / grupo).

(H – J) (H) Não houve diferença significativa na ingestão de energia normalizada (p = 0.60), (I) gasto de energia (p = 0.47), ou (J) RER (p = 0.17) entre iMSN-D2R-KO ratos e controles da ninhada.

Análise estatística. (B e C) Regressão linear; (E, F e H-J) teste t de Student não pareado; (G) ANOVA de medidas repetidas de duas vias, ^*p <0.05.

Opções de figura

Para explorar ainda mais a relação entre as diferenças pré-existentes nos níveis de atividade e o ganho de peso, aproveitamos um modelo genético de camundongo com a eliminação direcionada do Drd2 gene de iMSNs (iMSN-Drd2-KO) mas expressão preservada em outros tipos de células ( Dobbs et al., 2016 e Lemos et al., 2016). Como relatado anteriormente, iMSN-Drd2Os camundongos -KO moveram-se menos do que os controles da ninhada em um campo aberto (p = 0.02; figura 5E) e nas rodas giratórias da gaiola doméstica (p = 0.01; figura 5F). Consistente com os experimentos acima, iMSN-Drd2Os camundongos -KO não ganharam mais peso do que seus controles de ninhada quando colocados em uma dieta rica em gordura (p = 0.23; figura 5G). Para examinar sua utilização de energia mais de perto, realizamos experimentos de calorimetria indireta para comparar iMSN-Drd2Camundongos -KO para controles de ninhada. Não detectamos diferenças significativas na ingestão de energia (p = 0.60), gasto de energia (p = 0.47) ou razão de troca respiratória (RER) (razão de CO₂ produção para O₂ consumo [VCO₂/ VO₂], p = 0.17) entre camundongos iMSN-Drd2-KO e seus controles de ninhada, indicando que as reduções no movimento dos camundongos IMSN-Drd2-KO não se traduziram em mudanças na utilização de energia (Figuras 5H – 5J). Finalmente, exploramos a extensão em que reduções menores no D2R estriatal (como as observadas em nossos ratos obesos) poderiam regular o movimento e o ganho de peso. Para fazer isso, usamos uma linha de mouse que resulta em uma diminuição de 30% –40% no estriado Drd2 mRNA (iMSN-Drd2-Het) ( Lemos et al., 2016) Esses ratos também exibiram movimento reduzido, demonstrando que um knockdown parcial do D2R é suficiente para produzir déficits motores (p = 0.04; Figura S5UMA). Semelhante aos camundongos iMSN-Drd2-KO, os camundongos iMSN-Drd2-het não foram mais suscetíveis ao ganho de peso induzido por dieta rica em gordura (p = 0.89; Figura S5B). Concluímos que as alterações nos D2Rs do estriado são suficientes para alterar o movimento, mas não o balanço calórico ou o peso corporal em camundongos.

Discussão

A obesidade está associada à inatividade física, que muitas vezes acredita-se contribuir para o ganho de peso. Além disso, supõe-se que o aumento da adiposidade contribua para baixos níveis de atividade em pessoas com obesidade (Ekkekakis e Lind, 2006 e Westerterp, 1999), embora essa ideia seja difícil de testar diretamente. Curiosamente, as pessoas que perdem peso através da dieta (de Boer et al., 1986, de Groot et al., 1989, Martin et al., 2007 e Redman et al., 2009) ou cirurgia bariátrica (Berglind et al., 2015, Berglind et al., 2016, Bond et al., 2010 e Ramirez-Marrero et al., 2014) não aumentam seus níveis de atividade, argumentando contra o peso da adiposidade causando sua inatividade. Aqui, nós investigamos a hipótese de que a obesidade induzida por dieta causa inatividade física por meio de déficits na transmissão do DA estriatal. Consistente com o trabalho anterior, descobrimos que a dieta crónica rica em gordura diminuiu a ligação do D2R no estriado (Hajnal et al., 2008, Huang et al., 2006, Narayanaswami et al., 2013, van de Giessen et al., 2012 e van de Giessen et al., 2013). Também observamos um déficit na ativação motora de neurônios do estriado em camundongos obesos. Inibindo iMSNs com um G_i-coupled DREADD resgatado atividade em ratos obesos, demonstrando que os ratos com excesso de adiposidade podem se mover normalmente quando a saída dos gânglios basais é restaurada. Surpreendentemente, no entanto, nem medidas basais de D2R nem atividade física se correlacionaram com o ganho de peso, um ponto que observamos em vários experimentos. Isto está em contraste com um estudo em ratos, que pode refletir espécies ou diferenças experimentais (Michaelides et al., 2012). Concluímos que as reduções em D2Rs e subseqüente inatividade física são conseqüências da obesidade, mas não estão necessariamente causalmente ligadas ao ganho de peso adicional em camundongos.

