Modelet e aktivizimit nervor që qëndrojnë në themel të ndikimit të amygdala-s basolaterale në sjelljet konsumuese të drejtuara nga opioidet brenda-accumbens vs sjelljeve ushqyese me yndyrë të lartë në mi (2015) - MEKANIZMI BINGE

Behav Neurosci. Dorëshkrim i autorit; në dispozicion në PMC 2015 Dhjetor 1.

Botuar në formën e fundit të redaktuar si:

PMCID: PMC4658266

NIHMSID: NIHMS724902

Versioni përfundimtar i botuar i botimit të këtij artikulli është në dispozicion në Behav Neurosci
 

Abstrakt

Ky studim eksploroi rolin e amigdalës në ndërmjetësimin e një modeli unik të sjelljes së ushqyerjes të nxitur nga aktivizimi i opioidit intra-accumbens (Acb) në miu. Inaktivimi i përkohshëm i amygdalës bazolaterale (BLA), nëpërmjet administrimit agonist muscimol GABAA parandalon rritjen e konsumit pas administrimit opioid intra-Acb të agonistit μ-opioid selektiv D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO) sjelljet e paprekura, sidomos pasi konsumimi ka përfunduar. Një interpretim është se inaktivimi i BLA-s selektivisht bllokon veprimtarinë nervore që qëndron në bazë të konsumit (konsumit) të drejtuar nga DAMGO, por jo sjelljeve joshëse (qasje). Eksperimentet e pranishme përfitojnë nga kjo dissociim i përkohshëm i konsumit dhe sjelljes së qasjes për të hetuar aktivitetin e tyre nervor të lidhur. Duke ndjekur ose administrimin intra-Acb kripur ose DAMGO, me ose pa marrjen e muscimol BLA, minjve iu dha qasje 2hr në një sasi të kufizuar të dietës me yndyrë të lartë. Menjëherë pas sesionit të ushqyerjes, minjtë u sakrifikuan dhe truri u analizua për modelet e aktivitetit nervor nëpër rajonet kritike të trurit të njohur për të rregulluar sjelljet e ushqimeve të shijshme dhe ushqyese. Rezultatet tregojnë se administrata intra-Acb DAMGO rriti aktivizimin c-Fos në neuronet oreksin brenda zonës periferike të hypothalamusit dhe se kjo rritje në aktivizim është e bllokuar nga BLA muscimol inactivation. Administrimi intra-Acb DAMGO në mënyrë të konsiderueshme ka rritur aktivizimin c-Fos brenda neuroneve dopaminergic të zonës tegmentale të barkut, krahasuar me kontrollet e kripës, dhe inactivation BLA nuk kishte efekt në këtë rritje. Në përgjithësi, këto të dhëna sigurojnë qarkun bazë që mund të ndërmjetësojë ndikimin selektiv të BLA në drejtimin e sjelljes konsumatore, por jo joshëse, të ushqyerit në një model të sjelljes së ushqyerjes së nxehtë.

Keywords: sjelljet e motivuara, sistemet dhe analizat e qarkut, sjellja laboratorike (apetit / aversive), Modeli i Kafshëve, modeli i aktivizimit neural të të ushqyerit opioid

Rrjeti i shpërndarë që kontribuon në ushqimin e ndërmjetësuar ndërmjet opioidëve (Acb) është në shqyrtim të gjerë (; ; ; ), dhe kontributet e amygdala basolateral (BLA) kanë qenë veçanërisht interesante. Inaktivimi i përkohshëm i BLA me GABAA agonist muscimol parandalon rritjen e fuqishme në marrjen e yndyrës së lartë pas administrimit intra-Acb të agonistit μ-opioid selektiv D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO), akoma BLA inactivation nuk ka ndikim në rritjen e ushqyerit të nxitur nga akute Privimi i ushqimit 24hr (). Ky ndikim i BLA në mënyrë specifike të ndërmjetësimit të një modeli të ushqyerjes hedonike u karakterizua më tej për të treguar se inaktivizimi BLA pengoi rritjen e konsumit të nxitur nga intra-Acb DAMGO, por i la mënjanë sjelljet e rritura të qasjes ushqimore të paprekura, veçanërisht pasi konsumimi i dietës kishte përfunduar. Ndërsa një karakterizim dhe interpretim më i plotë i këtyre të dhënave është siguruar nga , Inaktivimi i BLA duket se vetëm ndërhyn në fazën e konsumimit të sjelljes së ushqyerjes me yndyrë të lartë, por jo në fazën e qasjes në ushqim të nxitur nga aktivizimi opioid i Acb.

Historikisht, sjelljet shpërblyese janë kategorizuar në një aperitiv faza, e cila përfshin sjelljet e afrimit të përfshirë në kërkimin e stimujve të dobishme si ushqimi, dhe consummatory faza, e cila përfshin sjellje të tilla si konsumimi i ushqimit (; ). Ky dallim është vërejtur për dekada dhe mbetet i popullarizuar sot, sepse teoritë e motivimit në lidhje me ushqimin dhe shpërblimet e tjera evoluojnë (; ; ; ; ). Përpjekjet në përcaktimin e fiziologjisë që i nënshtrojnë këto faza të veçanta të sjelljes së motivuar kanë përfshirë modele ku trajtimet kanë ndërhyrë me shprehjen e një faze pa ndikuar në tjetrën (; ; ; ). Ky studim shqyrton fiziologjinë themelore të një modeli unik të sjelljes së të ushqyerit ku faza konsumatore dhe e shijshme u shkëputën.

Eksperimentet e tanishme hulumtojne modelet nervore te veprimtarise qe bazojne sjelljet e shijshme dhe ushqyese te ushqyer nga DAMGO intra-Acb. Së pari, gjetja fillestare () është përsëritur për të vendosur premisën për eksperimentin e dytë, duke përfshirë nevojën për të përcaktuar një sasi të duhur diete të kufizuar për të siguruar në studimin e dytë. Në eksperimentin e dytë, pas secilës prej katër kushteve të ndryshme të trajtimit të drogës, të gjithë subjekteve u jepej një sasi e kufizuar e dietës me yndyrë të lartë, duke siguruar secilin grup trajtimi përveç grupit të trajtuar vetëm me DAMGO, për të arritur ngopje (dmth. kushtet nga eksperimenti 1). Menjëherë pas sesionit të ushqyerjes 2hr, minjtë u sakrifikuan për të kapur modelet e aktivitetit nervor të shoqëruara me modelet e sjelljes që shfaqeshin. Të dhënat e mëparshme treguan se tërësia e sjelljes së konsumit të konsumit dhe pleshtit të ushqimit ndodh brenda minutës së parë të 30 të sesionit të testimit pas të gjitha trajtimeve, megjithatë brenda Acb DAMGO, me ose pa inaktivimin e BLA prodhojnë nivele të fuqishme të sjelljeve të qasjes ushqimore gjatë minutës së fundit 90 i sesionit të provës 2hr (). Prandaj, aktiviteti nervor i lidhur me motivimin për të trajtim konsumoj duhet të përfaqësohen në minjtë që marrin trajtim intra-Acb DAMGO pa inaktivimin BLA. Në të kundërt, modelet e aktivitetit nervor në minjtë që marrin trajtim intra-Acb DAMGO me inaktivimin BLA duhet të pasqyrojnë motivimin e barabartë për trajtim, por pasqyrojnë motivimin e reduktuar për të konsumoj.

