A doçura intensa supera a recompensa de cocaína (2007)

comentários: Os ratos preferiram a doçura intensa de açúcar e sacarina em vez de cocaína. Essa preferência continuou mesmo quando a dose de cocaína foi aumentada e quando os ratos tiveram que trabalhar mais para receber sua doce recompensa. O fato é que os ratos preferiram um reforçador natural (açúcar) a um medicamento viciante. Pornografia na Internet é um substituto superestimulante para um reforçador natural (sexo real), um pouco como a sacarina é um substituto para o açúcar.

RESUMO

Contexto

Açúcares refinados (por exemplo, sacarose, frutose) estavam ausentes na dieta da maioria das pessoas até muito recentemente na história da humanidade. Hoje, o consumo excessivo de dietas ricas em açúcar contribui junto com outros fatores para impulsionar a atual epidemia de obesidade. O consumo excessivo de alimentos ou bebidas com alto teor de açúcar é inicialmente motivado pelo prazer do sabor adocicado e é frequentemente comparado ao vício em drogas. Embora existam muitas semelhanças biológicas entre dietas adoçadas e drogas de abuso, o potencial aditivo do primeiro em relação ao último é atualmente desconhecido.

Metodologia / Principais descobertas

Aqui relatamos que quando os ratos foram autorizados a escolher exclusivamente entre água adoçada com sacarina - um adoçante livre de calorias intensas - e cocaína intravenosa - uma substância altamente viciante e prejudicial - a grande maioria dos animais (94%) preferiu o sabor adocicado. de sacarina. A preferência pela sacarina não foi atribuída à sua capacidade não natural de induzir a doçura sem calorias, porque a mesma preferência também foi observada com a sacarose, um açúcar natural. Finalmente, a preferência pela sacarina não foi superável pelo aumento das doses de cocaína e foi observada apesar da intoxicação por cocaína, sensibilização ou aumento da ingestão - sendo esta última uma característica da dependência de drogas.

Conclusões

Nossas descobertas demonstram claramente que a doçura intensa pode superar a recompensa da cocaína, mesmo em indivíduos sensíveis e sensibilizados por drogas. Nós especulamos que o potencial aditivo de doçura intensa resulta de uma hipersensibilidade inata aos saborizantes doces. Na maioria dos mamíferos, incluindo ratos e humanos, os receptores doces evoluíram em ambientes ancestrais pobres em açúcares e, portanto, não estão adaptados a altas concentrações de saborizantes doces. A estimulação supranormal desses receptores por dietas ricas em açúcar, como as hoje amplamente disponíveis nas sociedades modernas, geraria um sinal de recompensa supranormal no cérebro, com o potencial de anular os mecanismos de autocontrole e, assim, levar ao vício.

Financiamento: Este trabalho foi financiado por doações da Université Victor-Segalen Bordeaux 2, do Conselho Francês de Pesquisa (CNRS), do Conselho Regional Aquitânia, da Agência Nacional de Pesquisa (ANR) e da Fundação para a Pesquisa Médica (FRM).

Editor acadêmico: Bernhard Baune, Universidade James Cook, Austrália

Citação: Lenoir M, Serre F, Cantina L, Ahmed SH (2007) A doçura intensa supera a recompensa de cocaína. PLoS ONE 2 (8): e698. doi: 10.1371 / journal.pone.0000698

A percepção do paladar doce é uma capacidade inata que depende de dois receptores de subunidades da proteína G acoplados, T1R2 e T1R3, localizados na língua [1], [2]. A estimulação desses receptores por dietas ricas em saborizantes doces, como, por exemplo, bebidas açucaradas (refrigerantes, refrigerantes, bebidas de frutas), gera uma sensação que a maioria dos humanos e outros mamíferos, incluindo roedores, acham intensamente recompensadora [3 ] - [6]. Uma vez reservado para uma pequena elite, o consumo de dietas altamente adoçadas é agora altamente prevalente em países desenvolvidos e está aumentando em outros lugares [7], [8]. Embora difíceis de estimar, as sensações doces evocadas por alimentos e bebidas açucarados são provavelmente um dos prazeres sensoriais mais precoces, frequentes e intensos dos seres humanos modernos [7], [9]. No entanto, a atual busca de sensações doces excede em muito as necessidades metabólicas e é pensado para contribuir, juntamente com vários outros fatores [10] - [13], para conduzir a atual epidemia de obesidade [7], [14].

O consumo excessivo passivo de dietas adoçadas com açúcar tem sido freqüentemente comparado à dependência de drogas, embora esse paralelo tenha se baseado, até muito recentemente, em evidências anedóticas do que em bases científicas sólidas. Mais recentemente, evidências crescentes de pesquisas experimentais em animais, especialmente ratos, desenterraram profundas semelhanças entre o consumo excessivo de açúcares e a dependência de drogas [15] - [17]. Primeiro, ambos os saborizantes [18], [19] e drogas de abuso [20], [21] estimulam a sinalização de dopamina no estriado ventral, uma via de sinalização cerebral envolvida criticamente no processamento de recompensas e aprendizagem [22], [23]. Em segundo lugar, tanto a tolerância cruzada [24], [25] e dependência cruzada [26] - [28] foram observados entre açúcares e drogas de abuso. Por exemplo, animais com uma longa história de consumo de sacarose tornam-se tolerantes aos efeitos analgésicos da morfina [25]. Além disso, a naloxona - um antagonista de opiáceos - precipita em ratos o consumo excessivo de açúcar, alguns dos sinais comportamentais e neuroquímicos de abstinência de opiáceos [28]. Esta última observação é importante porque mostra que o consumo excessivo de bebidas açucaradas pode induzir um estado semelhante à dependência. Finalmente, neuroimagem recente [29], [30].

No geral, existem muitos aspectos comuns comportamentais e biológicos entre bebidas açucaradas e drogas de abuso. No entanto, o potencial aditivo do primeiro em relação ao último é muito menos claro. Pesquisas anteriores mostraram que o acesso simultâneo a água altamente açucarada (sacarina e glicose) pode reduzir a auto-administração de baixas doses de cocaína em ratos não dependentes [31], [32], sugerindo que a água adoçada pode superar a recompensa de cocaína substância mais viciante e nociva atualmente conhecida [33]. Se este efeito resulta de uma preferência genuína por doçura intensa ou outros fatores (por exemplo, uso de uma dose sub-ótima de cocaína e / ou falta de dependência de cocaína) ainda não foi estabelecido. A presente série de experimentos foi projetada para abordar diretamente essa questão. Desenvolvemos um procedimento de escolha para avaliar o valor de recompensa de um sabor adocicado intenso em relação à cocaína intravenosa. Este procedimento foi testado em ratos virgens não restritos para determinar como, sem experiência anterior com cocaína ou doçura intensa, os animais aprendem a diferenciar os dois tipos de recompensa. Em seguida, o mesmo procedimento foi aplicado aos ratos após um acesso prolongado à auto-administração de cocaína. Pesquisas anteriores mostraram que, com o acesso prolongado à cocaína, a maioria dos ratos desenvolve os principais sinais de dependência, incluindo o aumento da ingestão de medicamentos, comprometimento do processamento da recompensa cerebral e dificuldade em parar a busca de medicamentos, apesar das conseqüências negativas [34].

Resultados

Ratos sem experiência prévia com açúcar refinado ou adoçante artificial foram autorizados a escolher 8 vezes por dia entre duas alavancas mutuamente exclusivas (Fig. 1a): responder em uma alavanca (alavanca C) foi recompensado com uma dose eficaz de cocaína (0.25 mg, iv) enquanto responde na outra alavanca (a alavanca S) foi recompensada por um acesso de 20-s a água adoçada com sacarina (0.2%) (ver Materiais e Métodos). É importante ressaltar que, a cada dia antes de fazer suas escolhas, os ratos podiam alternativamente amostrar cada alavanca 2 vezes para aprender seu respectivo valor de recompensa (Fig. 1a). Diferentes grupos de animais foram testados sob condições de recompensa 3. Sob a condição S- / C + (N = 30), apenas a resposta na alavanca C foi recompensada (+) pelo fornecimento de cocaína; responder na alavanca S não foi recompensado (-). Sob a condição S + / C- (N = 9), apenas a resposta na alavanca S foi recompensada pelo acesso à sacarina; responder na alavanca C não foi recompensado. Finalmente, sob a condição S + / C + (N = 43), ambas as alavancas foram recompensadas por suas recompensas correspondentes. Havia mais ratos na condição S- / C + ou S + / C + do que na condição S + / C- porque mais experimentos foram conduzidos nessas condições anteriores para avaliar os determinantes da escolha entre sacarina e cocaína (dose, atraso, esforço, reversão , entrada de calorias, sede).

