Sistema Receptor CRF-CRF1 nos Núcleos Central e Basolateral da Amígdala Diferencia Diferentemente a Alimentação Excessiva de Comida Palatável (2013)

Neuropsychopharmacology. 2013 Nov; 38 (12): 2456 – 2466.

Publicado online 2013 Jul 10. Publicado antecipadamente online 2013 Jun 10. doi: 10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Attilio Iemolo,¹ Angelo Blasio,¹ Stephen A St Cyr,¹ Fanny Jiang,¹ Arroz Kenner C,² Valentina Sabino,¹ e Pietro Cottone^1,^*

Sumário

Alimentos altamente palatáveis e dieta são os principais fatores que contribuem para o desenvolvimento da compulsão alimentar na obesidade e nos transtornos alimentares. Demonstramos anteriormente que o acesso intermitente a alimentos palatáveis resulta em fator de liberação de corticotropina-1 (CRF₁) comportamentos reversíveis pelo antagonista do receptor, que incluem ingestão excessiva de alimentos saborosos, hipofagia de ração regular e comportamento semelhante à ansiedade. No entanto, as áreas do cérebro que medeiam esses efeitos ainda são desconhecidas. Ratos Wistar machos foram alimentados continuamente por 7 dias / semana (Chow / Chow grupo), ou alimentados com ração intermitentemente 5 dias / semana, seguido de uma dieta saborosa de sacarose 2 dias / semana (Comida / Palatável grupo). Após a alternância crônica da dieta, os efeitos da microinfusão do CRF₁ O antagonista do receptor R121919 (0, 0.5, XUMUMX / lado) no núcleo central da amígdala (CEA), o núcleo basolateral da amígdala (BIA) ou o núcleo do leito da estria terminal (BNST) foram avaliados quanto à ingestão excessiva da dieta palatável, hipopatía da comida e comportamento semelhante à ansiedade. Além disso, a imunomarcação de CRF foi avaliada no cérebro de ratos submetidos a dieta. Intra-CeA R1.5 bloqueou a ingestão excessiva de alimentos saborosos e o comportamento semelhante à ansiedade em Comida / Palatável ratos, sem afetar a hipofagia da comida. Por outro lado, intra-BlA R121919 reduziu a hipopa- Comida / Palatável ratos, sem afectar a ingestão excessiva de comida saborosa ou o comportamento semelhante à ansiedade. O tratamento com Intra-BNST não teve efeito. Os tratamentos não modificaram o comportamento dos Chow / Chow ratos. A imuno-histoquímica revelou um aumento do número de células positivas para o CRF em CeA - mas não em BlA ou BNST - de Comida / Palatável ratos, durante a retirada e acesso renovado à dieta palatável, em comparação com os controles. Esses resultados fornecem evidências funcionais de que o CRF-CRF₁ O sistema receptor em CeA e BlA tem um papel diferencial na mediação de comportamentos desadaptativos resultantes de ciclos de dieta saborosos.

Palavras-chave: fator de liberação de corticotropina, BNST, vício, ansiedade, hipofagia, rato

INTRODUÇÃO

Alimentos altamente palatáveis (por exemplo, alimentos ricos em açúcares e / ou gorduras) são considerados os principais fatores que contribuem para o surgimento da compulsão alimentar em certas formas de obesidade e distúrbios alimentares (Corwin, 2006; Yach et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Existem muitas analogias entre dependência de drogas e ingestão excessiva de alimentos altamente palatáveis, incluindo perda de controle sobre drogas / alimentos, incapacidade de terminar o uso / comer em excesso, apesar de consequências negativas, angústia e disforia ao tentar se abster de drogas / alimentos (Parylak et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Volkow e O'Brien, 2007). Estes sintomas comuns têm sido propostos para surgir a partir de disfunções de circuitos cerebrais, que se sobrepõem na dependência de drogas e compulsivo comendo.

Fator de liberação de corticotropina tipo 1 (CRF₁) os antagonistas dos receptores têm sido propostos como novos alvos terapêuticos para os distúrbios de dependência, devido à sua capacidade de reduzir os efeitos motivacionais da abstinência (Logrip et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). O CRF é um mediador crítico de respostas endócrinas, simpáticas e comportamentais ao estresse (Bakshi e Kalin, 2000; Vale et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). O CRF no núcleo paraventricular do hipotálamo controla a resposta hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) ao estresse, enquanto os efeitos comportamentais do CRF são independentes de HPA e mediados por regiões cerebrais extra-hipotalâmicas (Koob e Heinrichs, 1999). O CRF-CRF extra-hipotalâmico₁ O sistema receptor é recrutado em dependência de todas as drogas conhecidas de abuso através de ciclos de intoxicação / abstinência, e esta hiperativação é considerada um elemento comum, promovendo a ingestão excessiva de drogas através de um mecanismo negativamente reforçado (isto é, ingestão compulsiva de drogas produzida pela remoção de estado emocional negativo induzido; Heilig e Koob, 2007; Koob, 2010; Shalev et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.).

Embora as semelhanças entre drogas de abuso e alimentos tenham sido amplamente estudadas em relação às suas propriedades reforçadoras positivas (ou seja, a ingestão excessiva de alimentos produzida pela obtenção de um efeito agradável; Aveia et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Blasio et al2013b; Corwin e Grigson, 2009; Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Hagan et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.), a hipótese de que a ingestão excessiva de alimentos pode resultar como uma forma de 'automedicação' para aliviar o estado emocional negativo associado à abstinência de alimentos altamente palatáveis é relativamente pouco estudada (Bale, 2005; Cottone et al2009a; Shalev et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.).