Aktiviteti nervor është ekzaminuar në rajonet e trurit të njohur për të ndërmjetësuar sjelljet e interesit dhe të konsumit të interesit, duke përfshirë zonën tegmentale ventrale (VTA), hypothalamus medial dorsal (DMH), zona periferike e hypothalamus (PeF) dhe hypothalamus lateral (LH); ; ). Administrimi Intra-Acb DAMGO rrit shprehjen c-Fos neuronet periferike hipotalamike dhe kjo shprehje kerkon sinjalizimin orexin brenda VTA (). Së bashku, këto dhe të dhëna të tjera sugjerojnë se ky model i ushqyerjes së shkaktuar nga palatability nëpërmjet aktivizimit të receptorit Acb μ-opioid mund të rekrutojë neuronet PeF orexin dhe të përmirësojë sinjalizimin orexin brenda VTA që mund të modifikojë DA efflux tek Acb dhe mPFC, duke ngarë sjelljet e të ushqyerit (). Efekti i aktivizimit të BLA që është i nevojshëm për të vëzhguar një rritje të konsumit intra-Acb DAMGO me yndyrë të lartë, por jo sjelljet e qasjes me yndyrë të lartë, do të hulumtohen.

Metodat

Rats

Tridhjetë e gjashtë meshkuj meshkuj Sprague-Dawley rats (Harlan Sprague-Dawley, Inc., Indianapolis, IN) që peshonin 300-400 g, ishin vendosur në çifte në kafaze Plexiglas në një dhomë të kolonisë me një klimë të kontrolluar në një temperaturë prej 22 ° C. Rats u mbajtën në një cikël 12-hr të lehtë-errët, dhe të gjitha eksperimentet u zhvilluan gjatë fazës së dritës (0700 -1900) ndërmjet orëve të 1200 dhe 1500. Përveç rasteve kur tregohet ndryshe, minjtë kanë qasje të lirë në ushqim laboratorik dhe ujë të pijshëm para dhe gjatë eksperimentit. Grupet përmbajnë 6-8 minjtë. Të gjitha procedurat eksperimentale janë bërë në përputhje me protokollet e miratuara nga Komiteti i Përkujdesjes dhe Përdorimit Institucional të Kafshëve në Universitetin e Misurit.

Kirurgji

Rats u anestetizuan me një përzierje të ketamines dhe ksilazines (90 mg / kg dhe 9 mg / kg respektivisht Sigma, St Louis, MO) dhe 2 grupe të udhëzuesve të çelikut inox (23 matës, 10 mm) dypalëshe mbi kufirin e bërthamës Acb dhe shell lateral dhe BLA dhe të siguruara në kafkë me vida çelik inox dhe rrëshirë të lehtë shëruese (Furnizimi Dentar i New England, Boston). Pas operacionit, stylet e telave u vendosën në kanulet udhëzuese për të parandaluar mbylljen. Koordinatat për vendet e synuara janë si më poshtë: Acb: AP, + 1.4; ML, ± 2.0; DV, -7.8; BLA: AP, -2.8; ML, ± 4.7; DV, -8.6 (koordinata DV paraqet vendosjen e gjilpërës 12.5mm të injektorit që shtrihet 2.5mm ventral i kanulës).

Aparat

Vlerësimi i sjelljes së të ushqyerit u zhvillua në një dhomë të ndarë nga dhoma e kolonisë në tetë pëllëmbë (30.5 cm x 24.1 cm x 21.0 cm) dhomat e ushqimit (Med Associates, St. Albans, VT). Rats kishin qasje në ujë ad libitum dhe afërsisht 35g e dietë të shijshme, përveç rastit kur vuri në dukje. Dhomat e ushqimit ishin të pajisura me katër rreze aktiviteti të locomotoreve infra të kuqe të vendosura në 6 cm përtej gjatësisë së dhomës dhe 4.3 cm mbi dysheme. Një shkallë e automatizuar e peshës për pleshtin e ushqimit monitoroi konsumimin e ushqimit. Një rreze infra të kuqe shtesë që përfshin hyrjen e pleshtit të ushqimit përcaktoi numrin dhe kohëzgjatjen e çdo hyrje të kokës në zonën e pleshtit. Pleshtja e ushqimit dhe shishja e ujit ishin të vendosura në të njëjtën anë (kënde të kundërta) të një muri të dhomës, dhe një tabaka mbeturash ishte vendosur nën dyshemenë e barit. Matjet përfshinin aktivitetin e lokomotoreve (numrin e shkyçjeve horizontale), kohëzgjatjen e futjes së pleshtit (kohëzgjatja mesatare e prerjes së rrezeve në hyrje të pleshtit), hyrjet e pleshtit (numri i prerjeve të rrezeve në hyrje të pleshtit) dhe shuma e konsumuar gram dietë të konsumuar). Periudhat e testimit përbëheshin nga monitorimi i sjelljes në dhomat e ushqimit nga një kompjuter që drejtoi programin Med-PC (Med Associates Version IV, St Albans, VT).

Procedurë

Mikro-injektimi i drogës

D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO; Research Biochemicals, Natick, MA) dhe muscimol (Sigma, St. Louis, MO) ishin tretur të dy në kripërat sterile 0.9%. Kontrolli i automjetit ishte gjithnjë steril 0.9% kripur. Infuzionet u dërguan me një pompë microdrive (Harvard Aparati, South Natick, MA), i lidhur me anë të tubit polietileni (PE-10), ndërsa minjtë ishin butësisht handheld. U përdorën injectors thirty-three-gauge 12.5-mm, duke zgjeruar 2.5 mm përtej fundit të kanulave udhëzuese. Shkalla e injektimit ishte 0.32 μl / min për Acb dhe 0.16 μl / min për BLA, me kohëzgjatjen totale të infuzionit që ishte 93 s, duke rezultuar në volumet 0.5-μl dhe 0.25-μl respektivisht. Një minutë shtesë u lejua për difuzion.