No dia 1 e quaisquer que fossem as condições de recompensa, os ratos eram indiferentes a ambas as alavancas, mostrando que não havia preconceito ou preferência preexistente em nosso meio. Como esperado, no entanto, com testes repetidos, as condições de recompensa influenciaram consideravelmente a evolução da escolha da alavanca [Condição × Dia: F (28,1106) = 8.71, P <0.01] (Fig.1b). Sob a condição S- / C +, os ratos não exibiram preferência até o dia 9, quando mudaram para a preferência pela alavanca C. Essa preferência tornou-se estatisticamente confiável no dia 11. Da mesma forma, sob a condição S + / C-, os ratos rapidamente adquiriram uma preferência pela alavanca S que se tornou estatisticamente confiável no dia 7. Mais surpreendentemente, sob a condição S + / C +, os ratos desenvolveram imediatamente uma preferência forte e estável pela alavanca S, que se tornou estatisticamente significativa no dia 2. Essa preferência era indistinguível daquela exibida pelos ratos no S + / C- condição [F (14,700) = 0.41, NS] (Fig. 1b). Além disso, após a estabilização do comportamento, a latência para selecionar a alavanca S na condição S + / C + (14.5 ± 5.0 s, média ± SEM dos últimos 3 dias estáveis) foi semelhante à da condição S + / C- (6.5 ± 2.4 s) [t (50) <1], mostrando que os ratos escolheram a sacarina em vez da cocaína sem hesitação, como se a alavanca C não fosse recompensada pela cocaína.

A forte preferência pela sacarina sob a condição S + / C + não foi devido a uma falha em aprender o valor da alavanca C. Na verdade, a partir do dia 7 em diante, os ratos experimentaram a alavanca C quase ao máximo, embora ligeiramente menos do que a alavanca S, antes de serem autorizados a fazer suas escolhas (Fig. 1c). Assim, apesar da amostragem de cocaína quase máxima, os ratos sob a condição S + / C + adquiriram uma preferência pela alavanca S tão rapidamente quanto os ratos sob a condição S + / C-. Esse achado também mostra que a cocaína não teve influência positiva ou negativa na aceitação e / ou preferência da sacarina no cenário de escolha atual. Finalmente, após a estabilização do comportamento, a latência para amostra da alavanca C (48.5 ± 10.2 s, média ± SEM dos últimos 3 dias estáveis) foi significativamente maior do que a latência para amostra da alavanca S (5.6 ± 1.7 s) [F (1,42, 17.44) = 0.01, P <XNUMX]. Essa diferença mostra que os animais aprenderam efetivamente que cada alavanca está associada a um resultado diferente.

É importante notar que a preferência pela sacarina não foi atribuída à sede ou ao comportamento de beber em si, porque os ratos preferiam a cocaína por causa da água (Fig. 2). Finalmente, a preferência pela sacarina não se deveu à sua capacidade não natural de induzir doçura sem calorias, porque a mesma preferência também foi observada com uma concentração equipotente de sacarose (4%) (Fig. 2).

Para avaliar diretamente a eficácia comportamental da cocaína no procedimento de escolha de ensaios discretos, medimos a capacidade da primeira auto-injeção de cocaína do dia em induzir a locomoção no dia 1, 5 e 15. Como esperado, em ratos que adquiriram uma preferência para a alavanca C sob a condição S- / C +, a cocaína induziu um rápido aumento na locomoção que atingiu o pico 1 min após a injeção e então retornou gradualmente à linha de base dentro do intervalo inter-ensaio de 10 min (Fig. 3a). Este efeito psicomotor aumentou ainda mais após a exposição repetida à cocaína [Dia × Intervalos: F (40,1160) = 5.06, P <0.01], um fenômeno bem estabelecido, chamado de sensibilização comportamental.

A sensibilização à cocaína foi máxima logo no dia 5 e permaneceu estável até o final do experimento, apesar da exposição adicional à cocaína (Fig. 3a). É importante observar que uma sensibilização comportamental de magnitude semelhante também foi observada em ratos que adquiriram uma forte preferência pela alavanca S sob a condição S + / C + [Dia × Intervalos: F (40,1680) = 6.57, P <0.01] (Fig. 3b ) Para testar a contribuição específica do consumo de sacarina para a indução de sensibilização na condição S + / C +, os ratos inicialmente testados na condição S + / C- foram testados na condição S + / C + no dia 16. Esses ratos eram muito menos sensíveis à cocaína do que os ratos inicialmente treinados sob a condição S + / C + [Grupo × Intervalos: F (20, 1000) = 1.66, P <0.05] (Fig. 3c). Esta observação mostra claramente que o consumo de sacarina per se tem pouco impacto na sensibilização sob a condição S + / C + e, portanto, que muito poucas doses de cocaína consumidas na condição S + / C + (principalmente durante a amostragem) foram suficientes por si mesmas para induzir a resposta sensibilizada. Assim, os ratos preferiram a sacarina à cocaína, apesar de serem totalmente responsivos e sensibilizados à (e pela) cocaína.

É possível que, embora eficaz na indução da locomoção e da sensibilização, a dose de cocaína fosse, no entanto, muito baixa para superar os efeitos recompensadores da sacarina. Para responder a esta questão, um subgrupo de ratos (N = 11) treinados na condição S + / C + foi testado com doses crescentes de cocaína iv (0.25-1.5 mg). A dose mais alta foi próxima, mas menor do que a dose convulsiva (isto é, 3 mg) em nossas condições. Como esperado, o aumento da dose de cocaína induziu um aumento dependente da dose na locomoção, conforme medido durante 10 min após a primeira auto-injeção de cocaína do primeiro dia de cada substituição de dose [F (2,20) = 18.77, P <0.01 ] (Fig. 4a). No entanto, independentemente da dose disponível, os ratos continuaram a preferir a alavanca S em vez da alavanca C [F (2,20) = 0.07, NS] (Fig. 4b). Assim, os ratos preferiram a sacarina apesar de um nível quase máximo de estimulação da cocaína. Embora a via intravenosa de administração permita efeitos de drogas rápidos e intensos - o que explica por que essa via é freqüentemente selecionada por usuários pesados ​​de drogas - ainda há um breve e incompressível atraso entre a pressão na alavanca e o início dos efeitos da cocaína. Este atraso de ação foi estimado em 6.2 ± 0.2 s no presente estudo (ver Materiais e Métodos). Da mesma forma, os efeitos neuroquímicos da cocaína atingem o pico entre 4 e 20 s após o início de uma injeção intravenosa [37]. Em contraste, o atraso entre a resposta e o início da ingestão de sacarina foi inferior a 2 s. Essa diferença de atraso, embora pequena, poderia explicar a preferência pela sacarina, cujos efeitos recompensadores são mais imediatos do que os da cocaína. Para testar a contribuição desse fator, a entrega de sacarina foi sistematicamente atrasada após a seleção da alavanca S (0-18 s) em um subgrupo de ratos (N = 11), enquanto o atraso da entrega de cocaína permaneceu constante. O aumento do atraso da entrega da sacarina induziu uma ligeira diminuição na seleção da alavanca S [F (3,30) = 6.58, P <0.01] (Fig. 4c). Esse aumento não foi suficiente, entretanto, para reverter a preferência pela alavanca S em favor da alavanca C. Assim, os ratos preferiram a sacarina mesmo quando seu retardo era igual ou superior ao retardo dos efeitos da cocaína. Finalmente, avaliamos em outro subgrupo de ratos (N = 10) os efeitos do preço da recompensa (ou seja, o número de toques na alavanca necessários para obter uma recompensa) na escolha. Em alguns casos, o aumento do preço da recompensa pode induzir uma mudança na preferência [38]. No entanto, o aumento do preço da recompensa de 2 para 8 respostas / recompensa não reverteu, mas aumentou a preferência pela alavanca S [F (2,18) = 8.04, P <0.01] (Fig. 4d). Assim, independentemente do preço, os ratos preferiram a sacarina à cocaína.

