Funktionell roll hos ΔFosBs N-terminala domän i respons på stress och missbrukande medel (2014)

Neuroscience. 2014 Oct 10. pii: S0306-4522(14)00856-2. doi: 10.1016/j.neuroscience.2014.10.002.

Ohnishi YN1, Ohnishi YH1, Vialou V2, Mouzon E2, LaPlant Q2, Nishi A3, Nestler EJ4.

Abstrakt

Tidigare arbete har medfört transkriptionsfaktorn, ΔFosB, som verkar i kärnan accumbens, för att medla de pro-givande effekterna av missbruksmedel som kokain samt förmedlande motståndskraft mot kronisk social stress. De transgena och virala genöverföringsmodellerna som används för att etablera dessa ΔFosB-fenotyper uttrycker emellertid, förutom AFosB, en alternativ translationsprodukt av AFosB-mRNA, benämnt A2AFosB, som saknar den N-terminala 78 aa som är närvarande iAFFosB. För att studera Δ2ΔFosBs möjliga bidrag till dessa läkemedels- och stressfenotyper, beredde vi en viral vektor som överuttrycker en punktmutantform av FosB mRNA som inte kan genomgå alternativ translation såväl som en vektor som överuttrycker Δ2ΔFosB ensam. Våra resultat visar att mutantformen av ΔFosB, när den är överuttryckt i kärnan accumbens, reproducerar förbättringen av belöning och motståndskraft som ses med våra tidigare modeller, utan effekter som ses för Δ2ΔFosB. Överuttryck av full längd FosB, den andra huvudprodukten av FosB-genen, har också ingen effekt. Dessa fynd bekräftar den unika rollen av ΔFosB i kärnan accumbens i kontroll av svar på droger av missbruk och stress.

INLEDNING

ΔFosB kodas av FosB genen och delar homologi med andra Fos familjetransskriptionsfaktorer, som inkluderar c-Fos, FosB, Fra1 och Fra2. Alla Fos-familjeproteiner induceras snabbt och övergående i specifika hjärnregioner efter akut administrering av många missbruksmedel [se ]. Dessa svar ses mest framträdande i Nucleus Accumbens (NAc) och Dorsal Stripatum, som är viktiga medlare av läkemedlets givande och lokomotoriska verkningar. Alla dessa Fos-familjeproteiner är emellertid mycket instabila och återgår till basala nivåer inom några timmar efter administrering av läkemedel. I motsats till detta, ΔFosB, på grund av dess ovanliga stabilitet in vitro och in vivo (; Carle et al., 2006; ) ackumuleras unikt inom samma hjärnregioner efter upprepad läkemedelsexponering (; ; ). Nyare studier har visat att kronisk exponering mot vissa former av stress också inducerar ackumulering av ΔFosB i NAc och att sådan induktion sker företrädesvis hos djur som är relativt resistenta mot stressens skadliga effekter (dvs fjädrande djur) (; , ).

Vi har visat att överuttryck av ΔFosB i NAc, antingen i inducerbara bitransgena möss eller genom lokal viralmedierad genöverföring, ökar ett djurs känslighet för de givande och lokomotoriska aktiviserande effekterna av kokain och andra missbruksmissbruk (; ; ; ; Robison et al., 2013). Sådan induktion ökar också konsumtionen av och motivationen för naturliga belöningar (; ; ; ; ; Pitchers et al., 2009; ) ökar hjärnstimuleringsbelöning i intra-kraniella självstimuleringsparadigmer () och gör djur mer motståndskraftiga mot flera former av kronisk stress (, ). På liknande sätt kan möss som konstitutivt saknar uttryck av full längd FosB, men visar ökat uttryck FFosB, visat minskad känslighet för stress (). Tillsammans stöder dessa resultat uppfattningen att ΔFosB, som verkar i NAc, ökar ett djurs tillstånd av belöning, humör och motivation.