Projektimi

Eksperto 1

Duke përdorur një dizajn brenda lëndëve, të gjitha grupet e minjve pranuan secilën prej katër kombinimeve të trajtimit të drogës në katër ditë të veçanta trajtimi në një mënyrë të balancuar. Të gjitha testimet e sjelljes për të dy eksperimentet filluan 1 javë pas operacionit në dhomën e monitorimit të marrjes së ushqimit nga Med-Associates. Rats iu është dhënë qasje në dietë në këto dhomat për 2hr çdo ditë gjatë 6 ditëve të njëpasnjëshme. Në 5th ditë, një injektues 10-mm u fut dhe u vendos për 2 min, pa vëllim të injektuar. Në 6th ditë, u fut një injektues 12.5-mm, dhe kripërat e administruara për 93 s. Në secilën ditë testimi, muscimol (20 ng / 0.25 μl / side bilaterally) ose saline u infused në BLA, e ndjekur menjëherë nga DAMGO (0.25 mg / 0.5 μl / side bilaterally) ose kripur në Acb, duke rezultuar në katër trajtim të mundshëm kombinime. Sesioni i testimit 2hr filloi menjëherë pas injektimit të fundit dhe minjtë ishin dhënë qasje ad libitum në dietën me yndyrë të lartë. Kishte të paktën 1 ditë mes ditëve të trajtimit.

Eksperto 2

Katër grupe të minjve, duke përdorur një dizajn midis subjekteve, me secilën prej tyre që kanë kanunë dypalësh që synojnë Acb dhe BLA. Rats iu është dhënë qasje në dietë në këto dhomat për 2hr gjatë ditëve 6 të njëpasnjëshme dhe procedurat e injektimit ishin identike me Experiment 1, megjithatë çdo rat do të merrte vetëm 1 të kombinimeve të mundshme të trajtimit të drogës 4. Konsumi i dietës me yndyrë të lartë në ditën 6th të trajtimit bazë është përdorur për të balancuar barazimin e trajtimit të drogës për të siguruar modele të ngjashme të marrjes së kontrollit bazë. Në 8th ditë, kafshëve iu dhanë 1 të 4 trajtimeve të mundshme të drogës dhe aksesin në 8g të dietë të shijshme për 2hr.

Verifikimi Histologjik i Vendosjes së Cannula

Menjëherë pas sesionit të ushqyerjes 2hr, kafshët u hoqën nga dhomat e ushqyerjes, thellësisht anestetizuan me ketamin dhe xilazinë (90 mg / kg dhe 9 mg / kg), dhe perfshihen transcardialisht. Truri u hoq dhe u zhyt në formalin (10%) brenda natës në 4 ° C dhe pastaj u krijua me transferimin në një zgjidhje të saharozës (20%) në 4 ° C. Seksionet e ngrira serik (50 μm) u mblodhën në të gjithë shtrirjen e vendit të injektimit, të montuar në slides të xhelatinuara, dhe të kundërta me ngjyrë violet kromi. Profilet e vendosjes së kanulave u analizuan për saktësinë dhe të dhënat nga minjtë me kanulë të gabuar nuk u përfshinë në analiza.

Immunohistochemistry

Truri u feta në trashësi 40 μm dhe ruhej në 0.1M zgjidhje të fosfateve (PB, pH 7.4) në 4 ° C. Protokolli i lyer me imunofluorescent pa lundrues ishte si më poshtë: Seksionet u lanë (3 × 10 min) në PBS. Vendet jo-specifike të lidhjes u bllokuan duke përdorur një solucion bllokues [një përzierje 10% serum dhie normale (Jackson Immuno Research, West Grove, PA) dhe 0.3% Triton X-100 (Sigma) në PBS) për 2 hr. Tjetra, seksionet u inkubuan në një përzierje kokteji që përmban antitrup anti-c-Fos (1: 5000, Calbiochem) dhe anti-Tyrosine Hydroxylase (VTA) ose miun anti-oreksin-A (hypothalamus) gjatë natës. Seksionet u lanë (4 × 30 min) në PBS që përmbajnë 0.05% Tween-20 (PBST). Tjetra, seksionet u inkubuan për orët 2 në një tampon bllokues, me një koktej të antitrupave sekondarë: Alexa Fluor 555 dhi Anti-lepuri IgG dhe Alexa Fluor 488 dhi Anti-pule IgG (Invitrogen). Të gjitha antitrupat sekondarë janë përdorur në përqendrimin e rekomanduar të 1: 500. Seksionet u lanë (4 × 30 min) në PBST dhe PB (2 × 10 min). Seksionet u montuan në slides super-ngricës (VWR International, USA) dhe u lejuan të thaten në temperaturën e dhomës, ndërsa të mbrojtur nga drita. Përdorimi i kutisë së montimit ProLong Anti-fade (Invitrogen) feta u mbuluan dhe ruheshin në 4 ° C. Të gjitha inkubacionet u kryen në temperaturë dhome, përveç atyre të antitrupave primarë që u inkubuan në 4 ° C. Për të kontrolluar për ndryshime në reaksionin imunohistokemik, indet nga grupet e ndryshme të trajtimit u reaguan së bashku. Përveç kësaj, errësira mungonte në eksperimentet e kontrollit me mungesën e antitrupave primarë.

Analiza e Sjelljes Statistikore

Për eksperimentin 1, të gjitha masat e ushqyerjes për sesionin total 2-hr dhe në kushte të ndryshme të trajtimit u analizuan me dy faktorë brenda subjektit ANOVA (Acb Treatment X Amygdala Treatment), me nivelet për secilin faktor të jetë ose mjet apo drogë . Për eksperimentin 2, të gjitha masat e ushqyerjes u analizuan duke përdorur një faktor dy-faktor ndërmjet ANOVA-s (Acb Treatment X Amygdala Treatment), me nivelet për secilin faktor ose si mjet apo drogë.