A série anterior de experimentos envolveu indivíduos inicialmente virgens de drogas, sem história prévia de auto-administração de cocaína. Para determinar se o histórico de drogas influencia a escolha entre sacarina e cocaína, um subgrupo de ratos (N = 24) que adquiriu uma preferência estável por alavanca C sob a condição S- / C + foi subsequentemente testado sob S + / C + durante 10 dias. Apesar de uma preferência inicial estável pela alavanca C, os ratos rapidamente inverteram sua preferência em favor da alavanca S quando ambas as alavancas foram recompensadas (Fig. 5a). A proporção de ratos que preferiram a alavanca C (ou seja, seleção média da alavanca C dos últimos 3 dias> 60%) após a reversão da preferência não diferiu significativamente daquela registrada em ratos inicialmente virgens de tratamento (8.3 versus 2.3%, z <1.96 ) Além disso, a preferência pela sacarina desenvolveu-se mesmo em ratos (N = 11) com uma longa história de autoadministração de cocaína (6 horas por dia, durante 3 semanas). No presente estudo, apesar de 3 semanas de acesso estendido à autoadministração de cocaína e uma grande escalada do consumo de cocaína [de 7.34 ± 2.50 para 26.04 ± 1.21 mg / dia; F (16,160) = 15.98, P <0.01], os ratos rapidamente adquiriram uma preferência forte e estável pela alavanca S em vez da alavanca C (Fig. 5b). A proporção de ratos com acesso prolongado à cocaína que preferiram a alavanca C após 10 dias de escolha não diferiu daquela registrada em ratos inicialmente virgens de tratamento (0.0 versus 2.3%, z <1.96). Apesar de uma pequena diminuição na seleção da alavanca S na dose mais alta, a preferência pela alavanca S em ratos pré-expostos à autoadministração de cocaína prolongada não foi superada pelo aumento das doses de cocaína (Fig. 5b, encarte). Finalmente, a preferência pela alavanca S foi tão forte que também surgiu em ratos sob a influência de cocaína durante a escolha (N = 10). Neste experimento, os ratos tiveram acesso contínuo à alavanca C sozinha durante 3 horas por dia. Após a aquisição da pressão da alavanca (> 20 respostas / sessão), eles foram testados em um procedimento de escolha discreta modificado que consistia em um acesso contínuo à alavanca C por 1 hora, seguido por 8 tentativas de escolha discreta sob a condição S + / C +. Embora os ratos respondessem todos os dias na alavanca C à autoadministração de cocaína durante a hora anterior à escolha (Fig. 5c), eles adquiriram rapidamente uma preferência robusta pela alavanca S (Fig. 5d). Como mostrado em 3 indivíduos representativos, houve uma mudança abrupta dentro da sessão no comportamento da alavanca C para a alavanca S durante a escolha (Fig. 5e).

Discussão

Praticamente todos os ratos preferiram a sacarina à cocaína intravenosa, uma droga altamente viciante. A preferência pela sacarina não é atribuível à sua capacidade não natural de induzir doçura sem aporte calórico subseqüente, porque a mesma preferência também foi observada com uma concentração equipotente de sacarose, um açúcar natural. É importante ressaltar que a preferência pelo sabor doce da sacarina não era superável pelo aumento das doses de cocaína e foi observada apesar da intoxicação por cocaína, sensibilização ou aumento da ingestão - sendo esta última uma característica da dependência de drogas [22], [34].

Além disso, em vários casos, a preferência pela sacarina surgiu em ratos que originalmente desenvolveram uma forte preferência pela alavanca recompensada pela cocaína.

Tais inversões de preferência mostram claramente que, em nosso meio, os animais não estão presos às suas preferências iniciais e podem mudá-los de acordo com novas contingências de recompensa. Finalmente, a preferência pela sacarina foi mantida em face do preço ou custo de recompensa crescente, sugerindo que os ratos não só preferiam a sacarina em vez da cocaína ("gosto"), mas também estavam mais dispostos a trabalhar para ela do que a cocaína ("querer"). ). Como um todo, esses achados estendem pesquisas anteriores [31], [32] mostrando que uma sensação intensa de doçura supera a estimulação máxima de cocaína, mesmo em usuários sensibilizados e sujeitos a drogas. A preferência absoluta pela doçura do paladar pode levar a um reordenamento na hierarquia de estímulos potencialmente viciantes, com dietas adocicadas (isto é, contendo açúcares naturais ou adoçantes artificiais) tomando precedência sobre a cocaína e possivelmente outras drogas de abuso.

Embora muito pronunciada, a preferência pela sacarina na condição S + / C + não foi exclusiva. Em média, os ratos seleccionaram a alavanca C em cerca de 15.6% de ocasiões (variação entre experiências: 7 a 23%) que, juntamente com doses de amostragem, representam um total de doses diárias de cocaína 3 por dia. Esta quantidade diária de auto-administração de cocaína é muito baixa comparada com o que os ratos espontaneamente se auto-administram durante o mesmo período de tempo (isto é, sobre doses de 30). Curiosamente, esta quantidade muito baixa de ingestão de cocaína foi suficiente para induzir uma sensibilização rápida e forte (ver abaixo). De fato, mesmo na condição S + / C-, os ratos ocasionalmente responderam na alavanca C (8.3% do tempo) que não foi recompensada pela cocaína nessa condição. Este nível residual de resposta na alavanca C não é surpreendente e é previsto pela lei correspondente, que se refere à tendência bem documentada de animais ou humanos de distribuir seu comportamento proporcionalmente ao valor de recompensa das opções disponíveis [39]. Esta interpretação sugere que mesmo na condição S + / C-, responder na alavanca C tem algum valor de recompensa, embora relativamente fraco. No presente estudo, o valor de recompensa da alavanca C na condição S + / C- provavelmente resulta de alguma generalização parcial do estímulo entre a alavanca S e a alavanca C, enquanto, na condição S + / C +, provavelmente resulta em grande parte da própria cocaína. Independentemente desta tendência residual para escolher a alavanca C, o presente estudo demonstra claramente que os ratos preferem em grande medida a alavanca S quando é recompensada pela doçura do sabor.

À primeira vista, a descoberta de que a doçura intensa ultrapassa a cocaína intravenosa é difícil de conciliar com pesquisas empíricas e teóricas anteriores sobre a dependência de cocaína. Primeiro, nossos achados parecem contrariar pesquisas seminais em macacos mostrando que a grande maioria dos indivíduos prefere altas doses de cocaína intravenosa em alimentos secos, independentemente da quantidade de alimento disponível [40], [41] e até mesmo apesar da perda de peso severa [42] No entanto, na maioria dos estudos anteriores, com exceção de um [43], a opção alimentar continha nenhuma ou apenas concentrações modestas de saborizantes doces, o que provavelmente explica por que foi negligenciado em favor de altas doses de cocaína. Além disso, nos estudos que empregaram pellets de alimentos levemente adocicados [41], a quantidade de esforço necessária para obter a opção alimentar foi dez vezes maior do que a obtenção de cocaína, favorecendo assim as escolhas de drogas. No entanto, em um estudo de escolha, todos os macacos claramente preferiram, ceteris paribus, a dose mais alta de cocaína sobre um pellet de sacarose 1-g [43]. A discrepância entre este último estudo e o presente estudo pode sugerir que as bebidas açucaradas são mais recompensadoras do que os alimentos secos açucarados (que podem induzir sede além de recompensa) e / ou que um pellet de sacarose 1-g não é suficiente para superar o problema. efeitos de recompensa das doses mais altas de cocaína. Finalmente, não se pode descartar a possibilidade de que essa discrepância possa também refletir uma lacuna interespecífica entre roedores e primatas, sendo estes últimos hipoteticamente mais suscetíveis à recompensa por cocaína do que os primeiros. Pesquisas futuras são necessárias para separar essas diferentes hipóteses. No entanto, o presente estudo demonstra claramente em ratos - uma espécie animal que facilmente se auto-administra cocaína e que desenvolve a maioria dos sinais de dependência após o acesso prolongado a drogas [34] - que o valor da cocaína é limitado e não não ultrapasse a doçura do paladar - uma recompensa orientada pelo sensorial.