En stor försening av dessa studier är dock att en annan produkt av FosB genen, betecknad Δ2ΔFosB, uttrycks också i alla dessa genetiska mutantmöss och virala vektorsystem, varvid det möjliga bidraget av Δ2ΔFosB till de observerade beteendemässiga fenotyperna öppnas. Δ2ΔFosB översätts från ett alternativt startkodon som ligger inom ΔFosB mRNA transkript (). Denna alternativa översättning leder till bildningen av Δ2ΔFosB, som saknar 78 N-terminalen aa av FFosB. I denna studie undersökte vi rollen av Δ2ΔFosB i drogmissbruk och stressmodeller genom att överuttrycka den, eller ΔFosB eller FosB, med AAV (adeno-associerade virus) -vektorer; vi använde en mutantform av ΔFosB mRNA som inte kan genomgå denna alternativa översättningsmekanism. Våra resultat bekräftar att de pro-belöning och pro-fjädrande åtgärder som ses i tidigare studier faktiskt medieras via ΔFosB och inte av de två andra protenprodukterna i FosB gen, full längd FosB eller Δ2ΔFosB.

METODER

djur

Före experimentet gruppades 9- till 11-veckobarn C57BL / 6J hanmöss (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA) grupp på fem per bur i ett koloni rum satt vid konstant temperatur (23 ° C) på en 12 hr ljus / mörk cykel (tänds på 7 AM) med ad libitum tillgång till mat och vatten. Några försök utnyttjade bitransgena möss i vilka överuttryck av FFosB är under kontroll av tetracyklingenregleringssystemet, såsom beskrivits (). Möss användes på doxycyklin (för att upprätthålla genuttryck av) eller bort från doxycyklin vilket möjliggör ΔFosB-uttryck. Alla protokoll godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) på Mount Sinai.

AAV vektorer

Vi använde AAV2 serotyp för förpackning av AAV-vektorer som uttrycker full längd FosB, ΔFosB eller Δ2ΔFosB under den humana omedelbara cytomegalovirus-promotorn (CMV) med Venus-fluorescerande protein kodade efter en intervenerande IRES2 (intern ribosomåterställningsplats 2). AAV-ΔFosB-konstruktionen uttryckte en mutant form av AFosB mRNA, där kodonet som representerar Met79 muterades till Leu för att utplåna den alternativa translationsstartplatsen som alstrar A2AFosB.

Viral-medierad genöverföring

Mössen placerades i stereotaxiska instrument av små djur under ketamin (100 mg / kg) och xylazin (10 mg / kg) anestesi och deras kranytor exponeras. Trettiotre gauge-sprutnålarna sänktes bilateralt i NAc för att infiltrera 0.5 μl AAV-vektor vid en 10 ° -vinkel (främre / posterior + 1.6; medial / lateral + 1.5; dorsal / ventral-4.4 mm). Infusioner uppträdde med en hastighet av 0.1 μl / min. Djur som mottog AAV-injektioner fick återvinna i minst 24-tim efter operationen. För bekräftelse av uttryck bedövades mössen och perfusionerades intrakardiellt med 4% paraformaldehyd / PBS (fosfatbuffrad saltlösning). Hjärnor kryoprotekterades med 30% sackaros och frystes sedan och lagrades vid -80 ° C tills användning. Koronala sektioner (40 μm) skars på en kryostat och behandlades för avsökning med konfokal mikroskopi.

Beteendeprovning

Möss studerades med flera standardbeteendeanalyser enligt publicerade protokoll enligt följande:

Kroniska (10 dagar) social nederlag stress utfördes exakt som beskrivet (; ). I korthet sattes en experimentell mus och en CD1-aggressor för 5-min i CD1-musens hembur. De separerades sedan av en plastdelare som perforerades för att möjliggöra sensorisk kontakt för dagens påminnelse. Varje morgon för 10 dagar flyttades den experimentella musen till en annan aggressormus bur. Icke-slagna kontrollmöss genomgick liknande exponeringar, men med andra C57BL / 6J-möss. Test för social interaktion utfördes som tidigare beskrivits (; ). Kortfattat placerades testmusen i en ny arena som innefattade en liten bur på ena sidan. Rörelse (t ex avstånd, som spenderades i närheten av denna lilla bur) övervakades initialt för 150 sek när lilla buret var tomt följt av en ytterligare 150 sek med en CD1-mus i den buren. Rörelsesinformation erhölls med hjälp av EthoVision 5.0-programvara (Noldus).