Procedurat e numërimit, imazhet dhe analizat statistikore

Për vlerësimin sasior të shprehjes së imunoreaktivitetit në hypothalamus (duke përfshirë hypothalamus lateral, zona periferical, hypothalamus dorsomedial) dhe VTA, tre feta indeve paralele anatomically nga çdo hemisferë (total 6 për rajon) janë analizuar dhe mesatarisht. Të gjitha imazhet u gjeneruan nëpërmjet objektivit 4 × ose 10 × me një mikroskop konfokal duke përdorur softuerin e imazhit Slidebook 4.3 (Inovacionet Inteligjente të Imazheve, Denver, CO). Në varësi të rajonit të caktuar, imunotaktësia fluoreshente brenda një flete 40μm është imaged për ose kanalet c-Fos, c-Fos / TH ose c-Fos / OrexinA, të ndara me një grup pragje ekskluzive. Imazhet pastaj u shfaqën në një ekran të plotë duke përdorur softuerin pa pagesë të domain-it me bazë Java, ImageJ (Instituti Kombëtar i Shëndetësisë, Bethesda, MD, SHBA), si një program i përpunimit të imazhit dhe analizës që lejonte caktimin e çdo neuroni individual dhe ngjyrosja pozitive për secilin kanal llogaritet në një mënyrë të verbër ndaj trajtimit. Neuronet klasifikuan vetëm si c-Fos, vetëm peptid, ose me etiketim të dyfishtë sipas pranisë së produktit të reagimit të kundërt të antitrupave në bërthamën e qelizës.

Të gjitha zonat u caktuan dhe hartëzuan duke përdorur The Rat Brain Atlas (Paxinos & Watson, 1998). Zona Ventrale Tegmentale dhe Tirosinë Hidroksilaza; seksionet e zgjedhura ishin midis −5.2 dhe −5.5 mm përpara të bregmës. Në secilin nivel, rajoni që përmban qelizat e hidroksilazës së tirosinës (TH-IR) dhe c-Fos-IR u numëruan në të dy hemisferat. Hipotalamusi dhe Orexin-A; seksionet e zgjedhura ishin midis −2.8 dhe −3.3 mm përpara nga bregma. Regjioni hipotalamik (midis −2.8 dhe −3.3 mm) që u gjet që përmban qelizat pozitive të oreksinës-A u nda në tre rajone nga mesi në atë anësor. Të gjitha qelizat brenda, ventrale dhe dorsale ndaj fornix-it u përfshinë në rajonin e mesëm të etiketuar si perifornical (PeF). Qelizat e etiketuara Orexin-A anësore të këtij rajoni u përfshinë në hipotalamusin anësor (LH), dhe ato mesatare nga fornix ishin në grupin medial (DMH), i cili mbivendosej me hipotalamusin dorsomedial. Neuronet numëroheshin në të dy hemisferat.

Rezultatet

Të gjitha efektet e trajtimit janë deklaruar në lidhje me lokacionet e administrimit të drogës ose automjeteve (dmth. Intra-Acb DAMGO). Si të gjitha minjtë iu është dhënë qasje dhe konsumojnë një sasi të kufizuar të dietës me yndyrë të lartë, të gjitha ndryshimet në sjelljet shoqëruese ushqimore (Exp. 1 dhe 2) dhe modelet e aktivizimit nervor (Exp. 2) janë domosdoshmërisht efekti i kombinuar i çdo droge përkatëse trajtim dhe dietë të konsumuar.

Sjellje ushqyese

Eksperto 1

Ndikimi i inaktivimit të BLA në sjelljet e ushqyerjes me yndyrë të lartë të nxitur nga administrimi intra-Acb DAMGO.

Konsumi

Siç tregohet në Fig. 1a, një ANOVA e kryer në të dhënat e konsumit ushqimor zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (1, 7) = 13.9, p <.01), trajtimi BLA (F (1, 7) = 8.6, p <.05), dhe bashkëveprimi i trajtimit të Acb × BLA (F (1, 7) = 8.9, p <.05). Analiza post-hoc zbuloi se trajtimi i kripës intra-Acb DAMGO + intra-BLA çoi në nivele konsumi të konsiderueshme më të lartap <.05) në krahasim me të dy trajtimet e kontrollit (kripëra intra-Acb + kripëra brenda-BLA; kripëra intra-Acb + muscimol intra-BLA), dhe trajtimi muscimol brenda-BLA bllokuan këtë rritje (p <.05).

Figura 1 

Ekzaminimi i sjelljes: A) Sasia e dietës me yndyrë të lartë të konsumuar (hyrja në libra), B) kohëzgjatja e hyrjes totale e pleshtit të ushqimit, C) numri i përgjithshëm i pikave të pleshtit të ushqimit dhe numërimi i aktivitetit të lokomotoreve (dmth. pushimi horizontal i rrezeve). Trajtimet 4 u administruan në ...
Kohëzgjatja e hyrjes së pleshtit të ushqimit

Siç tregohet në Fig. 1b, një ANOVA e kryer në të dhënat e kohëzgjatjes së futjes së pleshtit të ushqimit zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (1, 7) = 36.3, p <.001), trajtimi BLA (F (1, 7) = 12.1, p <.05), dhe bashkëveprimi i trajtimit të Acb × BLA (F (1, 7) = 16.5, p <.005). Analiza post-hoc zbuloi që trajtimi intra-Acb DAMGO + brenda-BLA me muscimol çoi në kohën e hyrjes së hinkës totale të ushqimit në mënyrë të konsiderueshme më të lartë krahasuar me të gjitha trajtimet e tjera (p <.001), pa asnjë trajtim tjetër dukshëm të ndryshëm nga njëri-tjetri.

Futjet e pleshtave të ushqimit

Siç tregohet në Fig. 1c, një ANOVA i kryer në të dhënat e futjes së pleshtit ushqimor zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (1, 7) = 10.6, p <.05), ndërsa trajtimi BLA iu afrua rëndësisë (F (1, 7) = 3.89, p = .08), dhe ndërveprimi i trajtimit Acb × BLA (F (1, 7) = 7.9, p <.05). Analiza post-hoc zbuloi që trajtimi intra-Acb DAMGO + intra-BLA me muscimol çoi në dukshëm më shumë hyrje të hinkave ushqimore krahasuar me të gjitha trajtimet e tjera (p <.05), pa asnjë trajtim tjetër dukshëm të ndryshëm nga njëri-tjetri.

Aktivitet lokomotor

Siç tregohet në Fig. 1c, një ANOVA i kryer në të dhënat e futjes së pleshtit ushqimor zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (1, 7) = 23.5, p <.005), por asnjë efekt kryesor i trajtimit BLA (F (1, 7) = 1.4, p > .05), dhe asnjë ndërveprim i trajtimit të Acb × BLA (F (1, 7) = .056, p > .05).

Eksperto 2

Ndikimi i inaktivimit të BLA në sjelljet e ushqyerjes me yndyrë të lartë dhe modelet e aktivizimit nervor të nxitur nga administrimi intra-Acb DAMGO.