Uma ligação entre a sinalização D2R alterada e a obesidade foi inicialmente identificada em humanos e foi inicialmente replicada por outros (de Weijer et al., 2011, Kessler et al., 2014, Volkow et al., 2008 e Wang et al., 2001). No entanto, trabalhos mais recentes colocaram essa questão em questão (Caravaggio et al., 2015, Cosgrove et al., 2015, Dunn et al., 2012, Guo et al., 2014, Karlsson et al., 2015, Karlsson et al., 2016, Steele et al., 2010 e Tuominen et al., 2015). Embora sejam necessárias pesquisas adicionais para entender as discrepâncias observadas entre os estudos clínicos, elas podem refletir complexidades inerentes aos estudos clínicos e à imagem de PET. Por exemplo, o raclopride, o radio-ligando usado em muitos estudos, pode ser deslocado pelo DA endógeno e, portanto, a ligação pode ser influenciada por diferenças no tom DA basal (Horstmann et al., 2015). Além disso, a relação entre os níveis de D2R e a obesidade pode ser não-linear, de tal forma que as alterações nos D2Rs podem ocorrer de forma diferente em pacientes com diferentes níveis de obesidade (Horstmann et al., 2015). Finalmente, fatores como a duração do sono (Wiers et al., 2016) e ingestão de cafeína (Volkow et al., 2015) também pode afetar a ligação de D2R e não é relatada ou controlada na maioria dos estudos clínicos. Estas fontes de variação podem ser mitigadas em estudos em animais, que pintam um quadro consistente de reduções no ARNm de D2R (Mathes et al., 2010 e Zhang et al., 2015), proteína (Adams et al., 2015 e Johnson e Kenny, 2010) e ligação ao receptor (Hajnal et al., 2008, Huang et al., 2006, Narayanaswami et al., 2013, van de Giessen et al., 2012 e van de Giessen et al., 2013) em roedores obesos. Nosso trabalho estende este corpo de literatura, informando que outros aspectos da sinalização DA permanecem inalterados em ratos obesos, mesmo aqueles com reduções em D2Rs. Adicionalmente, dada a nossa redução observada na ligação de D2R ³H-spiperone, mas sem alteração na proteína total D2R ou Drd2 ARNm, acreditamos que as alterações no D2R podem envolver alterações pós-traducionais, como a internalização do receptor. Embora nossos dados sugiram que a ligação reduzida de D2R é suficiente para diminuir a atividade física na obesidade, a atividade física é influenciada por muitos fatores, incluindo a genética e o ambiente. ( Bauman et al., 2012). Acreditamos ser improvável que os D2Rs sejam a única alteração neurológica associada à inatividade física na obesidade. Por exemplo, alterações nos hormônios circulantes, como grelina, leptina e insulina, atuam nos neurônios dopaminérgicos e podem influenciar a atividade (Murray et al., 2014). Finalmente, embora não tenhamos observado alterações nos D1Rs, não podemos descartar mudanças na ativação neuronal de neurônios da via direta que também possam influenciar a atividade física.

Não está claro se a variação na disponibilidade do D2R predispõe os indivíduos a ganhar peso. Humanos com o Drd2 O alelo Taq1A reduziu a disponibilidade de D2R e aumentou o risco de obesidade ( Blum et al., 1996, Carpenter et al., 2013, Noble et al., 1991, Stice et al., 2008 e Thompson et al., 1997). Além disso, camundongos com uma deleção global de D2Rs ganharam mais peso com uma dieta rica em gordura, que foi atribuída à inatividade física (Beeler et al., 2015). Em contraste, a variação individual (natural ou induzida geneticamente) no D2R do estriado se correlacionou com os níveis de atividade em nosso estudo, mas não se correlacionou com o ganho de peso. Uma distinção importante em nosso estudo foi que nosso modelo genético removeu os D2Rs apenas dos iMSNs. Além disso, medições cuidadosas da ingestão de alimentos e gasto de energia revelaram que a manipulação de D2Rs nesses neurônios não alterou o balanço energético. Como tal, estudos que demonstram ligações entre a função global D2R e o balanço de energia podem estar observando os efeitos de D2Rs em outros tipos de células. Nossos experimentos apóiam a conclusão de que a inatividade física é uma consequência da obesidade, mas em si não é suficiente para causar mudanças no peso.