Vi använde en standard, objektiv konditionerad platspreferens (CPP) -proceduren (; Robison et al., 2013). I korthet föreställdes djur för 20 min i en fotokalmonterad trekammad låda med fri tillgång till miljömässigt distinkta sidokamrar. Mössen delades sedan in i kontroll- och experimentella grupper med motsvarande förutbestämda poäng. Efter experimentell manipulation genomgick möss fyra 30 min träningssessioner (alternerande kokain och saltlösning). På testdagen hade möss 20 min obegränsad tillgång till alla kamrar, och ett CPP-poäng beräknades genom att subtrahera tid som spenderades i den kokainparade kammaren minus tiden som spenderades i saltlösningsparrerade kammaren. Kokaininducerad lokomotorisk aktivitet uppmättes via fotbågsavbrott i CPP-lådan för 30 min efter varje testinjektion.

Förhöjd plus labyrint tester utfördes med användning av svart plexiglas försedd med vita bottenytor för att ge kontrast (). Möss placerades i mitten av plus labyrinten och fick fritt utforska labyrinten för 5 min under röda ljusförhållanden. Positionen för varje mus över tiden i de öppna och stängda armarna övervakades med videotrackutrustning (Ethovision) och en takmonterad kamera.

Allmänt, ambulerande lokomotorisk aktivitet under nattfasen bedömdes i hemburar med en fotocellnätanordning (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA) som räknade antalet ambulatoriska fotostrålbrott under en 12-tidsperiod ().

Western blotting

NAc-prover utsattes för Western blotting enligt beskrivning (, ). Frysta NAc-dissektioner homogeniserades i 100 / il buffert innehållande fosfatasinhibitor cocktails I och II (Sigma, St. Louis, MO, USA) och proteashämmare (Roche, Basel, Schweiz) med användning av en ultraljudsprocessor (Cole Parmer, Vemon Hills, IL , USA). Proteinkoncentrationer bestämdes med användning av en DC-proteinanalys (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) och 10-30 ^ g protein laddades på 12.5% eller 4% -15% gradient Tris-HCl-plyakrylamidgeler för elektroforesfraktionering -RAD). Efter överföring av proteiner till nitrocellulosafilter inkuberades filtren med en anti-FosB antikropp som igenkänner alla FosB genprodukter, sedan med sekundär antikropp, och slutligen kvantifieras med användning av Odyssey-systemet (Li-Cor) enligt tillverkarprotokoll.

Statistik

ANOVA och studentens t-test användes, korrigerade för flera jämförelser, med betydelse inställd på p <0.05.

RESULTAT

Som visas i Figur 1A, den FosB genen kodar för mRNA för full längd FosB och för ΔFosB. ΔFosB mRNA genereras från en alternativ splitsningshändelse inom Exon 4 av FosB primär transkript; detta resulterar i alstring av ett för tidigt stoppkodon och till det trunkerade ΔFosB-proteinet, vilket saknar den C-terminala 101 aa närvarande i FosB. FosB och AFosB mRNA delar samma ATG startkodon, belägen mot 3 'slutet av Exon 1. Det har varit känt sedan den ursprungliga kloningen av FosB produkter som de två mRNA: n också delar alternativa translationsstartplatser inom Exon 2, benämnda Δ1, Δ2 och Δ3 ATG. Tidigare arbete visade att en mindre proteinprodukt genereras från AFosB mRNA, men inte FosB mRNA via A2 ATG; detta protein benämns A2AFosB och saknar 78 aa N-terminala regionen avFosB (). I motsats härtill verkar Δ1 och Δ3 ATG vara tysta, eftersom det inte finns några bevis för deras användning vid översättning av FosB eller ΔFosB transkript.