Caktimi i trajtimit të drogës ishte i balancuar nga nivelet e marrjes së yndyrës nga 6th dita e fillimit. Këto nivele të marrjes ishin si më poshtë: SAL-SAL, 5.1g; SAL-DAM, 4.9g; MUSC-SAL, 4.9g; MUSC-DAM, 4.8g.

Konsumi

Siç tregohet në Fig. 2a, një ANOVA e kryer në të dhënat e konsumit ushqimor zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (3, 24) = 26.60, p <.001), por asnjë efekt i trajtimit BLA (F (3, 24) = 0.02, ns) ose një ndërveprim të trajtimit Acb × BLA (F (3, 24) = 0.61, ns).

Figura 2 

Ekzaminimi i sjelljes: a) Sasia e dietës me yndyrë të lartë të konsumuar (linja e thyer reflekton aksesin e kufizuar të 8g); b) numri i hyrjeve të pleshtave të ushqimit, c) kohëzgjatja e hyrjes totale e pleshtit të ushqimit, dhe d) akuza aktiviteti lokomotor (p.sh. thyerja e rrezeve horizontale). Trajtimet 4 ...
Futjet e pleshtave të ushqimit

Siç tregohet në Fig. 2b, një ANOVA e kryer në numrin e përgjithshëm të hyrjeve të pleshtit përgjatë gjithë sesionit të ushqyerit zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (3, 24) = 8.55, p <.01), por nuk ka efekt trajtimi të trajtimit BLA (F (3, 24) = 1.68, ns) ose një ndërveprim të trajtimit Acb × BLA (F (3, 24) = 0.39, ns).

Kohëzgjatja e hyrjes së pleshtit të ushqimit

Siç tregohet në Fig. 2c, një ANOVA e kryer në kohëzgjatjen e përgjithshme të të gjitha hyrjeve të pleshtit përgjatë gjithë sesionit të ushqyerit zbuloi një efekt kryesor domethënës të trajtimit Acb (F (3, 24) = 12.45, p = .001), por nuk ka efekt të trajtimit BLA (F (3, 24) = .62, ns) ose një ndërveprim të trajtimit Acb × BLA (F (3, 24) = 0.07, ns).

Aktivitet lokomotor

Siç tregohet në Fig. 2d, një ANOVA e kryer në aktivitetin total lokomotor gjatë seancës së ushqyerit zbuloi një efekt të rëndësishëm kryesor të trajtimit Acb (F (3, 24) = 12.93, p = .001), por nuk ka efekt të trajtimit BLA (F (3, 24) = .198, ns) ose Acb × BLA ndërveprimi i trajtimit (F (3, 24) = 0.61, ns).

Immunohistochemistry

Sipërfaqja Ventral Tegmental

Siç tregohet në Fig. 3a, një ANOVA e kryer në qelizat IR c-Fos në VTA zbuloi një efekt të rëndësishëm të trajtimit të Acb (F (3, 24) =, 25.67 p <.001), por asnjë efekt të trajtimit BLA (F (3, 24) = 1.13, ns) ose bashkëveprimi ndërmjet trajtimeve (F (3, 24) = 2.80, ns). Një ANOVA e kryer në përqindjen e qelizave TH-IR që tregojnë c-Fos IR zbuloi një efekt të trajtimit të Acb (F (3, 24) = 6.33, p <.05), por asnjë efekt të trajtimit BLA në përqindjen e TH- Qelizat IR që tregojnë c-Fos IR (F (3, 24) = 07, ns) një ndërveprim jo të rëndësishëm midis trajtimeve (F (3, 24) = 63, ns).

Figura 3 

a) Numri i qelizave VTA që shprehin c-Fos IR; b) Përqindja e qelizave VTA TH-IR që shprehin c-Fos IR. c) Numri i qelizave qe shprehin c-Fos-IR ne zonen periferike te hypothalamus (PeF) d) Përqindja e PeF Orexin-A IR qelizat që shprehin c-Fos-IR. Trajtimet 4 ...

Hypothalamus periferike

Siç tregohet në Fig. 3b, një ANOVA i kryer në c-Fos IR në PeF (rajoni i analizuar i paraqitur në Fig. 5b) zbuloi një efekt të rëndësishëm të trajtimit Acb (F (3, 24) = 30.78, p <.001), trajtimi BLA (F (3, 24) = 30.52, p <.001) dhe një ndërveprim i trajtimit të Acb × BLA (F (3, 24) = 8.75, p <.01). Një ANOVA e kryer në përqindjen e qelizave OrxA-IR që tregojnë c-Fos IR zbuloi një efekt të rëndësishëm të trajtimit të Acb (F (3, 24) = 55.85, p <.001), trajtimi BLA (F (3, 24) = 23.52, p <.001), dhe një ndërveprim i trajtimit të Acb × BLA (F (3, 24) = 14.32, p <.001). Në figurat 5a dhe 5b, analizat post hoc tregojnë se inaktivizimi i BLA zvogëlon ndjeshëm shprehjen c-Fos të shkaktuar nga DAMGO dhe zvogëlon numrin e qelizave oreksinë që shprehin c-Fos (p <.05).

Dorsomedial hypothalamus

Siç tregohet në Tabela 1, një ANOVA e kryer për numrin e qelizave IR c-Fos në DMH zbuloi një efekt të rëndësishëm të trajtimit brenda-Acb (F (3, 24) = 20.19, p <.001), por asnjë efekt të trajtimit brenda-BLA ( F (3, 24) = 1.63, ns) ose një ndërveprim të trajtimit Acb × BLA (F (3, 24) = 0.05, ns) Një ANOVA e kryer në përqindjen e qelizave OrxA-IR që tregojnë c-Fos IR zbuloi një efekt të rëndësishëm të trajtimit të Acb (F (3, 24) = 13.39, p <.001), trajtimin BLA (F (3, 24) = 5.85, p <.05), por nuk ka ndërveprim të trajtimit të Acb × BLA (F (3, 24) = .89, p = .36).

Tabela 1 

Numri i qelizave që shprehin c-Fos-IR (total) në hypothalamus lateral dhe hypothalamus dorsomedial dhe përqindja e qelizave IR të PeF Orexin-A që shprehin c-Fos-IR (% orexin-A). Trajtimet 4 u administruan, duke përfshirë brenda-Acb DAMGO ose kripur (SAL) menjëherë ...