Apesar da crescente evidência de que a atividade física está associada a melhorias na saúde cardiovascular e diminuição do risco para várias outras doenças crônicas, a atividade física permanece baixa em indivíduos com obesidade (Ekkekakis et al., 2016). A falta de intervenções eficazes para aumentar os níveis de atividade física reflete-se na falta de compreensão dos mecanismos celulares e moleculares subjacentes à inatividade física em indivíduos com obesidade. Aqui, relacionamos a inatividade física a mudanças na função dos gânglios da base, fornecendo uma explicação biológica para a falta de atividade física em indivíduos com obesidade.

Procedimentos experimentais

Sujeitos e dietas

Em todos os estudos, os ratos foram alojados individualmente em condições padrão (ciclo claro / escuro de 12 horas, 21–22 ° C), com acesso ad libitum a alimentos e água. Os camundongos receberam dieta alimentar padrão (5001 dieta de roedores; 3.00 kcal / g com 29% de energia derivada de proteínas, 13% de gordura e 56% de carboidratos; LabDiet) ou dieta rica em gordura (D12492; 5.24 kcal / g com 20% de energia derivada de proteína, 60% de gordura e 20% de carboidrato; Dietas de pesquisa). Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do Comitê de Cuidados e Uso de Animais do Instituto Nacional de Diabetes e Doenças Digestivas e Renais.

Knockout condicional transgênico iMSN-Drd2-Camundongos KO foram gerados cruzando camundongos expressando Cre dirigidos por elementos reguladores do gene do receptor de adenosina 2A (Adora2a) (B6.FVB (Cg) -Tg (Adora2a-Cre) KG139Gsat / Mmucd; GENSAT; 036158-UCD) com camundongos portadores de Drd2 alelos nulos B6.129S4 (FVB) -Drd2^{tm1.1Mrub / J}, JAX020631 (Bello et al., 2011).

Composição corporal e cálculos de gastos com energia

A composição corporal foi medida a cada duas semanas ¹Espectroscopia de RMN-H (EchoMRI-100H; Echo Medical Systems). A despesa de energia foi determinada usando um cálculo do balanço energético (Guo et al., 2009 e Ravussin et al., 2013):

Energyexpenditure = Ingestão de energia metabolizável - (Δfatmass + Δfat-freemass).

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Atividade de campo aberto

Os testes de campo aberto foram conduzidos em gaiolas PhenoTyper (30 × 30 cm; Noldus IT), e o software de análise de vídeo EthoVision (Versão 11; Noldus IT) foi usado para rastrear camundongos durante o teste.

Roda de gaiola em casa correndo

A corrida em roda foi medida colocando rodas de corrida sem fio de baixo perfil (Med Associates) nas gaiolas dos camundongos por 72 horas a cada 3 semanas (experimentos de obesidade induzida por dieta) ou continuamente (iMSN-Drd2Experimentos -KO).

Medidas Sanguíneas

Sangue de veia ocular de animais sacrificados foi utilizado para a análise de metabolitos e hormonas no soro após um jejum de 4-hr.

Autoradiografia do Receptor de Dopamina

As hemissecções direitas foram criosseccionadas ao nível do estriado (−0.22, 0.14, 0.62 e 1.18 mm do bregma, cobrindo toda a extensão do estriado) em cortes de 12 mm. As lâminas foram descongeladas e pré-incubadas em tampão de ensaio (HEPES 20 mM, NaCl 154 mM e albumina de soro bovino a 0.1% [BSA]; pH 7.4) durante 20 min a 37 ° C. A ligação de D1R foi avaliada incubando lâminas em tampão de ensaio contendo SCH-1.5 marcado com trítio 23390 nM (Perkin-Elmer) e cetanserina 100 nM por 60 min a 37 ° C. A ligação de D2R foi avaliada incubando lâminas com espiperona marcada com trítio 600 pM (Perkin-Elmer) e cetanserina 100 nM durante 100 min a 37 ° C. Após a incubação com o radioligando apropriado, as lâminas foram lavadas duas vezes durante 10 min a 4 ° C em tampão de lavagem (Tris-HCl 10 mM, NaCl 154 mM) e depois mergulhadas em água (0 ° C) e deixadas secar durante a noite. As lâminas foram então expostas a placas de imagem de fósforo por 7 (ligação D1R) ou 11 dias (ligação D2R) e desenvolvidas usando um phosphoimager (Cyclone; Perkin-Elmer). Para análise, as áreas de interesse foram delineadas e analisadas usando o software de análise de imagem Optiquant (Perkin-Elmer).

