Comentários: Em um modelo de camundongo com Parkinson, o exercício em esteira aumentou os receptores D2 de dopamina. Os vícios causam um declínio nos receptores D2, que é parcialmente a causa da dessensibilização. Outro motivo para fazer exercícios.
Distúrbios do Movimento
Volume 25, Edição 16, páginas 2777-2784, 15 Dezembro 2010
Sumário
O objetivo do presente estudo foi examinar as mudanças na expressão do receptor dopaminérgico D2 (DA-D2R) nos gânglios da base de camundongos MPTP submetidos ao exercício intensivo em esteira. Usando Western Western immunoblotting análise de synaptoneurosomes e in vivo tomografia por emissão de pósitrons (PET) utilizando o ligante específico DA-D2R [18F] fallypride, descobrimos que o exercício em esteira de alta intensidade levou a um aumento na expressão de DA-D2R estriatal que foi mais pronunciado em MPTP em comparação com camundongos tratados com solução salina. As alterações induzidas pelo exercício no DA-D2R nos gânglios da base depletados com dopamina são consistentes com o papel potencial deste receptor na modulação da função de neurônios espinhosos médios (MSNs) e recuperação comportamental. É importante ressaltar que os achados deste estudo apoiam a justificativa para o uso de imagens PET com [18F] fallypride para examinar as alterações de DA-D2R em indivíduos com doença de Parkinson (DP) submetidos a treinamento em esteira de alta intensidade.
Exercício melhora o desempenho motor em pacientes com doença de Parkinson (DP).1-3 Modelos animais, como o rato 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetra-hidropiridina (MPTP), fornecem uma ferramenta crítica para investigar os mecanismos moleculares da melhora induzida pelo exercício no comportamento motor.4-6 Os receptores dopaminérgicos D1 e D2 (DA-D1R e DA-D2R) são os principais alvos da dopamina nos neurônios espinhais do meio estriado (MSNs) e modulam as propriedades fisiológicas e a sinalização celular. Especificamente, o DA-D2R desempenha um papel importante na depressão a longo prazo (LTD), uma forma de plasticidade sináptica que envolve a integração da neurotransmissão glutamatérgica e dopaminérgica, levando à codificação da função motora no estriado dorsolateral. Dado o papel do DA-D2R no controle motor, procuramos examinar se a melhora do exercício na função motora se deve em parte ao aumento da expressão do DA-D2R no estriado.
A tomografia por emissão de pósitrons (PET) - com radiotraçadores DA-D2R oferece a capacidade de realizar estudos longitudinais sobre o efeito do exercício em humanos. Estudos anteriores com exercícios aeróbicos tentaram medir a liberação de dopamina em indivíduos normais7 e nenhuma mudança na ligação de [11C] racloprida foi observada, levando os autores a sugerirem que pouca mudança nos níveis de dopamina ocorreu. No entanto, os efeitos do exercício na expressão e atividade sináptica de DA-D2R não foram estudados. O ligante de imagem PET [18F] fallypride é uma excelente ferramenta para examinar isso devido a sua alta afinidade e especificidade para DA-D2R e DA-D3R, e ao contrário de [11C] raclopride, não é facilmente deslocado pelos níveis basais de dopamina endógena.7-10 Isto foi confirmado pelo pré-tratamento de reserpina de animais (para reduzir a dopamina endógena) que não teve efeito sobre [18F] fallypride ligação,9,11 mas aumentou significativamente [11C] ligação de racloprida8 que foi atribuído a uma mudança na aparente afinidade de ligação (Kd) em vez do número do receptor (Bmax).