Hipotalamusi lateral

Siç tregohet në Tabela 1, një ANOVA e kryer për numrin e qelizave IR të c-Fos në LH nuk zbuloi asnjë efekt të trajtimit të Acb ((F (3,24) = .11, ns)) ose BLA ((F (3, 24 = 6.82, p < .05) dhe pa bashkëveprim (F (3,24) = .26, ns). Një ANOVA e kryer në përqindjen e qelizave OrxA-IR që tregojnë c-Fos IR nuk zbuloi ndonjë efekt të rëndësishëm të trajtimit të Acb (F (3, 24 ) = 64, ns), trajtimi BLA (F (3, 24) = 08, ns), ose ndërveprimi i trajtimeve (F (3, 24) = 77, ns.)

Diskutim

Nën ad libitum kushtet e qasjes me yndyrë të lartë, inaktivimi BLA uli rritjen e konsumit të lartë të yndyrës të prodhuar nga intra-Acb DAMGO, duke lënë të paprekur sjelljet e ekzagjeruara të qasjes së pleshtave të ushqimit, duke konfirmuar raportin e mëparshëm (). Eksperimenti i dytë shqyrtoi të njëjtat fenome, por në kushte të kufizuara të qasjes në dietë me yndyrë të lartë, duke lejuar të gjitha grupet e trajtimit përveç grupit të trajtuar vetëm brenda Acb DAMGO, për të arritur ngopje (dmth. Konsumojnë sasi të vërejtura nën kushtet ad lib në Exp. 1). Kafshët e trajtuara me kripësi intra-Acb, me ose pa inactivation BLA, konsumonin nivele të ngjashme të dietës me yndyrë të lartë dhe shfaqën nivele të ngjashme të sjelljeve të afrimit, siç parashikohet. Të dy grupet e trajtimit me interes të veçantë, ata që pranonin intra-Acb DAMGO me ose pa BLA inaktivim, konsumonin pothuajse të gjithë dietën me yndyrë të lartë të disponueshëm në minutën e parë 30 të sesionit të provës 2hr dhe shfaqën modele identike të sjelljeve joshëse e hyrjeve të pleshtave të ushqimit, kohëzgjatja e hyrjes së pleshtit të ushqimit) mbi 90 minutën e fundit, siç parashikohet. Trajtimi intra-Acb DAMGO ka ekzagjeruar si numrin dhe kohëzgjatjen e sjelljeve të qasjes së pleshtave të ushqimit, pavarësisht nga inaktivizimi i BLA, krahasuar me të dy grupet e trajtuara me ujë të kripur intra-Acb siç është raportuar më parë (). E rëndësishmja, siç vërehet në eksperimentin 1 dhe më parë (, ), trajtimi intra-Acb DAMGO, pa çaktivizimin e BLA, çon në nivelet e konsumit të paktën dyfishin e shumës së ofruar në kushtet e kufizuara të aksesit. Prandaj, modelet e aktivitetit nervor në minjtë që kanë marrë trajtim intra-Acb DAMGO pa inaktivimin BLA duhet të reflektojnë motivimin për të trajtim konsumoj ushqim shtesë përtej asaj që ishte në dispozicion. Në të kundërt, modelet e aktivitetit nervor në minjtë që marrin trajtim intra-Acb DAMGO, me inaktivimin e BLA, duhet të pasqyrojnë një motivim në rritje trajtim ushqimi, por një motivim i reduktuar për të konsumoj ushqim shtesë, krahasuar me minjtë e trajtuar me intra-Acb DAMGO pa BLA inactivation. Kjo është kritike për jo vetëm arsyetimin për dizajnin, por interpretimin e të dhënave aktuale. Niveli i dietës në dispozicion ishte zgjedhur jo vetëm për të mbajtur nivelet e konsumit brenda një sërë kufijsh në grupe, por gjithashtu për të siguruar rats në çdo grup trajtimi, përveç grupit vetëm DAMGO, të arritur ose afër ngopjes (siç përcaktohet nga Experiment 1 dhe mëparshme gjetjet, shih ).

Administrata Intra-Acb DAMGO në mënyrë të konsiderueshme rriti VTA c-Fos IR në neuronet dopaminergic krahasuar me trajtimin e kontrollit të kripës, dhe administrimi intra-BLA muscimol nuk kishte ndikim në këtë rritje. Hulumtimet e mëparshme sugjerojnë se rritja e c-Fos IR në VTA dhe në veçanti, neuronet VTA dopamin (DA) luajnë një rol qendror në shpërblimin, motivimin dhe varësinë nga droga (; ; ). Administrimi i antagonistëve të dopaminës në Acb bllokon sjelljen e sjelljes ushqimore të apasionuar ende nuk ka efekt në konsumimin e ushqimit nga uria () ose konsumi i yndyrës intra-Acb DAMGO (). Administrimi intra-Acb i dopamin agonisteve rrit raportin progresiv duke reaguar per nje perforcues ushqimor, por nuk kane efekt ne ushqimin e lire (). Këto të dhëna dhe të tjera sugjerojnë se sjelljet e ekzagjeruara të qasjes ushqimore të vërejtura në të dy grupet e trajtuara të administruara intra-Acb DAMGO, me dhe pa inaktivimin BLA, janë ndërmjetësuar nga aktiviteti i rritur në neuronet dopaminergike VTA.

Modeli i aktivitetit nervor PeF orexin-A përputhet me modelet e konsumit të vërejtura në mënyrë tipike pas këtyre efekteve të trajtimeve të njëjta nën kushtet e qasjes ad lib (, ), me trajtim intra-Acb DAMGO që çon në konsum më të lartë se çdo trajtim tjetër. Ne gjithashtu zbuluam se intra-Acb DAMGO rriti aktivitetin DMH c-Fos pavarësisht nga trajtimi BLA, por vetëm brenda DAMGO vetëm rriti proporcionin e neuroneve orexin që shprehin c-Fos krahasuar me kontrollet. Pavarësisht nga roli i saj në sjelljen e ushqyerjes së DAMGO-s (; ), DAMGO nuk ka rritur ndjeshëm aktivitetin e LH c-Fos, megjithëse nuk i lejonin kafshët të ngopnin.