Western blotting

As transferências de Western foram incubadas com anticorpo anti-D2DR de ratinho (1: 500; Santa Cruz; sc-5303) ou anticorpo anti-GAPDH de ratinho (1: 1,000; Santa Cruz; sc-32233) e depois com IgG de cabra anti-ratinho HRP (1: 1,000; Santa Cruz; sc-2005). O sinal de quimiluminescência foi gerado usando reagentes de detecção de western blotting quimioluminescentes melhorados (Bio-Rad) e visualizados com o sistema de imagem Chemidoc (Bio-Rad).

Hibridização In Situ

Um kit de ensaio de fluorescência multiplex RNAscope foi usado para hibridização in situ (Advanced Cell Diagnostics). Resumidamente, as seções fixadas em formalina foram desidratadas em etanol, seguido por exposição à protease. As seções foram então hibridizadas com sondas de oligonucleotídeo RNAscope contra Drd2. Após a hibridação da sonda, as lâminas foram incubadas com amplificador de sinal de acordo com os protocolos de RNAscope. As lâminas foram então lavadas com tampão de lavagem de RNAscope. Finalmente, as lâminas foram montadas com o contraste DAPI.

Cromatografia Líquida de Alta Performance com Detecção Eletroquímica

Hemissecções esquerdas foram processadas para detecção de DA usando cromatografia líquida de alta performance de fase reversa com detecção eletroquímica (HPLC-EC), como descrito anteriormente (Kilpatrick et al., 1986).

Imuno-histoquímica com Tirosina Hidroxilase

As seções montadas em lâminas foram fixadas em formalina tamponada neutra a 10%, lavadas em TBS 0.1 M (pH 7.5) e incubadas em uma solução de anticorpo primário contendo soro de burro normal a 3%, Triton X-0.3 a 100% e anticorpo de coelho anti-tirosina hidroxilase (1: 1,000; Millipore; MAB152) durante a noite a 23 ° C. No dia seguinte, as seções de tecido foram enxaguadas em TBS e incubadas em uma solução de anticorpo secundário contendo soro de burro normal a 3%, Triton X-0.3 a 100% e anti-coelho de cabra conjugado com Alexa Fluor 555 (Millipore; AQ132F). Para cada camundongo, duas seções estriadas foram analisadas, exceto para quatro camundongos (dois HFD, dois Chow), onde apenas uma seção foi analisada devido à má qualidade do tecido ou da imagem.

Micro-PET

Ratos foram injetados com ¹⁸F-fallypride com atividade específica de 2.5 ± 0.34 mCi / nmol em um volume de 130 μL via veia da cauda, sob anestesia com isoflurano. O micro-PET scan foi realizado por 2 horas, durante as quais 25 quadros foram adquiridos para análise. As curvas de tempo-atividade para ¹⁸A F-fallypride nas regiões de interesse (ROIs) foi extraída utilizando o software AFNI (https://afni.nimh.nih.gov/afni) e parâmetros cinéticos foram ajustados a um modelo de quatro compartimentos usando um script personalizado MATLAB (com o cerebelo usado como tecido de referência) para determinar o potencial de ligação D2R (Lammertsma e Hume, 1996).

Eletrofisiologia In Vivo

Os registros foram feitos a partir de um arranjo de eletrodos contendo 32 microfios de tungstênio revestidos com Teflon (35 mm de diâmetro) implantados unilateralmente no estriado dorsomedial (anterior / posterior [A / P]: +0.8; medial / lateral [M / L]: +1.5 ; dorsal / ventral [D / V]: -2.6 mm por bregma), e processado com software comercial (Offline Sorter and Neuroexplorer; Plexon).

Injeção de vetor viral estereotáxico

Os camundongos foram brevemente anestesiados por exposição a isoflurano. Uma vez profundamente anestesiado, uma única incisão foi feita ao longo da linha média, o crânio foi exposto e uma craniotomia bilateral foi feita (A / P: +0.5; M / L: ± 1.5 mm por bregma). O vetor viral contendo o KOR-DREADD inibitório (Syn-DIO-hKORD-IRES-mCit-WPRE; 0.5 μL) foi injetado bilateralmente no estriado dorsomedial (D / V, -2.8 mm do topo do crânio) e permitiu a expressão para 9 semanas antes da experimentação.