Mostramos anteriormente que a retirada do acesso crônico e intermitente a alimentos altamente palatáveis provoca o recrutamento do sistema de IRC extra-hipotalâmico e o surgimento de IRC.₁ comportamentos desadaptativos dependentes do receptor, que incluem ingestão excessiva de alimentos após acesso renovado à dieta altamente palatável, hipofagia da dieta de outra maneira aceitável, e comportamento semelhante à ansiedade durante a abstinência (Cottone et al2009a).

Entretanto, evidências funcionais diretas sobre qual área do cérebro é responsável pelo CRF₁ adaptações comportamentais dependentes do receptor induzidas por ciclismo de dieta palatável estão faltando. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar se o antagonismo específico do sítio₁ os receptores no núcleo central da amígdala (CeA), o núcleo basolateral da amígdala (BlA) ou o núcleo do leito da estria terminal (BNST) foram capazes de bloquear a ingestão excessiva de alimentos altamente palatáveis, a hipofagia induzida por abstinência do comida e comportamento semelhante à ansiedade. Além disso, este estudo teve como objetivo determinar se a expressão de CRF em CeA, BlA e BNST foi aumentada em ratos submetidos a dieta em comparação com controles, usando imuno-histoquímica. Embora tenhamos mostrado anteriormente que a retirada de alimentos palatáveis está associada a um aumento da expressão de CRF em CeA, como BlA e BNST são afetados pelo ciclo da dieta é atualmente desconhecido.

MATERIAIS E MÉTODOS

Assuntos

Ratos Wistar machos (n= 140, dos quais ratos 33 para experiências CeA, ratos 46 para experiências BlA, ratos 39 para experiências com BNST e ratos 22 para a experiência imuno-histoquímica; Tabela suplementar 1), pesando 180 – 230g e 41 – 47 dias antes da chegada (Charles River, Wilmington, MA, EUA), foram alojados individualmente em gaiolas de plástico com tampo de arame (27 × 48 × 20 cm) em uma luz reversa 12-h ciclo (desligado em 1100 horas), em um viveiro aprovado pela AAALAC (60%) e temperatura controlada (22 ° C). Ratos tinham ad libitum acesso a ração à base de milho (Harlan Teklad LM-485 Dieta 7012; 65% kcal carboidrato, 13% gordura, 21% proteína, energia metabolizável 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, EUA) e água, salvo indicação em contrário . Os procedimentos utilizados neste estudo aderiram ao Guia do Instituto Nacional de Saúde para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório (NIH 85-23, 1996 revisado) e os Princípios de Cuidados com Animais de Laboratório, e foram aprovados pelo Boston University Medical Campus Institutional. Comitê de Cuidado e Uso de Animais.

Drogas

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropil-pirazolo [2,3-a] pirimidina-7-amina, NBI 30775) foi sintetizada como descrito Chen et al (2004). R121919 é um CRF potente, não peptídico e de alta afinidade₁ antagonista do receptor (K_i= 2 – 5 nM), que mostra mais de 1000 atividade mais fraca no CRF₂ receptor, proteína de ligação ao CRF ou 70, outros tipos de receptores (Grigoriadis et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). O R121919 foi solubilizado utilizando uma mistura 18: 1: 1 de solução salina: etanol: cremophor.

Testes Comportamentais

Acesso à alternância de dieta palatável ad libitum

O acesso ao ad libitum alternância de dieta palatável foi realizada como descrito anteriormente (Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works., 2009a, 2009b; Iemolo et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Resumidamente, após a aclimatação, os ratos foram divididos em dois grupos pareados para ingestão de alimentos, peso corporal e eficiência alimentar dos últimos dias 3-4. Um grupo foi então fornecido com ad libitum acesso a uma dieta (Chow) por 7 dias por semana (Chow / Chow, o grupo de controlo deste estudo), enquanto um segundo grupo recebeu acesso gratuito à comida por 5 dias por semana, seguido de 2 dias de ad libitum a uma dieta rica em sacarose, altamente palatável e com sabor de chocolate (Palatável; Comida / Palatável grupo). Todos os testes comportamentais foram realizados em ratos que haviam sido submetidos a ciclos de dieta por pelo menos 7 semanas. A dieta 'ração' era a comida à base de milho descrita acima de Harlan, enquanto a dieta palatável era nutricionalmente completa, com sabor de chocolate e rica em sacarose (50% kcal), dieta baseada em AIN-76A que é comparável em macronutrientes proporções e densidade de energia para a dieta alimentar (fórmula 5TUL com sabor de chocolate: 66.7% de carboidratos kcal, 12.7% de gordura, 20.6% de proteína, energia metabolizável 344 kcal / 100 g (Dieta de teste, Richmond, IN, EUA) formulada como precisão de 45 mg pelotas de alimentos para aumentar sua preferência). Para resumir, os primeiros 5 dias (apenas ração) e os últimos 2 dias (ração ou saborosa de acordo com o grupo experimental) de cada semana são referidos em todos os experimentos como C e P fases. A dieta saborosa foi fornecida em alimentadores com GPF20 'J' (Ancare, Bellmore, NY, EUA). As dietas nunca estavam disponíveis simultaneamente.