Nossos resultados também são difíceis de prever a partir da teorização atual sobre a neurobiologia da dependência de cocaína. Apesar das divergências consideráveis, as teorias mais influentes da dependência de cocaína (incluindo recentes modelos neurocomputacionais [44], [45]) postulam que a cocaína é inicialmente viciante através de sua estimulação direta e supranormal da sinalização de dopamina no estriado ventral [15], [22] [46] - [49] A repetição dessa ativação supranormal com o uso repetido de cocaína aumentaria ainda mais o valor da cocaína acima de outras recompensas, independentemente de seu valor inicial, influenciando, assim, a tomada de decisão em relação à escolha excessiva de cocaína. Esta previsão é aparentemente contradita pelo presente estudo. Uma meta-análise da literatura (ver Material e Métodos) mostrou que a auto-administração intravenosa de cocaína era muito mais potente do que o consumo de sacarose ou sacarina na indução de níveis de dopamina no estriado ventral em ratos (Fig. 6). Apesar de sua potência neuroquímica muito maior, no entanto, descobrimos que a recompensa de cocaína empalidecia em comparação com a recompensa doce. Além disso, a preferência pela sacarina se desenvolveu apesar de uma rápida e forte sensibilização aos efeitos estimulantes da cocaína - um fenômeno comportamental bem documentado que está associado a mudanças duradouras na sinalização da dopamina estriatal [46], [47]. Assim, a capacidade da cocaína de estimular diretamente os neurônios dopaminérgicos mesencefálicos e de sensibilizá-los duradouramente aparentemente não é suficiente para tornar a cocaína irresistível. Essa conclusão pode de alguma forma levar a uma revisão de algumas das suposições básicas que fundamentam os modelos neurobiológicos atuais da dependência da cocaína.

Primeiro, nosso estudo pode sugerir que, embora muito menos eficaz na indução dos níveis de dopamina pré-sináptica no estriado ventral, o consumo de doces pode, no entanto, gerar um sinal pós-sináptico de dopamina global mais intenso que a cocaína. Os efeitos pós-sinápticos dos níveis supranormais de dopamina induzidos pela cocaína são, de fato, provavelmente limitados pela dessensibilização do receptor de curto prazo e / ou processos oponentes inter ou intracelulares [15], [22]. Assim, níveis absolutos de dopamina estriatal em resposta a diferentes tipos de recompensa podem não prever com precisão seu potencial de dependência. Medidas mais diretas de sinalização dopaminérgica pós-sináptica serão necessárias no futuro para testar essa hipótese. Alternativamente, a preferência absoluta pela doçura intensa também pode apontar para a existência de vias de sinalização cerebral que são mais poderosas do que a via dopaminérgica mesostriatal no controle do comportamento orientado à recompensa e que a doçura do sabor se ativaria mais vigorosamente do que a cocaína. Os peptídeos opióides estriatais são atualmente os melhores candidatos para realizar essa função. A expressão gênica estriatal de peptídeos opióides é modulada pelo consumo excessivo de água adoçada [50], [51] e a ativação farmacológica de receptores opióides ventrais estriados, especialmente de receptores mu, aumenta a ingestão e palatabilidade da água doce [52], [53]. O que é menos claro no momento, no entanto, é se a ativação da sinalização opioide do estriado pode anular a sinalização da dopamina no controle do comportamento. Uma maneira de abordar essa questão seria permitir que os ratos escolham entre a cocaína e uma manipulação de drogas que aumente seletivamente a sinalização opioide do estriado. Uma abordagem mais geral seria a utilização de tecnologias de imagem cerebral para procurar regiões ou redes que respondam mais ao sabor doce do que à cocaína intravenosa. Finalmente, também é possível que a doçura do paladar ultrapasse a cocaína simplesmente porque ela tem mais efeitos colaterais negativos e, portanto, é mais conflitiva ou ambivalente do que a anterior [54]. De fato, além de ativar a sinalização da dopamina estriatal, a cocaína também ativa as vias do estresse cerebral, como as vias fatoriais liberadoras de corticotropina extra-hipotalâmicas que desempenham um papel crítico no medo e na ansiedade [55]. A ativação simultânea das vias de estresse cerebral pela cocaína poderia explicar por que inicialmente os ratos virgens de drogas estavam mais hesitantes na amostragem da alavanca recompensada pela cocaína do que a alavanca recompensada pela sacarina no presente estudo. Além disso, os efeitos ambivalentes da cocaína também podem contribuir para explicar por que os ratos na condição S + / C + desenvolveram uma preferência confiável para a alavanca S mais rapidamente que os ratos na condição S + / C- (dia 2 versus dia 7).

Quaisquer que sejam os mecanismos envolvidos, a descoberta de que a doçura intensa tem precedência sobre a cocaína, uma das substâncias mais viciantes e nocivas atualmente conhecidas [33], sugere que bebidas altamente adoçadas, como as amplamente disponíveis nas sociedades humanas modernas, podem funcionar como estímulos supernormais [56] Por definição, um estímulo sobrenatural é mais efetivo do que o estímulo natural no controle do comportamento e, portanto, pode anular comportamentos normais (por exemplo, pais de aves hospedeiras sucumbindo ao chamado supranormal de um cuco aninhado insaciável em detrimento de seus próprios filhos [57] ). A percepção do sabor doce depende de dois receptores da subunidade acoplada à proteína G, T1R2 e T1R3 [1], [2]. Na maioria dos mamíferos, incluindo roedores e primatas, esses receptores evoluíram em ambientes ancestrais pobres em açúcares e, portanto, não estão adaptados a altas concentrações de saborizantes doces [1], [2]. Nós especulamos que a estimulação supranormal desses receptores por dietas altamente adocicadas gera uma recompensa supranormal, com o potencial de anular tanto os mecanismos homeostáticos e de autocontrole e, assim, levar à dependência [58]. Finalmente, o presente estudo também pode sugerir que a disponibilidade atual e disseminada de dietas ricas em açúcar nas sociedades humanas modernas pode fornecer um escudo insuspeito, embora altamente custoso, contra a disseminação da dependência de drogas. Pesquisas futuras em animais criados em ambientes ricos em açúcar, para melhor aproximar a condição humana moderna, podem fornecer pistas importantes para abordar essa importante questão.

Materiais e Métodos

Assuntos

Naïve, adulto jovem (221-276 g), macho, ratos Wistar (N = 132) foram utilizados no presente estudo (Charles River, França). Os ratos foram alojados em grupos de dois ou três e foram mantidos num biotério de luz (12-h reverso claro-escuro) e com temperatura controlada (22 ° C). Todos os testes comportamentais ocorreram durante a fase escura do ciclo claro-escuro. Comida e água estavam disponíveis gratuitamente nas gaiolas domésticas. Os alimentos consistiram em ração padrão para ratos A04 (SAFE, Scientific Animal Food and Engineering, Augy, França) que continha 60% de carboidratos (em grande parte amido de milho), 16% de proteínas, 12% de água, 5% de minerais, 3% de gordura e 4% de celulose. Nenhum açúcar sintético ou refinado foi adicionado. Todas as experiências foram realizadas de acordo com os padrões institucionais e internacionais de cuidados e uso de animais de laboratório [Lei de Animais (Procedimentos Científicos) do Reino Unido, 1986; e diretrizes associadas; a Diretiva do Conselho das Comunidades Européias (86 / 609 / EEC, 24 de novembro 1986) e as diretivas francesas relativas ao uso de animais de laboratório (Décret 87-848, 19 outubro 1987)].