Microdiálise de Fluxo No-Net e Análise de Dopamina

As medições de DA extracelular basal, DOPAC e HVA no estriado dorsal de camundongos foram realizadas por abordagem de microdiálise de fluxo sem rede. Sondas unilaterais de 2 mm (corte de membrana de 18 kDa) foram implantadas estereotaxicamente 1 semana após a implantação da cânula com perfusão contínua de líquido cefalorraquidiano artificial (aCSF) a 1 μL / min por 4 horas antes da coleta de amostra (ver Procedimentos Experimentais Suplementares) O experimento de fluxo sem rede para medir os níveis extracelulares de DA foi realizado por perfusão aleatória de seis concentrações diferentes de DA (0, 2.5, 5, 10, 20 e 40 nM) em aCSF através da sonda de diálise. Cada concentração de DA foi perfundida por 30 min e, em seguida, amostras de 2 × 10 min coletadas em 2.5 μL de HCl 100 mM mais EDTA 1 mM para evitar a degradação da catecolamina e congeladas a -80 ° C. Para as análises neuroquímicas, foi utilizado sistema de HPLC isocrático acoplado à detecção amperométrica (HPLC-EC; BASi LC-4C). Apenas camundongos com colocação de sonda adequada foram incluídos na análise (Figura S3E)

Estatísticas

A análise estatística foi realizada usando GraphPad Prism (Versão 6.07; GraphPad Software). A menos que declarado, foram usados testes t de Student bicaudais. Caso contrário, testes t pareados bicaudais, ANOVAs de medidas repetidas de uma via ou ANOVAs de medidas repetidas de duas vias foram usados quando apropriado e conforme indicado. ANOVAs foram seguidos por testes t para comparações post hoc. Os resultados foram considerados significativos com um alfa de p <0.05, ou com o alfa determinado pela correção da taxa de falsa descoberta de Bejamini-Hochberg (FDR), quando apropriado.

Contribuições do autor

DMF, KD, TJO, MS, AK, IPSGRVAA, MR, KDH e AVK, desenharam os experimentos. DMF, KD, TJO, MS e AVK realizaram e analisaram experimentos comportamentais. IP realizou experimentos de western blotting. DMF e AVK realizaram e analisaram dados eletrofisiológicos in vivo. DMF, J.-SL, JG e AVK realizaram e analisaram experimentos de micro-PET. DMF, KD, TJO e AVK escreveram o manuscrito. Todos os autores discutiram os resultados e comentaram o manuscrito.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo Programa de Pesquisa Intramural do NIH, o Instituto Nacional de Diabetes e Doenças Digestivas e Renais (NIDDK). Gostaríamos de agradecer ao Núcleo de Metabolismo de Rato no NIDDK para avaliar os metabólitos e hormônios séricos, Andres Buonanno com sua assistência na elaboração de experimentos de microdiálise de dopamina, e Dra. Judith Walters, Dra. Kristin Dupre e Dra. Claire Delaville para assistência com HPLC análise de conteúdo tecidual de dopamina. Gostaríamos também de agradecer ao Dr. Scott Young pelo uso de seu equipamento de laboratório e assistência com estudos de ligação. Agradecemos também aos membros do laboratório AVK, Marc Reitman e Nick Ryba por sua participação no projeto experimental e leitura cuidadosa do manuscrito.

Informação complementar

Documento S1. Procedimentos Experimentais Suplementares e Figuras S1-S5.

Ajuda com arquivos PDF

Documento S2. Artigo mais informações suplementares.

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O misterioso caso da diretriz de saúde pública que é (quase) totalmente ignorada: apela a uma agenda de pesquisa sobre as causas da extrema esquiva da atividade física na obesidade
Obes Rev., 17 (2016), pp. 313 – 329
CrossRef

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8.

Franklin e Paxinos, 1997
KBJ Franklin, G. Paxinos
O cérebro do mouse em coordenadas estereotáxicas
Imprensa Acadêmica (1997)

9.

Gerfen et al., 1990
CR Gerfen, TM Engber, LC Mahan, Z. Susel, TN Perseguição, FJ Monsma Jr., DR Sibley
Expressão gênica regulada por receptor de dopamina D1 e D2 de neurônios estriatonigral e estriatopalidal
Ciência, 250 (1990), pp. 1429 – 1432
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Citando artigos (1918)

10.

Guo et al., 2009
J. Guo, W. Jou, O. Gavrilova, KD Hall
Obesidade persistente induzida por dieta em camundongos C57BL / 6 machos resultantes de dietas obesigênicas temporárias
PLoS One, 4 (2009), p. e5370
CrossRef

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Citando artigos (47)

11.

Guo et al., 2014
J. Guo, WK Simmons, P. Herscovitch, A. Martin, KD Hall
Padrões de correlação do receptor do tipo D2 com dopamina estriatal com obesidade humana e comportamento alimentar oportunista
Mol. Psiquiatria, 19 (2014), pp. 1078 – 1084
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Citando artigos (37)

12.

Hajnal et al., 2008
A. Hajnal, WM Margas, M. Covasa
Função do receptor de D2 de dopamina alterada e ligação em ratos obesos OLETF
Cérebro Res. Bull., 75 (2008), pp. 70 – 76
Artigo

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Citando artigos (24)

13.