Figur 1 

Uttrycksnivåer av FosB genprodukter

Figur 1B illustrerar induktionen av FosB genprodukter i NAc efter en upprepad kokainadministration, med djur som undersöktes 2 tim efter den sista kokaindosen. Vid denna tidpunkt visar både ΔFosB- och FosB-proteiner signifikant induktion av kokain, utan konsekvent induktion av Δ2ΔFosB. Observera att induktionen av både ΔFosB och FosB skiljer sig från mönstret ses vid 24 timmar eller mer efter den sista läkemedelsdosen, då endast ΔFosB induceras på grund av den unika stabiliteten hos FFB-proteinet (; ; ). I motsats till bristen på induktion av Δ2ΔFosB genom upprepad kokainadministration, har det bitransgena mussystemet vi använt för att överuttrycka ΔFosB och därigenom studera dess beteendekonsekvenser (; ; ) leder till signifikanta, om än lägre nivåer av överuttryck av Δ2ΔFosB utöver ΔFosB (Figur 1C). En liknande nivå av induktion av Δ2ΔFosB ses med våra virala vektorer som överuttrycker vildtyp ΔFosB (t ex se Figur 2). Dessa observationer ger upphov till möjligheten att några av de påstådda åtgärderna av ΔFosB som rapporterats tidigare kan förmedlas delvis via Δ2ΔFosB.

Figur 2

Selektivt uttryck av FosB genprodukter med AAV-vektorer i Neuro2A-celler

För att skilja skillnaderna mellan ΔFosB och Δ2ΔFosB genererade vi en AAV-vektor som överuttrycker Δ2ΔFosB ensam, liksom en ny vektor som överuttrycker en mutantform av ΔFosB mRNA (mΔFosB mRNA) som inte kan utsättas för alternativ translation för att alstra Δ2AFosB. Båda vektorerna uttrycker också Venus som en markör för uttryck. Vi jämförde effekterna av dessa två vektorer till andra, som uttrycker FosB plus Venus eller Venus ensam som en kontroll. Förmågan hos dessa nya AAV-vektorer att selektivt överuttrycka deras kodade transgener är avbildad i Figur 2.

Därefter för att testa effekten av varje FosB genprodukt, som verkar i NAc. På komplext beteende injicerade vi var och en av dessa AAV i denna hjärnregion bilateralt av separata grupper av möss och 3 veckor senare när transgenuttryck är maximal (Figur 3A) utförde ett batteri av test. Vi utvärderade först förmågan hos FosB genprodukter som påverkar den pro-resiliencefenotyp som tidigare rapporterats för ΔFosB i det sociala nederlagsparadigmet (, ), Som visas i Figur 3A, kontrollmus som uttryckte Venus ensam visade den förväntade minskningen i socialt interaktionsbeteende, en väletablerad beteendemärkning av känslighet (; ). Överuttryck av mΔFosB reverserade denna fenotyp fullständigt, i motsats till Δ2AFosB och FosB som inte hade någon effekt.

Figur 3 

Effekten av FosB genprodukter i NAc på beteendemässiga svar på kokain eller social stress

Att testa det relativa bidraget för varje FosB genprodukt till de främsta effekterna av kokain överuttryckte vi Δ2ΔFosB själv, mΔFosB eller FosB bilateralt i NAc och studerade djuren i det konditionerade platspreferensparadigmet. Som visas i Figur 3B, ökar bilateral överuttryck av mΔFosB i NAc-ställningen för konditioneringseffekter av en tröskeldos av kokain, vilket inte gav en signifikant platspreferens hos Venus-uttryckande kontrolldjur. I motsats till detta hade överuttryck av Δ2ΔFosB eller FosB ingen effekt på kokainplacering. Eftersom vi använde en tröskeldos av kokain, som inte producerade en betydande platspreferens hos kontrolldjur, kan vi inte utesluta möjligheten att FosB eller Ax2ΔFosB kan minska de givande effekterna av kokain.