Como o potencial de ligação (BP) de [18F] fallypride é resistente a alterações devido à depleção de dopamina, sugerindo pouco efeito Kd or Bmax no estado basal ou empobrecido, usamos [18F] fallypride para testar nossa hipótese de que a expressão de DA-D2R aumenta no modelo de camundongos MPTP com exercício intensivo.9,10,12,13 Além disso, para apoiar nossas medidas de imagem PET, utilizamos a técnica complementar de Western immunoblot análise de preparações sinaptonaurosomal para medir as alterações na expressão da proteína DA-D2R ao nível da sinapse nos mesmos animais. Relatamos aqui os efeitos do exercício na expressão de DA-D2R e [18F] fallypride em grupos de ratos tratados com solução salina ou MPTP.
MÉTODOS
Animais, grupos de tratamento e administração de MPTP
Ratinhos C57BL / 6 machos 8 com semanas de idade (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) foram alojados em grupo numa sala com temperatura controlada sob um ciclo de luz 12 h / 12 h escuro. Todos os procedimentos foram realizados de acordo com o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório, conforme aprovado pelo USC IACUC. Utilizou-se um total de ratinhos 164 em quatro grupos de tratamento: (1) solução salina (n = 42), (2) solução salina mais exercício (n = 55), (3) MPTP (n = 57) e (4) MPTP mais exercício (n = 42). Para a lesão, os murganhos receberam quatro injecções intraperitoneais de 20 mg / kg de MPTP (base livre; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) dissolvidos em solução salina a XONOX%, a intervalos de 0.9-h ou quatro injecções intraperitoneais de 2 ml 0.1% NaCl como controle. A lesionamento foi validada por anise por HPLC dos neis de dopamina no estriado. Na administração 0.9 dias pós-MPTP, houve depleção de dopamina 10% em camundongos MPTP (82.2 ± 48.0 ng / mg de proteína) em comparação com camundongos salinos (8.4 ± 269.5 ng / mg de proteína). No final do estudo, não houve diferença significativa nos níveis de dopamina estriatal entre os ratos MPTP e exercício (24.9 ± 69.8 ng / mg de proteína) em comparação com MPTP (11.7 ± 77.9 ng / mg de proteína). No entanto, houve um aumento significativo da dopamina do estriado em camundongos salinos e em exercício (12.0 ± 315.2 ng / mg de proteína) em comparação com a solução salina (9.0 ± 246.9 ng / mg de proteína) (F(3,16) = 7.78; P <0.05).
Exercício em esteira
O exercício começou 5 dias após a lesão. Os ratos dos dois grupos de exercícios (salina mais exercício e MPTP mais exercício) foram treinados para correr em uma esteira motorizada 100-cm (Exer 6M, Columbus Instruments, OH) em velocidades incrementais para 6 semanas (5 dias / semana) para atingir a duração de 60 min / dia e velocidade de 18 – 20 m / min.5,6
Imagem de ressonância magnética
Obteve-se uma imagem de ressoncia magnica volumrica tridimensional ponderada com T1 (MR) do cebro de ratinho com um sistema de micro-RM de 7-T (Bruker Biospin, Billerica, MA). Os parâmetros de aquisição da imagem foram: TE = 46.1 ms, TR = 6292.5 ms, 0.4-mm espessura da fatia, 0.45-mm espessura da intersseção, 128 × 128 × 128 tamanho da matriz.
Radioquímica
Síntese de [18F] fallypride foi realizada como previamente descrito através da reação de substituição nucleofílica do precursor de tosila com [18F] usando um aparelho radioquímico feito sob medida.12 A purifica�o foi conseguida por HPLC de fase reversa numa coluna Phenomenex Luna C8 (2) utilizando acetonitrilo e tamp� de fosfato de s�io como fase m�el (55: 45). A absorvância de UV foi medida em 254 nm e AUFS 0.05. Pico radioativo (tempo de retenção 17 min) correspondente a [18F] fallypride, foi recolhido e o solvente foi removido num evaporador rotativo. O produto final foi testado quanto a pirogenicidade, esterilidade, pH e remoção de solventes orgânicos por cromatografia gasosa. A actividade especica e a pureza radioquica foram avaliadas com um sistema Waters HPLC utilizando um analico Phenomenex Luna C8 (2). A atividade específica estava na faixa de 3,000 – 12,000 Ci / mmol.