Hornykiewicz, 2010
O. Hornykiewicz
Uma breve história da levodopa
J. Neurol., 257 (Suplemento 2) (2010), pp. S249 – S252
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Citando artigos (40)

14.

Horstmann et al., 2015
A. Horstmann, WK Fenske, MK Hankir
Argumento para uma relação não linear entre a gravidade da obesidade humana e o tom dopaminérgico
Obes Rev., 16 (2015), pp. 821 – 830
CrossRef

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Citando artigos (12)

15.

Huang et al., 2006
XF Huang, K. Zavitsanou, X. Huang, Y. Yu, H. Wang, F. Chen, AJ Lawrence, C. Deng
Transporte de dopamina e densidades de ligação ao receptor D2 em camundongos propensos ou resistentes à obesidade crônica induzida por dieta hiperlipídica
Behav. Cérebro Res., 175 (2006), pp. 415 – 419
Artigo

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Citando artigos (73)

16.

Johnson e Kenny, 2010
PM Johnson, PJ Kenny
Receptores dopaminérgicos D2 em disfunção de recompensa e compulsividade alimentar em ratos obesos
Nat. Neurosci., 13 (2010), pp. 635 – 641
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Citando artigos (549)

17.

Karlsson et al., 2015
HK Karlsson, L. Tuominen, JJ Tuulari, J. Hirvonen, R. Parkkola, S. Helin, P. Salminen, P. Nuutila, L. Nummenmaa
A obesidade está associada à diminuição da disponibilidade do receptor D2 da dopamina μ-opióide mas inalterada no cérebro
J. Neurosci., 35 (2015), pp. 3959-3965
CrossRef

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Citando artigos (29)

18.

Karlsson et al., 2016
HK Karlsson, J. Tuulari, L. Tuominen, J. Hirvonen, H. Honka, R. Parkkola, S. Helin, P. Salminen, P. Nuutila, L. Nummenmaa
Perda de peso após cirurgia bariátrica normaliza receptores opióides cerebrais em obesidade mórbida
Mol. Psiquiatria, 21 (2016), pp. 1057 – 1062
CrossRef

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Citando artigos (3)

19.

Kenny, 2011
PJ Kenny
Mecanismos de recompensa na obesidade: novos insights e futuras direções
Neurônio, 69 (2011), pp. 664 – 679
Artigo

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Citando artigos (220)

20.

Kessler et al., 2014
RM Kessler, DH Zald, MS Ansari, R. Li, RL Cowan
Alterações na liberação de dopamina e níveis de receptores de dopamina D2 / 3 com o desenvolvimento de obesidade leve
Sinapse, 68 (2014), pp. 317 – 320
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Citando artigos (18)

1.

Kilpatrick et al., 1986
IC Kilpatrick, MW Jones, OT Phillipson
Um método de análise semiautomático para catecolaminas, indoleaminas e alguns metabólitos proeminentes em regiões microdissecionadas do sistema nervoso: uma técnica de HPLC isocrática empregando detecção coulométrica e preparação mínima da amostra
J. Neurochem., 46 (1986), pp. 1865-1876
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Citando artigos (167)

2.

Kravitz et al., 2010
AV Kravitz, BS Freeze, PR Parker, K. Kay, MT Thwin, K. Deisseroth, AC Kreitzer
Regulação dos comportamentos motores parkinsonianos pelo controle optogenético dos circuitos dos gânglios da base
Natureza, 466 (2010), pp. 622 – 626
CrossRef

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Citando artigos (591)

3.

Lammertsma e Hume, 1996
AA Lammertsma, SP Hume
Modelo simplificado de referência para estudos de receptores de PET
Neuroimagem, 4 (1996), pp. 153 – 158
Artigo

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Citando artigos (1170)

4.

Le Moine e Bloch, 1995
C. Le Moine, B. Bloch
Expressão gênica do receptor de dopamina D1 e D2 no estriado de rato: sondas sensíveis de cRNA demonstram segregação proeminente dos mRNAs D1 e D2 em populações neuronais distintas do estriado dorsal e ventral
J. Comp. Neurol., 355 (1995), pp. 418-426
CrossRef

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Citando artigos (382)

5.

Lemos et al., 2016
JC Lemos, DM amigo, AR Kaplan, JH Shin, M. Rubinstein, AV Kravitz, VA Alvarez
A transmissão aprimorada do GABA impulsiona a bradicinesia após a perda da sinalização do receptor de dopamina D2
Neurônio, 90 (2016), pp. 824 – 838
Artigo

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6.