Slutligen, för att utvärdera baslinjebeteenden, undersökte vi lokomotorisk aktivitet i djurs hembur samt angstliknande beteende i den förhöjda plus labyrinten. FosB, mΔFosB eller A2ΔFosB-överuttryck i NAc hade en effekt på lokomotorisk aktivitet, även om FosB och A2ΔFosB-men inte mΔFosB-producerade en liten men signifikant minskning av ångestliknande beteende i den förhöjda plus labyrinten (Figur 3D, E). Dessa data tyder på att FosB genuttryck förändrar inte påtagligt beteende under normala förhållanden.

DISKUSSION

Resultaten av föreliggande studie bekräftar att fenotypen som tidigare rapporterats för ΔFosB verkligen medieras via ΔFosB och inte av A2ΔFosB, en alternativt översatt produkt av ΔFosB mRNA som saknar ΔFosB: s N-terminus. Medan våra tidigare använda verktyg för att överuttrycka ΔFosB också resulterar i alstring av låga nivåer av Δ2ΔFosB, visar vi här att överuttryck i NAc av en muterad form av ΔFosB mRNA, som inte kan generera Δ2ΔFosB på grund av mutation av det alternativa startkodon som är inblandat, rekapitulerar ökningen både i kokainbelöning och i motståndskraft mot social nedslagsspänning som tidigare rapporterats för ΔFosB (; ). Dessutom har överuttryck av Δ2ΔFosB inte någon effekt på antingen kokain eller stressrespons. Vi visar också för första gången att överuttryck av full längd FosB i NAc inte heller har någon effekt på beteendemässigt svar på kokain eller stress.

Medan dessa resultat inte utesluter möjligheten att Δ2ΔFosB, som en mindre proteinprodukt av FosB genen, kan utöva funktionella effekter i andra hjärnregioner eller i perifera vävnader, bekräftar våra resultat ändå unikt bidrag från ΔFosB, som verkar i NAc-belöningskretsen, för att främja kokainbelöning och spänningsfasthet.

slingor

  • ΔFosB mRNA ger upphov till ΔFosB och till mindre alternativt översatt Δ2ΔFosB.
  • Överuttryck av ΔFosB ensam bekräftar sin fenomen för pro-belöning och pro-resilience.
  • I motsats till detta har Δ2ΔFosB ingen effekt på kokainbelöning eller stressproblem.
  • Full längd FosB, kodad av FosB mRNA, påverkar inte heller belöning eller motståndskraft.

Erkännanden

Detta arbete stöddes av bidrag från National Institute of Mental Health och National Institute on Drug Abuse, och av Ishibashi Foundation och Japan Society for Promotion of Science (JSPS KAKENHI nummer: 24591735).

fotnoter

Ansvarsfriskrivning för förlag: Detta är en PDF-fil av ett oediterat manuskript som har godkänts för publicering. Som en tjänst till våra kunder tillhandahåller vi denna tidiga version av manuskriptet. Manuskriptet kommer att genomgå copyediting, uppsättning och granskning av det resulterande beviset innan det publiceras i sin slutliga formulär. Observera att under tillverkningsprocessen kan det upptäckas fel som kan påverka innehållet och alla juridiska ansvarsfrister som gäller för tidskriften avser.