Experimentos de ingestão de alimentos

Os ratos receberam alimentos pré-pesados em suas gaiolas em casa no início do ciclo escuro. Os tratamentos foram administrados em ratos que foram submetidos a um ciclo de dieta durante pelo menos 7 semanas após renovação do acesso à dieta palatável (C→P fase), ou à dieta da comida (P→C Estágio). R121919 foi microinfundido bilateralmente dentro do CeA, o BlA, ou o BNST (0, 0.5, 1.5 μg / lado, 0.5 μl / lado, 30-min tempo de pré-tratamento) usando delineamento quadrado latino-alvo aleatório.

Teste de caixa claro-escuro

Os ratos foram testados para 10 min em uma caixa retangular claro-escura (50 × 100 × 35 cm) na qual o compartimento de luz aversivo (50 × 70 × 35 cm) foi iluminado por uma luz 60 lux. O lado escuro (50 × 30 × 35 cm) tinha uma cobertura opaca e ∼0 lux de luz. Os dois compartimentos eram conectados por uma porta aberta, o que permitia que os sujeitos se movessem livremente entre os dois. Os testes ocorreram após, pelo menos, 7 semanas de alternância de dieta, 5-9 h após a mudança da dieta palatável para a dieta da dieta (P→C Estágio); este ponto temporal assegura a ocorrência de comportamento semelhante à ansiedade induzido pela retirada de alimentos Comida / Palatável ratos (Cottone et al2009a, 2009b). Os ratos foram mantidos na ante-sala silenciosa e escura por pelo menos 2 h antes do teste. O ruído branco estava presente durante toda a habituação e testes. No dia do teste, os ratos foram microinfundidos bilateralmente com R121919 dentro do CeA, o BlA ou o BNST (0, 0.5 e 1.5 μg / lado 0.5 μl / lado) 30 min antes de serem colocados no compartimento escuro de frente para a porta e comportamento foi gravado em vídeo para posterior pontuação. Os tratamentos foram dados usando um desenho entre sujeitos. O tempo gasto no compartimento aberto foi medido como um índice de comportamento semelhante à ansiedade. O aparelho foi limpo com água e seco após cada sujeito.

Cirurgias Intracranianas, Procedimento de Microinfusão e Colocação da Cânula

Cirurgias intracranianas

Os ratos foram implantados estereotaxicamente com cânulas intracranianas bilaterais, como descrito anteriormente (Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Iemolo et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Sabino et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.) Resumidamente, as cânulas guia de aço inoxidável (calibre 24, Plastics One, Roanoke, VA, EUA) foram baixadas bilateralmente 2.0 mm acima do CeA, BlA ou BNST. Quatro parafusos de joalheiro de aço inoxidável foram presos ao crânio do rato ao redor da cânula. Resina restauradora dentária preenchida (Henry Schein, Melville, NY, EUA) e cimento acrílico foram aplicados, formando um pedestal que ancorou firmemente a cânula. As coordenadas da cânula do bregma usadas para o CeA foram: AP +0.2, ML ± 4.2, DV -7 (do crânio) com a barra incisiva colocada 5.0 mm acima da linha interaural, de acordo com o atlas de Pellegrino (1979). As coordenadas da cânula utilizadas para o BlA foram: AP −2.64, ML ± 4.8, DV − 6.5 (do crânio) com crânio plano, de acordo com Paxinos e Watson (2007). As coordenadas da cânula usadas para o BNST foram: AP −0.6, ML ± 3.5, DV − 4.8 (do crânio) com crânio plano e ângulo de inclinação de 14 °. Um estilete de aço inoxidável (Plastics One) manteve a patência da cânula. Após a cirurgia, os ratos foram autorizados a um período de recuperação de dia 7, durante o qual eles foram tratados diariamente.

Procedimento de microinfusão

A droga foi microinfundida no cérebro de ratos, como descrito anteriormente (Blasio et al2013b; Dore et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Para microinfusão intracraniana, o estilete simulado foi removido da cânula-guia e substituído por um injetor de aço inoxidável com calibre 31, projetando 2 mm além da ponta da cânula-guia; o injetor foi conectado via tubo PE 20 a uma micro-seringa Hamilton (Hamilton, Reno, Nevada) acionada por uma bomba de microinfusão multi-seringa (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, EUA). Microinfusões foram realizadas em 0.5 μl volume entregue em 2 min; os injetores foram deixados no local por um minuto adicional de 1 para minimizar o refluxo.

Colocação de cânula

A colocação da cânula foi verificada na conclusão de todos os testes (ver Figura 1). Os indivíduos foram anestesiados (isoflurano, 2-3% em oxigênio) e transcardially perfundidos com 4% paraformaldeído (PFA) gelada em água (pH 7.4) e microinfundidos com violeta de Cresyl (0.5 μl / side). Os cérebros foram então fixados durante a noite em 4% PFA e equilibrados em 30% de sacarose em PFA. Cortes coronais de 40 μm foram coletados usando um criostato (Thermo Scientific HM-525) e as colocações foram verificadas ao microscópio. Quarenta sujeitos (14 para CeA, 16 para BlA e 10 para BNST) foram excluídos da análise devido à colocação incorreta da cânula. Os dados de canais incorretos foram analisados para ajudar a interpretar a especificidade do site dos efeitos.

Figura 1

Desenho de fatias coronais de cérebro de ratos. Os pontos representam os locais de injeção no núcleo central da amígdala (CeA) (a), núcleo basolateral da amígdala (BlA) (b) e núcleo da estria terminal (BNST) (c) incluídos na análise de dados. ...