Aparelho

Foram utilizadas doze câmaras operantes idênticas (30 × 40 × 36 cm) para todos os treinamentos e testes comportamentais (Imétronic, França). Todas as câmaras estavam localizadas longe da sala da colônia em uma sala mal iluminada. Eles foram individualmente fechados em cubículos de madeira equipados com um alto-falante de ruído branco (45 ± 6 dB) para atenuação de som e um exaustor para ventilação. Cada câmara tinha um piso de grade de aço inoxidável que permitia a coleta de lixo em uma bandeja removível contendo serragem de milho. Cada câmara era constituída por dois painéis operantes opacos nos lados direito e esquerdo e duas paredes de acrílico transparente nos lados traseiro e frontal (o lado frontal corresponde à entrada / saída da câmara). Cada painel operante continha uma alavanca retrátil automática, montada na linha média e 7 cm acima da grade. O painel operante esquerdo também foi equipado com um bico de bebida retrátil em forma de cilindro, 9.5 cm à esquerda da alavanca e 6 cm acima da grade. Um circuito lickometer permitia monitorar e registrar a lambida. Um diodo de luz branca (1.2 cm OD) foi montado 8.5 cm acima de cada alavanca (a partir do centro do diodo). Cada câmara também foi equipada com duas bombas de seringa colocadas no exterior, no topo do cubículo. Uma bomba de seringa foi controlada pela alavanca esquerda e forneceu água ou solução de sacarina (ou sacarose) para o bocal de beber através de um tubo de silicone (Dow Corning Corporation, Michigan, EUA). A outra bomba foi controlada pela alavanca direita e solução de fármaco entregue através de uma tubulação Tygon (Cole Parmer) conectada através de um giro líquido de canal único (Lomir biomedical inc., Quebec, Canadá) a um conector de cânula (Plastics One, Roanoke, VA ) nas costas do animal. A tubagem de Tygon foi protegida por uma mola de aço inoxidável (0.3 cm ID, XUMUMX cm DE) (Aquitaine Ressort, França) que foi suspensa no centro da câmara a partir do conector do tirante giratório. Os movimentos verticais do animal foram compensados ​​por meio de um dispositivo de contrabalanceamento de peso-polia.

Cirurgia

Ratos anestesiados (hidrato de cloral, 500 mg / kg IP) (JT Baker, Holanda) foram preparados com cateteres silásticos (Dow Corning Corporation, Michigan, EUA) na veia jugular direita que saiu da pele no meio das costas sobre 2 cm abaixo das escápulas. Após a cirurgia, os cateteres foram lavados diariamente com 0.15 ml de uma solução antibiótica estéril contendo solução salina heparinizada (280 UI / ml) (Sanofi-Synthelabo, França) e ampicilina (Panpharma, França). Quando necessário, a permeabilidade do cateter foi verificada pela administração de 0.15 ml do anestésico não-barbitúrico de ação curta etomidato através do cateter (Braun Medical, França). O teste comportamental começou 7-10 dias após a cirurgia.

Procedimento de escolha de ensaios discretos

A cada dia, os ratos foram autorizados a escolher entre uma alavanca de cocaína emparelhada (alavanca C) e uma alavanca emparelhada de sacarina (alavanca S) em um procedimento de escolha de ensaios discretos. A recompensa de cocaína consistiu em uma dose iv de 0.25 mg administrada em 4 s. Esta dose é amplamente utilizada em ratos e foi utilizada em todos os nossos estudos prévios de auto-administração [34], [35]. A recompensa pela sacarina consistiu no acesso de um 20 a um bico de bebida que forneceu volumes discretos (0.02 ml) de uma solução de sacarina de sódio a uma concentração próxima da ideal de 0.2% [59], [60]. Os primeiros volumes 3 foram entregues livremente durante os primeiros 3 s para encher o bico de bebida; os volumes subsequentes foram obtidos por lamber (1 volume por 10 lambe em cerca de 1.4 s). Assim, durante o acesso de um 20 à solução de sacarina, pode obter-se um volume máximo de 15 que corresponde a 0.3 ml. Os ratos aprenderam a beber essa quantia máxima por acesso na primeira semana do teste.

Cada sessão de escolha foi constituída por ensaios discretos 12, espaçados por 10 min, e divididos em duas fases sucessivas, amostragem (ensaios 4) e escolha (ensaios 8). Durante a amostragem, cada tentativa começou com a apresentação de uma única alavanca nesta ordem alternativa: C – S – C – S. A alavanca C foi apresentada em primeiro lugar para evitar um eventual condicionamento da aversão ao sabor induzido por medicamentos ou efeitos negativos de contraste afetivo. Se os ratos responderam dentro de 5 min na alavanca disponível, eles foram recompensados ​​pela recompensa correspondente. A entrega da recompensa foi sinalizada pela retração da alavanca e uma iluminação 40-s da luz de sinalização acima desta alavanca. Se os ratos não responderem dentro de 5 min, a alavanca se retraiu e nenhuma luz indicadora ou recompensa foi entregue. Assim, durante a amostragem, os ratos foram autorizados a associar separadamente cada alavanca com sua recompensa correspondente (alavanca C com cocaína, alavanca S com sacarina) antes de fazer sua escolha. Durante a escolha, cada tentativa começou com a apresentação simultânea das duas alavancas S e C. Os ratos tiveram que selecionar uma das duas alavancas. Durante a escolha, a entrega de recompensa foi sinalizada pela retração de ambas as alavancas e uma iluminação 40 da luz de sinalização acima da alavanca selecionada. Se os ratos não responderem em qualquer alavanca dentro de 5 min, ambas as alavancas se retraíram e nenhuma luz ou recompensa foi entregue.

Aquisição de preferência de alavanca

Para avaliar a aquisição de uma preferência por animais de alavanca, naïve operante, não restritos foram testados durante 15 dias consecutivos sob as condições de recompensa 3 descritas no texto principal (um grupo de ratos por condição). Em cada condição de recompensa, o requisito de resposta de cada recompensa era inicialmente definido para a resposta 1 (primeiros 10 dias) e, em seguida, incrementado para 2 respostas consecutivas para evitar a eventual escolha acidental (dias restantes). Quando o requisito de resposta foi 2, uma resposta em qualquer alavanca redefiniu o requisito de resposta na outra alavanca. Reação de resposta ocorreu muito raramente, no entanto.

Efeitos da cocaína na locomoção

Cada câmara de autoadministração também foi equipada com dois pares de raios infravermelhos 2 cm acima do piso da rede (Imétronic, França). Ambos os pares cruzaram a câmara no seu eixo longitudinal e foram separados um do outro por 16 cm e da parede direita ou esquerda por 12 cm. Esta colocação permitiu a contagem do número de deslocamentos horizontais do animal para ir para lá e para cá entre as duas extremidades do eixo de comprimento (cruzamentos de gaiola).

Efeitos das doses de cocaína na escolha

Após a estabilização do comportamento sob a condição S + / C + (sem tendências crescentes ou decrescentes em 3 dias consecutivos), um subgrupo de ratos (N = 11) foi testado com doses crescentes de cocaína IV (0.25, 0.75 e 1.5 mg). Cada dose foi obtida aumentando a concentração do fármaco e foi administrada por via intravenosa ao longo de 4 s. Durante a auto-administração contínua de cocaína, o intervalo espontâneo entre injecções - que reflecte a duração dos efeitos da cocaína - aumenta de forma não linear com a dose unitária disponível. Em nossas condições, o intervalo inter-injeção foi em média 4.3, 10.7 e 17.4 min para 0.25, 0.75 e 1.5 mg, respectivamente [61]. Assim, para manter as mesmas condições de escolha entre as doses (ou seja, o mesmo atraso entre o final dos efeitos do fármaco e a próxima escolha) e evitar o acúmulo de drogas, o intervalo entre estudos foi aumentado com a dose: 10 (4.3 + 5.7) (16.4 + 10.7) e 5.7 (23.1 + 17.4) min para 5.7, 0.25 e 0.75 mg, respectivamente. Cada dose estava em vigor por pelo menos 1.5 dias consecutivos. O comportamento médio em cada dose foi considerado estável quando não houve tendências crescentes ou decrescentes ao longo de 5 dias consecutivos.