Hipotalamusi është konsideruar prej kohësh një qendër për rregullimin autonom të homeostasit të energjisë; duke përfshirë rregullimin e ushqimit, zgjimin dhe shpërblimin (, ). Neuronet që shprehin peptidet oreksigenike oreksin-A dhe melanin-koncentrimi hormon (MCH) janë të njohura për të populluar dendur zonat anësore të hypothalamus (), në veçanti, zona periferike. Konsumi i një diete me yndyrë të lartë që vërehet të jetë nxitur nga orexin-A () është bllokuar nga administrimi paraprak i naloksonit antagonist opioid (), duke sugjeruar një ndërveprim të peptideve opioide dhe oreksin në ndërmjetësimin e konsumit të shijshëm të ushqimit. Administrimi intra-VTA oreksin-A gjithashtu nxit neuronet dopamine (Borgland et al., 2006). Bllokimi i sinjalizimit të orexin në VTA redukton ushqyerjen e DAMGO-së të një diete me yndyrë të lartë (), por deri në ç'masë kjo është nëpërmjet reduktimit të sjelljeve joshëse që mund të kontribuojnë në rritjen e konsumit është e panjohur. Prandaj, gjetja e tanishme që rritja e aktivitetit dopaminergjik VTA pas intra-Acb DAMGO ishte i paprekur nga BLA inactivation, pavarësisht reduktimin e aktivitetit PeF orexin, ngre rëndësinë e karakterizimit të sjelljes si të fazave të shijshme dhe të konsumueshme të sjelljes së të ushqyerit. Përveç kësaj, këto të dhëna japin hipoteza të testueshme për të shqyrtuar ndikimin e modulimit dopaminergjik të PEF orexin dhe VTA në qasjen e drejtuar nga opioidi dhe në fazat e konsumimit të ushqimit.

Studimi aktual përdorte qasje të kufizuar të dietës (dmth. Gram në dispozicion) për të kontrolluar për ndikimin e niveleve të konsumit diferencial pas trajtimeve të ndryshme të drogës. Studimi gjithashtu e kufizoi ekzaminimin e tij në një dietë të vetme; prandaj, mundësia mbetet që ushqimi i orientuar nga opiumi i dietave të tjera të shijshme mund të rregullohet në mënyrë të ngjashme. Zgjedhja e dietës me yndyrë të lartë u nxit nga karakterizimet e kaluara të rrjetit të lidhur që zbulohet të jetë në thelb të ushqyerit intra-Acb DAMGO me yndyrë të lartë (; për shqyrtim), veçanërisht roli i BLA (, ). Nuk dihet nëse gjetjet e tanishme janë specifike për dietën me yndyrë të lartë, ose nëse ato do të vërehen gjithashtu duke përdorur një dietë alternative. Interesante, një studim i kohëve të fundit ka gjetur se edhe në mesin e dietave shumë të shijshme, ekziston një dallim i dukshëm në modelet e aktivizimit të c-fos në të gjithë rajonet rregullatore ushqyese të qarkut mesokortikolimik (). Studimet e ardhshme do të kërkohen për të përcaktuar nëse gjetjet aktuale janë specifike për dietat me yndyrë të lartë.

Në përmbledhje, këto të dhëna ofrojnë njohuri se si BLA reagon ndaj aktivizimit të opioidit të Acb për të nxitur në mënyrë specifike konsumimin, por nuk sjellin sjellje, të lidhura me një dietë me yndyrë të lartë. Të dhënat tregojnë se sjellja e konsumit e nxitur nga intra-Acb DAMGO mund të jetë për shkak të rritjes së aktivitetit të oreksin-A në PeF, ndërkohë që sjelljet e rritjes së qasjes ushqimore duket të jenë të lidhura me rritjen e aktivitetit dopaminergjik të VTA, me aktivizimin BLA kërkohet vetëm për të vëzhguar faza e konsumit. Këto të dhëna sigurojnë një kuptim më të mirë të dy sjelljeve të ushqimeve të pandjeshme brenda një modeli të ushqyer mirë të karakterizuar. Ky hulumtim zgjeron njohuritë tona të qarkut nervor kritik për ushqimin e ushqyerit të shijshëm dhe për të kryer implikime për të kuptuar sjelljet maladaptive të ushqyerjes të përfshira në zhvillimin e sjelljes së obezitetit dhe të varësisë ushqimore.

â € <

Figura 4 

Vizatimet skematike të vijave, të adaptuara nga atlasi Paxinos & Watson (1998), që përshkruajnë seksione koronale që përmbajnë rajone të analizuara të trurit të përshkruara në zonën blu (zona gri) dhe të zmadhuara direkt poshtë. Rajonet: (A) zona blegtorale tegmentale, VTA; (B) dorsomedial ...

Mirënjohje

Autorët do të donin të pranonin mbështetjen e granteve DA024829 nga Instituti Kombëtar i Shpërdorimit të Drogës në MJW.

Shënimet

Autorët nuk deklarojnë konflikt interesi.