Imuno-histoquímica do CRF

Procedimento comportamental, perfusões e imunohistoquímica

Ratos (n= 22) foram submetidos a ciclos de dieta por 7 semanas, anestesiados e perfundidos 2-4 h após terem mudado da dieta apetecível para a dieta da dieta (P→C ou a partir da ração da dieta até a dieta palatável (C→P Estágio). Os ratos foram anestesiados e depois transcardiados por perfusão com solução salina + 2% (p / v) de nitrito de sódio (pH = 7.4) primeiro e com 4% paraformaldeído tamponado em Bórax (pH = 9.5) a seguir. Os ratos foram então decapitados e os cérebros foram imediatamente recolhidos, colocados em ∼20 ml de 4% PFA e armazenados numa solução de 30% de sacarose em 4% PFA a 4 ° C até à saturação.

Para a visualização do CRF, os cérebros foram cortados em seções coronais de 40 μm usando um criostato e posteriormente armazenados em um crioprotetor a -20 ° C. Cada sexta seção (240 μm à parte) de todo o CeA, BlA e BNST foi escolhida de maneira aleatória sistemática e processada para imunocitoquímica. As seções flutuantes foram lavadas em solução salina de tampão de fosfato de potássio (KPBS). Após a lavagem inicial, os cortes foram incubados em solução KPBS de peróxido de hidrogênio 0.3% por 30 min para bloquear as peroxidases endógenas. As secções foram então lavadas novamente e colocadas em solução de bloqueio (3% de soro de cabra normal, 0.25% de Triton X100 e 0.1% de albumina de soro bovino) por 2 h. As seções foram então transferidas para o anticorpo primário (diluição 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) em solução de bloqueio e incubadas por 72 h a 4 ° C. Após uma lavagem adicional, as seções foram incubadas em anticorpo secundário (diluição 1: 1000, anti-coelho biotinilado (BA-1000) Vector Laboratories, Burlingame, Califórnia) em solução de bloqueio por 2 h em temperatura ambiente. As seções foram lavadas e, em seguida, incubadas em solução de peroxidase ABC avidina-biotina (Vector Laboratories) em solução de bloqueio por 1 h. As seções foram então incubadas usando um kit de substrato de diaminobenzidina (Vector Laboratories) de acordo com as instruções do fabricante e uma vez que a reação estava completa, as seções foram enxaguadas em KPBS, montadas em lâminas e deixadas secar durante a noite. No dia seguinte, as lâminas foram desidratadas usando concentrações graduadas de álcool e cobertas com lamínula usando composto para montagem DPX (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, EUA).

Quantificação de corpos celulares CRF +

A quantificação dos corpos celulares CRF + foi realizada de acordo com a abordagem estereológica imparcial. A série de seções foi analisada para cada lote de coloração. As seções foram analisadas usando um microscópio BX-51 da Olympus equipado com uma câmera de vídeo ao vivo Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Canadá), um estágio motorizado de três eixos MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, EUA) e uma estação de trabalho para computadores pessoais. Todas as contagens de células foram feitas em lâminas codificadas por um investigador cego para as condições de tratamento. Cada região foi delineada virtualmente na imagem digitalizada de cada seção escolhida aleatoriamente usando o módulo de fluxo de trabalho do fracionador ótico do software Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, EUA). Todos os contornos foram desenhados com baixa ampliação usando uma objetiva Olympus PlanApo N 2X com abertura numérica 0.08 e contados usando uma objetiva Olympus UPlanFL N 40X com abertura numérica 0.75. O quadro de grade e o quadro de contagem foram definidos para 275 × 160 μm. Foi utilizada uma zona de guarda de 2 μm e uma altura de dissecção de 20 μm. As secções congeladas foram originalmente cortadas a uma espessura nominal de 40 μm. A imunocoloração e a montagem resultam em espessura de seção alterada, que foi medida em cada local de contagem. Uma espessura média da seção foi computada pelo software e usada para estimar o volume total da região da amostra e o número total de células CRF +.

Análise Estatística

Do aluno t-testes foram utilizados para analisar fatores com dois níveis. ANOVAs foram realizados para analisar fatores com mais de dois níveis. Após o efeito omnibus significativo de ANOVAs (p<0.05), LSD de Fisher post hoc testes de comparação foram usados. O teste de Dunnett foi usado para determinar se a ingestão normalizada de R121919 de Comida / Palatável ratos tratados com veículo Chow / Chowníveis alimentados. Os softwares / pacotes gráficos utilizados foram Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, EUA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, EUA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, EUA) e PASW. Estatística 18.0 (SPSS, Chicago, IL, EUA).

RESULTADOS

Efeitos da microinfusão de R121919 no CeA

Ingestão excessiva de comida saborosa

Para determinar se o CRF₁ os receptores no CeA medeiam a ingestão excessiva de alimentos palatáveis em ratos alimentados com dieta, nós microinfundimos o local especificamente o CRF seletivo₁ antagonista do receptor R121919 nesta área do cérebro e mediu a ingestão de alimentos no início do P Estágio. Como mostrado em Figura 2a, a ingestão de alimentos dietéticos palatáveis Comida / Palatável ratos foi duas vezes maior do que o controle alimentado com ração Chow / Chow ratos. Antagonismo do CeA CRF₁ receptores bloqueado totalmente este excessivo comer de comida saborosa em Comida / Palatável ratos, sem afetar a ingestão de alimentos em ratos-controle (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Comida / Palatável, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc comparação revelou que a dose mais elevada de R121919 (1.5 μg / lado) reduziu significativamente a ingestão de alimentos saborosos em comparação com o veículo em Comida / Palatável ratos. Ingestão de Comida / Palatável ratos após a microinfusão da dose de 1.5 μg / lado não diferiram significativamente da ingestão de Chow / Chow ratos. Confirmando a especificidade dos efeitos para o CRF₁ nos receptores de CeA, nenhum efeito foi observado na ingestão de alimentos com cânulas mal colocadas (Comida / Palatável, F (2, 2) = 4.32, NS).