Estimativa do atraso do início dos efeitos da cocaína

Embora a via intravenosa de administração permita a ação rápida da droga, há, no entanto, um curto e incompreensível atraso entre a resposta e o início dos efeitos da droga. Este atraso foi estimado aqui, cronometrando a primeira reação comportamental observável à cocaína, após o início do fornecimento da droga. Cada rato responde à cocaína por via intravenosa de uma maneira muito característica: ela corre freneticamente ao redor da gaiola enquanto escova rapidamente suas vibrissas com suas patas dianteiras, a cabeça e o pescoço abaixados até o chão (Ahmed, observações não publicadas). Esta observação foi realizada em um subgrupo de ratos (N = 12) antes e após o teste sob a condição S + / C +. Em ambas as ocasiões, o atraso médio do início dos efeitos da cocaína foi de 6.2 ± 0.2 s.

Efeitos de atraso de recompensa de sacarina em escolha

Após estabilização do comportamento sob a condição S + / C + (sem tendências crescentes ou decrescentes em 3 dias consecutivos), um subgrupo de ratos (N = 11) foi testado com atrasos crescentes entre comportamento e entrega de sacarina (0, 6, 12 e 18 s) . O atraso de 6-s corresponde ao atraso do início dos efeitos da cocaína, medido através da observação direta (ver abaixo). Cada atraso estava em vigor por pelo menos 5 dias consecutivos. O comportamento médio em cada atraso foi considerado estável quando não houve tendências crescentes ou decrescentes ao longo de 3 dias consecutivos.

Efeitos do preço de recompensa na escolha

Após a estabilização do comportamento sob a condição S + / C + (sem tendências crescentes ou decrescentes em 3 dias consecutivos), um subgrupo de ratos (N = 10) foi testado com preços de recompensa crescentes ou requisitos de resposta (2, 4 e 8). Cada requisito de resposta foi testado por pelo menos 5 dias consecutivos. Em cada requisito, uma resposta em qualquer alavanca redefine o requisito de resposta na outra alavanca. O comportamento médio de cada preço foi considerado estável quando não houve tendências crescentes ou decrescentes ao longo de 3 dias consecutivos.

Indução do escalonamento da ingestão de cocaína

Os ratos (N = 11) tiveram acesso prolongado à auto-administração de cocaína (isto é, 6 h por dia durante os dias 18) antes de serem autorizados a escolher entre cocaína e sacarina. O acesso diário à cocaína dependia de um cronograma de 40s de time-out de taxa fixa, ou seja, era necessário um número fixo de respostas (veja abaixo) para obter uma dose unitária com um intervalo mínimo entre doses de 40s. A dose unitária de cocaína foi de 0.25 mg durante a primeira hora e 0.75 mg durante as últimas 5 horas. O aumento da dose unitária de cocaína durante as últimas horas 5 foi destinado a acelerar e agravar o aumento da ingestão de cocaína. O requisito de resposta foi inicialmente estabelecido para a dose / resposta 1 (primeiros 14 dias) e depois incrementado para 2 / dose (dias restantes). No dia após o aumento da ingestão de cocaína, os ratos foram autorizados a escolher entre cocaína e sacarina durante 10 dias consecutivos no procedimento de escolha de ensaios discretos descrito acima (condição S + / C +).

Escolha durante a intoxicação por cocaína

Os ratos (N = 10) foram primeiro treinados para auto-administrar 3 de cocaína por dia durante a semana 1, sob um programa de reforço de taxa fixa, com um tempo limite de 40 s. O requisito de resposta foi inicialmente estabelecido para a dose / resposta 1 (primeiros 3 dias) e depois incrementado para 2 / dose (dias restantes). Em seguida, os ratos foram testados sob um procedimento de escolha de ensaios discretos modificados. O período de amostragem do procedimento original foi substituído por um acesso contínuo ao 1-h apenas à alavanca C, durante a qual os ratos poderiam obter cocaína de acordo com uma programação 2 de tempo limite 40 de taxa fixa. Exceto que, o novo procedimento foi idêntico ao original (descrito no texto principal). Assim, a cada dia, os ratos estavam sob a influência de cocaína (isto é, intoxicados com cocaína) antes de fazer suas escolhas 8 entre a alavanca S e a alavanca C (condição S + / C +).

Meta-análise: efeitos do consumo de sacarose, sacarina ou cocaína nos níveis de dopamina do estriado

Foi realizada uma busca no Medline, utilizando as seguintes palavras-chave: rato, cocaína, sacarina, sacarose, auto-administração, dopamina, microdiálise, estriado, acumbens. Os artigos recuperados foram verificados e classificados de acordo com o conteúdo e a relevância. No final, um total de papéis 18 [62] - [79] foram mantidos para análise gráfica. Em cada caso, os efeitos do consumo de sacarose, sacarina ou cocaína nos níveis extracelulares de dopamina no estriado ventral foram estimados a partir dos números.

Drogas

O cloridrato de cocaína (Coopération Pharmaceutique Française, França) foi dissolvido em sacos estéreis de 250 ml ou 500 ml de NaCl a 0.9% e mantido à temperatura ambiente (21 ± 2 ° C). As doses do medicamento foram expressas como o peso do sal. A sacarina sódica (Sigma-Aldrich, França) foi dissolvida em água da torneira à temperatura ambiente (21 ± 2 ° C). A solução da sacarina era renovada a cada dia.

A análise dos dados

Por conveniência, o nível de indiferença entre a alavanca S e a alavanca C foi definido em 0. Valores acima de 0 indicavam uma preferência pela alavanca S (ou seja, seleção da alavanca S> 50% das tentativas de escolha concluídas), enquanto valores abaixo de 0 indicavam uma preferência pela alavanca C (ou seja, seleção da alavanca C> 50% das tentativas de escolha concluídas). Alguns ratos tiveram que ser excluídos do estudo porque não conseguiram adquirir o comportamento operante (ou seja, 20 de 132 ratos, sendo 16 na condição S- / C + e 4 na condição S + / C +). Especificamente, esses ratos completaram menos de 50% dos 8 testes de escolha diários após 15 dias de teste, um desempenho de escolha muito baixo para permitir uma medição confiável de suas preferências. As análises estatísticas foram executadas usando Statistica, versão 7.1 (Statsoft, Inc France).

Agradecimentos

Agradecemos a Anne Fayoux e Stephane Lelgouach pelos cuidados com animais, Pierre Gonzalez à assistência técnica, Marie-Hélène Bruyères à assistência administrativa, Caroline Vouillac à assistência logística, Christian Darrack por sua ajuda com a extração de dados, Alain Labarriere à assistência à manutenção da casa e finalmente, a Dra. Martine Cador para gerenciamento de laboratório. Também agradecemos ao Dr. Steve Negus por sua sugestão de testar a escolha de cocaína em função do preço de recompensa, Dr. Sallouha Aidoudi por seus comentários sobre uma versão anterior do manuscrito e os revisores por suas críticas e sugestões construtivas.

Contribuições do autor

Concebido e projetado os experimentos: SA. Realizou os experimentos: ML FS LC. Analisou os dados: SA ML FS. Escreveu o papel: SA. Outros: Ajudou na concepção das experiências: ML. Forneceu comentários críticos e forneceu materiais para o artigo: ML LC FS.