Levey et al., 1993
AI Levey, SM Hersch, DB Centeio, RK Sunahara, HB Niznik, CA Kitt, DL Price, R. Maggio, MR Brann, BJ Ciliax
Localização de receptores de dopamina D1 e D2 no cérebro com anticorpos específicos para cada subtipo
Proc. Natl. Acad. Sci. EUA, 90 (1993), pp. 8861 – 8865
CrossRef

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Citando artigos (410)

7.

Martin et al., 2007
CK Martin, L. Heilbronn, L. de Jonge, J. DeLany, J. Volaufova, SD Anton, LM Redman, SR Smith, E. Ravussin.
Efeito da restrição calórica na taxa metabólica de repouso e atividade física espontânea
Obesidade (Silver Spring), 15 (2007), pp. 2964 – 2973
CrossRef

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Citando artigos (99)

8.

Mathes et al., 2010
WF Mathes, DL Nehrenberg, R. Gordon, K. Hua, T. Garland Jr., D. Pomp
Desregulação dopaminérgica em camundongos criados seletivamente para exercício excessivo ou obesidade
Behav. Cérebro Res., 210 (2010), pp. 155 – 163
Artigo

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Citando artigos (48)

9.

Michaelides et al., 2012
M. Michaelides, PK Thanos, R. Kim, J. Cho, M. Ananth, Wang GJ, ND Volkow
A imagem de PET prediz o futuro peso corporal e preferência por cocaína
Neuroimagem, 59 (2012), pp. 1508 – 1513
Artigo

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Citando artigos (24)

10.

Murray et al., 2014
S. Murray, A. Tulloch, MS Ouro, NM Avena
Mecanismos hormonais e neurais de recompensa alimentar, comportamento alimentar e obesidade
Nat. Rev. Endocrinol., 10 (2014), pp. 540-552
CrossRef

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Citando artigos (36)

11.

Narayanaswami et al., 2013
V. Narayanaswami, AC Thompson, LA Cassis, Bardo MT, LP Dwoskin
Obesidade induzida pela dieta: função do transportador da dopamina, impulsividade e motivação
Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 1095 – 1103
CrossRef

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Citando artigos (26)

12.

Noble et al., 1991
EP Noble, K. Blum, T. Ritchie, A. Montgomery, PJ Sheridan
Associação alélica do gene do receptor de dopamina D2 com características de ligação ao receptor no alcoolismo
Arco. Gen. Psiquiatria, 48 (1991), pp. 648 – 654
CrossRef

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Citando artigos (470)

13.

Ramirez-Marrero et al., 2014
FA Ramirez-Marrero, J. Miles, MJ Joyner, TB Curry
Atividade física autorreferida e objetiva em cirurgia de revascularização miocárdica, obesos e magros adultos: associação com composição corporal e aptidão cardiorrespiratória
J. Phys. Aja. Saúde, 11 (2014), pp. 145-151
CrossRef

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Citando artigos (3)

14.

Ravussin et al., 2013
Y. Ravussin, R. Gutman, CA LeDuc, RL Leibel
Estimando o gasto de energia em camundongos usando uma técnica de balanço energético
Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 399 – 403
CrossRef

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Citando artigos (15)

15.

Redman et al., 2009
LM Redman, LK Heilbronn, Martin C., L. de Jonge, DA Williamson, JP Delany, E. Ravussin, equipe de Pennington CALERIE
Compensações metabólicas e comportamentais em resposta à restrição calórica: implicações para a manutenção da perda de peso
PLoS One, 4 (2009), p. e4377

16.

Sharma et al., 2015
S. Sharma, A. Merghani, L. Mont
Exercício e coração: o bom, o mau e o feio
EUR. Coração J., 36 (2015), pp. 1445 – 1453
CrossRef

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Citando artigos (21)

17.

Steele et al., 2010
KE Steele, GP Prokopowicz, MA Schweitzer, TH Magunsuon, AO Lidor, H. Kuwabawa, A. Kumar, J. Brasic, DF Wong
Alterações dos receptores centrais de dopamina antes e após a cirurgia de bypass gástrico
Obes Surg., 20 (2010), pp. 369 – 374
CrossRef

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Citando artigos (85)

18.

Stice et al., 2008
E. Stice, S. Spoor, C. Bohon, DM Pequeno
Relação entre obesidade e resposta embotada do estriado aos alimentos é moderada pelo alelo Taqia A1
Ciência, 322 (2008), pp. 449 – 452
CrossRef

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Citando artigos (412)

19.