Figura 2

Efeitos da microinfusão do fator de liberação seletivo de corticotropina-1 (CRF₁) antagonista do receptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / lado) no núcleo central da amígdala (CeA) na ingestão excessiva de alimentos saborosos, hipofagia de ingestão regular ...

Hipofagia da dieta regular da comida

Para determinar se o CRF₁ os receptores no CeA mediam a hipofagia da dieta da ração em ratos alimentados com dieta, microinfundimos o R121919 nessa área do cérebro e medimos a ingestão de alimentos no início da dieta. C Estágio. Como mostrado em Figura 2b, a ingestão de veículos tratados Comida / Palatável ratos foi ∼1 / 3 da ingestão de veículo tratado Chow / Chow ratos (hipofagia). O tratamento com R121919 não afectou a hipofagia da dieta normal em Comida / Palatável ratos (Comida / Palatável, F (2, 12) = 0.14, NS). Confirmando os resultados obtidos em P Na fase inicial, a microinfusão R121919 no CeA não afetou a ingestão de ração no controle Chow / Chow ratos (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Comportamento semelhante à ansiedade induzida por abstinência aguda

Para determinar se o CeA CRF₁ os receptores mediam o estado emocional negativo induzido pela retirada do alimento palatável em ratos ciclados, microinfundimos o local especificamente R121919 nesta área do cérebro e medimos o comportamento parecido com a ansiedade usando o teste da caixa claro-escuro 5 h no C Estágio. Como mostrado em Figura 2cos ratos, retirados de forma aguda do acesso crônico e intermitente à dieta altamente palatável, mostraram uma diminuição significativa no tempo gasto no compartimento de luz da caixa claro-escuro. A microinfusão de 1.5 μg / lado de R121919 no CeA, a dose que efetivamente reduziu o consumo excessivo de alimentos saborosos, bloqueou completamente o comportamento semelhante à ansiedade, aumentando o tempo gasto na área de luz da caixa em Comida / Palatável ratos, sem afetar o comportamento em Chow / Chow ratos (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Confirmando a especificidade dos efeitos para CRF₁ Nos receptores de CeA, nenhum efeito foi observado na ingestão de alimentos com cânulas deslocadas (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Efeitos da Microinfusão de R121919 no BlA

Ingestão excessiva de comida saborosa

Para determinar se o BlA CRF₁ os receptores mediam a ingestão excessiva de alimentos palatáveis em ratos com dieta, nós microinfusamos o local especificamente R121919 nesta área do cérebro e medimos a ingestão de alimentos no início do P Estágio. Ao contrário do que foi observado após a administração de R1219191 no CeA, como mostrado Figura 3a microinfusão bilateral do CRF seletivo₁ antagonista do receptor no BlA não afetou significativamente a ingestão de alimentos Comida / Palatável ratos (Comida / Palatável, F (2, 26) = 1.56, NS). Da mesma forma, o consumo regular de comida Chow / Chow ratos não foi afetado pela microinfusão R121919 (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Figura 3

Efeitos da microinfusão do fator de liberação seletivo de corticotropina-1 (CRF₁) antagonista do receptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / lado) no núcleo basolateral da amígdala (BlA) na ingestão excessiva de alimentos saborosos, hipofagia ...

Hipofagia da dieta regular da comida

Para determinar se o CRF₁ os receptores no BlA mediam a hipofagia da ração em ratos ciclados, microinfundimos o R121919 nessa área do cérebro e medimos a ingestão de alimentos no início do C Estágio. Como mostrado em Figura 3b, um aumento significativo na ingestão regular de ração foi observado após a microinfusão do CRF₁ antagonista do receptor no BlA de Comida / Palatável ratos (Comida / Palatável, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). De fato, a dose mais alta (1.5 μg) de R121919 microinfundido no BlA durante C Esta fase aumentou significativamente o consumo da ração normal por 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) por cento quando comparada com a Chow / Chow ratos. R121919 atenuou, mas não bloqueou completamente, a hipofagia induzida por abstinência na dose mais elevada injetada. Confirmando os dados obtidos em P microinfusão R121919 não afetou a ingestão regular de ração em Chow / Chow ratos (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). Confirmando a especificidade dos efeitos para o CRF₁ Na BSA, nenhum efeito foi observado na ingestão de alimentos com cânulas mal colocadas (Comida / Palatável, F (2, 8) = 0.50, NS).

Comportamento semelhante à ansiedade induzida por abstinência aguda

Para determinar se o BlA CRF₁ os receptores mediam o estado emocional negativo induzido pela retirada aguda do alimento palatável em ratos ciclados, microinfundimos o local especificamente R121919 nesta área do cérebro e medimos o comportamento semelhante à ansiedade 5 h no C Estágio. Como mostrado em Figura 3cComida saborosa retirada Comida / Palatável ratos gastaram menos tempo no compartimento de luz em comparação com Chow / Chow ratos (DIETA: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, microinfundido no BlA, não afetou significativamente o tempo gasto na área clara (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

Efeitos da microinfusão de R121919 no BNST

Ingestão excessiva de comida saborosa

Para determinar se o BNST CRF₁ os receptores mediam a ingestão excessiva de alimentos apetitosos em ratos submetidos a dieta de dieta, o R121919 foi especificamente microinfundido nesta área do cérebro e a ingestão de alimentos foi medida no início do P Estágio. Como mostrado em Figura 4bmicroinfusão bilateral do CRF seletivo₁ o antagonista do receptor no NLET não afetou significativamente a ingestão de alimentos Comida / Palatável ratos (Comida / Palatável, F (2, 18) = 0.33, NS). Da mesma forma, o consumo regular de comida Chow / Chow ratos não foi afetado pela microinfusão R121919 (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Figura 4

Efeitos da microinfusão do fator de liberação seletivo de corticotropina-1 (CRF₁) antagonista do receptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / lado) no núcleo do leito da estria terminal (BNST) na ingestão excessiva de alimentos saborosos, hipofagia ...