referenser

  1. Var LE, Hedges VL, Vialou V, Nestler EJ, Meisel RL. Delta JunD uttryck i kärnan accumbens förhindrar sexuell belöning i kvinnliga syriska hamstrar. Genes Brain Behav. 2013; 12: 666-672. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  2. Berton O, McClung CA, DiLeone RJ, Krishnan V, Russo S, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNF: s viktig roll i den mesolimbiska dopaminvägen i social nederlagsspänning. Vetenskap. 2006; 311: 864-868. [PubMed]
  3. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Frånvaro av konserverad C-terminal degron-domän bidrar till ΔFosBs unika stabilitet. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
  4. Chen JS, Kelz MB, Hopp BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kroniska Fos-relaterade antigener: stabila varianter av deltaFosB inducerad i hjärnan genom kroniska behandlingar. J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941. [PubMed]
  5. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB ökar incitamentet för kokain. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  6. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB modulerar differentiellt kärnan accumbens direkt och indirekt vägfunktion. Proc Natl Acad Sci USA. 2013; 110: 1923-1927. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  7. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. ΔFosB-överuttryck i kärnan accumbens ökar sexuell belöning i kvinnliga syriska hamstrar. Genes Brain Behav. 2009; 8: 442-449. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  8. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB-mutantmöss: Förlust av kronisk kokaininduktion av Fos-relaterade proteiner och ökad känslighet mot kokainens psykomotoriska och givande effekter. Proc Natl Acad Sci USA. 1997; 94: 10397-10402. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  9. Hoppas BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av ett långvarigt AP-1-komplex bestående av förändrade Fos-liknande proteiner i hjärnan av kronisk kokain och andra kroniska behandlingar. Nervcell. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Själv DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Uttryck av transkriptionsfaktorn FosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Natur. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  11. Monteggia LM, Luikart B, Barrot M, Theobald D, Malkovska I, Nef S, Parada LF, Nestler EJ. BDNF villkorliga knockouts visar könsskillnader i depression relaterade beteenden. Biolpsykiatri. 2007; 61: 187-197. [PubMed]
  12. Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr ΔFosB ökar de givande effekterna av kokain samtidigt som de pro-depressiva effekterna av kappa-opioidagonisten U50488 reduceras. Biolpsykiatri. 2012; 71: 44-50. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  13. Nestler EJ. Transkriptionsmekanismer för missbruk: deltaFosB: s roll. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008; 363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  14. Ohoshi YN, Ohnishi YH, Hokama M, Nomaru H, Yamazaki K, Tominaga Y, Sakumi K, Nestler EJ, Nakabeppu Y. FosB är avgörande för ökad stresstolerans och motverkar lokomotorisk sensibilisering av FosB. Biolpsykiatri. 2011; 70: 487-495. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  15. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery P, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av ΔFosB i belöningsrelaterade hjärnområden efter kronisk stress. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  16. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkta mönster av ΔFosB induktion i hjärnan av missbruk. Synapse. 2008; 62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  17. Platser KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. ΔFosB i kärnan accumbens är avgörande för förstärkande effekter av sexuell belöning. Genes Brain Behav. 2010; 9: 831-840. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  18. Platser KK, Vialou V, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. Sexuell erfarenhet ökar amfetaminbelöningen och kärnan accumbens spinogenes via dopamin D1-receptoraktivitet och induktion av deltaFosB. J Neurosci. 2013; 33: 3434-3442. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Roybal K, Theobold D, DiNieri JA, Graham A, Russo S, Krishnan V, Chakravarty S, Peevey J, Oehrlein N, Birnbaum S, Vitaterna MH, Orsulak P, Takahashi JS, Nestler EJ, Carlezon WA, Jr, McClung CA. Mania-liknande beteende inducerad av störning av CLOCK. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 6406-6411. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  20. Teegarden SL, Bale TL. Minskningar i kosttillskott ger ökad känslighet och risk för återfall av kost. Biolpsykiatri. 2007; 61: 1021-1029. [PubMed]
  21. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Reglering av ΔFosB-stabilitet genom fosforylering. J Neurosci. 2006; 26: 5131-5142. [PubMed]
  22. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering av ΔFosB medierar dess stabilitet in vivo. Neuroscience. 2009; 158: 369-372. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, III, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, III, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren B, Krishnan V, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, Nestler EJ. ΔFosB i hjärnbelöningskretsar medierar motståndskraft mot stress och antidepressiva reaktioner. Natur Neurosci. 2010a; 13: 745-752. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  24. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ. Serumresponsfaktorn främjar motståndskraft mot kronisk social stress genom induktion av ΔFosB. J Neurosci. 2010b; 30: 14585-14592. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  25. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham D, Green TA, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños CA. Påverkan av ΔFosB i kärnan accumbens på naturligt belöningsrelaterat beteende. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB reglerar hjullöpning. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  27. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. ΔFosB: En väsentlig roll för ΔFosB i kärnan accumbens i morfinåtgärd. Natur Neurosci. 2006; 9: 205-211. [PubMed]