Medições PET e Análise de Imagem
Vinte camundongos foram utilizados para exames de imagem PET (n = 6 salina; n = 3 salina mais exercício; n = 5 MPTP; e n = 6 MPTP mais exercício). As digitalizações foram adquiridas com um scanner Concorde microPET R4 (CTI Concorde Microsystems, Knoxville, TN) com um protocolo de aquisição de modo de lista 60-min após varredura de transmissão 20-min para correção de atenuação com um 68Fonte Ge. [18A F] fallypride (10.92 – 11.28 MBq) foi injectada através da veia caudal (bolus simples) no início do exame de emissão. Os ratinhos foram anestesiados com 2% isofluorano e 98% de oxigio. Os dados do modo de lista dinâmica foram classificados em sinogramas com quadros 26 (6 × 20 sec, 4 × 40 sec, 6 × 1 min e 10 × 5 min) e reconstruídos por duas iterações de OSEM (maximização de expectativa de subconjuntos ordenados) seguidos por 18 iterações do algoritmo de reconstrução MAP (máximo a posteriori).14 As imagens reconstruídas foram cortadas para conter a cabeça e linearmente interpoladas no Z-direcção para produzir uma imagem 128 × 128 × 63 com 0.4 isotrópico × 0.4 × 0.4 mm3 voxels. Imagens de potencial de ligação de alta resolução (BP) do estriado foram calculadas a partir das imagens dinâmicas reconstruídas usando um modelo de referência de tecido multilinear15 e lotes de Logan16 com alta atividade no estriado e atividade muito baixa no cerebelo (região de referência). Regiões anatômicas de interesse (corpo estriado e cerebelo) foram definidas manualmente em ambos os hemisférios em imagens de PET coregistradas com ressonância magnética por Rview (versão 8.21Beta).17 Quantificação da ligação específica de [18F] fallypride no corpo estriado de camundongo foi realizada usando o valor de BP que fornece uma medida da relação de ligação específica / não específica no equilíbrio.18,19 Para demonstrar a especificidade de ligação no corpo estriado, quatro ratos foram colhidos 60 min após a injeção do ligante, cérebros rapidamente congelados em nitrogênio líquido, seccionados com 30-μm de espessura, e seções apostas a um phospho-imager (Typhoon 9200, GE Healthcare Inc., Piscataway , NJ) (FIG. 1). Estudos mostraram que [18F] fallypride liga-se especificamente ao DA-D2R, e como muito pouco o DA-D3R está no estriado, a ligação indica a ocupação de DA-D2R.9,10,12,13
Coleção de tecidos para HPLC e análise de proteínas
No final do estudo, os cérebros foram rapidamente removidos e o estriado dorsal dissecado fresco correspondendo a regiões anatômicas de bregma 1.2 a 0.6 com o corpo caloso como borda dorsal, a face lateral do corpo caloso como borda lateral e acima da comissura anterior como a fronteira ventral.20
Análise HPLC de dopamina e seus metabólitos
Os níveis de dopamina em homogenatos estriados (n = 4 por grupo) foram determinados por HPLC com detecção electroquímica.6 O sistema consistia num auto-amostrador da ESA (ESA, Chelmsford, MA) equipado com uma coluna C-150 de fase reversa 3.2 × 18 mm (3μm diâmetro) e um CoulArray 5600A (ESA, Chelmsford, MA), equipado com quatro célula analítica de canal com potenciais definidos em −75, 50, 220 e 350 mV.