Hipofagia da dieta regular da comida

Para determinar se o BNST CRF₁ os receptores mediam a hipofagia da dieta da ração em ratos ciclados, microinfundimos R121919 nessa área do cérebro e medimos a ingestão de alimentos no início da dieta. C Estágio. Como mostrado em Figura 4a, Microinfusão R121919 não afetou a ingestão regular de ração em Chow / Chow ratos (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Do mesmo modo, o tratamento com R121919 não afectou a hipofagia da comida normal Comida / Palatável ratos (Comida / Palatável, F (2, 20) = 0.27, NS).

Comportamento semelhante à ansiedade induzida por abstinência aguda

Para determinar se o BNST CRF₁ os receptores mediam o estado emocional negativo induzido pela retirada aguda do alimento palatável em ratos ciclados, nós microinfusamos o local especificamente R121919 nesta área do cérebro e medimos o comportamento semelhante à ansiedade 5 h após a mudança de P→C Estágio. Como mostrado em Figura 4cComida saborosa retirada Comida / Palatável ratos gastaram menos tempo no compartimento de luz em comparação com o controle Chow / Chow ratos (DIETA: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, microinfundido bilateralmente na dose de 1.5 μg / lado no BNST não afetou significativamente o tempo gasto na área clara (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

Imuno-histoquímica do CRF

Figura 5 ilustra micrografias representativas de células CRF + no CeA, BlA e BNST em Chow / Chow e Comida / Palatável ratos, seguindo a ad libitum procedimento de alternância de dieta palatável. A análise da imunorreatividade do CRF do CeA revelou que uma diferença significativa entre Comida / Palatável e Chow / Chow ratos durante o C e P fase (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Nenhuma diferença estatisticamente significativa entre os grupos foi observada em qualquer BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) ou BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Figura 5

Micrografias representativas da imunorreatividade do fator de liberação de corticotropina (CRF) no núcleo central da amígdala (CeA) (a – d), núcleo basolateral da amígdala (BlA) (e – h) e núcleo do leito da estria terminal (BNST) ) (i-l) ...

DISCUSSÃO

Este estudo foi concebido para identificar funcionalmente o local do cérebro responsável pela ingestão excessiva mediada por CRF de alimentos altamente palatáveis em ratos sob regime de alternância de dieta. Nossas descobertas provam um papel importante para o CeA na mediação da ingestão excessiva de alimentos altamente palatáveis. Além disso, demonstramos que o sistema de CRF no BlA, diferentemente do CeA, tem um papel no processo de desvalorização que ocorre ao reduzir a magnitude da recompensa alimentar.

Nós mostramos anteriormente que ciclos repetidos de acesso e abstinência aguda a partir de uma dieta açucarada e altamente palatável levam à ingestão excessiva de alimentos saborosos, bem como à hipofagia aguda dependente de abstinência da dieta regular e comportamento semelhante à ansiedade (Blasio et al2013a; Cottone et al2009a, 2009b). A alimentação excessiva observada aqui é hipoteticamente impulsionada pelo estado emocional negativo induzido por repetidos episódios de abstinência aguda de alimentos altamente palatáveis por meio de um CRF-CRF extra-hipotalâmico.₁ mecanismo de receptor mediado pelo sistema, que se assemelha ao processo do tipo 'kindling' subjacente aos transtornos aditivos (Breese et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Cottone et al2009a; Koob, 2008; Parylak et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.).

Os resultados deste estudo demonstram que o CRF₁ Os receptores de CeA e BlA mediam diferencialmente as adaptações de alimentação e o comportamento semelhante à ansiedade de ratos cronicamente alimentados com dieta ciclada. Administração do CRF seletivo₁ antagonista do receptor no CeA bloqueia tanto o comportamento excessivo de comer quanto o de ansiedade Comida / Palatável ratos, sem afetar a hipofagia da dieta regular e pouco aceita. Curiosamente, a administração de R121919 na BSA atenuou a hipofagia da dieta menos apetecível (isto é, aumentou a ingestão regular de ração) Comida / Palatável ratos, sem afetar a alimentação excessiva ou o comportamento de ansiedade. Quando microinfundido no BNST, o R121919 não afetou nenhuma das variáveis medidas em Comida / Palatável ratos (ingestão excessiva da dieta altamente palatável, ingestão da dieta regular da dieta e o comportamento semelhante à ansiedade induzida por abstinência aguda). Os efeitos farmacológicos observados foram seletivos para Comida / Palatável ratos porque R121919, microinfundido no CeA, BlA ou BNST de Chow / Chow ratos de controlo, não exerceram efeito. Portanto, o CRF-CRF₁ O sistema receptor do CeA e do BlA parece mediar diferencialmente os resultados comportamentais resultantes da ciclagem crónica da dieta palatável. Por outro lado, o CRF-CRF₁ O sistema receptor do BNST não parece estar envolvido nas adaptações comportamentais induzidas pela alternância de dieta palatável.