Referencat

  1. Badiani A, Leone P, Noel MB, Stewart J. Ventral, mekanizmat opioidë të zonës tegmentale dhe modulimin e sjelljes së ushqimit. Hulumtimi i Trurit. 1995; 670 (2) 264-276. [PubMed]
  2. Baldo BA, Sadeghian K, Basso AM, Kelley AE. Efektet e bllokadës selektive dopamine D1 ose D2 receptor brenda subregioneve të nucleus accumbens në sjelljen e ingestive dhe aktivitetin motorik të lidhur. Behav Brain Res. 2002 Dhjetor 2; 137 (1-2): 165-177. [PubMed]
  3. Baldo BA, Pratt WE, Do MJ, Hanlon EC, Bakshi VP, Cador M. Parimet e motivimit zbuluar nga funksionet e ndryshme të substancave neurofarmacologjike dhe neuroanatomike që qëndrojnë nën sjelljen e të ushqyerit. Neurosci Biobehav Rev 2013 Nov; 37 (9 Pt A): 1985-1998. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  4. Ball GF, Balthazart J. Sa e dobishme është dallimi i shijshëm dhe i frytshëm për kuptimin tonë të kontrollit neuroendokrin ndaj sjelljes seksuale? Horm Behav. 2008 Shkurt; 53 (2): 307-311. përgjigja e autorit 315-8. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  5. Berridge KC. Konceptet e motivimit në neuroscience të sjelljes. Physiol Behav. 2004 Prill; 81 (2): 179-209. Shqyrtim. [PubMed]
  6. Berridge KC. Shpërblime ushqimore 'të pëlqesh' dhe 'të duash': substratet e trurit dhe rolet në çrregullimet e të ngrënit. Fiziologjia dhe Sjellja. 2009; 97 (5): 537–550. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  7. Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Roli i oreksit / hipokrinit në kërkimin e shpërblimit dhe varësisë: implikimet për obezitetin. Fiziologjia dhe Sjellja. 2010; 100 (5) 419-428. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  8. Clegg DJ, Ajrore EL, Woods SC, Seeley RJ. Ushqimi i nxitur nga oreksina-A, por jo hormon melanin-përqendrues, është ndërmjetës i opioidit. Endokrinologji. 2002; 143 (8) 2995-3000. [PubMed]
  9. Craig W. orekset dhe aversionet si përbërës të instinkteve. Buletini Biologjik. 1918; 34: 91-107. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  10. Data Y, Ueta Y, Yamashita H, Yamaguchi H, Matsukura S, Kangawa K, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakazato M. Orexins, peptidet hypothalamic oreksigenike, ndërveprojnë me sisteme autonom, neuroendokrin dhe neuroregulator. Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96 (2) 748-753. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  11. Dela Cruz JA, Coke T, Karagiorgis T, Sampson C, Icaza-Cukali D, Kest K, Ranaldi R, Bodnar RJ. induksioni c-Fos në objektivat e projeksionit të shtegut dopamine të dopaminës dhe striatum dorsal pas marrjes gojore të sheqernave dhe yndyrave në minjtë. Brain Res Bull. 2015 Shkurt; 111: 9-19. [PubMed]
  12. Fushat HL, Hjelmstad GO, Margolis EB, Nicola SM. Neuronet e fushës tegmentale ventral në sjelljen e mësuar appetitive dhe përforcim pozitiv. Rishikimi Vjetor i Neurosciencës. 2007; 30: 289-316. [PubMed]
  13. Hanlon EC, Baldo BA, Sadeghian K, Kelley AE. Rritja e konsumit të ushqimit ose sjelljes së ushqimit që nxitet nga stimulimi GABAergjik, opioid, ose dopaminergjik i bërthamës accumbens: A është kjo uria? Psikofarmacologjia (Berl) 2004 Mar; 172 (3): 241-247. [PubMed]
  14. Harris GC, Aston-Jones G. Zgjimi dhe shpërblimi: një ndarje në funksionin orexin. Trendet në Neuroscience. 2006; 29 (10) 571-577. [PubMed]
  15. Ikemoto S, Panksepp J. Shkëputjet ndërmjet përgjigjeve të shijshme dhe konsumuese nga manipulimet farmakologjike të rajoneve të trurit që kanë lidhje me shpërblimin. Behav Neurosci. 1996 Prill; 110 (2): 331-345. [PubMed]
  16. Jager G, Witkamp RF. Sistemi endokannabinoid dhe oreksi: rëndësia për shpërblimin e ushqimit. Nutr Res Rev. 2014 Qershor 2; 27 (1): 172-185. [PubMed]
  17. Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J, Veleta K, Kantak PA, Aita M, Shilling-Scrivo K, Ramakrishnan C, Deisseroth K, Otte S, Stuber GD. Paraqitja e dinamikës së rrjetit hipotalamik për sjellje të shijshme dhe të dobishme. Cell. 2015 Jan 29; 160 (3): 516-527. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  18. Kalra SP, Dube MG, Pu S, Xu B, Horvath TL, Kalra PS. Ndërthurja e rrugëve rregulluese të oreksit në rregullimin hypothalamic të peshës trupore. Shqyrtime endokrine. 1999; 20 (1) 68-110. [PubMed]
  19. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Do MJ. Kalimi i kortikosterisë-hipotalamik dhe motivimi i ushqimit: integrimi i energjisë, veprimit dhe shpërblimit. Physiol Behav. 2005 Dhjetor 15; 86 (5): 773-795. [PubMed]
  20. Lorenz K. Metoda krahasuese në studimin e sjelljeve të lindura. Symp. Soc. Exp. Biol. 1950; 4: 221-268.
  21. Nicola SM, Deadwyler SA. Niveli i qitjes së neuroneve të nucleus accumbens është i varur nga dopamina dhe reflekton kohëzgjatjen e sjelljes që kërkon kokainë në minjtë në një program raporti progresiv të përforcimit. J Neurosci. 2000 Korrik 15; 20 (14): 5526-5537. [PubMed]
  22. Park TH, Carr KD. Modelet neuranomatike të imunoreaktivitetit të ngjashëm me Fos, të nxitura nga një vakt i pëlqyeshëm dhe mjedis i përzier me vakt në rats të trajtuar me kripur dhe naltrekson. Hulumtimi i Trurit. 1998; 805: 169-180. [PubMed]
  23. Do MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-opioids rregullojnë marrjen e një diete me yndyrë të lartë nëpërmjet aktivizimit të një rrjeti të shpërndarë të trurit. J Neuroscience. 2003; 23 (7) 2882-2888. [PubMed]
  24. Do MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Amygdala është kritike për ngrënien e dhjamit të ndërmjetësuar nga opiati. Neuroreport. 2004; 15 (12) 1857-1860. [PubMed]
  25. Do MJ, Pratt WE, Kelley AE. Karakterizimi farmakologjik i ushqyerjes me yndyre të lartë, i nxitur nga stimulimi opioid i striatumit të ventralit. Physiol Behav. 2006 Shtator 30; 89 (2): 226-234. [PubMed]
  26. Do MJ, Pritchett CE, Parker KE, Sawani A, Ma H, Lai AY. Karakterizimi i sjelljes së përfshirjes së amigdalës në ndërmjetësimin e sjelljes së ushqyerjes së drejtuar nga opioidët intra-accumbens. Neuroscience sjelljes. 2009; 123 (4) 781-793. [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed]
  27. Yamanaka A, Kunii K, Nambu T, Tsujino N, Sakai A, Matsuzaki I, Miwa Y, Goto K, Sakurai T. Orexin-marrja e ushqimit të detyruar përfshin rrugën neuropeptide Y. Hulumtimi i Trurit. 2000; 859 (2) 404-409. [PubMed]
  28. Zhang M, Kelley AE. Futje e rritur e ushqimit me yndyrë të lartë, pas stimulimit stiatal të mu-opioideve: hartëzimi i mikroinjektimit dhe shprehja fos. Neuroscience. 2000; 99 (2) 267-277. [PubMed]
  29. Zhang M, Kelley AE. Marrja e solucarinës, kripës dhe etanolit rritet me infuzionin e një agonisti opioid në bërthamë accumbens. Psikofarmacologjia (Berl) 2002; 159 (4): 415-423. [PubMed]
  30. Zhang M, Balmadrid C, Kelley AE. Nucleus accumbens modulimin opioid, GABaergic, dhe dopaminergic e motivimit të ushqimit të këndshëm: efektet e kundërta zbuluar nga një studim progresiv raport në miu. Behav Neurosci. 2003 Prill; 117 (2): 202-211. [PubMed]
  31. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Sinjalizimi i Orexin në zonën tegmentale të barkut kërkohet për oreksin e yndyrës të shkaktuar nga stimulimi opioid i bërthamës accumbens. J e Neuroscience. 2007; 27 (41) 11075-11108. [PubMed]