Thompson et al., 1997
J. Thompson, N. Thomas, A. Singleton, M. Piggott, Lloyd S., EK Perry, CM Morris, RH Perry, em Ferrier, JA Tribunal
Gene do receptor de dopamina D2 (DRD2) Polimorfismo Taq1 A: ligação reduzida do receptor D2 da dopamina no estriado humano associado ao alelo A1
Farmacogenética, 7 (1997), pp. 479 – 484
CrossRef

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Citando artigos (398)

20.

Tuominen et al., 2015
L. Tuominen, J. Tuulari, H. Karlsson, J. Hirvonen, S. Helin, P. Salminen, R. Parkkola, J. Hietala, P. Nuutila, L. Nummenmaa.
Interação de dopamina-opiáceo mesolímbica aberrante na obesidade
Neuroimagem, 122 (2015), pp. 80 – 86
Artigo

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1.

van de Giessen et al., 2012
E. de Giessen, SE la Fleur, K. de Bruin, W. van den Brink, J. Booij
Dietas hiperlipídicas de escolha livre e sem escolha afetam a disponibilidade do receptor de D2 / 3 da dopamina no estriado, a ingestão calórica e a adiposidade
Obesidade (Silver Spring), 20 (2012), pp. 1738 – 1740
CrossRef

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Citando artigos (19)

2.

van de Giessen et al., 2013
E. de Giessen, SE la Fleur, L. Eggels, K. de Bruin, W. van den Brink, J. Booij
A alta relação entre gordura e carboidrato, mas não a ingestão total de energia, induz a menor disponibilidade do receptor de dopamina no estriado D2 / 3 na obesidade induzida por dieta
Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 754 – 757
CrossRef

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Citando artigos (16)

3.

Volkow e Wise, 2005
ND Volkow, RA Sábio
Como o vício em drogas pode nos ajudar a entender a obesidade?
Nat. Neurosci., 8 (2005), pp. 555 – 560
CrossRef

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Citando artigos (584)

4.

Volkow et al., 2008
ND Volkow, GJ Wang, F. Telang, JS Fowler, PK Thanos, J. Logan, D. Alexoff, YS Ding, C. Wong, Y. Ma, K. Pradhan
Os receptores D2 do estriado com baixa dopamina estão associados ao metabolismo pré-frontal em indivíduos obesos: possíveis fatores contribuintes
Neuroimagem, 42 (2008), pp. 1537 – 1543
Artigo

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Citando artigos (240)

5.

Volkow et al., 2015
ND Volkow, GJ Wang, J. Logan, D. Alexoff, JS Fowler, PK Thanos, C. Wong, V. Casado, S. Ferre, D. Tomasi
A cafeína aumenta a disponibilidade do receptor de dopamina no estriado D2 / D3 no cérebro humano
Transl. Psiquiatria, 5 (2015), p. e549
CrossRef

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Citando artigos (4)

6.

Vucetic et al., 2012
Z. Vucetic, JL Carlin, K. Totoki, TM Reyes
Desregulação epigenética do sistema dopaminérgico na obesidade induzida por dieta
J. Neurochem., 120 (2012), pp. 891-898
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Citando artigos (53)

7.

Wang et al., 2001
GJ Wang, ND Volkow, J. Logan, NR Pappas, CT Wong, W. Zhu, N. Netusil, JS Fowler
Dopamina cerebral e obesidade
Lancet, 357 (2001), pp. 354 – 357
Artigo

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Citando artigos (955)

8.

Wang et al., 2014
GJ Wang, D. Tomasi, A. Convit, J. Logan, CT Wong, E. Shumay, JS Fowler, ND Volkow
O IMC modula as alterações de dopamina dependentes de calorias no acumbens da ingestão de glicose
PLoS One, 9 (2014), p. e101585
CrossRef

9.

Westerterp, 1999
KR Westerterp
Obesidade e atividade física
Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord., 23 (Suplemento 1) (1999), pp. 59 – 64
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Citando artigos (60)

10.

Wiers et al., 2016
CE Wiers, E. Shumay, E. Cabrera, E. Shokri-Kojori, TE Gladwin, E. Skarda, SI Cunningham, SW Kim, TC Wong, D. Tomasi, et ai.
Duração reduzida do sono medeia a diminuição da disponibilidade do receptor estriado D2 / D3 em usuários de cocaína
Transl. Psiquiatria, 6 (2016), p. e752
CrossRef

11.

Zhang et al., 2015
C. Zhang, NL Wei, Y. Wang, X. Wang, JG Zhang, K. Zhang
Estimulação cerebral profunda da membrana do nucleus accumbens induz efeitos anti-obesidade em ratos obesos com alteração da neurotransmissão da dopamina
Neurosci. Lett., 589 (2015), pp. 1 – 6
Artigo

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Citando artigos (2)

autor correspondente

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Publicado por Elsevier Inc.

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