Nossos achados comportamentais e farmacológicos foram apoiados pela observação de que a imunorreatividade do CRF dentro do CeA de Comida / Palatável ratos foi significativamente aumentada em comparação Chow / Chow ratos de controlo, durante a retirada e após o acesso renovado à dieta altamente palatável (Cottone et al2009a). Curiosamente, nenhuma diferença significativa na imunorreatividade do CRF entre os grupos foi observada dentro do BlA ou do BNST. A maior imunorreatividade do CRF observada no CeA de Comida / Palatável ratos é consistente com o nosso achado anterior de que a retirada aguda da dieta palatável está associada a uma liberação aumentada de CRF no CeA (Cottone et al2009a). No entanto, ao contrário do que foi mostrado anteriormente, a renovação do acesso à dieta palatável não causou um retorno da expressão do CRF no CeA para controlar os níveis. A discrepância entre os resultados obtidos aqui e a observação anterior pode estar relacionada aos diferentes momentos da coleção cerebral e às diferentes resoluções anatômicas das técnicas adotadas para mensurar a expressão do CRF. No entanto, o aumento observado na expressão do CRF no CeA durante a abstinência e após o acesso renovado à dieta palatável é consistente com os efeitos seletivos do bloqueio do comportamento semelhante à ansiedade (durante a abstinência) e a ingestão excessiva (acesso renovado) em Comida / Palatável ratos. A aparente inconsistência entre os dois estudos pode, portanto, ser coletivamente interpretada da seguinte forma: durante a abstinência aguda de alimentos palatáveis, a expressão de CRF aumenta no CeA de ratos ciclados em relação aos controles e é responsável pelo surgimento de um afeto negativo. A expressão do CeA CRF permanece alterada até as primeiras horas de acesso altamente palatável, induzindo alimentação excessiva. Após o consumo excessivo de alimentos palatáveis, no entanto, a CRF retorna aos níveis de controle (Cottone et al2009a).

Os resultados comportamentais, farmacológicos e moleculares apresentados apoiam a hipótese de que o CRF-CRF₁ O sistema receptor do CeA tem um papel importante na mediação do estado afetivo negativo e da ingestão excessiva de alimentos palatáveis em ratos submetidos à dieta, similarmente ao que tem sido extensamente demonstrado para a dependência de álcool e drogas (Koob, 2010). De fato, ratos dependentes de etanol exibem aumento da liberação extracelular de CRF no CeA durante a retirada e a administração de um antagonista do receptor de CRF no CeA é capaz de bloquear a auto-administração aumentada de etanol durante a retirada (Medo et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Merlo Pich et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Analogamente, os animais dependentes de opiáceos apresentam aumento da expressão de CRF no CeA durante a retirada (Maio et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.) e o bloqueio dos receptores de CRF no CeA, mas não o BNST, reduz os sinais comportamentais de abstinência (Henry et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; McNally e Akil, 2002). Um papel fundamental para o CRF-CRF₁ sistema no CeA também foi demonstrado na dependência de nicotina. De fato, a retirada de nicotina precipitada por mecamilamina está associada a uma hiperativação do CRF-CRF₁ sistema receptor em CeA (George et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.), e intra-CeA, mas não intra-blA, microinfusão de um FRC₁ o antagonista do receptor reduz as elevações dependentes da abstinência de nicotina no limiar de recompensa do cérebro (Bruijnzeel et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Em ratos dependentes de canabinóides, a privação precipitada está associada a uma elevação acentuada na concentração de CRF extracelular no CeA (Rodriguez de Fonseca et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Em conjunto, esta evidência suporta fortemente a hipótese de que o CRF-CRF₁ O sistema receptor no CeA é um mediador chave do afeto negativo induzido por abstinência aguda, juntamente com a ingestão excessiva de drogas e álcool durante a dependência. Nossos resultados expandem esse conhecimento ao consumo excessivo de alimentos altamente palatáveis, sugerindo que ocorrem neuroadaptações análogas.