Referências

1. Chandrashekar J, Hoon MA, Ryba NJ, CS Zuker. (2006) Os receptores e células para o paladar dos mamíferos. Natureza 444: 288 – 94. Encontre este artigo online

2. Scott K. (2005) Reconhecimento do paladar: alimento para o pensamento. Neurônio 48: 455 – 64. Encontre este artigo online

3. Steiner JE. (1979) Expressões faciais humanas em resposta à estimulação do paladar e olfato. Adv Child Dev Behav 13: 257 – 95. Encontre este artigo online

4. Drewnowski A. (1997) Preferências de sabor e ingestão de alimentos. Annu Rev Nutr 17: 237 – 53. Encontre este artigo online

5. Berridge KC. (1996) Recompensa alimentar: substratos cerebrais de querer e gostar. Neurosci Biobehav Rev 20: 1-25. Encontre este artigo online

6. Sclafani A. (2004) Determinantes orais e postorais da recompensa alimentar. Physiol Behav 81: 773 – 9. Encontre este artigo online

7. Mintz SW (1985) Londres: Livros de pinguim. Doçura e poder: o lugar do açúcar na história moderna. 274 p.

8. Popkin BM, Nielsen SJ. (2003) O adoçamento da dieta mundial. Obes Res 11: 1325–32. Encontre este artigo online

9. Pelchat ML. (2002) Do cativeiro humano: desejo de comida, obsessão, compulsão e vício. Physiol Behav 76: 347 – 52. Encontre este artigo online

10. Blundell JE, Gillett A. (2001) Controle da ingestão de alimentos nos obesos. Obes Res 4: 263S – 270S. Encontre este artigo online

11. Berthoud HR. (2004) Mente versus metabolismo no controle da ingestão alimentar e balanço energético. Physiol Behav 81: 781 – 93. Encontre este artigo online

12. Hill JO, Peters JC. (1998) Contribuições ambientais para a epidemia de obesidade. Ciência 280: 1371 – 4. Encontre este artigo online

13. Ulijaszek SJ, Lofink H. (2006) Obesidade na perspectiva biocultural. Annu Rev Anthropol 35: 337 – 60. Encontre este artigo online

14. Malik VS, Schulze MB, Hu FB. (2006) Ingestão de bebidas açucaradas e ganho de peso: uma revisão sistemática. Am J Clin NutN 84: 274-88. Encontre este artigo online

15. Volkow ND, Wise RA. (2005) Como o vício em drogas pode nos ajudar a entender a obesidade? Nat Neurosci 8: 555-60. Encontre este artigo online

16. Kelley AE. (2004) Memória e vício: circuitos neurais compartilhados e mecanismos moleculares. Neurônio 44: 161 – 79. Encontre este artigo online

17. Levine AS, Kotz CM, Gosnell BA. (2003) Açúcares: aspectos hedônicos, neurorregulação e balanço energético. Am J Clin NutN 78: 834S - 842S. Encontre este artigo online

18. Hajnal A, GP Smith, Norgren R. (2004) Estimulação oral de sacarose aumenta a dopamina acumbens no rato. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286: R31-7. Encontre este artigo online

19. Mark GP, Blander DS, Hoebel BG. (1991) Um estímulo condicionado diminui a dopamina extracelular no núcleo accumbens após o desenvolvimento de uma aversão ao paladar. Res do cérebro 551: 308 – 10. Encontre este artigo online

20. Di Chiara G, Imperato A. (1988) Drogas abusadas por seres humanos aumentam preferencialmente as concentrações sinápticas de dopamina no sistema mesolímbico de ratos que se movimentam livremente. Proc Natl Acad Sci EUA 85: 5274 – 8. Encontre este artigo online

21. Pontieri FE, G Tanda, Orzi F, Di Chiara G. (1996) Efeitos da nicotina no nucleus accumbens e semelhança com os de drogas viciantes. Natureza 382: 255 – 7. Encontre este artigo online

22. Koob GF, Le Moal M. (2006) A neurobiologia da dependência. San Diego: imprensa acadêmica. 490 p. Encontre este artigo online

23. RA sábio. (2004) Dopamina, aprendizagem e motivação. Nat Rev Neurosci 5: 483-94. Encontre este artigo online

24. Lieblich I, Cohen E, Ganchrow Jr., Blass EM, Bergmann F. (1983) Tolerância à morfina em ratos geneticamente selecionados induzida por ingestão de sacarina cronicamente elevada. Ciência 221 871 – 3. Encontre este artigo online

25. d'Anci KE, Kanarek RB, Marks-Kaufman R. (1996) Duração da disponibilidade de sacarose diferencialmente altera analgesia induzida por morfina em ratos. Pharmacol Biochem Behav 54: 693 ± 7. Encontre este artigo online

26. Rudski JM, Billington CJ, Levine AS. (1997) Uma dieta de manutenção à base de sacarose aumenta a sensibilidade aos efeitos supressores do apetite da naloxona. Pharmacol Biochem Behav 58: 679-82. Encontre este artigo online

27. Kanarek RB, Mathes WF, LK Heisler, Lima RP, LS Monfared. (1997) A exposição prévia a soluções palatáveis ​​aumenta os efeitos da naltrexona na ingestão de alimentos em ratos. Pharmacol Biochem Behav 57: 377-81. Encontre este artigo online

28. Colantuoni C, Rada P, McCarthy J, Patten C, Avena NM, et al. (2004) Evidências de que a ingestão excessiva e intermitente de açúcar causa dependência opiácea endógena. Obes Res 10: 478 – 88. Encontre este artigo online

29. Wang GJ, ND Volkow, Thanos PK, Fowler JS. (2004) Similaridade entre obesidade e dependência de drogas, avaliada por imagem neurofuncional: uma revisão conceitual. J Addict Dis 23: 39 – 53. Encontre este artigo online

30. Wang GJ, Yang J, ND Volkow, Telang F, Ma Y, et al. (2006) Estimulação gástrica em indivíduos obesos ativa o hipocampo e outras regiões envolvidas no circuito de recompensa do cérebro. Proc Natl Acad Sci EUA 103: 15641 – 5. Encontre este artigo online

31. Carroll ME, Lac ST, Nygaard SL. (1989) Um reforçador não medicamentoso concomitantemente impede a aquisição ou diminui a manutenção do comportamento reforçado com cocaína. Psicofarmacologia 97: 23 – 9. Encontre este artigo online

32. Carroll ME, Lac ST. (1993) Auto-administração de cocaína iv autofolhada em ratos: efeitos de reforçadores alternativos não-fármacos na aquisição. Psicofarmacologia 110: 5 – 12. Encontre este artigo online

33. Nutt D, Rei LA, Saulsbury W, Blakemore C. (2007) Desenvolvimento de uma escala racional para avaliar o dano de drogas de potencial uso indevido. Lancet 369: 1047 – 1053. Encontre este artigo online

34. Ahmed SH, Koob GF. (1998) Transição do consumo moderado para excessivo de drogas: mudança no set point hedônico. Ciência 282: 298 – 300. Encontre este artigo online

35. Ahmed SH, Kenny PJ, Koob GF, Markou A. (2002) Evidências neurobiológicas para a alostase hedônica associada ao uso crescente de cocaína. Nat Neurosci 5: 625-6. Encontre este artigo online

36. Vanderschuren LJ, Everitt BJ. (2004) A procura de drogas torna-se compulsiva após a auto-administração prolongada de cocaína. Ciência 305: 1017 – 9. Encontre este artigo online

37. Mateo Y, Budygin EA, Morgan D, Roberts DC, Jones SR. (2004) Início rápido da inibição da captação de dopamina por cocaína intravenosa. Eur J Neurosci 20: 2838-42. Encontre este artigo online

38. Williams KL, Woods JH. (2000) Uma análise econômica comportamental de respostas simultâneas reforçadas com etanol e água em diferentes condições de preferência. Álcool Clin Exp Res 24: 980-6. Encontre este artigo online

39. Herrnstein RJ. (1970) Sobre a lei do efeito. J Exp Anal Behav 13: 243 - 266. Encontre este artigo online

40. Nader MA, Woolverton WL. (1991) Efeitos do aumento da magnitude de um reforçador alternativo na escolha de drogas em um procedimento de escolha de ensaios discretos. Psicofarmacologia 105: 169 – 74. Encontre este artigo online

41. Negus SS. (2003) Avaliação rápida da escolha entre cocaína e alimentos em macacos rhesus: efeitos de manipulações ambientais e tratamento com d-anfetamina e flupentixol. Neuropsicofarmacologia 28: 919 – 31. Encontre este artigo online

42. Aigner TG, Balster RL. (1978) Comportamento de escolha em macacos rhesus: cocaína versus alimento. Ciência 201: 534 – 5. Encontre este artigo online

43. Woolverton WL, Balster RL. (1979) Os efeitos do lítio na escolha entre cocaína e alimento no macaco rhesus. Psicofarmacologia Comunitária 3: 309 – 18. Encontre este artigo online

44. AD avermelhado. (2004) Addiction como um processo computacional que deu errado. Ciência 306: 1944 – 7. Encontre este artigo online

45. Montague PR, Hyman SE, Cohen JD. (2004) Papéis computacionais para dopamina no controle comportamental. Natureza 431: 760 – 7. Encontre este artigo online