Análise de Imunoblot Western
O efeito do exercício na expressão sináptica de DA-D1R e DA-D2R foi analisado em preparações de synaptoneurosome feitas a partir de oito estriados dorsolaterais agrupados.21 Este procedimento foi realizado em três conjuntos de ratos para um total de ratos 24 por grupo experimental (n = 3 preps por grupo). Expressão relativa de proteínas para DA-D1R (~ 50 kDa), DA-D2R (~ 50 kDa), tirosina hidroxilase (58 kDa), transportador de dopamina (68 kDa) e α-tubulina (50 kDa) (como controle de carregamento) foram analisados por Western immunoblot22 utilizando anticorpos primios disponeis comercialmente (anticorpos monoclonais policlonais de coelho e de ratinho, Millipore, Temecula, CA). As bandas de proteína foram visualizadas por anticorpos secundários de cabra anti-coelho ou anti-murganho purificados por afinidade conjugados com IRDye680 ou IRDye800 (Rockland, Gilbertsville, PA). O sinal fluorescente foi detectado por varrimento do filtro numa plataforma de imagiologia LI-COR Odyssey near infrared e quantificado utilizando o software Odyssey 2.1 (LI-COR Biotechnology, Lincoln, NE). Os resultados são apresentados como níveis de expressão relativa em comparação com o grupo de solução salina (definido para 100%).
Análise Estatística
Diferenças entre grupos na BP de [18Os níveis de proteína fallypride, DA-D1R e DA-D2R foram analisados usando análise de variância two-way (ANOVA) com tratamento entre fator sujeito (solução salina vs. MPTP) e exercício como dentro do fator sujeito (sem exercício vs. exercício). Para o teste de velocidade máxima em esteira, foi utilizado o tempo entre o fator sujeito (semana 1, 2, etc.) e o tratamento foi usado dentro do fator sujeito (solução salina vs. MPTP). O teste post hoc de Bonferroni foi usado para corrigir comparações múltiplas ao avaliar a significância de interesse. Nível de significância foi definido para P <0.05. Para explorar a importância prática das diferenças do grupo, uma estimativa da magnitude das diferenças entre os grupos foi calculada usando o tamanho do efeito (ES) (ES = MédiaGrupo 1 - SignificarGrupo 2/SDagrupado) O SE reflete o impacto do tratamento em uma população de interesse e é relatado de acordo com os critérios estabelecidos como pequeno (<0.41), médio (0.41–0.70) ou grande (> 0.70).23 A análise foi realizada usando Prism5 for Windows (GraphPad, San Diego, CA).
PREÇO/ RESULTADOS
Exercício em esteira de alta intensidade melhora o comportamento motor em camundongos lesionados com MPTP
Antes de MPTP-lesão e início do exercício, as velocidades médias basais de todos os ratos em dois grupos de exercícios foram semelhantes (salina mais exercício: 11.7 ± 1.1 m / min, e MPTP mais exercício: 11.2 ± 1.1 m / min). O exercício diário para as semanas 6 melhorou as velocidades máximas da esteira em ambos os grupos de exercícios, com os ratos salinos e em exercício exibindo uma velocidade máxima significativamente maior em comparação aos ratos MPTP mais exercício nas semanas 1 a 4 (FIG. 2). No entanto, camundongos MPTP e exercício tiveram velocidades de esteira tão altas quanto os ratos salinos e exercícios na semana 5 (MPTP mais exercício: 17.2 ± 3.6 m / min e salina mais exercício: 22.0 ± 1.5 m / min) e semana 6 (19.2 ± 1.2 m / min e 22.2 ± 0.9 m / min, respectivamente). Como relatado anteriormente, camundongos lesionados com MPTP que não foram submetidos a treinamento em esteira não apresentaram recuperação espontânea do comportamento motor com sua velocidade máxima de 7.0 ± 0.3 m / min no final do período de exercício de 6-semana.5