Os resultados deste estudo mostram que a hipofagia palatável dependente de abstinência alimentar da dieta menos apetitosa é atenuada por microinfusão dentro do BlA do CRF seletivo₁ antagonista do receptor, enquanto a alimentação excessiva e o comportamento semelhante à ansiedade não foram afetados pelo tratamento com drogas intra-BlA. O envolvimento diferencial do BlA CRF – CRF₁ sistema receptor nos resultados do ciclo da dieta sugere que a hipofagia da ração pode representar um processo comportamental independente do comportamento semelhante à ansiedade. Pelo contrário, estes resultados são consistentes com a hipótese de que o BlA medeia aspectos sensoriais e de incentivo de eventos motivacionalmente salientes. De fato, existem evidências consideráveis de que a ABA é criticamente importante na mediação de processos de desvalorização e respostas aversivas à redução de recompensa (isto é, efeito Crespi, contraste negativo sucessivo, desvalorização de recompensa e assim por diante; Hatfield et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Salinas et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Wellman et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.) e, portanto, a hipofagia resultante da mudança da dieta altamente palatável para a dieta menos apetecível pode representar um processo de desvalorização hedônica, em vez de um mecanismo dependente da homeostase energética (independente da ingestão energética anterior ou ganho de peso corporal). ; Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works., 2009b). Bloqueio do CRF₁ Portanto, sugere-se que os receptores dentro do BlA reduzam a hipofagia da comida (isto é, aumentem a ingestão de ração) atenuando o processo de desvalorização que ocorre quando se muda do alimento altamente palatável para o alimento menos apetecível. Relevante para este contexto é também a aparente inconsistência entre os resultados moleculares e comportamentais / farmacológicos obtidos no BlA. Embora o CRF₁ o antagonista do receptor foi capaz de reduzir a magnitude da hipofagia da comida quando injetado dentro do BlA, não foram observadas diferenças significativas na imunorreatividade do CRF nessa área quando comparados ratos controle e com dieta. Esta aparente discrepância pode ser explicada considerando que os processos de desvalorização dependentes de BlA de recompensas alternativas ocorrem fisiologicamente e têm um significado evolutivo importante na seleção de alimentos que produz o maior valor de recompensa / energia (Murray et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Como tal, é discutível que a mediação destes processos no BlA não requer neuroadaptações no sistema de CRF (similar àquelas observadas no CeA). Em apoio a essa hipótese, enquanto a alimentação excessiva exige o desenvolvimento de ciclos crônicos de dieta, a hipofagia da ração alternativa menos preferida ocorre após a primeira mudança da dieta altamente palatável para a ração normal (Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.). Além disso, é importante enfatizar que, com base nos resultados obtidos pela injeção do antagonista do receptor CRF1 no BlA e CeA, o CRF₁ A hipofagia dependente do receptor observada aqui parece ser um processo comportamental diferente da anedonia observada na abstinência de drogas. No entanto, a retirada aguda do acesso intermitente a alimentos palatáveis demonstrou induzir outras respostas do tipo hipo-hídricas, como o aumento da imobilidade no teste de nado forçado e a diminuição da resposta em um programa progressivo de taxa de reforço (Cottone et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Iemolo et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.).

Vale ressaltar que, embora Comida / Palatável ratos foram cronicamente dieta cycled, as alterações comportamentais e neuroquímicas mostradas aqui ocorrem durante uma retirada aguda, em vez de crônica, de dieta palatável. Enfatizar esse aspecto é particularmente relevante, pois na pesquisa da dependência há diferenças profundas nas conseqüências comportamentais, farmacológicas e neuroquímicas vs prolongada abstinência foram observadas (Heilig et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.; Koob e Le Moal, 2008). Estudos futuros serão valiosos para determinar como a retirada prolongada pode influenciar os resultados do ciclo da dieta.

Um ponto relevante de discussão é se o comportamento de ingestão excessiva de alimentos palatáveis que observamos no contexto desse modelo animal pode ser considerado 'compulsivo'. Na pesquisa pré-clínica do vício, o termo 'compulsivo' tem sido amplamente utilizado para descrever a ingestão excessiva de drogas durante a abstinência, que é impulsionada por um estado afetivo negativo e é aliviada ao renovar o acesso à droga (Ahmed e Koob, 2005; Koob e Le Moal, 2005) Esta aceitação do termo 'compulsivo' é baseada no quadro conceitual de que os transtornos compulsivos são caracterizados por ansiedade e estresse antes de cometer um comportamento compulsivo e alívio do estresse pela realização do comportamento compulsivo (Koob, 2009; Koob e Volkow, 2010) No contexto do modelo animal usado aqui, o comportamento alimentar excessivo pode ser interpretado como uma forma de comportamento 'compulsivo', dada a evidência publicada anteriormente de que ratos com acesso intermitente à dieta palatável apresentam um estado emocional negativo durante a abstinência de alimentos palatáveis, caracterizado por comportamentos semelhantes aos de ansiedade e depressivos, que são aliviados ao renovar o acesso (Cottone et al2009a, 2009b; Iemolo et albordados escolares americanos dos séculos XVIII, XIX e XX, bandeiras regimentais da Guerra Civil e bandeiras e estandartes de campanhas políticas do século XIX. Virginia é membro da Art Conservators Alliance e Fellow do American Institute for Conservation of Historic and Artistic Works.).

Em resumo, os resultados deste estudo fornecem evidências funcionais críticas de que o CRF-CRF₁ sistema receptor do CeA e o BlA tem um papel diferencial na mediação de comportamentos desadaptativos resultantes do acesso intermitente a alimentos palatáveis. No CeA, o CRF-CRF₁ O sistema receptor é um mediador chave da ingestão excessiva de alimentos saborosos e do afeto negativo dependente de abstinência, enquanto no BlA ele medeia as respostas aversivas dos sujeitos eliciadas pela redução da recompensa.

FINANCIAMENTO E DIVULGAÇÃO

Os autores declaram não haver conflito de interesses.

Agradecimentos

Agradecemos a Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak pela assistência técnica e Tamara Zeric pela assistência técnica e editorial. Agradecemos também a Elena F Crawford por sugestões úteis relacionadas à imunohistoquímica para CRF. Esta publicação foi possível graças aos números de concessão DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 e AA016731, do Instituto Nacional de Abuso de Drogas (NIDA), do Instituto Nacional de Saúde Mental (NIMH) e do Instituto Nacional de Abuso de Álcool e Alcoolismo ( NIAAA), pelo Peter Paul Career Development Professorship (PC) e pelo Programa de Oportunidades de Pesquisa de Graduação da Universidade de Boston (UROP). Esta pesquisa também foi apoiada pelos NIH Intramural Research Programs do National Institute on Drug Abuse, e do National Institute of Alcohol Abuse and Alcoholism, NIH, DHHS. Seu conteúdo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente a opinião oficial do National Institutes of Health.

Notas de rodapé

Informação Suplementar acompanha o artigo no site da Neuropsicofarmacologia (http://www.nature.com/npp)

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