46. Robinson TE, Berridge KC. (2003) Dependência. Annu Rev Psychol 54: 25-53. Encontre este artigo online

47. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. (2006) Mecanismos neurais da dependência: o papel da aprendizagem relacionada à recompensa e da memória. Annu Rev Neurosci 29: 565-98. Encontre este artigo online

48. Robbins TW, Everitt BJ. (1999) Dependência de drogas: maus hábitos se somam. Natureza 398: 567 – 70. Encontre este artigo online

49. Di Chiara G. (1999) Toxicodependência como distúrbio de aprendizagem associativa dependente da dopamina. Eur J Pharmacol 375: 13 – 30. Encontre este artigo online

50. Kelley AE, Will MJ, Steininger TL, Zhang M. Haber SN. (2004) O consumo diário restrito de um alimento altamente palatável (chocolate Ensure (R)) altera a expressão do gene da encefalina estriatal. Eur J Neurosci 18: 2592-8. Encontre este artigo online

51. Spangler R, Wittkowski KM, Goddard NL, Avena NM, Hoebel BG, Leibowitz SF. (2004) Efeitos do açúcar semelhantes ao opiáceo na expressão gênica em áreas de recompensa do cérebro de ratos. Cérebro Res Mol Res do cérebro 124: 134-42. Encontre este artigo online

52. Kelley AE, Bakshi VP, Haber SN, Steininger TL, Will MJ, Zhang M. (2002) modulação opiáceos do sabor hedônico dentro do estriado ventral. Physiol Behav 76: 365 – 77. Encontre este artigo online

53. Pecina S, Smith KS, Berridge KC. (2006) Pontos quentes hedônicos no cérebro. Neurocientista 12: 500 – 11. Encontre este artigo online

54. Ettenberg A, Geist TD. (1991) Modelo animal para investigar os efeitos ansiogênicos da cocaína autoadministrada. Psicofarmacologia 103: 455 – 61. Encontre este artigo online

55. Koob GF. (1999) Estresse, fator de liberação de corticotropina e dependência de drogas. Ann NY Acad Sci 897: 27 - 45. Encontre este artigo online

56. Tinbergen N (1951) Nova York: Oxford University Press. O estudo do instinto ..

57. Kilner RM, Noble DG, Davies NB. (1999) Sinais de necessidade na comunicação pai-filhos e sua exploração pelo cuco comum. Natureza 397: 667 – 72. Encontre este artigo online

58. Williams GC (1966) Princeton: Imprensa da Universidade de Princeton. Adaptação e seleção natural. 307 p.

59. Collier G, Novell K. (1967) Sacarina como substituto do açúcar. J Comp Physiol Psychol 64: 401-8. Encontre este artigo online

60. Smith JC, Sclafani A. (2004) Sacarina como substituto do açúcar revisitado. Apetite 38: 155 – 60. Encontre este artigo online

61. Zittel-Lazarini A, Cador M, Ahmed SH. (2007) Uma transição crítica na autoadministração de cocaína: implicações comportamentais e neurobiológicas. Psicofarmacologia 192: 337 – 46. Encontre este artigo online

62. Avena NM, Rada P, N Moise, Hoebel BG. (2006) A alimentação simulada com sacarose em regime abray libera a dopamina accumbens repetidamente e elimina a resposta de saciedade da acetilcolina. Neurosci 139: 813 – 820. Encontre este artigo online

63. Di Ciano P, Coury A, Depoortere RY, Egilmez Y, Pista JD, Emmett-Oglesby MW, Lepiane FG, Phillips AG, CD de Blaha. (1995) Comparação das alterações das concentrações extracelulares de dopamina no nucleus accumbens durante a autoadministração endovenosa de cocaína ou d-anfetamina. Behav Pharmacol 6: 311-322. Encontre este artigo online

64. Doyon WM, Ramachandra V, Sansão HH, Czachowski CL, Gonzales RA. (2004) Concentração de dopamina durante a autoadministração operante de uma sacarose ou uma nova sacarose com solução de etanol. Álcool 34: 361 – 371. Encontre este artigo online

65. Hajnal A. Comunicação pessoal com Serge Ahmed Encontrar este artigo online

66. Hajnal A, Norgren R. (2001) Mecanismos de dopamina Accumbens no consumo de sacarose. Res do cérebro 904: 76 – 84. Encontre este artigo online

67. Hajnal A, Norgren R. (2002) O acesso repetido à sacarose aumenta o turnover da dopamina no nucleus accumbens. Neuroreport 13: 2213 – 2216. Encontre este artigo online

68. Hajnal A, GP Smith, Norgren R. (2004) A sacarose oral aumenta a dopamina acumbens no rato. American Journal of Physiology. Fisiologia reguladora, integrativa e comparativa 286: R31-R37. Encontre este artigo online

69. Hemby SE, Co C, Dworkin SI, Smith JE. (1999) Elevações sinérgicas nas concentrações de dopamina extracelular do nucleus accumbens durante a auto-administração de combinações de cocaína / heroína (speedball) em ratos. J Pharmacol Exp Therap 288: 274-280. Encontre este artigo online

70. Hemby SE, Co C, Koves TR, Smith JE, Dworkin SI. (1997) Diferenças nas concentrações de dopamina extracelular no nucleus accumbens durante a administração de cocaína dependente de resposta e independente de resposta no rato. Psicofarmacologia 133: 7 – 16. Encontre este artigo online

71. Mark GP, Blander DS, Hoebel BG. (1991) Um estímulo condicionado diminui a dopamina extracelular no núcleo accumbens após o desenvolvimento de uma aversão ao paladar. Res do cérebro 551: 308 – 310. Encontre este artigo online

72. Meil WM, rolo JM, Grimm JW, Lynch AM, ver RE. (1995) Atenuação semelhante à tolerância à elevação contingente e não contingente da dopamina extracelular induzida pela cocaína no estriado ventral após 7 dias de retirada do tratamento crônico. Psicofarmacologia 118: 338 – 346. Encontre este artigo online

73. Melendez RI, Rodd-Henricks ZA, Engleman EA, TK Li, McBride WJ, Murphy JM. (2002) Microdiálise da dopamina no nucleus accumbens de ratos preferidos pelo álcool (P) durante a antecipação e auto-administração operante de etanol. Álcool Clin Exp Res 26: 318-325. Encontre este artigo online

74. Pettit HO, Justice JB. (1991) Efeito da dose no comportamento de autoadministração de cocaína e nos níveis de dopamina no nucleus accumbens. Res do cérebro 539: 94 – 102. Encontre este artigo online

75. Pontieri FE, Tanda G. Di Chiara G. (1995) A cocaína, a morfina e a anfetamina por via venosa preferencialmente aumentam a dopamina extracelular na “casca” em comparação com o “núcleo” do núcleo accumbens do rato. Proc Natl Acad Sci EUA 92: 12304 – 12308. Encontre este artigo online

76. Rada P, Avena NM, Hoebel BG. (2005) A ingestão compulsiva diária de açúcar libera repetidamente dopamina na casca do núcleo accumbens. Neurosci 134: 737 – 744. Encontre este artigo online

77. Sizemore GM, Co C, Smith JE. (2000) Níveis de líquido extracelular pálido ventral de dopamina, serotonina, ácido gama amino butírico e glutamato durante a autoadministração de cocaína em ratos. Psicofarmacologia 150: 391 – 398. Encontre este artigo online

78. Weiss F, Lorang MT, Flor FE, Koob GF. (1993) A auto-administração de álcool por via oral estimula a liberação de dopamina no núcleo accumbens de ratos: determinantes genéticos e motivacionais. J Pharmacol Exp Therap 267: 250-258. Encontre este artigo online

79. RA Wise, Newton P, Leeb K, B Burnette, Pocock D, Justiça JB. (1995) Flutuações na concentração de dopamina do nucleus accumbens durante a autoadministração intravenosa de cocaína em ratos. Psicofarmacologia 120: 10 – 20. Encontre este artigo online

80. Norgren R, Hajnal A, Mungarndee SS. (2006) Recompensa gustativa e o núcleo accumbens. Physiol Behav 89: 531 – 5. Encontre este artigo online