Exercício em esteira de alta intensidade aumentou o DA-D2R do estriatal, mas não a proteína DA-D1R
O exercício em esteira de alta intensidade diferencialmente afetou os níveis de DA-D2R e DA-D1R em preparações sinaptoneurosomadas do estriado dorsal, como mostrado pela análise de Western blot (FIG. 3). Camundongos MPTP mais exercício tiveram aumento de 48.8% no DA-D2R estriado em comparação com camundongos MPTP (Fig. 3B) e interação significativa entre exercício e lesão de MPTP no nível de proteína DA-D2R (F(1,8) = 6.0; P <0.05). Por outro lado, não houve efeito do exercício nos níveis de proteína DA-D1R entre os grupos (Fig. 3A; F(1,8) = 0.1, P = 0.78). A lesão por MPTP sozinha não alterou significativamente nem DA-D2R (F(1,8) = 0.0; P = 0.88) ou expressão DA-D1R (F(1,8) = 0.0; P = 0.92). Além disso, dois diferentes marcadores protéicos da integridade das fibras dopaminérgicas do mesencéfalo, a tirosina hidroxilase (TH; Fig. 3C) e transportador de dopamina (DAT; Fig. 3D), mostrou que o MPTP diminuiu significativamente a proteína TH do estriado (F(1,8) = 757.3; P <0.05) e expressão DAT (F(1,8) = 218.0; P <0.05).
Exercício em esteira de alta intensidade aumentou o estriado [18F] Potencial de Ligação Fallyprida (BP)
Enquanto a análise por Western immunoblotting da expressão da proteína receptora mediu os epitopos totais de anticorpos (armazenamentos celulares de superfície e internos), in vivo PET-imaging com o radioligamento específico de DA-D2R de alta afinidade [18F] fallypride pode delinear os efeitos do exercício sobre a disponibilidade de DA-D2R para ligar o ligando (FIG. 4). A análise estatística revelou que houve um efeito significativo do exercício (F(1,16) = 12.3; P <0.05), bem como lesão MPTP (F(1,16) = 160.3; P <0.05) sem interação significativa entre MPTP e exercício (F(1,16) = 3.5; P = 0.07) em [18F] fallypride BP. A análise post hoc de Bonferroni mostrou diferença significativa nos valores da PA entre os camundongos MPTP e MPTPt = 1.1, Df = 1, 16; P <0.01), e nenhuma diferença significativa entre soro fisiológico e soro fisiológico mais ratos de exercício (t = 4.1, Df = 1; P > 0.05). Especificamente, os camundongos MPTP mais exercício tiveram um aumento de 73.1% em [18F] fallypride BP comparado a camundongos MPTP (valores médios da PA para MPTP mais exercício: 7.1 ± 0.7; valores médios da PA para camundongos MPTP: 4.1 ± 0.3) (Fig. 4B). Além disso, os ratos com solução salina e exercício tiveram um aumento de 8.2% [18F] fallypride BP (13.2 ± 1.0) em comparação com camundongos salinos (12.2 ± 0.3). Consistente com estes achados, os cálculos do “tamanho do efeito” revelaram um maior efeito de exercício entre os grupos MPTP (ES = 2.61) do que aquele observado entre os grupos salinos (ES = 0.94).
DISCUSSÃO
Este estudo demonstra que o exercício em esteira de alta intensidade leva a um aumento18F] fallypride BP (disponibilidade de DA-D2R) no estriado de camundongos tratados com MPTP. Por outro lado, não houve mudança significativa nos níveis totais de dopamina no estriado entre o MPTP e o exercício, em comparação com o MPTP sem o exercício. [18F] fallypride é um antagonista altamente selectivo de DA-D2 / D3R cuja PA reflecte in vivo medida dos receptores disponíveis (Bmax) / afinidade de ligação (Kd). Como DA-D2Rs são o subtipo de receptor de dopamina predominante no estriado dorsal, um aumento induzido por exercício18F] fallypride BP representa um aumento no número de DA-D2R e é suportado por um aumento na expressão proteica utilizando Western immunoblotting e os nossos estudos anteriores mostram um aumento na expressão do transcrito de mRNA de DA-D2R no estriado utilizando histoquímica de hibridação in situ.5 Esta interpretação da elevação da PA é ainda apoiada pelo fato de que o deslocamento de18F] fallypride pela dopamina não é provável que ocorra em camundongos MPTP como os níveis de dopamina permanecem baixos.24 Assim, mudanças na aparente afinidade de ligação (Kd) são insignificantes e é improvável que afetem a BP. O efeito aumentado do exercício em camundongos MPTP pode refletir uma tentativa do cérebro lesado de otimizar a neurotransmissão dopaminérgica através do aumento do número de receptores, enquanto os níveis de dopamina permanecem esgotados. O aumento da capacidade de resposta dos camundongos MPTP ao exercício revela um potencial maior do lesionado em relação ao cérebro intacto para sofrer neuroplasticidade, o que pode não ser essencial quando o circuito estriado está intacto. O fato de que os níveis de dopamina não mudam significativamente com o exercício em camundongos MPTP sugere que as mudanças compensatórias em DA-D2R são críticas para o desempenho motor melhorado relacionado ao exercício.
Usando imagens PET, observamos uma diminuição no DA-D2R BP após a lesão MPTP em relação aos ratos tratados com solução salina. Isto estava em contraste com o Western immunoblotting em que não se observou qualquer alteração na expressão da proteína DA-D2R. O DA-D2R existe em equilíbrio dinâmico entre os compartimentos superficial e intracelular, com o último geralmente não disponível para ligação aos radioligandos de PET. No estado depletado de dopamina, os mecanismos compensatórios podem levar a alterações no pool intracelular de DA-D2R, que pode estar indisponível para [18F] fallypride ligação, mas ainda disponível para detecção em Western immunoblotting.
Ao contrário de nossas descobertas, um aumento compensatório no DA-D2R foi relatado em indivíduos com DP e após a administração de MPTP em primatas não humanos, ou 6-OHDA em ratos.25 Na literatura, a perda de DA-D2Rs é supostamente devida à degeneração de neurônios dopaminérgicos, enquanto o aumento de DA-D2Rs resulta do aumento da expressão nos terminais dopaminérgicos remanescentes e / ou aumento da síntese dentro dos neurônios estriatopalídeos ou interneurônios colinérgicos. Essa discrepância entre nosso estudo PET e os da literatura pode ser devido a diferenças na gravidade da lesão entre os estudos.11 Especificamente, a perda de um número maior de DA-D2Rs pré-sinápticas através da perda de células induzida por MPTP pode ser suficiente para compensar quaisquer alterações compensatórias pós-sinápticas induzidas pela lesão sozinha. Alternativamente, a nossa incapacidade de observar um aumento nos níveis de DA-D2R BP e expressão em camundongos MPTP (não-exercícios) pode ser devida a uma modesta recuperação dos níveis de dopamina no final do estudo (82% de depleção de dopamina em 10 dias versus 68 % de depleção em 42 dias postlesion). No entanto, isso é improvável, já que os camundongos com exercício MPTP plus, que também exibiram uma pequena recuperação de dopamina (não significativamente diferente do MPTP sem exercícios) tiveram aumento de DA-D2R BP.
A maioria dos DA-D1Rs e D2Rs são expressos em espinhas dendríticas de MSNs com receptores adicionais expressos em interneurônios colinérgicos e terminais de neurônios glutamatérgicos e dopaminérgicos originários do córtex (ou tálamo) e substantia nigra pars compacta, respectivamente.26 Um papel importante da dopamina é modular a neurotransmissão glutamatérgica corticostriatal ou talamostra no MSN. A neurotransmissão glutamatérgica é aumentada através de DA-D1Rs e diminuída através de DA-D2Rs.27-29 Sob condições de depleção de dopamina, espinhas e conexões sinápticas são seletivamente perdidas em DA-D2R contendo MSNs da via indireta.30 Esta perda é acompanhada de um estado de hiperexcitabilidade dentro dos MSNs devido ao aumento da neurotransmissão corticostriatal glutamatérgica.31-33 Em modelos animais de DP, esse aumento no drive glutamatérgico se correlaciona com o comportamento motor semelhante ao parkinsoniano.34 A atenuação desse estado hiperexcitável por meio da aplicação de dopamina ou de seus agonistas leva à reversão dos déficits motores parkinsonianos.35,36 À luz destes relatos e nossos achados, hipotetizamos que os benefícios do exercício de alta intensidade são aumentar a sinalização dopaminérgica através do aumento da expressão de DA-D2R na via indireta (mas não a via direta DA-D1R) e melhorar a função motora através supressão da excitabilidade glutamatérgica.
A principal conclusão do nosso estudo é que o exercício sob a forma de corrida intensiva em esteira facilita a neuroplasticidade por meio do aumento da expressão de DA-D2Rs do estriado, um processo mais evidente no cérebro lesado. Com base em nossos achados, uma abordagem não-invasiva de imagem por PET com [18F] fallypride pode ser usado para investigar se o exercício intensivo em esteira também leva a alterações no DA-D2R em indivíduos com DP. Nosso estudo destaca o valor da pesquisa pré-clínica em modelos animais de depleção de dopamina e a importância da pesquisa translacional para fornecer tanto a racionalidade quanto a percepção para compreender estudos de imagem e exercícios em indivíduos com DP.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado por uma concessão do programa USC CTSI Full Pilot Grant, e fundos generosos da Parkinson Disease Foundation, Parkinson Parkinson (Los Angeles), Parkinson Alliance, o Grupo de Educação de Doença de Parkinson de Whittier, NINDS RO1 NS44327-1, NIA ( AG 21937) e o Exército dos EUA NETRP W81XWH-04-1-0444. MGV é um beneficiário do USC Neuroscience Graduate Program Merit Fellowship. Gostaríamos de agradecer a Ryan Park e ao Dr. Peter Conti do Small Animal Imaging Core da USC pela assistência com micro-PET imaging e ao Dr. Rex Moats do Small Animal Imaging Research Core no Saban Research Institute para assistência com a ressonância magnética do mouse. Gostaríamos de agradecer a Yi-Hsuan (Lilian) Lai pela ajuda no exercício em esteira e Avery Abernathy por sua experiência em análise de HPLC. Somos gratos aos Amigos do Grupo de Pesquisa de Doença de Parkinson da USC, incluindo George e MaryLou Boone, Walter e Susan Doniger, e Roberto Gonzales pelo generoso apoio.
Notas de rodapé
Potencial conflito de interesses: nada a relatar.
Nota adicionada em prova: Este artigo foi publicado online no 19 October 2010. Um erro foi identificado posteriormente. Este aviso está incluído nas versões on-line e impressa para indicar que ambos foram corrigidos.
Divulgações Financeiras: Bolsa de Mérito do Programa de Pós-Graduação em Neurociência da USC (MV), NINDS RO1 NS44327-1 (MV, CW, JW, MJ e GP), Programa de Subsídio de Piloto Completo da USC CTSI (QL, AN, MJ, GP).
Funções do Autor: Todos os autores foram instrumentais na geração deste manuscrito. Concepção do Projeto de Pesquisa: GP, BF, MJ, RL, JW. Execução do Projeto: MV, QL, AN, CW, MJ, GP. Coleta de Dados, Processamento, Análise Estatística: MV, QL, BF, AN, RL, MJ, GP. Preparação do manuscrito: MV, QL, BF, RL, JW, MJ, GP.
Referências
36. Calabresi P, Pisani A, Centonze D, Bernardi G. Plasticidade sináptica e interações fisiológicas entre dopamina e gluta
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